El kinases ATR y la tensión de réplica de ADN de señal de ATM

Para enfrentarse con el desafío constante de daño de ADN encontrado por reproduciendo el ADN,
las células activan una red compleja de senderos que actúan recíprocamente que conducen a la
reparación del daño y la reanudación de progresión de ciclo de célula normal o a la muerte de
célula programada. Esta red coordina la activación de puntos de control de ciclo de célula, los
senderos de reparación de ADN apropiados, y numeroso otras respuestas [41]. Uno de los
componentes centrales del DDR es el serine-threonine kinase Ataxia Telangiectasia la proteína
Transformada (el ATM), que numerosos personajes llave phosphorylates en varias ramas del DDR
[42] [y 43]. El ATM es un miembro del phosphoinositide 3-kinase (PI3K) - la proteína relacionada
kinase (PIKK) la familia, que también incluye Ataxia Telangiectasia y Rad3 la proteína Relacionada
(ATR) - se refiere al Higo 1. El ATM transforma una respuesta a varios estímulos, pero el más
prominente al ADN DSBs. Al contrario ATR es la llave kinase en la señalización de la respuesta a
ssDNA, que puede ocurrir en DSBS persistente, pero más extensivamente sobre tenedores de
réplica parados [44].

Función del ATR

ATR es activado por su reclutamiento físico al ss-ADN la proteína obligatoria RPA, que por
separado junta los dos componentes del sendero ATR. Por un lado, RPA recluta ATRIP, que está en
un complejo con ATR y así trae el kinase a la lesión de ADN. De otra parte, RPA reclutas Rad17, que
cargan el Rad9-Hus1-Rad1 (9-1-1) el complejo. Este complejo es entonces esencial para reclutar y
colocar el activador allosteric TopBP1. Dentro de la proximidad cercana, TopBP1 activa ATR. A
pesar de los numerosos sustratos de ATR, el acontecimiento clave que traduce la actividad ATR en
una señal de punto de control sobre todo puede depender de un objetivo solo, que es el
phosphorylation y la activación de CHK1 [44]. ATR y/o la inhibición CHK1 causa defectos de punto
de control y la fractura de cromosoma, más lejos consolidando la noción que los puntos de control
de ciclo de célula de algún modo previenen el derrumbamiento de tenedor incontrolado [45]. Sin
embargo, el mecanismo que gobierna la regulación global de puntos de control vía la inhibición de
nuevos orígenes de réplica de ADN de encender por el sendero ATR/CHK1 para mantener la
estabilidad de tenedor local permanece confuso. Hay dos mecanismos posibles, en primer lugar el
punto de control que se señala en la zona afecta componentes de tenedor de réplica, que se
contribuirían directamente para bifurcarse la estabilización. En segundo lugar, ATR la señalización
regula la reparación de recombinational, que es necesaria para comenzar de nuevo se derrumbó
tenedores. Toledo y colegas demostraron otro mecanismo, que explica como ATR protege
tenedores de réplica en la zona y suprime el origen que enciende a escala mundial. Cuando ATR es
activado por ssDNA RPA-CUBIERTO generado delante del tenedor de réplica parado, CHK1 difunde
a escala mundial por el núcleo, donde esto inhibe el nuevo origen que enciende [46]. Esto asegura
que RPA permanece en el exceso sobre ssDNA por limitando el número de tenedores parados a
aquellos que eran al principio activos en el inicio de la tensión de réplica. Si ATR suspensos
señalados, el fuego de orígenes inactivo, y ssDNA recién generado cada vez más agota RPA
nuclear. Cuando todo el RPA se hace secuestrado, cada replicon activo genera ssDNA sin
protección, que rápidamente es convertido en DSBS [45] [y 46]. Recientemente, Yamada et al.
mostró que en la activación de células humana del sendero ATR/CHK1 causa la estabilización de
chromatin-atado Cdc7-preguntan el complejo kinase (homolog humano de cdc7-Dbf4) que es
necesario para la iniciación de réplica normal y origen que enciende [47]. Sin embargo, sobre
staling de réplica, requieren la activación de complejo cdc7/ASK por el sendero ATR/CHK1 para la
reparación de carretera de circulación de lesión eficiente, así previniendo el derrumbamiento de
tenedor en las condiciones de tensión de réplica.

Las funciones de ATM

Aunque ATR, como se considere, sea kinase principal el mediar la respuesta a la tensión de
réplica, principalmente debido a su capacidad de activar el punto de control de fase de intras,
pruebas existen para apoyar un papel para la activación de ATM en respuesta a la tensión de
réplica. Un aspecto de función de ATM en estas condiciones podría ser la activación del sendero
de reparación de nueva combinación homólogo, que es importante para el nuevo principio de
tenedores de réplica derrumbados y recuperación de réplica después de la inducción de tensión
de réplica [48]. Esta función puede requerir el reclutamiento del complejo MRN en los sitios de los
tenedores de réplica parados o derrumbados que promueven la nueva sección de final de ADN, el
primer paso importante para la nueva combinación homóloga. El reclutamiento del complejo MRN
a los sitios de daño de ADN es importante para la activación de ATM en respuesta a la radiación de
ionización (IR) - indujo DSBS. Requieren a los miembros MRN complejos Mre11 y Nbs1 para la
recuperación eficiente de réplica después del tratamiento con la réplica que para a agentes como
hydroxyurea [49] [y 50]. Sin embargo, la necesidad de una interacción entre el ATM y Mre11 y
Nbs1 en los sitios de tenedores parados deja una materia de controversia. Ciertos estudios indican
que el reclutamiento del complejo MRN después de la réplica acentúa aportes a de la activación
de ATR más bien que el ATM que señala [51], [52] [y 53]. Sin embargo, otro estudio sugiere que
tanto requieran el ATM como ATR para el nuevo principio de tenedor eficiente Mre11-
dependiente y la prevención de acumulación DSB durante la réplica impasible y después de la
tensión de réplica químicamente inducida [54]. Aparte de la nueva combinación homóloga, el ATM
también puede influir en el nuevo principio de tenedor de réplica por directamente regulando el
ADN helicases WRN y BLM, que ambos requieren para la resolución de intermedios de réplica y
son ambos sustratos de ATM [55] [y 56]. Dos estudios independientes muestran que activó el ATM
es reclutado a focos chromatin en los sitios de sitios comunes frágiles después de la tensión de
réplica suave inducida por aphidicolin [57] [y 58]. Al igual que esto, el agotamiento de ATM
además de la pérdida ATR causa la fragilidad aumentada en CFS comparado al agotamiento de ATR
solo, apoyando un papel para el ATM en el mantenimiento de estabilidad de cromosoma después
de la tensión de réplica [59]. Según el modelo propuesto, el ATM es activado después de la
formación de ADN DSBs que surge en una etapa posterior como consecuencia del
derrumbamiento de tenedor de réplica o la fractura chromatin en los sitios de ADN inreproducido
durante mitosis. Si el papel de ATM es restringido únicamente a la activación de punto de control y
la reparación de ADN en respuesta a DSBS que surge como consecuencia del remoto tratamiento
de intermedios de réplica permanece confuso. Evidencie el desafío esta vista es limitada, sin
embargo la intriga, sobre todo considerando la falta de información en la naturaleza exacta de las
lesiones de ADN específicas que surgen en los sitios de tenedores parados y el ADN reproducido
de forma incompleta. Por ejemplo, la inducción de tensión de réplica por las dosis bajas del
topoisomerase yo el inhibidor camptothecin causa la activación de ATM en ausencia de DSBS
perceptible [60]. Datos además recientes de un análisis a gran escala de proteínas expresamente
localizadas en tenedores parados después de la tensión de réplica mostraron el reclutamiento de
ATM en chromatin naciente en una temprana etapa de réplica de ADN [61]. Sin embargo, no han
confirmado un papel para el ATM en la temprana respuesta a la tensión de réplica y más estudios
serán necesarios para clarificar esto. Además, el tipo, la intensidad y la duración del estímulo
podrían ser factores críticos que determinan la contribución relativa de cada sendero a la
respuesta final. Además de NBS1, ATM posee un segundo cofactor; ATMIN (también sabido como
ASCIZ) que ha sido descrito [62] [y 63]. ATMIN actúa recíprocamente con el ATM que usa un
adorno homólogo a él de NBS1 [62]. Antes lo han mostrado usando siRNA accesos en líneas de
célula humanas y usando el ratón ATMIN-DEFICIENTE fibroblasts embrionario (MEFs) que ATMIN
tiene una función complementaria a NBS1 en lo que concierne a la activación de ATM: ATMIN es
prescindible para la señalización de ATM IR-induced, pero la activación de ATM después de la
réplica y la tensión de hypotonic es mediada por ATMIN [62]. De ahí, NBS1 y ATMIN requieren
para la activación de ATM en una manera de dependiente de señal [64]. Los intermedios de réplica
inresueltos pueden ocurrir durante las fases de S/G2 del ciclo de célula y pueden ser convertidos
en lesiones de ADN en la fase de M en particular en DSBS. Lo han mostrado que una proteína que
ata a p53, sabido como 53BP1 [65], está implicada en el proteger regiones genómicas expuestas a
la réplica acentúan y es reclutado a tales sitios en una manera DEPENDIENTE DE ATM. 53BP1
forma cuerpos nucleares en tales sitios de lesiones de ADN no reparadas en la fase de G1
subsecuente para proteger estas regiones contra la erosión [58].