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 Desarrollar una prueba para determinar la

presencia de sales con el nitrato de plana


en ciertas muestras.
 Reconocer las características de las
pruebas realizadas.
COMPOSICÍON QUÍMICA DE
LAS CELULAS INTRODUCCIÓN

Antes de realizar la respectiva práctica, se


socializaron las normas de seguridad y el
AUTORES:
adecuado manejo de los materiales de laboratorio
 Silvia Fernanda Martínez Santamaria para evitar accidentes de trabajo.

Código: 22180476 Luego se realizaron pruebas sencillas a una


cantidad finita de muestras. Se utilizo reactivos
 Camilo Alberto Flórez Rojas específicos, con el fin de determinar
cualitativamente compuestos orgánicos,
Código: 22181096 inorgánicos y macromoléculas.

 Mario Jurado Herrera La práctica se divide en dos momentos, en el


primer momento se realizaron las reacciones
Código: 2171586 químicas entre los reactivos y las muestras y en el
segundo momento y más importante se tomaron
 Laura Andrea Rojas Palomino una serie de observaciones visualizadas en los
tubos de ensayo. Al final se tabularon los
Código: 2242747 resultados en las tablas suministradas por el
manual de prácticas de laboratorio de biología
Laboratorio de biología para realizar su respectivo análisis.
Universidad Santo Tomás

OBJETIVOS
MARCO TEÓRICO
 Determinar la presencia de
macromoléculas como azúcares, Las proteínas son macromoléculas que se
almidones, proteínas, lípidos y sales en encuentran en estado coloidal, representan más
una muestra problema. del 50 % de peso seco de la célula.

 Señalar la presencia de azucares Están compuestas por aminoácidos, existen 20


reductores con el reactivo Benedict´s en aminoácidos diferentes que se unen entre sí por
las muestras de agua, glucosa 2%, miel enlaces polipeptídicos.
2%, almidón 0.5%, sacarosa 2% y la
muestra problema. Un azúcar reductor es todo azúcar con un grupo
carbonilo en su estructura, el cual puede funcionar
 Identificar la aparición de almidones con el como aldehído o cetona según su ubicación en
reactivo de Lugol en las muestras de dicha estructura. Se llaman azúcares reductores
glucosa 2%, sacarosa 2%, almidón 2%, porque poseen la capacidad de reducir otros
extracto de papa y muestra problema. compuestos gracias a la alta reactividad del doble
enlace del oxígeno.
 Realizar dos pruebas para determinar la
presencia de proteínas una con el reactivo
Biuret y la segunda con ácido nítrico. El almidón es un polisacárido de reserva
alimenticia predominante en las plantas,
constituido por amilosa y amilopectina.
 Elaborar la técnica del Sudam III para
Proporciona el 70-80% de las calorías consumidas
identificar la presencia de lípidos en
por los humanos de todo el mundo.
algunas muestras.
para muchos otros compuestos de plata, tales
Los lípidos, son un grupo de compuestos como los utilizados en la fotografía. Es mucho
químicamente diversos, solubles en solventes menos sensible a la luz de los haluros.
orgánicos (como cloroformo, metanol o benceno),
y casi insolubles en agua. La mayoría de los METODOLOGÍA
organismos, los utilizan como reservorios de
moléculas fácilmente utilizables para producir A) Prueba para azucares reductores
energía (aceites y grasas).
Se tenían seis tubos de ensayo con 3 ml de (agua,
Una sal es un compuesto iónico que contiene glucosa 2%, miel 2%, almidón 0,5 %, sacarosa y
cationes diferentes al del hidrógeno (H+) y aniones la muestra problema, en este caso fue un
diferente al hidroxilo (OH-). Cuando las sales se energizante llamado “vive 100”).
disuelven en el agua se forman iones.
Se añadieron tres gotas de reactivo Benedict’s a
cada tubo de ensayo, se calentó por un minuto
Prueba de reacción de benedit: Esta prueba sirve cuidadosamente. Se mantuvo un movimiento de
para el reconocimiento de azúcares reductores. muñeca para evitar el derrame de la muestra
Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio
básico débil. Aunque es similar a la reacción de B) Prueba para almidones
Fehling, el medio básico débil (HNaCO3) y el
Se tenían seis tubos de ensayo con 3 ml de (agua,
estabilizante (citrato sódico) usados hacen que
glucosa 2%, almidón 0,5 %, sacarosa, extracto de
este test sea más sensible y estable.
papa y “vive 100”).
Prueba de Yodo: El reactivo de Lugol que contiene
Se añadieron tres gotas de reactivo Lugol a cada
una mezcla de yodo y yoduro permite reconocer
tubo de ensayo, se agito. cuando la reacción torno
polisacáridos, particularmente el almidón por la
color (azul oscuro, morado o negro) la prueba fue
formación de una coloración azúlvioleta intensa y
positiva (+). Negativa (-) si la reacción tornaba un
el glicógeno y las dextrinas por formación de
color diferente.
coloración roja.
C) Prueba para proteínas
Prueba xantoproteica: Los anillos aromáticos
presentes en algunos aminoácidos reaccionan Se tenían cinco tubos de ensayo con 3 ml de
con ácido nítrico concentrado (agua, albúmina de huevo, gelatina sin sabor 3%,
formando nitroderivados de color amarillo o leche entera, “vive 100”).
anaranjado por lo cual esta reacción permite
reconocer la presencia de Tirosina, Fenilalanina y Se añadieron tres gotas de reactivo Biuret a cada
Triptófano. tubo, se agito. Cuando se formó un anillo de color
lila la prueba fue positiva (+) e indica que la
Reactivo de Biuret: Los péptidos y proteínas muestra tiene proteína.
producen una reacción coloreada muy usada para A) Prueba Xantoproteíca
la valoración de estos, llamada reacción del Biuret.
Las proteínas por sus uniones peptídicas Se tenían cinco tubos de ensayo con 3 ml de
reaccionan con los iones cúpricos del reactivo en (agua, albúmina de huevo, gelatina sin sabor 3%,
medio alcalino formando un complejo de color leche entera, “vive 100”).
violeta.
Se manejo con mucha precaución el ácido nítrico.
Técnica del sudam III: El sudam III es una solución Se añadieron tres gotas del ácido por las paredes
que se usa en el laboratorio para el de cada tubo de ensayo, se calentó por un minuto
reconocimiento del lípido (grasas), por lo tanto, es manteniendo un ligero movimiento de muñeca
soluble en ellas predominantemente utilizado para para evitar el derrame de la muestra.
colorear triglicéridos en secciones congeladas de
micrótomos, pero también pueden colorear B) Prueba para lípidos
algunos lípidos en secciones con parafina.
Se tenían cinco tubos de ensayo con 5 ml de
Nitrato de plata: El nitrato de plata es un (agua, aceite, agua más aceite, leche entera “vive
compuesto inorgánico con la fórmula química 100”).
AgNO3. Este compuesto es un precursor versátil
Al tubo de ensayo con 5 ml de agua se le añadió
diez gotas de aceite y se siguió el siguiente
procedimiento.
Se añadieron tres gotas de SUDAM III a cada tubo
y se agito, luego se observó si se formaron gotas
coloidales de color rojo, si esto ocurre la prueba
fue positiva (+).

C) Prueba de sales
Se tenían cuatro tubos de ensayo con 3 ml de
(agua, NaCl 3%, suero fisiológico y “vive 100”).

Se manejo con mucha precaución el nitrato de


plata. Se añadieron tres gotas de dicho compuesto
Figura 1. Resultados de la pruebas
a cada tubo de ensayo, se calentaron los tubos de
ensayo de tres a cinco minutos. Se forma un
La glucosa, la miel y el almidón resultaron que
precipitado de color blanco.
contienen azúcares reductores gracias a su color
amarillo ladrillo.
RESULTADOS
B) Prueba para Almidones:
A) Prueba para azúcares reductores: Se tomaron 5 muestras de 3 ml con distintos
Se tomaron 5 muestras de 3 ml con distintos contenidos los cuales se le agrega tres gotas de
contenidos que se le agrega tres gotas de reactivo de Lugol por muestra. Si alguna de estas
reactivo de Benedict’s y se somete a un muestras da un color de azul intenso significa que
calentamiento de un minuto por muestra. Si tiene positivo para almidones, de lo contrario será
alguna de estas muestras da un color de amarillo de otro color.
ladrillo significa que tiene positivo para azúcares Tabla 2. Resultados para prueba B
reductores, de lo contrario será de otro color.
TUBO MUESTRAS RESULTADO COLOR

Tabla 1. Resultados para prueba A. 1 agua negativo rojo


caramelo
TUBO MUESTRAS RESULTADO COLOR 2 glucosa 2% negativo rojo
caramelo
1 Agua Negativo No
cambió 3 sacarosa negativo rojo
2 Glucosa 3% Positivo amarillo 2% caramelo
ladrillo 4 almidón 0.5 positivo negro
%
3 Miel 2% Positivo Verde 5 extracto de positivo negro
papa
4 Almidón 0.5 Positivo Amarillo
6 vive 100 negativo no
% ladrillo
cambió
5 Sacarosa 2 Negativo No
% cambió
6 Vive 100 Negativo No
cambió
Figura 2. Resultados de la prueba B
Tabla 4. Resultados para la prueba C-2
El mismo almidón y el extracto de papa dieron TUBO
positivos para almidones gracias a su color oscuro MUESTRAS RESULTADO COÁGULO
o azul intenso. 1 Agua negativo no se
C) Pruebas para proteínas: formó
1- Biuret 2 albúmina de positivo sí, amarillo
Se tomaron 5 muestras de 3 ml con distintos huevo
contenidos los cuales se le agrega tres gotas de
reactivo de Biuret por muestra. Si alguna de estas 3 gelatina sin negativo no se
muestras forma un anillo lila en la superficie sabor 3% formó
significa que tiene positivo para proteínas, de lo 4 leche entera positivo sí, amarillo
contrario será que no contiene de estas.
5 vive 100 negativo no se
Tabla 3. Resultados para la Prueba C formó

TUBO MUESTRAS RESULTADOS COLOR

1 agua negativo azulado


completo
2 albúmina de positivo anillo
huevo azulado

3 gelatina sin positivo anillo lila


sabor 3%
4 leche entera positivo anillo
azul
5 vive 100 positivo anillo
azulado
fuerte

Figura 4. Resultados de las pruebas C2


La albúmina de huevo y la leche dieron positiva
con xantoproteínas por su correspondiente
coágulo amarillo al principio de la solución.

D) Prueba para lípidos:


Se tomaron 5 muestras de 5 ml con distintos
contenidos los cuales se le agrega tres gotas de
Sudam III por muestra. Si alguna de estas
muestras forma micelas (partículas coloidales) en
la solución significa que tiene positivo para lípidos,
de lo contrario será que no contiene de estas.
Figura 3. Resultados de las pruebas C. Tabla 5. Resultados para prueba D
La albúmina de huevo, la gelatina sin sabor, la TUBO PARTÍCULAS
leche y el vive 100 dieron positivo para proteínas, MUESTRAS RESULTADO COLOIDALES
gracias a la formación del anillo.
1 Agua Negativo No se formó
2- Xantoproteínas
Se tomaron 5 muestras de 3 ml con distintos 2 Aceite Positivo Se formó
micelas (todo)
contenidos que se le agrega tres gotas de ácido
Nítrico (HNO y se somete a un calentamiento 3 Agua + Positivo Se formó
de un minuto por muestra. Si alguna de estas Aceite (10 micelas en la
muestras da un coágulo amarillo significa que gotas) oleasa
tiene positivo para xantoproteína, de lo contrario 4 Leche Positivo Se formó, un
será de otro color. poco
5 Vive 100 Negativo No se formó Figura 6. Resultados de las pruebas D
El Cloruro de Sodio, el suero fisiológico y el vive
100 da positivo para sales gracias a la formación
del precipitado blanco en la solución. El vive 100
presentó una separación diluido de fase.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Con la experiencia realizada se estudiaron los


comportamientos de las macromoléculas de la
siguiente forma:
DETERMINACIÓN PARA AZUCARES
REDUCTORES:
Se realizo la determinación de azucares
reductores en seis patrones distintos: agua,
glucosa 2% miel 2% almidón 0,5%, sacarosa 2%
Figura 5. Resultados de las pruebas D y una muestra problema de una bebida
El aceite, el (agua + aceite) y la leche entera dieron energizante “vive 100”
positivo de contener lípidos gracias a las micelas El nombre de azucares reductoras se debe al
formadas en la solución. comportamiento que tienen los azucares en
E) Pruebas para sales: presencia de agentes oxidantes, lo cual explica
Se tomaron 4 muestras de 5 ml con distintos porque se utiliza el reactivo de benedict ya que es
contenidos que se le agrega seis gotas de ácido una reacción de oxidación, es decir, que en un
Nítrico (HNO y se somete a un calentamiento medio alcalino el ion cúprico (Cu+2) es capaz de
de tres a cincos minutos por muestra. Si alguna de reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar
estas muestras da un precipitado blanco significa (R-CHO) a la forma de Cu+. El cambio visual que
que tiene positivo para sal, de lo contrario será de presenta es la transformación de una solución
otro color. azulada a un precipitado rojo ladrillo indicando la
formación del óxido cuproso (Cu2O). Como se
Tabla 6. Resultados para la prueba E observa en la figura 1, se puede decir que la
muestra de glucosa al 2% (tubo 2) y la miel al 2%
TUBO MUESTRAS RESULTADO PRECIPITADO
(tubo 3) dieron positivas por la formación del
1 Agua Negativo No se formó precipitado amarillo ladrillo, debido presencia de
azucares reductores como glucosa, y fructosa en
2 NaCl 3% Positivo Se formó el caso de la miel que está constituida
precipitado normalmente por estos dos disacáridos, los cuales
color blanco presentan sus OH libres. A pesar de que en la
3 Suero Positivo Se formó imagen se vea de otro color cabe destacar que
fisiológico precipitado luego del calentamiento la reacción continúo
color blanco hidrolizándose. A su vez el agua y el almidón de
4 Vive 100 Positivo Se formó 0,5% dan negativos debido a que no hay
precipitado presencia de azucares reductores en su
color gris estructura. En el caso de la Sacarosa al 2% a
pesar de que es un disacárido, es uno formado por
glucosa + fructuosa que se une por medio de los
carbonos sin dejar opción de carbonos
anoméricos por lo cual no es un azúcar reductor.
Por último, la muestra problema dio negativo, lo
que indica que el azúcar presente es sacarosa y
no glucosa o fructosa debido a que no se presentó
la formación de ningún precipitado amarillo ladrillo,
Como lo dice la etiqueta del producto, este tiene
azucares en su composición, pero no de origen
reductor.
DETERMINACIÓN PARA ALMIDONES.
Con la reacción del Lugol se puede identificar de
modo general polisacáridos, pero de modo
específico entre uno de ellos se encuentra el entera presentan en sus estructuras este tipo de
almidón, este al ponerse en contacto con el lugol proteínas, debido a la presencia de un coágulo de
presenta una coloración violeta, esto se debe a color amarillo presente luego de calentar durante
que cuando el lugol reacciona con las dos 1 minuto. El agua, la gelatina sin sabor y la
estructuras que forman el almidón ,con la amilosa muestra problema “vive 100” dan como resultados
proporciona un color azul y cuando reacciona la que no presentan xantoproteínas en sus
amilopectina con lugol proporciona un color rojo estructuras, debido a que no presentaron
y la combinación de estos dos colores nos cambios.
proporciona el color azul oscuro, característico DETERMINACIÓN PARA LIPIDOS
para la identificación del almidón. Es por esto que Los indicadores para grasas son más solubles en
se observa que las muestras en los tubos 4 y 5 las propias grasas que en el medio en el que van
dieron positivas, siendo estas; almidón al 2% y disueltos. Así, El indicador Sudam III al estar en
extracto de papa, respectivamente. El tubérculo contacto con la grasa hace que este se vaya
de la papa contiene en sus células granos de cargando del colorante. El reconocimiento que se
almidón, por lo cual para extraerlo se debe triturar da en los lípidos se basa en la no polaridad que
la papa para que los granos de almidón se liberen. presenta la molécula, es por ello que se observa
La respuesta positiva para estas dos muestras que la formación de micelas, indicando como positivo
en esta reacción el yodo entra a la estructura la presencia de lípidos, como es el caso del tubo 2
helicoidal del almidón, es decir, que los átomos de con la muestra de aceite, al agitar el tubo se
yodo se introducen entre las espirales provocando pueden observar la formación de micelas. El tubo
la absorción o fijación de yodo en las moléculas 3 con la presencia de la mezcla de agua y aceite,
del almidón en la amilosa. Mientras que el agua se observa la formación de micelas en la parte
dio negativo ya que no es un polisacárido. La oleosa indicando positivo para lípidos, ya que por
muestra problema a su vez dio negativa, indicando parte acuosa no se observó ningún cambio. El
que no tiene presencia de almidones en su tubo 4 con la presencia de leche, se observaron
estructura. muy pocas micelas formadas debido a que las
leches comerciales, después de pasar por tantos
procesos les quitan prácticamente toda la grasa. Y
DETERMINACIÓN PARA PROTEÍNAS por último para la muestra problema no se observó
El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la ningún cambio, indicando que no presenta lípidos
presencia de proteínas, péptidos cortos y otros el “vive 100”.
compuestos con dos o más enlaces peptídicos en
sustancias de composición desconocida, debido a DETERMINACIÓN PARA SALES
la coordinación que tiene. Es por eso que al De las moléculas inorgánicas se encuentran, el
contacto con proteínas se genera un anillo de color agua y algunas sales y para la determinación de
lila. Como se puede observar en la figura 3 en los las sales se utiliza AgNO3 que en presencia con
tubos 2 y 3 hay presencia de un anillo color lila, sales forma un precipitado blanco característico.
indicando positivo para proteínas. De las 5 En la experiencia se pudo observar que luego de
muestras ensayadas solo estas dos dieron calentar los cuatro tubos con muestra, el único que
positivas, albumina de huevo y gelatina sin sabor no presento cambios fue el tubo 1 (agua), mientras
respectivamente. El caso de la albumina de huevo que en los otros tres; NaCl al 3%, muestra de
que en su composición presenta la mayor suero fisiológico y la muestra problema “vive 100”
proporción de proteínas y la muestra de gelatina presentaron un cambio con la formación de un
sin sabor al 3% por su parte dio positivo ya que es precipitado blanco, indicando así la presencia de
una proteína compleja. Por último, al estudiar la sales, como se observa en la figura 6 la muestra
muestra problema se observa que no se forma problema presenta un color grisáceo, pero al agitar
anillo, deduciendo así que la bebida energizante se puede observar la presencia del precipitado
“vive 100” no tiene presencia de proteínas. blanco, solo que ese color enmascaro la presencia
del precipitado blanco.
Por otra parte, se realizaron pruebas para la
determinación de las Xantoproteínas. Como las CONCLUSIONES
Xantoproteínas estas conformadas por
aminoácidos como el triptófano y la tirosina, se
identifican con HNO3 debido a que el ácido es PREGUNTAS ADICIONALES
capaz de detectar los anillos bencénicos de estos 1) Explique: ¿Por qué en la prueba de
aminoácidos. De las cinco muestras realizadas se azucares reductores la muestra para miel
observa que la albumina de huevo y la leche
da positiva, mientras que para la sacarosa el interior hidrofóbico. Esta dualidad convierte a las
da negativa? micelas en estructuras anfipáticas. El nombre
La diferencia radica en la composición de la anfipático hace referencia a tener la parte hidrófila
miel comparada con la sacarosa, mientras que e hidrófoba a la vez
la constitución de la miel esta basada en 5) Mencione al menos tres tipos de sales
glucosa y fructosa (monosacáridos) la necesarias para el funcionamiento del
sacarosa (polisacárido) organismo humano y diga cuál es su
2) Analice y escriba: ¿por qué la muestra de importancia.
gelatina da positivo con el reactivo de
Biuret pero negativa con el acido nítrico, si Calcio: Es el principal componente del esqueleto.
en ambos casos se determina proteínas? Además, son importantes en funciones
Existen varios métodos para la identificación de metabólicas, como la función muscular, el
proteínas, en este caso el de Biuret y el de estímulo nervioso, actividades enzimáticas y
xantoproteícas , pero a pesar que ambas hormonal.
determinan proteínas la prueba de las
xantoproteícas determina los aminoácidos Hierro: La principal función es el transporte de
triptófano y tirosina y en la composición de la oxígeno a varios sitios del cuerpo. La hemoglobina
gelatina los valores son muy bajos por lo cual la en los eritrocitos es el pigmento que lleva el
prueba no da positivo. oxígeno de los pulmones a los tejidos.
3) Consulte: ¿Qué función cumplen:
carbohidratos, lípidos y proteínas en las Zinc: Es un elemento de esencial importancia em
células la nutrición humana. Se encuentra en muchas
carbohidratos: Los carbohidratos tienen varias importantes y esenciales para el metabolismo. La
funciones en las células. Ellos son una excelente mayoría del zinc se halla en el
fuente de energía para las distintas actividades esqueleto, pero también en otros tejidos (piel y el
que ocurren en nuestras células. Algunos cabello y en algunos órganos
carbohidratos pueden tener una función como la próstata.
estructural. Por ejemplo, el material que mantiene 6) Explique el por qué de la composición de
a las plantas de pie y da a la madera sus la muestra problema
propiedades resistentes es una forma del polímero VIVE 100 COMPONENTES:
de glucosa conocida como la celulosa. Agua carbonatada, azúcar, ácido cítrico, taurina
Lípidos: Una función principal de los lípidos es la (300 mg/100 ml), saborizantes naturales e
formación de las membranas biológicas. Las idénticos al natural, citrato de sodio, ácido
células están rodeadas por una capa fina de ascórbico, benzoato de sodio y sorbato de potasio,
lípidos. Esta capa está formada por un tipo EDTA di sódico cálcico, cafeína, color natural
especial de lípido que tiene tanto propiedades caramelo IV, extracto natural de té verde (min.
hidrofóbicas como hidrofílicas. Las puntas 0.005%), niacina, ácido pantoténico, vitamina B6,
hidrofílicas de estas moléculas se enfrentan al vitamina B12, carotenos naturales.
espacio dentro y fuera de las células, el cual es Se escogió el vive 100 como muestra problema
acuoso. por su contenido de 18 ingredientes en total, entre
Proteínas: Ellas ayudan en el transporte de ellos, taurina, cafeína, té verde, aditivos artificiales
materiales a través de las membranas celulares. y naturales, vitaminas (C, B3, B5, B6, B12),
Un ejemplo sería la absorción de la glucosa desde grandes contenidos de azúcares y compuestos
el flujo sanguíneo a las células. Regresaremos a con sales como el (Na3C6H5O7) Citrato de Sodio
discutir sobre esta habilidad importante cuando y C7H5NaO2 (Benzoato de Sodio). Y el EDTA
hablemos sobre la resistencia de las células (ácido etilendiaminotetraacético) di sódico cálcico
cancerosas hacia los agentes quimoterapeúticos. que es un aditivo usado como agente secuestrante
4) ¿Cómo se forman las micelas en los que frecuentemente lo usan las bebidas con gas.
lípidos?
Las micelas tienen una parte hidrofóbica, que está REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
en el interior y otra hidrofílica en su exterior. La
gran ventaja está en que pueden transportar 1. Astrid Serrano., Manual de prácticas de
moléculas insolubles en un medio acuoso. Sin las biología. Tercera edición (2016) pag 23-32
micelas ninguna sustancia insoluble en agua 2. Curtis H., Barnes N., Massarini A.,
podría transportarse a través de un solvente polar Schnerck A., Biologia. Edición 7º. Editorial
como el agua. Las micelas son los transportadores Médica Panamericana (2008).
ideales ya que tienen la capa externa hidrofílica y
3. Bioquímica, Tercera edición 2005
recuperado:
http://booksmedicos.me/bioquimica-3a-
edicion-mathews/