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PRIMER LABORATORIO
Distribución
universal de los
microorganismos
PROF:
ALUMNO:
CODIGO:
20124122E
2013-II
DISTRIBUCION UNIVERSAL DE LOS MICROORGANISMOS.
OBJETIVO.
- Aprender la preparación adecuada de los medios de cultivo de los diferentes
microorganismos.
- Adquirir conciencia de la importancia que tiene la correcta preparación del medio
de cultivo en la práctica microbiana.
- Adquirir práctica en el preparado de algunos medios de cultivo a partir de sus
componentes individuales.
- Reconocer la necesidad de evitar la contaminación tanto de los medios de cultivo
como de los demás elementos utilizados en el laboratorio de microbiología.
- Aprender el correcto manejo de los instrumentos tales como placa Petri, tubos de
prueba, etc.
- Aprender el correcto manejo de los equipos utilizados en este laboratorio, tales
como autoclave, horno e incubadora.
- Observar las principales características del cultivo elaborado, tales como forma,
elevación, margen, cromogénesis, etc.
- Comprobar y comparar los resultados obtenidos experimentalmente en el
laboratorio con la teoría desarrollada en el aula.
- Aprender las diferentes características de la morfología colonial utilizadas en la
identificación de bacterias
FUNDAMENTO TEORICO.
Medios de cultivo.
Las bacterias se encuentran en el ambiente junto con otros microorganismos, razón por la
cual es difícil aislarlas. A menudo nuestro interés es caracterizar una especie bacteriana,
para lo cual debemos estar preparados para aislar, cultivar e identificar a la misma. Si
bien el aislamiento es un paso crucial en este camino, comenzaremos examinando los
medios de cultivo, ya que en estos últimos se basan muchos de los principios del
aislamiento.
Tipo trófico: se refiere a los requerimientos de carbono y energía, según los cuales
se los clasifica en autótrofos, heterótrofos, quimiotrofos (litotrofos u organotrofos) y
fotótrofos.
Tipo respiratorio: aerobios, anaerobios, anaerobios facultativos y microaerófilos.
Temperatura óptima de crecimiento: según el rango de temperatura al cual el
microorganismo presenta su mayor crecimiento, se los clasifica en sicrófilos,
mesófilos y termófilos.
Rango de pH: en general el rango óptimo de pH para la mayoría de las bacterias
oscila entre 6,6 y 7,2.
Naturales: Son aquellos que existen como tales en la naturaleza, por ejemplo,
agua, suero, papa, huevos, leche, sangre, tierra, etc.
Artificiales: Están compuestos de substancias que son manipuladas por el hombre
en el laboratorio. A los medios artificiales a su vez se los puede dividir en sintéticos
y complejos. Un medio del cual se conoce exactamente su composición química
se denomina sintético o químicamente definido; puede ser una simple solución de
sales con una fuente de carbono o puede contener muchos compuestos
orgánicos. Un medio no sintético o complejo es aquel del que se desconoce su
composición química exacta; se trata básicamente de extractos de tejidos
vegetales, animales o microbianos, cuya concentración no se conoce con
exactitud y que proveen todos los nutrientes necesarios, como por ejemplo el
caldo nutritivo.
Veamos
Fórmula:
Peptona............................................. 5 g
Extracto de carne....……………...... 3 g
Agua c.s.p.................……………… 1000 ml
pH.................................……………. 7,2
Preparación:
Agar nutritivo
Fórmula:
Agar........................... 20 g
Caldo nutritivo.....……………... 1000 ml
Preparación:
Consistencia y textura. La consistencia de las colonias puede variar desde una colonia
seca que puede moverse sobre el agar con el asa, hasta una colonia viscosa que se pega
al asa y forma filamentos o hilos mucosos cuando se trata de separarla del agar..
La superficie puede ser uniformemente brillante y suave o puede ser estriada con
muescas concéntricas o quebradas. Al examinar la colonia con luz transmitida puede
aparecer con textura granular o amorfa.
Pigmentación. Esta característica es muy común en la bacteria saprófita en las que las
colonias aparecen rojas, anaranjadas, amarillas, etc. De los microorganismos patógenos
uno de los pigmentados más importantes es Staphylococcus aureus que tiene un color
amarillo dorado. El pigmento no se aprecia en las células individuales a que se debe a
gránulos intracelulares muy pequeños para verse con luz transmitida.
Entonces tenemos.
Características ópticas.
Opaca
Brillante
Para optimizar espacio, materiales y tiempo, se puede también realizar ciertas
observaciones y determinativas con las cepas ya aisladas transferidas a medios de
cultivos en tubos líquidos y sólidos/ semi-solidos.
RESULTADOS Y DISCUSION.
Procedimiento A.
Procedimiento B.
CANTIDAD DE NO HAY
CRECIMIENTO CRECIMIENTO ESCASO MODERADO
NO HAY
OLOR OLOR AROMÁTICO PÚTRIDO
CANTIDAD DE NO HAY
CRECIMIENTO CRECIMIENTO ABUNDATE ABUNDANTE
imperceptible
OLOR PÚTRIDO PÚTRIDO FUERTE
Procedimiento C.
PROCEDIMIENTO B.
PROCEDIMIENTO C.
-
RECOMENDACIONES.
- En todos los experimentos realizados se debe mantener un correcto criterio en el
uso de los instrumentos y equipos utilizados.
- No contaminar los materiales esterilizados (pipetas, tubos y placas petris).
- Al preparar el agar nutritivo hacer el trasvase a los tubos de prueba los más rápido
posible ya que cuanto esta medio de cultivo al descender hasta los 45°C tiende a
solidificarse.
- Se puede utilizar la misma pipeta en el pipeteo del agar y caldo nutritivo.
- Al observar los resultados manejar las muestras con mucho cuidado, ya que un
mal manejo de estas puede confundir en la deducción de la morfología de las
colonias formadas.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
http://www.monografias.com/trabajos5/tuber/tuber.shtml#ixzz2ecZFemUo
http://www.monografias.com/trabajos5/tuber/tuber.shtml#ixzz2ecZFemUo
http://www.dmedicina.com/enfermedades/infecciosas/tuberculosis
http://www.who.int/topics/tuberculosis/es/
http://cibertareas.com/agentes-causales-de-enfermedad-ciencias-de-la-salud-
1.html
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/nutritivocaldo.htm
Madigan, M. T.; Martinko G. M. ; Parker J. Brock, Biología de los Microorganismos.
Ed. Pretice Hall. 8ª edición. 2004.
Laboratorios Britania. http://www.britanialab.com.ar
http://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r91252.PDF
http://es.scribd.com/doc/109735805/Estudio-y-descripcion-de-las-Bacterias-y-
Hongos
http://www.monografias.com/trabajos82/procesos-microbiologicos-actividad-
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http://www.monografias.com/trabajos82/procesos-microbiologicos-actividad-
agropecuaria/procesos-microbiologicos-actividad-
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http://www.monografias.com/trabajos82/procesos-microbiologicos-actividad-
agropecuaria/procesos-microbiologicos-actividad-
agropecuaria4.shtml#ixzz2ecKqO3rr
CUESTIONARIO.
1. ¿Qué factores influyen en la flora microbiana del aire?
El aire no posee una microflora propia, ya que no constituye un hábitat microbiano;
es un medio desfavorable para los microorganismos. La falta de sustancias
nutritivas, humedad, temperatura óptima y la acción de los rayos solares; unidos a
la desecación y otros factores, no son apropiados para la conservación de los
microbios, debido a lo cual la mayor parte de éstos muere, por lo tanto, la flora
microbiana del aire no es permanente y los microbios existen en él únicamente
como contaminantes accidentales.Entre estos factores se tienen: Materia orgánica,
humedad y precipitaciones atmosféricas, corrientes de aire, el tamaño de las
partículas; así como la luz solar, temperatura y desecación.
5. ¿Cuáles son los ingredientes del caldo y agar nutritivo? Y ¿Qué clase de
nutrientes proporciona cada uno de los ingredientes?
0,5 % de peptona;
0,3 % de extracto de carne/extracto de levadura;
1,5 % de agar;
0,5 % de cloruro de sodio;
agua destilada;
pH casi neutro (6,8) a 25 °C.
El caldo nutritivo se hace exactamente igual, excepto por la omisión del agar.
ANEXOS.
Procedimiento B.
Procedimiento C.