Guía de Ejercicios curvas de calibración

Bioquímica Clínica-I /2012

1. A partir del siguiente protocolo realice los cálculos para informar la glicemia
correspondiente a cada punto de la curva de calibración del Método de Somogyi-Nelson.

Componentes del Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6 Tubo 7

sistema ml ml ml ml ml ml ml
Estándar de glucosa 0.05 0.15 0.2 0.25 0.35 0.4 -
(250 mg/dl)
H2O destilada 0.45 0.35 0.3 0.25 0.15 0.1 0.5
Ba(OH)2 0,3N 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
ZnSO4 5% 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
H2O destilada 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5
Filtrar
Filtrado 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Reactivo Somogyi 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
100 ºC 10 min
Reactivo Nelson 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
H2O destilada 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5
Glicemia ¿??

2. Considerando que en el protocolo anterior se obtuvieron las siguientes absorbancias:

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6 Tubo 7
abs 0.05 0.15 0.195 0.243 0.34 0.39 0.0
Calcule el coeficiente de posición, el coeficiente de correlación, la pendiente y el
factor reciproco de calibración de la curva.

3. Si al usar el mismo protocolo para procesar 3 muestras y como resultado se

encontraron las siguientes absorbancias:
muestra 1 Muestra 2 Muestra 3
abs 0.18 0.25 0.1
a) Calcule la glicemia de cada muestra
b) Calcule los mg glucosa /tubo de cada muestra.

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4. A continuación se entrega un protocolo de trabajo utilizado para procesar muestras de
orina usando el método de Exton-Rose.

Componentes sistema Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo
1 2 3 4 5 6 7 8 9
ml ml ml ml ml ml ml ml ml
Estándar proteínas 0.05 0.08 0.1 0.15 0.18 0.2 - - -
6 g/dl (diluido 1/50)
Suero fisiológico 0.2 0.17 0.15 0.1 0.07 0.05 0.25 - 1.25
Muestra orina - - - - - - - 0.25 0.25
Ac. Sulfosalicílico 3% 1.25 1.25 1.25 1.25 1.25 1.25 1.25 1.25 -
Abs 0.08 0.128 0.16 0.24 0.29 0.32 0.00 0.12 0.009

a) Calcule los valores de proteinuria de la curva de calibración

b) Calcule el coeficiente de posición, el coeficiente de correlación, la pendiente y el
factor reciproco de calibración de la curva.
c) Calcule la proteinuria de la muestra de orina

5. Para trabajar con el método de Exton-Rose, usted recibe 25 µl de estándar de

proteínas con una concentración de 5,6 g/dl, los cuales mezcla con 1,1 ml de suero
fisiológico. De esta mezcla toma alícuotas de 25 µl, 35 µl, 75 µl, 125 µl, 150 µl y 200
µl., le agrega suero fisiológico a volumen final de 250 µl y le adiciona 0.625 ml de acido
sulfosalicílico , mezcla, incuba 10 minutos y lee absorbancia.
Calcule las proteinurias que representan los volúmenes indicados.

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6. El siguiente protocolo se usó para la determinación y separación de proteínas
plasmáticas por el método de Biuret.
Componentes Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6 Tubo 7
sistema
Estándar 0.025 ml 0.05 ml 0.10 ml 0.12 ml 0.14 ml 0.16 ml -
proteínas 1.5
g/dl
NaCl 0,15 M - - - - - - 0.25 ml
R. Biuret 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
Abs 0.08 0.16 0.32 0.38 0.45 0.5

a) Calcule el valor de proteinemia de la curva de calibración.

b) Calcule el coeficiente de posición, el coeficiente de correlación, la pendiente y el
factor reciproco de calibración de la curva.
c) Si la procesar una muestra Ud realiza los siguiente:
Toma 0,1 ml de suero, le adiciona 0,15 ml de suero fisiológico, mezcla y le agrega
1 ml de Reactivo de Biuret dando una abs de 0.323
Por otro lado toma 0,2 ml de suero, le adiciona 4 ml de sulfato de sodio mezcla y le
agrega 1 ml de éter etílico, incuba 30 min, lo filtra y del filtrado toma 0,25 ml y le
agrega 1 ml de Reactivo de Biuret dando una abs de 0.113
¿Calcule la proteinemia, albuminemia y globulinemia de la muestra?

R.O.C.
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