UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

EAP de Farmacia y Bioquímica

Clase 5: “Mitocondrias y Cloroplastos”

Curso de Biología Celular

Dr. Jaime R. Sánchez Venegas

AÑO LECTIVO 2014-I
 TEORÍA: ENDOSIMBIOSIS SERIADA

Dra. Lynn Margulis

Trabajos sobre
evolución biológica

¿Cómo aparecen las

células eucariotas?
 MITOCONDRIAS

Célula animal

CLOROPLASTOS

Célula vegetal
 MITOCONDRIAS
ESTRUCTURA

Fue descrita por primera vez por Altmann en 1884.

Esta presente casi en todas las células excepto en algunas.

Forma tubular, mide: 0,5-1 µm de ancho y 1-7 µm de largo.

Presenta dos espacios: matriz y intermembrana

Contiene enzimas:

Formación de Acetil CoA.

Ciclo de Krebs.

Fosforilación oxidativa
(cadena transportadora
de electrones)
MATRIZ MITOCONDRIAL

Es el centro de la mitocondria y está rodeado por la membrana

interna, contiene:
– DNA circular de doble cadena, que contiene la información
genética necesaria para la síntesis de RNA y proteínas
mitocondriales que le permite duplicarse.
– Ribosomas responsables de la síntesis de las proteínas
mitocondriales.
– Enzimas que regulan y controlan la replicación, transcripción y
traducción de DNA mitocondrial.
– Otras sustancias, como nucleótidos e iones.
RESPIRACIÓN CELULAR AERÓBICA
Proceso de obtención de energía (ATP) por reacciones de oxido-
reducción a partir de glucosa.

Se realiza en 4 etapas:

1) Glucólisis: se lleva a cabo en el citoplasma.

2) Formación de acetil-coenzima A (acetil-CoA): se realiza en el

espacio intermembrana de la mitocondria.

3) Ciclo de Krebs o ácido cítrico o tricarboxílico: ocurre en la

matriz mitocondrial.

4) Cadena transportadora de electrones o quimiosmosis: se lleva

a cabo en la membrana interna de la mitocondria (fosforilación
oxidativa).
 1 2 3

La energía se obtiene en forma de ATP (adenosin trifosfato).

También se obtiene a partir de NADH y FADH2 por fosforilación oxidativa:
- NADH mitocondrial  origina 3 ATP
- NADH citoplasma  origina 2 ATP (células: músculo esquelético, cerebro)
origina 3 ATP (células: hígado, riñón, corazón)
- FADH2  origina 2 ATP
 1- GLUCÓLISIS

- Se realiza en el citosol de la célula.

- En este proceso se convierten las

moléculas de glucosa (6 átomos de
carbono) en dos moléculas de
Piruvato (de 3 átomos de carbono).

- Resultado en energía:
2 NADH citoplasmático
2 ATP neto

- Dos moléculas de ácido pirúvico

2- FORMACIÓN DE ACETIL-COENZIMA A

Dos moléculas de piruvato entran al espacio intermembrana

de la mitocondria, para formar :
- 2 moléculas de Acetil-coenzima A.
- 2 moléculas de NADH.
 3- CICLO DE KREBS

El acetil-CoA entra al ciclo de Krebs,

en la matriz mitocondrial.

El ciclo es una serie de reacciones,

dando como resultado:

• Moléculas que pasan a la cadena

transportadora de electrones:
6 NADH
2 FADH2
• 2 moléculas de ATP neto

• 2 moléculas de CO2 como producto

de desecho.
 4- CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES

Fosforilación oxidativa, ocurre en la membrana interna

Los electrones de NADH y FADH2 se transfieren por la cadena respiratoria liberando
energía. El cual es utilizada para bombear protones (H+) a través de la membrana
interna desde la matriz al espacio intermembrana.
Esto genera un gradiente electroquímico de protones a través de la membrana
mitocondrial interna, y el flujo de H+ a favor de gradiente es utilizado por la ATP
sintasa para convertir el ADP+Pi en ATP.
RESUMEN DEL PROCESO DE LA
RESPIRACIÓN CELULAR

Hígado, riñón, corazón:

- NADH citoplasma  origina 3 ATP
Musculo esquelético, cerebro:
- NADH citoplasma  origina 2 ATP
Las mitocondrias  utilizan dos tipos de combustible para obtener
energía:

El piruvato procedente de la glucosa

Los ácidos grasos
 RESPIRACIÓN CELULAR ANAERÓBIA

Es el proceso de respiración celular en ausencia de oxígeno  FERMENTACIÓN

(ambiente anaerobio)

Lactobacillus

Musculo esquelético

Tejidos vegetales en
ausencia de oxígeno.

Semillas en fase inicial
de germinación

Saccharomyces
cerevisiae, fermentación
del vino, cerveza y
elevación del pan
FUNCIONES DE LA MITOCONDRIA

 Se realiza el ciclo de Krebs (parte del catabolismo de los

glúcidos)  en la matriz mitocondrial.

 Fosforilación oxidativa (cadena respiratoria y sintesis de ATP) 

en las crestas mitocondriales.

 β-oxidación de los ácidos grasos (catabolismo de los lípidos) 

en la matriz mitocondrial.

 Metabolismo de su propio DNA

 Se dividen por fisión binaria, independiente de la célula.

 CLOROPLASTOS

Presente en células vegetales

Tiene forma discoidal o globular

Presenta tres membranas:

- Externo
- Interno
- Tilacoidal

Presenta tres espacios:

- Intermembranoso
- Estroma
- Tilacoidal

Presenta los pigmentos que

intervienen en la fotosíntesis
Membrana externa:

Muy permeable, presenta proteínas de canal que regula el intercambio
de sustancias con el citosol.

Membrana interna:

Es lisa (sin crestas) y menos permeable, presenta proteínas
especializada en el transporte selectivo de sustancias.

Estroma:

Presenta enzimas implicados en el metabolismo fotosintético, ejemplo:
ribulosa bifosfato carboxilasa oxigenasa, la mas abundante.

Ribosomas encargados de la síntesis de las proteínas propias de los
cloroplastos.

DNA circular de doble cadena que codifica los tipos de RNA y proteínas
que participan en la fotosíntesis.

Enzimas que regulan y controlan la replicación, transcripción y
traducción del material genético del cloroplasto.
Membrana tilacoidal
Es impermeable a la mayoría de las moléculas e iones.

Contiene los pigmentos fotosintéticos: clorofilas (verdes) y carotenoides

(amarillos o anaranjados).

Presentan tres grupos de proteínas:

- Proteínas asociadas a los pigmentos.
- Proteínas de la cadena transportadora de electrones.
- El complejo ATP-sintasa, de estructura y función semejante al de la
mitocondria.
 CICLO DE DESARROLLO E INTERCONVERSIONES DE LOS PLASTIDIOS

Leucoplastos  son plastidios

de almacenamiento, pueden
contener proteínas, lípidos o
almidónes

Los cromoplastos  Son

plastidios que contienen
pigmentos rojos, amarillos o
anaranjados.

Los cloroplastos y leucoplastos

en ocasiones se transforman en
cromoplastos.

Los amiloplastos  plastidios

que almacenan almidones

Los cloroplastos  plastidios
que almacenan los pigmentos
fotosintéticos.
 PLASTOS OBSERVADOS AL
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO

Leucoplasto
Etioplasto
Luz
Sin luz
Cristales de
licopeno Luz

Cromoplasto
Proplastidio Cloroplasto

Gránulos teñido
con iodo

División de plastos Amiloplasto

FOTOSÍNTESIS

Proceso donde las plantas capturan energía solar (luz), fijan el
CO2 y lo convierten en energía química contenida en las moléculas
de azucares y otros compuestos orgánicos, liberando O2.

La fotosíntesis se realiza en los cloroplastos y dentro de ellos en
los pigmentos de clorofila.
 El intercambio de CO2 y O2 se realiza a través de los
estomas de la hoja:

Sección transversal de la hoja

PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS

Pigmento principal  Clorofila a, absorbe luz violeta, azul,

anaranjado-rojizo, rojo.

Pigmentos accesorios :

- Clorofila b, c, d y e.

- Carotenoides  pueden ser de dos tipos: los carotenos

(amarillos) y las xantófilas (naranja).

- Ficobilinas  pueden ser la ficocianina y la ficoeritrina,

pigmentos presentes en algas y cianobacterias.
 LA CLOROFILA

La Clorofila absorbe todas las

longitudes de onda de luz
visible excepto el verde, el
cual es reflejado, dando la
coloración verde de las hojas
y otras estructuras de la
planta.
ESTRUCTURA DE LA CLOROFILA

La molécula de clorofila está

formada por una cabeza
tetrapirrólica con un átomo
de magnesio en su centro, y
una cola de fitol (alcohol de
cadena larga).
FASES DE LA FOTOSÍNTESIS

Fase luminosa
(fotoquimica o reacción de Hill)
Reacciones fotodependientes que ocurren en la membrana de los
tilacoides, donde se genera NADPH, O2 y ATP (poder reductor)

Fase oscura
(quimiosintetica o ciclo de Calvin-Benson-Basham)
Reacciones fotoindependientes que ocurren a nivel del estroma,
utiliza el poder reductor y la energía química producidas en la fase
luminosa para la fijación de carbono.
En general se puede decir que el proceso fotosintético
global esta compuesto de tres procesos principales.
• Absorción de fotones por los pigmentos (PS I, PS II).
• Producción de NADPH y ATP.
• Ciclo de Calvin.
PROCESOS DE LA FASE LUMINOSA
1. Síntesis de ATP o fotofosforilación, que puede ser: Acíclica y Cíclica
2. Síntesis de poder reductor (NADPH).
3. Fotolisis del agua.
Implica transporte de electrones debido a la energía de la luz.
ESQUEMA Z DE LA FOTOSÍNTESIS

PS II = fotosistema II (P680)
PS I = fotosistema I (P700)
BOMBEO DE PROTONES (H+) HACIA EL ESTROMA

SÍNTESIS DE ATP (ATP sintasa)

SÍNTESIS DE ATP: ATP sintasa
PROCESOS DE LA FASE OSCURA: Ciclo de CALVIN
La fijación del CO2 se produce en tres fases:

1. Carboxilación: se fija el CO2 a una molécula de 5C.

2. Reducción: PGA se reduce a PGAL utilizándose ATP y NADPH.
3. Regeneración/Sintésis: de
cada seis moléculas PGAL
formadas, 5 se utilizan para
regenerar la Ribulosa 1,5BP
y una se empleada para
sintetizar moléculas de
glucosa (vía de las hexosas),
ácidos grasos, aminoácidos.
 FOTORESPIRACIÓN
Es un proceso realizado por la enzima RUBISCO (ribulosa-1,5-bisfosfato
carboxilasa oxigenasa), tiene 2 funciones:

1. CARBOXILACIÓN: fija el carbono del CO2 (ciclo de calvin)

2. OXIGENACIÓN: fija el O2 para oxidar la ribulosa 1,5 bifosfato a fosfoglicolato
(Fotorespiración)

En ambientes secos y calurosos

las plantas cierran los estomas
para evitar la pérdida de agua,
como consecuencia el oxígeno
producido por la fotosíntesis
aumenta mientras el CO2
disminuye, este proceso negativo
para la planta reduce el 50% de
la capacidad de fotosíntesis.
 ESQUEMA GLOBAL DE LA FOTOSÍNTESIS

6CO2 + 18ATP + 12NADPH + 12H2O C6H12O6 + 18ADP + 12NADP+ +6H2O

FUNCIONES DEL CLOROPLASTO
 Proceso de la fotosíntesis

Fase luminosa (membrana de los tilacoides)  obtención
de energía.

Fase oscura (estroma)  síntesis de materia orgánica.

 Fotorespiración (en colaboración con los peroxisomas).

 Lugar de almacenamiento temporal de almidón.

 Síntesis de moléculas como aminoácidos, ácidos grasos.

 Funciones propias como el metabolismo de su DNA.

 Se dividen por fisión binaria independiente a la célula.

 IMPORTANCIA BIOLÓGICA DE LA FOTOSÍNTESIS

 Se realiza la síntesis de materia orgánica a partir de matería

inorgánica. El cual es utilizado por los demás seres vivos de la
cadena trófica.

 Produce la transformación de la energía luminosa en

energía química, necesaria y es utilizada por los seres vivos .

 La fotosíntesis libera oxígeno que será utilizado en la

respiración aerobia como oxidante.

 Gracias a la fotosíntesis se tiene energía almacenada en

combustibles fósiles como carbón, petróleo y gas natural.

 El equilibrio necesario entre seres autótrofos y heterótrofos

es mantenida por la fotosíntesis.
 GENOMA DE EUCARIOTAS

Genoma nuclear Genoma citoplasmático

DNA núclear DNA mitocondrial DNA cloroplastos

(animales y plantas) (plantas)

Genes nucleares Genes extranucleares, citoplásmicos o genes

o mendelianos no-mendelianos

GENOMA EXTRANUCLEAR
 GENOMA MITOCONDRIAL

mtDNA:

Circular

Helicoidal

Doble hebra

Supercondensada

Presenta mayor GC que
el DNA nuclear

Hay diferencia de densidad entre las dos hebras que componen

el mtDNA:
- Hebra pesada (H)
- Hebra liviana (L)

mtDNA se separa del DNA nuclear por centrifugación en un
gradiente de cloruro de cesio.

No presentan histonas u otras proteínas asociadas al mtADN.

Cada mitocondria presenta muchas copias de mtDNA ubicadas

en regiones llamadas nucleoides.

Microscopia de fluorescencia:
( Euglena gracilis )

Corpúsculos de mtADN

DNA nuclear
TAMAÑO DE mtDNA:
Varia entre los organismos,
aunque el contenido de número
de genes y de funciones sean
similares

mtDNA levadura
(~ 80 Kb.)

mtDNA humano
(~ 17 Kb.)

tRNAs

Marcos de lectura
no asignados (URFs)
Exones y genes

ND NADH deshidrogenasa

En animales, el mtDNA, generalmente es menor a 20 kb:

- mtDNA del hombre  16.569 bp (~17 Kb.)

En plantas, el mtDNA, varía entre 100 y 2.000 kb.

En levaduras, el mtDNA, llega hasta 80.000 bp (~ 80 Kb.)

La diferencia entre mtDNA de animales, hongos y plantas:

- En animales el mtDNA codifica algún producto en casi

toda su extensión.
- En hongos y plantas, el mtDNA presenta largas
secuencias de DNA que No codifican productos.

No existen intrones en el mtDNA de animales, pero si existen en el

de plantas.
 Leyenda:
MAPA DEL mtDNA HUMANO
- El ciclo externo  genes que se
transcriben de la hebra pesada (H strand).
- El ciclo interno  genes de la hebra
liviana (L strand).
- Orígenes (Ori) y direcciones de la
replicación de la hebra H y de la hebra L .
- Las flechas indican las direcciones de
transcripción de cada una de las hebras.
- En azul  Genes para los rARN (16S y
12S).
- En violeta  Genes para los tARN
(identifica por los aminoácidos que
transportan).
- En amarillo  Genes que codifican
proteínas.
- ATPasas 6 y 8  componentes del
complejo enzimático mitocondrial ATPasa.
- COI, COII y COIII  Genes para las
subunidades de la oxidasa del citocromo c.
- cyt b  Gene para el citocromo b.
- NAD1-6  genes para los componentes 1
a 6 de la deshidrogenasa del NADH.
MAPA DE EXPRESIÓN DE GENES DEL
mtDNA HUMANO

En total hay 37 genes:

- 13 genes codifican mRNAs
- 22 genes codifican tRNAs
- 2 genes codifican rRNAs
mitocondriales
 GENOMA DEL CLOROPLASTO

cpDNA
- Es circular
- Doble hebra bien enrrollada
- No presenta histonas ni otras proteínas
- Presenta mucha diferencia GC respecto a mtDNA y DNA nuclear
- Se separa por centrifugación en un gradiente en cloruro de cesio
- Existen varias copias de cpDNA por cloroplasto distribuidos en
grupos formando nucleoides.
- Algunos genes que codifican proteínas presentan intrones
 ORGANIZACIÓN DEL GENOMA DEL CLOROPLASTO

- Contiene genes para producir cada uno de los rRNA del

cloroplasto (16S, 23S, 4,5S y 5S).

- Contiene genes para los tRNA, y genes que codifican algunas

proteínas de los procesos de transcripción y traducción dentro del
cloroplasto:
- Proteínas de los ribosomas
- Subunidades de la ARN polimerasa
- Factores de traducción
- Proteínas para la fotosíntesis

- Algunas de las proteínas con funciones dentro del cloroplasto

son codificadas en el DNA nuclear y sintetizadas en el citoplasma
y luego ingresadas al cloroplasto.
MAPA DEL cpDNA

cp DNA
Oryza sativa
- El cpDNA contiene dos copias de cada uno de los genes de tRNA
localizados en dos regiones de 10 kb a 25 kb, con secuencias
repetitivas idénticas pero con orientación invertida, conocidas como
IRA e IRB.

- Hay otros genes en estas secuencias repetitivas invertidas y por lo

tanto esos genes también están repetidos.

- Existen otras dos regiones de genes no repetidos: una región

corta SSC (short single copy) y una región más larga llamada LSC
(long single copy).

- En cpDNA de tabaco y de arroz, existen 30 genes de ARNt.

- En cpDNA de Marchantia (una hepática) son 32.

 mtDNA en ESTUDIOS DE FILOGENÉTICA

- El mtDNA presenta una región de aprox. 400 bases altamente

polimórfica denominada D-loop.

- Las mitocondrias se heredan a través del citoplasma materno (en

el óvulo).

- Por tanto el DNA de esa región se mantiene inalterable a través

de la línea materna.

- Esta propiedad del mtDNA, permite analizar parentescos por

medio de estudios de PCR.

- El mtDNA de cada individuo es idéntico al mtDNA de su origen

materno.
- Como el mtDNA puede ser obtenido de muestras de sangre y
otros tejidos, incluyendo de huesos. Indica que es posible usar
PCR para identificar individuos muertos en el pasado.

- El análisis del mtDNA está siendo usado para estudios de

relaciones filogenéticas en muchas especies y pueden ser
aplicados en políticas de conservación.
 ENFERMEDADES MITOCONDRIALES
- Son desordenes causados por la deficiencia de una o más
proteínas localizadas en las mitocondrias e involucradas en el
metabolismo.

- Las enfermedades mitocondriales pueden estar causadas por

mutaciones en el ADN mitocondrial, o por mutaciones en genes
nucleares que codifican para proteínas implicadas en el
funcionamiento de la mitocondria.

- Estas enfermedades causan daño a células del cerebro, corazón,

hígado, músculos esqueléticos, riñones y del sistema endocrino y
respiratorio, ya que los tejidos con mayor dependencia del
metabolismo mitocondrial (es decir, aquellos que requieren un
mayor aporte de energía) son los más sensibles a las mutaciones
mitocondriales.
MAPEO DE ENFERMEDADES MITOCONDRIALES
EN EL mtDNA
GRACIAS POR SU ATENCIÓN