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1. Introducción
En su mayor parte, los microorganismos son demasiado pequeños para observarse a
simple vista o al microscopio óptico.
Las tinciones selectivas son aquéllas que nos permitirán observar una estructura celular
determinada, ya sea endosporas o flagelos. Respecto a la cápsula, estos componentes no
se combinan con los colorantes, por lo que para la observación de la misma se emplean
tinciones negativas (tinciones simples) con las que se oscurece el fondo de la preparación
y de esta manera se contrastan las cápsulas.
2. Desarrollo experimental
a. Tinción de endosporas: Método de Wirts-Conklin
Se extrajo, con el asa de siembra, una pequeña colonia de Bacillus subtilis y se le dispersó
en una gota de agua sobre una lámina portaobjeto.
Se procedió a fijarla al calor, sobre un mechero.
Se tiñó con safranina durante 1 minuto, se lavó con agua y se dejó secar.
Figura N° 1: Las endosporas se visualizan de color verde y el soma bacteriano, color rojo.
A pesar que la bacteria es una estructura muy pequeña, por medio de la tinción
con verde de malaquita, el cual requirió del calor para la penetración, se pudo
observar la estructura interna de la célula bacteriana, las endosporas.
Se empleó nigrosina o tinta china; para el caso de bacterias que esporulan, esta
técnica permite visualizar las esporas como entes refringentes sobre un campo de
fondo oscuro.
4. Conclusiones
Las tinciones utilizadas en el laboratorio de microbiología permiten el diagnóstico
oportuno y sugerente de los agentes infecciosos, por lo que juegan un papel
importante en la decisión del tratamiento inicial de las enfermedades infecciosas.
Las tinciones selectivas son aquéllas que permiten observar una estructura celular
determinada. Algunas bacterias tienen la capacidad de producir endosporas o
cápsulas. Las endosporas bacterianas son estructuras de resistencia que se
caracterizan por presentar varias capas compuestas de proteínas y azúcares
complejos, mientras que en el protoplasto de la misma existe un complejo de
dipicolinato de calcio, debido a esta composición, es muy difícil que los colorantes
penetren, por lo que al aplicar una tinción simple, estas aparecen como cuerpos
incoloros (dentro o fuera de la célula).
La tinción negativa es un modo satisfactorio de aumentar el contraste de las
células en microscopia óptica, pero su máxima utilidad está en revelar la presencia
de cápsulas alrededor de las células bacterianas
5. Cuestionario
Tinción de Hiss
La tinción de Hiss es una tinción estructural (al igual que la tinción con nigrosina) que sirve
para poder observar cápsulas. Estas tinciones pueden teñir estructuras que sólo están
presentes en algunas especies y, por lo tanto, sirven como criterio de identificación.
Tinción de Anthony
6. Bibliografía
Laboratorio de microbiología. “Tinciones selectivas”. (Fecha de consulta:
24/09/17). Enlace: http://microbiologiaulat2013.blogspot.pe/2013/12/tinciones-
selectivas.html