DAÑO AL DNA

 El daño al DNA puede provenir de dos fuentes:

 Agentes exógenos
 Luz solar (Rayos UV)  Py dy
 Mutágenos y carcinógenos en el tabaco, BBQ
 Aflatoxinas
 Radiación ionizante
 Agentes endógenos
 Agua (hidrólisis)
 Oxígeno (oxidación)
 Agentes alquilantes
 La mayor parte del daño al DNA es causado por los
mutágenos endógenos.
 Uno de los daños más comúnes es la deaminación de
citosina a uracilo.
 CONSECUENCIAS DEL DAÑO AL DNA
El daño al DNA puede:

 Bloquear la replicación. Si la replicación del cromosoma

no es completada, hay muerte celular.

 Activar replicación por translesión, la cual puede ser

mutagénica. Este es un mecanismo de tolerancia.

 Rupturas de doble cadena (DSB).

 Bloquear la transcripción. Esta puede llevar a DSB o

apoptosis.
LUZ ULTRAVIOLETA
 La luz ultravioleta se divide en tres tipos: UV-C, UV-B y
UV-A, de menor a mayor longitud de onda y energía y de
menor a mayor grado de penetración.
 La luz UV-C y UV-B generan daño directo al DNA
mediante dímeros de pirimidina.
 La luz UV-A, por otra parte, provoca daño indirecto
mediante ROS y formación de 8oxo-G.
Reparación de PyD
 Existen dos mecanismos para reparar daño por UV.
 Fotoreactivación: La fotoliasa revierte el daño en
presencia de luz azul
 NER: Reparación por Escisión de Nucleótidos
FOTOLIASA
 Esta enzima (flavoproteína) mediante el proceso de
fotoreactivación se encuentra en MO, plantas y animales
no placentarios.
 Cataliza una reacción de reversión de daño mediante dos
cromóforos:
 Fotoantena de luz azul (metenil-tetrahidrofolato)
 Flavina en el sitio activo de la enzima
NER se puede dar en dos eventos
 TCR: Reparación acoplada
a Transcripción
 La RNA polimerasa se
detiene en daño o lesiones
 GGR: Reparación Global
del Genoma
 Encuentra daño al DNA
fuera de la transcripción y
de replicación.

No todo el daño se debe reparar.

Células que se dividen: Daño debe repararse antes de la
replicación y transcripción.
Células que no se dividen (neuronas): Daño se debe
reparar antes de la transcripción.
 REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE
NUCLEÓTIDOS
 Los animales placentarios tienen como mecanismo
principal NER. Éste presenta cuatro pasos básicos.
 Reconocimiento de daño
 Incisión: Corte de la zona dañada
 Escisión: Remoción del oligo dañado
 Relleno del gap y ligación.

Estos genes son los XP, relacionados con la enfermedad

Xerodermia pigmentosa
 Reparación por escisión de nucleótido

Comparación en E. Coli y en humanos

Función E. Coli Humanos

Escaneo DNA UvrA XPA, XPC; RPA

Nucleasa: UvrB, UvrC XPF, XPG

ESCINUCLEASA
Helicasa UvrD XPB, XPD

Sistema de DNApol I/DNApol II; DNApol d/e; ligasa

replicación ligasa

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BER: REPARACIÓN POR ESCISIÓN DE BASES
 Esta vía permite la reparación de bases dañadas o
incorrectas: sitios abásicos.
 Sus pasos de forma general son:
 Reconocimiento del daño mediante Glicosilasas de DNA
 Remoción de la base y ruptura del enlace fosfodiéster
 Introducción de AP endonucleasa
 Reparación del gap y ligación
•Cuando una base dañada en el DNA es reconocida, una glicosilasa actúa y
rompe el enlace N-glicosídico entre la base y el azúcar.
•
•Esto deja un sitio AP (apurínico/ apirimidínico).

•Una endonucleasa AP reconoce este “hueco” e hidroliza los enlaces

fosfodiéster adyacentes.

•La DNA pol I repara degradando el DNA (5’->3’) y sintetiza DNA nuevo.
•DNA ligasa sella el último enlace.
Vía corta

La reparación de un sitio abásico

necesita de las enzimas AP
endonucleasa y dRPasa.
AP endonucleasa corta en 5’ de la
cadena.
dRPasa tiene actividad
desoxiribofosfodiesterasa, cortando
en el extremo 3’, liberando el azúcar
fosforilado.
Vía larga Si se tiene un fragmento no apto para
dRPasa, concentraciones bajas de ATP o en
la fase S, se utiliza la vía larga.
Se sintetiza en el sitio de reparación,
desplazando a la cadena con el extremo
5dRP.
Este fragmento debe ser removido por una
Flap endonucleasa (FEN) antes de ligar el
relleno sintetizado.
Reparación de DSB
 DSB: RUPTURAS DE DOBLE CADENA
 Una de las lesiones más graves del DNA.
 Si no se reparan llevan a respuestas de muerte celular.
 Si se reparan mal, promueven inestabilidad genómica
como translocaciones.
Se generan por:
 Acción de ROS proveniente del metabolismo celular.
 Fallo de replicación de DNA o yuxtaposición de
eventos de reparación.
 Procesos de recombinación y meiosis.
 Agentes exógenos como IR o quimioterapia.
NHEJ: Unión de Extremos no Homólogos
 Funciona en todo tipo de células.

 Es un proceso sumamente simple, se reclutan proteínas

para unirse a los extremos del DSB y procesarlos.

 A grandes rasgos, únicamente se ligan los extremos rotos

NHEJ: Unión de Extremos no Homólogos
 Se inicia por la unión a los extremos por la proteína
heterodimérica K
 Recluta a las demás proteínas:
 DNA-PK que regula el procesamiento y el desensamble
 RAD50
 Helicasa
 DNA polimerasa
 Ligasa
HR: Recombinación Homóloga
 Utiliza la cromátide hermana como molde para reparar el
daño directamente.

 La cromátide hermana es idéntica en secuencia al DNA

dañado, el proceso repara de forma fiel la información
genética y está libre de error.
 Enfermedades hereditarias y defectos en la
reparación del ADN.
 – Xeroderma Pigmentosum.
 – Cáncer.
 – Ataxia telangiectasia.
 – Síndrome de Bloom.
 – Síndrome de Cockaine.
 – Síndrome de Werner.
SÍNDROMES DE INESTABILIDAD CROMOSÓMICA
 Síndrome de Bloom
 Alteración autosómica recesiva
 Caracteriza por eritema telangiectásico en la cara, antebrazos y dorso de las

manos, fotosensibilidad y manchas café con leche, e incremento de

patologías malignas como leucemias, linfomas y carcinomas (especialmente,
gastrointestinales).

sister chromatid exchange in a normal subject (left) and in a Bloom syndrome patient (right) (from: Mounira Amor-Guéret)
DNA mismatch repair (MMR).
 Este mecanismo es importante para la replicación,
recombinación y reparación del DNA.

 Repara errores de las DNA polimerasas

 Previene recombinación

 Actúa como barrera para intercambio genético entre

especies
 El MMR en humanos tiene dos complejos.

 Msh2/Msh6 (MutSα) + Mlh1/Pms2 (MutLα) que reconocen

mismatches GT y AC y pequeños loops

 Msh2/Msh3 (MutSβ) + Mlh1/Pms2 (MutLα) reconocen loops

pequeños y grandes

 Reconocen la base con mismatch y se unen al DNA mutado.