Técnicas de análisis hematológico

06.10.2016 (jueves)

PRACTICA: Extensión de sangre venosa periférica.

A. FUNDAMENTO:

Realización de extensión de sangre venosa periférica anticoagulada con EDTA utilizando como
método para realizarlo dos portaobjetos.

 La sangre y sus componentes

La sangre es un líquido viscoso que fluye en las arterias, venas y capilares de todos
los vertebrados, este líquido es de color amarillento, pero, debido a la presencia de
hemoglobina contenida en los eritrocitos tiene el color característico de rojo.

La sangre se divide en dos fases o elementos que son:

1. Fase Liquida.- compuesto por el plasma sanguíneo.

2. Fase Sólida.- compuesto por elementos formes que incluye a los leucocitos, glóbulos
blancos y plaquetas.
  Características y zonas de una extensión sanguínea:

Debe ser lisa, sin agujeros (presencia de grasa), ni rayas (velocidad no constante), con los
bordes laterales visibles y separados aproximadamente 1mm de los bordes del portaobjetos.

La extensión debe poseer tres zonas: cabeza, cuerpo y cola.

1.- Cabeza: Zona inicial, más gruesa. Los hematíes pueden estar formando más de una capa
(apilamiento en forma de monedas) y hay más proporción de linfocitos debido a su tamaño.

2.- Cuerpo: Zona media. Los hematíes se disponen formando una sola capa y los leucocitos
se encuentran en proporción equilibrada.

3.- Cola: Zona final, es más fina. Los hematíes se disponen de forma acordonada dejando
huecos entre ellos y hay una mayor proporción de leucocitos grandes (granulocitos y
monocitos) y plaquetas grandes. La cola termina en forma ligeramente redondeada con bordes
ligeramente deshilachados (barbas).

¿Cuál es la “zona ideal” para la observación?

Zona en la que se encuentra los componentes celulares bien proporcionados, sin montarse
unos en otros y casi sin rozarse, los leucocitos se encuentran en distribución proporcional.

Esta zona se suele encontrar entre final de cuerpo y principio de cola.

Extensión correcta y ejemplos de extensiones de sangre periférica artefactadas y no
valorables.

 Factores que influyen en la calidad del frotis:

+Portaobjetos: Limpios y desengrasado.

+Muestra de sangre:

-Volumen adecuado.

-Las mejores extensiones se consiguen con sangre antigoagulada con EDTA. (tapón
violeta)

+Ejecución de la técnica:

-Hacer que la gota se absorba por capilaridad por todo el borde extensor.

-Angulo correcto del portaobjetos extensor: 35º-45º.

+Velocidad del portaobjetos extensor: rápida y constante.

+Presión ejercida durante el deslizamiento por el portaobjetos extensor: homogénea y

uniforme.

¿ Cuál es la técnica más habitual para realizar la extensión?

Mediante la técnica del portaobjetos en cuña.

 B. OBJETIVO:

Aprender a realizar extensiones sanguíneas, ya que van a ser una herramienta fundamental en
el estudio y diagnóstico de muchas enfermedades y anomalías hematológicas.

C. MATERIAL QUE USAREMOS:

-Muestra de sangre venosa anticoagulada procedente de banco de sangre.

-Capilar.

-Gradilla.

-Dos portaobjetos bien limpios, de 7´5 x 2´5 cm, con bordes biselados.

-Lápiz.

-Papel de filtro.

-EPI.

-Caja guarda portaobjetos.

D. PROCEDIMIENTO : TECNICA DEL PORTAOBJETOS EN CUÑA.

1. Preparación de todo el material en la zona de trabajo.

2. Remover con suavidad el tubo de muestra con giro de 180º para mezclar las dos
partes de la sangre ( parte forme y líquida) . Es importante hacerlo con cuidado para
no romper hematíes.

3. Cogemos parte de la muestra con ayuda de un tubo capilar.

4. Depositamos una gota de sangre aproximadamente de 3 mm. de diámetro en el porta

objetos soporte, cerca de uno de los extremos.

5. Colocar el portaobjetos extensor sobre el soporte , por delante de la gota de sangre,

formando cuña en un ángulo de 35-45 grados.

6. Deslizamos hacia atrás despacio el portaobejtos extensor para repartir por capilaridad
la gota de sangre sobre el borde.
 7. Deslizar el portaobjetos extensor sobre la longitud del portaobjetos soporte en un
movimiento rápido, suave y continuo, manteniendo en todo momento el ángulo entre
ambos y una presión homogénea. De esta manera formamos una capa uniforme,
formando una monocapa de células que ocupa aproximadamente , entre 2/3 y ¾ de
la longitud del portaobjetos soporte.

8. Dejar secar la extensión al aire.

9. Marcar la muestra.

E) INTERPRETACION:

En total realice aproximadamente 40 extensiones, teniendo fallos como presión inadecuada,

cantidad abundante de sangre, cantidad escasa de sangre, portaobjeto con grasa, etc.

Entre todos los intentos obtuve 3 frotis aceptables para tinciones y posterior observación.