MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

UNIVERSIDAD CATOLICA DE
SANTA MARIA

FACULTAD DE ARQUITECTURA,
INGENIERIA CIVIL Y DEL AMBIENTE

ALUMNOS:
 SALCEDO PEZO, IVAN MARCELO

CURSO:
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

GRUPO: 02

IVAN MARCELO SALCEDO PEZO_ pág. 1

 MICROBIOLOGIA AMBIENTAL
AREQUIPA, 3 DE ABRIL DEL 2018
MEDIOS DE CULTIVO DE BACTERIAS-AGAR
RESUMEN
En esta práctica, realizaremos un método de
cultivo por un medio llamado agar, que aísla una
bacteria y hace que esta piense y se comporte
como si estuviera en condiciones normales,
tenemos que aportarle nutrientes, en la siguiente
práctica, probaremos distintos tipos de agares,
repartidos en grupos, en este grupo, toco el agar
“brillant Green agar”, donde probaremos 4
bacterias, donde tenemos 3 bacterias gram
negativas y 1 gram positiva, las bacterias que
cultivaremos son: escherichia coli, bacilo gram,
enterococcus faecalis y staphylococcus.
Palabras clave: Cultivo, agar, gram, nutrientes.
ABSTRACT
In this practice, we will make a method of
cultivation by a medium called agar, which
isolates a bacterium and makes it think and
behave as if it were in normal conditions, we have
to provide nutrients, in the next practice, we will
try different types of agars, distributed in groups,
in this group, I touch the agar "brillant Green
agar", where we will test 4 bacteria, where we
have 3 gram negative and 1 gram positive
bacteria, the bacteria we will grow are:
Escherichia coli, Gram bacillus, Enterococcus
faecalis and Staphylococcus.
Key words: Culture, agar, gram, nutrients.
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INTRODUCCIÓN
Una placa de agar (también, plato de agar) es
una placa de Petri que contiene un medio de
cultivo (comúnmente agar además de nutrientes)
usada en microbiología para cultivar
microorganismos o pequeñas plantas, Al colocar
microorganismos individualmente en la placa
crecerán en colonias individuales. Cada réplica
del microorganismo es seguramente idéntico
genéticamente a su antecesor (excepto por la baja
e inevitable tasa de mutación). Por lo tanto, la
placa se puede usar para estimar la concentración
de microorganismos en un cultivo o una solución
de ese cultivo, usando un contador de colonias.
También se puede usar para generar cultivos
genéticamente puros a partir de un cultivo mixto,
con diferentes especies de microorganismos,
usando una técnica llamada «estriado». En esta
técnica, una gota del cultivo es tomada de la
muestra, mediante un instrumento llamado «asa
bacteriológica», estéril; después se distribuye la
muestra sobre la superficie del medio de cultivo
dibujando estrías (de ahí el nombre), dejando de
esta forma un gran número de microorganismos
al principio y una baja cantidad al final de
colonias aisladas. Luego, las colonias que
crecieron pueden removerse individualmente con
otra asa estéril, y así determinar a qué especie
corresponde cada colonia individual. Este
método es además, usado prácticamente en todos
los laboratorios de microbiología para hacer
cualquier cultivo bacteriológico
MARCO TEORICO
AGAR
El agar nutritivo es una de las sustancias
gelatinosas que se pueden usar en el fondo de una
placa de petri. Este material contribuye a un
entorno hospitalario para el crecimiento
microbiológico, proporcionando tanto comida
para los organismos y una base para crecer que
no se degrade cuando se expone al crecimiento
de microorganismos. El agar nutritivo es
diferente de otros medios de crecimiento en los
que se usa agar, que es derivado de algas, como
el agente gelatinoso.
TIPOS DE AGARES
Agar nutritivo simple
El agar nutritivo simple está hecho de caldo
de carne, peptona, agua, agar y posiblemente
sal. El pH se ajusta al 7,0 y es filtrado o
pasado por el autoclave para esterilizarlo.
Este agar nutritivo simple puede servir para
que crezcan la mayoría de tipos de bacteria y
es especialmente útil si no estás seguro de
qué tipo de bacterias buscas.
Agar LB
El agar LB no hace crecer preferentemente un
tipo de bacteria sobre otra. Tiene muchas
variaciones diferentes, aunque casi todas
contienen extracto de levadura, que proporcionan
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vitaminas y restos de elementos, péptidos y
peptonas de caseína proporcionadas por triptona
y sal. El "LB" en el nombre se suele identificar
como una referencia al inventor, Giuseppe
Bertani, pero se ha establecido que las iniciales
son de "Caldo de Lisogenia".
Agar de sangre
El agar de sangre es creado añadiendo sangre
animal a la solución de agar, y para algunos tipos
(como el agar de chocolate), la mezcla es tratada
más para fomentar cierto tipo de crecimiento
bacteriano. Recuerda a la sangre fresca o seca y
se usa para cultivar una variedad de microbios.
Es útil porque la mayoría de organismos crecerán
en sangre, pero también porque puede ayudar a
determinar cómo interaccionan estos organismos
con el cuerpo.
El danés Hans Christian Joachim Gram (1853-
1938) descubrió en 1884 que podía teñir las
bacterias para su mejor observación bajo el
microscopio. Diferentes tipos de bacterias
reaccionaban de diferente manera a la tinción.
Tras aplicar coloraciones y disolventes, un tipo
de ellas quedaban teñidas en violeta, mientras
que otras no. La explicación de esta variabilidad
de reacción está en el tipo de membrana que
envuelve a estas bacterias. La diferencia en la
composición de la membrana entraña un
comportamiento diferente frente a los agresores
de la bacteria y en lo que respecta a su capacidad
defensiva. Se les llamó gram+ a las que fijaban la
tinción violeta y gram- a las que no la fijaban.
DIFERENCIAS ENTRE BACTERIAS
GRAM+ Y GRAM-.

Agar de medio selectivo BACTERIAS BACTERIAS

GRAM GRAM
El agar de medio selectivo es diseñado para POSITIVAS NEGATIVAS
fomentar el crecimiento de un tipo de organismo Poseen una Poseen una pared
y desalentar a otro. Por ejemplo, los agares de pared celular celular más compleja:
interna y una -pared celular interna
crecimiento fúngico son especialmente ácidos
pared de -pared de
para desalentar el crecimiento bacteriano pero peptidoglucan peptidoglucano
permiten a los organismos fúngicos florecer. Por o. - bicapa lipídica
otra parte, algunos agares están impregnados con *Peptidogluca externa
antibióticos que permiten que las bacterias no: es un
resistentes a ellos crezcan, mientras excluyen a exoesqueleto
otros organismos. que da
consistencia y
Agares diferenciales forma esencial
para
Los agares diferenciales contienen compuestos replicación y
que cambian de color cuando se exponen a los supervivencia
productos de desecho de un tipo de organismo, o de la bacteria.
cambian el color del organismo mientras crece. No tiene Membrana externa:
membrana forma un saco rígido
El agar MacConkey contiene un indicador de pH
externa alrededor de la
que pone las colonias de E. coli rojas. El agar de bacteria, mantiene
sal de manitol se vuelve amarillo cuando un estructura y es
organismo puede fermentar el manitol que barrera impermeable
contiene y bajar el pH. a macromoléculas,
ofrece protección en
¿QUE ES UNA BACTERIA GRAM? condiciones adversas

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Espacio Cisteria,
No tiene periplasmático: Frankia.
espacio espacio entre la
periplasmático superficie externa de Poseen otros Poseen proteínas con
la membrana componentes: concentraciones
citoplasmática y la ácidos elevadas.
interna de la teicoicos y
membrana externa. lipoteicoicos,
La red de La red de mureína y polisacáridos
mureína está presenta una sola complejos.
muy capa
desarrollada y
llega a tener
hasta 40 capas
La penicilina La penicilina no mata BACTERIAS A CULTIVAR:
mata a las a las Gram negativas,
gram a causa de la capa de Daremos una breve definición de las bacterias a
positivas, ya lipopolisacáridos situ estudiar.
que bloquea la ada en la parte
formación de externa de la pared Escherichia coli
enlaces celular. Se trata de una bacteria con diversas variantes.
peptídicos
Normalmente vive en el intestino del hombre y
entre las
diferentes de los animales y no suele causar ningún tipo de
cadenas del problema, es más, es necesaria para el
peptidoglucan funcionamiento correcto del proceso digestivo.
o Sin embargo, algunas cepas por intercambio de
Contiene LPS: material genético, han adquirido la capacidad de
No contiene estimulador de causar infecciones y provocar diarreas
LPS respuestas inmunes:
sangrantes.
activa células B,
liberación de Bacilo gram negativo
IL, FNT, IL 6 por
macrófagos. Enterococcus faecalis
En la tinción Quedan decoloradas.
de Gram, Habita el tracto gastrointestinal de humanos y
retienen la otros mamíferos.1 Como otras spp.
tinción azul del género Enterococcus, E. faecalis puede
causar infecciones comprometidas en humanos,
Conservan el Pierden el complejo especialmente en ambiente de hospital. La
complejo yodocolorante existencia de enterococos se potencia porque ha
yodocolorante
tenido la habilidad de adquirir resistencia a
Pueden ser prácticamente todos los antibióticos en uso.
Son anaerobios o aerobios
Staphylococcus
esporulantes y
no Comprende microorganismos que están
esporulantes, presentes en la mucosa y en la piel de los
como
humanos y de otros mamíferos y aves,
Streptococcus,
incluyendo a 35 especies y 17 subespecies,

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muchas de las cuales se encuentran en los

humanos. Las especies que se asocian con más
frecuencia a las enfermedades en humanos
son Staphylococcus aureus (el miembro más
virulento y conocido del género),

MATERIALES Y METODOS
El brillant Green agar
MATERIALES.
El agar verde brillante se utiliza para el
aislamiento selectivo de Salmonella spp. en un  2 gramos de agar verde brillante
entorno de laboratorio. El agar verde brillante no  40 ml de agua destilada
está destinado a ser utilizado en el diagnóstico de  Papel craft
enfermedades u otras condiciones en humanos.  Cinta de esterilizacioin
 1 erlenmeyer
 1 probeta
 2 placas

METODOS

Método placa agar

El agar nutritivo es una de las sustancias

gelatinosas que se pueden usar en el fondo de una
placa de petri. Este material contribuye a un
entorno hospitalario para el crecimiento
microbiológico, proporcionando tanto comida
para los organismos y una base para crecer que
no se degrade cuando se expone al crecimiento
de microorganismos. El agar nutritivo es
diferente de otros medios de crecimiento en los
que se usa agar, que es derivado de algas, como
el agente gelatinoso.

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DESARROLLO Y DISCUSIÓN CONCLUSIÓN

En esta práctica, primero debemos calcular la Concluimos que los diferentes métodos de
cantidad de agar y agua respectivamente para que cultivo tipo agar, nos sirven para distinguir
sea proporcional para 2 placas, para esto microorganismos, en este caso bacterias, de
seguimos indicaciones dadas por el envase del forma minuciosa, y que para hacer esto debemos
agar, que nos dijo que por 25 gr de agar, se de darles condiciones donde estas puedan
necesitan 500 ml de h2o, por regla de 3 simple multiplicarse.
obtuvimos que para 2 gramos de agar,
necesitamos 40 ml de agua, esto porque solo
usaremos 2 placas.
REFERENCIAS
Una vez medido el peso de el agar, lo mezclamos
en el erlenmayer con el h2o, primero ponemos el
1. https://antibioticosnaturales.com/bacteri
agua y luego disolvemos el agar, para que
as-gram/
disuelva todo, lo sometemos a calor del mechero,
para tener una disolución uniforme.
2. http://biologiamedica.blogspot.pe/2010/
Cuando estuvo disuelto totalmente, lo metimos a 09/bacterias-gram-positivas-y-
una maquina donde se calentó a 121 grados gram.html
centígrados y a una presión atmosférica, por 20
minutos. 3. http://conogasi.org/articulos/metodo-
medios-de-cultivo-sqolidos-agar-o-
Luego, lo enfriamos a condiciones reales, y
agarosa/
pusimos el agar disuelto en las placas, luego de
una corta refrigeración obtuvimos nuestras placas
4. http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar
con el agar en estado gelatinoso.
/SeminarioMedios.htm
Procedimos a colocar nuestras bacterias, previa
separación de la placa en 4 partes usando un 5. http://www.danival.org/notasmicro/med
marcador para trazar separaciones en la parte ioscult/_madre_medios.html
externa de la placa.
6. http://academico.upv.cl/doctos/ENFE-
En la otra placa pusimos diversas bacterias, 6017/%7B103AD534-8A1F-456C-
tosiendo o colocando mucosa.

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9BF8-
99DD8BE54F05%7D/2012/S1/Bacilos
%20gram%20positivos%202012.pdf

7. http://foodsafety.neogen.com/sp/brillian
t-green-agar

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