DIVERSIDAD CELULAR I.

CÉLULAS PROCARIÓTAS:
TINCIÓN Y SU OBSERVACIÓN
(CELLULAR DIVERSITY I. PROKARYOTIC CELLS:
STAINING AND OBSERVATION)

Barraza Y; Estrada C; Prada C; Quintero C; Romero W; Soto A

Resumen:
La célula es la unidad biológica, funcional y estructural básica de cualquier ser viviente y a
la vez, la célula es el organismo más pequeño de todos, capaz de realizar las funciones de
nutrición, relación y reproducción.

Todo ser vivo está formado por células. Cuando están formados por una sola célula se les
denomina unicelulares y cuando son formados por una gran cantidad de células de diferentes
tipos que normalmente están especializadas en funciones específicas, reciben el nombre de
multicelulares.

Se conocen dos tipos básicos de células, las Eucariotas que contienen un núcleo celular bien
definido y las Procariotas que carecen de él. En general, las Eucariotas forman parte de los
grandes organismos multicelulares como animales, plantas o el ser humano, mientras que las
Procariotas son parte única de los organismos unicelulares como las bacterias o Arqueos.

Palabras Claves: célula procariota, bacteria, arqueo bacterias, cianobacterias, membrana

celular, tinción, microorganismos unicelulares, fisiología, morfología, GRAM positiva,
GRAM negativa.

Abstract:
The cell is the basic biological, functional and structural unit of any living being and, at the
same time, the cell is the smallest organism of all, capable of performing the functions of
nutrition, relationship and reproduction.
Every living being is made up of cells. When they are formed by a single cell they are called
unicellular and when they are formed by a large number of cells of different types that are
usually specialized in specific functions, they are called multicellular.
Two basic types of cells are known, the Eukaryotes that contain a well-defined cell nucleus
and the Prokaryotes that lack it. In general, Eukaryotes are part of large multicellular
organisms such as animals, plants or humans, while Prokaryotes are a unique part of
unicellular organisms such as bacteria or Arqueos.

Keywords: prokaryotic cell, bacteria, archaebacteria, cyanobacteria, cell membrane, staining,

unicellular microorganisms, physiology, morphology, GRAM positive, GRAM negative.

INTRODUCCIÓN El proceso que permitió la creación de las

Las células procariotas son el grupo más
antiguo de organismos sobre la Tierra, se
han encontrado fósiles de más de 3.000
millones de años, así mismo| son
las más abundantes.
Su estructura es básica por lo que no
forman organismos multicelulares y tienen
características que las distinguen de las
Eucariotas, como no poseer un núcleo
definido a diferencia de las células
eucariotas que sí cuentan con un núcleo
celular y separado por el citoplasma.
En el núcleo, la célula alberga la
información genética. En el caso de
las células procariotas, al no disponer de
núcleo definido, este material está
distribuido en una región del citoplasma
que se conoce como nucleoide.
En la mayoría de las células procariotas es
posible distinguir la pared celular,
la membrana plasmática,
el citoplasma (con el nucleoide),
los ribosomas y los
llamados compartimentos procariotas.
Los biólogos vinculan a las células
procariotas con el origen de la vida y
sostienen que la aparición células
eucariotas posibilitó el desarrollo de
organismos más complejos.
células eucariotas se llama eucariogénesis.
Hubo, según una hipótesis, un “último
antepasado común universal”: LUCA,
según la sigla en inglés. Este sería
un organismo unicelular procariota del
que descienden el resto de los seres
vivientes.
La amplia mayoría de los organismos
unicelulares, de hecho, siguen siendo
procariontes. Las bacterias, por ejemplo,
son organismos procariontes. Están
formadas por células procariotas, con su
material genético disperso en la zona del
citoplasma.
Las arqueas son otros organismos con
células procariotas. Anteriormente eran
consideradas bacterias pero luego, al
descubrirse varias diferencias con estos
organismos, se “independizó” a este tipo
de dominios en el dominio Archaea.
MATERIALES Y EQUIPOS
Microscopio óptico, láminas porta y cubre
objetos, goteros, cultivo de
microorganismos realizado con
anterioridad, un vaso de yogurt, azul de
metileno, solución colorante de cristal
violeta, colorante de Gram (bacterias),
violeta de Genciana, papel absorbente, Parte B. Técnicas para la coloración de
aceite de inmersión, asa de inoculación bacterias.
punta redonda, beaker, pipeta, mechero,
1. Coloración Simple:
agua destilada, papel filtro, etanol al 95%.
 Se preparó un frotis con la técnica
anteriormente descrita.
PROCEDIMIENTO
 Se colocó el portaobjetos sobre un
soporte para tinciones.
Parte A. Preparación de un frotis
 Se cubrió la preparación con dos o
3 gotas de solución de azul de
Comprende las siguientes etapas:
metileno y se dejó actuar por 1
1. Extendido. 2. Secado. 3. Fijación
minuto.
 Se lavó con agua.
Se verificó que en la se entraran los
 Se secó encima del mechero a una
materiales que se requerían (caja de Petri,
distancia adecuada de la llama.
asa microbiológica, beaker con agua
destilada, porta objetos limpios, muestra Con esta técnica de coloración se observó
biológica). la muestra a través del microscopio óptico
con diferentes objetivos, encontrando lo a
1. Extensión: continuación descrito:
 Se disolvió la muestra en una caja
2. Coloración de Gram (Técnica de
de Petri con un poco de agua
Hucker)
destilada y se mezcló con el asa.
 Se preparó el frotis según la
 Se preparó un porta objetos
técnica que se describió.
limpio.
 Se colocó la porta objetos sobre un
 Se introdujo el asa en el beaker
soporte para tinciones.
con agua destilada con el fin de
 Se cubrió la muestra con una
limpiarla y luego se flameó hasta
solución de cristal violeta y se
rojo vivo; se introdujo de nuevo en
dejó actuar por 1 minuto.
el agua.
 Se lavó suavemente con agua de
 Se tomó una muestra con el asa y
un frasco lavador.
zigzagueando se colocó sobre un
 Luego se cubrió con lugol y se
porta objetos limpio.
dejó actuar por un minuto.
2. Secado: se mantuvo la lámina encima
 Se lavó nuevamente de la misma
de llama del mechero a una distancia
manera.
segura (apróx. 15 cm).
 Después se cubrió con etanol a
3. Fijación: con el frotis seco, se pasó el
95% (decolorante de Gram) y esto
porta objetos tres veces por la llama
actuó sobre la muestra durante 30
para fijarla.
segundos, moviendo la lámina
suavemente.
 Se lavó con agua.
  Se cubrió con una solución de
safranina y actuó por un minuto.
 Por último se lavó y secó.

Aplicando esta técnica de coloración

se observó la muestra a través del
microscopio con diferentes objetivos,
encontrando lo a continuación
descrito:

Relación entre células procariotas y

eucariotas.
Fig.6.7 Reconocimiento de células de la
1. Raspamos con un palillo el epitelio
mucosa bucal. Foto: Alicia Soto.
interno de la mejilla de un voluntario,
lo colocamos sobre el porta objetos y
dejamos que se secara la muestra.
Observamos los núcleos de las células
2. Se tiño con azul de metileno.
epiteliales de la mucosa oral utilizando el
3. Después lavamos con agua destilada
objetivo 10X, notamos que se tiñieron con
del frasco lavador.
un tono azul oscuro, no podemos distinguir
4. Retiramos el exceso de agua con papel
el citoplasma ni la membrana que lo rodea.
adsorbente, colocando el porta objeto
Fig. 6.8
sobre él, sin arrástralo.
5. Colocamos la muestra en la platina del
microscopio y encontramos lo
siguiente:

Enfocamos con el objetivo 4X, con este

logramos ver que las células de la mucosa
oral se tiñeron, pero no logran distinguirse,
como se muestra en la fig. ¿

Fig. 6.8 Observación de núcles en las

células epiteliales de la mucosa oral.
Foto: Alicia Soto.

Con el objetivo 40X vemos los núcleos

teñidos de azul oscuro, observamos el
citoplasma que se tiño de un azul mas gramnegativos a las que se visualizan
claro, pero no podemos distinguir la de color rosa, rojo o grosella.
membrana de las células. Fig. ¿.
4. ¿Por qué debe enfriarse la asa antes
de usarse? Para evitar que el calor
destruya los microorganismos.

5. ¿Cómo se clasifican las bacterias según

su forma? Se clasifican en:

Cocos: Proviene del griego kókkos, lo que

se traduce como grano, es de forma
esférica. Estas se clasifican en:

Fig.6.9 Observación de células epiteliales  Diplococo: Cocos en grupos de dos.

de la mucosa bucal con objetivo. Foto:
Alicia Soto.
 Tetracoco: Cocos en grupos de
cuatro.
 Estreptococo: Cocos en cadenas.
 Estafilococo: Cocos en agrupaciones
irregulares o en racimo.

RESULTADOS
CUESTIONARIO

1. ¿Por qué deben usarse coloraciones

para observar al microorganismo?
porque son transparentes y si no se
utilizan los colorantes, no pueden
apreciarse.

2. ¿Para qué se usa la tinción de azul de

metileno? Se usa para observar Fig. 6.5 Clasificación de los Cocos.
bacterias y levaduras las cuales Imagén tomada de: bacteriasyvirus’s blog.
difieren desde el punto de vista
Bacilos: Proviene del latín baculus, lo que
químico de su medio exterior y por eso
significa “varilla”, tienen forma de
se tiñen contrastando con su
alrededor.

3. ¿Según Gram como se dividen las

bacterias? Se dividen en bacterias
Gram positivas a las que se visualizan
de color morado, y bacterias
bastoncillo. Fig.
Fig. 6.6 Clasificación de los Bacilos.
Imagen tomada de: bacteriasyvirus’s
blog
Formas Helicoidales.
 Vibrio: ligeramente curvados y en
forma de coma, judía o cacahuete.
 –Espirilo: en forma helicoidal rígida o
en forma de tirabuzón.
 Espiroqueta: en forma de tirabuzón
(helicoidal flexible)
Fig. 6.5 Clasificación de Helicoidales.
Imagen tomada de: bacteriasyvirus’s
blog.
6. ¿Por qué se dice que la coloración
azul de metileno es una coloración
¿. simple y directa y con GRAM es una
coloración diferencial? La
coloración con azul de metileno es
simple y directa, porque nada más se
usa un solo colorante y con este tipo de
tinción se puede observar la
morfología y disposición bacteriana.
La coloración de GRAM es
diferencial porque con ella podemos
apreciar la morfología, tamaño,
organización de las bacterias y además
se puede categorizar los
microorganismos en varios grupos,
según la afinidad con él está
coloración.
7. Cuál es la diferencia entre cápsula y
capa mucosa de las bacterias? La
cápsula bacteriana es una capa rígida
organizada en matriz impermeable,
que le sirve a las bacterias de cubierta
protectora resistiendo la fagocitosis; y
la capa mucosa bacteriana se refiere al
material sudado polimérico
extracelular que se deforma con
facilidad, incapaz de excluir partículas
y no tiene límite definido.
Fig. 6.7 Cápsula bacteriana, 2. Capa
mucosa. Imagen tomada de: Wikipedia.
8. ¿Cuál es la composición química de
la cápsula bacteriana? Está formada
por una serie de polímeros orgánicos.
Generalmente contiene glicoproteínas
 y un gran número de polisacáridos
diferentes, incluyendo polialcoholes y
amino azúcares.
9. ¿Qué tipo de antibióticos se conocen
para bacterias GRAM positivas y
GRAM negativas?
 ANTIBIÓTICOS para BACTERIAS
GRAM POSITIVAS:
PENICILINAS actúan frente a multitud
de bacterias gram-positivas. De espectro
dominante sobre bacterias Gram-positivas,
por ejemplo beta-lactámicos (con
extensión para bacterias Gram-negativas
en el caso de la amoxicilina y
cefalosporinas) y macrólidos.
ERITROMICINA y fármacos similares
(claritromicina, azitromicina, etc.) son
activos, sobre todo, frente a espectro restringido, actúan frente a
microorganismos de los llamados ‘gram-
positivos' y tienen utilidad en muchas
infecciones (amigdalitis, infecciones
bucales, neumonías ,etc.), sobre todo en
alérgicos a penicilina. Producen molestias
de estómago en muchas personas.
GLICOPEPTIDOS: VANCOMICINA,
TEICOPLANINA: Son antibióticos muy
activos frente a microorganismos llamados
"gram-positivos", incluso los resistentes a
penicilinas y cefalosporinas. Por ello se
emplean en infecciones hospitalarias
graves, sobre todo en alérgicos a
penicilina.
LINCOMICINA Y CLINDAMICINA:
Son activos también frente a sulbactam, también pueden con las
microorganismos llamados "gram-
positivos", pero además pueden con otros
microorganismos llamados anaerobios.
También se emplean en infecciones de
hospital, sobre todo en alérgicos a
penicilina. La clindamicina se utiliza
tópicamente en algunas infecciones de
piel.
PENICILINAS G son eficaces contra
estreptococos gram-positivos,
estafilococos, enterococos y
meningococos: se emplean en el
tratamiento de la sífilis, gonorrea,
meningitis, ántrax y el pián. La penicilina
V se utiliza en el tratamiento de las
infecciones respiratorias.
 ANTIBIOTICOS para BACTERIAS
GRAM NEGATIVAS:
AMINOGLUCÓSIDOS, también de
bacterias gram-negativas.
De espectro dominante frente a bacterias
Gram-negativas, por ejemplo,
polipéptidos, solo para bacterias Gram-
negativas; aminósidos (con extensión para
bacterias Gram-positivas en el caso de la
gentamicina, y para Mycoplasmas en el
caso de la espectinomicina), y quinolonas
(con extensión para bacterias Gram-
positivas y Mycoplasmas para el caso de
las fluoroquinolonas).
AMINOPENICILINAS (Amoxicilina,
ampicilina, etc). Tienen más actividad
frente a los microorganismos llamados
‘gram-negativos', y si se asocian con
sustancias como el ácido clavulánico o el
bacterias que producen beta-lactamasa,
como el estafilococo.
GENTAMICINA, TOBRAMICINA,
AMIKACINA, NETILMICINA . Se
usan sólo en infecciones graves por
microorganismos de los llamados gram-
negativos.
QUINOLOMAS: Hay 2 subgrupos de
quinolonas. Las más antiguas (ácido
nalidíxico, ácido pipemídico ) sólo
actúan contra algunos microorganismos de
los llamados ‘gram-negativos' y se utilizan
sólo como antisépticos urinarios (en
infecciones leves de orina). Las más
recientes, o fluoroquinolonas, incluyen
fármacos como norfloxacino , aminoglucósidos son infrecuentes e
ciprofloxacino y ofloxacino y son activos
frente a otras muchas bacterias,
incluyendo la llamada Pseudomona (una
bacteria peligrosa que causa infecciones
muy graves).
AMPICILINA y AMOXICILINA
tienen un rango de acción similar a la
penicilina-G, con un espectro de acción
algo mayor, que incluye a las bacterias
gram-negativas. La ampicilina y Rickettsia (las bacterias que producen el
derivados, son eficaces frente a la fiebre
tifoidea, bronquitis, infecciones del tracto
urinario, neumonía, meningitis y el tratamiento del acné, la enfermedad
bacteriemia. Las penicilinas resistentes a
la penicilinasa son efectivas frente a las
bacterias que han desarrollado resistencia
a la penicilina G. Las penicilinas
antipseudomonas permiten el tratamiento
de las infecciones provocadas por la
bacteria gram-negativa Pseudomonas, que
es una bacteria frecuente en la flora
hospitalaria. Las penicilinas
antipseudomonas se pueden administrar de
forma profiláctica a los pacientes con una
alteración del sistema inmunológico que
tienen una susceptibilidad incrementada a
las infecciones por gram-negativos.
AMINOGLUCÓSIDOS:
ESTREPTOMICINA es el más antiguo de
los aminoglucósidos y, después de la
penicilina, el antibiótico más empleado.
Los aminoglucósidos son antibióticos de
espectro restringido que inhiben la síntesis
de proteínas bacterianas en bacilos gram-
negativos y estafilococos. En ocasiones se
utilizan en combinación con la penicilina.
Los efectos adversos asociados con la
utilización prolongada de
incluyen lesión de la región vestibular del
oído interno, pérdida auditiva y lesiones en
el riñón.
TETRACICLINAS: Las tetraciclinas son
antibióticos bacteriostáticos que inhiben la
síntesis de proteínas bacterianas. Son
antibióticos de amplio espectro eficaces
frente a cepas de estreptococos, bacilos
gram-negativos, las bacterias del género
tifus) y espiroquetas (las bacterias que
producen la sífilis). Se emplean también en
inflamatoria pélvica, las infecciones del
tracto urinario, las bronquitis y la
enfermedad de Lyme. Debido a su amplio
espectro, las tetraciclinas pueden, en
ocasiones, alterar el equilibrio de la flora
bacteriana interna que normalmente es
controlada por el sistema inmunológico
del organismo; esto puede producir
infecciones secundarias en el tracto
gastrointestinal o la vagina, por ejemplo.

 ANTIBIÓTICOS para BACTERIAS
GRAM NEGATIVAS y POSITIVAS:
TETRACICLINAS y (o cotrimoxazol) que se usa en infecciones
CLORANFENICOL son antibióticos de
amplio espectro, eficaces frente a bacterias
gram-positivas y gram-negativas.
AMOXISHOT PREMIX está formulado
sobre la base de una penicilina
semisintética.
AMOXILINA con amplia actividad
frente a bacterias gram positivas y gram
negativas. Resistente a los jugos gástricos,
tiene una excelente absorción intestinal,
alcanzando rápidamente altos niveles en
plasma y difundiéndose por todo el
organismo, con una buena persistencia.
FLOXAID 10% incorpora una
QUINOLONA de 2da. generación, la
ENROFLOXACINA, formulada
especialmente para ser utilizada en
animales. Activa frente a gérmenes Gram
negativos y positivos y PPLO. Su
exclusivo mecanismo de acción
antibacteriana se produce mediante la
inhibición de la enzima ADN girasa,
imprescindible para la multiplicación
bacteriana, y que al ser un mecanismo
exclusivo de este grupo químico, actúa
allí, donde ya se ha producido resistencia a
los antibióticos.
SULFAMIDAS: Son agentes
antimicrobianos sintéticos,
bacteriostáticos, con un espectro amplio
que abarca la mayoría de los "gram-
positivos" y muchos ‘gram-negativos'.
Actualmente en relativo desuso, a
excepción de algunas sulfamidas tópicas
(sulfadiazina argéntica, mafenida), y de la
combinación trimetoprim-sulfametoxazol
urinarias y bronquiales, en la fiebre
tifoidea y en otras infecciones, y que es de
elección para el tratamiento y la
prevención de la neumonía por el protozoo
Pneumocystis carinii , que afecta a los
pacientes con SIDA.
CEFALOSPORINAS: Las
cefalosporinas tienen, como las
penicilinas, un anillo betalactámico que
interfiere con la síntesis de la pared celular
bacteriana y son también antibióticos
bactericidas. Son más eficaces que la
penicilina frente a los bacilos gram-
negativos, e igual de eficaces frente a los
cocos gram-positivos. Las cefalosporinas
se emplean en el tratamiento de la mayor
parte de las meningitis, y como profilaxis
en cirugía ortopédica, abdominal y
pélvica. A pesar de ser en general más
costosas que las penicilinas, se emplean
con frecuencia debido a su amplio margen
de seguridad. También se recomienda su
utilización en la profilaxis debido a su
eficacia frente a las bacterias gram-
negativas.
CONCLUSIONES
Después de terminar el laboratorio y el
desarrollo de los distintos temas del
presente informe hemos entendido la
diferencia a nivel celular que nos separa de
las especies del reino de los protistas, que
son organismos unicelulares como por
ejemplo las bacterias. Aprendí como
manipular, conocer las distintas partes, el
funcionamiento e interpretar la
información que me entrega el
microscopio de óptico.
Por otra parte el proceso que se lleva a
cabo para hacer visible las células a través
de la tinción de estas. En este laboratorio
observamos cómo se ocupan las distintas
tinciones para detectar enfermedades,
marcar células o moléculas específicas, y
para hacer visibles organismos muy
pequeños como las bacterias. Sin duda la
exploración del microcosmos es algo
asombroso y vital para el desarrollo de la
humanidad.

BIBLIOGRAFÍA
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torio-Guia3-Diversidad-Celular

WEBGRAFIA

https://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A1psula
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