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DIE PERMEABILIT~T VON BEGGIATOA MIRABILIS.

EIN BEITRAG ZUR ULTRAFILTERTHEORIE DES PLASMAS.


Von
W. RUTLAND und C. HOYFMA~.
Mit 10 Textabbildungen.
(Eingegangen am 15. November 1924.)

I. Eialeitung.
In der physiologisehen Liter~tur dot letzten Jahrzeh~te ist ein immer
tebhafter werdender Flu• der Arbeiten fiber die Permeabilit~t lebender
Zellen mad damit zusammenh~ngende Fragen zu beobachten, was in
Anbetraeht der grundlegenden Bedeutung des Problems nieht nut fiir
die Stoffwechselphysiologie. sondern aueh fiir die Pharmakologie, Pa-
$hologie und Toxikologie nicht verwundern kann. Aber auch auf ganz
anderen Gebieten, so z. B. im Zusammenhang mit der pflanzliehen
Reizleitung ist man gerade in letzter Zeit wiederholt auf Permeabilitgts-
ffagea gesto~en.
Die meisten Forseher auf dem Gebiete der Permeabflit~t gingen
wohl yon der Voraussetzung aus, es mfisse eine allgemeine, mehr oder
minder einfache Gesetzm~igkeit die Aufnehmbarkeit der verschieden-
sten Stoffe beherrsehen, welche aufzudecken eben das Ziel ihrer Unter-
suehungen war. E~ is$ wohl zum mindestea zweifelhaft, ob die frfihe
Voranstellung des letzten Ziels, die in mehreren Hypothesen und Thee.
rien ihren Ausdrack fand, noch bevor befriedigendes Eriahrungsmaterial
vorlag, zum Vorteil tiir die Entwicklung unserer Kenntnisse gewesen
ist. Einseitige Betrachtungsweise und Parteistreit sind jedenfalls oft
an Stelle eines soliden, ruhigen Fortsehreitens gesicherten Wissens ge-
treten. Wie gering dies ]etztere im L~rm der Meiaungen geblieben ist,
mul~ jedem auff~llen, der ein einsehl~giges Handbuch zu Rate zieht.
Insbesondere tritt z. B. bei einer Durchsieht der verdienstvollen
und kritisehen Zusammenfassung bei H(~BER (1922/24) oder derjenigen
yon W. STIL~S (1921/23) hervor, da~ gegen alle bisher zur Erkl~rung
der Permeabilit~t lebender Zellen entwickelten Vorstetlungen gewich-
tige Einw~nde erhoben worden sind, und dal~ wir yon einer einheitlichen
Arehiv f. wissenschaftl. Dotanik Bd, t . 1
2 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilitgt yon

Erkli~rung heute weiter denn je entfernt sin& Mancher wird aus den
vielen einsehl~gigen Diskussionen und wenigen Beobachtungen den
Eindruck haben, dab das Suchen nach einer solchen aussichtslos ist,
dab sieh mit anderen Worten in verschiedenen Stoffgruppen verschiedene
Gesetzm~Bigkeiten, vielleicht aber auBerdem noch spezifische Besonder-
heiten der Objekte geltend maehen. In der Tat kann neuerdings z. B.
an der Sonderstellung der Elektrolyte, die mit Wirkungen auf den
Quellungszustand des Plasmas zusammenhangen dfirften, kein Zweifel
mehr sein.
Wei$ ausffihrlieher aber werden uns im folgenden die Nichtelektro-
lyre beseh~ftigen. Gerade ihr diosmotisohes Verhalten war es, an d e m
sieh so grundverschiedene Theorien und Hypothesen wie die Lipoid-,
die Haftdruek-, Adsorptions-, Ultrafiltertheorie usw. versuchten. Bald
sehien sieh ein Stoff besser in diese, bald in jene zu ffigen, so dab das
Bild reeht verworren, die Skepsis (z. B. STILES l. C.) immer grS~er wurde.
Wit sind geneig~, die Schuld hieran weniger den Tatsachen als ihrer
tmzul~ngliehen ~Erforsehung zuzusehreiben, Da wir auf manche Einzel-
heiten sparer einzugehen haben werden, genfige hier der I-Iinweis, daft
die zur Theoriebfldung verwendeten Beobaehtungen sich meis~ nur auf
eine oder wenige S$offgruppen (Farbstoffe, Narkotica, Alkaloide usw.)
stfitzten.
Man dari wohl sagen, dab es eigentlich nur OVERTON gewesen ist,
weleher alle mSgliehe~ ihm erreiehbaren und fiir derartige Studien
verwendbaren organischen Stoffe genauer gepriift hat. Das hat zum
nicht unerheblichen Tell wohl auch seiner daraufhin aufgestellten
Lipoidtheorie zu ihrem gro~en ]~rfolge verholfen.
Leider hat OVErrOde die diosmotischen Versuche, welche seiner
Theorie zur Grundiage gedient haben, nur in h6chst summarischer
Weise, in ~orm knapper Vortr~ge ver6ffentliehr (Literatur welter unten).
Angaben fiber da$ benu~zte Objek~ finden sich nur beim ersten Ver-
suehe (1895, S. 21) mit Athylalkohol (Spirogyra); ob bei den fibrigen
die~es selbe Objekt und eventuell ob nur dieses oder noch weitere be-
nutzt wurden, wird nicht mitgeteilt.
Die angewandte Methode bestand offenbar meist in der Feststellung
des plasmolytisehen Grenzwertes, wobei die plasmolysierenden Stoffe
teils unvermiseh*, tells - - bei grSl3erer Giftigkei~ oder geringer L6s-
lichkeit - - i n Kombination mit Rohrzucker gelSs~ worden. Zahlen-
m~Bige Angaben fiber die gesultate linden sieh nur ganz vereinzelt,
das Verhalten der Stoffe. wird vielmehr fast durchgehends nut durch
Worte wie ,,~uBerst schnell", ,,recht schneU", ,,m~Big", ,,langsam",
,,gul~erst langsam" und ,,nicht oder kaum merklich" in die Zellen ein-
dringend gekennzeichnet.
Es ist also kaum mSglieh, zu diesen Versuchen ohne Naehprfifung
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrttg zur Ultraliltertheorie des Plasmas. 3

im einzelnen Stellung zu nehmen. Wir legen aber im Hinbliek auf


unsere eigenen Untersuehungen besonderen Nachdruek noch auf
folgende zwei M~ngel der zu so fiberragender Bedeutung gelangten Ver-
suche OVE~TO~, n~mllch erstens die yon ibm nur ganz kurz und ge-
legentlieh gestreifte und de~halb ungekl~rte Frage der zweifellosen
Sch~dlichkeit einer sehr groBen Zahl der yon ihm untersuehten Stoffe,
w~hrend der zweRe Einwand an den Umstand, dal~ nieht alle Stoffe
auf ihr Eindringen in die Zelle nach einer und derselben Methode unter-
sueht worden sind, ankniipft.
Betreffs des ersten Punktes bedarf e s kaum weiterer Ausffihrungen;
es wurde ja vielfaeh festgestellt, dab eine Seh~digung der Zelle dureh
den permeierenden Stoff nicht ohne weiteres sichtbar zu werden braucht,
sondern sieh zunaehst nur in einer zu hohen Permeabilitat zeigt, die ffir
die intakte Zelle nieht besteht. Es hatte also einer ganz besonders sorg-
f~ltigen Kontrolle daraufhin dureh Weiterbeobaehtung der Versuehs-
objekte, Wiederholung der Versuche an den gleiehen Zellen usw. be-
durft, um sehwerwiegende Errtfimer auszu~ehlieBen, und e'me grebe Zahl
der aufgeffihrteu Stoffe hatte aus den Versuchen wohl ganz ausseheiden
mfissen.
Was den zweiten Punkt anbelangt, so handelt es sieh vor allem
darum, dab das Ergebnis derjenigen Versuehe, bei denen an gewissen
Reaktionen, Speieherungen usw. im Zellinnern die Durchtrittsgeschwin.
digkeit namentlich sehr sehwer 16slieher und deshalb zu plasmolytischen
Versuehen ungeeigneter Stoffe erkannt wurde, mit den naeh letzterer
Methode gewonnenen Resultaten nieht ohne weiteres verglichen werden
darf. Denn bei derartigen Reaktionen ~usw. kSnnen Gesehwindigkeit
und Empfindlichkeit derselben und andere sekundare ~omente das
Urteil fiber den Grad der Permeierfahigkei~ ganzlich falsehen. Wenn
z. B. OVERTONselbst (1897) feststellt, dab Stryehnin noeh in einer Yer-
dfinnung yon 1 g auf 10 000--20 000 1 Wasser in Spirogyravaeuolen
einen mikroskopiseh deutlich sieh~baren Niedersehlag erzeugt, so ist
klar, dal~ bei Versuehen mit diesem Alkaloid eben wegen der auBer-
ordentliehen EmpfindliehkeR der Reaktion schon der Eintritt geringster
Mengen angezeigt wird, und die Eintrittsge.schw~nd~gkeit infolgedessen
fibersch~tzt werden muB. Ein Vergleieh soleher ,,optiseher ~essungen"
(HSBE~ 1922) mit plasmolyti~ehen entbehr~ jeder Grundlage und ist
unstatthaft. Nieht einmal die versehiedenen Alkaloide untereinander
dfirfen, wie dies immer gesehehen ist, auf Grund derartiger Versuehe
hinsiehtlieh der Permeierf~higkeit vergliehen werden, da Empfindlieh-
keit ihrer Fgllung mit Tannin (ebenso mit J~, HgCI~ usw.) ~ehr ver-
sehieden ist. Und was hier fiber die Alkaloide ausgefiihrt wurde, gilt
mutatis mutandis aueh yon anderen im Zellinnern ehemische Reaktion~x
hervorrufenden und speicherbaren KOrpern wie Farbstoffen usw., deren
1"
4 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die P e r m e a b i l i t ~ yon

diosmotisches Verhalten .seit OVERTON gerade besonders hKufig als


Grundlage fiir Theorien der Permeabilit~t herangezogen worden ist.
])as Objekt (Beggiatoa mirabilis), an welchem die nachfolgenden
Untersuehungen angestellt worden sind, gestattete, alle diese verhiingnis-
vollen lVehlerquellen zu vermeiden. Schidigungen durch die gepriiften
Stoffe warden in weiter unten angegebener Wei~e stets aufs sorgfiltigste
beriicksichtigt und kormten am Objekt unsehwer erkannt werden. Ein
welt grSl3erer Vorzug de~selben aber bestand darin, dab es gestattete,
simtliehe Stoffe, auch die soeben behandelten, auf ihre Eintritts-
gesehwindigkeit nach einer und derselben (plasmolytisehen) Methode zu
priifen, uncl jene zahlenmSflig zu bestimmen. So war zum ersten Male
ein einwand/reier Vergleieh der ehemisch versehiedenartigsten Ver-
bindungen untereinander ermSglieht, die naeh ihrer Durchtritts-
gesehwindigkeit in eine ein/ache Reihe geordnet werden konnten.
Dieue bfldete die Grundlage fiir die Diskussion des Permeabilit~ts-
problems.
Wie welter unten zu zeigen sein wird, fielen die Resultate mit Ein-
deutigkeit im Sinne der vor 12 Jahreii yon einer yon u n s (RuHLAND1912)
aufgestellten sogenannten Ultrafiltertheorie aus. Diese Theorie war
seinerzeit naehdrficldieh und wiederhoR (RuHLiND 1912, S. 431 ; 1914,
S. 391,438 usw.) als fiir kolloide Stoffe giiRig bezeiehnet worden. Ihre
GiiRigkeit fiir molekular gel6ste war dagegen damals (vgl. besonders
RUHLAND 1914, S. 438ff.) ohne besonders daraufhin gerichtete Ver-
suche als sehr unwahrscheinlich bezeichnet worden. Wenn wir nunmehr,
also eigentlich gegen unsere Erwartung, auch fiir echt gel6ste Stoffe
die Giiltigkeit der Ultraffltertheorie Ieststellten, so wird man darin
Voreingenommenheit kaum zu suchen haben. Es soll allerdings nicht
verschwiegen werden, da]~ uns auch die Untersuchungen yon BZOELOW
(1911) und ]3ARTELLund ROBL~SON(1918), die bei Rohrzuckerversuehen
den Eir~lu~ der Porenweite anorganischer ,,Membranen" ~estgestellt
hatteni), zti den Versuchen mit anregten. Die Messungen wurden dureh-
gingig yon H O F ~ A ~ ausgefiihrt, dem auch 6fret ihm unbekannte
LSsungen zur Messung mit bestem Erfolg iibergeben wurden. Aueh
dritte Personen wurden gelegentlieh zur Wahrung roller Unbefangenheit
dazu herangezogen. Deshalb, vielmehr aber, weft es sich iiberall, wie
schon hervorgehoben, um leieht wiedexholbare, zahlenm~l~ige Messungen
handelte, glauben wir prinzipieIle Irrtiimer ausgeschlossen zu haben,
die iiberall da, wo es sich nur um Sch~tzungen nach dem AugenmaBe
handelt, eine verh~ngnisvolle Rolle spielen kSnnen und gerade bei
unserem Problem zu dessen Sehaden so oft gespielt haben.
1) Die Untersuchungen COLLANDERS(1924) fiber Ferroeyankupfermembranen
ersch/enen erst, als unsere Ergebnisse an Beggia~oamirabilis bereits feststanden.
Vgl. auch RUHT.ANDund HOr~MA~ (1924).
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertherorie des Plasmas. 5

II. ])as Objekt (Beggiatoa mirabiIis).


a. AUgemeines.
Den ~uBerea AnstoB zu diesen Studien gaben in erster Linie weniger
allgemeinere Erw~gungen im Sinne der Einleitung als ein besonderes
Objekt: Die sonst aus den Kiistengebieten im l~eerwasser bekannte
B. qnirabilis, welehe yon KOLKWITZ (1918) im Solgraben der Saline yon
Artern a. d. Unstrut festgestellt worden war.
Naeh den Untersuchungen yon A. FlSCHE~ (1895) konnte man ver-
tauten, dab manche, wenn nieht alle Baeterien sich durch eine hShere
Permeabilit~t im Vergleieh zu den Zellen anderer Pflanzen auszeichnen,
wenngleieh die Befunde yon SHEA~E~ (1919) damit nicht ohne weiteres
zu vereinbaren waren. Klarheit dariiber muBten die Riesenzellen des
genannten Organi~mus am ehes~en ermSgliehen, und wenn die dios-
motisehen Verh~ltni~se bei ibm den Untersuchungen FlSCHE~S ent-
spraehen, so bot sieh vielleieht ein Weg, vor allem Permeabilit~ts-
messungen mit einer Reihe indif]erenter Stoffe auszufiihren, die weder
schadigend wirken noch Speieherungsreaktionen veranlassen konnten,
als zelleigene Stoffe aber besondere Bedeutung beanspruehten: mit den
Kohl~nhydraten, fiir welche die Pcrmeabilit~t gew6hnlicher Pflanzen-
zellen zu gering ist.
Gleieh die ersten Versuehe mit dem Objekt ergaben, dab diese Vor-
aussctzungen zutrafen, ja, dariiber hinaus, dab einige besondere Ver-
hMtnisse vorlagen, welchc die Beggiatoa noch geeigneter fiir solehe
Studien machten als selbst bei weitgehenden Erwartungen angenommen
werden konnte. Deshalb wurde der Bereieh der in die Untersuehung
einzubeziehenden Stoffe bald so erweitert, wie es die Festhaltung der
in der Einleitung betonten Grunds~tze gestattete.
Einige Worte fiber das Auftreten des Organismus in Artern diirften
gereehtfertigt sein: Gem~B der yore Salzamt in Artern ausgegebenen
Analyse der Sole und auch naeh den Angaben yon KOLKWITZ enth~lt
das Wa~ser an sich keinen Schwefelwasserstoff, dieser wird vielmehr
erst dutch Zersetzung faulender Tier- und Pflanzenreste - - vor aUem
D i a t o m e c n - an bestimmten Stellen des Solgrabens frei, wo durch
Stauungen die sonst starke StrSmung des Wassers gemindert wird.
Dor~ finder sieh dann eine iippige Vegetation yon Sehwefelbacterien,
meist B. mirabilis, B. alba var. marina, B. minima, Thiophysa volutans,
G~romatiumarten, SIJirillum und anderen Formen, auch Purpurbacterien.
Die Flora zeigt je naeh der ~ppigkeit der einzelnen Arten einen jahres-
zeitliehen Weehsel. So wurde yon B. ~nirabilis Stets vom Herbst bis
Friihjahr das reichste und beste Material gefunden, ja Thiophysa volu-
tans war fast aussehlieBlieh in diesen Mona~en zu beobachten.
t?. mirabili8 iiberzieht, oft vermischt mit anderen Species, in weiten
prachtvollen, spinnwebeartigen Netzen den meist gesehw~rzten
6 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~$ yon

Schlamm. Es sind vie]/ach grol~e bis 1,5 cm lange und 40--50 # breite
F~den, die sich oft aus tausenden von Zelien zusammensetzen. Jede
Zelle ist etwa halb so lang als breit. Der ganze Faden wird yon einer
deutlich sichSbaren Membran umgeben, wahrend die einzelnen Zellen
durch diinne, oft schwer sichtbare Quermembranen getrennt sind. Im
iibrigen sei auf die ausfiihrliche Darstellung bei HINz~. (1902) verwiesen.
Nur ein Punkt sei bier noch beriihrt, den wir noch nirgends erwahnt
fanden, dab ni~mlieh der ganze Faden yon einem ~uBer.st dfinnen und
feinzn Schleimmantel umgeben ist. Diese Schleimschicht ist direkt nicht
nachweisbar. Man kann sich nur yon ihrer Exi~tenz fiberzeugen, wenn
man kriechende Beggiatoa-F~den in einer feinen Suspension beobachtet.
Dann haften die Partike] an dieser Schicht und werden vom nach-
wandernden Fadenende langsam abgestreift. Sie bilden so eine anfangs
deutlieh sichtbare Krieehspur, die dureh allmahliehes Verquellen des
Sehleimes verwiseht wird. Die Schicht ist viel feiner als die Schleim-
hiille der Oscillarien. Fiir diese ist bereits yon G. SCHMID (1918, 1919)
die Fechnersche Theorie, wonach in dieser Schleimabsonderung die
Bewegungsursaehe zu suehen sei, abgelehnt worden. SOHMID sueht
diese vielmehr in osmotisch bewirkten Kontraktionswellen und d e r
Quellung des ausgeschiedenen Schleims. Bei B. mirabilis scheint uns
infolge der Geringfiigigkeit der Schleimabscheidung eine inwendung
der Feehnersehen Theorie yon vornherein unm6glich. Hingegen lassen
die Befunde an den i~Iembranen eher die Sehmidsche Annahme zu. In-
wieweit dabei osmotisehe Druckdiiferenzen yon Wirkung sind, sei flit
dieses Objek~ noeh dahingestellt.
Der yon B. mirabilis iiberzogene Sehlamm wurde ftir den Bahn-
transport in etwa 1--2 1 fassende Glasgefi~e gebracht und noeh am
gleiehen Tage im Laboratorium in flaehe, etwa 5 em hohe Krystallisier-
schalen gegossen. Mit natfirlichem Ar~erner Salzwasser - - i m folgenden
stets als Arternwasser bezeichnet - - wurde die 0,5--1 cm dieke Schlamm-
schich~ 3 4 cm hoch iibersehich~et," und dann die Schalen durch einen
Glasdeckel gegen rasches Verdunsten geschfitzt. Diese Kulturgefi~l~e
diirfen, vor allem im Sommer, nicht zu warm stehen, da son,st die
~uJ]ers~ empfindliehe B. mirabilis binnen kurzem zugrunde geht.
Unter solchen Umst~nden treten besonders sulfatzersetzende Baeterien
auf und geben zu reiehlieher H~S-Entwieklung und Entstehung
eines starken Sehwefelniederschlag Veranlassung, der das Kultur-
wasser triibt.
Ob die Kulturen ins Licht gestellt oder verdunkelt wurden, richtote
sich naeh der jeweiligen H_oS-Entwieklung. Iffahm die H~-S-Entwiek-
lung ab, was sieh sofort an der Abnahme der Schlammschw~rzung
zeigte, so wurden die Kulturen verclunkelt, um dadurch den Einflul3
des clurch die Assimilation der zahlreichen Diatomeen gelieferten Sauer-
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 7

stoffes auszuschalten. Im umgekehrten Falle, bei zu starker H~-S-


Entwicklung, warden die Kulturen dem Lieht (jecloch nicht dem direl~en
SonnenUch~) ausgesetzt. An und f/ir sieh ist es bei B. mirabilis gleich-
giiltig, ob sie im IAcht oder Dunkeln kultiviert wird. Da~ Kulturwasser
wurde etwa alle 10--14 Tage abgeheber~ und durch frisehes Artern-
wasser erse~zt. Dieses wurde in grfBerer Menge aus dem Artemer Sol-
graben geholt und im Keller des Instituts unter Lieh~abschlu~ kiihl
aufbewahrt. Das so au/bewahrte Wasser zeig~e keinerlei Ver~nderung.
Seine Gefrierpunktserniedrigung hatte ~ieh aueh nach Jahresfrist nieht
ge~ndert, und aus dem Solgraben friseh geholtes Material gedieh in
solchem fiber ein gahr im Keller aufbewahrtem Wasser ausgezeichnet
In derartigen Kulturen hielt sich Beggiatoa im I)urchschniSt etwa
2 Monate sehr friseh und lebenskr~ig. Dann nahm jedoch die iippige
Beggiatoa-Vegetation meis~ rasch ab, und die l~den zeigten ein krank-
haft ver~ndertes Aussehen. Im Sommer trat diese Erscheinung oft
schon naeh 4 Wochen ein, w~hrend im Winter im giins$igsten Falle
Kulturen his zu 6 Monaten normal erhalten werden konnten. Es wurde
deshalb alle 2--3 Monate, im Sommer noeh 6fter, aus dem Solgraben
frisehes Material geholt, um eine Beeinflussung der Resultate durch
Material kranker Kulturen zuverl~ssig auszuschlieBen.
Versuehe, B. mirabilis naeh der yon KEIL (1912) angegebenen Me-
rhode in Glocken mit Schwefelwasserstoff-, Sauerstof~- und Kohlen-
s~ureatmosph~re in Reinkultur zu ziichten, miBlangen. Vermutlich
sind die Parti~rdrueke der einzelnen Ga~e fiir B. mira~lis anclere als
die, die KEIL fiir seine Arten fand 1). Da fiir unsere Zweeke l~einkulturen
nieht erforderlieh waren, wurden weitere Versuehe in dieser Riehtung
nieht angestellt. Es sei nut noch bemerkt, dab ObjekStr~gerkulturen
nach den Angaben yon WINOGRADSKY (1887) ohne weiteres gelingen.
b. Die Membran.
W~hrend es auBerhalb unseres Untersuchungsplanes lag, etwa die
schon erw~hnten Studien yon HINZE naeh der Seite der allgemeinen
Organisation der Be#giagoa.Zelle fortsetzen und vervollst~ndigen zu
vcollen, muBten doeh einzelne wiehtige Struktuffragen noch welter auf-
gekl~rt werden, deren volles Verst~ndnis die Verwendung des Objektes
fiir unsere Zweeke zur Voraussetzung haste.
Es wircl aus dem FolgendenVers~ndlieh werden, aus welchen Griin-
den hierzu in erster Linie die feinere Struktur der Membran der Zelle
geh6rte. Es mug auf sie zun~ehst n~her eingegangen werden, da sich
auf die - - auch an sieh sehr bemerkenswerten - - Membranverh~ltnisse
unsere Versuchsmethodik griindet. Der Ausgangspunkt zu diesen Stu-
dien waren Plasmolyseversuche.
1) K~.Ir. gibt kelne Species an. B. mlrabil~s war aber sicher nicht dabei.
8 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabili~ yon

Angaben fiber Plasmo!yse an B. mirabilis finden sich nur in der


groBen Arbei~ yon Hn~ZE: ,,Untersuchungen fiber den Bau yon Beggia-
toa mirabilisCohn" (1902). Die yon ibm verwendeten Plasmolytica
waren 20proz. RohrzuckerlSsung, Glycerin und 21/2 und 5proz. KNO3-
LSsung. Jedoch 15ste sich nirgends das Plasma yon der Membran,
sondern es r eine mehr oder weniger ausgepr~gte Schrumpfung des
ganzen Fadens ein. HINz~. kommr daher zu dem Resulta~, dal3 Plasmo-
lyse bei diesem Organismus nicht m6glich ist, da nach seincr Meinung
,,die ZeUwand ffir die angewand~en SubsSanzen einen hohen Filtrations-
widers$and" besitzen soU. Jede nahere ~mgabe fehl~, und auch die
fibrige Lir fiber B. mirabilis, meist ~lteren Datums (F. C o ~ 1865,
1867; WARMING1875; ENGLER 1884; KOLKWITZ 1897 ; B~TSCHLI 1890;
M~SSART 1902), weis~ keine Angaben fiber Plasmolyse auL
Auch bei Durchsicht der haupts~chlichs~en Li~eratur fiber andere
Beggiatoa-Species (CoHN 1865, 1867; E~GLE~ 1885; Wr~oGRADSXY
1883, 1887, 1888; KEIL 1911; MOLmOH 1912 u. a.) finden sich wci~ere
Mitteilungen darfiber nich$ vor. Nur eine Arbeit yon A. FISCHER:
,,Die Plasmolyse der Bakterien" (1891) weis~ eine Stelle auf, an dcr yon
der Plasmolyse einer Beggiatoa die Rede is~. Es betrifft dies aber
B. alba, elne Form, welehe bedcutend kleiner ist als B. mirabilis. Jfingere,
schwefelarme oder sehwefelfreie F~dcn diescr Species werden nach
FISCHER yon einer s/4 laroz, und s~rkercn NaC1-LSsung plasmoly-
siert. Sehr schwefelreiche F~den dagegen eignen sich fiir den Versuch
nicht.
Die ersten eigenen Plasmolyseversuche an B. mirabills zeig~en ~at-
s~chlich die yon HI~ZE erw~hnten Schrumpfungen, in deren Verlauf
eine Plasmolyse nie auf~rat. Eine kleine ~nderung in den Versuchs-
bedingungen ffihrte aber zu fiberraschenden ResulSaten und ermSg-
lichr es, im wei$cren Verlaufe auch zu einem vollen Verst~ndnis
der merkwiirdigen, diosmotischen Verh~lr bci B. mirabilis zu ge-
langen.
Nachdem die soeben erw~hn~en Vorversuche die Unm6glichkei~,
B. mlrabiUs in gewShnlicher Weise zu plasmolysieren, ergebcn ha~en,
wurden IAisungen, in dcnen als LSsungsmir ~rternwasser diente,
verwendet, doch konn~e eine Plasmolyse auch ~uf diesem Wege nicht
erzielt werden. Wurden n~mlich stark hypertonische LSsungen benuSzt,
so tra~ fast momentan ein volls~ndiges Schrumpfen der untersuchten
F~dcn ein, wahrend bei achwach hyper~onischen L(isungen under Ver-
kiirz~mg des ganzen Fadens an einzel~en Zellen in~olge Wasserentzugs
zar~ Einkerbungen au~raCen ((Abb. 1 b). Oder die F~den begannen
an einzelnen S~eUen leicht ein~u]cnieken (Abb. 1 a). H~u~ig ~raCen bei
geringem Wasserentzug auch ~inkerbungen am Ansatz der Quermem,
branch auf (Abb. 1 b). Ihnen foigten meist an anderen Zellen Einker.
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 9

bungen der L~ngswand zwisehen je zwei Quermembranen. Nie abet


wurde ein Losl6sen des Plasmas yon der Membran beobaehtet, obwohl
innerhalb der Zellen grebe Vaeuolen vorhanden sind, die eine Plasmo-
lyse im weitesten l~al~e erwar~en lassen, und trotz der deutlieh aus-
gebfldeten Zellmembran.
Als die Ursaehe des eigenartigen Verhaltens ist, wie welter zu zeigen
sein wird, offenbar ein fester Verband yon Plasma und l~Iembran an-
zusehen, abet nicht nur dies, sondern auch die besondere Bescha//enheit
der Membran ist dabei noch yon Eir~luB. Ihr kommen, wie die nach-
folgende Untersuehung zeigte, Eigensehaften zu, welehe die Schrnmp-
fungserscheinungen ohne weiteres erkl~ren. Wir besehr~nkten uns bei
diesen )/Iembranstudien auf das, was zum Verst~ndnis der die dios-
mo~ischen Untersuehungen ermSgliehenden Fundamentalerscheinung
der Sehrumpfung notwendig war, strebten also keine erschSpfende Be-
handlung der ~Iembranfrage an.
Sehon bei HI~ZE finden sich einige interessante Beobachtungen fiber
die .~Iembran. l~ach ihm besteht die L~ngswand aus zwei verschieden

a b
Abb. 1. ,Knicken" der Fiiden in schwach hypertonischen LSsunsen. a schwaeh, b stark ver-
grSflert. (u Text.)

quellbaren Schiehten, die sich unter Einwirkung verschiedener Reagen-


zien voneinander 15sen. HINZE verwandte dazu ChlorzinkjodlSsung, in
weleher eine Spaltung in jene beiden, normal nieht als getrelmt wahr-
nehmbare Schichten naeh e~wa einer halben Stunde eintrat, ferner
60 proz. Chloralhydrat-, konz. H2S0a-, KNOa-LSsung und kochende
Kalilauge. Bei Verwendung yon KNOs trat die Spaltung nur voriiber-
gehend auf. Die bei HrszE abgebfldete Chlorzinkjodspaltung (Tafel 4,
Abb. 4) zeigt deutlieh, doppelt konturiert, eine abgehobene ~uBere und
eine ebenfalls doppelt konturierte innere l~embranschicht. An den
Quermembranen tritt die Spaltung nicht auf. Hinsichtlieh der chemi-
schen Beschaffenheit der Membran land Hl~z~., da~ die iiblichen Cellu-
losereagenzien wie Chlorzinkjod, Jod und Sehwefels~ure versagten, auch
eine AuflSsung in Kupferoxydammoniak trat nieht ein. Desgleiehen
verlief die Chitinprobe nach VANW I S S E L I N G H nega~iv. I)oeh wurde
dutch Rutheniumrot eine starke Rotf&rbung der L~ngs- und Querw~nde
erzielt, mit Safranin eine Orangef&rbung. ,,Die W~nde geben also die
Reaktionen der sogenannten Pektinstoffe, allerdings l~Bt sich dami~
noeh nieht behaupten, da~ sie lediglich aus denselben bestehen, was
indes nicht unwahrscheinlich w~re."
10 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~ yon

Was die ehemisehe Natur der ~embran anlangt, so k6nnen die An-
gaben f fir den Cellulose- und Pek~innachweis best~tigt werden. Gegen
die Cellulosenatur der Membran spricht auch, dab sie yon konz. Chrom-
s~ure nicht angegriffen wire]. Es kann noch hinzugeffig~ werden, dab
in Methylenblaul6sung die Membranen einen viole~ten Farbton an-
nehmen, w~hrend das tote Plasma rein blau gef~rbt erscheint, eine
Tatsache, die gleichfalls auf das Vorhandensein yon Pektinen hinweist.
Die Chitinprobe nach VAN WISSELINGH wurde nicht wiederholt.
Betrachten wir aber nun die eigenartige Spaltung der L~ngsmembran.
Hier gelang es, bei einer Wiederholung der Hinzesehen Spaltungs-
versuche, nie, mit Chlorzinkjod eine Spaltung zu erzielen. Erst bei Ver-
wendung anderer Spaltungsmittel wurden ~hnliche Bilder, wie sie
HI~ZE gibt, zum Tell sogar noeh welt deutlichere, erhal~en. Bringt
man n~mlich e'me Anzahl F&den in eine 10 proz. KNO3-L6sung in aqu.
dest. und untersueht die l~den nach e~w~ 15 Minu~en, so ist allgemein
eine Spal~ung der Membran eingetre~n. Anfangs erstreckt sich die

a 3

Abb. 2. Fadenspaltung in t0 proz. KalisalpeterlSsung. a abgehobene ~ul3ere Membranschicht,


b innere Membranschicht. Durch eine Verletzung tier beiden ist PIasma, e, a u s dem l~aden
hemusgetreten.

Spaltung meist nur fiber 3--5 Zellen. Solche SpaltungszeUen finden sich
aber in groBer Zahl an einem und demselben Faden. Erst nach l~ngerer
W/rkungsdauer breitet sich die Spaltung fiber grSBere Fadens~recken
aus, aber nie fiber den gesamten Faden. Die Angabe Hl~zss, dab die
Spaltung in KNO3 sparer wieder zuriickgehe, auch dab KN03 momen-
tan spalte, konnte nich~ best~ig~ werden. Abb. 2 zeigt einen Faden
in 10 proz. KNOs-L6sung, an dem der SpaltungsprozeB unter dem
Mikroskop verfolgt wurde. Da infolge einer Zellverletzung gerade an
der Spaltungsstelle das Protoplasma (c.) ausgetre~en war, sieh~ man
hier mit roller Deu~lichkeit eine ~uflers~ dis und ]eine innere Membran.
schicht (b) neben einer ebenso deutlich sichtbaren, abgehobenen ~uBeren
(a). Soweit die Innenschich~ am Plasma anlag, war sie nur sehr schwer
erkennbar. Abb. 3 zeigt die gleiche Stelle im Anfangsstadium bei hoher
Einstellung.
Man sieht dabei, wie die Spaltung in blasenartigen Abhebungen
ihren Anfang nimmt.
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafil~r~heorie des Plasmas. 11

Ganz ~hnliche Spaltungsbilder wie in Abb. 2 ergaben sich nun ferner


bei Behandlung mi~ folgenden S~uren: Schwefels~ure, Salzsiure, Sal-
petersiure, Essigsiure und Ameisensiure. Hier tre~en die Spaltungen
momentan auf, aber nur, wenn die Siuren geniigend konzentriert shad.
In verdiinnten Sguren (e~wa unter 7--8 vii. S~uregehalt) unterbleibt die
Spaltung ganz, auch bei l~ngerer Einwirkung. In den konzentrierten
Siuren kSnnen die Protoplasten stark schrumpfen und sieh dabei yon
der Innenmembran 15sen, wobei es bisweilen auch zur Verquellung der

O o o

Abb. 3. Beginnende Spaltung in 10 proz. KalisalpeterlSsung. a - - c wie in Abb. 2, bei d beginnt


die Aul~enmembran sich in Form yon Blasen abzuheben.

Quermembranen kommen kann. So zeigt Abb. 4 einen in konzentrierter


Salpeters~ure gespal~enen Faden, an dem die Protoplasten ~tark ge-
schrumpft sind und sich yon der Innenmembran gelSs~ haben.
Neben diesen eben angefiihrten Spaltuugsmitteln fanden sich nun
noch eine Reihe anderer, die bei fliichtiger Betrachtung ganz die gleiche
Wirkung auf die Membran hatten wie die konzentrierten Siuren. Es
siud dies Kalilauge, Natronlauge, Chloralhydrat und Ammoniak. Ab.
gesehen yon letzterem, der wie die Siuren nur ia kolizentriertcren

Abb. &. Spaltung in k0nzentrierter Sall~etersiure. Bezeichnungen wie in Abb. 2.

L6sungen spaltet , sind die iibrigen drei Stoffe auch in verdfinnten


L6sungen wirksam. Bringt man Beggiatoa.F.'~denin n oder 0,5 n KOH,
so hebt sich momentan lings des ganzen Fadens die Au~enmembran
ab, wihrend der innere ,,Pr otoplastenfaden ~' - - s o m6ge der im Inneren
der abgehobenen Membran liegende Zellfaden bezeichnet werden
sich auffillig kontrahiert. D~bei 16ste er sich an den Apicalzellen yon
der Aul3enmembran u n d lieB diese besonders an den Fadenenden als
wei~ abgehobenen Membranschlauch zuriick (Abb. 5).
12 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t y o n

Mitunter platzte auch solch ein Membransehlauch, wohl infolge


weitgehender Quellungen im Innenraume (vgl. welter unten). Dana
wurde der gesamte Protoplastenfaden raseh aus der abgehobenen Hiille
herausbef6rdert, so dab der Faden seheinbar aus seiner Haut kroch,
und sehlie$1ich Membran und Protoplastenfaden, ohne zu zerfallen,
nebeneinander lagen.
Untersueht man aber die dureh die Laugen hervorgerufenen Spal-
tungen genauer, so finder sieh ein iiberrasehender Untersehied gegen-
fiber denen in Siuren. Es gelingt n~mlieh bei solchen in Laugen gespal-
tenen wie auch aus der Haut geschliip]te~ Fgden hie, ein~ inhere dem
Plasma noch anliegende Membranschicht naehzuweisen, weder im Hell-
noch im Dunkelfeld 1), noeh dureh geeignete Membranf~rbungen. Aueh
beim Einbringen eines herausgesehliipften Protoplastenfadens - - er l i s t
sieh ohne weiteres yon einer LSsung in die andere fibertragen - - in
einen Tropfen verdfinnter ,,Burritusche" liel~ sieh eine Membran aueh
spurenweise nicht mehr nachweisen. Die Tuschepartikel gelangten un-
mit~elbar an das Plasma heran, so daft der innere Faden also offenbar
einen nackten Protoplastenfaden darstellt. Aueh an Mikrotomsehnitten

Abb. 5. Faden bei Behandlung mit starker Kalilauge, schematisch. (Vgl. Text.)

solcher in Kalilauge gespaltenen F~den war nie eine inhere dem Plasma
anliegende 1Ylembranschicht nachweisbar, weder an Quer- noch an
LRngsschni~ten.
Wenn aber bier die innere 1Yfembranschieht fehlt, so wird es iiber-
haupt fraglich, ob die Laugen elne der in S~uren analoge Spaltung her-
vorrufen. Man k6nnte auf den Gedanken kommen, dab sieh in den
Laugen die Membran in ihrer Gesamtheit abgehoben babe, eine Tren-
mmg beider Schichten also nieht erfolgt sei. Diese Erkl~rung diirfte
aber aus folgenden Grfinden abzulehnen sein: Nach ihr bliebe unver-
stindlieh, wie pl6tzlich eine Trennung der Lings- yon den Querw~nden
eintreten sollte und zwar so akkurat und sauber, dab nie an der L~ngs-
wand e'm Rest yon Querw~nden haften bleibt, wie es bei einem Zer-
reiBen doch ohne Zweifel zu erwar~en wire. Etwas Derartiges wire
vielmehr nur unter der Annahme verstindlieh, dal3 eine Au/16sung der
Quermembran erfolgte, was jedoch der Beobachtung widersprieht, dab
auch in den kontrahierten Protoplastenfiden Quermembranen vor-

x) Hierbei wurde ein Paraboloidkondensor yon Zeiss mi$ Apochromaten u n d


Kompensationsokularen verschiedener Stirke verwendet. Als Lichtquelle diente
eine kleine Bogenlampe.
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 13

handen sind. Ganz ungekl~rt bleibt aber bei dieser Annahme ferner
die Contraction des Protoplastenfadens (vgl. die Messungen S. 14 u. 15).
Wenn sich aber die Gesamtmembran nieht abheben kann, dann bleibt
zur Erklgrung der Laugenwirkung nur noch die eine ]VISglichkeit, dab
die innere Membranschieht dabei verqu~llt oder au/gel6st wird. Man
kSmlte sogar versucht sein, mit einem derartigen Verquellen der inneren
Membranschicht das Abheben der guBeren Schieht und die Contraction
des inneren Protoplastenfadens zu erkl~ren, indem beides durch den
Quellungsdruck bewirkt wiirde. Vergleieht man aber einmal die iiber-
aus geringe Dieke der aus der KNOs-Spaltuug bekannten zarten Innen-
membran mit dem gesamten enormen ttohlraum zwischen kontra-
hiertem Protoplastenfaden und abgehobener AuBeamembran, so wirkt
es yon vornherein unwahrscheinlieh, dal~ die gequollene Membran noeh
ein Gel darstellen soll yon gallertiger Koasistenz, dessen Quellungs-
druek die ganze Spaltung bewirken kSnnte.
Gegen die Annahme der Entstehung eines solehen diehteren Quel-
lungsgels spreehen aueh die folgenden Versuehe: Es wurde versucht,
in einer Tuschesuspension durch Zerquetsehen die Membransehlguehe
zu verletzen und ein Eindringen yon Tusehepartikeln in den fraglichen
Raum zu beobaehten. Es gelang dies einwandfrei nur wenige Male.
Viel hgufiger jedoch wurde die folgende Erseheinung beobaehtet: Bei
dem Versueh, die Membransehlguche zu zerquetsehen, kommt es bfter
dazu, dal~ der kontrahierte Protoplastenfaden stellenweise zerfgllt,
ohne dal~ aber der Membransehlaueh zerrei~t. Dann flie[~en Plasma-
teflchen und Sehwefeltropfen leieht zwischen der abgehobenen NIembran
und unzerstSrten Teilen des Protoplastenfadens entlang. Aus beiden
Beobaehtungen mul~ man auf einen leicht/liissigen Zustand des ver-
meintlichen Quellungsgels der inneren Membransehieht schliel~en, in
dem kaum noeh ein merklieher Quellungsdruek zu erwarten ist.
Noeh deutlieher wird das Yerhalten der inaeren Membransehicht
aus folgender Tatsaehe: Fiir das in KOH beobaehtete Heraussehliipfen
der Protoplastenf~den l~f~t sieh die Ursaehe nur im Quellungsdruck der
verquellenden inneren Membransehicht suehen. Dabei braueht das
Quellungsgel durchaus nieht den gesamten Hohlraum (der Lgnge naeh)
zwisehen Membransehlaueh und Protoplastenfaden auszufiillen. Es
geniigt, werm das Gel den verh~ltnismgl~ig diinnen Hohlzyllnder, der
sieh nut in Lfinge des Protoplastenfadens zwisehen diesem uad der
Auf~enmembran befindet, im Querdurehmesser ausfiillt, um im ge-
gebenen Fall ein Herauspressen zu bewirken. Nun zeig~ es sieh, dab
dieses Herauspressen nut kvrz nach Beginn der KOH-Wirkung ein~ritt,
aueh bei kfinstlichen Verletzungen. Naeh kurzer Zeit jedoch, beispiels-
weise sehon etwa 4--6 Minuten nach Beginn der KOH-Wirkung lieB
sieh meist kein Herauspressen mehr be~bachten, aueh bei kiinstliehen
14 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilitiit yon

Verletzungen nicht. Dies wiirde sich so erklaren, dad die an/dinglich


gequollene Innenmembran aus dem Gel- in den Solzustand iibergegangen
und chemisch (hydrolytisch) ver~ndert ist.
So ergibt sieh aus diesen Versuchen, dab beider Einwirkung der
Laugen die innere Membran.schicht eine Verquellung er/dhrt, die schliefl-
lich zu einer Auf158ung/i~hrt. Der vorangehende Proze$ der Spaltung,
d. h. das Abheben der i~uBeren ~r und die Contraction
des Protoplastenfadens kann abet mit dieser LSsung nicht erklart
werden. Dieser wird vielmehr ganz anMog der S~urespaltung verlaufen,
nur mit dem Untersehied, dab nach Eintritt der Spaltung die innere
)/Iembransehicht, die bei der S~urewirkung erhalten bleibt, unter dem
Einflul~ der Laugen verquillt.
Was nun das Zustandekommen der Spaltung anlangt, so hatte die
Beobachtung des Vorganges schon gezeigt, dab er mit einer Au~dehnung
der ~ul~eren ~[embranschicht und einer deutlichen Contraction des
inneren Protoplastenfadens verbunden war. Diese Beobachtung mui~te
aber noch durch Messungen erg~nzt werden. Obwohl infolge der aul~er-
ordentlichen L~nge der F~den und ihrer h~ufigen Schlingen und Bie-
gungen wegen L~ngsmessungen nur sehr ungenau sind, wurde eine
Anzahl derselben an F~den, die in KOH gespalten waren, ausgeffihrt.
2~us einer grSBeren Anzahl Messungen seien die zuverl~ssigsten aus-
gewahlt. Sie ergaben folgende Werte:
Tabelle 1.
L~lngeder F~iden.
Nach der Spaltung
Vor der Spaltung Protoplastenfaden Auflenmembran
L~nge vH. Abnahme L~inge vH. Zun~hme

1. 1061} 92 13,2 108 1,9


2. 77 65 15,58 78 1,3
3. 215 183 14,9 220 2,32
4. 116 96,5 16,81 119 2,6

Die Zahlen zeigen fiir den inneren Protoplasten]aden eine deutliehe


Gontravtion, im Durchsehnitt um 15,12 vii. Fiir die Auflenmembran ~ g t
sich, da die geringen L~ngenuntersehiede innerhalb der Fehlergrenzen
der Messungen liege'n, nut sagen, dab die Liingenzunahme, wenn sie
iiberhaupt stattfindet, im Vergleich zur Contraetion des Protoplasten-
fadens nur gering sein kann.
Die Breiten~nderung der F~den ist dagegen ganz exakt meSbar.
Hier wurden die folgenden Wer~e festgestellt:

1) Dio bei Mai~angabengebrauchten Zahlon bedeu~eniiberall Teilsfxichedes


Mellokulars. Ein Teilstrich -- 3,2 /~.
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultraliltertheorie des Plasmas. 15

Tabelle 2.
Breite der F~den.

Nach der S1)altung


Vor der Sp~2tang Protoplastenfaden Aul3enmembran
vii. Quer- vH. Breiten-
Breite contraction Breite zunahmc

i. 15,5 12 22,58 17 9,67


2. 13 13 0 17 30,8
3. 11 9 18,18 14 27,27
4. 13 12,5 3,84 17 30,77
5. 15 12 20,0 17,2 14,67
6. 12 10,5 12,5 15,8 31,67
7. 14 12 14,28 18,5 32,14

Der Protoplastenfaden hat also im Durchschni~t um 13,5 vii. der


Breite des Norm altadens abgenommen, die ~ufere ~r dagegen
um 25,28 vii. im Durchsehnit$ zugenommen. ~iessungen der Breiten-
Zunahme und Quercontractionen der F~den bei Spaltungen in KNO.~
und HNO~ ergaben ganz ~hnliche Werte. Fiir KN03 land sich eine
Brcitenzunahme yon durchschnittlich24,3 vii., e'me Quercontractionvon
durchschnittlich 12,8 vH. Bei HNO~ wurde nut die Quercontractio~
gemcssen, sic ergab imDurchsehnitt 13,8 vii. L~ngsmcssungen sindbei
KN03 wegcn dcr nut pal~iell auftretcnden Abhebung nicht mbglich,
bei HN03 ebensowenig, ul~d zwar bier wegen der auftretenden Gascnt-
~Scklung beim Zusatz der S~ure, wodurch die F~den stark deformiert
werden.
Der ganze Spaltungsvorgang geht also unter einer 4euttichen LSngen.
und Breitenabna~me des Protoplaster~adens vor sich, w~hrend flit die
Aul~enmembr~n eine Breitenzunahme eindeutig festge~tell~ werden
konnte, eine gleichzeitige Lgngenzunahme derselben ist /rag[ich oder
ieden/alls nut gering/iigig.
Dazu sei noch bcmerkt, daft die Spaltung in KOH ~owohl bei Ver-
wer~dung hypertonLscher LSsungen, wie auch hypotonischer eint~itt.
l~ur ist bei letzteren die Contraction durch den grS~eren Wassergehalt
der Zcllcn etwas gehcmmt. E~ kann daher die Contraction de~ Proto-
plastenfadens, ganz gleich, ob die inhere Membranschicht aufgelSst ist
oder nicht, durch einen Wasserentzug nicht erkl~rt werden. Vcrgleicht
man ferner die oben gemessenen prozentualen L~ngem und Breiten-
abnahmen des Pro~oplastenfadens mit Wcrtc~, die sich fiir die L~ngen-
und Breitenabnahme yon F~dcn infolge der AbtStung im schwachen
Flemmingschen Fixicrungsgcmisch ~) ergcben, wobci eine Spaltung nicht
erfolgt, so zeigt sich, d a f die bei der Spaltung gemessene Abnahme in

1) ttierbei wurde das zur Herstellung ben6tigte Aqua dest. dutch Artera-
W&SSor e1"s@tzt,.
16 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

Li~nge und Breite iiberwiegt. Fiir abgetStete l~den ergnb sich eine
L~ngenabnahme im Durchschni~t yon etwa 10vH., eine Quercon~rac~ion
yon racist 0 vH, im HSchstfall 3 vH. Das bedeutet aber gegenfiber den
gespaltenen Fi~den fiir die L~ngenabnahme eine Differenz yon etwa
5 vH., ffir die Breitenabnahme yon 10vH.
Aus allen diesen Tatsachen ergibt sich nun aber eine sehr einfache
und einleuchtende Erkl~rung des normalen Membranzustandes:
Die beiden Schichten der Membran besitzen antagonistische
Spannungsverhgltnisse. Die 5uflere Schicht (Abb. 6 a), am
....... normalen Faden elastisvh verlciirzt, besitzt ein Ausdehnungs-
, , bestreben, hauptsSchlich in der Q~errichtung des Fadens.
F i Die innere Schicht (Abb. 6 b), am normalen Faden in
b\ :,."...... ~i Liings- und Querrlchtung elastisch gedehnt, zeigt ein starke8
L: ...... : Confravtionsbestreben. Am normalen ungespaltenen ~aden
~ ~__.._~ hal~en sich beide Schichten im Gleichgewicht. Durch die
,,Spaltung" wird der Z~sammenhang beider Schichten au]-
! ....... ~ : gehoben, ~o dab sich beide Spannungskr~fte auswirken
a......~ kSnnem Bei der Contraction der Innenmembranschicht
i......] sind auch noch die Querwiinde mit wirksam, also im
i I Normalzustand ebenfalls elasti~.ch gedehnt. Denu wiirden
i : diese nur passiv durch die Contraction der Innenmem-
l , bran zusammengedriickt, so miiBte wegen ihrer Zartheit
:i ......
.... ji ein mehr oder weniger deutliches Falten oder Einbiegen
: ~ erwarte~ werden. An kontrahierten F~den liegen sic aber
i i immer vSllig glat~ zwischen den einzelnen Zellen.
......." Abb. 6 zeigt diese Verh~ltnisse in schematischer Dar-
steUung.
Bei der Spal~ung in KOH und anderen Laugen tritt
Abb. 6. Schema
der ~Iembran- nach derselben eine AuflSsung der inneren Membran-
spaltung, a $iu- s c h i c h ~ 5 a u f .
13erc,abgehobenc
Membranschicht Anfi~nglich bleibt h~ufig der Zusammenhang beider
5innere,kontra- Membranschichten bei Einwirkung des S]?altungsmi~$els
hierte Membran-
sehicht (,,Proto- (K-NO3) partiell gewahrt, und es trit~ nur ein blasen-
plastenfaden"),
gestrie~e~t,,vm-artiges Abheben der ~uBeren ~embranschich~ ein.
ril~desungespal- Bei l~ngerer Einwirkung geht die Trennung etwas welter,
tenen, normalen
za~ens, doch bleibt immer in einigen mehr oder weniger brei~en
Falten der Zusammenhang beider Schich~en erhalten.
Auch die in hypotonischen LSsungen auftretende Verkiirzung der
Protoplastenf~den finde$ in dem Contractionsbe~treben der inneren
Membranschich~ ihre Erkli~rung. Und dab schlieBlieh beim einfachen
AbtSSen (z. B. durch Flemmings L5sung) eine bedeutend geringere Con-
Craction des ganzen Fadens eintriSt, als der Protoplastenfaden bei der
Spal~ung zeigt, beruht nur darauf, dab hier eine weitere Verki~rzung
Beggiatoa mir~bilis. Ein Beltrag zur Ultrafilter~heor~edes Plasmas. 17

dez _Faden8 durch die lest anliegende Auflenmembran verhindert wird.


Diese wirkt einerseits wegen ihrer n~ch auBen geriehteten Spannungs-
tendenz hemmend, anderseits k~nn sie sich iiberhaupt nut bis zu einom
bestimmten Punkt elas~isch verkiirzen, wie der folgende Versuch zeig~:
Es wurde ein in Kaiilauge gespaltener ~aden i~ eine 20proz. Rohr-
zuekerlSsung gebracht. Dabei stiill)te sich die i~ui~ere~embran voriiber-
gehend in vielen ~alten nach innen ein und war nach einiger Zeit wieder
in die urst)riingliehe glatte Lage (d. h. welt veto inneren !~aden ab-
gehoben) zuriiekgegangen. Infolge des hohen Filtrationswiderstandes
der Membr~n gegen den l~ohrzucker entsteht anf~nglich ein osmotischer
Po~entialsprtrng, der sich aber infolge der Permeabiliti~t der Membran
fiir Rohrzucker (vgl. fiber diese Vorg~nge die Versuche auf S. 53) wiedor
ausgleicht. Darius geht abet hervor, daI~ eine st~rkere dureh Wasser-
entzug bedingte Volumabna~hme der Zellen nicht dutch Verkiirzung der
~uI~eren ~embran, sondern nur dutch Ein/altung erzielt werden k~nn.
SehlieBlieh sei bier aueh auf die MSgliehkeit einer gewi.ssen mecha.
nischen Bedeutung dieser beiden antagonistisch wirkenden Spannungs-
kr~fte der Membran hingewiesen. Wie im folgenden Teil dieser Arbeit
gezeigt werden wird, ist der in den Zellen herrsehende Turgordruck
(der osmotische Uberwert de.r Zelle gegen das Arternwasser) ganz
erstaunlieh geringfiigig, so dab er fiir eine Festigung des ga~zen
Fadens nieht wesentlich in Frage kommt. Das oben naehgewie-
8ene Ausdehnungsbestreben der ~ul~eren Membran wird gleiehsi~nig
mit dem iiberaus bescheidenen Turgordruek zu einer gewissen Straffung
der Innenmembran beitragen und damit dem ganzen so zarten Faden
eine etwas grSi3ere Festigkeit (Aussteifung) verleihen. Bezeichnen wir
die Quereontractionskraft der letzteren im Normalzustand der F~den
mit c, die, wie gezeigt, fast nur quer gerichte~e Dilatationskraft der
Au~enmembran mi~ d und den Turgordruck mit t, so wiirden wir im
natiirlichen Zus~ande der nicht-apicalen Zellen haben:
c=t+d
und im turgorlosen Zustande bef~nden sieh beide Membranen im
Spannungsgleiehgewieht. Tats~ehlieh kontrahiert sieh der Faden sehon
bei Naehlassen des minimalen Turgordrucks deutlieh. (Bei so kleinen
Zustands~nderungen des Fadens werden die fraglichen Kr~fte praktisch
als konstant be~raehte~ werden diirf~n.)
Ungekl~rt bleibt nut der spezi/ische Mechanismus bei der Wirkung
der Spaltungsmittel, die den Zusammenhang beider Niembranschichten
&ufheben. S~uren und Laugen kSnnten dabei hydrolytiseh auf eine
Kittsubstanz wirken, die letzteren aui~erdem auf diese wie auf die
Innenmembran verquellend. Darauf wiirde dann die Wirkung der
Laugen aueh bei schw~cheren Konzentrationen zuriickzufiihren sein.
Archiv f. wissenschaf~l. Botanik Bd. t.
18 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilitgt yon

Fraglieh bleibt aber die Ursaehe der Wirkung yon KNO3, KNO2, KSCN
und NH'4NO3. Da NO s' und SCN' gem~B der Hofmeistersehen lyotropen
Reihe als besonders quellungsf6rdernd gelten, k6nnte man auch hier
an eine queltungsf6Mernde Wirkung auf die Kittsubstanz denken. Da
sich abet auf Grund der Spal%ung der beiden Salze nicht fests~ellen
1/~13~, ob das Rhodanid wirksamer ist als das Nitrat und sieh ebenso-
wenig fiir die fibrigen Neutralsalze, die keine Spaltung bewirken, eine
bestimmte Anordnung ergibt, liegt zunaehst kein zwingender Grund
fiir diese Annahme einer quellungsfSrdernden Wirkung dieser Salze vor.
Die Wirkung des Kalisalpeters und auch der konzentrierten S~uren
k6nnte aueh auf ihrer Eigenschaf% als Oxydationsmittel beruhen. Da
aber andere Oxydationsmittel wie Kaliumchlorat, Kaliumpermanganat
und Wasserstoffauperoxyd keine Spaltung bewirken, wird in einer
Oxyda%ion.swirkung die Ursache nicht zu suchen sein.
Sehr auffallig ist nun die Tatsache, dab weder an natiirlich abgestor-
benen F~iden noch a~ ~olchen, die auf die verschiedenste Art und Weise
abyet6tet waren, 8ich dutch die genannten Mittel noch eine Spaltung er-
zielen ldflt. Zur Abt6tung wurden Flemmingsches schwaches Fixierungs-
gemiseh, Sublimat, Chroms~ure, Alkohol, Chloroform, Jodd~impfe, Hitze
und schlieBlieh langer anhaltendes Einfrieren der Faden beniitz%.
Man muB daraus sch]ieBen, daB beim Tode auch in der Membran, zum
mindesten in der irmeren Schicht oder der Kittsubstanz ~iefgreifende
Ver~nderungen stattfinden, so dab sich, zumal schon natiirliches Ab-
sterben die fragliehe Wirkung hat, yon selbst der Gedanke an die Be-
teiligung lebender Substanz an der Membranstruktur, wie sie z. B.
HA~'ST~.N-CI~A~NER (1914 und 1922) und M.acDouGAI, (1923) bei
anderen Pftanzen annehmen, aufdr~ngt.
Da unsere Vermu%ungen sogar soweit gingen, dab der inneren
Membransehicht ein ganz vorwiegend plasmaartiger Charakter zukomme,
wurden Verdauungsversuche mit einem hervorragend wirksamen Tryp-
sinpraparat angestellt: Zur Verwendung gelangten Fgden, deren ~em-
bran in einer 10proz. KNO~-LSsung zur Spaltung gebracht worden war.
Die so gespaltenen Fgden wurden zungehst in eine grSl~ere Menge der
VerdammgslSsung gebracht, um die anhaftende KNO3-LSsung ganz
auszuwaschen. Erst dann wurden sie in einen Tropfen frischer Ver-
dauungslSsung auf einen Objekttrgger tibertragen. Die aufgelegten
Deckgl/iser wurden mit Paraffin abgedichtet, und die fertigen Prgparate
im Thermostaten bei 37~ aufbewahrt.
Die Verdauungsl6sung bestand in einer LSsung, die etwa 0,3proz.
Trypsin (Trypsin sice. yon Dr. G. G1iibler & Co., Leipzig} und 5proz.
NaeCOa enthielt. Neben einem Kontrollprgparat mit Fibrin wurden
noeh zwei weitere Kontrollprgparate hergestellt, in deren einem das
Ferment dureh Hitze unwirksam gemaeht worden war, wahrend sich
Beggiatoa, mirabilis, Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 19

im zweiten nur reine NaeCO3-LSsung befand. Iu diesen beiden Pr~.pa-


raten blieben die Fiden unverdaut. Dagegen war in der wirksamen
Trypsinl6sung nach 24 Stunden - - zum Tell auch schon f:riiher - - ein
Tei] der P]asmakSrper mibsamt der anllegenden inneren Membran ver-
schwunden. Da$ auch die innere Membranschich$ verdaut war, zeigben
besonders deutlieh einige genau aufgezeichnete F.adenstellen, bei denen
naeh der Spaltung die innere Membranschicht yore Plasm~ losgelSs$
sichtbar gev~esen war: Hier war nach dem Versueh v o n d e r inneren
Membranschicht niehts mehr zu sehen, w~hrend die ~uBere Sehieht noeh
vollstindig erhalten war.
Betreffs der verdauenden Wirkung des Trypsins auf Plasma, welehe
hier und auch bei anderea Pflanzen direkt, d. h. ohne Vorbehandlung
desselben mit Xther, Chloroform und dergleiehen hervortritt, und also
ilteren Feststellungen sowie den darauf aufgebauten weitgehenden
Schliissen fiber die chemisehe Struktur des Plasmas widerspricht, ver-
weisen wir auf die naehfolgende Arbeit yon A. WEIs (1925). Hier
interessiert uns vor allen* die gteichze~tige Verda~tung der Innenmembran.
Wit halten uns dentnach ]iir berechtigt, au~ ihren eiweifi, odor plasma-
artigen Charakter zu schliefien, der auch den festen, jede Plasmolyse
ausschlieSenden innigen Verband von Plasma und Gesam~membran
verstindlieh macht. Vielleicht l~l~t sieh die eigenartige Natur der
Innenmembran am besten mi$ der sogenannten ,,Pellicula" gewisser
Protozoen vergleiehen. Dem widerspricht auch nicht ihre elastische
Dehnbarkeit ; m6glieherweise ist sic nut ein noeh ausgesprochener mem-
branartiges Gebilde als das genannte Protozoenorganoid.

c) Die Schrumpfung.
Die Kenntnis der eigenartigen Membranverhiltnisse erm5glieht nun-
mehr ein Verst~ndnis der ei~gangs besehriebene~ Schrumpfungsersehei-
nungen. Wie aus S. 17 hervorgeht: befinden sich am turgorlosen Faden
beide Membranschiehten im Spannungsgleiehgewieht. Am roll turges-
zenten Faden ist dieses Gleichgewicht durch den nach aul~en gerichteten
Turgor im Sinne des Ausdehnungsbestrebens der AuBenmembran ver-
sehoben. Der ganze Faden ist also st/~rker gedehnt als im turgorlosen
Zustand. Tritt durch Wasserentzug eine Turgorverminderung ein, so
wird der Faden eine Vark~rzung erleiden, his beide Membransehiehten
wieder im Spannungsgleichgewieht stehen. Bei weiterem Wasserentzug
kann aber, da die ~uf~ere Yfembran sich nur innerhalb der Turgor-
dehnung elastiseh verkiirzen kann (vg]. S. 17) und, wie gezeigt, wegen
des innigen Zus~mmenhanges yon Plasma und YIembran eine Plasmo-
lyse unmSglich ist, eine Volumverminderung der Vacuole nut unter
Ein]altungen und Knickungen, wie sie eingangs (S. 9, Abb. 1) be-
sehrieben wurden, erfolgen, und zwar an solohen Zellen zuemt, die
2*
20 W. X~uhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

wegen ihres etwas geringeren osmotischen Wertes den Grenzzustand am


r~schesten erreichen.
Damit gelangen wir in den Bereich der MSglichkeit, diese in dem
Spannungsantagonism~.~ der beiden Membranschichten und dem [esten
Verband yon Plasma und Innenmembran begriindete Schrum'p/ungser-
scheinungen als rein osmotische Vorg~inge an der lebenden Zelle zu
Messungen zu benutzen, zu denen bei gewShnliehen Objekten die
typisehe Plasmolyse dient. Dies wird im folgender~ ni4her zu begrfinden
sein.
I I L Diosmotische Versuche.
A. AlIffemeines.
Will man den osmotischen Wert des Zellsaftes der Beggiatoa-Zellen
bes$immen, so ist yon vornherein zu erwarten, dab dieser ein reeht
erheblicher sein mu$, da der Faden in einem Medium yon hohem os-
motischen Wert lebt und sich aus diesem Medium mit Wasser versorgen
m u l l Der gesamte osmotisehe Weft des Zellsaf~es wird sieh nun zu-
sammensetzen aus einer GrS_6e, die dem osmotischen Wer~ des um-
gebenden Mediums entsprieht, und einem gewissen ~berwert fiber dieses.
Der osmotische Wert des umgebenden Mediums 1M~t sich aber aus
der Gefrierpunk$serniedrigung des Arternwassers ohne Schwierigkeit
bereehnen. Diese ergab sich aus einer Anzahl yon Messungen als
z / = 2,196 ~ C,
das wiirde n~ch der Formel
273 -}- t
Pt -~ 12,05 9 z/ 9 2 7 3 ~ z /
(RENI~ER, 1912), wobei Pt den osmotischen Druck der LSsung bei t ~
bedeutet, ffir eine Temperatur yon 18~ einen dem Druck yon 28,4
AtmosphSren entsprechenden osmotischen Wert fiir das Ar~ernwasser
ergeben.
Zur Bestimmung des osmotischen 0-berwertes der ZeUen wiirde nun
die ,,plasmolytisehel) '' Grenzkonzentration zu bestimmen sein. Die
Differenz zwisehen dem osmotischen Wert dieser GrenzlSsung und dem
des Arternwassers erg~be dann den osmotischen ~berwert der Fi~den.
Anstatt nun das reine Plasmolytieum in den fiir diese ]3es~immungen
nStigen, verh~ltnismi~Big hohen Konzentrationen auf die P~den wirken
zu lassen, was schon deshalb, weil die F~tden in solehen reinen LSsungen
sogleieh gesch~digt werden, unstatthaft ist, werden wir zweekmi~f~ig
das I~lasmoly~icum im Arternwasser 15sen und mit dieser LSsung die
,,plasmolytische" Grenzkonzentration bestimmen. Dann ergib~ der

1) Es wird zun~ehst yon der Bes0nderhei~ yon Begg~atoa, dal] an Stelle einer
Plasmolyse nur Sehrumpfungen auftreten, abgesehen.
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 21

o~motische Wert des zugesetzten Plasmolytikums direkt den osmotisehen


~3berwert des Zellsaftes.
Das ffir eine solche Bestimmung verwendete Plasmolytioum muB
nun aber ein ganz unsch~dlicher, mSglichst wenig permeierender, che-
raisch indifferenter Stoff sein, am besten ein Nichtelektrolyt. Welter
unten (Abschnitt IIID) wird genauer zu zeigen sein, dab in die lebende
ungesch~idigte Beggiatoa.ZeUe fast alle Stot/e, zum Tell sogar erstaun-
lich leicht Termeieren, in noch weir h(~hercm MaBe als es A. FlSCI~EI~
(1891, 1894) bei seinen Bacterien land, und JA~SF. (1887), DRv.WS
(1895), KOTTE (1914) an Meeresalgen beobachteten.
Verhaltnismi~Big sehr langsam unter den brauchbaren (d. h. genfigend
15slichen uncl unsch~dlichen) Stoffen permeiert Raffinose." Der speziellen
Darstellung der angewendeten Methodik vorgreifend seien gleich die
Resultate dieser grenzplasmolytisehen Bestimmung mit Raffinose an-
geffihrt. Die Raffinose wurde in Arternwasser gelSst, und die Messung
ergab darauf eine plasmo]ytische Grenzkonzentra~ion yon 0,00 015 G.I~I.
Das bedeutet also den erstaunlich geringen osmotischen ~berwer~ fiber
dem Arternwasser von 0,00 336 Atmosph5ren. M2t einigen anderen ahn-
lieh brauchbaren Stoffen wurde genau derselbe Weft gemessen, welcher
somit trotz .seiner Kleinheit als zuverl~saig bezeichnet werden mul3.
Nun wird hSchstwahrscheinlieh nur dieser miifimale l~berwert des
Zellsaftes durch zeUeigene Stoffe aufgebracht, w~hrend die Haul~tmenge
des Zellsaftes, des.sen osmotischer Weft den des aul~en umgebenden
Mediums kompensiert, im wesentlichen die gleiche Zu.sammensetzung
haben dfirfte wie das Arternwasser. Dies schlieBen wir aus der iiberaus
hohen Permeabilit~t der F~den fiir die einz61nen Bestandteile des Artern-
wassers, speziell auch fiir das NaCI (siehe Tab. 6, S. 32), wie sie unseres
Wissens yon keinem anderen daraufhin gepriiften Organismus aueh nur
anni~hernd erreicht wird. DaB sich Beggiatoa dauernd auch nur partiell,
gegen das Eindringen dieser Stoffe wehren kSnnte, ist danach nicht
anzunehmen. Vielmehr wird bei Differenzen im Binnen- und AuBen-
gehalt rascher Ausgleich eintreten. Demgem~B wird auch bei Xnde-
rungen im Salzgehalt des AuBenmediums, die im Binnenlande (Artern
in Thfir.) durch Regengfisse oder Trockenheit leicht eintreten kSnnen,
das osmotische Gleichgewicht sich rasch und einfach ohne Neubildung
oder Abbau zelleigener, osmotiseh wirksamer Substanzen neu einstellen
kSnnen.
B. Methodisches.
a. Das Verhalten des Ob~ebt,.
Richten wir aber nun einmal un~ere Aufmerksaml~eit auf die Tra/c-
tische Durch/is soleher Messungen in Rficksich~ auf die eigenartigen,
oben dargestellten Verh~ltnis~e bei Beggiatoa, vor allem auf das an Stelle
einer Pla~nolyse auftretende Sehrumpfen und ,,Knicken" der F~den.
22 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~it yon

Wir erinnern uns (S. 19), dal~ diese Knickungen sogleich auf einen
Wasserentzug hin eintreten, der fiber den Zustand der Membr~n-
entspannung hinausffihrt. Somit sind diese K~lickungen mit dem be-
~nnenden Abheben des Plasmas yon der Membran bei der Grenzplasmo-
lyse direl~ vergleichbar. ])as beweisen oft wiederholte Parallelversuche
mit den gleichen osmotisch wirksamen Aul~enstoffen, die immer wieder
dieselben Grenzwertc ergaben und nicht zum letzten die ffir die Permeier-
f~higkeit der Nichte]ektrolyte gefundene wichtige Gesetzm~igkeit.
Will man nun diese Erscheinung ~n Stelle dcr Plasmolyse zu osmo-
tischen Messungen verwenden, so hat man nur auf folgendes Rficksicht
zu nehmen:
Beim Durchsaugen yon LSsungen dutch die Pr~parate (ein ~ber-
~rage~ von Flfissigkeit zu Flfissigkeit kommt natiirlich nicht in Frage)
reifien sich einzdne F~denteile leieht yon der Unterlage 10s uncl werden
dann in Richtung der StrSmung mehr oder weniger gebogen und ge-
kriimm~. Wegen der verh~ls geringen meehanischen Festig-
keit der F~den k~nn es dabei leieht zu Knickungen an der Konkav-
seite kommen, die nieh~ osmo~ischer Natur sind. Diese werden daher
beim Naeh]assen der StrSmung sQlort ausgeglichen, w~hrend die typisch
osmotisehen Knicku~gen much d~nn noch erhalten bleiben. Aul~erdem
treten diese in ganz charakteristischer Weise, ~nscheinend in bestimmter
En~fernung voneinander, meist ~bwechselnd auf beiden Seiten 4es
Faden.s auf und sind dadurch schon yon den Knickungen dutch StrS-
mung zu unterscheiden. Stets ist eine Kniekung yon osmotischer N~tur,
sobald sie gegen die StrSmung geriehtet auftritt.
Aui alle Fhlle einwandfrei bleibt aber das andere Merkmal, die Ein-
kerbungen zwischen zwei Quermembranen, uncl da meist beide Er-
seheinungen zugleich an demselben Faden auftreten, ist die osmotischen
Wirkung einer zugeftigten LSsung eindeutig zu erkennen.
Ffir eine vSllig genaue Messung des Turgordruclces der F~den miiBte
n~tfirlich theoretisch die den EiI~kerbungen vorhergehende vSllige
Membranen~spannung in Reehnung gestellt werden, die wegen der
aul3erordentlichen El~stizit~t und Zartheit der Membranen trotz des
geringen Turgors (vgl. S. 21) etwa 10 vH. beCr~gt. Fiir PermeabilitSts-
studien abet handelt es sich nur darum, ob der Beginn des Knickens
einen eben so scharf definierten and konstanten Grenzwert kennzeichnet,
wie es bei der sog~nannten ,,Grenz"pl~smolyse gewShnlicher Zellen der
Fall ist. DaB die Kniekungen dieser Fordcrung tats~chlich Geniige
leisten, wurde bereits (S. 21) hervorgehoben.
Das Prinzip dieser PermeabilitStsmessungen war nun folgendes: Es
wurde die Zeit gemessen, innerhalb der sich die in der hypertonischen
LSsung eines Stoffes an einem F~den auftretenden Knickungen und
Einkerbungen volts~ndig au~geglichen hatten. ])a die Schru~pfungen,
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 23

ganz gleieh ob stark oder schwach hypertonische LSsungen zur An-


wendung kamen, fast iiberall momentan, d. h. sobald die L6sung an
den Faden herantrat,, erscheinen, so wird einfach die Zeit vom Beginn
des Einwirkens des Plasmolytikums bis zum Ausgleich der Schrump-
fungen bestimmt. Beide Punkte" .sind bei geeigneter Versuch~nord-
hung genau bestimmbar, und so ist auch ein genaues Messen dieses
Zeitintervalls m6glich. Innerhalb dieser Zeit wird aber, da in der AuBen-
15sung die zu un~ersuchenden Stoffe im Arternwasser gel6st geboten
werden, und daher, wie wir schon oben sahen, nut diese osmotisch wirk-
sam sind, die Menge der yon auBen gebotenen Gramm-Molekiile des zu
untersuchenden Stoffes eingedrunge n sein, wobei sich selbstverst~ndlich
diese Mengen auf das Volum der Zellfliissigkeit beziehen (FITTI~rG1917).
Durch Berechnung der in der Zeiteinheit aufgenommenen Gramm-Mole-
kiile erh~lt mand~nnDurchschnittswerte, die einenVergleich der einzelnen
Stoffe untereinander gestatten. Bei der Berechnung dieser Werte konnte
der ~ul~erst winzige Turgordruck der F~den unberiicksichtigt bleiben.
Da in manchen ~'~llen die Wa.sserlSslichkei~ der Stoffe zu gering
war, oder diese in den erforderlichen Konzentrationen bereits seh~d-
~ich wirkten, urn, wie es sonst meist geschah, diejenige AuBen-
konzen~ration za ermltteln, in wdeher gerade nach ftinf Minuten ein
Riickgang der Erscheinung eingetreten war, muSten unter solchen Urn-
a~nden die ,,M0men anwer~e fiir den Vergleich der Durehtrittsfahig-
keit der Stoffe geniigen, d. h. diejenigen 1Vfinimalkonzentrationen, i:n
denen etn sofortiger R~ickgang des ,,Knickens" erfolgte. D[ese Werte
kormten darm zur Berechnung der Permeabilit~tskoeffizienten ~LE-
PESCaKI~r 1909, T~5~DLE 1910) benutzt werden, wobei nut wegen des
Fehlens eines im strengSten Sinne importunf~higen Stoffes tier diesen
am n~chsten kommende, also als Vergleichsstoff die am langsamsten
permeierenden Raffinose verwendet wurde, welehe praktiach dieselben
Dienste leistet.
Permeabilitat$messungen nach der ~lasmOlytischen Methode, wie ale
F~TTI~G (1915, 1917, 1919) weitgehend ausgearbeitet hat, kamen da-
gegen hier nicht in Be~racht, denn es war ein l~aSstab far den jeweiligen
Schrumpfnngsgrad nicht gegeben.
Nun erhebt sich aber die Frage, ob wirklich der Riickgan9 und sehlie~-
liche Ausgleich einer Schrump/ung durch das Eindrinilen des autlen ge-
botenen Stuffes bedingt sein muB. So k6nnte - - vorausgesetzt, dal]
nicht gar Sch~digungen der Zelle im Spiele sind ~ ein Ausgleich auch
dadurch zustande kommen, dab nicht das aul~en gebotene Plasmo-
lytikiam permeiert, sondern dal~ ein Bestandteit des mit der Aul~en-
tfsung gebutener~ Arternwassers in die Zelle eindringt und den Ausgleieh
bedingt, und schlieBlich konnte ein solcher auch dutch Anatonose be-
wirkt werden.
24 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

Beide Einw~nde l~ssen sich leicht widerlegen. Im ersten Falle,


einigermaBen angen~hert &ber wohl auch im zweiten, kSnnte man er-
warren, dab bei Darbietung osmotisch gleichwertiger L6sungen ganz
versehiedener Stoffe und vSlliger Impermeabilit~t der F/~den fiir diese
Stoffe, der Ausgleich im gleichen Zeit,intervall erfolgen miiflte, was aber
den Tatsachen nicht im entferntesten entsprieht. Oder man miil~te
umgekehrt erwarten, dal~ LSsungen, in denen die anf~nglich dutch sie
bewirkten Schrumpfungen auf eine dieser beiden Arden in gleichen
Zeiten ausgeglichen werden, auch osmotisch gleichwertig sind. Damit
~timmen ~ber die Befunde an Beggiatoa ebensowenig iiberein. So waren
folgende Konzentrationen yon Harnstoff und Rohrzucker nStig um
einon Ausgleich der momentan eingetretenen Schrumpfungen binnen
5 Minuten zu erzielen:
Rohrzucker 0,00 033 G.M.
H arnstoff 1,48 G.M.
Die Differenz in den osmotischen Werten dieser beiden L6sungen
ist So auffallend (sie betr~gt etw~ das 8200fache), dab an beide Er-
ld~rungsmSglichkeiten gar nicht gedacht werde~ kann. Eine Anatonose
wird auBerdem schon durch die kurzen Zeiten, innerh~lb derer ein Aus-
gleieh anf~nglieher Schrumpfungen erfo]gt, ausgeschlossen. Wir kimnen
daher den Ri~ckgang der Schruml~/ungen nut auf die Permeabilit(it der
ZeUen ]i~r die ~eweiligen Sto//e zuriiclc/i~hren, falls die Permeabilitat
der F~den, und insbesondere, wenn ~ie so hoch ist wie im Falle des
Harnstoffes, nicht nur dutch eine Schgdigung (pathologische Durch-
l~sigkeitserh6hung, Exosmose) seitens der yon auI~en gebotenen LS-
sungen vorget~uscht wurde. Wie schon in der Einleitung betont, wurde
diesem Punkte ganz besonder.s sorgf~ltige Beaehtung gewidme~.. Die
F~den von B. mirabilis bieten in ihrer Bewegtichkeit ein sicheres Kri-
terium dafiir, dal~ sie sich vollst~ndig im normalen Zustand befinden.
Die F~den wurden daher nach den Versueh n, d. h. nach erfolgtem
Ausgleich, welter beobachtet, und es zeigte sich, dal~ sie im Falle der
Unschi~dlichkeit der angewandten Stoffe und Konzentrationen immer
beweglich waren. Erst einige Zeit sp~ter, je nach der spezifischen
Wirkung der Stoffe, s~ellten dann die F~den die Bewegung ein und
begannen mehr oder minder rasch zu zerfallen. Yon den im folgenden
untersuchten Salzen wirkten verh~ltnism~Big ra.sch schgdlich die
Magnesiumsalze und N~C1. Bei diesen wurde die Bewegung durch-
achnittlich 1---2 Stunden nach Beendigmag de.s Versuehes einge.stellt.
Im allgemeinen trat jedoch in Salzl6.sungen ein Stillstand der Bewegung
erst nach 2. 4 Stunden ein, bei organischen Stoffen (siehe S. 38) blieben
die FKden sogar oft bis zum n~ehsten T~ge beweglich.
SchlieBlieh spricht auch die folgende Tatsache gegen eine dutch
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 25
Sehidigung gesteigerte Permeabilitit der Fi~den: l~an kan~ innerhalb
der gleiehen Zeit, in der ein Stoff in den Faden eindringt, ihn dureh
Zufiigen einer groBen Menge reinen Arternwassers auch wieder ,,aus-
wasehen". An solchen ,,ausgewaschenen" Fiden kann man die Messung
der gleichen L6sung such ein zweites und drittes l~al vornehmem
Dies wurde hiufig un4 in allen zweifelhaften Fi~llen durehgefiihrt. Da
bei der zweiten und dritten Messung die Fi~den bereits dem Einflusse
der zu untersuchende~ LSsung ausgesetzt waren, hitte man erwarten
miissen, dab bei einer Schidigung des Plasmas dutch die LSsung in
den letzten beiden Messungen die Ausgleichszeiten etwas kleiner sei6n
oder die Grenzkonzentrat,ionen hSher ausfielen als beim ersten Versueh.
Dies war tat si~chlich sehon bei wenig schi~dliehen Stoffen zu beobaehten,
welehe alsdann flit die weiteren Studien unberiicksichtigt blieben. Die
Resultate aller drei Messungen mit den Stoffen, die unseren allgemeinen
Sehlu6folgerungen zugrunde liegen, waren abet gleich. Im einzelnen
sei hier such auf die einsehligigen Bemerkungen auf S. 40 bei der
Behandlung der organischen Stoffe hingewiesen. Wir miissen also die
an den FSxlen gemessenen Permeabilitdten als de~ normalen l/erMiltnissen
entsprechend ansehen, sie sind nicht dutch einen schgdigenden Ein]lufl
der gebotenen Sto/]e abnorm erhSht, und beim I~iickgang des ,,Kniekens"
der Fiden ist such keine pathologische Exosmose im Spiele.
Ftir die Konzentr~tion der zu den Permeabilititsmessungen ver-
we~deten LSsungen gaben die fiir jeden Stoff vorher ausgefiihrten Be-
stimmungen der GrenzkonzentrationenZ) Anhalt~punkte. Zur Be-
stimmung der GrenzlSsungen sei bier noch ganz allgemein gesagt, da{~
diejenige MAndestkonzentration als Grenzkonzentration angesehen
wurde, bei der an etwa 50 vH. der untersuchten ]~iden die Knickungen
un4 Einkerbungen auftraten. Die nichst tiefere. Konzentration lil~t
darm entweder bei keinem Faden oder nut bei vereinzelten die Knik-
kungen in Erseheinung treten, die nichst hShere dagegen bei alien
oder wenigstens bei mehr als 50 vH. der F~den.

b. Die L5sungen.
Die bei den Versuchen verwendeten LSsungen wurden al]e volumnormalin
Axternwasser (vgl. S. 20) hergestellt. Fiir Permeabilititsmessungen bcsteht
bekanntlieh eine gewisse Schwierigkeit, ob die Liisungengewichts- oder volum-
normal hergestellt werden sollen. I~E~v.~ (1912, S. 498) macht darauf auf-
merksam, dab eine Verwendung volumnormaler LSsungen bei geringen Per-
meabihtiten irrefiihren4 wirken kann. Da abet anderseits gewichtsnormale
IAisungen sich in einfachen Volumverh~ltnissen nicht verdtinnen lassen, emp-

1) Der Ausdruck is~ laier und im folgendenauf die zum Eintreten des ,,Knik-
kens" notwendige Minima~konzentrationzu beziehen und vertrit~ infolge des
l~'ehlens einer eigentliehen Plasmolyse die ,,plasmolytisehe" Grenzkonzen-
tration der anderen Objekte.
26 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabitit~t yon

fiehlt er doch volumnormale StammlSsungen zu verwenden, und die rs


Konzentrationen in numerische umzurcchnen (S. 494). FITTLUO(1915) ver-
wendet gewichtsnormale Stamml~isungen, verdiinnt sle aber volumnormal. In
seiner Arbeit 1919 wird eine ,,volummolare" St~mmlSsung volumnormal ver-
diinnt. Der Ausdruck ,,volummolar" ist nicht ganz klar.
Da fiir die f01genden Versuche glcich die StammlSsungen der hochmoleku-
laren Stoffe meist schon 1/10o n oder zum Tell sogar 1/10o0 n hergcstellt wurden,
kSnnen die Konzentrationsunterschiede zwischen volum- und gewichtsnormalen
Werten als ganz uncrheblich bezeichnet werden. Die GrenzlSsungskonzentration
fiir Saccharose wurde mit 0,00025 vn bestimmt, das entsprieht eider 0,0002500625
gn-Konzentration, eine Dffferenz, die ohne weiteres vernachls werden kann.
Bei Stoffen mit geringerem Molekulargewich~ wurden meist n oder h0chstens
~]1o n S~ammlSsungen hergestellt, doch wird der bei ihnen a n sich grSB0re
Unterschied zwischen volum- und gewichtsnormal in den Versuchen wegen der
meist iiberaus hohen Permeabilit~t der F~den ffir diese Stoffe ganz becleutungs-
los. Es ist daher yon einer Umrechnung der gofundenen volumnormalen Grenz-
konzentration Abstand genommen worden; die jeweiligcn Konzentrar
werden unten als grammolekulare bezeichnot.
Die volumnormal hergestellte StammlSsung wurde zun~chs~ aul eine Zwi-
sChenkonzentration verdiinnt, aus der die GrenzlSsungen hergestellt wurden.
Es wurde dabei elne Biirette mit ScheUbachstreifen benutzt, die eine Ablesung
bis auf ~/~ Tcflstrlch = 0,025 ccm zulie~, und eine MaBpipette, die ein sicheres
Ablesen bis auf ~/e Teilstrich = 0,05 ecru erm6glichte. Doch lieB sioh durch
Herstellung verschieden groBer Mengen der GrenzlSsungen leicht erreichen, daft
h~chstens zehntel, meist sogar nur ganze oder halbe Kubikzentimeter abzu-
meSS~YI W a r , n o

c. Apparatur und Aus/i~hrung der Me~sungen.


Fiir die Bestimmung der Grenzkonzentrationen wurdCn klei~ne
K a m m e r n verwendet, die auf folgende Weise hergestellt waren: Ital-
bierte Dcckgl~ser (Abb. 7 a) wurden mit einer sehr feinen 2araffinsohioht
auf einen Objekttrager so gegeneinander aufgekittet, dal3 sie eine etwa
3 - - 4 m m breite Rinne (Abb, 7 b) in der L~ngsrichtung des Objekt-
tr~gers freilie6en. ~ b e r diese schmale Rinne
wurde ein ganzes Deckglas gelegt und auf den
halbert Deckglasstiicken mi$ Paraffin fesSgekit-
tet. Dabei war darauf zu achten, da6 die Paraf-
finschich~ so diinn wie nur m6glich w~r und
Abb. 7. Objekttr~gerkammer
gut B e s t i m m u n g der Grenzkon- vo]lst~ndig his an die Rinne her~nging, diesc
zentration, a halbierte Deck- selbst aber v611ig paraffinfrei blieb.
gl~ser, b StrSmungsrinne.
Mittels eines schmalen FlieB]?apierstreifens
und einer kleinen Saugpipette wurden gr513ere aus zahlreichen t~eggiatoa-
F a d e n bestehende Flocken in diese K a m m e r eingesaugt, und die so fertig
gemachten Pr~parate hn feuchten R a u m bciTageslich~ fiir etwa i Stunde
stehen gelassen. Wi~hrend dieser Zeit 15sten sich die Flocken meist zu einer
~rS~eren Anzahl etnzeln kriechender Fi~den auf, die schiieBlich lest am
SUb strat saI~en. Bei Beginn eine,s Versuches wurde ~un~ch.st mit einem
Flie]papierstreifen in ziemlich starkem Strom reine~ Arternwasser
Beggia~oa mimbilis. Eiu Beitrag zur Uttrafiitertheorie des Plasmas. 2~

durehgesaugt. Dadurch wurden aui~er ~ien Schmutzpartikeln aueh alle


lose :al~ha~eaden FRden ~eggesptiR, so , d ~ man darm beim Dureh-
saugen der Versuchsl6sung einigerm~l~en either war, da~ der einmat
eingestetRe Faden rdehs mehr fo~gespfilt wurde. Die Verwendung dieser
Kammera ermSgliehte ~nd gewRhrlei~tete ein wi~kliehes Durchsaugen
der V~rsuchslSsu,ng u~d verhinderte, da~ diese, wie e~ bei lose auf-
liegonden DeckglRsem ~leieh~ de~ F~ll ist, nut au~en um das Deckglas
herum flieBt ~ d nut langsam in d,as Preparer eindringt. Fiir eine
g a ~ e Grul~ge yon Untersuchungen wurde stets Material gleicher Kul-
turen verwendet.
die Ausfiihru~g der Permeabili~'atsmes~tmgen aber gentigten

i
i
B
]

D
Abb. 8. Str~imuag~kamm~r fiir Permeabtlit~tsme~sungem ~ - - 0 ~gl. Text, /)L~ng~sehnitt dutch
die M~to der Kammer', a Ob]ek~tr~er, b aufgekitt~te Glasstlieke, e au~gekitteter :Decl~la~ring,
d Zutlu~r8h~en~ e ~u g AbfluBmhr, i a b g e s c h r ~ t e Stellen ~m mittelsten aufge-
k~ttet~n Glaesti~ck (A~), k Fes~igungsr~hrchen.

auch diesc Kammern niche, da flit diese Messungen fo]gendes zu be-


rticksichtigen war: Das Pt~smoty~ieum muBte ~nSflichst rasoh ~nd voU-
s~ndi,q (ohae anf~ngtiche VeMiiimtmg ocler Vermisehung mit der ur-
spriingliehea Flti~igkeit) an den Faden her~ngebraeht werden, w~h~end
die F~den dauernd beobaehtb~r bteiben muBten. Dazu wurdr die
fotgende A p ~ r a t u r notwendig:
Auf einen breiten Objekttr~ger wurdeu fiin~ aus einem dieken
Objekttr~iger ge.schnittene Gl~sstiieke mi~ Ca~adab~lsam aufgekltt~t.
Form und Anordn~ng dieser Stiicke zeigt Abb. 8 A. Das g r o ~ Mitt~l-
28 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die PermeabilitKt yon

stfick war an den mit i bezeichneten Stellen schr~tg eingefeilt. In der


Rinne ] (Abb. 8 A) wurde eine eapillar ausgezogene G]asrShre mit
Paraffin und Siegellack so befestigt, dal~ die 1Kfindung genau an die
mit i bezeichnete abgesehragte Stelle des Mittelstiiekes zu liegen kam.
Die Capillare darf nicht zu rein sein, darf aber anderseits nicht fiber
die aufgekitteten Glasstficke herausragen. Aul3erhalb der Rinne ging
die Capillare rasch in die Dicke der GlasrShre fiber, die etw~ 1--11/~ cm
fiber den ganzen Objekttr~ger herausragte. Dieses R6hrchen diente
als AbfluBrohr der Kammer. In der gegenfiberliegenden Rirme ]'
wurde nun in ganz ~hnlieher Weise als Zuflul~rShrchen eine Capillare
eingelegt, die aber nach aut~en zu hSchstens zu 2--3 mm Dieke zunahm
und etwa 3 4 mm fiber den Objekttr~gerrand herausragte, l~ber dieses
herausragende Ende wurde ein ganz dfinner Gummischlaueh gezogen
es wurde der ffir Fahrr~der verwendete Ventflgummi benutzt - -
von etwa 7--8 mm L~nge. Um der ganzen ZufluBrShre mitsamt der
Gummiverbindung grSBeren Halt zu geben wurde ein ldeines Stfiek
Glasrohr yon der Lange des Gummi~, fiber diesen bis an den Objekt-
trEger herangesehoben und mit diesem dutch Siegellack lest verbunde~
(Abb. 8 Dk). Die Capillaren miissen in den Rinnen ganz in Paraffin
eingebettet liegen, so dab keine ttohlr~ume vorhanden sind. Auf dem
so vorbereiteten Objekttr~ger (Abb. 8 B) wird nun mit Paraffin ein
Deckglas befe~ti~o~, in das die in Abb. 8 C angegebene (Sffnung durch
FluBsaure einge~tzt war. Das Deckglas muB so aufgelegt sein, dal~ die
Mfindungen der Capillaren gen~u unter die Spitzen der ausge~tzte~
Deckglas6ffnungen zu ]iegen kommen. Mit einem vollen Deckglas
konnte da/m diese Kammer mit Hilfe yon ehemisch reiner Vaseline
vollst~ndig gesehlossen werden.
Diese so hergestellten Str6mungskammern hatten den Vortefl, dab
der Kammerraum vor allem in seiner tt6he auf ein Minimum besehr~nkt
war, und man so auch mit s~rkeren Objektiven an die Objekte
herangelangte. AuBerdem war bei geeigneter Ver~uchsanordnung ein
dauerndes Durchstr6men mSglieh. Die Ver~uchsanordnung war folgende:
Die ganze Kammer ist mit Objek~ldammern auf dem Objek~isch des
Mikroskops so befe~tigt, dal~ das Abflul~rohr fiber den Rand des Objekt-
tisehes herausragt und abtropfen kann, w~hrend die eigenthehe Ks mvner
im Zen~rum des Tisches liege. Links vom Mikroskop befinden sieh an
einem Stativ zwei Tropftriehter, der eine mit gewShnliehem Artern-
waz~er, tier andere mit der Versuehsl6~ung gefiillt. Die Trichter fiihren
dutch je eine Gummiverbindung in je eine GlasrShre mit Glashahn, die
in ]=[5he des Mikroskoptisches an einem zweiten Stativ horizontal be-
festigt ~ind. Jede dieser RShren tr~g~ am anderen Ende einen etwa
3--6 cm langen Gummischlaueh, der in ein spitz ausgezogenes Glas-
rShrehen mfindet. Dessert Slaitze kann lest i n die Gummiverbindung
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 29

des Zuflul~rShrehens an der Kammer eingesehoben werden, wodureh


ein rasches Wechseln der LSsungen mSglieh wird. Die StrSmungs-
gesehwindigkeit wurde fOx e'me ganze Versuchsreihe dureh die Stellung
tier Trichterh~hne reguliert. Das Unterbrechen der StrSmung gesehah
dutch die H~hne an den GlasrShren. Die Schlauchstiicke zwisehen
diesen l~Shren und der Kammer ermSglichen ein leiehtes Wechseln der
LSsungen und Verschieben des Objekttisches.
Das Ffillen der Kammer gesehah meist dutch Etnsaugen des Materials
dutch die ZufluB6ffnung; nur wenn das Deckglas der Kammer abge-
hoben war, wurde letztere vereinzelt direkt gefiill$ und dann erst mit
dem Deckglas geschlossen. Die ]ertig gemachten Pr~parate wurclen aus
den gleiehen Griinden wie auf S. 26 erw~hnt, fox etwa eine Stunde im
feuchten Raum gehalten und kamen erst dann zur Verwendung. Zu
Beginn eines Versuehes wurde Ctets unter starker StrSmung Ar~ern-
wasser durch die Kammer geschiekt, um die lose sitzenden l~de~
wegzuspiilen. Noch w~hrend dieses DarehstrSmens der Kammer wurden
geeignete F~den im Mikroskop eingestellt und auf ihre Besehaffenheit
und Verhalten beobaehtet. Waren die F~den normal, d. h. waren keine
auffallenden kranken oder zerfallene Zellen an ihnen, so wurden sie
zur Un~ersuchung verwendet. Bei gutem ~aterial glfiekt es 5fret, die
Permeabilit~tszeit mehrerer F~den gleiehzeitig zu messen.
D~e LSsungen wurdea mSgliehst raseh, abet sehr vorsiehtig geweehselt,
wobei jede StrSmung abgestellt war. Erst nach dem Wechseln wurde
.die StrSmung wieder angestellt. Die durehsehnittliehe StrSmungsdauer
betrug, sofern ein Versueh nieht schon vorher beendet war, mindestens
1 x/~, meist sogar 2 Minuten. Damit ergab sieh volle Garantie, dab dis
erste LSsung vollst~ndig entfernt war. Denn aus Versuchen, Artern-
wasser, das ungef~hr einen Chloridgehalt yon 3 vH. hat, dutch destilliertes
Wasser zu verdr~ngen~ hatte sieh ergeben~ dal~ d~s auB der AbfluBrShre
tropfende Wasser bei nieht zu starker StrSmung - - etwa alle 2--3 Se-
kunden ein Tropfen - - sehon naeh 45 Sekunden fast kei~ne I~eak~ion
mit Silbernitrat mehr gab. Wenn man bedenkt, dab der gesamte Hohl-
raum der Kammer, also mit Zu- und AbfluBrohr in dieser Zeit fast"
ehloffrei war, daft das AbfluBrohr aber mindestens a/~ dieses gesamten
ttohlraums ausmacht, so muB die eigentliehe Kammer sp~testens im
Viertel dieser Zeit yon der neuen LSsung vollst~ndig durchspiilt sein,
also etwa in 10 Sekund~n. Da sieh abet zeigt, dab bei den Versuchen
mels~ sehon naeh 3--5 Sekunden die Sehrumpfung erfolg~, so wlrd das
Verdr&ngen der ersten LSsung in noeh koxzerer Zeit als 10 Sekunden
vor sieh gehen. Infolgedessen wurde als Beginn eines Versuehes stets
das Einsehalten der StrSmung angesehen, und zu diesem Zeitounkt
eine Stoppuhr eingesehaltet.
Ganz kurz sei hier sehliel~lieh noeh ein Wort fiber die Brauchbarkeit
30 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabiliti~t von

der Methodik und die Wahrung der Objektivit~t der Messungen gesagt :
Es gelang bei der Verwendung dieser Methode mi~ Hilfe der Permeabili-
t~tsmessungen auf einen bei der Herstellung der untersuchten L6sungen
gemachten kleinen Reehenfehler aufmerksam zu wcrden~ auch wurde
~nf eine zun~ehst iibersehene, schwache bacterielle Zersetzung bei einer
der untersuchten LSsungen durch eine derartige Permeabilit~tsbestim-
mung bemerkt. Dabei sei hier gleich bemerkt, dab die Untersuchungen
der organischen Stoffe, um ein Einwirken ~on Bacterien auszuschlieBen,
alle am Tage der Herstellung der Stamml6sungen vorgenommen wurden.
Um die Objektivit~t der Messungcn zu priifen, warden dem Versuchs-
anste]ler ( H o g r ~ N ) numerierte LSsungen unbekannter Konzentra-
tionen yon Stoffen, die teils schon untersuch~ waren, tei]s zum ersten
Male bestimmt wurden, gegeben, Bei den Wiederholungsver~uchen
ffihrten auch diese Bestimmungen stets zu den frfiher gefundenen
Resultaten.
C. P e r m e a b i l i t i t t s b e s t i m m u n g e n a n S a l z e n .
a) Lebende Fiiden.
In der Wahl der zu untersuchenden Salze war eine gewisse Be-
schr~nkung dutch das als LSsungsmitte] notwendig zu verwendende
Arternwasser geboten. So schieden non ~ornherein alle Sulfate aus, da
diese mit dem Ca-Ion des LSsungsmittels unlSsliche Niederschl~ge
bildeten, desgleichen alle Oxalate und Tartrate; ferner atle Barium-,
Calcium- und Strontiumsalze, da dicsc mit dem S04-Ion des Artern-
wassers reagierten,
&Is Beispiel sei bier der Kiir~e halbcr nut die Messung an einem Salze
(KCI) genauer ausgefiihrt. In der Tabelle 3 bedeutc~ ,,+ = Reaktion':
das Eintreten, ,,-- - P~eaktion" das Ausbleiben der Schrumpfung. Da
nun diejenige Konzentration als GrenzlSsung gelten soll, in der rnnd
Tabelle 3. KCI.
, ~o
Konzentration Anzahl der unter- = Reaktion --~ Reaktion
in G.M, s u c h t e n Fl!den

o2 14 100 vH. 0 vii.


o,,15 11 82 ,, 18 ,,
o,1 19 37 ,, 63 ,,
o,o5 18 6 ,~ 94 ~,

50 vii, der Fi~den die Schrumpfung zeigen, die anderen 50 vH. noch nicht
so ergibt sich, dal~ fiir KC1 die GrenzlSsung zwischen 0,1 G.M. und
0,15 G.I~L liegt, und zwar etwas nKhcr an 0,1 G.I~L heran. D a es bei
sehr s~ark permeierenden Stoffen - - wie .sic die Salze racist darstellen - -
die Schrumpfung in der 0,2 G.M. KCl-I~sung wurde durchschni$tlich
sehon in 20 Sekunden ausgeg!i'chen - - keinen Zweck haL, feiner ab-
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 31

gestufte L5sungen zu verwenden, so bleibt nur durch Interpolation die


Grenzl5sung noah etwas genauer zu bestimmen. Fiir KC1 wfirde sich
dann fund 0,12 G.M. als GrenzlSsung ergeben.
Auf gleiche Ar~ wurden noch einige andere Salze untersucht, deren
Grenzwerte in Tabelle 4 zusammengestellt sind.
Tabelle 4. Vergleicht man die Kon-
zentrationen der GrenzlSsun-
Konzentration der GrenzlSsung gen untereinander, so ist man
Salze in G.bL
fiberraschL wie au$erordent-
KCI 0,12 lieh versehieden sie sind.
NaCI 0,15 Wollte man daraus ffir die
NH4C1 0,175
MgCI~ 0,055 Faden den osmotischen (~ber-
KN03 0,25 druck fiber dem reinen Artern-
NaNOs 0,25 ~asser berechnen, so ki4me
NH4NOa 0,20
Mg(NO~h 0,095 man zu Resultaten, die mit-
KSCN 0,40 einander g~nzlich unverein-
K-Ar 0,035 bar w~ren. Ffir KNOa z.B.
K-Citrat O,OOO3 wfirde sich ohne Berficksieh-
tigung der den Knickungen vorhergehenden Volumabnahme der F~den
durch Contraction (S. 22) und, ohne Beriicksichtigung irgendwelcher
dutch das Arternwasser bedingter Dissoziationsanderung der Salz-
15sung ein osmotiseher Uberwert yon etwa 8,5 Atmospharen ergeben.
ffir Kaliumeitrat dagegen nut ein soleher yon 0,018 Atmosph~ren.
Es liegt auf der Hand, dab diese auBerordentliehen Differenzen in der
versehiedenen Permeabilit~t des Plasmas ffir die einzelnen Stoffe be-
grfindet sein mfissen.
Ordnet man nun die oben gefundenen Werte der K-Baize nach fal-
lenden Konzentrationen der GrenzlSsungen, so wie es in Tabelle 5 ge-
sehehen ist, so ergibt sich die bekannte lyotrope Reihe der Anionen.
Diese lyotrope Reihe lautet
Tabelle 5. (nach HOBER 1922):
SCN ~ J > Br > N03 > CIO~
Baize Grenzliisung in G.I~. > C] ~ Acetat ~ Citrat > Tar-
trat > S O ~
KSCN 0,40 ])as Verhalten der Kationen:
KN0z 0,'25
KCI 0,12 die sich nach der Hofmeister-
K-Acetat 0,035 schen Reihe wie folgt ordnen:
K-Oitrat 02O03
NH4> K>Na> Li> Mg>
Ca > Sr > Ba
zeigt sich dagegen, wie dies auch sonst h~ufig beobachtet ist, vielfach
dutch das zugehSrige A~fion beeinflu~t,
Die gleiehe Anordnung der Salze tritt nun aber auch bei den folgen-
den Permeabilitat.smessungen entgegen: Es~ wurden flit jede LBsung
32 W. Ruhland und C. Hoffmann: :Die Permeabilit~t yon

die Permeabilit~ten yon durehschnittlieh 15--20 F~den gemessen und


aus den dabei erhaltenen Ausgleiehszeiten die Durchschnittswerte be-
reehnet. Da sieh die zum Ausgleich der Sehrumpfungen n~iige Zeit
meist, bis auf 5--10 Sekunden genau feststellen l~l~t, sind die Zeitwerte
auf 5 Sekunden abgerundet. Die Resultate der Messungen an Salzen
sind in Tabelle 6 zusammengestell$:

Tabelle 6.
2, B~ 5. 6.
Konzentration Konzentration
Anza,h! der der plasmolyt. der Versuchs- Ausgleichs- I n einer Minute
Salze untexsuchten 16sungen in zeiten aufgenommen
Grenzl6sungen G.~L
F~de~ in G.M. G.M.

KN03 19 0,25 0,4 1r 45" 0,226


NaN0a 16 0,25 0,4 1r 40" 0,247
NI-I4N0~ 17 O,2 0,4 1r 30" 0,264
Mg(NOa), 22 0,095 0,4 4~25'r o,o91
KCI 21 0,12 0,4 3r 5" 0,13
NaC1 17 0,15 0,4 3' 50" o,104
1VfI4C1 14 0,175 O,4 3t -- o,181
~gC~ 13 0,055 0,4 16' 10" 0,025
K-Acetat 23 0,035 0,285 11' 35" 0,024

Vergleicht man die Werte in der Spalte 6 untereinander, so zeigt


sieh auch hier, dab die Nitrate viel leichSer permeieren als die Chloride,
fast doppel$ so leich$ und um ein Vielfaches leich~er als das Ace~at.
])as best~tig$ aber das mit den GrenzlSsungen gewonnene I~esultat,
dab die Durehtrittsgeschwindigkeit im Sinne der lyotropen Reihe
beeinfluBt ist, und darin liegt ein erneuter ttinweis daftir, dab die
auBerordentlich verschiedenen Grenzkonzentrationen dieser Salze tat-
si~ehlieh dutch die verschiedene Permeabiliti~t der F~den fiir ~ie bedingt
sind.
Ob bei den Versuche~ zu Beginn die Permeabilit~t grSi~er i.st als
am Ende oder w~hrend ihrer Dauer unver~nderlich gleieh bleibt, lieB
sich mit derartigen Versuehen nicht entseheiden, da ein br~uchbarer
Ma$stab fiir den jeweiligen Schrumpfungsgrad fehlt. Es liel~ sich
jedoch feststellen, daft mit steigendem Konzentrationsge[dlle die i~ der
,~eiteinheit aq~/qenommenan Salzmengen abnahmen. Das Permeieren
kann also nicht in e'mer einfachen Dio~mose bestehen. Fiir diese gilt
das Fieksehe Diffusionsgesetz, welches gerade umgekehrt besagt, dab
die Aufnahmegeschwindigkeit der Aul~enkonzentration proportional
geht. Dem widersl~rechen die Werte der Tabelle 7, welche fo]gender-
mafien gewonnen wurden: E~ wurden die Ausgleichszeiten yon neun
LSsungen einer Konzenr yon MgC12 gemessen und fiir jede
Konzentras die ill 1 ~inute aufgenommenen G.M. berechnet. Dabei
ergab sich:
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 33

Tabelle 7.
~~
G.~.-Gehalt Zahl der Ausgleichs- Gmmm-~olektile
der Aui3enlSsung Me~sungon zeiten

0,5 18 18' 30" ~0270


0,4 13 16' 10" 0,0247
0,3 19 11' 10" 0,0269
0,2 20 6' 10" 0,0324
0,1 14 2' 50" 0,0353
0,09 17 2' 40" 0,0342
0,08 20 1' 40" 0,0480
0,07 17 1' 5" 0,0656
0,06 19 1' 10" ~0533
Deutlich tritt hier mit steigendem Konzentrationsgef~Ue eine Ab-
nahme der in 1 Minute aufgenommenea Salzmengen hervor. Man wird
hieraus mit Wahrscheinlichkeit vermuten diirfen, dab auch zu
Beginn eines Versuches mehr G.M. permeieren als am Eade, obwohl
wie erw~hnt, mehrere sukzes~ive )~essungen an einem Objekt w&hrend
des Verlaufs eines einzigen Schrumpfungsausgleiches nicht durchfiihr-
bar sind. Die obigen Messungen zeigen abet fernerhin, dab man bei
Salzen die Bestimmung der Ausgleichszeiten bci angen~her~ ffleichen Kon-
zentrationsge/5llen vornehmen mul~, wenn die Resultate vergleichbar sein
sollen. Fiir die Werte in Tabelle 6 ist dies beriicksichtigt, mit Aus-
nahme der Bestimmung des Acetates,
Bei all diesen und auch ~p&t6ren Versuehen mit organischen Stoffen
wurde aueh ein eventueller EinfluB yon Lieht and Temperatur (TRSm)LE
1910, 1916/18, 1922) aUf die Pemeabilit&t im Auge behalten. Der Ein-
fluI~ der Temperatur wurde nut innerhalb der Grenzen untersucht: die
tat~cMichen Temperaturschwankungen bei den einzelnen Messungen
entsprachen, also etwa zwischen 15~ und 20 ~ C. Es zeigte sich dabei
jedoch kein Unterschied in den Ausg|eichszeiten. Auch ein EinfluB
des Lichtes auf die Permeabilit&t konnte bei B. mlrabilis nicht fest-
gestellt werden.
b) Tote Fiiden.
Es ist nun sehr bemerkenswert, dab es an unserem Objekt gelingt,
ganz a naloge GrenzlSsungsbestimmungen, wie am !ebenden Faden, auch
am abgetSteten Objekt auszuffihren. Die ~embranen der F~den sind
also semipermeabel. Solche semipermeable Zellh~ute sind yon A.
J. BROWN (1907, 1909), SC~R51)E~ (1910, 1911, 1922), REm~hRD (1910),
S~ULL (1913), RIPPEL (1918, 1919), COLLL~S(1918), P~AT (1923), CZAZA
(1922), an verschiedenen Objekten (Gramineen, Lcguminosen, Utrieu.
laria und anderen) 1) gefunden und naher v,~tersueh+ w~rden.

1) Hierhin diirften wohl auch die eigenar~igen Samenhaare der Loasaceen zu


rechnen sein. Vgl. RVHLAND, Ztschr~ ~, ~ :~IV (1922). S. 80.
Archiv f. wissenschaftl. Botanik Bd. t. 3
34 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

Die erhebliehe Bedeutung des Umstandes, dab aueh an den toten


F~den Schrumpfungserscheinungen aaftreten, erblicken wir darin, dab
wir dadurch in den Stand gesetzt waren, zugleieh aueh den Eir~flu~ der
Membran auf die Stoffaufnahme dureh die lebende Zelle zu unter~uchen
und wenigstens in ganz roher Ann~berung zahlenm~ig festzulegen, wie
es bisher noeh bei keinem anderen Objekte gegliickt ist.
Leider war es nieht m6glich~ hierzu nati~rlich abge.storbene F~den
zu verwenden, da die F~den naeh dem Absterben sehr rasch zerfallen
oder deformiert werden. Die F~den mu~ten daher ki~nstlich, und zwar
dureh schwaehes Flemmingsches Fixierung~gemisch, Jodd~mpfe, 80 proz.
Alkohol, 2 proz. Chroms~ure oder m~13ige I-Iitze abget6tet werden. Im
letztgenannten Falle wurden die F~den in einem Flfissigkeitstropfen auf
dem Objekttr~ger ffir kurze Zeit auf etwa 60 ~ nie aber his zur Siede-
hitze erw~rmt. Gerade bei diesem letzteren Verfahren, dem AbtSten
durch m~13ige Erwarmung, konnte man eine geringere Ver~nderung
der zarten Membran gegen den natfirliehen, lebenden Zustand erwarten
als bei den iibrigen Abt6tungsmitteln, welehe ~ie chemiseh oder physi-
kalisch wohl tiefgreifender beeinflussen werden.
Die ser Einflul3 des T6tungsmittels auf die Membrandurehl~ssigkeit
wurde an einigen Salzen geprfift und zeigte sich znm Tefl ~ ganz aul~er-
ordentlich groB. Indem wir der Kfirze halber auf eine tabellarische
Wiedergabe der Versuche verziehten, sei nur soviel erwahnt, dal~ die
nach den versehiedenen 1VIethoden mit demselben Salz erhaltenen Grenz-
werte im Extrem um fiber 300 vii. differierten. Dabei fielen in~besondere
die in Alkohol get6teten l~aden dureh hohe Grenzl6sungen au~, eine
Tatsaehe, die vielleieht in der h~rtenden Wirkung des Alkohols au/
Plasma und Membran (grS~ere meehanische Widerstandsfahigkeit gegen
die infolgedessen erst bei erh6htem Was serentzug eintretenden Ein-
kniekungen und Einkerbungen) ihre Ursaehe hat.
Ganz gut entsprechen den dureh Erw~rmung get6teten Zellen,
soweit die wenigen mit ihnen geglfickten Ver suehe ein Urtefl gestatten,
in ihrem Verha]terl bei der Grenzwertsbestimmung die im l~lemming-
sehen Gemiseh fixierten. Deshalb und weft weiter die ersteren nur in
besonderen Glficksf~llen sieh ffir unsere Zwecke verwendbar erwiesen,
insofern .sie aueh bei vorsichtiger W~rmezufuhr mei~st deformier~ wur-
den, die Querw~nde leieht verquollen u~w., wurden ~iir die weiteren
Bestimmungen am toten Objekt nur solehe F~den verwendet, die im
Flemmingschen Gemiseh get6tet waren, da hierbei meist tadellose F~den
erhalten wurden und nur selten kleine Deformationen auftraten. Gegen-
fiber den durch Erw~rmen get6teten F~den zeigen sie eine etwas gr61~ere
Durehl~ssigkeit.
Die abget6teten F~tden k6nnen entweder in destflliertes Wasser iiber-
geftihrt, und zur Bestimmung gleiehfalls LSsungen in Aqua destillata
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 35

verwendet werden, oder die F~den gelangen naeh dora AbtSten in


Arternwa~ser zurtick, wobei eine zun~chst auftretende Sehrumpfung
ausgeglichenwird, und die zu untersuchenden Stoife werden dann gleich-
falls in Arternwasser gel6st verwendet. EinUnterschiecl in der H6he der
GrenzlSsungen auI Grund dieser verschiedenen Methode ergab sieh nie.
Da man stets darauf gefaBt sein muB, dab tote F~den in den Strf-
mungskammern weggespiilt werden, muBte hier eine andere Ver~uehs-
art gesuch~ werden. Es wurde dafiir die yon SCH~rD (1923) fiir die
Plasmolyse yon Oscillarien gebrauchte, leider recht primitive,,Tropfen"-
methode I) benutzt. Die F~den wurden in einem m6glichst ldeinen
offenen Tropfen unter dem ~r beobaehtet und die Versuehs-
15sung aus einer kleinen Pipette rasch aufgetropft. Um bei dauernder
Beobachtung das Zufiihren der LSsungen zu erleiehtern, wurde mit
sehwachem Objektiv und m6glichs~ starkem Okular gearbeitet. Die
bei dieser ~Iethode auftretende Verdiinnung der LS~ungen lieB sich nicht
vermeiden. Sie wttrde aber dutch Auftropfen yon regelm~Big 3 Tropfen
LSsung m6gliehst konstant gehalten.
Diese an sieh welrig befriedigende Methodik lieB immerhin eine
leid!ieh sichere Be stimmung der Grenzwerte an toten F~den zu. Feinere
Kenzentrationsunterschiede, wie sie am lebenden Faden deutlieh meB-
bar sind, kSnnen hierbei Ireilieh nieht ebenso deutlich werden, zumal
da ein Ausgleich der eintretenden Sehrumpfungen an den toten F~den
meist sehr rasch erfolgt: Entsprechend der bei dem Auftropfen auftreten-
den Verdiinnung der untersuchten L6sungen um etwa x/a der Anfangs-
konzentration, wurden aueh die gefundenen Grenzwerte um 1/a redu-
ziert. In den Tabellen sind iiberall diese korrigierten Werte ~ngegeben.
Die Wahl der untersuehten SalzlSsungen an toten F~den war ganz
auf die Frage der Gfiltigkeit der lyotropen Reihen geriehtet. Fiir die
Anione~ wurden die in Tabelle 8 in fallender Reihenfolge ihrer Kon-
zentrationen geordneten Grenzwerte gefunden.
Tabelle 8. E~ Bind mit Au~nahme des
Rhodanids alles Na-Salze,
GrenzlSsung ~ GrenzlSsung flit
den toten Faden den lebenden d e r e n Anordnung der auf S. 31
in G.M. Faden in G.M.
zitierten lyotropen Reihe der
KSCN 0,9 0,4 Anionen entsprieht, nur die
NaBr 0,3 Stellung des S04-Ions ist ab-
NaNO~ 0,3 0,25
NaC1 0,15 0,15 weichend.
Na=SO~ 0,03 Interessant ist einVergleich
Na~S~Os 0,045
Na-Tartrat 0,0019 (Tab. 8) der Grenzwerte glei-
chef Salze ffir tote und lebende
x) SoE~u bestimmte die bei der Plasmolyse yon Oscillarien auftretende
L~ngscontraction der l~dcn, indem er die F~den im offenen Tropfen beob-
a~h~ete und das Plasmolytikum aus einer kleinen Pipette auftropfen lieB.
3*
36 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die PermeabilitEt yon

F~den. Es ist dabei besonders auff.~llig, dab fiir NaC1 beide Werte
zusammenfaUen, wenn man Iiir die toten F~clen den reduzierten Weft
nimmt. Es scheint also dem Plasma /i~r die Regulation der Au/nahme
dieses Salzes in den ]raglichen Konzentrationen, wenn is nur
ein ganz gering/is Anteil zuzu]commen. Dies gewinnt an Bedeutung,
w e ~ man beclenkt, daft Beggiatoa in einem Medium yon besonders
hohem NaC1-Gehalt lebt.
Die .Kationenwirl~ung wurde ffir die toten F~den auBer an den
AlkMisalzen auch noch an einigen ErdMkali- und Schwermetall~alzen
untersueht. Zur Verwenclung kamen fiberall Nitrate. Die Resultate
~incl in Tabe]le 9 wiecler nach abnehmendem Grenzwer~ geordnet.

Tabelle 9.
Gren~,16sung l~itrate Grenzl6sung
Nitrate in O.M. in G.M.

NH4 0,3 B& 0,071


Na 0,3 Ca o,o68
K 0,26 Co o,o68
Li 0,15 Pb o, o45
Mg 0,15 Cu o,oo68
Sr 0,075 A1 0,006

Fiir die Alkali- und Erdalkalisalze ist die Ubereinstimmung m i t der


Hofmeistersehen Kationenreihe unverkennbar (siehe S. 31). Die Zahl
der untersuchten Sehwermetallsalze ist jedoch zu klein, um auf irgend-
einen Zusammenhang mi~ Reihen schlieBen zu kSnnen, wie sie ~ieh in
der physikalisehen Chemie z. B. in der Abnahme des elektrolytischen
L6sungsdruekes aueh ffir diese Kationen finden.

e) Ergebnis.
Vergleich~ man nun die an lebenden wie aueh an toten F~den ge-
wonnenen Re~ultate mit, dem, was i n d e r Literatur fiber das Eindringen
der Salze in die Zellen anderer l~lanzen bekannt ist, so muB vor allem
auffallen, daft die lebenden ZeUen yon Beggiatoa iiir die Salze ganz
iiberrasehend stark permeabel sind. Trotz dieses sehr starken Gegen-
satze~ in quantitativer Hinsieh~ aber herrseht in qualitativer eine vSllige
~bereinstimmung, die sehr bemerkenswert ist. Ordnet man n~mlich
die Kationen bzw. Anionen der Salze entspreehend ihrer ~ h i g k e i t ,
zu permeieren, in steigender oder fallender Reihe, so fallen diese Reihen
mit Ionenreihen, wie sic in der Literatur fiber das Ei'ndringen yon
Salzen in gewSh~fliehe ZeUen wiederhol$ angegeben werden, v6Uig zu-
sammen. Da sich in einer Arbeit yon KA~HO (1924) eine Zu~ammen-
stellung der Literatur finder, welehe die Beeinflussung des Permeierens
der Salze im Sinne d e r lyotropen Reihen betrifft, sei hier yon einer
Beggia$oa mirabilis. Ein Bei~rag zur URrafiltertheorie des Plasmas. 37

Aufz~hlung dieser Arbeiten abgesehen. K ~ o kommt in dieser Arbeit


auf Grand eigener Versuche zu dem Resultat, daft ,,das Einclringen der
Neutralsalze in das Pflanzenplasma'" abh~ngig is~ ,,yon ihrem Verm6gen
den kolloidalen Zustand der Plasmaoberfl~chenkolloide zu veri~ndern,
wobei die Wirkung eines jeden Salzes sich additiv au~ den entgegen-
gesetzten Wirkungen seiner Ionen ergibt". Den Kationen wiirde dabei
eine entquellende Wirkung auf die Kolloicle des Plasmas zuzusehreiben
sein. die des sen Permeabilit~t fiir die Salze herabsetz~. Die se Wirkung
nimmt nach KAH~O ab naeh der Reihenfolge:
Ca ~ Ba ~ Mg ~ Li ~ Na ~ K ~ NH,.
Die Anionen wirken entgegengesetzt, al~o ,,peptisierend (16~end) auf
die Plasmakolloide", was zu einer Steigerung der Permeabiliti~ des
Plasmas fiihre. Diese Anionenwirkung nimmt ab in der Reihenfolge:
J ~ Br ~ NO~ ~ C1 ~ Tartrat ~ SO~.
Die Salzaufnahme wird Mso auf eine rein physikaliseh-ehemische
Wirkung der Salze auf die Plasmakolloide zuriickgeffihrt, und das
Gleiche wiirde auch fiir unser Objekt anzunehmen sein. Diese prinzi.
pielle ~]bereinstimmung des Beggiatoenplasmas mit dem gewShnlicher
P/lanzenzellen sei bier im Hinbliclc auf die allgemeinere Bedeutung unserer
weiter unten zu besprechenden Ergebnisse mit Nichtelelctrolyten besonders
hervorgehoben.
Eine solche rein physikalisch-ehemisehe Natur der Salzwirkung wird
auch dutch die Tatsache wahrscheinlich, dab as bei Beggiatoa gelingt,
analoge Permeabilit~tsverhi~ltnisse fiir Salze aueh an token Fi~den naeh-
zuweisen. Wi~hrend sich die yon BROWN und anderen untersuchten
semipermeablen Zellh~ute fiir Salze als mehr oder weniger impermeabel
erwiesen, die permeierenden Salze aber kein ausgepri~gtes Verhalten
ihrer Ionen etwa im Sinae lyotroper Reihen zeigten, ist hier die Membran
ganz im Sinne dieser geihen beeinflui~t. Von P ~ T (1923) wurde eine
i~hnliche Semipermeabiliti~t fiir die Zellw~nde yon Utricularia-Bl~ttern
beobaehtet, doch lassen die dort mitgeteil~en Versuehe nut den Schlui~
zu, da~ die Permeabilit~t der Zellwi~nde fiir einwertige Elemente ge-
ringer ist al~ fiir zweiwertige.
Aus dem gleichsinnigen Durchl~ssigkeitsverhalt.en lebender uncl toter
Zellen gegen Salze kSnnte man versueht sein, fiir die ganze ~Iembran
eine eiweii~haltige Zusammensetzung anzunehmen, da Polysaccharide
ein abweiehendes Quellungsverhalten zeigen (vgl. besonders WALTEI~
1923). Wir wiirden also auf die~em Wege zu Folgerungen gelangen, wie
sie ahnlich friiher (vgl. S. 18) aus ganz andersartigen Beobachtungen be-
ziiglieh der (pellieulaartigen) Iqatur der Innm~nembran gezogen wurden.
38 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

D. Permeabilitittsbestimmungen mit organischen Stoffen.


a) Lebende F~den.
Als viel in~eressanSer und bedeutungsvoller erwiesen sich nun die
diosmotisehen Verh~Itnisse hinsichtlich organischer Stoffe. Die Be-
s~immung der GrenzlSsungcn wie ~uch die Permeabilit~tsmessungen
wurden naeh der gleichen lVIethode wie bei den S~lzen vorgenommen.
Wie aus den weiter unten gegebenen Tabellen ersichtlich, ist der
Durchliissigkei~sgrad der Beg.q_iatoa-F~den je naeh der Natur der orga-
nischen Stoffe ganz auBerordentlich verschieden. ])as war yon OVEI~TO~
und anderen auch bereits an anderen Pflanzenzellen festgestellt worden.
Vergleieht man letztere mit den Beggiatoa-Faden daraufhin, so ~ l l t
vor allem auf, dab diese in weft hSherem Marie permeabel 8ind als
~ene. Dasselbe haben j~ bereits oben unsere lV[itteilungen fiber Salze
gezeigt.
])iese erstaunlieh hohe Durchli~ssigkeit erwies sich nun gerade bei
den organischen Stoffen als eine weitere fiir unsere Zweeke fiberaus
wertvolle Eigenschaf~ des Untersuchungsobjektes. Sie erstreekte sieh
vor allem auch auf eine ganze Reihe chemisch indi//erenter, phy~iologisch
wiehtiger Stoffe, wie z. B. der Kohlenhydrate und maneher anderen,
deren Importf~higkei~ in gewShnlichen Pfl~nzenzellen zu gering ist,
um lolasmolytisch gemessen werden zu kSnnen. Als nicht minder be-
deutungsvo]l erwies sich gerade ffir die Untersuchung der organischen
S$offe die bereits frfiher (vgI. S. 21) hervorgehobene besondere Eigen-
~iim]iehkeit der B. mirabilis, daft der o.smotische Weft ihrer Zelleu nur
aurierordsntlich knapp i~ber dem des Mediums liegt, so dai~ die als Kri-
terium ffir die Durchl~ssigkeit benutzte Erscheinung des ,,Kniekens"
bereits in ganz niedrigen Konzentrat,ionen der im Solwasser zu 15senden
S~offe hervorgerufen wird.
Dieser Umstand ermSglichte uns - - sofern die Durchl~ssigkeit keine
zu hohe war ~ eine Reihe besonders interessanter, 8chwach wasserlSs-
licher oder i~ hSheren Konzentrationen bereits schgdlich wir/~ender Stof/e
in den Bereich der Untersuchungen einzubeziehen, welche an anderen
Objekten entweder iiberhaupt nich~ oder doch nur nach besonderen,
einen Vergleieh mi~ den fibrigen Stoffen nicht zulassenden Methoden
(Fgrbungen und andere Speieherungen) geprfif~ werden konnt~n.
So war es denn auch mSglich, die Versuehe alle nach einer und def.
selben Mettwde ~nzustellen und iiberall zahlenndiriige Ergebni~se zu er-
halten, die einen unmittelbaren Vergleich fiber die Plasmadurchlgssig-
keit ffir ehemiseh sehr verschiedene Stoffe gestatteten.
Bei den weniger leiehr permeierenden Sr so z. B. bei :den
Kohlenhydraten, mehrwerCigen Alkoholen u sw. lieflen sich die Werte
mit bedeutend grSi3erer Schgrfe bestimmen als bei rascher permeieren-
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 39

den organischen Stoffen oder gar den Salzen, da hier selbst in den Grenz-
15sungen die Sehrumpfungen verh~ltnism~Big langsam ausgegliehen
werden, w~hrend dies bei so raseh permelerenden Stoffen wie Glykol,
Harnstoff usw. aug~nblicklich erfolg~.
Es erseheint wiehtig, hier hervorzuheben, dab ~hnlich wie dies
oben (S. 33) sehon fiir Salze naehgewiesen wurde, auch bei den orga-
nischen Stoffen mit zunehmender AuBenkonzentration eine Abnahme
der pro Zeiteinheit aufgenommenen Mengen erfolg~. Dies ]ehr~ z. B.
die Tabelle 10, we die Zahlen der Spalte 3 Mit~elwerf~ darsteUen, die
aus der zum Riickgang der Schrumpfung in den unter 2 mitgeteilten
Konzentratio~en notwendigen Zeib bereehnet wurden. Die Unter-
schiede aind sehr bedeutend.
Tabelle I0.
1. 2. 8,
Konzentxationder Die pro Minute auf-
Stoffe untersuchtenLSsung genommenenGramm-
in G.M. Molekiile
Rhamnoso a. 0,0006 a. 0,000171
b. O,OOO75 b. 0,000111
Arabinose 0,0015 a. 0,00030
b. 0,0025 b. 0,00020
Harnstoff a. 0,6 a. 0,420
b. 2,0 b. 0,279

Fiir organisehe Stoffe sind derartige Beobachtungen neul). Yon


anorganisehen Salzen wissen wir (vgl. z. B. YITTING 1915), dab ihre
Atffnahme mit der Zeit abnimmt, offenbar unter der Wirkung der Salze
selbst. Es ist sehr wahrscheinlich, dab die hSheren Konzentrationen
diese Erseheinung, el. h. die allm~hliehe Aufnahmeverringerung, im
Laufe eines Versuchs steigern, wenng]eich ein zeitlicher Veffolg des
Vorganges, etwa yon Minute zu iYlinute, bei unseren Versuchen nichs
mSglich war. Eine genaue Analyse derartiger Vorg~nge, z. B. gerade
fiir die Zuckerarten w~re hSchst wiinschenswert gewe~en. Sie lieB sieh
aber ohne weiteres nicht durchfiihren und wurde, als nicht zum engeren
Rahmen unserer Ziele gehSrig, beiseite gelassen.
Es w~re sieherlieh nieht gereehtfertigt, aus solehen Versuchen wie
den in Tabelle 10 zusammengestellten zu folgern, dal~ aZle Stoffe in
der gleichen Aul~enkonzentration zu verwenden seien. Denn abgesehen,

1) FITTING (1919) teilfl jedoch bereits mit, dab einige seiner Versuche mlt
Tradescan$~a d/see/or ,,vielleicht zugunsten der Annahme, dab die Glycerin.
li~sungen als solche die Permeabilit~it fiir Glycerin sehr sclmell herabsetzens
und zwar um so st~irker, je konzentriet~er sie sind", sprechen. Vg]. im iibrigen
die Zusammenfassung dieses Autors a. a. O., S, 167 f.
40 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilitit von

dab schon die LSslichkeitsverh~ltnisse, Giftwirkungen und die ~uBerst


verschiedene Permeierf~higkeit das unausfiihrbar machen, wiirde wohl
auch bei gleicher oder ann~hernd gleicher Konzentration eine sehr
verschieden weitgehende und spezifische Alterierung der Aufnahmc-
f~higkeit angesiehts der so weir dlfferenten ohemischon Natur der
einzelnen Stoffe anzunehmen sein. Wir haben die Vergleiehbarkeit auf
efnem anderen Wege zu erreichen gesucht, und die Eindeutigkeit der
Versuehsergebnisse scheint uns efn starkes Argument dafiir zu sein, dab
sie wenigstens in der Anniherung erreicht worden ist, auf die es uns bier
ankara, d. h. bis zum Hervortreten der grundlegenden GesetzHchkeit
des AufnahmevermSgens der Zellen. Diese erg~b sich, wie sogleich zu
zeigen sein wird, so klar, dab man viel eher in den yon ihr mehr oder
weniger abweichenden Einzelf~llen hior und da u. a. an solche st6renden
Konzentrationseinfltisse zu denken geneigt sein k6nnte.
Fine Reihe der Versuche (a) mit organischen Stoffen wurde so an-
gestellt, da~ diejenige Schrumpfung hervorrufende Konzentration be-
stimmt wurde, in welcher jene gerade nach 5 MJnuten ausgegHchen wurde.
Fiir das Auffinden dieser Konzentration geben bereits die Grenzl6mmgen
einen Anhaltspunkt, so daI3 es bei einer Anzahl Stoffe gliickte, sogleich
die richtige Konzentration zu treffen. Fiir die anderen Stoffe muBten
jeweils mehffache Ver~uche angestellt werden, und die fraglichen Kon-
zentrationen konnten schlieBlich durch Interpolation aus den Kon-
zentrationswerten zweier L6sungen errechnet werden, yon denen die
eine in etwas mehr, die andcre in etwas wenigcr als 51VIinuten permeicr~e.
Fiir einige wenige Stoffe, so z. B. fiir Raffinose war diese Bestimmung
nicht m6glich, da hler in der Grenzl6sung selbst sogar in mehr als
5 ~i'nuten noch kein Ausgleich erfolg~. DaB sie fiir Stoffe ullterbliebert
sind, die zu wenlg wasserlSslich waren, um m i t ihlaen Grenzkonzentra-
tionen zu bestimmen (z. B. Tyrosin, ameisensaures .ii,thyl und Isobutyl,
AceConitril, Butyro- und Valeronitril, Propylen- mid Butylenglykol,
Phlorrhizin, Acet- und Formanilid, Sulfonal, Saligenin, h6here ein-
wertige Alkohole usw.) oder, wie Thioharnstoff, Acet- und Propyl-
aldehyd, methyl- und ~thylacetat, Propionitril, Formamid, ein- und
mehrwertige Phenole, einwertige A3kohole der Fettreihe, Aldehyde,
Aceton usw. (mindestens in den n6tigen Konzentrationen) schidlich
oder stark gfftig wirkten, bedarf keiner weiteren Ausfiihrung. Letztere
Wirkung trat in schw~cherem l~IaBe auch bei einzelnen der unten ver-
wendeten Stoffe hervor und wurde immer hervorgehobenl), so dab
derartige Versuche dann nut einen sehr bedingten roh orientierenden
Wer~ haben. So sind 1?Ionoacetin und Propionamid in h6heren Kon-

l) In den Tabellen dadurch, dab die auf sie bezfiglichen Zahlen in


Klammern gesetzt wurden.
Beggiatoa mirabilis. E i n Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 41

zentrationen seh~dlich. Dies letztere gilt auch fiir die Urethane, die
abcr zum Tefl in den zur Bestbnmung der GrenzlSsungen ausreichenden
Konzentra~ionen noch verwendbar waren. In ~ h y l - und Propyl-
urethan waren z. B. die F~den bereits lange vor Ablauf der 5 M[nuten
abgestorben und defomiert. Mit l~Iethylurethan waren Messungen
zwar mSglieh. Diese zeigten abet sehr deutlich, dal~ die F~den gesch~digt
waren. Denn die in der Zeiteinheit aufgenommene Stoffmenge stieg
ganz auffallend mit steigender Aul]enkonzentration, w~hrend bei den
iibrigen Stoffen, wie erwi~hnt, das Umgekehrte der Fall war. Im Gegen-
satz dazu ergab sich z. B: bei den Messungen mit Methylurethan, dab
eine 0,1 G.l~I.-LSsung in 1'50" aufgenommen wurde, d. h. es permeieren
pro Minute 0,055 G.M. Eine 1 G.M.-IAisung permeier~e in 7'35"~ hier
wurde also pro Minute 0,13 G.M. aufgenommen, so dal~ also die Auf.
nahme des Stoffes etwa ann~hernd nach dem Ficksehen Diffusionsgesetz
erfolgt.
Die iibrigen unten angeffihrten organischen Stoffe iibten keinerlei
merldich schSdigenden Ein/lufl auf die F~den aus. Auch in den sehr
starken LSsungen der am rasehesten permeierenden und deshalb auf
ihre Sch~dlichkeit besonders sorgf~Rig zu priifenden Stoffe, wie z. B.
Glykol und Hamstoff blieben die F~den fast noch 3 Stunden beweg-
lich, in den viel schw~cheren ZuckerlSsungen sogar iiber 24 Stunden.
Die Versuchsresultate 5nderten sich auch nicht, wenn am gleiche~ Faden
eine Bestimmung wlederholt w,arde. Dies war sehr leicht mSglich, wie
schon bei den Salzen ausgefiihrt warde, tIierbei wurde auch einmal
der zu unter~uehende Stoff gewechselt. Zuerst wurde die Ausglcichs-
zeit flit Glycerin bestimmt und dann nach dem Auswaschen fiir Trauben-
zucker. Der flit letzteren gefundene Ausgleichswert entsprach vSllig
den iibrigen an nicht vorbehandeRen F~den bestimmten Werten.
~brigens gibt ]a neben anderen Beobachtungen (S. 24f.) auch die Tat-
sache, da~ mit steigendem Konzentrationsgef~lle die pro Minute auf-
genommenen Gramm-]~Iolekiile abnehmen, einen Hinweis darauf, dai~
eine Sch~digung der F~den wahrend des Versuches nieht stattge-
funden hat.
Bei der anderen - - unffallgreicheren ~ Versuchsreihe dienten die
gemessenen Grenzkonzentrationen selbst als Unterlage fiir die Berech-
nung der Permeabilit4Ct. Diese lYlethode (b) gestattete deshalb eine
welter reichende Anwendung, weft bier die die Benutzung der Methode a
einschri~nkenden Grenzen - - LSslichkeit und Sch~dlichkeit - - wegen der
in Frage kommenden niedrigeren Konzentrationen wesentlich erweitert
wurden. Diese Grenzkonzentrationen, in G.M. ausgedrtickt, fielen fiir
die verschie~lenen Stoffe ungcmein verschieder~ hoeh aus, und zwar
natiirlich um so hSher, je grSl3er die Zelldurchl~ssigkeit fiir sic war.
Diese Relation gilt in vollem MaBe, da die mehrfaeh hervorgehobenen
42 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabflit~t yon

weitgehenden Cautelen andere Beziehungen aussehliel]en. Es kommen


also, da, wie im Kapitel fiber die Methodik hervorgehoben, mit den
DurehstrSmungskammern weitgehend und gleichmii$ig raseh gearbeitet
werden konnte, in diesen Grenzkonzentrationen sozusagen ,,Momentan-
werte" der Permeabilit~t zum Ausdruck.
Fast gleichzeitig yon LEPESC~KI~ (1909) und TR(i~CDLE (1910) ist
bekanntlich schon vor li~ngerer Zeit aus derartigen Grenzkonzentrations-
bestimmungen an anderen Objekten nach bekannten physikalischen
Vorbildern ein Permeabilitatskoeffizient dutch Vergleiehung mit dem
theoretisch berechneten Grenzwer~ abgelei~et worden. Wir haben danaeh
e = c' (1--~u),
wo c" die faktiseh beobaehtete Gren~.konzentra~ion, c dieselbe im Falle
der Undurehl~ssigkeig des Plasmas ffir den Stoff und tt den Permeabili-
t~tsfaktor bedeutet, weleher der Permeabilit~t (seiner Diffusionskon.
stante beim MembrandurehSritt) proportional ist.
Die ]gethode ist yon FITTI~O (1915, 1916, 1919) einer ablehnenden
Kritik unt erzogen worden, mit der sieh T~6N])LE (1916, 1918 und' 1922)
und insbesondere vor kurzem LEPESCHKIN (1923) auseinander gese~zt
haben. Die physikalisch.chemischen Bedenken FrrTr~Gs scheinen uns
durch LEPESCItKIN hinreichend zerstreut zu sein. Sie spielen auch in
unserem Falle kaum eine RoUe, da es sieh bei B. mirabilis altgemein
um eine wei~ grSl]ere Permeabilitiit handelt als wir sie bei gewShnlichen
Pflanzenzellen ~inden, und auch die Unterschiede in bezug auf erstere
zwischen den einzelnen Stoffen sehr grol~ sind. Die Annahme, die der
Methode mangels genauer physikalisch-osmometrischer Bestimmungen
zugrunde liegt, dab n~mlich die osmotischen Drucke den Konzentrationen
proportional sind, diirfte ffir unsere physiologischen Zweeke und bei
organischen S~offen, wie wir sie verwandten, kaum Bedenken erwecken.
l~atfirlieh driickt, wie LEPESCHKrN (1923) betont, unsere Gleichung die
Abh~ngigkeit der Permeabilit~$ aueh deshalb nut angen~hert aus, weil
die Vorausse~zung, dab die Diffusionsgeschwindigkeit der theore~isehen,
isosmo$ischen Konzentration (d. h. eines praktisch nich~ permeierenden
Stoffes) der LSsung proportional ist, streng genommen nut ffir ver-
dfinn~e LSsungen gilL. Es wird also die Vergleichbarkei~ de~ mi~ hSheren
Konzentrationen ermittelten Permeabilit~tskoeffizienten (leichter per-
meierender Stoffe) ein wenig, abet ffir unsere speziellen physiologischen
Zwecke kaum merklich und keinesfalls grunds~tzlich ins Gewicht
fallend, gemindert (vgl. die Bemerkungen S. 51) --. Von den physio-
logischen Einw~nden FITTI~as, aui die bier der Kiirze halber im ein-
zelnen nich~ eingegangen werden soll, seheinen uns die wichtigsten
dutch die bereits erwahnte Feststellung, dal~ aueh bei Wiederholung
der Versuche, an den gleichen Fi~den die gleichen isosmotischen Kon-
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 43

zentrationen gemessen warden und wegen der sehr kurzen Dauer der
Versuche beseitigt zu sein. Im fibrigen diirften die erhaltenen Werte
beim ~2~berblick fiber das Ganze fiir sich ~elbst sprechen.
~ach diesen Vorbemer]rungen seien nun die Ergebnisse cler ersten
Versuche mit organischen Stoffen in der ~olgenden Tabelle 11 zu~
sammengestellt.
Tabelle 11.
t. 2. ~~ ~.
Grenzkonzentrationen (in G.M.) Durchschnitfl.
Stoffe Molekular- a. b~ Anstieg der Innen-
gewichte in Momentan- in 5-Minuten- konzentration pro
versuchen versuchen Minute in G.M.

Raffinose 594,4 0,00015


Saeeharose 342,1 0,00025 0,00033 0,000066
Rhamnose 182,1 O,OOO5O O,OO067 0,000134
Dulcit 182,1 O,OOO55 0,00075 o,00015
Mannit 182,1 O,OOO55 O,0OO75 O,00015
Mannose 180,1 O,OOO5O
Glucose 180,1 0,00055 O,OOO8 0,00016
Galactose 180,1 0,00050 O,OOO8 0,00016
Fructose 180,1 0~00050 O,OOO8 0,00016
Sorbose 180,1 0,00045 0,00075 O,OOO15
Arabinose 15o,1 0,00080 0,0015 O,0OO3
Erythrit 122,1 0,003 0,02 O,OO4
Monochlorhydrin 11o,5 0,02 O,O8 0,0.16
Pr opylurethan lO3,1 O,OO45
Glycerin 92,1 0,OO9 0,07 0,014
~thylurethan 89 1 (0,011
Dimethylharnstoff 88,1 0,O05 0,02 o,o04
Methylurethan 75,1 (0,O6) (0,6) (0,12)
Methylharnstoff 74,1 0,01 o,14 O,O28
Glycol 62 O,O9 0,5 0,1
Harnstoff 60,1 O,35 1,48 0,296
Spalte 1 enth~lt die Stoffe, mit denen diese ersten Messungen
angestellt worden waren. Sic sind naeh fallendem Molekulargewicht
geordnet. In Raffinose zeigt sieh aueh naeh l~ngerem Verweflen kein
Riickgang der Schrumpfung, fiir Mannose wurde nur die Grenzkon-
zentration festgesgellt, ein 5-Minutenversuch unterblieb. Letzteres eben-
falls mit Pr0pyl- und -i~thylurethan, in diesem Falle weft die dazu n6figen
L6sungen schon stark schik[igend wirkten. ])as zeigte sich auch schon
bei den schw~cheren L6sungen der ,,lVlomentanversuche" (Spalte 3), deren
Ergebnisse deshalb in Klammern gesetzt wurden.
Wie man sieht, springg fast iiberall in den Zahlen ein Anstieg der
Permeabilitat (steigende Werte der Grenzkonzentrationen in ~omentan-
und 5-Minute~versuchen, sowie der i~ 1 Minute aufgenommenen Stoff-
mengen) mit ]all~ndem Molekulargewicht ~ofort in die Augen, so dal~
mit steigendem ~olekulargewicht der Stoffe ihre Durchtrittsf~higkeit
abnimmt. Lassen wir hierbei die Urethane (etwa abge~ehen yore Propyl-
urethan) auBer Betracht, deren zu hohe Grenzkonzentrationen, wie
44 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~ yon

oben erw~hnt, auf einc pathologische Permeabflit~tserh6hung zuriick-


zufiihren i~t, so blcibt als bedeutende Ausnahme yon der Regel
vor allem das 21/onoch/orhydrin (Glycerinchlorwasserstoffester) bestehen,
bei dem die Grenzkonzentrationen fast das vierfache des nach dem
l~r zu erwartenden Wertes betragen, obwohl hier bei
den kurzen Versuchen eine Sch~digung wie bei den Urethanen nicht
im Spiele ist. Von dieser, wie wir sehen werden, nur scheinbar so groBen
Ausnahme und dem auch stark abweichenden Dimethylharnstoff wird
welter unten (S. 52, 56) noch die Rede sein.
Da eine allgemeine Diskussion der Yer~uch~ergebnisse einem be-
sonderen Kapitel vorbehalten bleiben ~o11,sei hier nur der weitere Gang
der Untersuchungen kurz be~prochen.
Die vSllige ~Ybereinstimmung diestr Re~ultate mit den Anschauungen,
welche der yon cinem yon un~ f-rfiher aufgestellten Ultrafiltertheorie
(RUHL~rD 1912 USW.) der Plasmahaut zugrunde lagen, war die Ver-
anla~sung, dab nunmehr noch weitere geeignete Stoffe in den Bereich
der Untersuchungen einbezogen wurden. Insbesondere war uns die
schSne Gesetzm~Bigkeit, mit der sich der der Kohlenhydrate in das
Schema der Ultrafilter~heorie einfiigten, bedeutungsvoll ersehienen.
Wir haben bier nicht nur eine in der Reihenfolge: Tri-, Di-, ~/Iono-
saccharide, sondern die Werte fiir die GrenzlSsungen (Tabelle 11, Spalte 3a
und die pro Minute erfolgenden .~xnstiege der Innenkonzentration
(Spalte 4) verhalten sich bier sogar ann~hernd umgekehrt proportional
dem Molekulargewicht der Sto//e, w~hrend yore l~olekulargewieh~ 180
an nach abw~rts, also mit steigender Permeierf~higkeit, die Verh~lt-
nisse der Grenzwerte viel rascher als diejenigen der l~olekulargewichte
zunehmen.
In der folgenden Tabelle 12 sind diese Verh~ltni~e aus den Wer~en
yon Tabelle 11 berechnet. Die Zahlen in Spal~e 2 bezeichnen das Ver-
h~ltnis Molekularvolumen Raffinose zum l~Iolekularvolumen der in
Spalte 1 angegebenen Stoffe. Spalte3 bringt die Verh~ltnisse der
,,Momentanwerte" der Grenzkonzentrationen derselben Stoffe zu dem
der Ra~no~e, w~hrend 4 und 5 den Spalten 2 und 3 korrespondieren,
und zwar die Verh~ltniswerte auf Saccharose start Raffinose bezogen.
Die letzte Spalte (6) endlich enth~lt das Verhaltnis der ,,Minutenwerte"
zu demjenigen yon Saccharose~).
Wit werden auf diese Verh~ltnisse in erweitertem Zusammenhange

1) Es f~llt auf, dal3 die in Spalte 6 berechneten Verhiiltniszahlen etwas h~her


liegen als die yon Relhe 4 und 5. Dies beruht wold darauf, dal~ der Wer~ flit
die pro Minute erfolgende Zunahme der Innenkonzen~ration fiir Saceharose
ein wenig zu niedrig gefunden ist. Dieser Weft wurde n~mlieh aus den Zeit-
werten, die sieh fiir IAisungen yon 0,0003 und 0,00035 G.M. ergaben, dutch Inter-
polation gefunden, womit die Annahme verbunden ist, dab in gleicher Zei~
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 45

nochmals slJ~ter (S. 49) zuriickzukommen haben. Hier wollen wit uns
noch einmal der Tabelle 11 zuwenden. In ihr f~llt auBer der bereits
oben als be sonders bedeutend (aber als nur scheinbar) bezeichneten
Ausnahme im Verhalten des Monochlorhydrins bei nRherem Zusehen
noch auf, dab der Dimethylharnstoff nach den auf ihn beziiglichen
Werten der Spalten 3 a und 4 eine zu geringe Permeierfi~higkeit (Glycerin
mit etwas hSherem Molekulargewicht permeiert rascher) zeigt und
ferner, dab Monomethylharnstofl insofem eine umgekehrte Ausnahme
TabeUe 12.
i. 3. 5. 6~

M.V. Raft. Gr.Lsg. 8toff M.V. Sacch. Gr.Lsg. Stoff Stoff:


stoffe M.V. Stoff M.V. Stoff Gr.I~g. Sacch. GM
8acch.

Raffinose
Saccharose 1,44 1,67 u
Rhamnose 3,33 2,0 2,03
Duleit 2,64 3,66 1,83 2,2 2,27
Mannit 3,66 2,2 2,27
Mannose 3,33 2,0
Glucose 3,66 2,2 2,42
Galactose 2,72 3,33 1,89 2,0 2,42
Fructose 3,3O 2,0 2,42
Sorbose 3,00 1,8 2,27
Arabinose 3,25 5,33 2,25 3,2 4,55
Erythrit 4,O9 20,33 2,65 12,o 00,60
Monoehlorhydrin 4,54 133,33 3,15 8o,o 242,42
Dimethylharnstoff 4,83 32,58 3,35 2o,0 60,60
Glycerin 5,68 60,00 3,98 36,0 202,12
Methylharnstoff 6,14 66,67 4,26 40,0 424,24
Glycol 8,05 600,00 5,28 360,0 1515,15
Harnstoff 8,43 2333,50 5,84 1400,0 4484,84
darstellt, als er in Spalte 3 a mit einem etwas hSheren Grenzwert a h das
niedriger molekulare Glycol erscheint, also demnach, wenigsten~ zu
Versuch~beglnn~ ein wenig rascher als dicses I)ermeiert als zu erwarten.
Sehen wir nun yore Monochlorhydrin und auch yon den wcgen ihrer
Sch'~Uichkeit unsicheren Urethanen (wenigstens dem ~Iethylurethan)
ab, so l~Bt sich die eben erw~hnte, auf die Harnstoffderivate beziigliche
Uns$1mmigbeit beseltigen, wenn man der Anordnung der Stoffe nicht
wie bisher geschehen, die Molekulargewlchte, sondem die Molekular-

gleich~ G.M. aufgenommen werden, Dies ist abet nun nicht nachgewiesen,
sondern es wird vermutlich ~hnllch wie yon anorganischen Salzen (S. 33) zu
An~ang mehr aufgenommen werden als am SclduB; es wird also wotfl tatsiicldich
dieser Weft etwas hSher als der berechnete anzusetzen sein. Die Werte flit
die Hexosen hin~egen werden genauer den wirklich aufgenommenen Gramm-
Molekiilmengen entsprechen, da es bier gegliickt war, die richtige Konzentration
yon vornherein zu treffen und eine Interpolation deshalb wegfiel.
46 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

votumina zugrunde leg~, die hiernach allerdings nur ffir die Stoffe mit
kleineren Molekfilen eine bedeu~same )i.nderung erfi~hrt, ffir die mit
hSherem aber gleich ausf~lR.
Fiir die lJltrafiltertheorie mfissen natfirlich rein r~umliehe Verhalt-
nisse ausschlaggebend sein. Sofern sie also nieht nur ffir Kolloide,
sonclern auch ffir molekular gelSste Stoffe gtiltig is~, werden nicht so
sehr die Molekulargewichte (iff.G.), sondern vielmehr die Molekular-
volumina (~.V.) fiber die F~higkeit einzudringen und die Geschwindig-
keit des Eindringens in die Zelle entseheiden mfissen. Ffir das M.V.
(spezif. Vol. • Molekulargewicht) lehrt bekann~lich die alte Koppsche
Regel, dab es ~ich aus der Summe der Atomvolumina und bestimmter
Addenden ffir doppelte Binclungen usw. additiv berechnen li~Bt. Die
beim Siedepunk~ der verschieclensten flfissigen organischen Verbin-
bbadungen tats~chlich ermi~elten Molekularvolumina stimmen so gut
zur Koppsehen Regel, dal~ ffir die Anwendung derselben auf die iibrigen
Fi~lle, wo eine solehe Bestimmung niCht mSglich ist, kein Bedr
bestehr Es spricht also vieles daffir, dal3 die wirkliche Gr6Be der Mole-
kfile unserer Stoffe der ffir sie nach KoPP erreehneten sehr nahe liegt.
DaB Polymerisationen und ttydratationen, die auf die Permeierf~hig-
keit natfirlieh yon Ein/luB seirl mfil]~en, und in der Berechnung auf
Grtmd der Molekularformen natfirlich nicht, zum Ausdruck ki~men, bei
den bier untersuch~en Stoffen nicht anzunehmen sind, wurde aus der fiber-
rasehencl sehSnen ~bereinstimmung der in den Versuchen an Beggia$oa
gefundenen Werte mit der Ultrafilter~heorie gesehlossen. Die Bereeh-
hung des I~.V. erfolgte meis~ nach der Koppsehen Formel, wir sie sich
bei NERNST (1921) vorfinde~. Bevor wir nun die naeh dem M.V.
der erweiterten Reihe der organischen Versuehsstoffe geordne~en Er-
gebnisse tabellarisch vorlegen, dfirfte es angezeigt sein, mit einigen
Worten auf das Verhalten yon Farbstof/en und Alkaloiden einzugehen,
die das Verst~ndnis der Versuehsergebnisse un4 ihre Auswahl ffir die
Gesamttabellen erleichtern werden.
ES hasten ~a~mlieh bisher zu den Permeabilit~tsmessungen als Bei-
spiele ffir Stoffe mi~ gr6Berem M.G. nur Kohlenhydrate gedien~ oder
entsprechende Alkohole. Es erhob sich daher die Frage, ob nieh~ etwa
die oben dargestellte Gesetzmi~i~igkeit nur eine besondere Eigensehaft
dieser Gruppe sei. Daher wurde noch die Durehtrittsf~higkeit einiger
anderer hoehmolekularer Stoffe untermleht, und zwar kamen zuni~ehst
nur eine Anzahl Farbstoffe und einige Alkaloide zur Verwendtmg,
Die geprfiften Farbstoffe waren folgende:
a) basisch.
Chrysoidin, Cbxysoidin R, Viktoriablau R, Nachtblau, Viktoriablau 4 R,
Viktoriablau B, Rhodamin G, Prune pure, Neublau R, Genti~nin, Methylenblt~u,
Thioninblau, Neutralrot, Basler Blau, Ketonblau 4 B N.
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 47

b) 8auero
Echtsulfonschwarz, Diaminreinblau, Erioglauein, Cyanol extra, Rotviolet~
5 RS, S~ureviolett 6 B, Eryoeyanin A, Anilinblau, Rose bengale, Dinitroanthra-
chrysondisulfos~ure.
Die saure~ Farbstoffe, welche natiirlich wie alle Versuchsstoffe im natiir-
lichen Solwasser der Arternsaline gel6st dargeboten werden muBten, warden,
wie zu erwarten war, als elektronegatlv dutch die in jenem reiehlieh enthaltenen
Kationen zum groi3en Tell gleich oder allm~hlieh ausgefloekt, obwohl weniger
elektroly~empfindliche Stoffe vonvornherein daftir ausgew~hlt worden waren.
Infolge der damlt verbundenen unkontrolllerbaren Konzentrationsabnahme
waren sie fiir unsere Zwecke nieht verwendbar. Aueh als 0,1proz. Farbstoff-
15sungen in destilliertem Wasser hergestellt und davon 0,5 ecru zur 15 ccm des
Solwassers zugesetzt wurden, flockten einige Farbstoffe noeh stark aus. Da
ferner vielfach Gi/twirkungen (insbesondere bei dem photodynamisch wirkenden
Rose bengale, in welehem die F~den schon naeh 3--4 Minuten bewegungslos
warden und alsbald Zerfallserseheinungen zeigten) hervortraten, wurden die
Versuche mit diesen Stoffen aufgegeben.
Die basischen Farbstoife sind bekanntlieh im allgemeinen noch giftiger als
die sauren, insbesondere wirkten Viktoriablau B, 1%ublau R und Gentianin
sehr giftig. Die l~den begannen in den 0,1proz. LSsungen schon nach etwa
15 Minuten abzusterben. In den anderen LSsungen blieben die F~den etwa
4 Stunden beweglich und starben dann raseh ab. Nut in den LSsungen yon
Chrysoidin, Chrysoidin R, Basler Blau und Naehtblau hielten sie sieh l~nger,
in den beiden Chrysoidinen etwa 8, in den beiden letztgenannten bis zu 17 Stun-
den. Speieherungen in den Vacuolen traten ebensowenig wie mit sauren Farb-
stoffen in Erscheinung, was zur Frage des Eindringens oder Nichteindringens
bekanntlich gar nichts besagt. Zu Grenzkonzentrationsbestimmungen liel~en
sieh Basler Blau und Nachtblau wegen partieller Ausfloekung nieht verwenden,
in beiden Chrysoidinen wurden dagegen sehr sehSne vitale Plasmaf~rbungen
erzielt, wie sie der eine yon uns (RUHLAND1912, vgL aucli R. Scm~D~. 1923)
mit Chrysoidin an Epidermiszellen der Zwiebelsehuppen yon A tlium cepa und
anderen lebenden Objekten ztlers~ bekommen hat~e. Da die Molekulargewichte
yon Chrysoidin 268,5, yon Chrysoidin R 276,5 betrugen, steht das Eindringen
der Farbstoffe in die F~den mit den oben behandelten anderweitigen Resultaten
im Einklang.
Nach langwierigem Herumprobieren gelang es endlich, einen basischen
Triphenylmethan/arbstoff ausfindig zu machen, das Ketonblau 4 B N
(Pulver), der nach unseren Erfahrungen als einer der unsch~dlichsten
basischen Farbstoffe zu bezeichnen ist und welches die Feststellung der
Grenzkonzentration ermSglichte. Man finder den Stoff in den folgenden
Tabel]en deshalb mit aufgefiihrt. Auf die theoretische Bedeutung dieser
Versuche mit Ketonblau soll sparer (S. 70) eingegangen werden.
Unter den Alkaloide• sind viele zu wenig 15slich oder wirken auch
giftig. Es wurden schliel~lich nur wenige dieser Stoffe zu Versuchen
herangezogen, bei denen Grenzpunkt.sbestimmungen sich mit aller
wtinschenswerten Seh~rfe ausfiihren lieBen. Verwandt wurden iiberall
die Hydrochloride der Basen, und zwar yon Veratrin wegen seines
iiberaus hohen, yon Coniin wegen seines relativ niedrigen M.G. (M.V.) ;
Cocain erschien wegen seiner kleinen Affinit~tskonstante und des
48 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

eventuellen Einflusses der hydrolytischen Dissoziation ( R U H L A N D 1914)


interessanL wi~hrend die Untersuchung yon Morphin, Codein und
Thebain wegen ihrer ehemisehen Konstitution, welche OVERTON zur
Erld~rung des diosmotischen Verhaltens herangezogen hatte, erwfinscht
ersehien: ~orphin hat 2 alkoholische OH-Gruppen im lY/olekiil, yon
denen im Codein eine dutch eine Methoxylgruppe ersetzt ist, wi~hrend
dies beim Thebain yon beiden gilt.

Tabelle 13.
1. B. 4. 5.
Konzentration Verh~ltnis d. ~r der
MoL-Vol. I ~Iol-Gow. GrenzkonzentL
Alkaloide d. Grenz- M.V. zu den zur Grenzl6sg.
dot Hydrochloride 16sungen yon Raffinose yon Raf[inose

Veratrin 723,5 627,9 0,0O015


Thebain 382,1 347,7 0,000225 1.31 1,50
Cocain 372,3 339,8 0,000225 1,34 1,50
Codein 365,6 353,7 O,OOO25 1.37 1,66
Morphin 349,1 339,7 0,00025 1,43 1,66
Coniin 211,3 163,6 0,00045 2,37 3,00
Man sieht (Tabelle 13), dab sich auch bei den Alkaloiden die Zahlen
der gleiehen Gesetzm~Bigkeit fiigen. (Ferner sehen wir aueh hier in
ganz roher Anni~herung die Grenzkonzentrntionen sich etwn um-
gekehrt proportional zu den M.V. der Stoffe verhalten. [Spalte 4
und 5.])
Einen Anhaltspunkt daffir, da$ die hydroly~isehe Sp~ltung der SMze
einen EinfluB auf die Durehtrittsf~higkeit dieser Salze ausfibt, finder
sich nicht. Die Konzentrationen der GrenzlSsungen liegen vielmehr so,
wie sie aus den vorhin aufgestellten Beziehungen zu den Molekular-
volumina zu erwarten waren.
Sehr interessant ist, dab fiir das diosmotisehe Verhalten yon Thebain,
Cocain, Codein und Morphin nicht das M.G., sondern das M.V. aus-
schlaggebend ist (Tabelle 13).
Auf das Thebain, Codein und Morphin wird im allgemeinen Kapitel
zuriiekzukommen sein, wie auch das ganze diosmotisehe Verhalten der
Alkaloide mit Rfieksieh* auf unsere Ergebnisse dort noehmals zusammen-
fassend kurz zu diskutieren sein wird. Die nach dem Verhalten des
Veratrins nahe liegende Vermutung, dab Stoffe mit h6herem oder i~hn-
lichem M.G. (M.V.) als Raffinose unabh~ngig yon ihrer ehemisehen
Natur fiir unsere Methode nicht mehr metbar d. h. also nur noeh sehr
langsam permeieren, land in der sp~teren Untersuchung des Amygdalins
und des Ketonblaus ihre BestAtigung.
Wit gehen nunmehr zu einer tabellarischen ~bersieht (14) fiber die
mit organischen Stoffen der verschiedensten Art an ]ebenden Faden
ausgefiihrten Messungen fiber.
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des tOlasmas. 49

Tabelle 14.1)

t. 2. 3,
stoff Mol.-Vol. Mol.-Gew. Grenzkonz.
a
~a

1. Veratrin . . . . . . . . 723,5 627,9 0,00015 0


2. Ketonblau . . . . . . . 577~8 507,0 0,00015 0
3. Raffinose . . . . . . . . 498,8 594,4 0,00015 0
4. Amygdalin . . . . . . . 461,3 457,2 0,00015 0
5. Thebain . . . . . . . . 382,1 34%7 0,00023 0,33
6. Cocain . . . . . . . . . 372,3 339,8 0,00023 0,33
7. Codein . . . . . . . . . 365,6 353,7 0,00025 0,40
8. blorphin . . . . . . . . 349,1 339,7 0,00025 0,40
9. Saccharose . . . . . . . 345,6 342,1 0,00025 0,40
10. Salicin . . . . . . . . . 296,0 286,2 0,00035 0,57
11. A~tipyrin . . . . . . . 213,2 188,2 0,0025 0,94
12. Coniin . . . . . . . . . 211,3 163,6 o,ooo45 0,67
13. Rhamnose . . . . . . . 189,2 182,1 0,0005 0,70
14. Mannit . . . . . . . . . 189,2 182,1 0,00055 0,73
15. Dulei~ . . . . . . . . . 189,2 182,1 0,00055 0,73
16. Mannose . . . . . . . . 183,2 180,1 0,00050 0,70
17, Glucose . . . . . . . . i83,2 18o,1 0,00055 0,73
18. Galactose . . . . . . . 183,2 180,1 0,00050 0,70
19. Fructose . . . . . . . . 183,2 180,1 0,00050 0,70
20. Sorbose . . . . . . . . 183,2 180,1 0,00045 0,67
21. Inosit . . . . . . . . . 173,2 180,1 0,00045 0,67
22. Paraldehyd . . . . . . . 169,5 132,2 [0,0085] [0,992]
23. Leucin . . . . . . . . . 164,5 131,2 0,00025 0,40
24. Arabit . . . . . . . . . 160,0 152~1 0,00080 0,81
25. Adonit . . . . . . . . . 160,0 152,1 0,00085 0,82
26. Arabinose . . . . . . . 153,4 150,1 0,00080 0,81
27. Mono-Acetin . . . . . . 145,6 134,1 [0,002] [0,93]
28. Asparagin . . . . . . . 134,2 132,2 0,00085 0,82
29. Erythrit . . . . . . . . 130,2 122,1 o,ooi 0,85
30. Aspaxagins~ure . . . . . 129,5 133,1
931. Orcin . . . . . . . . . 128,8 129,1 0,0035 0,957
32. Phloroghcin . . . . . . 122,4 90,1 0,0045 0,967
33. Propylurethan . . . . . 120,5 103,1 0,0045
34. Methyllactat . . . . . . 0,967
115,8 104,1 0,0040 0,963
35. Resorein . . . . . . . . 114,6 110,1 o,0o45 0,967
36. Anilin . . . . . . . . . 111,5 93,1 0,004
37. Monochlorhydrin . . . . .
0,963
109,9 110,5 0,02 0,993
38.Dimethylharnstoff a s . . . 103,2 88,1 0,0050 0,970
,, sym.. . 103,2 88,1 0,0045 0,967
39. Succinimid . . . . . . . 102,9 99,1 o,005o
40. Alanin . . . . . . . . . 0,970
98,5 89,1 0,0015 0,90
41. -~thylurethan . . . . . . 98,5 89,1 [0,01]
42. Methylal . . . . . . . . [0,985]
97,0 76,1 0,009 0,983
43. Furfurol . . . . . . . . 97,0 96,0 0,009
44. Prupionamid . . . . . . 0,983
90,7 73,1 0,01 0,985
45. Glycerin . . . . . . . . 87,8 92,1 0,009
46. Methylharnstoff 0,983
81,2 74,1 0,0I 0,985
47. Glycocoll . . . . . . . . 76,5 75,1 0,002
48. Methylurethan . . . . . 0,925
76,5 75,1 0,06 0,998
49. Acetamid . . . . . . . . 68,7 59,1 [0,225] [o,9993]
50. Glycol . . . . . . . . . 65,5 62,0 0,09 0,998
51. Harnstoff . . . . . . . . 59,2 6o,1 0,35 0;9996
~) Yon Nr. 1, 5 - - 8 und 12 warden die Hydrochlorido untersucht. Die mit
mehr oder weniger schildlich wirkenden Stoffen erhaltenen (zu hohen)Zahlen
sind in eckige K l a m m e r n gesetzt.
Archly f. wissenschaftl. Botanik Bd. t. 4
50 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabili~t yon

TabelIe 15.
1. 4.
Grenzkcnz. 5. Eg ;er me-
b ' ieren pro
Stoff 31..Vol. d.-Gew. ~b I Minute
(in G.M.)
I (in G.M.)

1. Veratrin . . . . . . 723,5 627,9


2. Ketonblau . . . . . 577,8 507,0
3. Raffinose . . . . . 198,8 594,4
4. Amygdalin . . . . . ~61,3 457,2
5. Thebain . . . . . . 382,1 347,7
6. Cocain . . . . . . . 372,3 339,8
7. Codein . . . . . . . 365,6 353,7
8. Morphin . . . . . . 349,t 339,7
9. Saccharose . . . . . 345,6 342,1 0,00033 0,55 0,000066
10. Salicin . . . . . . . 296,0 286,2
11. Antipyrin . . . . . 213,2 188,2
12. Coniin . . . . . . . 211,3 163,6
13. Rhamnose . . . . . 189,2 182,1 0,0006~ 0,78 O,0O0134
14. Mannit . . . . . . . 189,2 182,1 0,0007! 0,80 0,000150
15. Dulcit . . . . . . . 189,2 182,1 0,0007~ 0,80 0,000150
16. Mannose . . . . . . 183,2 180,1
17. Glucose . . . . . . 183,2 180,1 0,00081 0,8- [0,0 i60
18.
19.
Galactose . . . . . .
:Fructose . . . . . .
183,2
183,2
180,1
180,1
0,0008q
0,00081
0,81
0,81
10,000160
0,000160
20. Sorbose . . . . . . 183,2 180,1 0,0007~ 0,80 0,O00150
21. Inosit . . . . . . . 173,2 180,1 0,0007~ 0,79 i 0,000140
22. Paraldehyd . . . . . 169,5 132,2

0,8 iIo,0,0ooo%o
23. Leucin . . . . . . . 164,5 131,2 O,O005t
24.
25.
Arabit . . . . . . .
Adoni~ . . . . . . .
160,0
160,0
152,1
152,1
0,0012 24
26. Arabinose . . . . . 153,4 i50,1 0,0015 0,90 1 0,00030
27. Monoaoetin . . . . 145,6 134,1 [0,02] [0,9925] [0,004]
28. Asparagin . . . . . 134,2 132,2 0,002 0,925 ~0,0004
29. Ery~hrit . . . . . . 130,2 122,1 0,02 0,993
30. Asparaginsgure . . . 129;5 133,1 _ l ~176176
31. Orcin . . . . . . . . 128,8 129,1
32.
33.
Phloroglucin . . . .
Propylurethan . . ,
122,4
120,5
90,1
103,1
0,033 o, 55 o,oo6-6
34. Methyllaktat . . . . 115,8 104,1
35. Resorcin . . . . . . 114,6 110~1
36. Anilin . . . . . . . 111,5 93,1
37. Monochlorhydrin. . . 109,9 110,5 o,os o f 98 o,
38. Dimethylharnst. a s . . 103,2 88,1 0,02( 0,9925 0,004
,, sym.. 103,2 88,1 0,02~ 0,9935 0,0046
39. Succinimid . . . . . 102,9 99,1 0,05~ 0,9973 0,01]
40. A l a n i n . . . . . . . 98,5 89,1 0,00, 0,970 0;001
41. A~hylurethan . . . . 98,5 89,1
42. Methylal . . . . . . 97,0 76,1
43. Furfurol . . . . . . 97,O 96,0
44. Propionamid . . . . 9O,7 73;1 [0,~" [0,~96] [0,074
~-]
45. Glycerin . . . . . . 87,8 92,1 0,07 0,998 0,014
46. M e t h y l h a r n s t o t f . . . 81,2 74,1 0,14 0,999 0,028
47. Glycocoll . . . . . . 76,5 75,1 0,01 0,985 0,002
48. Mcthylurethan . . . . 76,5 75,1 [o,6o: [0,9997] [0,12]
49. Acetamid . . . . . . 68,7 59,1 [1,0] [0,9999] [0,2]
50. Glycol . . . . . . . 65,5 62,0 0,50 0,9997 0,10
51. Harnstoff . . . . . . 59,2 60,1 1,48 0,9999 0:,296
Beggiatoa mirabilis, Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 51

In der Tabelle 14 bedeutct ,,Grcnzkonz. a" bzw./x~ die betreffenden


Werte ~us ,,Momentanversuchen" (S. 42), in Tabelle 15 ,,Grenzkonz. b"
bzw./zb diehelben fiir 5-Minutenversuche.
Diese Werte fiir Ha bzw. /2b aber hind die ]~r die Ultra]iltertheorie
en~cher d~ nur hie, nicht abet die Grenzkonzentrationen (S. 22)
der Durchl~ssigkeit proportional hind. Fiir diese Permeabitit~thkoeffi-
zienten ergibt sich aus der Formel S. 42
0
,u = 1 - - C ~
wo C den mit t~ffinose oder Stoffen hSherenMolekulargewiehts (-volums)
ermittelten Grenzkonzentrationswert, C' denselben fiir den ieweiligen
Stoff bedeutet (Spalte 4).
C
Mit kleiner werdendem Wert ffir ~-; n~hert sich # dem Grenzfall der

]reien DiMusion , welche fiir jeden Stoff gleich 1 gehetzt wird. Die Werte
fiir # sind nicht nut der Permeabilit~t, sondern auch den Diffusions-
konst~nten (fiir die Diffusion durch das Plasma) proportional. Man
findet in den physik~lisch-chemihchen Handbfichern racist den Hinweis
d~rauf, d~l~ die Diffusionskonstanten (fiir freie Diffusion) bei hSheren
Konzentrationen sich im allgemeinen mehr oder minder andern (z. B.
NE~ST 1921). Bei den niedrigen Konzentrationen, mit denen unsere
Messungen erfolgten, wird dies also keine Rolle spielen. Nur da, wo jene
hSher werden, also fiir die Eadglieder unserer Tabelle (z. B. Tabelle 14
bis 17) kSnnte dies der F~ll hein. Unterlagen dafiir haben wlr abet nicht
gefunden. Fiir Glycerin nnd Harnstoff z. B., die zu diesen Stoffen ge-
hSren, zeigen die Tabellen yon LAN])OLT-BSRNST~I~(1923, Band I, S. 68)
sogar, dal~ die Diffusionskonstanten bis zu 1,75 G.M. hin~uf, ~lho bis
zu weir hSheren Konzentrationen als wit sie verwandt haben, gleich
bleiben, wenn wir yon einer auff~lligen, und mit yon anderer Seite an-
gestellten Messungen unvereinb~ren Ang~be yon THOVERTfiir 0,25 proz.
Glycerin absehen.
Ein Vergleich der Spalten 2 und 5 zeigt die sch6ne Obereinstimmung
mit den Voraussetzungen der Ultra]iltertheorie, wobei die sehr verschiedene
chemische Konstitution der Sto//e keine Roltc 8pielt.
Man sieht ferner, dal~ die Perme~bilit~ttskoeffizienten yon Cocaln,
Codein, Coniin, Inosit, Phloroglucin, Propylurethan, Anilin, Methylal,
Propionamid, Glycerin und Monomethylharnsto// besser zum Molekular-
volum als zum Molekulargewicht stimmen (Tab. 14, 15), daft also mit
andern Worten die ritumlichen VerhSltnissctatsSchlich ausschlaggebendsind.
Bei den Isomeren haben die molekul~ren Besonderheiten fiir die
Permeabiliti~t keinen oder keinen erheblichen Einflui~ auf die Perme-
abiliti~t. Die Ketohexose Sorbose permeiert allerdings etwas schwerer
4*
52 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die PermeabiNt~t yon

als die stereoisomere Fructose, diese stimmt aber wieder mit den Aldosen
fiberein. Ferner verh~lt sich Inosit mit der isomeren Sorbose fiberein-
stimmend. Es f~llt auch auf, dab der asymmetrische Dimethylharn~to/]
sowohl in lebende (Tabelle 14) wie in tote Zellen (Tabelle 17) etwas
schwerer eindringt als der symmetrische. Die Verschiedenheiten sind
aber so gering, dab man wohI sagen daft, dab die r~umliehen Besonder-
heiten der gclSsten Molekfile deren Gcsamtform (z. B. Kugel) nicht
wesentlich modifizieren dfirften.
Beim ~berblicken der Tabel]en machen sieh nun aber doch einige,
zum Teil nut scheinbare, zum Teil aber wirkliche Abweichungen (kursiv
gedruckt) yon der allgemeinen Regel bemerkbar, fiber welehe in der
allgemeinen Diskussion (S. 56) mehr zu sagen sein wird.

b. Tote Fdden.
Ehe wir zu dieser fibergehen, wollen wir noch das Verhalten toter
Fgden prfifen. Die Methoclik des Arbeitens mit solchen wurde bereits
fr'tther (vgl. S. 33) bei Gelegenheit der Versuche mit anorgani.schen
Salzen besprochen. Auch die geeignetste AbtStungsart wurde bei dieser
Gelegenheit besprochen. Die Messungen fiber die Aufnahme organischer
Verbindungen in tote F~den sind in der gleichen Weise angestellt worden.
Die besondere Art der AbtStung der F~den beeinfluBte die Permeabiliti~t
ffir organische Stoffe weniger als es seinerzeit ffir anorganische Salze
fe.stgestellt wurde. Dies ergibt sich aus einigen in Tabelle 16 zusammen-
gestellten vergleichenden Messungen. (Zahlen in GNL)
Tabelle 16.
F~lden abgetbtet dutch
J[. 3. 8. ~~ 6.
Chroms~iure
Stoff :Flemming W~rme Alkohol 2 vH.

Saooharoso 0,000680 O,OOO6 0,0013 0,000680


Glucose 0,00075 0,00064 0,0015 ~00075
Arabinose 0,015 0,013 0,03 0,015
Quotient:
Saccharose 0,9 0,94 0,86 0,9
Glucose
Saccharose 0,045 0,046 0,043 0,045
Arabinose

Man sieht immerhin (Tabelle 16), dab der Durehtritt auch der orga-
nischen Stoffe dureh die Membran bei Verwendung yon AlkohoI ver-
zSgert wird, falls nicht (S. 34) die durch ihn bedingte Hi~rtung das
,,Knicken" nur mechanisch erschwert, so dab es erst bei hSheren Kon-
zentrationen erfotgt.
Beggiatoa mirabilis. E i n Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 53

TabcUe 17 Tote Fgden).


I. 2. 3. 4.
Stoff Mol.-Vol. Mol.-Gew. Greuzkonz.
1. Veratrin . . . . . . . . . . . 723,5 627,9 0,0015
2. Raffinose . . . . . . . . . . . . 498,8 594,4 0,0052
3. Amygdalin ~ . . . . . . . . . 461,3 457,2 0,0050
4. Thebain . . . . . . . . . . . 382,1 347,7 O,0O57
5. Coeain . . . . . . . . . . . . 372,3 339,8 0,0068
6. Codein . . . . . . . . . . . . 365,6 353,7 0,0075
7. Morphin . . . . . . . . . . . 349,1 339,7 0,0068
8. Saocharose . . . . . . . . . . 345,6 342,1 0,0068
9. Salioin . . . . . . . . . . . . 296,0 286,2 0,0068
10. Antipyrin . . . . . . . . . . . 213,2 188,2 0,0068
11. Coniin . . . . . . . . . . . . 211,3 163,6 0,0075
12. Rhamnose . . . . . . . . . . 189,2 182,2 0,0071
13. Mannit . . . . . . . . . . . . 189,2 182,2 O,OO76
14. Hexosen . . . . . . . . . . . 183,2 180,1 O,OO75
15. Inosit . . . . . . . . . . . . 173,2 18o,1 0,0075
16. Paraldehyd . . . . . . . . . . 169,5 132,2 0,010
17. Leucin . . . . . . . . . . . . 164,5 131,2 0,011
18. Adonit . . . . . . . . . . . . 160,0 152,1 0,015
19. Arabit . . . . . . . . . . . . 160,0 152,1 0,019
20. Arabinose . . . . . . . . . . . 153,4 150,1 0,015
21. Monoaccfin . . . . . . . . . . 145,6 134,1 0,019
22. A s p a r a g i n . . . . . . . . . . . 134,2 132,2 0,015
23. Erythrit.. . . . . . . . . . . 130,2 122,1 0,019
24. Asparagln~gure . . . . . . . . 129,5 133,1 0,015
25. Orcin . . . . . . . . . . . . . 128,8 129,1 0,060
26. Phloroglucin . . . . . . . . . 122,4 90,1 0,068
27. Propylurethan . . . . . . . . . 120,5 103,1 0,071
28. Methyllaktat . . . . . . . . . 115,8 104,1 0,060
29. Resorcin . . . . . . . . . . . 114,6 110,1 0,075
30. Anilin . . . . . . . . . . . . 111,5 93,1 0,057
31. Monochlorhydrin . . . . . . . 109,9 110,5 0,071
32. Dimethylh~rnBtoff sym . . . . . 103,2 88,1 0,068
33. ,, assym . . . . . 103,2 88,1 0,072
34. Succinimid lO2,9 99,1 0,075
35. Alanin . . . . . . . . . . . . 98,5 89,1 0,04
36. Athylurcthan . . . . . . . . . 98,5 89,1 0,068
37. Praplonamld . . . . . . . . . . 90,7 73,1 0,19
38. Glycerin . . . . . . . . . . . 87,8 92,1 0,15
39. Methylharastoff . . . . . . . . 81,2 74,1 0,15
40. Glycoco!l . . . . . . . . . . . 76,5 75,1 0,095
41. Methylurethan . . . . . . . . 76,5 75,1 0,26
42. A c e t a m l d . . . . . . . . . . . 68,7 59,1 0,34
43. Glycol . . . . . . . . . . . . 65,5 62,0 0,34
44. Hamstoff . . . . . . . . . . . 59,2 60,1 0,60

E i n e B e r e c h n u n g des P e r m e ~ b i l i t ~ t s k o e f f i z i e n t e n ist fiir t o t e


F ~ d e n u n m 5 g l i c h , d a k e i n S t o f f y o n g e n i i g e n d grol~em, sicher b e k a n n t e m
M.V. g e f u n d e n w e r d e n k o n n t e , fiir d e n ~ie a u c h b e i k f i r z e s t e r V e r s u c h s -
z e i t i m p e r m e a b e l g e w e s e n w ~ r e n . E s ist e i n l e u c h t e n d , d a b i n l e ~ z t e r e m
F a l l d i e s e r S t o f f b e r e i t s b e i e i n e r K o n z e n t r a t i o n u n t e r 0,0015 G.M.
S c h r u m p f u n g ( , , K n i e k u n g " ) e r z e u g e n miiBte. W o l l t e m a n aber, u m eine
54 W. Ruhiand and C. l~offmann: Die Permeabilit~t v0n

robe Vorstellung vom Permeabflit~tsgrade der toten Zellen zu erhalten,


diesen Weft einmal mit ahem Vorbehalt auch fiir letzteren zugrunde legen,
so erggbe sieh bereits fiir das Veratrfn mit dem grSBte~l ~r
(-gewieht) unter allen untersuehten Stoffen ein Wert yon/~a' = 0,90, der
aber sicherlich gegenfiber dem wahren Wert noeh zu niedrig liegt. Da,
wie die Grenzkonzentrationen der Tabelle 17 zeigen (Spalte 4), die
fibrigen Stoffe noeh leiehter permeieren, so ~pringt der ~ehr bedeutende
Untersehied zum dlosmotisehen Verhalten lebender Zellen, d. h, die
hemmende Wirkung des lebenden Plasmas (Tabelle 14) deutlieh in die
Augen.
Als Anhult zur Beurteilung der Permeabilit~t toter Zellen k6nnen
aber die Grenzkonzentrationswerte dienen, die, wie bereits ausgefiihrt
der Perme~bilit~t nieht proportional sind, abet selbstverst~ndlieh mit
dieser fallen und steigen. ~ a n sieht beim ~berblieken der ~u
(Spalte 4)deutlich die gleiche prinzipielle Gesetzm~fligkeit wie bei den
]iir die lebende Zelle geltenden: sie fallen und steigen mit dem M.V.,
folglich auch die Permeabilit~t mit diesem. Der eben erwi~hnte in den
Werten der Tabellen 14 (lebende) und 17 (tote Zellen) zum Ausdruek
gelangende Unterschied ist - - so groB er auch ist - - nut veto quantita-
tiver, nicht aber grundsiitzlicher und qualitativer ~abur. Von einigen
bei den toten F~den nur kleineren ~ Abweichungen yon der Regel
soll im allgemeinen Teil noeh die Rede sein.
IV. Kurzer l~-berbliek fiber die Ergebnisse der Hessungen.
Wir beabsichtigen in diesem Kapitel keineswegs eine Zusammen-
fassung aller experimentellen Ergebnisse unserer Untersuchungen zu
geben. Wir vermeiden vielmehr alle ~iederholungen und verweisen
auf den Abschnitt III.
Es wird sich indessen empfehlen, vor einer Diskus$ion fiber die Be-
deutung der Versuchsergebnisse fiir das Problem der Permeabflit~t, in
aller Kiirze wenigstens die in ihren Einzelheiten schon genfigend be-
sproehenen Ergebnisse unserer Messungen insgesamt zusammenzufassen.
A. Organisehe Stoffe.
a. Lebende Zellen.
Wir geben zunaehst nach der Tabelle 14 eine graphisehe Darstellung
der Abh~ngigkeit der Permeabilitgtskoeffizienten (1Vfomentanwerte ?la,
Spalte 5) yore M.V. (Abb. 9). D~bei mul~ten aus teehnischen Griinden
einige Stoffe durch Zahlen bezeichnet, andere, welehe anf der Kurve zu
dicht an ~qaehbarwerte gefallen w~ren (Saccharose und viele andere)
ganz fortgelassen werden.
Wie man sieht, ist der Anstieg yon fa mit abnehmendem M. V. ein
angenShert geradliniger. Beim Erythrit und Orein befinden sieh gr61~ere
Beggia~oa mirabilis. Eiu Beitrag zur Ultrsfiltertheorie des Plasmas. 55

Knioke. NIit~ dem H~rnstoff ber'Chrt die Li~ie n~hezu die Ordinate 1,
d. h. den Wer~ fiir freie Diffusion. N u t zwei Stoffe (Antipyrin und
Leuci~) liegen mit ihrem p=-Wert wei~ ~uBerh~lb der Linie. Bedenkt
man, dab den Methoden der Messung manche M~ngel anhaften, und
dal~ ~uch die Molekul~rvolumin~ meist n u t n~ch der Koppschen
Formel errechnet sind, so wird man nich~ umhin k5nnen, yon der rela.

o~/on ~ o , . ~ ..... I
G~-oko/J o.. j ) "'"''T'
~g /I/an& "7'-.
"-'o Erj Chr#
o,s "q~Pq~in ~ ='~,qmb~ , , L, ,

"~o ~al/cin

,o

50 r 150 200 250 300 350 ~0


Molehular -Volum/na
Abb. 9. Abh~Mgkeit der P~rrneabillt6t lebe~der F~de~ (ua) ~on~ M.V. Es bedeuten: l. tIarnstoIl,
2. Glycol,B. Glycerin,4. Suceinimid,5. Methyllactat,6. Arabinose.

riven Strenge und Eirt]achheit der an elne lineare 12unktion gemahnen.


den Abhiingi#keit der Permeabilit~tskoeffizienten yore ~.V. iiberrascht
zu sein. Man wircl auch vermuten diirfen, dab n~ch diesen Erf~hrungen
die spe~ielge~e, riiumliche l~or~nder einzdnen Molek~21e]iir die Permeabilit~t
keine ins Gewicttt ]allende Rolle s~ielen kann, bzw. dab diese Form
bei den untersuchten Sto[]en, so verschieden ihre Konstitution auch ist,
reehf ?ihnlic~ sein diirfte. Auch folgt fiir uns daraus alB sehr wahrsehein.
56 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die P~rm~hili~ von

lich, dab Hydratationen bei ihnen nicht vorkommen, und mit yeller
Sicherheit, dab Doppetmolelci~l- oder gar Molekiilaggregatbildung in ihren
LSsungen ausgeschlossen sind. (Vergl. auch Collander 1924.)
Von besonderem, auch ehemisch-physikalischem Interes,e ist der die
hoehmolekularen Verbindungen betreffende Teil der Kurve. Er zeichnet
sich durch besondere RegelmgBigkeit aus, obwohl auch hier chemisch
ganz verschiedene Stoffe, wie Kohlenhydrate, Alka]oide, ein Glykosid,
ein Triphenylme~hanfarbstoff usw. vertreten sind. Letztere konnten
aus rgumlichen Griinden nieht mehr mit gezeichnet werden. Es ist aber
die Richtung auf diese Punkte angedeutet women. Also spezieU auch
ffir die untersuchten Alkaloide und den genannten Farbsto/[ folgt daraus
ein molekularer L6sungszustand. Im Abschnitt V (S. 69) wird davon
noch ausfiihrlieher die Rede sein.
Vielleicht wird das diosmotisehe Verhalten der Alkaloide am
meisten fiberraschen. 1Vfanhat $ie bisher wohl allgemein als besonders
rasch permeierende bezeichnet. Die Vermutung liegt nahe, dal~ dies
nur dadureh vorgeti~uscht wurde, daG diese Stoffe in so vielen Pflanze:n-
zellen Speicherungen (Niedersehli~ge) ergeben, und zwar dies weiter noeh
dureh chemische Reaktionen (so mit Gerbstoffen der Vaeuolen usw.),
welehe sieh durch eine auflerordentliche, zum Tell ungeheure Emp]indlich-
keit auszeichnen, wenn z. B. OVERTON feststellt, da{~ Stryehnin und
andere Alkaloide in einer Verdtinnung yon 1 g auf 10 bis 20 Tausend
Liter Wasser in Spirogyravaeuolen einen noch deut]ieh sichtbaren Nieder-
schlag erzeugen. So mul3te die Permeierfi~higkeit dieser Stoffe bedeu$end
i~berschStzt werden (vgl. auch S. 3), da wegen d e r LSslichkeits- und
Giftigkeitsverhi~ltnisse plusmolytische Messungen, die einen exakten
Vergleich mit andern Stoffen erm6glieht hgtten, an gewShnliehen Pflan-
zenzellen ausgesehlossen waren. Diese Sehwierigkeiten fallen bei Beg-
giatoa fort, und da in ihr auch keine Speicherung dieser Stoffe erfolgt,
k6nnen wir infolgedessen sehen, dai] sich die Alkaloide g~nz entsprechend
ihrem M.V. verha!ten, Veto Ketonbl~u (S. 71) gilt mutatis mutandis
das gleiche.
Der Kiirze halber wollen wir hier aber nieht etwa alle Stoffe einzeln
betrachten, fiber welehe ja sehon in Kapitel I I I (z. B. S. 51) das Er-
forderliehe gesagt wurde, sondern nut noeh denjenigen einige Worte
widmen, welehe in ihrem diosmotisehen Verhalten yon der Regel abzu-
weisheu scheinen.
Schon in Tabelle 14, Spalte 5, machten sich in den/~a-Werten einige
Sprfinge (kursiv gedruckt) bemerkbar. Die grS~lten sind die yon Leuein
und Antipyrin, wesentlieh kleiner die yon Monoehlorhydrin, Aspa-
ragin, Alanin und GlycoeolI, wobei in der Kurve, Abb. 9, diese Amino,
s~uren einen Seitenast bilden. Die geringen Abweiehungen yon Paralde-
hyd und Monoaeetin bertthen, wie frfiher bewiesen (S. 40), auf einer
Beggiatoa mi~sbilis. E i n Beitr~g zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 57
Tabelle 18.

L 2. 3. A.
Mol.-Vol.
Stoff Mol.-Vol. /~a
iO p a

1. Veratxin . . . . . . . . . . . 723,5 0 oo
2. K e t o n b l a u . . . . . . . . . . 577,8 0 co
3. Raifinose. ' . . . . . . . . . . 498,8 0 co
4. A m y g d a l i n . : . . . . . . . . 461,3 0 co
5. T h e b a i n . . . . . . . . . . . 382,1 0,33 116
6. Cocain . . . . . . . . . . . . . 372,3 0,33 113
7. Codein. . . . . . . . . . . . 365,6 0,40 91,5
8. Morphin . . . . . . . . . . . 349,1 0,40 87,4
9. Saccharose . . . . . . . . . . 345,6 0,40 86,4
10. Salicin . . . . . . . . . . . . 296,0 0,57 51,9
11. A n t l p y r l n . . . . . . . . . . . 213,2 0,94 27,0
12. Coniin . . . . . . . . . . . . 211,3 0,67 31,6
13. R h a m n o s e . . . . . . . . . . 189,2 0,70 27,4
14. Mannit . . . . . . . . . . . . 189,2 0,72 26,4
15. Dulcit . . . . . . . . . . . . 189,2 0,72 26,4
16. Sorbose . . . . . . . . . . . 183,2 0,67 27,4
17. Mannose . . . . . . . .... 183,2 0,70 26,4
18. Galactosc . . . . . . . . . . . 183,2 0,70 26,4
19. Fructose . . . . . . . . . . . 183,2 0,70 26,4
20. Glucose . . . . . . . . . . . . 183,2 0,72 25,5
21. Inosit . . . . . . . . . . . . 173,2 0,67 25,9
22. P a r a l d e h y d . . . . . . . . . . 169,5 [0,98] I17,3]
23. Zeucin . . . . . . . . . . . . 164,5 0,40 4 . l ~3
24. Arabit . . . . . . . . . . . . 160,0 0,824 19,4
25. A d o n i t . . . . . . . . . . . . 160,0 0,813 19,7
26. Arabinose . . . . . . . . . . 153,4 0,813 18,9
27. Monoacetin . . . . . . . . . . 145,6 [0,925] [15,7]
28. Asparagin . . . . . . . . . . 134,2 0,824 16,3
29. E r y t h r i t . . . . . . . . . . . 130,2 0,850 15,3
30. Asparaginsdure . . . . . . . . 129,5
31. Orcin . . . . . . . . . . . . 128,8 0,957 1a,4
32. Phloroglucin . . . . . . . . . 122,4 0,966 12,7
33. P r o p y l u r e t h a n . . . . . . . . 120,5 0,966 12,5
34. Methyllactat . . . . . . . . . 115,8 0,963 12,0
35. Resorcin . . . . . . . . . . . 114,6 0,966 11,9
3 6 . Anilin . . . . . . . . . . . . 111,5 0,963 11,6
37. M o n o c h l o r h y d r i n . . . . . . . 109,9 0,9925 11,1
38. Dimethylharnstoff sym . . . . . 103,2 0,967 10,68
103,2 0,970 10,63
39. Succinimid . . . . asym
. . . .. .. . . . 102,9 0,997
40. Alanin . . . . . . . . . . . .
lO,32
98,5 0,900 10,94
41. Athylurethan . . . . . . . . . 98,5 0,985 10,00
42. Mcthylal . . . . . . . . . . . 97,0 0,9833 9,87
43. Furfurol . . . . . . . . . . . 97,0 0,9833
44. Propionamid . . . . . . . . .
9,87
45. Glycerin . . . . . . . . . . .
90,7 0,985 11,6
87,8 0,9833 8,93
46. Methylharnstoff . . . . . . . . 81,2 0,985 8,25
47. Glyc,ocoll . . . . . . . . . . . 76,5 0,925 ~I,27
48. Methylurethan . . . . . . . . 76,5 0,9975 7,67
49. Acetamid . . . . . . . . . . .
50. Glycol . . . . . . . . . . . .
68,7 [0,9993] [6,881
65,5 0,9983 6,56
51. Hamstoff . . . . . . . . . . . 59,2 0,9988 5,92
58 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

.(in ,,Momentan"versuchen nur schwach)schi~digenden Wirkung (Ta-


belle 14, Zahlen in Klammern). Die beiden S~offe wurden tabellarisch
gleichwohl beriicksichtigt, um zu zeigen, daI~ ihre normale Permeier-
f~higkeit offenbar der Ultrafil~ertheorie entspricht.
])as vi~ ~ i g ~ rasche Permeieren ,,~
:onochlorhydrins brauch~ auf keiner TJe~alh o
vitalen Besonderheit zu beruhen (S. 68, r
Anm. 1), beim Antipyrin ist letzteres
nicht ausgeschlossen. Leider lieB es sich
zu M ~ssungen an ~oten ~ d e n nich~ ver- wo
wenden, da es nicht gcniigend wasser-
16slit h ist, um die dazu efforderlichen 90
Ko ;entrationen zu ergeben. Alle iibrigen i Morph/n
Abw, @hungen beziehen sich auf ( ! - zu
l~n am permeierende) Aminos~uren und ~o ,

Sieur, ~amide; wir kommen sogleich ~uf


sie urfick. 7o

ine sehr schSne Reihe erbMt man,


wen~ man die Stoffe nach den Werten ~0
der "erhMt~isse der M.V. zu ihren Per-
.o 5aliqh

/
58

/40 ~l~.,r/n

0 -, , ~

I j~:~7, e~,. " '


po , ~ , ! ~ ~
ff~rnsto~
I
50 100 150 20fl Z50 300 350 ~0
Molekular-~Zolummo .,
M.V.
Abb. i0. AbhdnMgkeit der Werte l--~-~vom ~f.L (~bende Z~Uen). Y~s bedeuten: i. Glycol~ 2. Meo
thylurethan~ 3. Methylharnstoff, 4. Glu 5. Propionamid, 6. Alan[u. 7. Succinimid, 8. Ani-
lin. 9. Methyllactat~ i0. Orcin~ l i . Aaparagin~ 12. Arabinose.

meabilit~ten (Perme~bilit~tskoeffizienten) ~nordnet. In Tabelle 18,


wo, urn ldeinere Zahlen zu erhalten nicht die einfachen, sondern die
10fachen Werte yon/~a benutzt wurden, sieht man bis auf die in kursivem
Druck hervorgehobenen Ausnahmen einen regelm~Bigen Abfall mi~ dem
M.V., der in Abb. 10 graphi.sch c~rgestellt ist.
Begglaf~a mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 59

Als 8tarkr Abweichung tritt allein dos Leucin hervor. Dazu kommt
noch die nicht mit verzeichnete Asparaginsgure. Sie hatte berei~s in
Konzentrationen, die noch dreif~ch unter der Grenzkonzentration hoch-
molekularer Stoffe lag (Veratrin, Raffinose usw.) an den lebenden F~den
,,Knlckungen" hervorgerufen, die somit wohl gar nieht osmotischer Art
sein k6nnen. Sehr wenig, und in der Abb. 10 deshalb kaum hervor-
tretend (4, 5, 6, 11), aber doch noch eben merklieh, fallen ferner noch
Gtyvoooll, Proplonamid, Alanln uncl Asparagln neben die Kurve, d. h.
also sgmtllche darau[hin gepri~[ten Aminosguren uncl S~ureamide, mit
alleiniger Ausnahme des Acetamids, dessen Permeierf~higkeit aber bereits
so grol~ ist (/~ ganz nahe = 1), dab die Messung etwas weniger genau
ausf~llt.
Es ist abet wenig wahrseheinlich, dab in der etwas geringeren Per-
meierfMdgkeit dieser Stoffgruppe eine vitale Eigentiimlichkeit des
Plasmas steckt; vergleicht man nimlich daraufhin Tabelle 17, so finder
man ouch f~r die toten F~iden etwas, zum Tell sogar erheblicher ab-
weiehende Grenzkonzentrationen, uncl wieder unter allen geprii]te~
Sto][en nut fiir diese. Allein dos Leucin verhMs sieh bier normal.
Wir sind geneig% zur Erklirung der Besonderheit der genannten
Stoffgruppe am ehesten an eine Wirkung der, wenn ouch recht geringen,
elektrolytische~ Dissoziatio~ zu denken, welehe diese zum Tell ampho-
lytischen Verbindungen in ihrem diosmotischen Verhalten den anorga-
nischen Salzen annhhern kSnnt,e, die ihrerseits ja auch bei den Ver-
suchen sowohl mit lebenden wie mit retch Fiden eine Sonderstellung
gegeniiber den Nichtelektrolyten deutlich gezeigt hatten (vg]. S. 30).
Ob aber ouch hier, wie wir anaehmen mSehten, Beeinflussungen des
Quellungszustandes der Plasma- (inneren Yfembran-)kolloide im Spiel
siud, bleibe dahingestellt.

b. Tote Zellen.
Werfen wir schlieBlieh noeh ei~aen Blick auf dos diosmotisehe Ver-
h~lten der S~offe gegen tote le~den, d. h. auf die Permeabilitat der Zell-
rnembranen. Da bereit.s auf S. 52 (vgl. ouch Tabelle 17) schon das
Wiehtigste, insbesondere die Tatsaehe, dal~ wir ouch hier eine nach dem
M.V. abgestu[te Permeabilitiit vorfinden, betont wurde, kSnnen wir uns
hier kiirzer fassen: YVir sincl fiir tote Zellen, wie dort ebenfalls sehon
ausgefiihrt, nieht in der Lage, die Permeabilititskoeffizienten und somit
ouch nieht die fiir Ultrafiltertheorie maBgebenden VerhMtnisse des M.V.
zu diesen zu bereehnen, so dab uns nur die experimentell bestimmten
Grenzkonzentrationen zur Beurteilung des diosmotisehen Verhaltens
der Stoffe zur Verfiigung stehen. Dos Ansteigen jener mit abnehmendem
M.V. ist, trotz der iiberaus hohen Durchl~ssigkeit der Membranen und
der grSl~eren Ungenauigkeit der Messungen, wie eia Blick auf Tabelle 15
60 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~it yon

zeigt, so augenfa!lig, dal~ auch hier an tier Giiltigkeit des Ultra]ilter-


prinzips kein Zwei/et bestehe~ kann.
Aueh bier sehen wit aber einige Abweiehungen, die bei grSl~erem M.V.
nur recht klein, bei kleinerem aber in einigen ~ l l e n (A!anin, Propion-
amid, Glyeecoll) gr513er sind. Es ist, wie bereits S. 59 hervorgehoben,
sehr bemerkenswert, da$ sich diese Aufnahmen wiederum, wie bei
lebenden Zeilen und im gleichen Sinne der Permeabilit~tsverringerung
auf Aminos~uren und S~ureamide besehr~nken, und w~.r .sehlossen dar-
aus, dab deren Ausnahmestellung keine spezi/isch vitale Eigentiimlich-
keit des Protoplasmas zugrunde liegt, sondern vielleicht die elektro-
lytische Dissoziation oder eine andere physikalisch-chemische Besonder-
heir. Auffallend ist nut, dal~ Propionamid, und dieses allein, in tote
Zellen rascher als zu erwarten, permeiert,

B. Salze.
Messungen an lebenden Zellen sowohl (die uns in erster Linie inter-
essieren) wie auch solche an toten Zellen, in diesem weniger wichtigen
Falle allerdings mit einem gewissen, dureh die AbtStungs~rt (S. 34) und
die primitive Methode bedingten Unsieherheitskoeffizienten, hatten uns
das allgemeine Resultat ergeben, da$ die Wirkung der anorganischen
Salze sieh additiv aus denen der [onen zusammensetzt. Die Kationen
wirken auf den Quellungszustand tier Plasmakolloide vermindernd ein,
derart, dal~ mit dem Grade der Entquellung eine tterabsetzung der
Permeabilitat (HOrMEISTE~S lyotr0pe Reihe) erfolgt. Die Anionen
wirken entgegengesetz~, also quellungsbe]6rdernd (15send, ,,peptisierend")
und steigern die Permeabilit~t, ebenfalls in bestimmter Stufenfolge der
Anionen. Wit konstatierten also im dio~mo~isehen Verhalten der
Beggiatoa-Zellen gegen Salze dieselbe Gesetzm~13igkeit, wie sie yon
KAHHO und anderen allgemein fiir Zellen anderer Pflanzen gefunden
wurde - - der Unterschied gegen diese ist nut quantit~tiver Natur; B.
mirabilis ist auch fiir sie wie fiir die organischen Stoffe viel leiehter
permeabel. Wit sehlossen hieraus und aus anderen T~tsachen auf eine
wesentliehe ~bereinstimmung des Beggiatoenplasmas in seinen Grund-
eigensehaften mit dem der iibrigen Pflanzen (vgl. aueh S. 76). Da naeh den
allerdings wesentlieh weniger genauen und zuverl~ssigen, Messungen an
toter~ Zellen (S. 34) bei diesen dieselbe Gesetzm~Bigkeit herrseht, und
die Beeinflussung der Quellung dureh anorganisehe Salze naeh der
chemischen Natur der Membranen versehieden zu sein scheint (WxLTE~
1924), sO kSnnen wir hierdureh den aus anderen Tatsachen (S. !8) ge-
zogenen SehluB auf die plasma- oder eiweigartige Besehaffenheit, minde-
stens der inneren Zellwandschicht bei B, mirabilis bekr~ftigen.
Erkl~ren die Einwirkungen auf die Quellung die Reihenfolge im
Durehtritt der Salze untereinander, so/ragt es sieh nun, kSnnen wir das
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 61

diosmotisehe Verhalten der letzteren auch mit dem der organischen


Stoffe vergleiehen and wie steht es mit der Anwendung tier Ultra/ilter-
theorie auf die anorganischen Salze ?
~achdem in den ~Reren Zeiten der Permeabflit~tsforschung die an-
organisehen Salze vielfach im Vordergrund der Diskussio~ fiber die Be-
sehaffenheit der hypothetischen ,,Plasmahaut" gestanden batten, ist
sp~ter immer mehr ihre Sonderstellung gegeniiber den organischen
Stoifen betont worden. Jene soUten darnach auf Grund irgendwelcher
einfachen chemisch-physikalischen Eigenschaiten (LSsliehkeit, Ober-
fl~chenaktivit~t usw.) ohne weiteres, diese abet ,,unter aktivem Ein-
grei]en des Plasmas" ins Zellinnere befSrdert werden. Letzteres hat
besonders tt(~BE~ (1922) durch die Auistellung des auf ihr Verhalten
begrfindeten Begrif/s der ,,physiologischen" PermeabilitSt seharf heraus-
gestellt (vgl. aueh NATHANSOHN1910).
Unseres Erachtens ist diese Auffassung clutch die neueren Arbeiten
insbesondere yon KAHHO (1921, 1924) widerlegt: Auch hier spielen
offenbar rein physilcochemische Vorgiinge die Hauptrolle, die allerdings
yon anderer Art sind als die fiber den Import organischer Stoife ent-
scheidenden: Q~ellungsSnderungen der Plasmakolloide, deren Bedeutung
gerade auch bei unseren Versuchen qnit B. mirabilis wegen der leiehten
Mefibarkeit ihrer DurehlSssigkeit besonders klar und schSn hervortrat. Die
Bedeutung unseres ~Vachweises, daft dieser Sate aueh ]~r tote Zellen, also
fiir die MembranI~olloide gilt, seheint uns darin zu liegen, daft er die
spezi/iseh physiologisehe Au]/assung HSBEI~Seindeutig widerlegt, und ganz
/iSr die Au//assung KAHHOSspricht.
In die Ultra/iltertheorie ffigen sick die anorganisehen Salze infolge-
dessen nut insoweit ein, als ihre MolelcitlgrSfle i~berhaupt ihren Durehtritt
gestattet. Die Geschwindiglceit des letzteren h~ngt aber yon der erw~hnten
Quellungswirkung abl). Zu dem ersteren Punkt sei noch Folgendes
bemerkt: Man weil~, dait die ~olekularvolumina analog aufgebauter,
kry~tallisierender Salze additiver Natur sind, und ganz neuerdings hat
BInTZ (1923, 1924) sogar gezeigt, dal] das M.V. yon krystaUisierten Halo-
geniden vieler Metalle n~hezu gleich der Summe der Atomvolumina der
letzteren und dcr yon W. ItE~Z errechneten ~ullpunktsatomvolumina
der Halogene sind. Aul~er der hierin liegenden sck5nen Best~tigung der
Koppschen Volumregel interessieren uns nun hier die Werte ffir das M.V.,
wenn auch, gem~B dem oben Gesagten, nur in ihrer allgemeinen GrSl~en-
ordnung. Die Atomvolumina betragen nach BILTZ (1923, S. 124) z. B.
fiir C~ 26, Na 23,7, K 45,4. Der Herzsche Wert flit das A.V. des C1
aber betragt 16,2. Wir 8ehen also, wSren die M.V. alle~n mafigebend,
1) Auch beim diosmotisehen Verhalten der yon B~E~v.~ (1918) n~her
studierten S~uren und Basen diirften u. a. Quellungs~nderungen eine wiehtige
RoUe spielen.
62 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t von

so mi~[3ten an sich leichtes Permeieren mSglich 8ein. Da, wie unsere Ver-
suche (S. 35) ergaben, z. B. des NaC1 in B. mirabilis fast ungehemmt
durch das lebende Plasma permeiert, diirfte hier, im Gegensatz zu anclern
Pflanzenzellen, die dem Na sonst eigene Quellungserniedrigung nur
wenig wirksam werden. Dal~ eine solehe abet gleiehwoh!, aueh bei B.
mirabilis, nieht nut yon ~aC1, sondern auch yon den iibrigen unter-
suchten, ebenfalls relativ recht leieht eindringenden anorganisehen
Salzen ausgeht, crgibt sich deutlich aus der oben besprochenen reihen-
m?i[3igen Abstu]ung der Importgeschwindigkeit.

V. T h e o r e t i s c h e s .
Nach den mit B. mirabilis erhaltenen Versuchsergebnissen (Ab:
schnitt III) und ihrer allgemeinen ErSrterung (Abschnitt IV) diirfen wir
davon ausgehen, daft das M.V. in weitaus erster Linie i~ber das diosmo-
tisvhe Verhalten der wenig oder nicht diseoziierten Sto]/e entscheidet. Die
Ubereinstimmung dieser Tatsache mit den Forderungen der Ultrafilter-
theorie wurde h~ufig hervorgehoben, bedarf aber noch einer grundstitz-
lichen ErSrterung, wie auch die Frage der Bedeutung der Membran dabei
und die Gfiltigkeit der Ergebnisse ftir andem Zellen. Bevor wir hierauf
eingehen, werden wir zweckm~Big einen kurzen Blick auf den gegem
w~rtigen Stand des Permeabiliti~tsproblems zu werfen haben.
A. Die Permeabflit~t.
a. Bemerkungen iiber einige ~iltere Hypothezen.
Die bekarmte ,,Lipoid~heorie", welche yon MEYER und OVERTON
begriindet wttrde, stfitzt sich in der physikochemisehen Gruadlage ~uf
den unseres Wissens zuerst yon Ln~BIG (1848, 1862) ge~u~erten und
yon L'HER~ITE (1855), Ga~a~AM (1854) und NERNST (1890) weiter aus-
gebauten Gedanken der ,ausw~hlenden LSslichkeit", wonach die Auf-
nehmbarkeit eines yon auflen gelSst dargebotenen Stoffes in das Zell-
innere dutch die L0slichkeitsverh~ltnisse jenes in der semipermeablen
~Iembran bedingt sein miiBte. Eine ausfiihrliche Darstellung dieser
Theorie und ihrer Stiitzen finder sich bei einem ihrer ]angj~hrigen
Anh~nger, ttSBE~ (1922).
Nachdem diese Theorie, namentlich auf G17and der eindrucksvollen,
einfachen pflanzenphysiologischen Versuche ihres Begrfinders, OV~,I~TON,
in tierphysiologischen Kreisen ~ in der Pflanzenphysiologie hat sie
nie eine ~hnliche Rolle gespielt ~ die Anschauungen der Stoffwechsel-
physiologie, Pharmakologie und Toxikologie jahrzehntelang beherrscht
hat, ist die Stellungnahme zu ihr doeh auch dort eine viel zuriickhal-
tendere oder gar skeptische geworden, bezeichnenderweise gerade auf
Grund eines eindringenderen Stuctiums ihrer scheinbaren Hauptsti~tzen.
So will z. B. WINT~,~STEIN (1916) in ihrer Anwendung auf die 1Varkose
Beggiatoa mlrabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 63

sogar nur noch eine Art ,,Zwangsvorstellung" mancher Autoren sehen.


Auch z. B. FOHNE~ (t921) lehnt sie in ~hnlichem Zusammenhange ab,
und v. TSCHER~K (1924) sieht in d~n Plasmalipoiden, im diametralen
Gegensatz zu OVERTON, Hindernisse fiir das Eindringen wasserl6slichcr
Stoffe 1).
Ein vielleieht noch bestechenderes Hauptparadigma als die Narcotica
bildeten die yon OVERTON(1900) genauer studiertenAnilin]arbsto[]e. Aber
gerade hier kormte RUHLAND(1908) nachweisen, dab es basische Stoffe
gibt, die trotz sehr hoher Lipoidl6slichkeit in lebende Pflanzenzellen
hie eindringen (Viktoriablau 4 R und B, Nachtblau, Basler Blau BB
und R, w~hrend auf der anderen Seite yon ihm eine Reihe weiterer
basischer Farbstoffe gefunden werden konnte, welche sehr leicht ein-
dringen, ohne lipoidlSslich zu sein (Methylengriin, Thionin, Neublau 1~,
Azophosphin QO, MalachRgriin, Bismarckbraun u. a.). Entsprechend
lagen die Dinge bei den sauren ~arbstoffen.
Da wit hier keine erschSpfende Kritik anstreben, genfige es, wenig-
stens noch eine schwerwiegende Unstimmigkeit gege~ die Lipoidtheorie
ins Treffen zu ffihren, zumal sie einen Punkt yon besonderer physio-
logiseher Bedeutung betrifft, der in diesem Zusammenhange yon anderer
Seite unseres Wissens noch nicht beriihrt worden ist: Es betrifft die
Wegsamkeit der lebenden Zelle fiir den freien Sauerstoff. HARVEY
(1922) hat an lebenden Tierzellen durch sehr elnfache Versuche mi~
Hilfe der Methylenblauleukobase gezeigt, mit wie auSerordentlicher
Geschwindigkeit der~elbe jederzeit in das Zellinnere eindringt. DaB der
Sauerstoff abet kaum lipoidlSslicb sein karm diirfte unseres Erachtens
aus der Tatsaehe hervorgehen, da$ man mit Erfolg schon durch diinne
l~Yberschiehtung mit so extrem fettlSsliehen Stoffe, wie hSheren Kohlen-
wasserstoffen, den Sauerstoffzutritt zu Wasser, in denen Wasserpflanzen
assimilieren und atmen, praktisch verMndern kann.
Wenn man sich einmal die Mfihe macht, das Tatsachenmaterial zu
priifen, welches der Lipoidtheorie als Grundlage gedient hat, so wird
man nicht umhin kSnnen, es als reeht diirftig zu bezeichnen, ein Eindruck
der sehr im Gegensatz zu demjenigen steht, welehen man friiher unwill-
kiirlich aus den Darstellungen der Hypothese in Lehr- und Hand-
biichern empfangen hatte. Wit kSnnen es zunachst nicht als geeignete
Grundlage einer Permeabilit~tstheorie anerkennen, wenn als Ma$ des
Permeierens irgendwelche physiologischen (Narkose) oder toxischen
Wirkungen (H~molyse usw.) zugrunde gelegf werden. Denn bei dieser
Argumentation wird das Spezifische in tier Wirkung der einzelnen
Stoffe und andere Momente, die immer im Spiel seir~ mfissen, grSblieh
vernachl~ssigt. Wenn also z. B. nach F~NER und NEUBAUE~ (1907)
1) Letz~erenHinweis verdanken wit einer freundliehen Mitteilung des Herrn
Prof. TISCHLER, I~d.
64 W. Ruhland mid C. Hoffmann: Die P~rmeabtlt~ yon

in der homologen Reihe der einwertigen ges~ttigten Alkohole die hi~mo-


ly~ische Grenzkonzentr~tion veto Mcthylalkohol mit 7,34 G.M. bis zum
Oetylalkohol mit 0,004 G,M. regelmai]ig abnimmt, und ferner der Ver-
teilungsquotient dleser Stoffe ffir (~1:Wasser in derselben Reihenfolge sehr
erheblieh steigt, so schwebt ein Schlu~ daraus zugunsten der Lipoid-
theorie v611ig in dcr Luft. Es kann ebensogut eine quantitative Ver-
schiedenheit der spezifischen Wirkung, der Adsorption, der Oberfl~ehen-
aktivi~t u. a. m. die Ursache der Erseheinung sein (vgl. auch die
kritische Darstellung bei HSBER 1922), wie denn iiberhaupt gerade inner-
h~lb der homologen Reihen offenbar verschiedene physikalische Kon-
stanten symbates Verhalten zeigen k6nnen. Schon daraus folgt die
Mehrdeutigkeit solcher Versuehe. Klassische Beispiele w~ren dafiir aus
der Narkoselehre, Toxikologie usw. leicht zu erbringen.
Wenn wir also yon solehen unzul~ngliehen Versuehen und ihren
,,Deutungen" absehen, und nut das Augenmerk 8uf das eigentlieh
diosmotische Verhalten mehr oder weniger indifferenter Stoffe richten,
soweit es wirklich messend verfelgt wurde und der Lipoidtheorie als
Sttitze dienen kSnnte, so bleibt die Literaturausbeute ebenfalls fiberaus
kiimmerlich. Zwar hat OVERTON (wie er z. B. 1895, S. 22 des S.-A.
erw~thnt) im ganzen ,,einige 200, zum Tell anorganisehe, zum weitaus
grSBten Teile aber organische Verbindungen" geprfift, er ist abet fiber
einige, mehr vortragsartige zusammenfassende allgemein gehaltene
Darstellungen (1895, 1896, 1899) nieht hinausgekommen und is~ die
mehrfach (z. B. 1899, S. 88) versproehene ausfiibrliche Arbei~ mit
zahlenm~Bigen Versuchsdaten unseres Wissens leider sehuldig geblieben.
Das, was in jenen VortrEgen geboten wurde, besehri~nkt sich auf
die Aufstellung yon Stoffreihen nach der Aufnahmegeschwindigl~ei~ und
einer dureh allgemeine Worte wie ,,raseh", ,,langsam", ,,~uBersr lang-
sam" usw. versuch~e Kennzeichnung derselben. Zahlen fehlen, wie
gesagt. Ebenso vermiBt man manche anderen durchaus unentbehr-
lichen Angaben (vgl. S. 2). In zahlreichen F~llen werden Irrtitmer
wegen der zweifellosen Uneinheitlichkeit der (ira einzelnen nicht ge-
nannten) Methoden und infolgedessen auch der Unvergleiohbarkeit d e r
Resultate (vgl. oben S. 3) vorliegen. Auf einige andere, beso~ders
wichtige Punkte werden wit am Schlusse dieser Arbeit noch einzugehen
haben. Systematische Me~sungen yon anderer Seite mit diesen Stoffel~,
welehe zur Stiitze der Lipoidtheorie geeignet w~ren und sieh zweek-
m~Big au~ Pflanzenzellen bezogen h~ttten, sind uns nicht bek~nnt
geworden.
SehlieBlich sell besonders betont werden, daft, welm die neueren
Angaben yon H/~NSTEEN-~RANNER (1922) sich best~tigen, der Li1~d-
th~orle und der gesamten Oiskussion fiber sic der Baden ent~ogen w~re,
beide also reeht eigentlieh gegenstandslos geworden wgren. Die yon fiim
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 65

entdeekten, yon allen gepriiften Pflanzengeweben an umgebendes


Wasser abgeschiedenen und naeh ihm normal in der Zellhaut und den
iulieren Plasmasehiehten angehiuften Lipoide zeigten im genuinen Zu-
stand vfllig andere L6slichkeitsvertffiltnisse als bisher allgemein an-
genommen wurde; der fettartige LSsliehkeitscharakter t r a t vielmehr
erst naeh erfolgter ,,Denaturierung" hervor. Wenn abet die ,,Lilgoide"
selbst nicht IiTooidl6slich sind, so wird yon L6sliehkeitseigensehaften
ledig]ich die in W a s s e r , und zwar nur als allgemeinstr Voraussetzung
fiir das Permeieren der Stoffe in Frage k o m m e n kSnnen~). Aus unseren
Resultaten a n B. mirabilis geht unseres Eraehtens eindeutig hervor,
da~ letzteres a u e h zutrifft, wenu die yon HANSTEEN-CRANNERerhaltenen
Ergebnisse und seine darauf aufgebauten Vorstellungen sich als nicht
zutreffend erweisen sollten.
Es erseheint danach nieht verwu~derlieh, da~ m a n vielfaeh das
Bediirfnis eml~fand , neue Vorstellungen fiber die die Stoffaufnahme in
die lebende Zelle beherrsehende Gesetzlichkeit zu entwiekeln.
Wir k6nnen bier nur einige der so entstandenen neuen Theorien
fliiehtig beriihren. Hierhin gehSrt z. B. die vielfache Neigung, an die
Stelle der Lil~oidlSsliehkeit oder aueh neben sie die Adsorbierbarkeit der
gelSsten Stoffe dutch versehiedene Teile der Zelle zu setzen. Zusammen-
fassend h a t ~ieh dariiber z. B. HSBEI~ geiu~ert (1922, vgl. besonders
S. 506ff.). I)er Gedanke ist alt und u. a. sehon yon P~E~FE~ (1877)
ins Auge g e f ~ t worden. Es sei aueh auf die Arbeiten yon LOEWE (1912)
fiber Narcotica verwiesen. Viele Autoren, deren Versuehe sich in dieser
Richtung bewegten, haben leider ohne weiteres wieder die ~hysiologisc~en
Wirkungen oder die A~]speicherung der fragliehen Stoffe in der Ze!le
als Marl ihrer Eintrittsgeschwindigkeit genommen, und wenn jene dem
Adsorptionsgesetz entspraeh, dies unbereehtigterweise auf den Meeha.
nismus des Aufnahmevorganges zuriiekgefiihrt, obwohl natiirlieh dieser
ganz anderen Gesetzen gehorehen konnte, zumal nicht festzustellen war,

1) KAHEOhat in seiner neuen Darstellung (1924, S. 152 ff.) diese Zusammen-


h~nge etwas verkannt, was keiner weiteren Ausfiihrung bedarf. F~rstiitzt sich auch
zugunsten der Lipoidtheorie u. a. auf die bekannten Arbeiten yon BI~DV.RMI~
(1909) und H. WALTER (1920, 1921), wonaeh Pflanzenplasma bei der kiinst-
lichen Verdauung erst naeh Vorbehandlung mit Alkohol und ~ther, and dadurch
bewirkter Entfernung einer angebliehen LipoidhiiUe um die Eiwei6teilehen an-
gegriffen wird. Im Gegensatz dazu hat W]~Is (1925) das Plasma versehiedener
Pflanzen, u.a. auch der yon B I ~ . D E ~ benutzten E/odea ohne jede Vor-
behandiung mit einem sehr wirksamen Trypsinpriparat zu sehr weitgehender
Verdauung bringen kSnnen. Wit haben seine Pr~par~t~ gesehen und haben
(vgl. oben, S. 18) aucli das Beggiatoenplasmas in gleieher Weise, d. h. ohne jede
Vorbehandlung mit fettlSsenden Mitteln zum Verschwinden bringen kSnnen.
Die yon BIEDER~NI~ entwiekelte Vorstellung kann also nicht richtig, min-
destens nieht allgemeingiiltig sein.
Archiv f. wissenschaitl.BotanikBd. I. 5
66 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t vcn

welcher Bestandteil der Zelle das Adsorbens darstellt. Es bedarf keiner


weiteren Ausfiihrung, d~l~ Adsorptionen der permeierenden Stoffe an Be-
standteilen des Zellinneren ihre Anh~ufung daselbst ebenso oder noch
mehr beschleunlgen miissen, wie Speicherungen auf Grund vonehemischen
Reaktionen. In beiden l~llen wird bei genfigenden absoluten Mengen
der Aul~enstoffe das Konzentrationsgef~lle alsbald restituiert. Nach
PFEFFERS klaren Ausffihrungen (1886) fiber Speicherungen sollte dieser
Hinweis eigentlich nicht mehr nStig sein. Aufnahmegesehwindigkeit,
die unter solehen VerhMtni~sen erheblich werden, und Durchlgssigkeits-
grad des Plasmas, welche gleiehwohl reeh~ gering sein kann, w e r d e n
selten mit der erforderlichen Sch&rfe auseinandergehaRen. Sehr lehr-
reich ist daffir das u der Alkaloide einerseits, z. B. gegen Spiro-
gyra, wo sofort Anh~ufung erfolgt, und gegen B. mirabili8 anderseits,
wo sie unterbleibt (S. 56). Mit den Farbstoffen steht es nieht anders.
Wit haben keinen Anlal], uns hier eingehender zu diesen Vorstellungen
zu ~ul~ern und bemerken nur noeh, dal~ es natiirlieh g~nzlieh ausge-
~chlossen ist, unsere obigen Resultate durch die Adsorptionstheorie zu
erkl~ren, auch nieht dio im we~entlichen auf Aminos~uren und S~ure-
amide besehr~tnkten, meist kleinen Abweiehungen yon dem der Ultra-
filtertheorie entsprechenden Verhalten.
I m Zusammenhange mit der Adsorptionstheorie ist oft yon der
Ober/ldchenaktivit(it (dem sogenannten ,,Ha[tdruck") die Rede gewesen,
welehe J. TRAUB]~in zahlreichenArbeiten als den Ifir dieAulnehmbarkeit
und deren Geschwindigkeit entscheidenden F a k t o r angesproehen hatte.
Wir brauchen diese Theorie, welche das Verdienst ffir sich beanspruehen
kann, zu manchen kapillarehemischen Messungen und physiologischen
Versuchen angeregt zu haben, hier um so weniger zu bespreehen, als
TRAUBE ~elbst vor einigen Jahren (gemeinsam mit So~ooYI 1921)
seinen frfiheren Standpunkt yon der allgemeinen Bedeutung der Ober-
fl~ehenaktivit~t verlassen und sich zur Theorie der Adsorption, welche
mit jener nieht parallel geht, bekannt hat.
Anhangsweise sei mit wenigen Worten noch auf zwei Theorien eingegangen,
die sich mit der Aufnahme yon Anilinfarben besch~ftigen, yon denen die eine
(IqIRE~STEI~ 1917) als eine Modifikation der Lipoidhypothese bezeichnet werden
kann, indem an Stelle der LipoidlSsllchkeit diejenige in OlsKure-Diamylamin
gesetzt wird. Den hierauf beziiglichen kritischen Ausfiihrungen COLLA~DERS
(1921) und HSB~Bs (1922) haben wir nichts hinzuzufiigen.
Sodann sei noch einer yon BE~HE(1905) aufgestellten und yon RHODE(1917)
welter ausgebauten Hypothese ged~ch~, nach welcher vor allem die mehr oder
weniger yon der neutralen abwe~chende Reaktion des Zellsa/tes ftir die ,,F~rbung"
(was sich mit Permeabilitgt natfirlich nicht deckt) entscheidend ist: und zwar
sollte, der Pelet-Joliretschen Fgrbetheorie entsprechend, saute Reaktion die
F~rbung durch saure, basische die durch basische Farbstoife begiinstigen. Auch
diese Hypothese is~ offenbar nlcht rich~ig (vgl. auch R~rHI~A~ 1921). ])iv
sauersten Zells~fte, welche im Pflanzenreich bekannt slnd, wurden yon RvH-
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 67

L~ND (RUHLANDund H O ~ _ w N 1924) bei Begonia heracle~]ol~ages Die


S~te wurden mit der Gaskette elektrometrisoh 5fret zu ph = 1,30 bestimmt, die
somit einer 0,07 n HC1 entsprechen. Dem ungeachtet wird z.B. der basisehe
Azofarbstoff Chrysoidin ausgiebigst, und fast momentan im Zellsaft gespeichert.
Aiff der anderen Seite spricht nichts dafiir, dab etw~ die relativ sehr leicht
saure l%rbstoife speiehernden Zellen, -z. B. diejenigen der Leitbiindelscheide,
der Blumenblgtter oder des Laubblattmesophylls yon Pflanzen, in deren Sten-
geln man die l%rblSsungen nach der Methode yon GorrELS~OV.D~ (1901) und
K~s~.~ (1911) emporsteigen lgi~t, ssureren Zellsaft bes~Ben als ihre ungef~irbt
bleibenden Naehbarn.

b. Bemerkungen zur Ultra]iltertheorie.


1. Membranen als Ultrafilter.
Zu Unteruehungen fiber die Teflchengr6i~e in kolloiden LSsungen
(BEoHHOLD 1920) kSnnen rein qualitativ Dialysen, besser abet, und auch
zu quantitativen Zwecken, die Diffusion und die Ultrafiltration ver-
wendet werden. Uns interessiert hier nur die letztgenannte. Bei der
wichtigeren Hoehdruckfiltration benutzt man Gallertfilter, zu denen
meist Eisessigkollodium, aber auch Gelatine u. a. empfohlen worden
ist. Die Eichung uuf die Durchli~ssigkeit dieser Filter, d. h. ihre Poren-
weite, ist z. B. mit Hilfe der yon BEOHHOLD (1920, S. 108f.) gegebenen
Tabelle durehzuffihren. Man hat nur darauf zu achten, dal~ die Ultra-
ffl~erfunk'tion der Membranen ~ieht durch Adsorptionen gestOrt wird.
Auf die gebr~uchlichen Apparaturen brauchen wir nieht einzugehen,
auch Mikromethoden sind vorgesehlagen worden (z. B. THr~SSE~ 1923).
Die Erfolge mit diesen Apparaten sind sehr bemerkenswert, und werden
in den Lehrbfichern genauer behandelt.
I m Zusammenhang mit unseren Versuchen an B. mirabilis ist ~ber
die l~rage des Gr61~enbereiches der LSsungsteilchen, fiber den sieh die
Ultrafilterfunktion yon Gelen erstreckt, yon besonderer Bedeutung.
Unzweifelhaft deutet ja alles, was wir dariiber wissen, d~rauf hin,
dab die Eigenschaften der kolloiden ganz allmShlich ul~d 8tetig in
solehe der eehten L6sungen iibergehen (vgl. z. B. I~EUN])LIOH 1924).
Seit vor allem ZSlOMO~)Y und BAOHY~X (1912) die Ergebnisse aus
ihren Studien am Kieselsi~uregel zogen, hat die Vorstellung, daft die
Struktur der Gele in einem ,,]ibrillgren Netzwerk" bestehe, das ,,zuerst
amikroskopisch, dann aber aueh ultramikroskopisch ausgebfldet" sei,
allgemeine Anerkennung ge/unden. Das ist z. B. noeh auf der gemein-
samen Tagung der l~aradaygesellschaft und der physikalisehen Gesell-
sehaft in London 1920 zum Ausdruck gelangt (J. O. WE~KELI~ BA~-
RATT, ANDERSON u. a., Faradayheft der Kolloidzeitsehrfft 1921), und
SVEDBERG betont noeh besonders die mit der Gelstruktur zusammen-
h~ngende Filterwirkung, auch au] molekular get6ste Substanzen.
In der T a t haben die Bemfihungen, ,,N~embranen" herzustellen,
5*
68 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

deren Porenweite gering genug ist, um auch MolekiJlen au8 e~hten Z6-
sungen den Durehtritt zu erschweren, schon vor mehr als einem Jahrzehnt
vollen Erfolg gehabt. Schon BARTELL (1911.) zeigte, daft, wenn man
in einem mir Rohrzucker gefiillten Osmometer start der l~embran sine
Platte mit ziemlich grobkSrnigem Porzellan anbringt, das Niveau im
Steigrohr sich zwar noch nicht ~ndert, dab man abet durch Einlagerung
sines ~iederschlages yon Baryumaul/at in das Porzellan, also bei /ort-
sehreitender Verdiehtung, schHel31ich zu ,,l~embranen" gelangt, welche
in steigendem Marie Oamose veranlassen. Die osmotische Wirksamkeit
begann schon bei einer Porenweite yon ungefghr 0,4--0,6/z.
BIO]~LOW und Ro/3i~rso~r (1918) haben mit besonderen App~raten
und Methoden ausgedehn~e Studien fiber die osmo~i~chen Ph~nomenc
mit Membranen aus gepulvertem MateriM angestellb Und osmotische
Erscheinungen mit solchen aus ~qilikaten, amorpher Kohle, Graphit und
Metallen (Kupfer, Silber and Gold) erhalten, und zwar ebenfalls wie
BARTELL mit dem eindeutigen Ergebnis, daft die C--r6fiedes osmotischen
E//ektes mit der Abnahme der (ffeme88enen) Porenweite der Membran
zunahm. Sis zeigten welter, dal3 der osmotische I)ruck dutch die Wirk-
samkei$ kapillarer Kr~ifte allein, also ohne Hills yon LSsungsvorg~ngen
oder ehemischen Reakt.ionen hervorgerufen werden kann, worauf wir
hier nieht weiter einzugehen brauchen.
W~hrend such diese wichtigen Stuclien nut mit ZuekerlSsungen an-
gesteUt wurden, hat kurz vor Ersehei~en unserer ersten l~itteilung
(RurlLAND und HOFFMA~rlV 1924) COLLANDER (1924) sine Arbeit ver-
5ffentlicht, in we]cher die seit ~ , TRAUBE bekannten semipermeablen
Niedersehlagsmembranen aus Kup/er/errocyanid in ihrer Durehl~ssig-
keit ~iir sine grSl3ere Zahl (25) von Niehtelektrolyten untersueht wurde.
Der Verfasser finder, dal3 sieh die Membran ,,gegenfiber'Niehtelek~,ro-
lyten w/e sin Ultrafilter oder ein Moleki~lsieb im ~ginne ~ . T~Au~Es
verh~It: Verbindungen, deren Molekiile sine gewisse (r~umliche) GrSrie
nieht iJbersehreiten, diosmieren mehr oder weniger leicht dutch die Mere-
bran, grSriere Molekale werden dagegen zuriJckgehalten. Bei den Mem-
branen war die obere Grenze der einigermal3en leieht permeierenden
~olekiile bei einem M.V. von etwa 80--100 gelegen. Adsorptions- und
LSsungsvorg~nge in den iVIembranen treben also - - wenn fiberhaupt
vorhanden ~ gegenfiber dem in diesem FMIe gartz dominierenclen
EinfluB der meehanischen Siebwirkung stark in den Hintergrund"z).
Die Wirkung 4er l~errocyankupferh~ute auf molekular gel6ste Stoffe

x) Es ist bemerkenswert, dal] in Cor.r.A~r~.~s Versuchen das Monochloro


hydrin etwas zu rasch permeierte, wie wit dies auch an lebenden Beggiatoen
J[anden, Antipyrin permeierte durch 1Perroeyankupfermembranen schwer~ so
dal3 der zu rasche Eintritt in ;Beggiatoa~ eine vitale Besonderhei~ sein
kSnn~e. Aminos~uren hat COLLA~D~ leider nicht geprii~t.
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafil~er~heorie des Plasmas. 69

war also 13rinzipiell ganz dieselbe wie diejenige der Gelmembranen auf
Kolloide, und es be s~tigte sieh somit 8ehr schSn die yon M. TRAVB~
vor langer Zeit (1867) aufgestellte Theorie. Wir mSehten nut betonen,
dal~ uns das Bild eines Ultrafilters ffir die Iragliehe Rolle sowohl der
Niedersetdags- und Gelmembranen wie des Plasmas bei B. mirabilis
trotz des Fehlens eines eigentliehen Filtrationsdruekes (LIEsEG/~G 1913)
bezeichnender zu sein scheint als der yon M. TRAUBE gebrauchte Aus-
druek ,,Molekis gegen welehen nicht nur einzuwenden ist, da{~ er
die Kolloide nleht umfal~t~ sondern namentlieh aueh, dab er den mit
der ~olekfil-(Teilehen-)GrSfle wachsenden Widerstand nieht bezeiehnet.,
da ein Sieb lediglieh fiber Passieren oder Zurfickhalten entseheidet.
Auf eine weitere historisehe Betraehtung der Anschauungen fiber
die l~atur der Wirkung semipermeabler l~Iembranen auf gelSste Stoffe
und beim Zustandekommen osmotischer Erseheinungen brauehen wit
bier um so weniger einzugehen, als eine solche bereits in der zitierten
Arbeit yon B m ~ o w und ROB~SO~ (1918) gegeben wurde, die uns
alles wesentliche zu enthalten seheint.

2. KoUoide und eehte Liisungen.


Ffir unsere Zweeke diirften diese allgemeinen Ausffihrungen, die
sich leicht naeh ver~chiedenell Seiten erweitern lieBen, geniigen. Das
Wiehtigste fiir uns besteht in dem Sehlusse, daft, wenn aueh beim
Passieren der,,Teflchen" (M61ekfile) dureh die Poren yon Gelmembranen
der Zusammenhang zwisehen ~riderstand und Teilchengr61]e (M-~.) im
einzelnen noch keineswegs restlos aufgeklgrt ist und mit ihm die Weehsel-
beziehung zwisehen den LSsungsteilehen (gelSsten Molekfilen) mad den
Porenw~nden des Gels zum mindesten in manehen Fgllen noch nieht
erschSpft sein wird, jedenfalls, wie die faktisehen Ergebnisse der Ultra-
filtrat, ionen yon BECHHOLD U. a. zeigen und wie es z. B. SVEDBERG
(1921, S. 196) auch betont, der t'iltrationswiderstand mit der Teilchen-
9rSfle (dem M.V.) wSchst.
Die Gelnatur des Protoplasmas, mindestens jedenfalls der 5ufleren
Plasmabezirlce kann keinem ernstlichen Zweifel mehr unterliegen (LE-
~ESCHKrN 1924), und wit sind deshalb berechtigt, die, wie unsere Be-
trachtung gezeigt hat, wohlbegrfindeten Vorstellungen yon. der Netz.
maschenstrulctur der Gele auch au/ das Protoplasma zu iibertragen, wobei
es fibrigens ziemlich gleichgfiltig bleibt, ob wit dabei nur die sogenamlte
,,Plasmahaut" (P~EFFE~) oder, (W~Is 1925, LEPESCH~rN 1924) aueh
den nach innen angrenzenden Plasmabereieh ins Auge fassen. Tat,
s~ehlieh haben ja unsere Versuche gezeigt, daft dutch das Plasma yon
B. mirabilis sehr schwache und Nichtelektrolyte ohne Ri~cksicht au/ ihre
chemische Konslilution oder irgemlwelche physikalischen Konslanlen ( L6s~
70 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

lichkeit, Adsorption usw.) nur gemSfl ihrem M . V . , und zwar bei allmgih
lich abnehmendem M . V . mit wachsender Geschwindigkeit eindringen.
W e liegt, n u n a b e t die Grenze d e r A u f n e h m b a r k e i t (kritische Teilchen-
grSl~e) ? /ffoch a u f e c h t gelSstem o d e r bereits k o l l o i d e m Gebiet ? W i r
k S n n t e n d a r a u f h i n z. B. die A l k a l o i d e u n d F a r b s t o f f e b e t r a c h t e n .
S ~ m t l i c h e Stoffe, m i t d e n e n messende Versuehe a n B. mirabilis aus-
ge~fihrt w u r d e n , miil3ten n~eh d e n Messungen i h r e r G r e n z k o n z e n t r a -
t l o n e n e c h t gel6st sein, a u c h d e r Stoff m i t gr61~tem I~.V. u n t e r allen
gepriiften~ d a s A l k a l o i d Verabrin, d a s in e t w a s l~nger dauerncten Ver-
s u e h e n sieh als permeieff~hig erweist.
Da der eine yon uns (RuHLAI~D 1914) das Problem dos Liisungszustandes
der A]kaloide im selben physiologisehen Zusammenhang bereits friiher einmal
au/gerollt hat, so sei hier anhangsweise erneut Stellung dazu genommen: Er
glaubte damals, aus manchen Erscheinungen sich flit die Annahme der Kolloidit~t
entseheiden zu sollen: Das hgufige Schgumen der w~sserigen LSsungen, beim
Sehfitteln, naeh Art lyophfler Solo, die Ausf~Uung derselben beim Capillarisieren
mit FlieBpapier, entspreehend der posi~iven Ladung der Base, die mit der Kon-
zentration rasch steigende Viseosit~t usw. u. v. a. spraehen fiir diese Anschauung,
zu der auf anderem Wege aueh J. TRAVBE (1914) gelangte. Allerdings wurde
yon RUHLAI~D damals naehdriicLlieh betont (a. a. 0., S. 445), dab ,,diese Stof~e
wohl ziemlich dem hiichs~en, noch als kolloid zu bezeichnenden Dispersionsgebiet
angehSren" und daB ,,einige Basen, wie Coniin, Nicotin und Pilocarpin beim
Capillarisieren fiberhaupt keine Phasentrennung mehr zeigen". ])ies gait ftir
die freien Basen. Die Salze aber fast aUer dieser Basen verhalten sich nun
anders. ,,Nur beim Bulboeapnin ist aueh das Chlorhydrat ausgesproohen kolloid,
die Salze des Berberins und Brucins wandern nieht ganz voUst~indig, die der
iibrigen gepriif~en Basen abet his zum Rand des Feldes mit. Im allgemeinen
enthalten also die w~sserigen LSsungen der Salse nur insoweit koUoide Teflehen,
als sie hydrolytisch aufgespalten sind" (RUHLAI~D1914, S. 446). DaB tatsiieh-
lich in den LSsungen der Hydroehloride nur oder so gut wie ausschlieBlich
einfache )iolekiile vorhanden sind, beweist die Obereinstimmung der ~iir Vera-
tr~n gemessenen Grenzkonzentration mit der z. B. fiir Ra~inose. Hydro-
lytiseh in ganz geringer Menge (vgl. die Bereehnung fiir Coeain bei Rv~r~Nv
a. a. O., S. 404) abgespaltene koIloidale Basenanteile kSnnten dabei wegen der
unvermeidiiehen )/IeBfehler im Spiel gewesen sein. Indessen sch~umen aueh
die eehten LSsungen der Veratrinsalze deutlich beim Sehiitteln, so dab wohl
aueh in denen der freien Basen nur einfaehe Molekiile enthalten sein diifften.
Mit unseren heutigen allgemeinen kolloidchemisehen Ansehauungen w~re das
aueh insofern zu vereinbaren, als in der einscM/~gigen Literatur (z. B. FR~tr~D-
LICH 1924) immer wieder darauf hingewiesen wird, dab die Eigenschaf~en der
kolloiden LSsungen ganz allmgihlich und ~tetig in solehe der eehten iibergehen.
So wKre es in der Tat nicht verwunderlieh, wer~n e~hte LSaungen vo~ 8to]]en
mit so groBem Molekiil, wie es die Alkaloide besitzen, berelts man,he Ersehe~n'angen
zeigen, welche wir typisch an kolloiden ~olen au~ffeprdgt ]~nden. Ein erheblich
geringeres M.V. als Vera~rin besitzen die iibrigen gepriiften Alkaloide: Thebain,
Cocain, Codein, Morphin und Coniin, und so is~ die molekulardisperse I~atur
ihrer L6sungen, wie sie aus der seh6nen, dem M.V. entspreehenden Abs~ufung
ihrer it -Werte hervorgeht, weniger auff~Uig.
I)as Gleiche, was s o e b e n fiber d a s V e r a t r i n gesag~ w u r d e , gil$ n u n
a u e h ffir d a s (vgl. S. 47) Ketonblau 4 BN. A u e h mi~ diesen e r g a b sich
Beggiatoa mirabiUs. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 71

als Grenzkonzentration g e n a u der gleiche G . ~ . - W e r t wie fiir Veratrin~


Raffinose usw. I entspreehencl unseren bisherigen physikochemlsehen
A n s c h a u u n g e n muB es also ebenfalls molekulardisperse I ~ s u n g e n bilden.
W ~ h r e n d wit m i t d e m Veratrin u n t e r d e n Alkaloiden wohl ziemlich
die Grenze des M.V. erreicht h a b e n , gibt es u n t e r den F a r b s t o f f e n
nach allgemeiner A n n a h m e auch ausgesproehen kolloidale.
Wie wit soeben bei den Alkalo!den (S. ~0) die Frage naeh der molekularen
oder kolloidalen N~tur ihrer w~sserigen LSsungen aus und zu beantwor~en
versuehten, erfordert der Zusammenhang das gleiche aueh ftir die Anillnfarbstoffe.
Stat~ der Hochdruckultrafiltration sind bei Untersuehungen iiber den Disper-
sionsgrad der Farbstoffe viel/aeh Diffusionsversuehe in Gelatine verwendet
worden; so z. B. yon OSTWAT.D,H~,RZOG und POLOTZKY(1914) u.a. Der eine
yon uns (RUHLA~D 1912) hatte solche Versuche sehon friihzeitig in einfachster
Weise derar~ ausgefiihrt, dal~ ein kleineres Farbs~offtrSpfehen bestimmter GreBe
auf Gelatinfl~ehen au~gesetzt und die Seitenranddiffusion gemessen wurde.
Bei basisehen wie sauren Farbstoffen, die in grol~er Zahl (30 basisehe und
89 saare unte~sueht warden, Stimmten alle nicht aufnehmbaren dareh ihre sehr
geringe oder fehlende Geldi/fusibilits fiberein, w~hrend die permeieff~hlgen in
hSherem MaBe diffusibel waren, so dal~ sehon nach dem Ausfall der Gelatine-
versuehe das Ergebnis der Vital/s vorausgesehen werden konnte.
Die Frage nun, ob und inwieweit bier Sole yon versehiedenem Dispersions-
grade oder eehte L6sungen mit versehiedenem M.V. des gel~sten ~axbstoffes
vorliegen, wird dutch derar~ige Geldiffusionsversuehe nieht ohne weite~es ent-
sehieden: I n be~de~ l~llen ws das vi~ale und diffusible Verhalten der Farbstoffe
erkls DaB es ausgesprochen kolloidale Farbstoffe gibt, scheint uns 1e~t-
zustehen. Wit erinnern nar an das Ko~gorubi~ &ls Beispiel ffir einen sauren
unc[ N~ch~b~ als ein solehes, f5r einen baslsehen Farbstoff. Beide spielen in
der KoUoidchemie, in der sie als beliebte Beispieie fiir typische Sole immer
wieder zitiert werden, eine besondere Rolle. Indessen gilt letz~eres z. B. ~uch
fiir das bekannte Kongorot, w~hrend HA~TZSC~ (1914) die molekulare Natux
yon dessen Ltisungen mi~ gewiehtigen Argumenten beleg~. Was speziell die
b~sisehen Farbstoffl~sungen ~nbetriff~, so werclen sie neuerdings (z. B. A u ~ R ~ e ~
1923) immer mehr in die l~Iit~e zwisehen molekular- und koUoidgelSste, also
in die sogenannten polydispersen Systeme eingereiht [so z. B. SCHWARZ und
H~A~ (1922) fiir das Toluidinblau], die nebe~ koUoid- gleiehzeitig aueh
molekulardisperse Teilehen enthalten. Auf der anderen Seite mSehten wir unter
den basischen Farbstoffen als unseres Eraehtens unzweifelhaft hochkolloidal
auf die merkwiirdige Triphenylmethanverbindung ,,Firnblau" hinweisen, da
dessen LSsungen beim Erkalten gelatinieren.
I n ]iingster Zeit hat ZSmMONDr (1924) festgestellt, dab beim Kongorot,
sowie den Benzoparpurinen 4 B und 10 B die Differenzen, die sieh zwischen
Loi~higkeitsmessungen und Messungen des osmotisehen Druekes ihrer w~s-
serigen LSsungen ergeben, nicht mig der ,,klassischen" LSsungstheorie in Ein-
klang zu bringen sind~ F/it den Dispersionsgrad, der auf Grund der I~eitf~hig-
keitsbestimmungen uncl osmotischen Messungen bei den drei Farbstoffen als
gleiehgro/~ anzunehmen w~re, weist der genannte Autor abet durch Ultrafiltra-
tion eine weitgehende Versehiedenheit naeh. Es h~lt da~egen evtl. eine Anwen-
dung der Debye-Hiiekelsehen Elek~rolyt~heorie filr aussichtsreich, falls man sich
zur Annahme yon Mieellenbfldung versteht.
Hieran w~re evtL also auch beziiglich der yon uns benutzten basischen
Ke$o~blaus 4 B N zu denkem Der hervorragend ungif~ige Farbstoff ist eine
72 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~it yon

Triphenylmethanverbindungaus der Pa~entblaugruppe. Es gelangen osmotische


i~essungen an B. mirabilis mit sch5ner Genauigkelt, der Grenzwert, in G.M.
ausgedriiekt, stimmte vSllig mit dem yon Raffinose iiberein (Tab. 14). l~ach
der klassischen LSsungstheorie kSnnten also Mo]ekiilkomplexe in der L(isung
nich$ vorhanden sein, denn sonst h~tte die Grenzkonzentration viel hSher aus-
fallen miissen. Sie sind auch schwerlich vorhanden, wenigstens nicht allein
vorhanden, da Zellen yon Spirogyra crassa sieh aus 0,01proz. LSsung nach etwa
3 Stunden vital fgrben (Kerne v6lIig normal, gef~rbte 1Niedersehl~ige in der
Vacuole, keine Adsorption durch die ZeUwand). Die ~ISglichkeit der poly-
dispersen Natur der KetonblaulSsung muB nach den Ausffihrungen ZSIG~o~1)Ys
aber zugegeben werden. - - Die Grenzkonzentration hgtte niedriger ausfallen
miissen, wenn die FarblSsung elektrolytiseh dissoziiert gewesen w~re. Ob nun
eine etwa vorhandene Neigung zur Dissoziation bei diesem Hydrochlorid n u t
durch das ~'aC1 des Solwassers yon Artern (e~wa 3 vH.) zurfickgedr~ngt, oder
bier keine echte Ammoniumbase (HANTZSCI~1904), sondern nur eine schwache
tertiSre Base vorliegt, bleibe dahingestellt.
W~hrend bei anderen Sr mit groBen Molekfilen der Oiffusionskoeffizient
sieh so gut umgekehrt proportional zur Zahl der Molekiile pro Mol verh~lt,
dab man aus ersteren angen~hert das ~I.G. bereehnen kann, also die Diffusions-
geschwindigkei~ mit grSl3er werdendem l~Iolekiil und vermehrter Reibung ab-
nimmt (N~.R~ST 1921) und aueh die Dialysierbarkeit diesen Gesetzen folgt
(z. ]3, BvxTo~ und T~AGUE 1907), hat die Regel bei den Farbstoffen sehr zahl-
reiehe Ausnahmen. Auch die Anzahl der Benzolkerne im Molektil, die nach
VIG~roN (1910) die Diffusibilit~tt bestimmen soUte, ist keineswegs framer aus-
schlaggebend. Eine ganze l~eihe yon auff~lligen Ausnahmen ist yon Rtrar.x~D
(1912, S. 410L) angegeben worden.
Wenn z. B. saute Farbstoffe mit so relativ ldeinem M.G. wie Martiusgelb,
Curcumin S und Aurantia oder unter den basischen das Gallaminblau (mit je
nur zwei Benzolkernen) in Gelen schleeht dffiundieren, und aueh vital nicht
aufnehmbar sind, so wird man aus solehen und ~hnlichen Beobachtungen
(z. B. ]~mpfindlichkelt der genannten ~itro- und AzoxykSrper gegen Elektrolyt-
f~llung usw.) den Schlul~ zu ziehen haben, dal~ die J~elgung, im Kolloidzu~tartd
gelS~t zu ~eln, in den einzelnen Farbstoffgruppen verschieden ausgeprSgt ist nnd
durchaus nicht gmmer mlt dem M.G. w~ichet.
Es ergibt sich daraus, daB, wie seinerzeit bereits yon R u ~ ) (1912) aus-
gefiihrt wurde, Molekulargcwicht (M.G.) und Permeierf~higkeit bei den Farb-
stoffen keine durchg~ngige Beziehung zueinander haben k6nnen. Vielmehr
haben wit bier statt der ersteren die TeilchengrS/3e zu setzen, die nach der Gel-
diffusion, Elektrolytf~Ubarkeit usw. zu sch~tzen ist. Nachdem ffir das sehr fang-
sam aufnehmbare Ketonblau (M.V. der Base = etwa 549,5) der molekulardisperse
bzw. polydisperse L0sungszustand erwiesen ist, kSnnte man evtl. vermuten,
da~ nur derartige Farbstoffe, nicht abet kolloide aufnehmbar sind. DMiir liel~e
sich geltend machen, dal~ die nicht aufnehmbaren basisehen (Basler Blau R
und BB, Viktoriablau B und 4 R~), l~achtblau u.a.) und sauren Farbstoffe

1) Viktoriablau B und 4 R werden nach KL~BS (1919) noch in Farnprothal-


liumzellen aufgenommen, l~ach ihm gilt dies auch ffir das ,, Gallein", ein Pyro.
gallolphthalein, das RCHLAND (1912) als nicht aufnehmbar bezeichnet hatte.
DieserFarbstoif kommt in ,,Teigform" als freie S~ure oder Natriumsalz in den
Handel. Erneute Versuehe mit letzterem best~tigten die Angaben von KLEBS.
Der Farbstoff erwies sich auch als gut geldiffusibel. Da sigh das alte Pr~parat
nicht mehr voffand, konnte das Verhalten dieses nicht mehr nachgepriift werden.
Unsere Wiederholung des Viktoriablau-Versuches verlief dagegen negativ.
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 73

bisher als ffir den hochkolloiden Zustand eharakteristisch bezeiehnete Eigentiim-


liehkeiten ausgesprochen zeigen. Wit miissen abet dahingestellt sein lassen, ob
die Gerenze]~r die Au~nehmbarbeit wirklich mit derjenigen zwischen molelcular-
(evtl. poly-) und botloiddispersen (Molekiilaggregate) zusammenf~llt.
~ber die Geschwindigkeit des Permelerens ist, wie sehon an anderer SteUe
(S. 56) hervorgehoben, aus der Au]nahmegesehwindigkeit 1) nichts Sicheres zu
ersehlieBen, sefern Speieherungen, Adsorptionen usw. im Spiel sind.
Es k a n n deshalb auch nichts fiber die ,,kritische Teilchen-(Mole.
kular-) CrrSfle" angegeben werden, bei der die Grenze fiir die Aufnehm-
barkeit erreicht ist. Veratrin, das freilich molekular gelSst ist, m i t
dem riesenhaften I~I.V. 723,5 wird jedenfalls sicherlich noch sowohl
in B. mirabilis wie in andere Objekte aufgenommen. Auch Enzyme
(R~LAND 1913) vermSgen noch zu permeieren, yon denen friiher z. B.
OPPE~rH~I~Cm~ (1910, S. 28) meinte, ihre Kolloidnatur sei das einzige,
was fiber die N a t u r der meisten yon ihnen m i t Sicherheit ausgesagt
werden kSnne. Abet auch dies ist dutch die neueren Arbeiten EuLE~s,
WILLST:~TTEI~S U. a. erschiittert worden, so dal3 auch sie fiir die Ent-
scheidung unserer Frage nicht in Betracht k o m m e n diirften.
Enzyme sowohl wie das oben genannte Veratrin sind gut geldiffu-
sibel. Letzteres z. B. wandert, bei 18 ~ C, wenn m a n im Reagensrohr
eine 15 proz. Gelatine m i t der m/250 LSsung des Hydroehlorids fiber-
sehiehtet, in 24 Stunden etwa 0,7 em weir in das Gel ein, wie an der
folgenden Reaktion m i t naehdiffundierender JodjodkaliumlSsung erkannt
werden kann. Vergleichende Versuehe fiber die Gelwanderungsge-
schwindigkeit etwa der Alkaloide untereinander oder der Kohlenhydrate
stol~en aber infolge der verschiedengradigen Sch~rfe der Reaktionen im
Gel zum Zwecke ihres Nachweises~) auf sehr erhebliche Sehwierigkeiten.

1) Es erscheint uns deshalb beziiglich der Farbstoffe und anderer, friiher


(R~r~LA~D, a. a. 0. 0.) untersuchter hochmolekularer Stoffe richtiger, die er-
hal~enen Ergebnisse so zu formulieren, dal3 die#nigen .Farbsto]]e usw., seien sie
basischer oder saurer Natur, welche nirgends yon lebenden P]lanzenzellen au]-
genomme~ werden, hochkolloldale wgsserlge L6sungen bilden, und dal~ die au[-
nehmbaren sicherlich h6her d~sperse ~ysteme bilden, Diese S~tze bflden das Haupt-
argument beim diosmotisehen Verhalten der Farbstoffe usw. zugunsten der Ultra-
ffltertheorie, das bestehen bleibt, ~uch wenn man yon der Geschwindigkeit der
Aufnahme wegen deren enger Abh~ngigkeit yon Vorg~ngen sui generis (Speiche-
rungen dutch chemische Reaktionen, Adsorptionen) g~nzlieh absieht. Diese
sekund~ren Vorg~nge haben offenbar zu einer ~bersch~tzung der Permeier-
fahigkeit bei den sulfosauren 1%rbstoffen gefiihrt, wie COLLA~D~R(1921) iiber-
zeugend naehgewiesen hat. DaB sie nut schwer aufnehmbar sind, wSrde zum
hohen M.V. dieser Stoffe gut stimmen. Auf die Bedeutung des Kolloidzustandes
ffir die Aufnehmbarkeit der sulfosauren Farbstoffe in PflanzenzeUen, hat im An-
sehlu0 an HOB~RS Tierversuche, zuerst KiJST~R (1911) hingewiesen.
2) ~ber die Empfindliehkeit der Alkaloidf~llungsreagenzien und ihre 17K1-
lungsgrenzen vgl. z. B. S P R I ~ R (1902).
74 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

3. Die Diffusionsgeschwindigkeit.
Es liegt sehr nahe, angesichts der soeben (S. 72) erw~hnten engen
Beziehungen zwischen Diffusibilit~t und I~I.V. (M.G.), welehe wenigstens
bei Stoffen mit gr6flerem Moleki~l besteht, die ~rage aufzuweffen, ob
man auch ohne die Annahme yon ,,Poren" (Micellarinterstitien) im
Plasma auskommt, und die Versuehsergebnisse allein au/ Grund einer
mit dem wachsenden M.V. abnehmenden Di//usionsgesc~windigkeit er-
kl~ren kann. HERZOG (1910) hat mit einer sich ffir den Diffusions-
koeffizienten nach den Reibungsgesetzen bei Annahme der Kugelform
fiir die gelSsten ~olekfile ergebenden ~ormel, wobei der Kugelradius
dutch das Molekulargewieht, das spezifisehe Volumen der gelSsten Sub-
stanz im festen Zustand und die Zahl der Molekiile l~ro Mol substituiert
wurde, das M.G, aus allen diesen, der Messung zug~ngliehen GrSBen
bereehnet; es ergab sich eine ziemlich gute ~bereins~immung des theo-
retisehen und bereehneten M.G,, sofern es geniigend hoch war, (vgl.
auch I~ER~ST 1921). Leider ist der Vergleich nur ~fir eine sehr geringe
Zahl yon Stoffen durchgefiihrt, die zum Teil wieder noch deshalb ffir
uns unbrauchbar sind, weil sie nicht oder zu wenig permeieren. Immer-
hin kSnnen wir wenigstens zwei der dort behandelten Sboffe, Arabinose
und Rohrzucker, hinsichtlieh ihrer ,,Diffusion" ins Zellinnere und in
Wasser genau vergleiehen, da der ersteren die Permeabilit~skoeffi-
zienten proportional sin&
Tabelle 19.

Stoff I~IG. DArab. ttArab.


D20o ~e
~Sacch.

Arabinose i80,1 0,540 0,81


Saccharose 342,1 0,382 0,40 1,41 2,02

Der Quotient fiir/~ ist also um fiber 45 v. H. grSf~er als der der
Diffusionskoeffizientenfiir 20 ~ Und es kommt bier an einem besbimm-
ten Beispiel nur das zum exakten Ausdruck, was sich auch ergibt,
wenn man die Diffusionskons~anten anderer S~offe mit den ermittels
Werten ftir die Permeabilit~tskoeffizienten vergleieht: •etztere nehme~
mit steigender Moleki~lgrS[3e viel s~hneller ab als die ersteren. Da. nun
weiter die inhere Reibung des LSsungsmittels ~ in der lqernstschen
•ormel
RT 1
n=--

wo N die Molekiilzahl pro Mol, und ~ der l~Iolekiilradius ist, als einfacher
Faktor auftritt, so dfirfen wit schliel3en, dab beim Permeieren keine
freie Diffusion in der Membran und im Plasma stattfindet, sondern da~
Beggi~toa mirabilis. Ein Beitr~g zur Ul~rafilter~heorie des Plasmas. 75

in dem bei steigendem I~I.V. rasch waehsenden Sinken yon # in erster


Linie die behindernde Wirkung der Micellarinterstitien zum Ausdruck
gelangt, wenn auch, wie wiederholt betont wurde, der Zusammenhang
zwischen diesem Widerstand und der Teilehengr6Be (M.V.) noeh keines-
wegs restlos aufgeklirt ist. Wir k6nnen uns daher nicht mit den Argu-
mentationen yon H. FISOHER (1923) einverstanden erkliren, der die
mit den unseren fibereinstimmenden, zuerst yon ZSI(~I~IONDYbegrfin-
deten und in der Kolloidchemie allgemein angenommenen Vorstellungen
fiber die Gelstruktur nicht berfieksichtigt und die in der Physiologic
bereits geklirte Sonderstellung der Elektrolyte (vgl. seine Bemerkungen
fiber KNOB) nieht zu kennen sehein~. Die StoHau]nahme kann eben.
sowenig ein L6slichkeitsphdt'nomen wie ein ein/acher Vorgang /reier DiHu-
sion sein,
4. Zellmembran und Plasma.
Unsere diosmotischen Messungen hatten das eigenartige Ergebnis
gehabt, daB nicht nur die lebenden Protoplasten, sondern aueh die
Zellmembranen sich gegen die untersuchten Stoffe wie Ultrafilter ver-
hielten. Indem wir bezfiglieh der Einzelheiten und auch allgemeiner
Bemerkungen auf die betreffenden Kapitel verweisen, wollen wir hier
nut n0eh einige prinzipielle Er6rterungen naohtragen.
Wit hat~en an toten Fiden osmotische Grenzpunktsbestimmungen
durehgeffihr~, und gefunden, daI~ die Grenzkonzentrationen der Nicht-
elektrolyte wie bei Ver~uehen mit lebenden Zellen mit abnehmendem
M.V. raseh ansteigen, aber allgemein sehr viel hSher liegen ala fiir diese.
Es ergab sich daraus, daB die (toten) Membranen (wenigs~ens die innere)
deren Eiwei$-(Plasma-)natur wir sieherstellen konnten, besonders weit-
porige URrafilter darstellen. Die Stoffe hatten danach unter normalen
Verh~,ltnissen bei ihrem Eintritt in da~ Zellinnere naoheinander zwei
versehiedene Ultrafilter zu pa.ssieren, zunichst ein weitporigeres, die
,,2r sodann das viel engporigere Plasma.
Beim ersten Blick a.uf diese Zusammenh~nge kSnnten sieh vielleicht
gewisse Zweifel ergeben, ob denn nieht vielleieht nur die Membran
und ob tatsiehlieh auBcrdem auch das Plasma als Ultrafilter wirke,
und nicht vielmehr bei der Aufnahme der Stoffe nur noch die Rolle
eines einfaehen Diffusionsweges in die Vacuole spiele, so daB, wie tat-
s~ehlich festgestellt, aueh bei dieser Annahme das Eindringen in lebende
Zellen langsamer als in tote erfolgen miiBte.
Eine 8olche Auffassung kann aber der einfachsten Uberlegung nicht
standhalten. Es miiBten doeh dann, da nach ahem was wir wissen das
Plasma seine besonderen diosmotisehen Qualititen hat und keineswegs
alte Stoffe gleichmiflig passieren liBt, diese QualitRten, etwa eat-
sprechend der Lipoid-, Haftdruck-, Adsorptions- oder einer andern
Theorie zweifellos eine tiefgreifende Modifizierung der Aufnahme-
76 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

geschwindigkeit der zun~cbst durch die Yfembran naeh dem Ultra filter-
prinzip eingedrungenen S~offe bewirkt haben. Davon ist abet nicht
das Mindeste zu bemerken, vielmehr kommt die Ultrafilterwirkung in
der Reihenfolge der passierenden Stoffe gem~B ihrem M.V. rein und
klar zum Ausdruek.
Die Annahme aber, die m~n weRer naeh dieser Riehtung bin er-
sinnen k5nnte, da~ das Plasma 8peziell var~ B. mirabili8 flit aUe Stoffe
gleiehm~Big v511ig durehl~ssig sei, erseheint uns fast zu absurd, um eine
ernsthafte Widerlegung zu verdienen. So kSnnen wir uns damit be-
gnfigen, auf drei Punkte hinzuweisen, einmal, dab das Beggiatoen-
pl~sm~ gegen ~norganische Salze dasselbe eigenartige Verhalten zeigt,
wie es 1iir andere lebende Zellen so charakteristisch ist, ferner d~lt es
in gleieher Weise wie diese Chrysoidin vital speiehert und endlieh, dal~
es seine besonders geartete •162 bei der Stoffaufnahme schon
dadurch dokumentiert, dab es sowohl anorganische wie organisehe Stoffe
nicht einfach gemal] dem bekannten Fieksehen Diffusionsgesetz, d. h.
mit einer dem Konzentrationsgefglle innen : auBen proportion~len Ge-
sehwindigkeit passieren lgftt, sondern es sind im Gegenteil, wie mehrfach
betont uncl ~hnlich dem, was man aueh a~ andern lebenden Zellen
mehrfaeh beobaehtet hat, bei waeh.sendem Gef~lle starke Verz6gerungen
in der Aufn~hme zu beobaehten, die aueh auf eine zeitliehe Ungleiehheit
derselben w~hrend des Ver~uehs sehliel3en lassen.
Die Passierbarkeit toter F~den ist so groB, da~ kein Stoff mit sieher
bek~nntem lVI.G. (~.V.), gefunden werden konnte, der nieht yon ihnen
~ufgenommen werdeu konnte. Aus diesem Grunde konnten fiir die
Membr~n die Werte der Permeabilit~tskoeffizienten nieht bereehnet
werden. Vergleieht man aber die Grenzkonzentrationen (G) der Stoffe
fiir lebende und tote Fgden miteinander, indem m~n etwa den Quo-
tienten beider bilde~, so sieht man, dal~ der Quotient Gle~" : Gt~ mit
kleiner werdendem M.V. yon 34,6 fiir Raffinose sehr raseh auf 1,71 fiir
H~rnstoff sinkt. Der Durehlgssigkeitsuntersehied is~ ~lso fiir grSl~ere
Molekiile weir erheblieher als fiir kleine, wie es beim Vergleigh zweier
Ultrafilter mit versehiedener Porenweite erwartet werden muB.
Die Dinge kSnnten nun aber sehr wohl aueh so liegen, d~l] beim
natiirliehen Absterben bzw. der kiinstlichen T6tung eine Dispersions,
verminderung, also VergrSberung der Mieellarinterstitien der Innen-
membran erfolgt. Auf Grund wiehtiger Beob~chtungen miissen wir
dieser eine der ,,Pellieula" der Protozoen ghnliche Beschaffenheit zu-
schreiben (S. 19). Da sie nun aber lest mit der AuBenmembran
verbunden ist, so erkl~rt sich daraus die bei der Plasmolyse be-
obaehtete mangelnde Abl6sung des Protoplasmas yon der Gesamt-
membran. In die an sich nicht plasmatisehe Aul3enmembran hinein
abet mu~ sieh wohl das Plasma der Innenmembran, in intimster Weise
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 77

mit deren Bausteinen verkettet, hineinerstrecken. Zu dieser Folgerung


fiihrte uns die Beobachtung, daB die merkwiirdige,,Spaltung" der ~em-
bran in ihre beiden Sehiehten an toten ~ d e n nieht mehr geling% d ~
diese sieh also beim Tode (aueh dem natiirliehen) tiefgreffend verKndert
haben mug. Wir gelangen also dazu, der Augenmembran prinzipiell
dieselbe Struktur zuzuerteilen, d. h. eine innige, dauernd erhalten
bleibende Beziehung zum lebenden Plasma, welehe IffANSTEEN-CRANNER
(1910, 1914, 1919, 1922) und manehe anderen Forseher (z. B. M~cDou-
GAT~L1923) auf Grund ganz andersartiger Beobaehtungen fibereinstim-
mend aueh fiir die Zellhaute anderer Pflanzen neuerdings in Ansprueh
nehmen. ]Kit der eigenartigen Semipermeabilit~t, die gewisse, ganz be-
sondere (cutlni~ierte)Zellhaute yon Samen usw. bei Versuehen mit
SalzlSsungen zeigten [Literatur z. B. bei STILES (1923)], hat natiirlieh
diejenige der (plasmatisehen) Innenmembran yon B. qnirabilis nieht
das Mindeste zu tun.
B. Ausblick auf andere Objekte und die Frage der Porenweite.
Im Hinbliek auf unsere mit B. mirabilis erhaltenen Versuchsergeb-
ni~se drangt sieh die Frage, wie sich denn nun andere Pflanzenzellen
gegen eeht gelSste Nichtelektrolyte verhalten mSgen, mit solehem Nach-
druck hervor, dag wit noch kurz auf sie eingehen m5ehten, obwohl wit
neue Beobaehtungen und Messungen an solchen Objekten nicht mit-
zuteflen haben. Man mug sich unseres Erachtens davor hiiten, die Eigen-
art yon B. mirabilis etwa gem~g ihrer bekannten ern~hrungsphysiolo-
gischen Besonderheiten zu iibersch~tzen. Wir sind geneig~, in ihr mit
andern Forschern nicht mehr als eine apochlorotisch gewordene Cyano-
phycee zu sehen, die nicht einmal ein be.sonders eigenartiges Medium
bewohnt.
Daraus folgt natiirlieh noch nicht die Allgemeingfiltigkeit der an
ihr festgestellten diosmotisehen Gesetzm~Bigkeit. Aber es scheint uns
doeh manches dafiir zu sprechen. Es ist dies vor allem der Umstand,
dab der eine yon uns (RUHLAND 1912, 1914) fiir eine Reihe hochmole-
kularer Stoife an gewShnliehen Pflanzenzellen verschiedener Art, und
an diesen zuers L ganz entspreehende Durchl~ssigkeitserscheinungen be-
obachten konnte, welche ja ihrerseits zur Aufstellung der Ultrafflter-
theorie Veranlasstmg gaben. Die damals allein behandelten hoehmole-
kularen Stoffe wurden, entsprechend dem seinerzeitigen Stande unseres
Wissens als mehr oder weniger typisehe Kolloide angesehen, w~hrend
dies gerade na~h unsern obigen Untersuehungen (vgl. S. 70--73)
nieh~ mehr tmbedingt haltbar ist, sondern der gr6gere Tell yon ihnen
wohl sich in Wasser molekular 16st.
Man mSchte deshalb um so eher geneigt sein, eine allgemeine Giiltig-
keit der Ultrafiltertheorie aueh fiir die iibrigen echt gel6sten Nicht-
78 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Perme~bilit~t yon

elektrolyte, d.h. diejenigen mit kleinerem Nf.V. auzunehmen, wie wit


sie ffir B. mirabilis erwiesen haben. Indes,sen fehlt der Nachweis. E.S
.seheint .sieh auch niem(als dafiir eine Andeutung gefunden zu haben, .seit
YI. TRAUBE (vor mehr als einem halben Jahrhundert) .seine NIolekfilsieb-
gheorie aufgestellt hat. Es i.st aueh auffallenderweise kaum versucht
worden, daraufhin systematische Untersuchungen anzustellen. Die ein-
zigen, vle]e sehr verschiedenartige Stoffe umfassenden Versuehe ver-
danken wir OV]~RTON, welehe bereits aug S. 2ft. kri~isch be~raehtet
wurden. Da er nicht dazu gelangt, exakte, genauere Angaben fiber .seine
Versuehe und ihre Resultate zu publizieren, sondern fiber einige, sehr
allgemein gehaltene vortragsartige DarsteUungen nieht hinau.sgelangt
ist (am relativ eingehendsten sind seine Y[itteilungen y o n 1895), so
kSnnen sie kaum eine befriedigende Grundlage fiir die Entscheidung der
aufgeworfenen Frage bieten. Vor allem aueh deshalb, weil er, wie
mit Sicherheit aus seiner Darstellung hervorgeht, sehr verschiedenartige
NIethoden anwendete, deren Resultate sich zweifellos nieht miteinander
vergleichen lassen (vgl. z.B. oben S. 64). Es ist deshalb nicht nut
mSglieh, sondern naeh unseren Erfahrungen sogar sehr wahrseheinlich,
dab er dadurch vielfach zu schweren Trugschlfissen geffihrt worden ist.
So kSnnte hSehstens etwa seine Tabelle V (1895) und zwar deren erster
Teil mit allem Vorbehalt zugunsten der Ultrafiltertheorie gedeutet wer-
den1). DaB man nut aug Grund der ~[essung der zur Permeabilit~t pro-
portionalen Permeabilit~tskoeffizienten und seines Verh~ltnis,ses zum
~.V. zu einer riehtigen Bewertung der Aufnahmegesehwindigkeit im
Sinne unserer Zusammenh~nge gelangt, geht mit besonderer Deutlich-
keit bei B. mirabilis am Beispiel des Antipyrins hervor (S. 58), wi~hrend
ohne dies der Grad seiner Aufnehmbarkeit auch bei ibm bedeutend fiber-
sch~tzt werden muir.
OVERTON hat - - n o e h bevor er zur Aufstellung seiner Lipoidtheorie
gelangte - - vor allem Besonderheiten in der ehemisehen Konstitution,
also die Wirkung gewisser •olekiilgruppen als entscheidend fiir die
vitale Aufnehmbarkeit angesehen und hat erst .sparer den roten ~aden
aller Einzelheiten in einem dutch diese Konstitution gesetzm~Big beein-
flul~ten Grade der LSslichkeit in Lipoiden gefunden zu haben geglaubt.
Bei sp~teren Untersuchungen, besonders im Zusammenhang mit der
1) Es ist dies die Reihe: Methylalkohol(42,8) oder/~tbylalkoho] (62,4) ~ Gly-
kol (65,5) > Glycerin(87,8) > Ery~hrit (130,2) > Arabinose (153,4) > Hexosen
(180,1) und Mannit (189,2). Die M.V. wurdeu in Klammern zugefiigt. Als
Vertreter der Alkohole Cn H2n+l OH wiirden nut Methyl- oder ~thylalkohol
geeignet sein. Die Reihe ~thylalkohol > Glycerin > Erythrit > Mannit >
Traubenzueker wurde aueh fiir TierzeUen (BlutkSrperehen, quergestreifte Mus-
keln, Daxmepithel) 5fret gefunden (vgl. z. B. HSBE~ 1922, S. 476), abet immer
im Sinne der Lipoidtheorie gedeutet (Zunahme der Z~hl alkoholischer OH-
Gruppen).
Beggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafilter~heorie des Plasmas. 79

Narkose, ist man sogar vielfaeh dazu gelangt, innerhalb der homologen
Reihen, z. B. der Alkohole usw., eine mit steigendem M.G. wachsende
Aufnahmegesehwindigkeit anzunehmen, Es wurde im Laufe der vor-
liegenden Arbeit an mehreren Stellen betont, dab die Permeierfihigkeit
eine Sache fiir sieh darstellt, die nur rein zum Ausdruck gelangt, wenn
sekund~re Vorginge der Speicherung, Adsorption usw. nicht im Spiele
sind. Naeh den bekannten Arbeiten O. WARBtmGs seheint uns aber
vSllig festzustehen, dal3 bei der ~ r k o s e und gewi$ aueh bei munclaen
andern Aufnahmevorgingen Adsorptionen die weitaus aussehtaggebende
Rolle spielen. W o e s sich also um eine Erklirung der Plasmadurch-
l~ssigkeit handelt, miissen derartige Stoffe, die auch bei OVERTONin
auffallend groBer Zahl vertreten sind, zu fundamentale~ Irrungen Ver-
anlassung geben.
Man wird diese Gesiehtspunkte scharf im Auge behalten miissen,
wenn man die niedriger molekularen Stoffe auf ihre Permeierf~higkeit
an gewShnliehen Pflanzenzellen priift. Das ersehwert die L6sung des
Problems ungemein. Sie wird leider noah waiter dadureh ersehwert,
dab die geeignetsten, d. h. unzweifelhaft indifferenten Stoffe, wie z. B.
die Zuekerarten wohl allgemein zu langsam permeieren, als dab dies
plasmolytiseh einwandfrei gemessen warden kSnnte.
Als wir unsere Untersuchungen an B. mirabitis begarmen, glaubten
wit auch bei diesen ungemein giinstigen Objekt uns aus den eben er-
wahnten Griinden vor ahem auf solehe ,,indifferenten" Stoffe stiitzen
zu ~ollen; um so grSger war unsere ]~berrasehung, als sieh herausstellte,
dab die Gunst des Objektes, viel grSBer als unsere weitgehendste Er-
wartung, die Messungen aueh an so vielen andersartigen Stoffen ge-
stattete. Waren bei B. mirabilis, die ihrem Artnamen aueh hierbei
Ehre maehte, die erw~hnten sekunda.ren Erseheinungen im Spiel ge-
wesen, so hitte sieh niemals die sch6ne M.V.-Reihe ergeben kSnnen,
die tatsiehlieh gefunden wurde. Zeigten dies doeh aueh die zahlreieh
gepriiften Farbstoffe, yon denen kein einziger im Zellsaft gespeiehert
oder adsorbiert wurde. Die iVf.V.-Reihe hitte sich ebensowenig ergeben
kSnnen, wenn die konstitutiven Besonderheiten der Stoffe, die OVE~TON
im Auge hatte, fiir die Geschwindigkeit des eigentlichen Permeierens
eine wesentliehe Rolle gespielt bitten. Selbst unter chemisch nahe
verwandten Stoffen war niehts davon zu merken. So soil naeh OVERTON
die Zahl tier alkohoIischen Hydroxylgruppen yon erhebliehem Einflul~
sein, so da$ einwertige Alkohole raseh eindringen, mit steigender Zahl
der genannten Gruppen aber die Importf~higkeit raseh abnimmt.
Das yore ~orpholinkem abzuleitende l~Iorphin hat zwei alkoholisehe
OH-Gruppen, im Codein ist eine derselben durch eine l~Iethoxylgruppe
ersetzt, beim Thebain sogar beide. Trotzdem 0permeiert Thebain,
und zwar ganz gemi$ seinem hSheren M.V., in deutlieh megbarer
80 W. Ruhland und C. Hoffmann: Die Permeabilit~t yon

Weise langsamer als die beiden andern genam~ten Alkaloide 1)


(Tabelle 13, 14).
Wenn man die Vorstellungen der UltrafiRertheorie zugrunde legt,
wird man annehmen diirfen, dal~ mit enger werdenden Filterporen die
im einzelnen noch unbekannten iibrigen Wechselbeziehungen der per-
meierenden Stoffe zu diesen eine grSl3ere Rolle spielen werden, dal~ auch
wohl Beeinflussungen der Aufnahmegeschwindigkeit, z. B. dutch Tem-
peratur, und Beleuchtungsvcrti~ltnisse (J~hreszeiten), w i e sic dutch
LEPESCHKIN (1909), TR(JNDLE (1910 USW.), FITTL~G (1919) USW. sicher
bekannt geworden sind, mehr in den Vordergrund ~reten werden, und
also mehr oder weniger bedeutende Abweichungen yon der Ultrafilter-
regel zu erwarten w~ren. So permeiert n~ch FITTING (1919) Harnstoff
in Epidermiszellen yon Tradescantia discolor langsamer als Glycerin.
Lgge die Sache etwa so, da~ nur ffir hochmolekulare S6offe (Enzyme,
Gerbstoffe, Farbstoffe, Alkaloide, Glykoside, Saponine, Kohlenhydrate
usw.) and fiir solche mit kleinem M.V. (z. B. elementare Gase, soweit
sie wasserlSslich sind, Kohlens~ure, einwertige Alkohole usw.) (~berein-
stimmung mit den Forderungen der Ultrafiltertheorie bestiinde, wi~hrend
etwa far den gesamten mittleren Bereich des I~.V. andersartige, noch
unbekannte Beziehungen der Stoffe zu den Poren des Plasmagels oder
besondere, nach den AuBenbedingungen weehselnde physiologische Dis-
positionen die zugrtmde liegende Gesetzm~Bigkeit verdeek~en, so w~re
der praktische Wert der Ultrafiltertheorie far diese Objekte nur gering
zu nennen. Und doch sehiene uns wissenscha]tlich auch dann etwas
gewonnen, wenn die Theorie, wie wir vermuten mSchten, g]eichsam nar
den groi~en Grtmdrahmen abgeben wiirde, innerhalb de,sen noch sehr
weiter Raum w~re far das Spiel jener physiologischen Di~positionen und
mSglieherweise auch noeh maneher physikalischen uncl chemischen Be-
sonderheit des Plasmas sowohl wie der Stoffe.
D~fiir daI~ quantitative Verschiedenheiten in den ~tatischen Eigen-
sch~ften der Protoplasten bestehen, die in einer allgemein grS~eren bzw.
geringeren Durchl~ssigkeif derselben zum Ausdruck kommen, kann, wenn
man auf diese hin etwa die (abnehmende) Reihe: B. mirabilis ~ Nieren-
epithelzellen ~ Bacterien(?) ~ gewShnliche Pfla~z~nzellen betr~ehte~,
kaum ein Zweifel sein. im Sinne der Ul~rafiltertheorie h~i.tten wit sic
durch eine mi~ der genannten Reihe symbate Abnahme der durchschnitt-
lichen Porenwei~e der Plasmagele zu erklgren. So ~mrde der Sachverhalt
bereits vor langerer Zeit vom einen yon uns (RUHLA~D 1913, S. 429,
1914, S. 75) aufgefal~t. Besonders wichtig erscheint, in diesem Zusam-

1) ]~ei den Alkaloiden mi~ grOBeren Affinit~tskonstant,en (staxken terti~iren


Basen oder gar quatern~ren Ammoniumbasen) diirfte sich die Dissozia~ion (vgl.
anorganische Salze) fiir des Permeieren sehr bemerkbar machen.
t~cggiatoa mirabilis. Ein Beitrag zur Ultrafiltertheorie des Plasmas. 81

m e n h a n g e n o c h m a l s zu b e t o n e n , d a ~ HOBER, welcher als e r s t e r die h o h e


B e d e u t u n g des D i s p e r s i o n s g r a d e s d e r s a u r e n F a r b s t o f f e ffir ihre v i t a l e
A u f n e h m b a r k e i t i n N i e r e n e p i t h e l z e l l e n des F r o s c h e s e r k a n n t e , welter
festgestellt h a t , d a b a u s g e s p r o c h e n k o l l o i d e basische F a r b s t o f f e (wie
B a s l e r B l a u R u n d BB, V i k t o r i a b l a u B u n d 4 R u n d N a c h t b l a u ) , d i e in
Pflanzenzellen n i c h t m e h r passieren, y o n j e n e n n o a h a u f g e n o m m e a wer-
d e n (HSBER u n d NAST 1913) u n d d a s Gleiche f a r eine ganze R e i h e saurer
F a r b s t o f f e g e f u n d e n h a t , (1919) y o n d e n e n n u r die grSbst dispersen
n i c h t m e h r a u f n e h m b a r waren. D a a b e t A u f n e h m b a r k e i t u n d ,,Fgr-
b u n g " , n i e h t s t r e n g a u s e i n a n d e r g e h a l t e n w a r d e n , wie a u c h i n a n d e r n
d e r a r t i g e n t i e r p h y s i o l o g i s c h e n U n t e r s u c h u n g e n , so k o n n t e d i e Gesetz-
mgBigkeit n i c h t restlos k l a r h e r v o r t r e t e n .
B o t a n i s c h e s I n s t i t u t Leipzig, 15. Nov. 1924.

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