“Año Del Dialogo Y La Reconciliación Nacional”

Universidad nacional
“san Luis GonzaGa” de ica

Nombres : Torres Ramos Anthony

Tema :Medios de Cultivo en Patología

Curso :Entomología

Facultad : Agronomía

Ciclo : V - Sección B

Docente : Ing. Musto Anicama

ICA – PERU
2018

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 DEDICATORIA:

Dedico el presente trabajo a mis padres

y a mi docente por brindarme sus
enseñanzas para un futuro profesional
exitoso.

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 Introducción

n medio de cultivo es un material alimenticio que se usa en el laboratorio para

el desarrollo de los microorganismos. Una vez que ha sido preparado, un
medio de cultivo puede ser inoculado, (es decir se le añaden organismos) y a
continuación incubado en condiciones que favorezcan el crecimiento
microbiano. En 1881 Koch ideo un método para reproducir bacterias en un
medio de cultivo sólido hecho con gelatina, e introdujo el método de la placa
para asegurar cultivos puros.

Sembró en gelatina una mezcla de bacterias, después de fundir el medio por

calentamiento, y vertió en este medio inoculado en una placa de cristal
esterilizaday fría, para endurecerlo. Allí donde las bacterias quedaban
atrapadas al irsesolidificando el medio, se multiplicaban formando una masa,
llamada colonia,visible a simple vista, dichas colonias debían ser puras, es
decir contener un solotipo de bacteria.Para asegurar el cultivo puro era
necesario tomar una muestra de una colonia conun alambre estéril y trasladarlo
a un tubo de medio estéril fresco.

Este método de cultivos puros es en esencia el que se usa actualmente con la

salvedad de que se usa agar en lugar de gelatina; para los cultivos en placa
empleamos una cajita de vidrio llamada cápsula o caja de Petri introducida por
Petri, uno de los ayudantes de Koch durante 1887.

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 MEDIOS DE CULTIVO EN FITOPATOLOGÌA

Conocer a que denominamos medio de cultivo en el laboratorio de

Fitopatología.
 Reconocer la existencia de diferentes tipos de medio.
 Reconocer la utilidad de los diferentes medios de cultivo en el trabajo con
patógenos de plantas.

Objetivos
1) ser capaz de elaborar medios de cultivo con el fin de ser utilizados
posteriormente para el aislamiento de hongos, bacterias o microorganismos
epifíticos.
2) Desenvolverse con soltura en la utilización de protocolos.

METODOS DE CULTIVO
Los medios de cultivo de microorganismos(hongos, bacterias, levaduras) son
esenciales en el Laboratorio de Fitopatología por lo que a diario se preparan y
utilizan.
Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones
adecuadas en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los
microorganismos.

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Condiciones que debe reunir un Medio decultivo
Para que los microorganismos crezcan adecuadamente, un medio de cultivo
artificial debe reunir una serie de condiciones:
 Contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios
 Disponer de oxígeno
 Temperatura adecuada
 Humedad
 pH.
 Exento de microorganismos contaminantes.

Disponibilidad de nutrientes en los Medios de cultivo.

 Un medio de cultivo para que permita el crecimiento adecuado de
microorganismos debe contener como mínimo:
 Carbono
 Nitrógeno
 Azufre
 Fósforo
 Sales inorgánicas que suplan iones (K, Mg, Fe,Ca, etc.).
 Estos nutrientes generalmente se aportan con Extracto de malta, Peptona,
Papa, extracto de levadura, etc.

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MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SU COMPOSICIÓN
 Medios Naturales. Consisten únicamente en un material vegetal. Ejemplos:
un trozo de papa. Agarjugo de manzana, Agar durazno, Agar y jugo de
vegetales.
 Medios definidos o sintéticos: son los medios que tienen una composición
química definida cuali y cuantitativamente.
 Generalmente se usan en trabajos de investigación.
 Ej: Medio Czapek.
 Nitrato de Sodio 2 g/l
 Fosfato bipotásico 1 g/l
 Cloruro de potasio 0,5 g/l
 Sulfato de magnesio heptahidratado 0,5 g/l
 Sulfato de hierro heptahidratado 0,01 g/l
 Sacarosa 30 g/l
 Agar-agar 15 g/l
 Medios complejos o de composición indefinida: Son medios cuya
composición no se conoce con exactitud.
 contienen nutrientes en abundancia pero sin saber con exactitud la
composición cualitativani cuantitativa de estos nutrientes.
 Ej: Agar Papa; Agar Malta.

Medios complejos
 Agar Papa Dextrosa:
 Medio para el cultivo y conteo de levaduras y hongos en general.
 Agar -15g
 Dextrosa - 20g
 Infusión papa - 4g
 Agua destilada 1L

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MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SU ESTADO FÍSICO
Los medios de cultivo utilizados pueden ser de diferentes tipos:
 Medios sólidos.
 Medio semisólidos.
 Medios líquidos.

Medios sólidos de cultivo

 Usualmente para preparar un medio sólido se parte de un medio líquido al
que se le añade un agente solidificaste como el agar
 El agar es un polisacárido extraído de algas.
 En los medios sólidos la proporción de Agar es siempre por encima del 15%
 El agar es el elemento solidificante más empleado en la preparación de
medios decultivo.
 Sus características principales son:
 Se licua completamente a temperaturas de 80 –100ºC y se solidifica al
enfriarse a 40 grados.
 No afecta el crecimiento de hongos ni bacterias.
 No es utilizado por los microorganismos que crecen en él.

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Medios semi-sólidos de cultivo
 En los medios semi-sólidos la proporción de Agar esde alrededor del 5%.
 Se trata de un medio sin el agregado de nutrientealguno.
 Utilidad
 Aislamiento de hongos a partir de tejido vegetal. Selogra que el crecimiento
sea el resultado de lanutrición que posee el tejido vegetal.
 Ensayos de evaluación de actividad antifúngica

MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SU UTILIDADPRÁCTICA

 Generales: Sirven para el cultivo de una gran variedad de
microorganismos.
Ej: Agar Papa destrosado (PDA); Agar Nutriente(NA)
 Selectivos: Son medios a los que se les agregan sustancias para inhibir el
crecimiento de otros microorganismos.
Ej: Agar Malta acidificado y con antibiótico para inhibir el crecimiento de
bacterias.
 Diferenciales: Medios diferenciales: Son aquellos destinados a facilitar la
discriminación de microorganismos de una mezcla por sus propiedades
diferenciales de crecimiento en dichos medios.
 Medios selectivos: Son aquellos que favorecen por su diseño el
crecimiento específico de un microorganismo particular o grupo de
microorganismos. Es de gran utilidad para el aislamiento de
microorganismos a partir de una población microbiana mixta

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Temperaturas de incubación
 En general los microorganismos patógenos de plantas crecen a
temperaturas en el entorno de24 a 28 ºC.
 En ocasiones incubamos a temperaturas diferentes:
 A 37 ºC cuando queremos descartar el crecimiento de agentes de control
biológico a la temperatura del cuerpo humano.
 A 5ºC o menos cuando buscamos microorganismos adaptados a crecer en
la cámara frigorífica.
 Venturia inaequalis debe incubarse a temperaturas de entre 16 y 20 ºC

Condiciones adecuadas de humedad

 Un nivel mínimo de humedad, tanto en el medio como en la atmósfera, es
imprescindible para un buen desarrollo de las células vegetativas de los
cultivos microbianos.
 En las estufas de cultivo se debe proporcionar una fuente adecuada de
humedad para evitar así que se deseque el medio.

Presencia de oxígeno
 Los microorganismos aerobios necesitan que el oxígeno llegue en forma
adecuada al medio.
 En los medios líquidos se recurre a la agitación, delo contrario solamente
habrá crecimiento en laparte superior.
 Los microorganismos aerobios necesitan que el oxígeno llegue en forma
adecuada al medio. Los anaerobios por el contrario crecen en ausencia de
oxígeno. Ej. Erwinia

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Reparación de medio Agar Malta conantibiótico
 Receta del agar malta
 Extracto de malta 20 g/L.
 Agar 20 g/L
 pH = 5,4
 Sulfato de estreptomicina al 0,02%(0,1 ml de la solución stock/100 ml
demedio).

Preparación de medio Agar Nutriente

 Receta NAD (Nutriente agar destrosa)
 Agar nutriente 23g
 Destrosa 5g
 Agua destilada 1000 ml
 3 g de extracto de Carne de buey
 5 g de peptona trípsica de gelatina
 15 g de agarde cloruro sódico y glucosa agua destilada hasta 1000 ml
 Los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para evitar otros
microorganismos puedan interferir con el crecimiento del que queremos
cultivar.
 Los medios de cultivo se esterilizan en el autoclave.

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Medios de cultivo
 En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri, comienza a utilizar placas de
vidrio planas
 Hoy existen de plástico.
 Procedimiento seguido para dispensar el medio en placas de Petri
 Los medios se pueden utilizar en frascos, placas de Petri o tubos.

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 CONCLUSIÓN

Se puede elaborar medios de cultivo de manera sencilla, siendo muy útil para
el estudio de microorganismos debido a que en este tipo de medio se los puede
reproducir con facilidad.

Ya que un “medio de cultivo” a cualquier material que presente una adecuada

combinación de nutrientes para permitir el crecimiento o el incremento del
número de células de una población microbiana.

Elaborar medios de cultivo resulta eficiente para la reproducción y el posterior

aislamiento de alguna cepa de microorganismo que nos interese estudiar.

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 BIBLIOGRAFÍA

 http://www.pv.fagro.edu.uy/fitopato/cursometodosfito/03-Medios_de_

cultivos.pdf

 https://es.slideshare.net/mwampii/medios-de-cultivo-practica

 https://www.google.com/search?q=METODOS+DE+CULTIVO&client=opera

&hs=Mpc&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwjk7uSNuufaAhVyx

FkKHbf7AfgQ_AUICigB&biw=802&bih=692

 http://www.nutribiota.net/blog/blog7.php/camara-de-incubacion-casera

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 ÍNDICE

 Caratula 01

 Dedicatoria 02

 Introducción 03

 Medios de cultivo en Fitopatologìa 04

 Métodos de cultivo 04

 Medios de Cultivo según su Composición 06

 Medios de Cultivo según su Estado Físico 07

 Medios de Cultivo según su Utilidadpráctica 08

 Conclusión 12

 Bibliografía 13

 Índice 14

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