Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2006

UJI KEEFEKTIFAN BIJI SIRSAK (Annona muricata) DAN

AKAR TUBA (Derris elliptica) TERHADAP LARVA
Chrysomya bezziana SECARA IN VITRO
(Effectivity of Sirsak Seed (Annona muricata) and Tuba Root (Derris elliptica)
Against Larvae Of Chrysomya bezziana in In Vitro)
SRI MUHARSINI, APRIL HARI WARDHANA dan YUNINGSIH

Balai Penelitian Veteriner, Jl. R E. Martadinata No. 30, Bogor 16114

ABSTRACT

Annona muricata (sirsak) and Derris elliptica (tuba) grow widespread in Indonesia and they are known as
herbal insecticides. The major active compound of sirsak seed are annonain and squamosin which are
included acetogenin compound. The active compound of tuba root is rotenon. The aim of the experiment is to
evaluate of hexan and methanol extract of Annona muricata and Derris elliptica against Chrysomya bezziana
in vitro. These extract with the concentration of 1 and 2% were added to the larvae at the satage of early L2
and L3 0.05% Counahos and water were used as positive and negative control, respectively. The larvae were
observed in 24 hours. Theresults showed that all L2 died at all oncentration when treated with methanol
extract of sirsak or methanol and hexane extract of tuba root. Methanol and hexane extract of sirsak with 1
and 2% concentrations killed 26 and 46% L3, respectively. Methanol and hexane extract of sirsak seed and
tube root decreased pupae weight of L3 significantly (P < 0.05). The two plants are potential to be used for
controlling of Chrysomya bezziana but further in vivo trial is needed.
Key Words: Chrysomya bezziana, In Vitro, Derris elliptica, Annona muricata

ABSTRAK

Tanaman sirsak (Annona muricata) dan akar tuba (Derris elliptica) banyak tumbuh di Indonesia dan
dikenal dapat digunakan sebagai insektisida botanis. Senyawa aktif utama biji sirsak adalah annonain dan
squamosin yang termasuk golongan senyawa asetogenin, sedangkan senyawa aktif akar tuba adalah rotenon.
Tujuan penelitian ini adalah menguji keefektifan biji sirsak dan akar tuba yang masing-masing diekstrak
dengan heksan dan metanol, terhadap larva Chrysomya bezziana secara in vitro. Larva yang digunakan adalah
L2 awal dan L3 yang diberi perlakuan dengan menambahkan ekstrak heksan dan metanol biji sirsak dan akar
tuba masing-masing dengan konsentrasi 1 dan 2%. Kontrol positif dan negatif masing-masing menggunakan
coumaphos 0,05% dan H2O dengan menggunakan pengemulsi Tween 20 1%. Pengamatan dilakukan dalam
24 jam. Hasil penelitian menunjukkan semua larva L2 yang diberi perlakuan dengan ekstrak metanol biji
sirsak, ekstrak metanol dan heksan akar tuba, mati pada semua konsentrasi. Sementara itu, L2 yang diberi
ekstrak heksan biji sirsak konsentrasi 1 dan 2% mematikan masing-masing 26 dan 46%. Pada L3 yang diberi
perlakuan, terjadi penurunan bobot pupa yang berbeda nyata dibandingkan dengan kontrol yang diberi air (P
< 0,05), baik pada biji sirsak dan akar tuba yang diekstrak dengan metanol dan heksan. Kedua tanaman ini
sangat potensial digunakan untuk pengendalian penyakit myiasis yang disebabkan oleh larva Chrysomya
bezziana. Namun perlu dilakukan pengujian lanjutan secara in vivo.
Kata Kunci: Chrysomya Bezziana, In Vitro, Derris Elliptica, Annona Muricata

PENDAHULUAN Senyawa aktif utama biji sirsak adalah

Tanaman sirsak (Annona muricata) dan
tuba (Derris eliptica) banyak terdapat di
Indonesia dan tidak tergantung musim
sehingga dapat tersedia secara terus menerus.
annonain dan squamosin yang termasuk
golongan senyawa asetogenin
(LOUNDERSHAUSEN et al., 1991a; LEATEMIA
dan ISMAN, 2001) sedangkan senyawa aktif
akar tuba adalah rotenon. Senyawa asetogenin

1013
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2006
dari suku annonaceae dilaporkan mempunyai
toksisitas yang cukup efektif terhadap serangga
dari beberapa ordo seperti Lepidoptera,
Coleoptera, Homoptera dan Diptera (LI et al.,
1990; LONDERSHAUSEN et al., 1991b; MITSUI
et al., 1991). Senyawa Annonain, squamosin
dan rotenon bersifat sitotoksik dan neurotoksik
sehingga menimbulkan kematian sel pada
serangga. Apabila senyawa ini kontak atau
masuk ke dalam tubuh maka akan menghalangi
ikatan enzim NADH dengan sitokrom c-
reduktase dan sitokrom komplek sub unit I
yang berada di dalam mitokondria serangga.
Akibatnya sel kehilangan energi dan
pernafasan sel akan terhenti (LOUNDERHAUSEN
et al., 1991b).
Khasiat kedua tanaman tersebut sebagai
insektisida telah diujikan pada Callobruchus
analis (hama biji kacang hijau) (KARDINAN,
2000); Pediculus humanus (kutu kepala)
(SOSROMARSONO, 1990); Plutella xylostella L.
(hama kubis dan lobak) (LEATEMIA dan ISMAN,
2004); kutu anjing (HEYNE, 1987); Nilaparvata
lugens (wereng coklat) dan Crocidolomia
binotalis (ulat kubis) (PRIJONO, 1994).
Dari penelitian yang telah terdahulu perlu
dilakukan pengujian secara in vitro keefektifan
biji sirsak dan akar tuba terhadap larva lalat
Chrysomya bezziana.
MATERI DAN METODE
Koleksi biji sirsak dan akar tuba
Biji sirsak diperoleh Bogor berasal dari
Pelabuhan Ratu. Akar tuba diperoleh dari
Jember (Jawa Timur).
Pembuatan ekstrak biji sirsak dan akar
tuba
Biji sirsak dikupas, sehingga hanya daging
bijinya yang tersisa. Daging biji sirsak digiling
sehingga menjadi serbuk. Akar tuba dipotong-
potong dan dimasukkan ke dalam oven agar
kering, sehingga mudah digiling. Pembuatan
ekstrak heksan dan metanol dilakukan di
Departemen Toksikologi menurut metode
PRIJONO (1994). Sepuluh gram serbuk daging
biji sirsak dan akar tuba ditambahkan 100 ml
metanol atau heksan teknis (1 : 10), lalu
dikocok selama dua jam dengan alat pengocok.
1014
Larutan kemudian disaring dengan kertas
saring kasar. Sisa serbuk diekstrak kembali
dengan menambahkan 50 ml metanol atau
heksan teknis dan dikocok kembali seperti di
atas. Larutan disaring lagi dan dikumpulkan
dengan hasil saringan yang pertama. Larutan
kemudian diuapkan di atas waterbath sampai
semua metanol atau heksan menguap. Proses
ekstraksi ini diulang hingga memperoleh
sejumlah ekstrak biji sirsak dan akar tuba yang
dibutuhkan.
Uji in vitro
Metode uji in vitro untuk ekstrak biji sirsak
dan esktrak tuba untuk L2 mengacu pada
metode KUMARASINGHE et al. (2002), dan uji
terhadap L3 menggunakan metoda SPRADBERY
et al., (1983). Uji in vitro dilakukan pada
ekstrak biji sirsak dan akar tuba dalam
berbagai konsentrasi, yaitu 1 dan 2%. Kontrol
positif menggunakan asuntol 0,05% yang
mengandung coumaphos. Sebagai pengemulsi
digunakan Tween 20 1%. Uji ini dilakukan
pada larva instar 2 awal untuk mengetahui efek
racun perut sedangkan pada larva L3 untuk
mengetahui efek racun kontak. Uji L2
dilakukan dalam cawan petri kecil berdiameter
3 cm. Sebanyak 2 ml ekstrak heksan atau
metanol dari biji sirsak atau akar tuba dalam
berbagai konsentrasi (1 dan 2%) di dalam
cawan petri dimasukkan sepuluh L2 C.
bezziana awal dan diamati selama 24 jam.
Jumlah larva yang hidup dan yang mati
dihitung. Setiap isolat dilakukan 5 kali
ulangan. Kontrol negatif menggunakan air,
sedangkan kontrol positif menggunakan
asuntol 0,05%. Uji terhadap L3 dilakukan di
dalam pot obat plastik yang diisi dengan
ekstrak metanol atau heksan dari biji sirsak dan
akar tuba dengan konsentrasi yang sama
dengan yang dilakukan pada L2. L3 dicelupkan
ke dalam ekstrak metanol dan heksan selama
10 detik, kemudian larva dikeringkan dengan
kertas saring. Selanjutnya, larva dipindahkan
ke vermikulit dan diamati sampai menjadi
pupa. Masing-masing perlakuan menggunakan
5 ulangan, dan masing-masing ulangan
memerlukan 30 larva, sehingga jumlah L3
yang digunakan 750 larva. Jumlah larva yang
menjadi pupa dihitung dan ditimbang
bobotnya, kemudian diamati sampai menetas.
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2006
HASIL DAN PEMBAHASAN
Dari 10 g biji sirsak yang diekstraksi dalam
metanol dan heksan teknis mengasilkan 0,4 g
ekstrak, sehingga rendemannya adalah 10%.
Sementara itu, dari 10 g akar tuba yang
diekstrak dalam metanol dan heksan teknis
menghasilkan 1 g ekstrak, sehingga
rendemannya 10%. Ada dua cara yang umum
digunakan untuk mengekstraksi bahan
insektisida botani yaitu dengan pelarut dan
distilasi uap. Ekstraksi dengan pelarut yaitu
dengan cara bahan ekstrak diupayakan kontak
dengan bahan yang diekstraksi selama jangka
waktu tertentu, kemudian larutan dipisahkan
dari padatan dan pelarut diuapkan dengan
menggunakan alat yang sesuai. Ekstraksi yang
dikerjakan dalam penelitian ini adalah
termasuk infusi. Selain infusi, ada beberapa
cara lain yaitu perkolasi, ekstraksi refluks,
ekstraksi soklet dan penyulingan (PRIJONO,
2003).
Pada penelitian ini, kontrol positif yang
digunakan adalah Asuntol™ yang berbahan
aktif coumaphos 0,05%. Coumaphos
merupakan senyawa golongan organofosfat
yang sering digunakan di lapangan. Selain itu
coumaphos mempunyai efek racun perut dan
kontak, sehingga dapat digunakan sebagai
kontrol positif untuk L1, L2 maupun L3.
Lalat yang digunakan dalam uji ini adalah
lalat yang sudah lama dipelihara di
laboratorium, sehingga tidak perlu dikuatirkan
kemungkinan pengaruh residu insektisida yang
digunakan di lapangan. Pengujian yang
dilakukan dalam penelitian ini menggunakan
L2 awal, karena lebih mudah ditangani
dibandingkan dengan L1 dan aktivitas
makannya lebih terlihat, walaupun serangga
yang sering digunakan adalah L1, karena
jenjang perkembangan yang paling lemah
dalam siklus hidup serangga. Metode yang
digunakan adalah metode KUMARASINGHE et
al. (2002), untuk mengetahui efek racun perut,
karena pada stadium ini larva masih
memerlukan nutrisi. Telur dan pupa tidak bisa
digunakan sebagai obyek pengujian racun
perut. L2 diberi perlakuan dengan ekstrak
metanol biji sirsak konsentrasi 1 dan 2%
mengalami kematian 100% setelah 24 jam,
sedangkan yang diberi perlakuan dengan
ekstrak heksan mengalami mortalitas masing-
masing 26 dan 46% pada konsentrasi 1 dan
2%. L2 yang diberi perlakuan dengan ekstrak
metanol dan heksan mengalami kematian
100% pada semua konsentrasi (Tabel 1).
Analisa statistik dengan menggunakan Anova,
terdapat perbedaan yang nyata antara larva
(L2) yang diberi perlakuan dengan ekstrak
heksan biji sirsak dengan konsentrasi masing-
masing 1 dan 2% (P < 0,05%). Hasil ini
menyatakan bahwa efek ekstrak metanol biji
sirsak terhadap L2 lebih baik dari ekstrak
heksan. Sementara itu, untuk akar tuba, kedua
ekstrak sama baiknya, karena dapat mematikan
L2 100% dalam 24 jam. Efek ini sama dengan
efek asuntol terhadap L2 (Tabel 1).
Tabel 1. Rata-rata persentase dan simpangan baku
mortalitas L2 setelah 24 jam perlakuan
Jenis ekstrak/perlakuan Mortalitas (%) ± SD
Akuades + Tween 20 1% 0,00a ± 0,00
Metanol biji sirsak 1% 100,00b ± 0,00
Metanol biji sirsak 2% 100,00b ± 0,00
Heksan biji sirsak 1% 26,00c ± 19,49
Heksan biji sirsak 2% 46,00d ± 20,74
Metanol akar tuba 1% 100,00b ± 0,00
Metanol akar tuba 2% 100,00b ± 0,00
Heksan akar tuba 1% 100,00b ± 0,00
Heksan akar tuba 2% 100,00b ± 0,00
Asuntol 0,05% 100,00b ± 0,00
Superskrip yang berbeda menunjukkan perbedaan
yang nyata (P < 0,05)
Uji in vitro terhadap L3 adalah untuk
mengetahui efek racun kontak dilakukan dalam
pot obat. Setelah L3 direndam dalam ekstrak
selama 10 detik, maka dikeringkan dengan
kertas saring dan selanjutnya dipindahkan ke
vermikulit hingga menjadi pupa. Jumlah pupa
dihitung dan bobot pupa ditimbang. Terjadi
penurunan bobot pupa antara 24 – 54% pada
L3 yang diberi perlakuan dengan ekstrak
metanol dan heksan teknis pada biji sirsak dan
akar tuba (Tabel 2). Penurunan bobot pupa
yang tertinggi terjadi pada perlakukan L3 yang
diberi ekstrak heksan akar tuba 2%. Dengan
analisis statistik menggunakan Anova,
penurunan bobot ini berbeda nyata
dibandingkan dengan kontrol menggunakan
akuades dan Tween 20 1% (P < 0,05).
Perbedaan yang nyata juga terjadi pada L3
1015
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2006

Tabel 2. Rata-rata persentase dan simpangan baku bobot pupa L3 setelah perlakuan dengan perendaman
10 detik

Jenis ekstrak/perlakuan Rata-rata bobot pupa (mgr) ± SD Penurunan bobot pupa (%)
a
Akuades + Tween 20 1% 33,85 ± 1,57 0,0
Metanol biji sirsak 1% 23,13b ± 2,48 31,2
Metanol biji sirsak 2% 19,28c ± 2,43 43,0
b
Heksan biji sirsak 1% 25,66 ± 1,13 24,2
Heksan biji sirsak 2% 24,38b ± 2,93 28,0
c
Metanol akar tuba 1% 18,60 ± 1,78 45,0
Metanol akar tuba 2% 17,34c ± 2,60 48,8
Heksan akar tuba 1% 17,21c ± 2,78 49,2
c
Heksan akar tuba 2% 15,56 ± 1,37 54,0
Asuntol 0,05% 17,89c ± 2,59 47,1

Superskrip yang berbeda menunjukkan perbedaan yang nyata (P < 0,05)

yang diberi perlakuan dengan ekstrak metanol
biji sirsak 1 dan 2% (P < 0,05), sedangkan
perlakuan dengan menggunakan ekstrak biji
sirsak, ekstrak metanol akar tuba dan ekstrak
heksan akar tuba tidak berbeda antara
konsentrasi 1 dan 2% (P > 0,05). Hasil ini
membuktikan bahwa ekstrak metanol lebih
baik dari ekstrak heksan biji sirsak, sedangkan
untuk akar tuba kedua ekstrak sama baiknya.
Akar tuba mempunyai efek yang sama dengan
asuntol baik yang diekstrak dengan metanol
maupun dengan heksan teknis. Sementara itu,
biji sirsak yang diekstrak dengan metanol
maupun heksan teknis mempunyai efek racun
kontak yang lebih rendah daripada efek yang
diakibatkan oleh asuntol, kecuali yang
diekstrak dengan metanol 2%.
perlakuan mengalami penurunan bobot pupa
antara 24 – 54% yang berbeda nyata dengan
kontrol yang diberi perlakuan dengan air. Perlu
dilakukan uji secara in vivo untuk mengetahui
potensi biji sirsak dan akar tuba untuk
pengendalian myiasis di lapangan.
UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terimakasih kepada
Eko Setyo Purwanto, Lilis Solihat dan Yayan
Daryani yang telah membantu di laboratorium
Entomologi Bbalitvet. Penelitian ini didanai
dari APBN tahun anggaran 2005.
DAFTAR PUSTAKA

HEYNE, K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia.

KESIMPULAN DAN SARAN
Biji sirsak dan akar tuba mempunyai
potensi yang baik sebagai insektisida botanis
dan mempunyai efek yang sama dengan
asuntol. L2 yang diberi perlakuan dengan
ekstrak metanol biji sirsak konsentrasi 1 dan
2% mengalami kematian 100% setelah 24 jam,
sedangkan yang diberi perlakuan dengan
ekstrak heksan mengalami mortalitas masing-
masing 26 dan 46% pada konsentrasi 1 dan
2%. L2 yang diberi perlakuan dengan ekstrak
metanol dan hexan mengalami kematian 100%
pada semua konsentrasi. L3 yang diberi
Jilid II. Cetakan I. Yayasan Sarana Wanajaya.
Jakarta Heyne.
KARDINAN, A. 2000. Pestisida Nabati, Ramuan dan
Aplikasi. PT Penebar Swadaya, Jakarta.
KUMARASINGHE, S.P., N.D. KARUNAWEERA, R.L.
IHALAMULLA, L.S. ARAMBEWELA and R.D.
DISSANAYAKE. 2002. Larvasidal effect of
mineral turpentine, low aromatic white spirits,
aqueous extracts of Cassia alata, and aqueous
extracts, ethanolic extracts and essential oil of
betel leaf (Piper betle) on Chrysomya
megacephala. Int. J. Dermatol. 41(12): 877 –
880.

1016
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2006
LAETAMIA, J.A. and M.B. ISMAN. 2001. Crude seed
extract of Annona squamosa (Annonaceae) as
a potential botanical insecticide. Faculty of
Agricultural Sciences. Plant Science. 248-
2357 Main Mall. University of British
Columbia. Vancouver. BC. Canada.
LAETAMIA, J.A. and M.B. ISMAN. 2004. Efficacy of
crude seed extracts of Annona squamosa
againts diamondback moth, Plutella xylostella
L. in the greenhouse. Inter. J. Pest. Manag.
50(2): 129 –133.
LI X, H., Y.H. HUI, J.K. RUPPRECHT, Y.M. LIU, K.V.
WOOD, D.L. SMITH, C.J. CHANG and J.L. MC
LAUGHLIN. 1990. Bullatacin, bullatacinone,
squamone, a new bioactive acetogenin, from
the bark of Annona squamosa. J. Natur. Prod.
53(1): 81 – 86.
LONDERSHAUSEN, M., W. LEICHT, F. LIEB,
H. MOESCHLER and H. WEISS. 1991a.
Molecular mode of action of Annonins. Pest.
Sci. 33(4): 427 – 438.
LONDERSHAUSEN, M., W. LEICHT, F. LIEB,
H. MOESCHLER and H. WEISS. 1991b.
Annonins - Mode of action of acetogenins
isolated from Annona squamosa. Pest. Sci.
33(4): 443 – 445.
METCALF, R.L. 1986. The ecology of insecticides
and the chemical control of insects In
Ecological Theory and Integrated Pest
Management Practice. Wiley. New York. pp.
251 – 297.
MITSUI, T., S. ATSUSAWA., K. OHSAWA., I.
YAMAMOTO., T. MIYAKE and T. UMEHARA.
1991. Search for insect growth regulators In
Pesticides and the future: Toxicological
Studies of Risks and Benefits. Rev. Pestic.
Toxicol. I. North Carolina State University.
Raleigh. North Carolina.
PRIJONO, D. 1994. Teknik Pemanfaatan Insektisida
Botanis. Fakultas Pertanian Institut Pertanian
Bogor.
PRIJONO, D. 2003. Teknik ekstraksi, uji hayati, dan
aplikasi senyawa bioaktif tumbuhan.
Departemen Hama dan Penyakit Tumbuhan.
Fakultas Pertanian Institut Pertanian Bogor.
hlm. 62.
SOSROMARSONO, S. 1990. Peranan Sumber Hayati
dalam Pengelolaan Serangga dan Tungau
Hama. Seminar Pengelolaan Serangga Hama
dan Tungau dengan Sumber Hayati, Bandung.
SPRADBERY, J.P., R.S. TOZER and A.A. POND. 1983.
The efficacy of some acaricides against
Screwworm Fly larvae. Aus. Vet. J. 60: 57 -
1017