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FACULTAD DE CIENCIAS

ESCUELA DE QUIMICA

LABORATORIO DE QUÍMICA APLICADA

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE LA
CONCENTRACIÓN DEL COLESTEROL EN UNA SUSTANCIA
PATRÓN INCOGNITA POR TRIPLICADO.
Se determinó por medio del método de espectrofotometría la concentración del
colesterol total en patrón de trabajo, dando como resultado la concentración
205,00mg/dL, la desviación relativa promedio 4ppmil, el coeficiente de variación
0,6%, la desviación estándar 1,25 y la incertidumbre ±3. Se utilizó un
espectrofotómetro marca Jenway 6320D.

Hay 2 tipos de lipoproteínas las de


 INTRODUCCIÓN: baja densidad (LDL) y las
lipoproteínas de alta densidad (HDL).
El colesterol es un componente Las partículas LDL llevan el colesterol
importante de las membranas a las partes del cuerpo, sin embargo
celulares1 es un lípido y un esterol, si hay mucha cantidad en el torrente
que fluye por el cuerpo por el sanguíneo estás se depositan en las
torrente sanguíneo, sin embargo el arterias obstruyéndolas, esto podría
cuerpo empaqueta el colesterol y ocasionar un infarto en el miocardio.
otros lípidos en pequeñas partículas Se puede reducir el nivel de LDL,
recubiertas de proteínas, llamado ingiriendo menos grasas saturadas.
lipoproteínas y de esta forma se Las HDL contienen muchas proteínas,
mezcla bien con la sangre. y su trabajo es absorber el colesterol
Tiene 3 funciones principales2: sobrante de los tejidos y las células y
ayuda a construir la pared celular lo devuelve al hígado que lo
externa, permite que el cuerpo reabsorbe, se pueden aumentar su
produzca vitamina D y hormonas nivel realizando actividad física.
como el estrógeno y la testosterona, Con la realización de esta práctica se
además fabrica los ácidos biliares pretende determinar por medio
que ayudan a digerir los alimentos en espectrofotometría la concentración
los intestinos. Sin el colesterol del colesterol total en un patrón
ninguna de estas funciones se podría trabajo con concentración
llevar a cabo. desconocida.
SECCIÓN EXPERIMENTAL:

 PROCEDIMIENTO:
Existe relación entre el colesterol y Se realizó el experimento descrito en
las enfermedades cardiovasculares. el Manual de Técnicas de Laboratorio
en Química Clínica3, sin modificación
1
Koolman, J. Bioquímica, texto y atlas: Ed 3. Edi.
3
Médica Panamericana: Madrid, España, 2005, Shoscinsky,K. Manual de Técnicas de
p172. Laboratorio en Quìmica ClínicaI. Catedra de
2
Mason W, Freeman, E. Colesterol. Editorial Química Clínica. Universidad de Costa Rica: San
Paidós: Barcelona, España, 2008, p25. José, p1-3.
alguna.
Cuadro II. Cálculos estadísticos
RESULTADOS: obtenidos en la obtención de la
concentración del colesterol.

Absorbancia Dato Valor


Media 205,00 mg/dL
Absorbancia
Mediana 205,00 mg/dL
0.400 Desviación 4 ppmil
relativa
0.300
Absorbancia

promedio
0.200 Coeficiente 0,6%
variación
0.100 Incertidumbre ±3
0.000 Desviación 1,25
estándar
620
580
590
600
610

630
640

Longitud de Onda (nm)


DISCUSIÓN DE RESULTADOS:
Figura 1. Espectro de absorción
realizada para obtener la longitud de En la figura 1 se puede observar que
onda de mayor absorción. a 625nm de longitud de Onda se
encuentra el punto más alto de
0.350 absorbancia el cual fue de 0,305
y = 0.0008x - 0.029
0.300 después de ese punto la absorbancia
R² = 0.9727
descendió.
0.250
En la figura 2 se gráfica la
Absorbancia

0.200 concentración en mg/dL con respecto


0.150 a la absorbancia, determinando la
0.100 linealidad del método con los
instrumentos y los reactivos
0.050
utilizados.
0.000 En el cuadro I se resume la
100
150
200
250
300
350
400
50

absorbancia y concentración de 3
Concentración (mg/dL) replicas tomadas durante el
procedimiento.
Figura 2. Curva de calibración En el cuadro II, se muestra la
realizada para obtener la concentración promedio de colesterol
concentración del Colesterol en la total encontrada en el experimento,
sustancia incógnita. esta fue de 205mg/dL.
Es deseable que una persona tenga
Cuadro I. Determinación de la un nivel de colesterol <200mg/dL4 de
concentración del patrón de trabajo sangre, si se encuentra entre 200 y
del Colesterol. 239mg/dL está en un limite máximo,
y más de 240mg/dL 240 está en alto
Absorbancia Concentración riesgo de padecer enfermedad. Si los
Incógnita Incógnita niveles son altos es importante
Replica (nm) (mg/dL) realizar una segunda prueba para
1 0,134 203,75
2 0,135 205,00 4
Williams, H. Nutrición para la salud, la condición
3 0,136 206,25 física y el deporte. Editorial Paidotribo: Barcelona
España, 2002, p162.
determinar los niveles de LDL y HDL
en el paciente y de esta forma
conocer el nivel de riesgo real y dar
el tratamiento e indicaciones
necesarias.
Además en el cuadro II, se pueden
observar más datos estadísticos
donde se muestra la desviación
estándar de 1,25 medida del grado
de proximidad de los datos en torno
al valor de la media5, al ser una
desviación pequeña indica que los
datos están agrupados alrededor de
la media.
La desviación relativa promedio fue
de 4ppmil y el coeficiente de
variación fue de 0,6% medida6 de
variabilidad relativa que expresa la
magnitud de la desviación estándar
como un porcentaje de la media,
este indica la precisión del método.
Los datos obtenidos también
demuestran la precisión del método.

CONCLUSIÓN:

 El colesterol es un componente
importante de las membranas
celulares que cumple varias
funciones significativas.

 La espectrofotometría es un
buen método para determinar
la concentración de colesterol
total.
 El experimento dio los
siguientes resultados: La
concentración del colesterol
total 205,00mg/dL, la
desviación relativa promedio
4ppmil, el coeficiente de
variación 0,6%, la desviación
estándar 1,25 y la
incertidumbre ±3.

5
Mongay, C. Quimiometría; Universidad de
Valencia: España, 2011, p27.
6
Araya, C. Estadística para laboralista químico,
1°Ed; Universidad de Costa Rica: San José, Costa
Rica, 2004, p23.