5.

- revise los link y realizar un cuadro comparativo de los 5 insertos

incluyendo el de la práctica:

Si bien es ciertos los diferente tipos de laboratorios tienen diferente manejo de

insertos ya que la dosis de la aplicación de antígenos son diferentes, pero igual es
el procedimiento, y de la misma forma tienen diferente tiempo de incubación pero
se llega al mismo fin que es identificar la presencia de anticuerpos en el ser
humano ya sea de forma cualitativa y cuantitativa.

LABORATORIO LICON:

Debido a la dificultad para el aislamiento de las Rickettsias sp, el antígeno

empleado para la determinación de anticuerpo es el proteus OX-19, el cual
presenta una reacción cruzada con bacterias de géneros Rickettsias.

La reacción de huddleson es un método serológico que detecta anticuerpos contra

B. abortus, B. melitensis, B. suis que son agentes causales de la brucelosis

VOLUMEN DE SUEROS TITULO

0.08 ml 1:20

0.04 ml 1:40

0.02 ml 1:80

0.01 ml 1:160

0.005 ml 1:320
METODO DE TITULACION EN TUBOS

1.- Se prepara una dilución de 1:20 del antígeno en solución salina

2.- se coloca 7 tubos de 13 x 100mm marcándolos del 1 al 6 y el tubo 7 como

control.

3.- añadir al tubo 1, 0.9 ml de solución salina y 0.5 ml a los 6 tubos restante.

4.- añadir 0.1 ml del suero al tubo número 1 mezclar y transferir 0.5ml al tubo
número 2.

5.- continuar con lo mismo hasta el tubo número 6.y eliminar 0.5 ml de la dilución
el tubo 7 será como control negativo solo tendrá solución salina.

6.-añadir 0.5 ml del antígeno diluido 1:20 a cada uno de los 7 tubos.

TIEMPO DE INCUBACION:

METODOS DE PRUEBA RAPIDA EN PLACA

1.- depositar en sitios diferentes de la placa cantidad de suero: 0.08 ml, 0.04ml,
0.02ml, 0.01ml, 0.005ml (el suero debe estar totalmente claro).

2.- añadir 30 ul de la suspensión del antígeno y girar la placa con un agitador de

120 rpm x 2 minutos y se utiliza una fuente utilizando luz directa
LABORATORIO BIOLABO:

Las suspensiones de antígenos son bacterias muertas y coloreadas

La suspensiones coloreadas en azul son específicas de antígenos somáticos O y

las coloreadas en rojo son especificas de los antígenos flagelarías H.

Las suspensiones Proteus OX2, OX19, OXK, permiten la detección de

anticuerpos anti-Rickettsias porque estas bacterias tienen un polisacáridos en
común conciertas especies de Rickettsias y producen aglutinaciones idénticas.

GRADUACION RAPIDA EN PLACA:

1.- Distribuir 80ul, 40ul, 20ul, 10ul, 5ul, de suero no diluido en una serie de circulo
aprox. De 3 cm de diámetro.

2.- depositar una gota (50ul) de reactivo no diluido sobre cada distribución de
suero.

PROCEDIMIENTO CUANTITATIVO:

1.- identificar 8 pequeños tubos de platico.

2.- distribuir 1.9 ml de una solución NaCl 0.85% en un tubo y 1 ml en los 7

siguientes:

3.- con la ayuda de una pipeta distribuir 0.1 ml de suero del paciente no diluido en
el primer tubo y mezclar bien.

4.- coger 1ml del contenido primer tubo, transferir en el 2° tubo y mezclar bien.
5.- proceder del mismo modo hasta el 7° tubo, el 8° tubo solo contiene solución de
NaCl 0-85% y solo sirve de testigo negativo.

6.- homogenizar la suspensión de antígenos añadir una gota (50ul) del antígeno
apropiado de cada tubo y mezclar bien.

7.- incubar como sigue:

 Salmonella O y proteus 4 hrs a 50°C

 Salmonella H 2 hrs a 50°C
 Brucella 24 hrs a 37°C

8.- examinar los tubos después del tiempo de incubación apropiado y verificar la
aglutinación.

Nota:

Sumergir los tubos a 2/3 del contenido para asegurar una buena corriente de
convección en el interior del tubo. Dejar una noche en el refrigerador y volver a
temperatura ambiente antes de volver.

LABORATORIO WIENER

en este caso se dice que se va utilizar suspensiones de salmonella o brucella

muertos. Si la muestra contiene los anticuerpos correspondientes se producirá una
aglutinación visible.

En este caso se dice que una prueba aislada es de escaso valor, siendo necesaria
dos o más pruebas seriadas.

TECNICA RAPIDA EN PLACA

1.- colocar en una placa una gota (50ul) de suero y agregar una gota de antígeno
(50ul) mezclar y agitar x 2 mint.
Observar presencia o ausencia de aglutinación utilizando luz indirecta sobre fondo
oscuro

TITULACIÓN RÁPIDA EN PLACA

1.- dividir una placa de vidrio en sectores de 4cm 2 .

2.- colocar una gota de antígeno abarcar una área de 2 cm de diámetro

3.- agitar la placa durante 2 mint.en forma circular y observar aglutinación en fondo
oscuro.

INTERPRETACION:

4+: todos los microorganismos aglutinan

3+: aglutinan aproximadamente el 75%

2+: aglutinan aproximadamente el 50%

1+: aglutinan aproximadamente el 25%

NEGATIVO: no aparece aglutinación.

VALORES REFERNCIALES

Títulos de 1:40 o 1:80 son sospechosos de enfermedad. Solo títulos mayores de

1:80 pueden considerarse probatorios cuando estén acompañados de
sintomatología clínica y mayores de 1:320 son concluyentes.