Sie sind auf Seite 1von 9

ANALISIS MICROBIOLOGICO DE SUELOS

Montes, Juan David1., Xiomara, Lugo2, Dayanna, Perez3


Unisangil, Facultad de Ciencias Naturales e Ingeniería
Ingeniería Ambiental
Yopal, Colombia

jmontes@unisangil.edu.co
xiomaralugo@unisangil.edu.co
dayanaperez@unisangil.edu.co

1
Ingeniería Ambiental; Juan David Montes
2
Ingeniería Ambiental; Xiomara Andrea Lugo
3
Ingeniería Ambiental; Dayanna Pérez
Resumen —El suelo tiene muchas fauna (detritívoros) y c) microorganismos
propiedades, las cuales benefician a la planta, (descomponedores)
es por eso que se ha utilizado los
microorganismos ya que en el suelo suceden Los diferentes componentes del suelo no forman
diversas reacciones microbianas, encontramos una masa homogénea sino que están asociados
bacterias y hongos beneficos que mediante su otorgando una estructura particular. La base de
uso se obtiene incrementos significativos. la estructura del suelo la constituyen los
llamados agregados. Un agregado es un
Palabras clave—analisis, microbiologico, conjunto de partículas minerales ligadas por
suelos, microscopio, solución. compuestos orgánicos y organismos vivos. El
tamaño de cada agregado es de
Abstract - The soil has many properties, which aproximadamente 2 mm. El espacio que queda
benefit the plant, that is why microorganisms entre los agregados son los poros del suelo,
have been used since in the soil several donde circulan el aire y la solución del suelo.
microbial reactions occur, we find beneficial
bacteria and fungi that through its use, significant los microorganismos del suelo dependen de
increases are obtained. factores ambientales tales como los nutrientes,
la humedad, el pH, aireación, temperatura y
Keywords - analysis, microbiological, soils, prácticas agrícolas.
microscope, solution. En desinfecciones severas, como las que se
realizan en cultivos bajo plástico, anulamos
I. INTRODUCCIÓN muchos de estos microorganismos, que estaban
La utilization de los microorganismos es de forma natural en el suelo. Estos
considera de gran importantcia en la agricultura microorganismos beneficiosos que se
ya que le genera propiedades al suelo del cual encuentran en el suelo, son bacterias,
depende mucho la planta, en el suelo suceden actinomycetes, hongos, algas y protozoarios. Un
diversas reaaciones por eso se utilizan estos suelo fértil es aquel que contiene una reserva
microorganismos los cuales propician la adecuada de elementos nutritivos disponibles
busqueda de microorganismos con actividad para la planta, o una población microbiana que
fisiologica especifica. libere nutrientes que permitan un buen desarrollo
vegetal.
MICROBIOLOGIA DEL SUELO Cuando se quema un bosque, observamos la
importancia de todo lo que estamos diciendo, ya
La ecología microbiana trata sobre la relación de que muere toda la plantación, pero muere
los microorganismos con el ambiente donde también el suelo de esta, por lo que tardará
habitan. El suelo superficial (0-20cm) es el mucho tiempo en recuperarse.
ambiente donde ocurren la mayoría de los En la agricultura tradicional, se alternaban las
líneas de cultivo en el suelo, o bien se dejaba
procesos microbianos que influyen sobre la descansar la tierra durante un tiempo.
nutrición de los cultivos, de los cuales se ocupa Actualmente, en la agricultura intensiva, el suelo
la Microbiología Agrícola. Desde un punto de apenas está sin cultivo, y se planta siempre en la
vista ecológico, un ambiente esta constituido misma línea de terreno, por lo degradamos el
por: 1) una fracción abiótica (el hábitat), y 2) una suelo rápidamente.
fracción biótica (los componentes vivos). La Por todas estas razones, se está empleado lo
fracción abiótica del suelo incluye: a) partículas que se denomina “Biofertilización”, que consiste
minerales de diferente tamaño y composición en aumentar el número de microorganismos de
química, b) agua y solutos, c) gases y d) un suelo, para de esta forma, acelerar todos los
compuestos orgánicos; mientras que la fracción procesos microbianos, aumentar la cantidad de
biótica incluye: a) raíces vivas de plantas, b) nutrientes asimilables por la planta, etc.
Una biofertilización correcta, ayuda a una una agrupación, la cual se contara como una
fertilización tradicional, reduciendo el uso de bacteria. Estas placas pueden ser usadas no
energía de la planta a la hora de absorber los solo para el conteo de poblaciones microbianas,
distintos nutrientes, disminuye la degradación sino también para el aislamiento de organismos.
del agroecosistema y reduce la pérdida de
nutrientes del suelo por lixividados, sobre todo
de nitrógeno. 3. Explique las razones por las cuales los
Pero estos microorganismos actúan a la vez hongos y no las bacterias del suelo son
como agentes de control biológico, con lo que cultivados mediante la técnica de placa
reducimos aquellos microorganismos profunda.
indeseables en el suelo y favorecemos los
organismos útiles para los cultivos, con lo que RTA: Cuando se compara los hongos con las
aumentamos la producción de la planta. bacterias las razones por las cuales los hongos
son cultivados mediante la técnica de placa
profunda es porque en general estos tienen
I. OBJETIVOS requerimientos nutricionales muy simples, pero
su desarrollo es más lento por lo que requieren
1. Realizar la cuantificación de microorgnaimos mayor tiempo de incubación para su cultivo, la
del suelo (hongos y bacterias) mediante la diversidad más notable la presentan en sus
técnica de diluciones y siembra en placa. propiedades morfológicas y en sus ciclos
sexuales siendo estas características los
criterios que se emplean en la identificación y
clasificación de este grupo Las
II. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS. características, estructurales incluyen :
tipo de talo , morfología microscópica del
1. Por que se debe hacer diluciones seriadas a micelio tanto aéreo como profundo . tipo
partir de la solución de sue- lo? (ver paso 2 del de hifas diferenciación y disposición o
procedimiento) agrupación de las mismas tipo de hifas
reproductivas asexuales, estructura y modo de
RTA: Se deben hacer diluciones seriadas porque formación del cuerpo fructífero sexual, tipo de
se espora (forma, tamaño, aspecto externo,
necesita reducir la concentración de agrupación, fabricación, color, movilidad, tipo
microorganismos presentes en la muestra para y numero de flagelos).
lograr cuantificar el número de colonias de
bacterias y hongos.
4. En qué consiste la técnica del Número Mas
Probable para la cuantifica- ción de
2. Explique cual es el propósito de cultivar
microorganismos del suelo?
muestra de diluciones de suelo próximas en
los medios de cultivo? (ver paso 3 del
RTA: El método del número más probable
procedimiento)
(NMP) es una estrategia eficiente de estimación
de densidades poblacionales especialmente
RTA: El propósito es determinar indirectamente
cuando una evaluación cuantitativa de células
el potencial de biodegradación de un suelo
individuales no es factible. La técnica se basa en
contaminado y que cualquier célula viable
la determinación de presencia o ausencia o en
inoculada en un medio de cultivo bajo
réplicas de diluciones consecutivas de atributos
condiciones ambientales apropiadas se
particulares de microorganismos presentes en
multiplica y produce datos de fácil identificación,
muestras de suelo u otros ambientes. Por lo
que permita generar colonias separadas, cada
tanto, un requisito importante de este método es
colonia puede proceder de una sola célula o de
la necesidad de poder reconocer un atributo
particular de las poblaciones en el medio de Dispersar el suelo y homogeneizar con
crecimiento a utilizarse. El estimado de densidad agitación vigorosa
poblacional se obtiene del patrón de ocurrencia
de ese atributo en diluciones seriadas y el uso
de una tabla probabilística.

IV. PROCEDIMIENTO
Imagen 1. Muestra de suelo
 EEn condiciones esteriles se adiciono 11
G del suelo a una botella de disolución
con tapa de rosca con 99 ml de solución
salina isotónica esteril
 SSe agito y se tomó 1 Ml de la solución
preparada anteriormente, se transfirió a
un tubo de 9 Ml de solución salina
esteril, se agito y se tomó 1 ml de la
solución y se transfirió a un tubo de 9 ml
de solución de salina esteril, realizar
diluciones sucesivas utilizando el mismo
procedimiento hasta obtener la dilución
1.100.
 SSe selecciono tres disoluciones
próximas, se agito y se tomó 0,1 de
cada disolución
 Se Extendido homogéneamente la
alícuota en la superficie del medio con
una varilla de vidrio previamente
esterilizada (inmersa en alcohol y
pasándola por la flama del mechero
permitiendo su enfriamiento).
 Se Incubo las placas de forma invertida
a 30 ˚C en ausencia de luz.

 dDespués de un periodo de
incubación de 24 a 48 horas, se
contó el número de colonias y se
reportó como unidades formadoras
de colonias (UFC)/ g de suelo seco

V. DESARROLLO DEL
PROCEDIMIENTO

1) En condiciones estériles, adicionar 11 g


del suelo a una botella de dilución o
matraz con tapa de rosca con 99 ml de
solución salina isotónica estéril.
2.) Agitar y tomar 1 ml de la solución del suelo
preparada anteriormente y transferido a un tubo
de 9ml de solución salina estéril o medio líquido
(dilucion1:10). Agitar y tomar 1 ml de la solución
salina estéril o medio liquido (Dilución 1:100)
Realizar diluciones Sucesivas utilizando el
Imagen 4.
mismo procedí-

5) Incubar las placas de forma


invertida
a 30 ˚C en ausencia de luz.

Imagen 2. pesaje de la muestra 11gr

3) Seleccionar tres diluciones próximas, Agitar y


tomar 0.1 ml de cada dilución seleccionada y
Imagen5.transfiriendo solución salina colocarla en el centro de la superficie del medio
Estéril. de cultivo

6.) Después de un periodo de incubación de


24 a 48 horas, contar el número de
colonias y reportar como unidades
formadoras de colonias (UFC)/ g de suelo
seco.

Imagen3. Agitación de la solución del suelo.

4) Extender homogéneamente la alícuota en la


superficie del medio con una varilla de vidrio
previamente esterilizada (inmersa en alcohol y
pasándola por la flama del mechero permitiendo
su enfriamiento).

II. RESULTADOS
Figura 5. Coloración de Gram. Dilución 1:100
A. CUANTIFICACION DE BACTERIAS Y de la solucioón de suelo.
COLORACION DE GRAM. Observado en microscopio óptico objetivo 100 x.
Fuente: Autores.

Figura 1. Registro macroscopico. Dilucion 1:100


de la solucion de suelo despues de 24 horas. B. CUANTIFICACIÓN DE HONGOS

Figura 6. Registro macroscopico. Dilución 1:10


000 de la solución de suelo, después de 3 días.
Figura 2. Coloración de Gram. Dilución 1:100
de la solución de suelo.
Observado en microscopio optico objetivo 4x.

Figura 3. Coloración de Gram. Dilución 1:100


de la solución de suelo.
Observado en microscopio óptico objetivo 10x.

Figura 4. Coloración de Gram. Dilución 1:100


de la solución de suelo.
Observado en microscopio óptico objetivo 40x. VI REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Fuente: Autores.
[1] POCHON J. 1962. Microbiología del suelo.
IDIA 173: 1 – 72.

[2] Órgano MINISTERIO DE LA PRESIDENCIA.


Publicado en BOE núm. 45 de 21 de febrero de
2003 [web]:
http://noticias.juridicas.com/base_datos/Admin/rd
140-2003.html. Consultado 11/09/2016

[3]Técnica de placa profunda. (En línea) (Citado


el 15 de mayo de 2015) Disponible en:
<http://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/q
uimica/5_anio/biotecnologia/practicoIII.pdf>

[4]Fumigación del sustrato (En línea) (Citado el


15 de mayo de 2015) Disponible en:
<http://www.etsmre.upv.es/pcult/desinfsuelo.htm
>
[5] Velez, D. (1 de 02 de 2008). Slideshare.
Obtenido de Estructura y morfologia bacteriana .
https://pt.slideshare.net/divelezo/diapositivas-
tema-02-estructura-y-morfologa-bacterianas-
presentation

VII. CONCLUSIONES

1). Se realizó la cuantificación de


microorganismos del suelo (hongos y
bacterias) utilizando la técnica de dilución y
siembra en la placa pero en esta experiencia
no hubo un crecimiento amplio de
microorganismos por lo cual no se pudo
realizar el conteo y los cálculos
correspondientes, en cada caja de Petri se
podrían haber formado de 30 a 300 colonias
pero en este caso no se obtuvieron los
resultados deseados, tal vez porque la
muestra del suelo tomada no pudo ser el
medio apropiado para que todas crecieran al
mismo tiempo y estas bacterias crecen en el
suelo como colonias o si no se desintegran
antes del recuento, esta toma de muestra es
complicada y llena de errores se deben
tomar muchas y en este caso no se pudieron
haber tomado las suficientes para realizar
dicho conteo, los pocos que formaron no se
pudieron diferenciar en algunas cajas no se
formó nada y en otras se formaron manchas
blancas o gris como se observa en la
muestra.