INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

Escuela Nacional De Ciencias Biológicas

Asignatura:

“Laboratorio de Bioquímica Clínica”

PRACTICA:

Bilirrubina

ALUMNA : Vanesa Pérez Galindo

Grupo: AQM1

Sección : 3

No.de boleta: 2014500857

Fecha: 12 de Abril del 2018.

INTRODUCCION:
La bilirrubina es el principal pigmento de la bilis; es un compuesto tetrapirrolico que se forma a partir del
catabolismo del grupo hemo en las células del sistema retículo endotelial, hígado, bazo y medula ósea.
La bilirrubina es un tetra pirrol lineal hidrófobo que surge del clivaje del anillo cíclico de hemo de la
hemoglobina o de otras proteínas que contienen hemo como mioglobina y citocromos. La conversión del hemo
a bilirrubina es catalizada en dos pasos secuenciales por la hemoxigenasa y por la biliverdinreductasa. En el
adulto, se producen aproximadamente 250 a 350 mg por día de bilirrubina, alrededor de 70% por la degradación
de los eritrocitos seniles en el sistema reticuloendotelial, un 30% por degradación de otras hemoproteínas
(predominantemente citocromos hepáticos) y menos del 1% por eritropoyesis ineficaz en la medula ósea.
El análisis de bilirrubina generalmente se realiza como parte de un grupo de análisis para controlar la salud del
hígado. El análisis de bilirrubina se puede realizar para lo siguiente:
 Investigar la ictericia: los niveles elevados de bilirrubina pueden otorgar un color amarillento a la piel y
la parte blanca de los ojos (ictericia). Este análisis se utiliza con frecuencia para medir los niveles de
bilirrubina en recién nacidos.
 Determinar si hay alguna obstrucción en las vías biliares del hígado
 Ayudar a detectar o controlar la evolución de otras enfermedades hepáticas, como la hepatitis
 Ayudar a detectar una mayor destrucción de glóbulos rojos
 Ayudar a hacer el seguimiento de cómo está funcionando un tratamiento
 Ayudar a evaluar la sospecha de toxicidad de medicamentos

OBJETIVOS:
 Determinar la bilirrubina sérica directa (conjugada).
 Determinar la bilirrubina sérica total.
 Calcular la bilirrubina sérica indirecta (no conjugada).

FUNDAMENTO:
Determinación de bilirrubina por el método de Jendrassik-Grof
La bilirrubina reacciona con el ácido sulfanílico diazotado (DAS) formando un colorante que es rojo en un
ambiente neutral y azul en un ambiente alcalino. Los glucoronidos de la bilirrubina solubles en agua
reaccionean directamente con DAS mientras la bilirrubina ‚indirecta’ conjugada con albumina reacciona solo en
presencia de un acelerador. La bilirrubina en suero y plasma se determina según Jendrassic-Gróf mediante
reacción con ácido sulfanilico diazotada despues de anadir cafeína, Benzoato de Sodio e acetato de Sodio. Con
la solución Fehling-II alcálica se produce una azobilirrubina azul, cual concentración tambien se puede
determinar en presencia de productos laterales ámarillos con una longitud de onda de Hg 578nm. La bilirrubina
directa se mide segun Schellong y Wende sin añadir reactivos alcálicos con Hg 546nm. La bilirrubina indirecta
se calcula de la diferencia entre Bilirrubina total y bilirrubina directa.

RESULTADOS:
Tabla 1. Concentración de bilirrubina en suero.
 Determinación
Equipo BD BT mg/dL BI
mg/dL mg/dL
1 3.87 6 2.13
2 2.05 5.02 2.97
3 3.87 5.08 1.64
4 3.12 5.36 2.24
∑ 3.22 5.36 2.24
BT= bilirrubina total BD= bilirrubina directa BI= bilirrubina indirecta
Tabla 2. Porcentaje de error y puntuación del índice de varianza del equipo 1
% de Error PIV (%)
BT 11.9 119
BD 20.1 201

EJEMPLO DE CALCULOS:
 Bilirrubina total equipo1= ( 0.555 ) (10.8 )=6 mg/dL
 Bilirrubina directa equipo 1=( 0.268 ) ( 14.4 ) =3.87 mg/dL
mg
 Bilirrubina Indirecta =BilirrubinaTotal −Bilirrubina Directa
dL
 Bilirrubina Indirecta equipo1=6−3.87=¿ 2.13 mg/dl
valor observado−valor esperado 6−5.36
 Error de BT = x 100= x 100=11.9
valor esperado 5.36
error 11.9
 PIV de BT = x 100= x 100=119
CVS 10

DISCUSIONES:
Este análisis se realiza para determinar si hay daño renal, y si es así analizar si es pre-hepático, hepático o post-
hepático, es una prueba que se utiliza para evaluar un perfil hepático, esta prueba sola, se utiliza comúnmente en
niños recién nacidos o en transfusiones sanguíneas.
La concentración de bilirrubina indirecta o no conjugada suele ser mayor que la bilirrubina directa o conjugada,
esto debido a que diariamente los eritrocitos mueren o su periodo de vida media se termina produciendo la lisis
del eritrocito, liberando el grupo hemo y por lo tanto este es catabolizado o degradado hasta bilirrubina directa;
por consecuencia la cantidad es mayor de la que puede ser conjugada (indirecta) por el hígado.
En este caso el paciente la BD y BI están aumentadas, aunque en mayor proporción la directa, es por eso que se
diría que tiene una afección post-hepática y para descartar que sea cáncer, cirrosis entre otras afecciones, se
procedería a complementar con la prueba de transaminasas, si éstas salen normales se asegura que el problema
no es post-hepático, mientras que si éstas salen elevadas se hablaría de un daño hepático.
El coeficiente de variación tiene que ser de 10%, esta es alta debido a la complejidad de la técnica y sus
condiciones, sin embargo el obtenido por nuestro equipo sobrepaso el límite, obteniendo un 11.9% de error
indicando un mal proceso de la técnica, por lo que se deberá mejorar la forma de trabajo.

CONCLUSIONES:

 Se sospecha que el paciente tiene una afección post-hepática

 La determinación de bilirrubina sérica es de importancia clínica en el diagnostico y tratamiento de
enfermedades hepáticas principalmente.
BIBLIOGRAFIA:

 Henrry R.J. Clinical Chemistry; Principies and Technics. Harper and Row. New York. Pp-173.
 J.M Prieto Valtueña., J.R Yuste; Balcells. La Clínica y el laboratorio. Interpretacion de análisis y
pruebas funcionales. Exploración de los síndromes. Cuadro biológico de las enfermedades; ed. 21, Ed.
Elsever Masson. España. 892 pág.

Pregunta extra:

Enfermedades que excretan urobilinógeno en orina

Hepatitis:
Todo aumento del urobilinógeno debe considerarse como primera causa esta enfermedad, de la cual existen
alrededor de 7 diferentes tipos, siendo las más letales la B, C y D en pacientes con VIH o inmunosupresión y en
países en vías de desarrollo los tipos A y E relacionados con diarreas y vómitos de difícil manejo.
La hepatitis como tal es considerada auto-limitada, sin embargo si existe progresión con en el caso de hepatitis
por medicamentos o por alcohol el daño en el interior de los hepatocitos genera liberación de mayores
cantidades de bilirrubina, que al degradarse por las bacterias generará urobilinógeno alto
Cirrosis:
Catalogada como un daño crónico del hígado se caracteriza por una fibrosis de las células hepáticas de manera
irreversible las cuales empiezan a generar cúmulos de pigmentos biliares, los cuales son degradados de igual
manera que la bilirrubina formando mayor nivel de urobilinógeno en sangre y por ende de urobilina
Hemólisis:
Como describimos en la síntesis de bilirrubinas, estas se forman por la destrucción de eritrocitos que
completaron su vida útil, sin embargo procesos anómalos como dengue, malaria, hemorragias, síndrome de
HELLP, cáncer entre otros generan una destrucción de glóbulos rojos sin tomar en cuenta la edad de los
mismos.
Colestasis:
También llamada colestasia, hace referencia a la obstrucción que se ha presentado en las vías de salida de los
productos del hígado lo cual se traduce en niveles aumentados de bilirrubinas y enzimas hepáticas.
Colangitis:
Esta es una enfermedad bastante común caracterizada por la inflamación de las vías biliares principalmente el
conducto biliar común conocido también como colédoco.
En este caso se cumple el mismo mecanismo de la colestasia, al verse obstruida la vía biliar se acumulan las
bilirrubinas y son más fácilmente degradadas por las bacterias.
Cáncer o metástasis a Hígado:
Todo cáncer que genere metástasis a hígado generará daño en las células del mismo así como también lo hace el
cáncer hepático.
Por ello la destrucción de las células de este órgano acompañado de procesos de obstrucción generan acumulo
de enzimas hepáticas, desechos tóxicos, ácidos biliares y bilirrubinas, fatales para la salud.
Hematomas:
Dentro del interior de estos, se encuentran abundantes cantidades de eritrocitos, que al verse contenidos en un
medio sin oxígeno inician un proceso de destrucción liberando su hemoglobina la cual inicia el proceso de
producción de bilirrubinas.
Por ejemplo, este proceso es evidente en los famosos moretones, los cuales tienen una progresión en color de
morado, luego verdoso y por último amarillento, todo ello por el procesamiento de la hemoglobina.

Enfermedades donde se excreta bilirrubina:

 Hepatitis
 Cirrosis
 Vesícula biliar
 Colecistitis