TECO DIAGNOSTICS SET DE REACTIVOS
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Anaheim, CA 92807
1-800-222-9880
USO
El reactivo de Albúmina es utilizado para la determinación cuantitativa de
la concentración de albúmina en suero humano.
INTRODUCCIÓN
La albúmina es la proteína más abundante constituyente del suero. Es
sintetizada en el hígado y se destaca por su habilidad de cambiar de
configuración. Esta afinidad estérica, permite a la molécula de albúmina
servir como un transportador de varias sustancias como la bilirrubina,
ácidos grasos, acido úrico, variedad de drogas y antibióticos. La
Albúmina, también cumple una función en el mantenimiento apropiado
de la presión osmótica.1
Niveles elevados de albúmina en suero están asociados con una posible
deshidratación. Niveles bajos de albúmina en suero son indicativos
potenciales de una malnutrición, desórdenes del hígado, desórdenes en los
riñones y artritis reumatoide.2
Antiguos métodos de fraccionamiento de sal para determinar Albúmina
en suero, eran demasiado laboriosos para llevarlos a cabo y han sido
reemplazados por métodos de colorantes azoicos. El uso del verde de
bromocresol en la reacción, se ha convertido en el método preferido,
debido a su alta especificidad para la Albúmina y su insignificante
interferencia por la hemólisis, bilirrubina y silicilatos. 3,4
PRINCIPIO
La albúmina sérica se enlaza selectivamente al colorante verde de
bromocresol a un pH de 4.2. El incremento en la absorbancia resultante
de la formación del complejo albúmina-colorante, leído a 630 nm, es
proporcional a la concentración de Albúmina.
COMPOSICION DEL REACTIVO
1. Verde de Bromocresol (BCG) 0.25 mM, buffer pH 4.0 0.1,
surfactante, ingredientes no reactivos y estabilizadores.
2. Estándar: Albumina bovina Fracción V con estabilizador (5
g/dl).
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
1. Utilizar para Diagnóstico in vitro.
PRECAUCION: Los reactivos para diagnóstico in vitro, pueden ser
peligrosos. Manipúlelos de acuerdo a buenas practicas de laboratorio,
las cuales indican evitar la ingestión y el contacto con los ojos y la
piel. El reactivo está en solución ácida. Enjuagar con agua en caso de
que ocurra un contacto.
2. Las muestras deben ser consideradas infecciosas y manipuladas
apropiadamente.
3. Evite el contacto o la ingestión.
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
1. Almacenar el reactivo a temperatura ambiente (15 -
30°C).
2. Almacenar el estándar de albúmina en refrigeración
(2 - 8°C).
DETERIORO DEL REACTIVO
El reactivo debe ser claro y presentarse como una solución amarillo
verdoso. Si existe turbidez o ha ocurrido precipitación, el reactivo debe
ser desechado.
RECOLECCION DE LA MUESTRA
PARA ALBUMINA
1. Las muestras deben ser sueros no hemolizados
2. Evite hemólisis excesiva, puesto que 100 mg/dl de hemoglobina
Corresponden a alrededor de 100 mg/dl de Albúmina. 5
3. La Albúmina en suero es estable por una (1) semana a
temperatura ambiente (15 - 30°C) y aproximadamente un (1) mes,
cuando esta almacenada en refrigeración (2 - 8°C) y protegido contra
la evaporación.6
SUSTANCIAS INTERFERENTES
La ampicilina y otros medicamentos interfieren de manera seria con las
propiedades de Albúmina para unirse con el colorante (Young, et al.). 7
Se recomienda que solamente estándares y controles que contengan
Albúmina humana sean empleados en este procedimiento. Se ha
encontrado que las propiedades de la unión de Albumina con el colorante
de diversas especies, son muy diferentes.
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO PROVISTOS
1. Dispositivos de precisión para Pipeteo
2. Tubos para la prueba/gradilla.
3. Cronómetro.
4. Espectrofotómetro.
PROCEDIMIENTO AUTOMATIZADO
Consultar el manual de aplicación apropiado de uso disponible.
PROCEDIMIENTO MANUAL
1. Rotular los tubos como: Blanco, Estándar, Control, Paciente,
etc.
2. Pipetear 1.5 ml del reactivo en cada tubo.
3. Transferir 0.01 ml (10 l) de muestra a los tubos respectivos y
mezclarlos y dejarlos reposar a temperatura ambiente por cinco (5)
minutos.
4. Colocar a cero el espectrofotómetro con el blanco a 630 nm.
(Rango de longitud de onda: 580 – 630 nm).
5. Leer y registrar las absorbancias de todos los tubos.
 VOLUMENES ALTERNATIVOS: 0.02 ml de
muestra para 3.0 ml del reactivo.
 EL CALIBRADOR TECO MULTIPROPOSITO
PUEDE SER UTILIZADO EN REMPLAZO DEL ESTÁNDAR.
LIMITACIONES
1. Las propiedades de unión al colorante de
Albúmina que no sean humanos, entre las especies. 3
2. Muestras con valores por encima de 8.0
g/dl deben ser diluidas 1:1, con solución salina al 0.9%, nuevamente
corridas y el resultado multiplicar por dos (2). Muestras con valores
por debajo de 0.5 g/dl deben ser analizadas electroforéticamente.
3. Sueros gravemente lipémicos, deben
tener un blanco de suero.
a. Añadir 0.02 ml (20 μl) de muestra a 3.0 ml de agua destilada y
leer la absorbancia contra agua destilada a 630 nm.
b. Restar la absorbancia del suero blanco, de la absorbancia de la
muestra y use la absorbancia corregida en los cálculos.
CALCULOS
Abs. = Absorbancia
Abs. desconocida x Concentración del estándar = Albúmina g/dl
Abs. del estándar A502: 10/01

Ejemplo: Si la absorbancia desconocida es = 0.455 y la absorbancia del

estándar es 0.705 y la concentración del estándar es = 5.0
entonces:

0.455 x 5.0 = 3.23 g/dl

0.705

CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda que los controles sean incluidos en cada set del ensayo.
Material de control comercialmente disponible con valores establecidos
de Albúmina, puede ser utilizado de rutina para control de calidad. El
valor asignado del material de control debe ser confirmado para la
aplicación elegida. Fallas en la obtención de rangos apropiados en los
valores del material de control del ensayo, pueden indicar un deterioro del
reactivo, mal funcionamiento del instrumento o errores en el
procedimiento.

VALORES ESPERADOS

3.5 - 5.3 g/dl 9

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de valores
esperados, puesto que existen diferencias entre instrumentos, laboratorios
y poblaciones locales.

CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO

1. Linealidad: 0.5 – 8.0 g/dl

2. Sensibilidad: Basado en la resolución de un instrumento de A =
0.001 el presente método tiene una sensibilidad de 0.005 g/dl.
3. Comparación: Un estudio de comparación entre este método y
otro método con BCG resulto en un coeficiente de correlación de
0.99 con una ecuación de regresión de y = 0.96 x + 0.1

4. Precisión:
Dentro una corrida
Media (mg/dl) D.S. C.V.%
3.3 0.07 2.1
2.7 0.07 2.4
Corrida a corrida
Media(mg/dl) D.S. C.V.%
3.3 0.06 1.8
2.7 0.08 2.9

REFERENCIAS
1. Jacobs, D.S.: Laboratory Test Handbook with DRG Index Lexi-
Comp, Ohio p.332, (1984).
2. Anderson, C.F., et al.: Mayo Clin. Proc.: 57:181 (1982).
3. Bartholomew, R., Delany, a.: Proc Australian Assoc.
Clin.Biochem. 1:64 (1964).
4. Doumas, B., et al.: Clin. Chem. Acta., 31:87 (1971).
5. Doumas, B.T., Biggs, H.G.: Standard Methods of Clinical
Chemistry, Academic Press, N.Y. 7:175 (1976).
6. Beng, C.G. et al.: Am. J. Clin. Pathol. 59:14 (1973).
7. Young, D.S., et al.: Clin. Chem. 21:10-4320 (1975).
8. Spencer, D., et al: Anal. Clin. Biochem. 14 (1977).
9. Tietz, N., Fundamentals of Clinical Chemistry, Philadelphia,
W.B. Saunders 335-337 (1976).