Fosforilacion oxidative -:

( Combustible} Proporcionados
par [a circulation
02 sangufnea

ATP

. · Las mitocondrias, teiiidas de verde, forman un entramado en el interior

. de un fibroblasto(jzquierda). Las rnitocondrias oxidan combustibles
carbonadospara generar energla ce!ular en forma de ,AJP. [(lzquierda)
Cortesfa de Michael P. Yaffee, Deoartamento de Biol02fa. Unilt<"rsid"~----· ·-·- ~
.. de Cafrfo~a, San Diego.] - ·. . ~ . . .

2£2!1.tidad de. ATP que las seres humanos ~ecesitm.p~ a:frontarsu vida resul- CONTENIDO
[ia asombrosa. Un hombre sedentario de 70 kg requiere aproxirnadamente
.. l;J (2.000 kcal) para su actividad diaria, Para disponer de toda esta energia I~i!. La fosfon1aci6n oxidativa en
.,rs&?\83 kg de ATP. Sin embargo, 1os seres humanos tienen solo alrededor de eucariotas tiene Jugar en las
mitocondrlas
Hgde ATP en un momenta dado. La disparidad entre la cantidad de ATP que
Ptmsx>s y la que n~os se resuelve con ~l reciclaje del ADP a ATP. Cada I~.~ La fosfon1aci6n oxidativa depende
,...IPcu1a de ATP se reciclaaproximadamente300 veces par dia, Este proceso tiene del transports electr6nico
~-p:rincipalmentepor media de lafosforilaci6noxida.tiva. ]~~-~- La cadena respiratoria esta formada
Comenzaremos nuestro estudio de la fosforilaci6n _i;n::idativa examinando las por cnatro complejos: ires bornbas
Jii>21:Cioues de oxidaci6n-reducci6n que permiten ef'HU:JO de electrones desde de protones y una conexi6n ffsicci
NADH y F.A...DH2 al oxfgeno.El flujo de eleci:i.-onestiene Iugar en cuatro complejcs con el cido def acido cfuico
proreicos voluminosos que se encuentran embebido~en lamembranaintema mite- t~~: Un gradiente.de protones impu~-
omdrii!, queen su conjunto se denomina cadena respiratotui o cadena de transporte la sfntesis de lITP ;,,,
~-.,.
de electrones. ~· ...
;1!~~." Muchas Ianzaderas permiten ,_~ . .~~
NADH + 1h 02 + H+~ H20 + NAD+ el movimiento a traves de las : }'
rnembranas mitocondriales
!:,.G°'·= """7220,1 kJ mol-1 {-52,6kcalmol-1)
iJi:[ La reguladon de Ia respiraci6n
La reacci6n global es exergonica, Significativamente, tres de las complejos de la celular esta gobemada en primera
cadena de transporte electr6nicoutilizan la energia liberada por el flujo de electro- instancia por la necesidad de J'iIP
nes para bombear protones de la matriz rnitocondrialal citoplasma. En esencia,la
energfa se transform.a.La distribuci6n desigual de las protones genera un gradiente
de pH y un potencial electricotransmembranal que crea unafuerza proton-motriz,
El ATP se sintetiza cuando las protones vuelven a la matriz mitocondrial mediante
:· rm corpplejo enzimatico.
. ADP+ Pi+ H+-+ ATP+ H20
!:,.G°' = +30,5 kJ mol-1( +7,3 kcalmol-1)
525
 -~

"'......
~
'ill
Figura 18_1 Fundamento de la fosforilacidn
cxidativa, la oxidadon y fa sfntesis de ATP se
acoplan mediante fllJios de protones a traves de

...
la membrana. Para reducir el oxfgeno a agua !os
eledrones fluyen desde el NADH y ef FADH2 a
traves de.cuatro complejos proteicos.. Tres de los ·~

..
cornplejos bombean protones desde la matriz
mitocondria! al exterior de [a mitocondria Los
protones vuefven a la matriz fluyendo a traves
de otro complejo proteico, la ATP sintasa, que fs1
impulsa la·sintesis de ATP. ·filli

Asf pues, la oxidacum de las combustibles y la fosforilaci6n del ADP estdn: aco- (iii]
Respiraci6n ·
plados por un gradiente de protones a traves de la membnma uaema mitocondrial
Proceso generador de ATP en el que un
(Figura 18.1)_
compuesto inorganico ( como ef oxfgeno
mo[ecular) actUa' como aceptor final de Conjuntamente, la generaci6n por el cido del acido citrico de electrones de alto
los eledrones. 8 donador electr6nico potencial de transferencia, su flujo a. traves de la cadena respiratoria y la sintesis de
puede ser o bien un compuesto organko ATP que le acompa:iia, se denomina respiraci6n o respitacuni celular.
o uno inorganico,

18.1 La fosforilacion oxidative .en eucariotas .tiene Iugar en

las mitbcondrias · ;.
Recordemos que ei objetivo bioqufmico del cido del ~cido citrico, que tienelugar
en las mitocondrias, . es generar electrones de alta energia, Esto se adecua, por lo.
tanto, con la fosforilacion oxidativa, que ocurre tarnbien en las mitocondrias y que
' I 0 • ' .~• •• • •0 •
............ convertirala er.iJ~r.gf:i. de estos.electrones Las
en.ATP, mitcccndriasscnorgaculosde
form.a oval, generalmente de UnOS 2 µm de Iongitudy. O;S )lIIl de diametro, aproxi-
madamente el tamafio de una bacteria. Eugene Kennedyy Albert Lehninger descu-
brieron hace mas de media siglo que las mitocondrias contienen el ensamblaje
sespiiatorio, las etizimas del ciclo del a.cido citiico y las enzimas de la oxidacion. de los
dcidos gtasos.

Las mitocondrias estan delimitadas par una rnernbrana doble

Los estudios de microscopfa electronica de George Palade y FritjofSjostrand
pusieron de manifiesto que las mitocondrias tienen dos sistemas demembrana: una
membrana externa y una membrane intema amplia y muy plegada. La membrana
interna se dispone en una serie de plegamientos llamados ciestas. Por lo tanto, hay
dos comp~@witos enlamit'acondria: (1) el espa.cio intennembranal entrelas mern-
. branas externa e: interna y (2) la matriz, que esta delimitada por lamembrana inter-
na (Figura 13.2). La matriz mitocondrial es donde tienen lugar Iamayor parte delas
reacciones del cido del acido citrico y la oxidaci6n de los acidos grasos. En contras-
te, la fosforilaci6n oxidativa tiene lugar en la membrana interna mitocondrial.
El incremento en el area superficial de la .membrana interna mitocondrial produci-
do por las crestas crea mas lugares para la fosforilaci6n 6xidativa que si la membra-
nafuera simpley Sinplegar, Seestimaqueen unser hum.ano existen unos 14.000 m2
de membrana interna mitoconclrial, que es el equivalente a tres earnpos: de fUtbol
amencano.
La membrana extema es bastante permeable a un granmimero de iones y mole-
culas pequciias, ya· que contiene muchas copias de la porina mitocondrial, una pro-
. tefna de 30-35 kDa, que form.a pores y quetambien es conocida como VDAC, canal
anionico dependiente del voltaje. VDAC, la protefna mas frecuente enla membrana
extern.a mitoconclrial, interviene en el flujo regulado de metabolitos ·(generalmente
aniones como el fosfato, cloruro, aniones organicos y nucle6tidos de adenina) a
traves de la membran<1; externa. Por el contrario,)a me:mbrana interna es impermea-
ble a· casi todos las iones y moleculas polare3. Ur:-a amplia familia de transportadores

52-6

.· ... ·_--:·:.:. ·- .• -.;.-· - .-6:-~ -- - ": • : ·-~-. -::.:-.- :-::- . _._...._ .:.-:~ .... -
 527
18.1 Mitocondrias

Figura 18.2 Micrografia electrdnica

(A) y diagrarna (B) de una mltocondria,
[(A) Cortesfa de George Palade. (B) Tornado
de S. L Wolfe, Biology of the Cell, 2.• Ed,
© 1981 Brooks/Cole, una parte.de (engage
Membrana extema Leaming, Inc. Reproduddo con perrniso de
www. cengage.com/perrnission 3.]
(B)

··traslada rn'etabolitos como el ATP, piruvato y citrato a traves de la membrana inter-

. na mitocondrial. Al hacer referencia a las dos caras de esta membrana utilizaremos
~Ws te:o:ninos car~ de la matrizy Ca.ra caoplasauiiica (ya que esta Ultima es totalmen-
te accesible a la mayor parte de las moleculas pequefias del.citoplasma). Tambien
reciben el nombre de caras Ny P, respectivamente, porque el potencial de membra-.
na es 'negative en· el lado de la matriz y positive en el lado del citoplasma.

f··· . _ .. : . Ji'.,p,,prnl::<l.riota.s,Jas born bas .de prctones.activadas par. electrones ~el. ..complejo
sintetizadorde ATP estanlocalizados en h~embrana plasmatica,la mas Intema de
las dos membrimas. La'membrana externa de las bacterias, como la de las mitocon-
. drias, es permeable a la mayor parte de Ios metabolites pequefios debido 'a la presen-
cia de porinas. ·

Las mitocondrias son el resultado de un prc:icesoendosi1'.,1bi6pco_

y. Las mitocondrias son organnlos serillaut6nomos que mantienen una relaci6n
endosimbi6tita con la celula hospedadora. Estes' orginulos ·tienen su propio
-..:. · :c;
y
DNA, que codifica diversos RNA proteinas,' El DNA mitocondrial se suele
representar coma circular, pero investigaciones recientes · sugieren que el DNA
Rkkettsia
mitocondrial de muches organismos puede ser lineal El tamaiio del genoma rri.ito- (una bacteria)
condrial varia mucho segtin las especies. El ge~~witocon?rial del protista
Plasmodiv.m fa.lciparum tiene menos de 6.000 pares de 'bases (pb ), mientras que las
de algunas plantas terrestres comprenden mis de 200.000 pb (Figura. 18.3). .·
El DNA mitocondrial humano tiene 16.569 pb y codifica 13 protefnas de la cadena
respiratoria, asi como las RNA ribos6micos grande y pequefio, y suficientes tRNA
Wabidopsis
coma para traducir todos las codones. Sin embargo, las mitocondrias tambien con- Auna p[anta) ~
tienen much.as proteinas codificadas par el DNA nuclear. Las celulas que tienen
mitocondrias dependen de estos orginulos para realizar- la fosforilaci6n oxidativa Pfasmodium :'''
y, a cambio, la existencia misma de las mitocondrias depende de la celula. zC6mo (un prot~~o)
lleg6 a producirse esta fntima relaci6n simbi6tica? ·
Se piensa que un acontecimiento endosimbiotico pudo haber tenido lugar cuando 0
un organism a lib re capaz de realizar la f osforilaci6n oxidativa fue engullido por otra Homo saplens
celula, La doble membrana, el DNA circular (con algunas excepciones) y las Figura 18.3 Tamaiios de genomas
y
maquinarias de transcripci6n ·traducci6n especfficas de las mitocondrias apuntan mitocondriales. Los tarnanos de tres genomas
en este sentido. Gracias a la rapida acumulaci6n de datos sobre las secuencias de mitocondriales comparados con el genoma de
genomas mitocondriales y bacterianos, podemos hoy especular con cierta autoridad Rickettsia, un pariente de! supuesfo ancestro de
todas las mitocondrias. En los genornas de mas
sobre el origen de la mitocondria "primigenia". El genoma bacteriano que mas se de 60 kpb, la region de! DNA que cod)fica, genes
parece al de las mitocondrias es el de Rickettsia.. prawazekii, el causante del tifus con funci6n conodda se rnuestra en rojo.
 . .
Schizosaccharomyces Porphvra
(una Ievadura)
Acanthamoeba
(una ameba)
(una alga roja)
Redinotnonas
provocado por piojos. El genoma de este organismo tiene un
tamafio de mas de 1 mill6n de pares de bases y contiene 834 genes
que codifican proteinas. Los estudios sobre su secuencia sugie-
]..
......
(un protozoa)
ren que todas las mitoconclrias existeri.tes derivan de un ancestro
de R prowazekii y son el resultado de un tinico-acontecirniento
endosimbi6tico. · . ~
La evidencia de que las mitocondrias actuales son el resulta- ~
do de un iinico acontecimiento proviene del estudio del genoma
mitoconclrial mas parecido al de las bacterias, el del protozoa
· · - Reclinoiiionas . a:meiicaii.lr.. Su.genomi.coriflene-97 geile;~d.--;-i~s '..;.
cuales 62 son especificos de protein.as. Los genes. que ccdifican

\ ~tas proteinas incluyen todoslos genes c~difiCao.tes de protei-

nas encontrados en todos los genomas mitoconclriales secuencia-
dos (Figura..18.4). Aun asi, este genoma representa menos del
flll
fl
2% de los genes que codifican proteinas de la bacteriaE. coli. En fli
otras palabras, una fracci6n pequefia de genes bacterianos, un
2%, se encuentran en todas las initocondrias examinadas. lC6rno Pi
es posible que todas las mitoconclrias tengan el mismo 2% del P
·genoma bacteriano? Es muy· poco .probable que los genomas
fil

Figura 18.4 Sol.apamiento de dotaciones.genicas de rnitocondrias,
Los genes presentes en c:ada 6valo son aque!los que-se encuentran en el
. organismo representado por el 6valo: Solo se muestran genes que codifican
protelnas y rRNA. El genome de Redinomonas contiene todos las genes
que codifican proteinas encontrados en todos las genomas mltocondria!es
secuenciados. [Tornado de M. W.. Gray, G. Burger y B. F. Lang: Science
283: 1476-1481, 1999.]
."
: .mitocondriales resultantes de varies acontecimientos endosim-
bioticos .pudieran haberse reducidc de forma independiente al ~
mismo conj unto de genes presente en R. americana. Por lo tanto,
la explicaci6n mas· sencilla es que el suceso de la endosimbiosis
tuvo 1Ugar solo uria vez y todas las .motocondrias exi'stentes son

••
descendientes de ese antepasado. . .. ·
~
·Hay que tener en cuenta queen el rnundo microbiano no es
nada "taro que Uni celula grande engulla de forma transitoria

••
celulas procariotas. En 16 que respecta a las mitocondrias, esta rcl~ci6D. .transitoria
••• - - _,,.. - -~--· ...·-·· •• ,,. ---- ••• .r.-
·- se convITti'oen peiriianciite cuancfola celulatiact~a-perclio. s~
b:NA y ~~ a;paci-
dad para vivir de.forma independiente, y la celula hospedadora paso a depender del

·••
ATP generado por su inquilino. · · ·

La fosforilacion oxidativa depende

••
.·182 · de! transporte
electronico :

••
En el Capitulo 17, vimos que la funcion principal del ciclo del acido citrico es.Ia
generacion cl~ ::t\fADH y FAQH2 rnediante la oxidacion de acetil-CoA. En l~ fo~fo-.
rilacion oxidativa s_e utiliza el NADH y el FADH2 parareducir el oxigeno molecu-

••
lar a agua, Lareducci6n de! oxfgeno molecular por NADH y FADH2 es un proceso
muy exerg6nic~qu_;,Fe realiza mediante una serie de reacciones de transferencia de
Vo[tfmetro electrones, que tlrnfu lugar en un conjunto de proteinas de membrana conocida

••
r,==~~==(/~J)==~~==;i coma cadena: de transpoite de electrones.

El potencial de transferencia electr6nica de un electron se mide corno

potenciaI redox
I
••
En la fosforilaci6n oxidativa, el potencia..I de transf erencia. de electrones de! NAD H o
del FAD H2 se convierte en el potencia..l de tra..nsferencia. de grupos fosforilo del ATP.
Es necesario expr~ar estas forrnas de energfa libre de forma cuantitativa. La medi-

••
da del potencial de transferen.cia de fosforilos ya nos resi.ilta familiar: corresponde al
f:i.G°' de lahidr6lisis del compuesto fosforilado activado. La expresion analoga para
el potencial de transferencia de electTones es E&, el potencia..l de reducci6n (tambifo
Disoluci6nde W 1 M en equilibria

X 1 Myx-1 M con gas H2 a 1 atm
Figura 18.5 Medida de! potenciaI redox.
Dispositivo para medir el potendal de oxidadon-
reducci6n estandar de un par redox Los 'electrones
pueden despfazarse a traves def puente de agar-
agar, mientras fas compuestos X y X" no pueden.
52-S
•
llamado potencia..l red.ox o potencia..l de oxidaci6n-reducci6n).
·El potencial de reducci6n es un concepto electroquimico. Consideremos una
sustancia que pueda estar en forma oxidada X o en forma reducida x-. Se trata de
un par redox-y se design.a X:x-. El potencial de reducci6n de este parse puede I
determinar rnidiendo la fuerza qe~omotriz generada po.r un aparato denoillinado.
J
-,
se:mipila.. p;ob~ con~ctada- a·una semipila.. estandar de referencia.. Cfigura is.S).

--4
...... •
'
~
f
 ·La semipila problema esta formada por un electrode sumergido en una disoluci6n -529
1 M de oxidante (X) y 1 M de reductor (X-)- La semipila estandar d~ referencia 18.2 Transferenda de electrones
consta de un electrode sumergido en una disoluci6n 1 M de H+en equilibria con
gas H2 a una atm6sfera de ·presi6n. Los electrod~s se conectan a un voltfmetro y la
continuidad electrica entre las ·dos semipilas se establece mediante un puente de
agar-agar, permitiendo que los iones pasen de una semipila a la otra, Entonces, los
electrones pueden desplazarse de una semipila a la otra, a traves del cable que
conecta las dos sernipilas al voltirnetro, Si la reacci6n transcurr~ en la direcci6n

x-+ H+-7x+ 1f2H2

las reacciones en cada semipila (tambien llamadas semirrea.cciones o pares) deben ser

Asi pues, los electrones se desplazan de la semipila problema a la semipila estandar

de-referencia, y el electrode de la semipila problerna se considera negative con res-
pecto al electrode de'Ia semipilaestandar. El potencial de reducciOn del par X:X-.
coi(~sponde al voltaJe~medido al cornienzo delexperimento (cuando las concentracio-
nis, de X, x- ]i+'son
y 1 M con una atm6sfera de H2). El potencia.I de reef,uccion def:
. -pd.'fJ$+:H2· es de ·¥if.:.voltios, por definici5n. En las reacciones de oxidaci6n-reduc-
ci6#;'~i:do;;_ad9r d~}lectrones, en este case X, se deno~a reductante o agente
~-
r~8.~[5tor;i:nientra§.qli~
_., .
el aceptor de electrones, aqui H", sellamaoxidante ..
. :;:.::El significadodel potencial de reducci6n resultaahora evidente. Un potencial
d~teducci6n negative indica que la form.a reducida de una sustancia tiene menos
a(rii.idad hacia los electrones que el H2, como en el ejemplo anterior. Un pctencial
de reducci6n positive indica que la forma reducida de una: sustancia tiene mas afi-
nidad hacia los electrones que el H2• Estas comparaciones hacen referencia a condi-
ciones estandar, es decir, 1 M de oxidante, 1 M de reductor, 1.M d~ H+ y una
. _ atmosfera de"H2- Por. tanto, un ag__ep.te.fuerternent~ redUctor . el.NADH) ~.: (coVio ·- ... _ . .
;· -· ·~-.·- , M ..... .,. '"-:-·. ••

obligado a ceder electrones y tiene un potencial. de reducciOn negaiiuo, mientras que un

agente fuertemente oxidante (como el O:z) esui: disp~esto.a acepiar electaones y tiene un :
potencia[ de red.ucci5n positivo. ·
Se conocen los potenciales de reduccion de muches pares red.ox biol6gicamen.te
importantes (Tabla 18.1). La Tabla 18.1 es parecida a las que se pueden ver en los
textos de qufmica, y solo se, diferencia por el hecho de que las condiciones estandar

Tablat s.t Potenciales de oxidaci6n-reducci6n .estandar_de algunas reacciones -

Oxidante Reductor n Eo(V)

Succinato+ C02 a-Cetoglutarato 2 . -0,67
Ac~ta., ·,.: .. :.:·:: ·' · .: . :··Acetaldeb.):do... ~~ , ...,~f~,,..;; · ·. -2 -0,60.
Ferredoxina(oxidada) Ferredoxina(reducida) - 1 -0,43
2_ H~ -'"'· ._,.,. .... ~.--~ -'--·, "·::·. _· . ...:~. ." ;.H2 ·,'.;._;-. ~..;._,._. ;·: , ._:.•.. ; .. :.-· ~ «: .-.: .. -: -'?-:- . ',: " •.. -:-0,'.1'2:
NAD+ NADH + H+ 2 -0,32
NAI?P.-fJ.:-~ ;):.-,_-:.. · :-: : · ·.:: ·':~PH+· H°f :.: ', ,'. '·· _:. _:_. :.. ';,::2 ', ·: ·:. ·. ·. . : -6~~~ ·.·:~,:...
Lipoato (oxidado) Lipoato(reducido) 2 -0,29
Gluii.tion(oxidado)·. -~ · '..: .·: ·.: Gh...¥6!],(red-qqdo) ··_:2. · --o,23 .·~:·~·:: .'·~-
FAD FADH2 2 -0,22
Acetii},dehfqo Etan~~· ·.: . . 2 -0,20
Piruvato Lactate ·2 -0,19
F~o:.:;.:·:.:·-·:· :···Sucellia~o<;.··_:·-:;: .... .:·· :·.z.:.::· .. ·.:· :+Q,03
Citocromob (+3) Citocromob ( +2) . 1 +0,07
Deshldr6~rb~t~ · -: ~: · · __: -.~ -·:...1\scq~ato.::- . .::..:· ~----- :__ ".;:.~---- .:.2_. .;__·.:.:. .:.: ·.;...:±-.O,.mi".
Ubiquinona(oxidada) Ubiquinona(reducida). 2 +0,10
Citocio~o;(+3)·. .- · .. · .._-·.. cifocro~oc(+2)·. ·.. .: . -."+o,2i r ~:·. ·.
Fe(+3). Fe(+2) 1 . -!-0,77
• 11i02+2H+.,, __ .·. . ·_·B20.""·: .. _ ..... ·2 ... _,... · .+:o;·s2
Nata: E& es el potencial de: oxidaci6n-reduc:ci6n:estmdar (pH 7, 25 °C) y n es el nfunero de electrones tr3nsf'e-
ridos. Ea se: refiere a Iasemirreacci6n escrita come Oxiclante + e:- --7 reductor
I·
I
:I 1
.. ··-·- ---------
1:
rI
I
It.
·~·
 2iii
530 adoptadas p9r los bioquimicos establecen que la concentracion de iones hidr6geno
iii

·. c:Ap_fn..!L0.1.8 · Eosfon1ad6n oxidativa
..
••
es 10-7 M (pH 7) en vez de 1 M (pH 0). Esta diferencia se indica rnedianteel
superindice prima de E&. Recordemos que la prima en 6.G0' hace referencia al incre-
mento de energfa libre estandar a pH 7.
El incremento de energia Iibre estandar 6.G°' estarelacionado con el incremento
del potencial de teducci6n ti.Eb mediante la expresi6n

.
·

ilG01 =-nFilEo
,.
....
donde n es el mimero de electrones transferidos, F es una constante de.proporcio-
nalidad Ilarnadaconsianie <le Fa~~y [96,48 kJ mo1-1 v-1 (23,06kcal mo1-1 v-1)],
ti.Ea se expresa en voltios y 6.G°' en kilojulios o kilocalorias por mol.
A partir de los potenciales de ieducci6n de los reactivos, se puede calcular de
form.a inmediata el incremento de energia Iibre en una reacci6n de oxidaci6n-
reducci6n. Por 'ejernplo, consideremos la reducci6n del piruvato por el NADH
•
..
catalizada por la lactate deshidrogenasa. Recordemos que esta reaccion mantiene el
balance redox en la fermentacion del acido lactico (vease la Figura 16.11)

+ NADH + H+ + NAD+

.
Piruvato ~ lactato (A)

,- -El,potencial de.reduccion, o sernirreaccion, del par NAD+:NADH es de -0,32 V,

'mientras que el.del parpiruvato:lactato es de -0, 19 V. Por convencion, los poten-

".f
ciales de reduccion (tal y como sereflejan en la Tabla 18.1)hacen referencia a las
.reacciones parciales expresadas como reducciones: oxidante-i- e----;. reductor. Por
tanto,

+ 2 H+ + 2 e- --7
Piruvato lactato E0 = -0,19V (B)
NAD+ + H+ + 2 «: --7 NADH Eb= -0,32V (C) t

·.~ -··· ···-· . ••••••• .r•

Para obtener la reaccion A;_ partir delas ;I"g<:<cioi:+e§ B y C,.debemn,<>.invert.ir.el.sen-:
tido de la rea~ci6i:i·c, de m.anera que el NADH figure a la izquierda de la flecha. Al
hacer esto, el signo ~e. Ea
debe canibiarse. .
"
I

•
~
+_ 2H~ +_2 «: --7. lactate.·
Piru.vato E[j = -0,19\'. (B)
NAQH ~ NAD+ + H+ t 2 «: Ea = +0,32 V (D)
~
En la reaccion B, la energia libre'se calcula teniendo en cuenta que n = 2. f
AG 0' = -2 x 96,48kJ mo1-1 v+ x -0,19V
= +36,7 kJ mol"? ( +8,8 kcal mol-1)
Analogamente, para la reacci6n D,

41¥;G 0' = --'2 X 96,48 kJ mol-1 V-'-1 X +0,32 V

= -61,8 kJ mol-1 (-14,8 kcal mol-1)
Por tanto, 13: energfa libre de lareacci6nA viene dada por

AG 0' = L.G 01(en Ia reaccion B) + L.G0' (erilareacci6nD)

= +36,7 kJ mol-1 + (-61,8 kJ mol-1)
= -25,1 kJ mol-1 (-6,0 kcal m.ol-1)

Una diferencia de potencial de 1,14 voltios entre el NADH y el oxfgeno

molecular impulsa.el transporte de electrones a traves de Ia cadena y
permite Ia formaci6n de un gradiente de protones
0potencial
La fuerza impulsora de la fosforilaci6n oxidativa es el de transferencia de
electrones del NAD Ho del FADH2 en comparaci6n con el del 02• zCuanta energfa
se libera durante la reduccion del 02 por el NADH? Hagamos el cilculo de AG0'
pm esta reacci6n .. Las sernirreacciones corresp:ind.i~tes son:

-c- -s . -. --..· ··-· ···":'·:- ·.--· .

 1/z 02 + 2 H+ + 2 « ~ H20 E[J = +0,82V ·.(A) ·-·}
531
NAD+ + H+ + 2 e----+ NADH E[J = -0,32V (B) 183 La" cadena respiratoria

La combinacion de las dos semirreacciones, como precede en la cadena de transpor-

te electronico, proporciona

(C)

La energfa libre estandar de == reacci6n sera;

b..G
0' = (-2 X 96,48kJ mol-1 v-1 X +0,82V)-
(-2 x 96,48 kJ mo1-1 v-1 x 0,32 V)
=· -i58,2 kJ mol-1 -61,9 kJ mo1-1
= -220,1 kJ mol-1 (-52,6k~mol-1)

Se desprende una considerable cantidad de energfa libre. Record~os que la b..G0'

para Ia hidrolisis delATP es ·-30,5 kJ mol-1 (-7,3 kcalmol-1). Laenergfalib~-
da se utiliza en primera instancia para generar un gradiente de protones que-sera
uti.fu.;;i.po tanto par~-1?- sfntesis de ATP como para el transporte de metabolitos a tra-
v~~-¥ia membra,n?:.;pntocondrial. .
·~:zCismo se pueg?.' cuantificar la energfa asociada a un gradiente de protones?
Recordem~ que ~l,.incremento de energfa.libre asociado al movimiento de una
su~bcia de un lado de la membrana, · donde su concentracion es c1, al otro lade,
doii.de su concentracion es c2, viene dado por:

AG= RT1n(c2/~1) !° ZFAV

donde Z es la carga .electrica de la sustmcia transportada y AV es el potencial a
---·-- ----.-- .. tra...P_s,.ck .lamembraoa; en-.voltios-(Secci6n-:.13;i1.- En-Ias.coadiciones -tfpiras ·de: .. '• r• • .-...- ........ - ,.__....; __ .....__.. __ ,, '-•··--.-·-·" __...'='"'

la: membrana interna' rnitocondrial, el pH extemo es 1A unidades menor que el

interno (lo que corresponde a un valor In(c2! c1) de 1, 4] y el potencial de merobrana
es de 0, 14 V, positivo en el exterior. Como para los protones Z = + 1, el incremento
"de energia libre es (8,32 X 10-3 kJ mol-1 K~1;X 310 K X 1,4) + (+1 X 96,48 kJ
mol-1 v-1 X 0,14 V) = 21,8 kJ mol-1 (5,2.kcal mol-1). Por tanto, cada proton
transportado desde la matriz al lado citoplasmitico representa una energfa libre de
21,8 kJ mo1-1.

~Hk3} La cadena respiratoria esta formada par cuatro

complejos: tres bombas de protones y una conexion
ffsica con el cido deI acido dtr~~
Los electrones se transfieren del NADH al 02 a traves de una cadena de tres
grandee complejos proteicos llamados NADH-Q oxulorieductasa, Q-citocromo ·-·
v ..

c oxidorteductasa y citocromo c oxida.sa.(Figura 18.6yTabla 18.2). Elj[.ujo de elec- .'.

trones entre estos complejos transmembumales induce el transporte de ptototies a. tra.- ,;;;~;i}~·
ves de la membrana interna. mitocondria.L Un cuarto gran complejo proteico, . !i'

llamado succinato-Q reductasa, contiene la succinato deshidrcgenasa que genera

FADH2 en el ciclo del acido citrico. Los electrones del FADH2 entran en la
cadena de transporte electronico en la Q-citocromo oxidorreductasa. La succina-
to-Q, reductasa, en contraste con las otros complejos, no bombea prctones.
NADH-Qoxidorrecluctasa, succinato~Qreductasa, Q-citocromo c oxidorreduc-
tasa y citocromo c oxidasa tambifo reciben el nombre de Comp lejos I, II, III y IV,
respectivamente. Los complejos I, II y III parecen estar asociados en un complejo
molecular conocido como vespirasoma. Como se ha visto antes, tales complejos ,
supramoleculares facilitan la transferencia rapida del sustrato y evitan la Iibera-
ci6n de los intermediarios de las reacciones.' . . .
 'I
~
532
0
CAPITuLO 18 -Fosfon1~d0n oxidativa
~
~
Succinato deshidrogenasa

,....., 250 Cornplejo e- ~

I..
0
E
NADH~Q
reductasa Complejo dtocrorno c
"
g ·· reductasa ~
N
0
iU Crtocromo c ~
er
~ -2100
ro
~
~ ~
g
"
(!)

ro Complejo
tiO
:v citocromo c ll
c . oxidasa
UJ -2150 ~
Figura J 8.6 Coinponentes de Ia cadena de
transports e!ectr6nico. Los e!ectrones fluyen
par un gradiente de energfa desde el NADH al '-
~- El f!ujo se cata!iza par cuatro complejos ~
proteicos, El hierro es un componente de las
comp!ejos ~ !II, IV y de! citocromo c. [Tornado · ~
de D. Sadava y col, Life, s- Eel (Sinauer, 2008), -2200
@
p. 150.]
~
~
Los electr~nes.se .trasladan de un cornplejo hasta el siguiente OJ~diant~ dos
transportadores cle-..r-trccicos-espccialcs. El-primero es-el coeta'ffM: Q ( QJ; conocido .8
tambien coma ubiquinpna porque es una quuuma. ubicua en las sistemas biologicos, ~
La ubiquinona es una quinona hidrofobica que difunde con gran rapidez en el inte-
rior de la membrana interna mitocondrial.· Los electrones se transfieren desde la
8
NADH-Q oxidorreductasa hacia la Q-citocromo c:: oxidorreductasa, el 'segundo 8
cornplejo dela cadena, mediante la forma reducida de Q Los electrones dcl FADH2
generados por el ciclo del acido cftrico se -transfieren prirnero a ·la ubiquinona- y
e
posteriormente al .complej o Qj-citocromo c oxidorreductasa. · @

•
La coenzima Q es un derivado de la quinona con una larga cola consistente en ~
unidades isoprenoides de cinco carbonos que indican su caracter hidrof6bico. El
mirnero de unidades de isopreno en la cola depende de la especie. En mamiferos, la
forma mas cormin contiene 10 unidades de isopreno (coenzima Qi0). Para simplifi- f
t

•
Tabla 18.2 Componentes de la cadena de transporte de electrones rnitocondrial- ~
Oxidante o reductor

Complejo enzimatico Masa(kDa) Subunidades Grupo prostetico Matriz Membrana interna Citoplasma 1
NADH-Qoxidarreductasa >900 46 Thill NADH Q f
Suc~2;to-Qreducta:;a 140 4·
Fe~S
. FAD Succinato Q
-
. · -Fe-s· ", · -
Q-citocramo c axidorreductasa 250 11 Hemol>II Q Citocromoc
Hema br.
Hemo cj
. Fe-S ~
Citocramo c axidasa 160 13 . : ·Hemad." Citocrom~· c ·

..... . ·. . ... .
Fuentes:].W.DePierreyL. Emster.Annu.Rev. Biochem. 46: 201-262, 1977;Y.Hatefi.AnnuRev:Biochem. 54:'1015-1069,1985;
y J.E. Walker.Q. Rev. Biophys. 25: 253-324,1992. · ·

L
I
 533
3 183 La cadena respiratoria

ion radkaI semiqumolila

(Q=)

. · ·. '. Forma oxidada de! coenzima Q Intennediario semiquinona Forma redudda de! coenzima Q
'3"··~:~~ · (Q, ubiquinona) (QH-) (QHz, ublqulnol)
, ~~-.;~~:ti::;;!
Figura l 8.7 Estados de oxidadon de las
:;f<l.'.~ quinonas, La redua:i6n de la ubiquinona (0)
;:r/~rnitiremos el subindice de la abreviatura, ya que todas las variedades funcio- a ubiquinol(QH:z) se realize a traves de un
intermediario semiquinona (QH·).
nTui: de manera idenii.ca. Las quinonas pueden existir en tres estados de oxidacion,
·

Eh ·el estado totalmente oxi.dado (Q), la coenzima Q presenta dos grupos ceto
(Figura 18.7). La adicion de un proton y un electron origins la form.a semiquinona
(QH·). La forma serniquinona puede perder un proton para dar lugar al radical
anionico de la semiquinona (Q=-). Laadicion dew segundo proton y electron da
-- · ·· ·· ·- lugar al ubiquinol (QH2); la forms totalmente=reducida deIa -coenzima Q.. quc::·
retiene SUS protones con mas intensidad. ·Por tanto, en las quinonas, las reacciones de
. transferencia de electrones estan acopladas a: Ia uniOn y-libe!faci6n de protones, una
prcipiedad clave a la hara de transportar protones a traves de la membrana, Debido
a quela ubiquinona es soluble enla membrana, se cree queen la membrana interna ·
mitocondrial existe una reserva de Qy QH2, llamada -reserila Q.. ·· · ·
· En contraste con Q, el segundo.transportador electronico especial es una protei- ·
na. El citocromo c es una protefna pequeil.a y. soluble; que traslada los electrones
desde I~ Q-citocromo c oxidorreductasa a la citocromo c oxidasa, el componente
final de la cadena que caraliza la reducci6n del 02.

Los electrones de alto potencial de! NADH entran 'en la cadena

respiratoria por la NADH-Q oxidorreductasa : ~<!"t
Los electrones d.el NADH entran en la cadena por la NADH-Q oxidorreducw.sa ·
(tambien llamada Complejo I y NWH d.eshid:r.ogenasa.), un enzima enorme. ~\~·~.
(>900 kDa) fonnada por aproximadamente unas 46 cadenas polipeptidicas. Esta· ~':'f ·.~·.·y
bomba de protones, como la delas otras dos de la cadena respiratoria, esta coclilica- ...
da por genes que residen enIarnitocondria yen cl micleo. La NADH-Q.o:xidorre-
.,..
-!!: .•
": e , ,:
ductasa tiene forma de L, con un braze horizontal anclado en la membrana y un
braze vertical que se proyecta hacia la matriz, ·
La reaccion catalizada par este enzima parece ser

NADH ~ Q + 5 H~atriz --7 NAD+ + QHz + 4 Ht.taplasrna

La etapa iuicial consists en la union del N.1\D H y la transferencia de sus dos elec-
trones de alto potencial a lajlavma mononucle6tiJ.o (FlvfN), que es el grupo proste-
tico de este complejo, para dar Ingar a la form.a reducida FMNH2 (Figura 18.8).- El
, aceptor de electrones del FMN, el anillo de isoaloxacina, es identico al del FAD.
Los electrones se transfieren-posteriormente desde el F1v1NH2 a una serie de ·
agtupacumes hierro-a.zufre, el segundo tipo de· grupo prostetico de la NADH-Q ,.
oxidorreductasa. Las agrupaciones de Fe-Sen las proteinas hierro-azujre (tambien

. .. ··- ·--- --------

 534
CAPfTULO18 Fosforilacion oxidativa

:::xx):): ::xx;Gt: I
CH2
'_e--+~--=i;+~

RI ~

Flavina mononudea°tido (reduddo)

H--+--!JH (FMNH:z) .

H---+--,OH.

H OH

CH20P032-
Figura 18.8 Estados de oxidacidn de las Flavina mcnonucleotido (oxidado)
flavinas. (FMN}

llamadas protefnas con hierro no hemo) desempefian un papel critico et: una amplia
. gama de reacciones .de reducci6n .en los sistemas biologicos. Se c~:mocen varios tipos
· ::de-.agrupaciones.Fe-S'(F~a 18:9). En el tipo mas sencillo, un tinico ion de hierro
.. , esta coordinado de form.a -tetraedrica a los grupos suliliidrilo de cuatro residuos de
cisteina de la proteina. Un segundo tipo, representado como 2Fe-;2S, contiene dos
iones de hierro, dos sulfuros inorganicos y, generalmente; cuatro residues de cistci-
na, Un tercer tipo, · denominado 4Fe-4S, contiene cuatro iones de hierro, cuatro
sulfuros inorganicos y cuatro residuos de cisteina, La NADH-Qoxiaorreductasa
contiene tanto agrupaciones 2Fe-2S coma 4Fe-4S. Los iones hierro de estos com-
plejos Fe-S alternan entre los estados Fe2+ (reducido)' y Fe3+ (oxidado ). A diferen~
cia de las quinonas y flavinas, fas agrupaciones hierro-azufre suelen participar en las
.. .... . ··.:.:.·.--.......... .
_ _, .. -reacciones deoxidacion-reduccion sin: aceptar o liberar protones, · · · - · - ·· •
Todas las reacciones redox tienen lugar en el fragmento extramembranal 'de la
NADH-Q oxidorreductasa. Aunque los detalles de la transferencia electr6nica
a traves de este complejo contimian siendo objeto de investigaci6n, esta claro que el
NADH se une a un lugar del dominio extramembranal, El NADH transfiere sus
dos electrones al ~- Estos electrones fluyen a traves de una serie de centres
hierrc-azufrehasta el coenzima Q El jlujo de dos electrones desde el NADH al coen-
zima Q a traves de la NADH-Q oxulorreductasa produce el bombeo de cuairo iones
hidr6geno hacia el exterior de la. matriz de la"mitocondria. Al aceptar dos electrones,
Q captura dos pioiones de la matriz cuando se reduce a QH2 (Figura 18.10) El QHz
abandona el enzima por el interior hidrof6bico de la membrana ..
Es importante indicar que el ciclo del acido citrico no es la fuente iinica del
NADH mitoc~dgal. Como veremos en el Capitulo 22, la degradaci6n de acidos

(A) (B)

Figura 18.9 Agrupaciones hierro-azufre, (A) Un unico ion de hierro se une a cuatro residuos de
dstefna: (B) Agrupaci6n 2Fe-2S con las ion es hierro conectados rnediante iones su!ft.iro. ·(C) Agrupadon
4Fe-4S. Cada uria ·de estas agrupaciones puede Jlevar a cabo reacdones de oxidac:i6n-reducd6n:
 .- ' - :
grasos, que tarnbien tiene lugar en la m.itocondria, es otra fuente 4H+
fundamental de NADH para la cadena de transporte electr6ni- .·. '···
Espacio
co. Ademas, el NADH generado en el citoplasma puede ser Reserva Q intermembranal
transportado a la mitocondria para su utilizaci6n par la cadena
de transporte de electrones (Secci6n 18.5). ·

El ubiquinol es el punto de entrada para

las electrones procedentes del FADH2 de NADH---
Matriz
!as flavoprotefnas
El F ADH2 entra en. la cadena de transporte electr6nico en su
segundo complejo proteico. Recordemos que el FADH2 se
genera en el ciclo del acido cftrico, en la oxidacion del succinato
a fumarato por la succinato desbidrogenasa (Secci6n 17.2). Este
enzima del ciclo del acido citrico forma parte del complejo succi- Figura 18.1 O Reacciones de transferencia acopladas electron-
nato-Q reductasa ( Complejo II), un~ protefna integral de la proton a traves de la NADH-Q oxidorreductasa.. Los electrones -
membrana interna rnitocondrial. El FADH2 no abandona el . iluyen en el Comp!ejo I desde el.NADH a traves de! FMN y una serie de
agrupaciones de hierro-azufre hasta la ublqulnona El flujo electronlco
complejo. En vez de ello, sus electrones setransfierenalos cen-
(flechas rojas) produce.el bombeo de cuatro protones y la toma de dos
tros Fe-Sy de alli finalmente a Qparaformar QH2; que despues protones de la matrizmitocondrial [Basado en U. Brandt y col, FEBS
trab.~fi~re
·.~ · .. ·{ .-
·rapidamerift
~\1"!:·t1:
los electrones
.
incorporandose a la cade- . Letters 545: 9-17, 2003, Fig.2]
ri~_,g~;p:ansporte de ~~~drones. El complejo succinato-Qreduc-
~~·:'a diferencia de Ia NADH-Q oxidorreductasa, no bombea
. protones' desde un .lado de fa membrana al otro. Conse-
cu,E;ntemente, se forma rnenos ATP a partir de la oxid~ci6n del
F~H2 que a partir del NADR . .
Otros dos enzim.as que veremos mas adelante, la_glicerol fosfato deshidrogenasa
(p. 551) y la acil-CoA df!Shidrogenasa de acidos grasos (Secci6n.22.2), transfieren de
forma similar sus electrones de alto potencial desde el FADH2 a Qpara formar
· .i.. ' ... · · ubiquinol (QH2), Ia forma reducida-dela:•ubiquino~:·Estosc.;zfmasoxidan res pee-· ·'
tivamente glicerol y grasas, suministrando electrones para la fosforilaci6n oxi.dativa.
Estos enzi.mas tampoco born.bean protones. .

. Los electrones fluyen de~de el ubiquinol al citocro~o ca traves de la

Q-citocrorno c oxidorreductasa · ·
.'.Gual es el destino del ubiquinol generadci por las. cornplejos I y IT1 Los electrones
del QH2 pasan al citocromo c mediante la segi.mda de las tres bombas de la cadena
respiratoria, la Q-citocromo c oxidorreducta:sa(tambien conocida como C~plejo III
ycomo 'citocromo reductasa). La funci.6n de la Qj-citocromo c oxidorreductasa es
catalizar la transferencia de electrones desde QH2 al ciiocrcmd c (Cit c) oxidado, una
'proteina soluble en agua, al tiempo que bombea protones hacia el exterior de la
matriz rnitocondrial. El flujo de un par de electrones a~v,~ de este complejo pro-
duce el transporte neto efectivo de 2 n+ al lado citoplasmatico, la rnitad del rendi-
zniento obtenido con la NADH-Qreductasa debido a una menor fuerza de empuje
termodinamico.
(

QH2 + 2 Cit C x + 2 Ht,atriz

0 -7 Q + 2 Cit Cred + 4 H~oplasma
La Qcitocromo c oxidorreductasa contiene dos tipos de citocromos. llamados by c1
(Figura 18.11). Un citocromo es una protefna. iransportadoia: de electrones que contie-
ne un grupo prostetico hemo. Durante el transporte de electrones, el ion bierro de un
citocromo alteroa entre un estado reducido ferro so ( + 2) y un estado oxidado ferrico
( + 3). Las dos subunidades de citocromo de la Q-citocromo c oxidorreductasa con-
tienen un total de tres hemos: dos hemos Iocalizados en el citocromo b, denornina-
dos heme bL (L :inc;Iica baja afinidad) y hemo ha (H indica alta afini.dad), y ungropo
heme localizado en el citocromo c1. El grope prostetico del hemo de los citocromos
b, c1 y c es la ferro-protoporfirina IX, el rnismo hemo presente en la mioglobina yen
la hem.oglobina (Secci6n '7.1). :Estos hemes idfoticos tienen diferentes afinidades
electronicas ·porque estan en diferentes entombs polipeptfdicos. Par eje~plo, ·el

535
 536
CAPfrl.i-LO .Js.. Fosforilacion oxidativa Centro hlerro-azufre de Rieske

~ Figura 18.11 Estructura de la

Q-citocromo c oxidorreductasa (dtocromo
be,). Este enzima es un hornodirnero con
J 1 cadenas.polipeptfdicas distintas. Obseivese
. que las grupos prosteticos principa!es, tres
. hemos y una agrupaci6n 2Fe-2S, estan
!ocalizados a bien cerca de! extrema
dtoplasrnatico de! comp!ejo contiguo al espacio
intermembranal (arriba) o en la region insertada
en la membrane (helices a. representadas por
cilindros). Estan bien posicionados para mediar
Hemob8 ·
en las reacciones de transferencia electr6nica
entre las quinonas de la membrana y el
- citodomo c de! es~ddo·i11tf1111embianaL
[tornado de 1 BCCpdb.]

hemo ~ que ~ locafuado en una agrupacion de helices cerca de la cara citoplas-

matica de la membrana, tiene menor afinidad por un electron que el hemo bH que
. esta cerca del lado de la matriz. La Q-citocromo c oxidorreductasa se conoce tam.-
bien coma citocrorno bc1 debido a sus grupos citocromos.
Ademas de los grupos hemo, el enzima tambien contiene una proteina hierro-
azufre con un centro 2Fe-2S. Este centro, conocido como elcencro de Rieske, es
atipico debido a que uno de los iones de hierro esta coordinado con dos residues de
histidina en vez de. con dos residues de cisteina, Este tipo de coordinacion estabiliza
el centre en 'su<?"fii~ reducida aumentando su potencial de reduccion, por lo que
puede aceptar facilmente _electrones del QH2-

El ciclo Q canalize las ·e!ectrones desde. un transportador de ·

dos electrones a uno de un electron y bombea protones
QH2 pasa dos electron.es a la Q-citocromo c oxidorreductasa, pero el aceptor de
electrones en este complejo, el citocromo c, solo puede aceptar un electron. zC6mo ·
se llevara a cabo la transferencia desde el ubiquinol, transportador de dos electro-
ries, al citocromo c, transportador de un electron? El mecanismo que acopla la
transferencia de electrones desde Qhasta el citocromo c con el iransporte de proto-
nes a traves de la membrana se denomina ciclo Q (Figura 18.12). Dos moleculas de
QH2 se unen de forma consecutiva al cornplejo, cediendo cada una dos electrones y
dos H+. Estos pro tones .se liberan en el lado citop lasm.5.tico de la membrana. La pri-
m era QH2 para salir de la reserva Q se ~e al primer centro de union Q (~). y sus
dos electrones Viajan a traves del cornplejo a destinos diferentes, Uri electron fluye
prim.ero a la agrupacion 2Fe-2S del centre de Rieske; despues al citocromo c1, y
finalmente a una molecula de citocromo c oxidado convirtiendolo en su forma redu-
 Primera rnltad del ciclo Q segunda mitad de! ddo Q 537
18.3 La cadena respiratoria

Figura 18.. 12 Cicio Q. El cido Q tiene lugar en el Complejo lll, que se representa aquf en forrna
esquematica En la primera parte de! ddo, dos electrones de una QH2 unida se transfieren, uno al
citocromo c y el otro a una Q unida en un segundo centre de union para former el radical ani6nico
semiquinooa Q·-. la Q reden formada s_e disoda y entonces entra la reserva Q. En la segunda rnitad
de! ddo, un segundo QH2 tarnbiencede sus eledrones al Cornplejo I!, uno a una segunda rnolecnla de
citocromo c y el otro para redodr el Q· - a QH2• Esta segunda transferenda eledrorfca produce la torna
de dos protones de la rnatriz. La via de transferenc:ia electr6nica se muestra en rojo,
..;~~-
·t~~-
: . -. . ·.

cid~. La molecula di-8.tocromo c ~educida puede difundir libremente y" alejarse del
. ¢nZiina para contin~por la cadena respiratoria, ·
:- · ·El segundo electron atraviesa los dos grupos hemo del citocromo b hasta una
ubiquinona oxidada unida a un segundo centre de unlan· Q ( Q), Esta molecula de
quinona (Q) en
cl segundo centre de muon se reduce a un inion radical semiquino-
. na (Q:-) P.Q~ media del electron de la prirnera molecule de QHz. El.Q totalmente
... ..;~---0E.d.ado .abandona.el--p:cimer-centra-Q;-y-qu.~a-clim:a-1..ibre·pa..-a entrar de nuevo a 1~·
reserva Q,
Una segunda molecula de QH2 se une al centro 0o de la Q-citocromo c oxido-
rreductasa y reacciona.de la misrna maneraque el primero- Uno de las electrones se
transfiere al citacramo c. EI segundo electron pasa a tr?-v~ de dos grupos hemo d~l
citocromo b para reducir parcialmentda ubiqtiinona unida en el centre de union' Q.
Tras la union del electron de la segunda molecula de QH2, 'este anion radical quino-
na incorpora dos protones del l~do d~ la·m~~ ·P~ fo~ar. QH2• La captura de
esios dos ptototies de la matriZ c®tri~ye a la.formacii5n del grad~te de protones. En
restimen, · cuatro protones se Iib~ran en el lado citoplasmatico, y dos protones se
captiiran de la matriz mitacondrial. . · .

2 QH2 + Q + 2 Cit cox +2.H~-? ·2 Q + QH2 +,"Cl:ft;:ed + 4 H'tttoplasma

~ ~-}:-
En un ciclo Q, dos molecules de QH2 se oxidan para formar dos moleculas de
Q y, posteriormente, una molecula de Q se reduce QH2. El problem.a que se a:
resuelve aqui mediante el ciclo Q es la canalizaci6n de modo eficiente delos electro-
nes desde un transportadar de dos electrones (QH2) a un transportador de un elec-
tron (citocromo c). El componente citocramo b de la reductasa es en esencia un .i:f
mecanismo de reciclado que permite que los dos electrones de QH2 se utilicen de·
modo eficiente,

La citocromo c oxidasa cataliza la reducci6n del o:xfgeno molecular a

agua
El Ultimo de.las tres ensamblajes bambeador~ de pratanes de la cad~a transpor-
tadora de electrones es la ciiocromo c oxidasa ( Complejo IV). ia citocromo c oxidasa
cataliza la transferencia de electrones desde la forma reducida del citocromo c al
aceptor final, el oxigeno molecular. . .

4 Cit Creel + 8 H~ + 02 -? 4 Cit C~x + 2 H20. + 4 H'ttoplasma

538
CAPi1uLO.J8. Fosforilaci6n oxidativa

Hemoa3
Hemoa

~HO

, ·ctf?is
Fe ;;His

Tyr

·);:· Figura 18.13 Estructura de Ia citocromo c oxidasa, El enzima consta de 13 cadenas

polipeptidicaS. Obs.eIVeseque la mayor parte def complejo, asf como Ios dos grupos prosteticos
principales (hemo. a y hemo a.,-Cu8) estan insertados en la membrana (helices cr representadas como
cilindros·verticales). El hemo a.,-Cu8 es el centro de reducci6n de! oxigeno a agua. El grupo prostetico
Cup/OJA esta.localizado cerca del espacio internernbranalpara ac:eptar mejor los e[ectrones de[
citocromo c, CO(bb} es un grupo .GarhonilD \fe! esqueleto peptidlco, [lornedo de 20CCpdb.]
. . .

La necesidad de oxfgeno para esta reacci6n es _lo que hace "aerobicos" a los orga-
nismos aerobicos. Obtener oxigeno para esta reaccion es la raz6n por la que las
seres humanos deben respirar. Cuatro electrones se dirigen al 02 para reducirlo
completamente a H20, y, a la vez, los protones se bombean desde la rnatriz al lado
citoplasmatico de la membrana intema mitocondrial. Esta reacci6n es muy favora-
. ble termodinamicamente, A partir de Ios potenciales de reducci6n de la Tabla 18 .1,
podemos calcular el incremento de energfa libre estandar para esta reaccion, que
sera de b..G"' = -231,8 kJ mol"! (-55,4 kcal mol-1). La mayor cantidad posible
de esta energfa ligre debe retenerse en form.a de gradiente de protones para la pos-
terior sfntes'is ~A:~P.
La citocromo c oxidasa bovina se conoce bastante bien a nivel estructural
(Figura 18.13) Esta formada por 13 subunidades, 3 de las cuales Oas denominadas
subunidadesI, II y III) estan codificadas por el propio genoma mitocondrial. La

J.
citocromo c oxidasa contiene dos grupos hemo de tipo A y tres iones de cobre dis-

l)
Cua~ tribuidos en dos centres de cobre, llamados A y B. Uno de los centres, Cuj.J~uh
contiene dos iones de cobre conectados mediante dos residues de histidina: Este
His centre acepta en primera instancia los electrones del citocromo c reducido. El otro
N centre de cobre, CuB, esta coordinado con tres residues de histidina, uno de los
cuales esta mod.ifi.cado poi la formaci6n de un enlace covalente con Un. residuo de
tirosina, Los centres de cobre alternan entre la form.a cu+ reducido (cuproso) y la
'H~ forma Cu2+ oxidado (ctiprico) segtin aceptan o donan electrones, .
Hay dos moleculas hemo de tipo A, denorninadas hemo a y hemo a3 en la cito-
cromo oxidasa, El grupo hemo de tipo A se diferencia de los griipos hemo de los
cifocromos c y c1 en tres aspectos: (1) un grupo formilo reemplaza a un grupo meti-
lo,. (2) una cadena.hidrocarbonada de C17, sustituye a uno de. las grupos vinilo, y
(3) el b:emo no esta unido covalentemente a la proteins, ·

- ----
 .' - -.5·39
183 La cadena r:espiratoria
3

- ,

6
HemoA

El hem.a a y el a3 tienen distintas potenciales redox porque se encuentran localiza-

dos en distint6s entornos dentro de la citacroino c oxidasa, Un electron fluye desde
a3
. el citacromo c al Cu A/Cu A, al hemo a: al hemo al Cu.B, y finalmente al oxigeno .
. J.,: El hema a3 y el CuB estan tatalmente adyacentes. En conjunto, el hemo a3 y CuB
i'.':
""".;{\
forman el centre activa donde el 02 se reduce a·H20.
Cuatra moleculas de citocramo c se unen cansecutivamente al enzima y trans-
_

. ~-·' fieren un electron para reducir una malecula de O_i a H2<;) (Figura 18.14 ).

~: .. 1. Dos molecules de dtocromo ctransfieren secuendalmente . 2 E Cu8 y el Fe en el hemo a3

. electrones para redudr Cu8 y el heme a3• reducidos seunen al 02, que
forma un puente de peroxide,
2 Citocrqmoc

~
.,
• @ ~
o, •
·1~0'®).

_ 2 Citocromoc _

;;.: -··

<
Figura 18.14 Mecanismo de Ia citocrorno c
oxldasa, E cido comienza y termina con todos
'los grupos prosteticos'en su forrna oxidada
(rnostrada en azuQ. Las forrnas reduddas se
presentan en rojo. CUatr~ molecules de
c:itocromo c donan cuatro electrones, que
permltiendo la union y ruptura de una molecule
4. la adid6n de otros dos - 3. la adic16n de otros dos de 02 hacen posible el importar cuatro H+
. protones produce [a eledrones v otrosdos de la rnatriz para former dos rnoleculas de H20,
liberaci6n de agua protones rompe el puente que son fiberadas desde el enzima para
de peroxide. regenerar el estado inicial
540 1. Los electrones de dos moleculas de citocromo c reducido fluyen par la vfa de
CAPfTuLO 18 Fosforilad6n oxidativa transporte electr6nico par la citocromo c oxidasa, uno parando en el CuB y el otro
en el heme a3. Con. ambos centres en estado reducido, juntos pueden unir una
molecula de oxigeno.

2. Cuando se une el oxfgeno molecular, se abstrae un electron de cada uno de los

iones cercanos en el centre active para formar un. puente peroxide ( oz2-)
entre ellos
(Figura 18.15). -
3. Dos rnoleculas mas de citocromo c se unen y liberan electrones que se dirigen al
centro activo. La adicidn de un electron.' asi como de un H+ a cada itomo.de- ~xig~-
no reduce las dos conjuntos de ion-oxigeno a CuB2+ -OH y Fe3+ -OH. ~
4. La reacci6n con otros dos iones H+ permite la liberacion de dos moleculas de ~

---
H20 y restaura el enzima a su form.a inicial, completamente oxidado.
~
4 Cit Cred + 4 Htiatriz + 02 -7 4 Cit C0x + 2 H20 ~

Los cua.tro protones de esta. teaccuiti proceden exclusivamente de la matriz -, Par tanto,
el consume de estos cuatro protones contribuye directamente al gradiente de pro-
tones. Recordemos que cada proton aporta 21,8 kJ mol-1 (5,2 kcal mol-1). a la

--
·~
Figura 18.15 Puente de peroxide. El oxfgeno -energfa libre asociada al gradiente de protones, de manera que estos cuatro proto-

unido al heme a3 se reduce a peroxide por la
presencia de Cu8•
..-
nes aportan 87,2kJ mol-1 (20,8 kcalmol-1), unacantidad sustancialmentemenor
que la energia libre disponible a partir de la reduccion del oxigeno a agua. zCuaJ. es @
el destino de esta energfa perdida? Sorprendentemente, la citocromo G oxulasa usa
esta energia para bombear cuatro protones adiciona.lesdesde el Lado de Ia matriz liacia ~
el la.do citopla.smii.ticode la membrana, en el transcurso de cada ciclo de reaccum, con

---
IO queen total ocho protones son extraulos de la matriz (Figura 18.16). Los detalles
sabre corno se transportan. estos protones a traves de la proteina todavfa se estan
investigando. Sin embargo, dos factores contribuyen al mecanismo: En primer
Cit Creduddo Cit Coxidado
lugar ,..£?.x,i:ste una tedc"ncia: a mantener la ueutralidad de cargas en ini:edo-r:·

-•.
el de la~
4 proteinas. Por tanto, Iaun.i6n de un electron a algiin Iugar del interior de la protei-.
na favorece la union de. un proton en algUn. lugar cercano. En segundo Ingar,
durante el transcurso del ciclo de reacciones se producen carnbios conformaciona-
•
les, especialmente en tomo al centre hemo arCuB. Presumiblemente, ~ · una
conformacion los protones pueden entrar en la proteina exclusivamente del Iado de 4!
la matriz, mientras que en la o"tra conformaci6n, pueden salir exdusivamente al,
lado citoplasrnatico. Asi pues, el proceso general catalizado por la citocromo c
oxidasa es:

.•
4!
4 Cit Cred + 8 H~triz + 02 --+ 4 Cit C0x + 2 H20 + 4 Bttopl~
La Figura 18.1} resume el flujo de electrcnes desde el NADH y el °FADH2.-a
4W 4H+
Protones Proton es.
traves de la c3.Cifu;.i?Etspiratoria.Esta serie de reacciones exergonicas esta acoplada
bornbeados qufrnicos al bombeo de protones desde la matriz. Como se vera en breve, la energfa inherente ·~
al gradiente de protones se usari para sintetizar ATP.
•
•
Figura 18.16 Transporte de protones porla
citocromo c oxidasa. Cuatro protones se
incorporan de! !ado de la matriz para reducir Los derivados toxicos de! oxfgeno molecular coma el radical
una molecule de 02 a dos molecules de H2D. ·
Estes protones se conocen como "protones super6xido se neutralizan mediante enzimas protectores 4

\'
qufmicos" porque participan en una reacci6n
con el 02 daramente definida Cuatro protones
Como ya hemos indicado anteriormente, el oxigeno molecular es un aceptor final de
.
f
adicionales "bombeados" se conducen al electrones ideal, porque su elevada afinidad hacia los electrones proporcionauna

exterior de la rnatriz y se liberan en el Iado
dtoplasrnatico durante la reacdon, Los protones
bombeados duplican la eficiencia def ·
almacenamiento de energfa libre en forma de
un gradiente de protones eneste paso final
de la cadena transportadora de electrones.
I:-. I
gran fuerza impulsora termodinfunica. Sin embargo, la reduccion del 02 no esta
exenta de riesgos. La transferencia de cuatro electrones ·da lugar a productos ino-
cuos (dos moleculas de H20), pero la reduccion parcial origina compuestos peligro-
sos. Concretamente, la transferencia de un iinico electron al 02• genera el anion
super6xido y la transferencia de dos electrones origina.per6xido.

Anion Per6xido
super6xido
 . 54·1
183 la Cadena respiratoria
Espacio
transmemb~ra~n~al!_..~"'"""~@i~"""""'~

Figura 1·8.17 La cadena transportadora de

electrones. Los electrones de alta energfa en·
forma de NADH y FADH2 se generan en el ddo
de! acido cftrico. Estos electrones fluyen a traves
de la cadena respiratoria, que impulsa el
bombeo de protones y produce la reducci6n
Acetil-CoA de! Oz•
.. :.

.. bos compuestos .son potencialmente d~ctivos. La estrategia para la

"'r~: \lcci6n segura del 02 eS clara.: el caiclizador no libera intermedi.a.rios paicialmenie ....;::.·
'~%J.Jcidos. La citocrorno c .oxidasa cumple este requisite fundamental reteniendo
· ftleffemente al 02 ~tre los iones Fey Cu. · · . ·
··:·, 0:1\.unque la citocromo c oxidasa y otras protefnas que reducen 02 son particular-
m~te eficientes para no Iiberar intermediaries, resulta inevitable que se produzcan
pequefias cantidades de anion super6xido y de peroxide de hidrogeno. El superoxi- ·.
do,· el peroxide de hidr6geno y otros productos que: ~~ pueden .generar a partir de
.. ellos, come el. 0 H ·,_ se.incluyen colectivamente bajo el t&:p:iinp especies react:ivas ~~ · ... ··-·· .· .....
oxfgeno (ROS, rea.ctiv~ oxigen species). Se piensa que el daiio oxidative causado por
las ROS esta implicado en el proceso de envejecimiento asf como en una serie ere-
ciente de enfermedades (Tabla 18.3). . : · - . . ' , . . -.
l,Que estrategias defensives adopta la celula pai;a evitar el d<µj.o oxidative prove- Dismmacion
cado par los' ROS? La mas importante es· el enzima superoxido dismuta.sa. Este Una reacdon en la que un (mico reactive se
eiu.:..rrna neutraliza los radicales super6xido catalizanda la conversion de dos de estos convierte en dos productos dislinto~.
radicales en peroxide de bidr6geno y oxfgeno molecular.
Super6xido

202:- + 2H+ ==== 02 + H202

dismutasa

Los eucarictas poseen dos form.as de este enzima, una variante que contiene man-
ganeso _1acalizada en Ias rnitocondrias una variante y
dependiente de ~wm.a.uca

Tabla 18.3 Condiciones patol6gicas y de otro tipo que- pueden implicar Iesiones par ·:i.·

radicales libres
Aterogenesis
-· :.
..... .
Enfi~
••···
bron,.,.;,;·
.·"i~
1;is-:.·..............
»: :
1
.. :.:·.:. ·. : .
Enfermedad de Parkinson
Di®:-?fia~~~~~~DUt:h~~: -, -·· -: .. - -. ,. £ '
Cancer cervical
Enf~ooad aI~h6liQ de! hfitdo
Di~etes. - .· . ·· - ..
F.illci'~~·~4;°t: f :.=-;- -~: ·::; ': :._.~~ -::\:. :>;· _,':-·: ·.: '': -:.:. ~-~.-:-:-_-: ·::·:· .. : .: . ··:~ _:.:c:.7:~~;:;~-
Sfudrome de Down
F:tbi:ophi.sii retrolental (conversi6~d~1~retma·en~a~ Ehros;:·eo_ i:ederinacidos·premaroro~)
.AJteraciones cerebrovasculares
Istfdei:Di;\;-fes16h:pori:ej:iedUsion · ·" : ·::· : :
Fuente: D. B. Marks,A. D. Marks y C.. M:. Smith, Basic Medical Biochemistry: A Clinical Approa.dt (Williams
& Wtl.lcins,1996), p. 331.

........ - ·--··--------
 c
542 cobre y zinc. Estas dos enzimas llevan a cabo la reacci6n de dismutaci6n mediante ~
mecanismos parecidos (Figura 18.18). La form.a oxidada del enzima se reduce por
·(ApfruLO 18. Fosforilaci6n oxidativa
el super6xi.do para fonnar oxigeno. La forma reducida del enzima, producida en
4
esta reaccion, reacciona con \m segundo ion super6xido originando peroxide, que ~
durante el transcursc de Iareaccion acepta dos protones y genera per6xido "de hidro-
ger10. .
El per6xido de hidr6geno formado por la superoxido dismutasa y por otros
•
4
enzimas es ~eutralizado por la caialasa, una protefna ubicua que contiene un grupo 4
hemo y que cataliza la disociaci6n del per6xido de hidr6geno en agua y oxfgeno
molecular. . 4
4
4
La super6xido dismutasa y la catalasa son extraordinariamente eficientes, llevando
a cabo sus reacciones a una velocidad igual o cercana a la velocidad de difusi6n
•
4
Figura 18.18 Mecanismo de Ia super6xido
dismutasa, la forrna oxidada de la superoxido (Secci6n 8.4). La glutati6n peroxidasa tambien desempefia un papel neutralizando 4
dismutasa (M~ reacciona con un ion
super6xido para former 02 y [a forma reducida
H202 (Secci6n 20 .5). Otras defensas celulares frente al daiio oxidative incluyen las
vitaminas antioxidantes, vitaminas E y C. Al ser lipofilica, la vitamina E es particu-
4
de! enzirna (M,ed). Posteriormente, la forma
redudda reacciona con un segundo superoxido
.. : larmente eficaz a la hcra-de evitar la. peroxidaci6n ·de lipidos en las membranas, 4
y dos protones para formar per6xido de Uno de los beneficios a largo plaza de realizar- ejercicio puede ser el incrementar la 4
hidr6geno y regenerar la forrna oxidada del cantidad de super6xido dismutasa en la celula, El elevado metabolismo aerobico duran-
enzima, te .el ejercicio causa que se generen mas ROS. En respuesta, la celula sintetiza m2s 4
enzimas protectores. El efecto neto' es de protecci6n, porque el incrernento en supenD:i-
do dismutasa protege mas efectivamente la celula durante los periodos de descanso,
4
A pesar del: hecho de que l~s especies reactivas del oxigeno son conocidas romo 4
peligrosas, evidencias recientes sugier:en que, bajo ciertas circunstancias, I~ foIID2.- ~
cion controlada de estas moleculas podria ser un componente importante d~ las vias
. "que
·--- -ci.etiallsCfika.ori desenaies:-por ejemplo, s'e"ha coniprobado io~·factores de ere- .•
cimiento incrementan los niveles de ROS como parte de su via de sefializacion, y ~
que ROS regula los canales y factores de transcripci6n. La funci6n doble de ROS es
un ejernplo excelente de la asombrosa complejidad de la bioquimica de los sistemas
vivos: incluso sustancias potencialmente nocivas pueden aprovecharse para desem-
penar: funciones utiles.

L9s electrones se pueden transferir entre grupos que

"' E 14
u
·2 no estan en contacto
Bo.. ..12
-0 ·-

(!)-0 zCOmo se transfieren los electrones entre los grupos transporta-

ai (!)
·s. dores de electrones de la cadena respiratoria? Esta pregunta es
rtr

-g E- to , ·-
~~-~ fascinante porque estos grupos estan a menudo inmersos en el
(!) (!)
Q:j (!) interior de la protefna ocupando posiciones fijas, de tal form.a que
'tl-0 8
c ro no establecen un contacto directo entre ellos. Los electrones se
et:!
~ ~ 6 pueden desplazar en el espacio, incluso en condiciones de vacio.
Sin embargo, la velocidad de transferencia de electrones ·a traves
"Q'+-

:2:g
-0

UC
"'
4 del espacio disminuye cipidamente a medida que aumenta la
.2
(!)
::>
co 2
distancia entre el donador. y el aceptor de electrones, haciendose
.c..a._~ 10 veces menor cada vez. que su_separacion aumente en 0, 8 .A_ .El.
~ ~ 0 o'----~s,____ __,10"------'1s~----'20-~--25 entomo de las protefn:as proporciona rotas mas eficaces para el
transporte de electrones: generalmente, la velocidad de transfe-
Contacto de Distancia (A)
van der Waals rencia de electrones disminuye en un factor de 10 por cada 1,7 A
de separaci6n (Figura 18.19 )~ Cuando los grupos estan en contac-
Figura 18.19 Dependencia de la distancia en la velocidad de
transferencia electr6nica. La ve[oddad de transferenda electr6nica
to, las reactjones de transferencia de electrones pueden ser rmry
disrninuye cuando el dador e!ectr6nico y el aceptor electr6nico se separan, elevadas, alca.nzaudose velocidades de hasta 1013 s -l: En las pro-
En el vado, la veloddad disminuye por un factor de 10 por cada 0,8 A_de·· tefnas de la cadena i:ra.u"sportadora de electrones, la distancia
aurnento, En protelnas, la veloddad cftsminuye· de una forma mas gradual, me&a entre los grupos transportadores de dectrones es de UD.OS
por un factor de 10 cada incremento'de 1,7 A. Esta ve!ocidad es solamente
aproximada debido a que !as variaciones estructura!es de las protefnas de!
15 A, superioraladistancia de contacto de van der w;ais_ A estas
medio pueden afectar a la· velocidacL distancias, la velocidad de transferencia de electrones estimada es

.. - - ~ .. - .
de Uiios 104 s-1 (es decir, cadaeled:r6n'setransflere enmenos de 1 ms), ~pociendo .. 5:43
que todos los demas fa.ctores esten optimizados, Sin la intervenci6n de las proteinas, 18.4 Sintesis de ATP
un electron tardaria aproximadamente 1 dia en atravesar esta distancia. . · · -
El ca.so es mas complicado cuando los electrones se deben transferir entre dos
proteinas distintas, como cuando el citocromo c acepta electrones del Complejo m
o se los pasa al Complejo N. Una serie de interacciones bidrof6bicas Ilevan a las
grupos hemo de las citocromos c y c1 a unos 4,5 A de distancia, con Ios atomos de
hierro separados por 17, 4 A. Esta distancia podria perrnitir la reduccion delcitocro-
mo ca una velocidadde 8,3 X 106 s-1• ·

La conforrnacion de! citocromo c ha permanecido practicarnente

constants durante mas de mil millones de afios
--~·
"°I• :.r•
"'-:.:Elcitocromo c esta presente en todos las organismos que poseen cadenas
. g~. $.l" respiratorias mitocondriales: plantas, animales y microorganismos eucario-
tas, Este transportador de electrones evolucion6 hace mas de 1.500 millones de
afios, antes de producirse la separaci6n entre' animales yplantas: Su funcion se ha
conservado durante todo este tiempo, taly como evidencia el hecho de que el cito-
~QWQ.'.i:::'de cualquier especie eucasiota. reaccuma in vitro con la citocromo c oxidasa de
~~~¥iiii otra especie ensayada hasia lafecha. Par ej emplo, el citocromo c de germen
]:~\pgo-l:eacciona'c:on la citocromo o:xidasa human.a. Ademas, algunos citocromos
;d~ pr:dcanotas, COIDO el citocromo Cz de una bacteria fotosintetica Rhodospiiillum
rubrun» y el citocromo csso de una bacteria desnitrificante Paracoccus denitrificans,
. :sq~~- muy parecidos al citocromo c de las mitocondrias de coraz6n de atiin
(Figura 18.20). Esta observacion nos confirma que 'las caracteristicas estructurales
y funcionales del citocromo c representan una soluci6n evolutiva eficiente para la
transferencia de electrones, ·
:.'.• ....... . ~- - ·- .·• ~ ..
~~ Figura 18..20 Conservacicn de Ia
estructura tridimensional de! dtocromo c,
Se indican las cadenas latera!es de !os 21
. arnnoaddos conservados y el grupo hemo .
. [fomado de 3CYT.pdb,3C2C.pdb,y lSSC.pdbJ

Arnn . Rhodospiriflum rubnuti · Parococcus denitrificans

El pareci~o entre las distintas moleculas de cit~cr~~ se hace extensive a nivel

de sus secuencias de aminoacidos. Debido al relativamente pequefio tamafio de la
molecula y a su ubicuidad, Emil Smith, Emanuel Margoliash y otros autores han
podido determinar par secuenciacion directa de las proteinas la secuencia de ami-
noacidos del citocromo c en mas de 80 especies muy diversas de eucariotas, El
hallazgo sorprendente es que 21 de los 104 residuos han· permanecido invariantes
dur~nte mas de mil quinientos millones de aiios de evolucion. Un arbol filogenetico,
elaborado a partir de las secuencias de aminoacidos del citocromo c, nos revela 13$
relaciones evolutivas·existentes entre muchas especies animales {Figura 18.21).

3~'.t41 Un gradiente de protones impulsa la sfntesis de ATP· Figura 18.21 Arboi evolutivo elaborado a
partir de las secuendas 'de! citocromo c.
Hasta ahora hemes considerado el-flujo de: electrones desde el NADH hasta ~l 02 La longitud de las ramas es propordonal al
.como un proceso exerg6nico. mirnero de cambios en las aminoaddos que
parece haber tenido [ugar. Este dibujo ,es una
NADH + 1h02 + H" ~H;o + NAD+ adaptad6n de! trabajo de Walter lvL Frtch y
!i.G = -220,1
01 kJ mol-1 (-52,9 kca:lmol-1) Emanuel Margofiash.
 ---
-.-...
544 A continuaci6n, vamos a considerer c6mo se acopla este proceso a. la sintesis de
CAPITuLO .18 . Fosforiladon oxidative ATP, un proceso enderg6nico.

ilG' = +30,5 kJ mol-1( +7,3 kcal mol-1)

1

Hay quien afirma que, junto con la e!ucida-
ci6n de la estructura de! DNA, el descubri-
miento de que la sfntesis de! ATP esta
potenciada per un gradiente de protones
constituye uno de los dos avances principa-
les en biologia en el siglo XX. Sin embargo,
..
Una maquinaria molecular de la membrana interna mitocondriaI Ilevaa cabo la
sfn.tesis de ATP. Este complejo enzirnatico se llama inicialmenteATPasa mitocon-
drial, o F1F0-ATPasa,ya que fue descubierta gracias a su catilisis en sentido inver- ~
se, hidroliiando ATP. Su nombre mas aceptado, ATP siniasa, "enfatiza s{i":fuii.cr6n
real en la mitocondria. Tambifu recibe el nombre de ComplejoV,
lC6mo se acopla la oxidaci6n del NADH a Ia fosforilaci6n del ADP? En un fll]!
principio se sugiri6 que la transferencia de electrones daba lugar a la formaci6n de .
un intermediario covalente de alta energia que actuaria como un compuesto con un
elevado potencial de transferencia de fosforilos, de forma analoga a la generacicn de
ATP por formaci6n de 1,3-bisfosfoglicerato en la glic6lisis (Secci6n 16.1). Una
""
1111
,.
propuesta alternativa fue que la transferencia electronica induciria la formaci6n de
una conformacion proteica activada que posteriormente Ilevaria a cab~ la,sfn.tesis de fl!!
ATP. La btisqueda de tales intermediarios durante varias decadas result6 infruc-

la propuesta inicial de la teorfa -quimiosm6ti-
ca de Mitchell no fue bien recibida inicial- ·
mente per todos. Asi, Efraim Racker, uno de
los primeros investigadores de la ATP sinta-
sa, afirm6 que algunas de las ideas de
Mitchell eran propias de un buf6n de carte,
y que su trabajo no tendrfa consecuencias.
Peter Mitchell obtuvo el premio Nobel de
Qufmica en 1978 por su contribucion al
_1:onocimiento de la fosforilaci6n oxidativa.
..... : ... -- :· . ·~.
........
tuosa..
· . -En. 1961, ·Peter Mitchell propuso un mecanismo radicalmente diferente, la hip6- ~
y
iesis quimiosm0tica. Propuso que el transporte electronico la sintesis de ATP se
fllil
acoplan mediante un gradienie de protones a traves de la membrana intern.a mitocon-
drial. En su modelo, la transferencia de electrones a traves de la cadena respiratoria ·
provoca el borobeo de protones desde el lado de la matriz hacia el lado citoplasma-
tico de la membrana interna mitocondrial. La concentracion, de H+ en la matriz
disminuye y se genera un campo electrico negativo en este compartimento (Figu-
_,
...
ra 18.22). Los protones fluyen de vuelta a la matriz para igualar la distribuci6n. La
idea.de.Mitchell era que estc flujo de pf'6tones- impulsa la sfntesis. de ATP median-·
te la ATP sintasa.. La distribuci6n desigual, rica en energia.ide protones, se conoce
comoJuerza prot6n-motriz. Se puede imagin.ar que la fuerza prot6n-motriz esta ~
cornpuesta por dos componentes: un gradiente quirnico y un gradiente de carga. El

•,.
gradiente quimico para los protones se puederepresentar como un gradiente de·pH.
~
El gradiente de carga se crea por la carga positiva de ios protones distribuidos des-

.•
l
igualmente que forman el. gradiente qufmico. Mitchell propuso que ~bos compo-
nentes im.pulsan la sintesis de ATP. . .

"
I

Fuerza prot6n-rnotriz (.6.p) ·= l

gradiente qulmico (.6..pH) + gradiente de carga (.6..'tp) I

"•
La innovadora hip6tesis de Mitchell segliu la cual la oxidaci6n y la fosfori1aci6n
se acoplan
.
rn.edio?iits,
. r--...,__. .,...!'
un gradiente
~
de proton.es .esta hoy en dia rf.spaldada por un

Los protones se bombean a traves de

esta membrana conforme !os e!ectr.ones
fluyen por la cadena respiratoria. / Mem.brana e~ema
._ mltocondnal
. .

!"+
.
Figura lS.22 Hip&tesis qufmiosmctlca, [W] alta
++ Membrana intema
La transferencia de electrones a traves de la mitocondnal
cadena respiratoria provoca e( bombeo de -
protones desde el !ado de la matriz hacia el !ado
dtoplasmatico de la membrana intema Espada intermembranal
mitocondriaL E gradiente de pH y el potendal · [W] baja_
,de membrana constituyen una fuerza proton- Matriz
motriz que es utilizada .para dirigir la sfntesis s + + + + +
de ATP.
 Bacteriorrodopsina en H+
una vesicula sintetica
18.4·: Sfntesis de· J.\TP

Figura·18.23 Prcbando Ia hipotesis

quirniosm6tica. CUando se iluminan vesicolas ·
de membrane reconstituidas que contienen
bacteriorrodopsina (una bomba de protones
dependiente de la Iuz) y ATP sintasa, se sinte!iza
sintasa· ATP. La orientaci6n de la ATP sintasa en estas
membranas reconstituidas es la contraria a la de
· la mitocondria.

gran mimero 4e evidenci~. De. hecho, el transporte de electrones genera uri gra-
diente de protones a traves de la membrana interna mitocondrial. El pH extemo es ·
1}{tihldade5menor que·el interno y el potencial demembrana es de 0, 14V, .positive
·. en,ie:J.JexJ:~ii.or. Como ya se cakul6 en la pagina 531, este potencial de membrana se
. c~:haj,Jj;ria~co~:oo~ energia libre de 21, 8 kJ ( 5 ,2 kcal) par mol de protones.
', ~ F'k demostrar Cle una manera elegante el principio basico de la bip6tesis
qui~upsm6tica,. se ?J.sefi.6 un sistema artificial. Una proteina de membrana de
h?l~bacterias que l)ombea protones al ser iluminada, la bacteriorrodopsina, se
utilize coma cadena respiratoria .. Se desarrollaron vesiculas sinteticas que conte-
nfan bacteriorrodopsina y ATP sintasa mitocondrial purificada de coraz6n de ·
buey (Figura 18.23). Cuando las vesiculas se exponian a la luz, se formabaATP .
. ,. .. ·:. .~&te-~~erim.ento. clave aefilostr6. clararcente.que la cadena. -:respiratori.CJ.-JL·la _4.TP.
suitasa. SO.'FJ. dos sistemas bioqufmicos distintos, conectados unica.mente por la. [uerza.
protim-motriz: ·. : · · · ·

La ATP sintasa esta formada par una unidad transportadora de

protones y una unidad catalftica ·
Hoy en dfa, ya esta claro c6mo se acoplan las dos partes ·de este puzle, la oxi~ci6n
del NADH y la sintesis de ATP: (1) El transporte de electro~~ genera una fuerza
prot6n-motriz; (2) La sintesis de ATP por la ATP sintasa puede-generarse'median-
te una fuerza proton-motriz .. zC6mo se convierte la fuerza proton-rnotriz en el
potencial de transferenciade fosforilo de alta energiadel ATP?
Los estudios bioquimicos, -de rnicroscopfa electrcnica y cristalograficos de la
ATP sintasa han puesto de manifiesto muches ~<;).~alles de· su estructura ·
(Figura 18.24). Es un enzim.agrande y complejo, qurpa'f~ce una pelota sujetada
a un palo. Grari parte del "pale", llamada la subunidad F o. esta inserta en lamem-
brana interna mitocondrial. La pelota, de 85 A de diarnetro, llamada subunidad
F 1 se proyecta hacia la matriz mitocon.drial. La subunidad F 1 posee la actividad
1

catalitica de la sintasa, De hecho, las subunidades F1 aisladas exhiben acti.vidad

ATPasa.
La subunidad F 1 esta formada por.cinco tipos de cadenas polipeptfdicas (a.3,
133, "f., o ye) con la estequiometria indicada en los subindices. Las subunidades a. 'I>\ Figura 18.24 Estructura de Ia ATP ·
y 13, que constituyen el grueso de la F 1, se disponen de forma altema en un anillo sintasa. Se representa una estructura
esquernatica junta con las estructuras detalladas
hexamerico, son hom6logas entre sf y son rniembros de la faID.iliade NTPasas de
de aquellos componentes cuyas estru.a.i..!rasse
bucleP (SecciO:n9-.4). Las dos unen n.ucle6tidos,pero.solo las subunidades 13 par- han deterrninado a alta resoludon, El sornbreado
ti.cipan directamente en la ca.tali.sis. Comenzando justo debajo de las subunidades de color pdrpura representa las dorninios NTPasa
a y 13 hay un tallo central que esti formado por las protefnas "f. y e. La subunidad del bude P.de lassubunidades a y fl. Observese
· que parte de! complejo enzimatico estl loca-
'Y. conti.ene un superhelicoide largo que llega hasta el centro del hexamero a.3~3. La lizado en la .membrana intema mitocondrial, .
subunida.d. ')' rompe la.. simetriq. del hexamero a.3{33: cad.a. iLna de las subunida.des 13 es mientras que el resto se encuentra en Ia matriz.
distinta. en virtud de· SUS mtera.cciones con diferentes ca.ras de ')'. poder" distinguir [Iornado de 1 E79.pdb y 1 COV.pdb.J
 -·•.
546
CAPITULO 18 Fosforilaciori oxidativa
entre las tres subunidades f3 resulta crucial para entender el mecanismo de sfntesis
de ATP. .
La subunidad F o es un segmento hidrof6bico que atraviesalamembrana intema
mitocondrial. Fo contiene el canal de ptoioties del complejo. Este canal esta formado
.
...
ii

•.
por un anillo que contiene entre 10 y 14 subunidades c, que estan i.nsertadas en la
membrana. Una Uni.ca subunidad a se une a la periferia del anillo. Las subunidades

.•
F0yF1 estan conectadas de dos formas: medi~te ·er tallo central "{Symediante una
columna extern.a. La columna extema esf;<i formada por una subunidad a,.dos ~buni-
dades by la:s.~~da1_ ~'. · ... --· ...

El flujo de protones a traves .de la ATP sintasa provoca Ia liberaci6n de!

••
ATP fuertemente unido: el mecanismo de cambio de union
La ATP si.ntasacataliza la formaci6n de ATP a partir de.ADP y ortofosfato.
ADP3- + HP042- + H+ ~ ATP4- + H20
.•
.
Los sustratos reales son complejos de ADP y ATP con Mg2+, coma en todas
las reacciones de transferencia de fosforilos conocidas para estos dos nude6tidos.
Un atom~ de oxigeno distal del ADP.ataca al atomo de f6sforo del Pi para formar
..
.
· .un:intermediario.-pentacovalente;.que. posteriormente ae: disocia en ATP·y H20
(Figura 18.25).
..
. •
...
.. ji
·~ ..
'
.. ADP . - • -- .. .Pj..•.. ATP

Figura l 8.25 Mecanismo de sfntesis de ATP. Uno de los atornos de oxfgeno del ADP ataca al atorno
de f6sforo del Pi P.'lra forrnar, un if1termecfiario. pentacova[ente que posteriormente genera .AJP y libera una
•
~
molecule de H20. ·

,!:De que modo elflujo.de protones impulsa la sfntesis de ATP? Los resultados
de experimentos de intercambio isot6pico revelaron de forma insospechada que el
comp lejo enzima-ATP unido se [ormafii.cilmente en ausencia: de [uerza. prototi-motaiz .
Al afiadir ADP y Pi a la ATP sintasa en H2130, el 180 se incorporaba al Pi por la
sintesis y posterior hidr6lisis del ATP (Figura 18.26). La velocidad de incorpora-
ci6n del 180 al Pi i.ndicaba que cantidades aproximadamente iguales de ATP:unido
y de ADP esw.t~equilibrio en el centre catalitico, incluso en ausencia de un gra-
...
,
diente de protones. Sin embargo, el ATP no abandona el centre catalitico a menos
que exista un flujo de piotones a traves del enzima. Por tanto, el papel deI gradiente
de protones no es la formaciOn del ATP sino su liberacion. de· la: siniasa, ·
. El hecli.o.de que tres subunidades 13 sean componentes de la mitad F 1 de la
f
.
ATPasa signifies que hay tres centres actives en el enzima, cada uno realiza en
cualquier instante cada una de las tres funciones diferentes. La fuerza prot6n-
motriz hace que Ios tres centros activos cambien secuencialmente de funciones

v v ~1
0. ,0 2- 0 - 0 0 - 0 . 0 . 0 2- W
\
,0 0. H2lBO
. \,/ \,1'
""'-o_,,,,._"-o_,,,,. ..,,,__o/ ~o
R. J,
R........_o/P"-o/P~·o
ADP. P;." ATP

Figura· 18.26 EI ATP se forrna en ausencia de una fuerza prot6n-rnotriz, pero no se libera. Los
resultados de experimentos de intercambio isot6pico in_dican qu!= el ATP se forma a partir. de ADP y P; en
ausenda de una fuerza proton-rnotriz,

-···_.
 DJmO el flujo de· protones a traves del componente del enzima integrado en la
semhrana. De hecho, podemos pensar que el enzima esta compuesto de una
pa:iE m6vil y una parte estacionaria: (1) la unidad m6vil, o rotor, esta compuesta
prd.anillo cy el tallo ')'S; y (2) la unidad estacionaria, o estdtor, esta fonnadapor
d.:restn de la molecula., .
i.fJe que modo los tres centres activos de la ATP sintasa responden al flujo' de
prinnes? A partir de una serie de observaciones experimentales se propuso un
M'mllismo de cambio de uni6n para la sintesis de ATP impulsada por protones. Esta
l*''l" iesta establece que una subunidad 13 puede llevar a cabo cada uno de los tres
p!S(llS secuenciales del proceso de sintesis de ATP cambiando de conformacicn,
Bsiospasos son (1) union de ADP y Pi, (2) sfntesis de ATP y (3) liberaci6n de ATP.
tDno ya se ha indicado, las interacciones con.la subunidad -y hacen que las tres
••mi<bdes 13 no sean equivalentes (Figura 18.27). En un momento dado, una
~ ~ puede estar enla conformaci6n L, o relajada (loose). Esta conforma-
- ciiie. tme ADP y Pi· Una segunda subunidad puede estar en la conform.aci6n T o T
kosa.(tight). Esta conformaci6n une ATP con gran avidez, tanta que convertira el Figura 18.27 Los sitios de union a
~y Pi unidos en ATP. Ambas conform.aciones, Ty L, estan lo suficientemente · nucleotides deIa ATP sintasa no son
~as come para.no poder liberar los nucleotides unidos. La iiltima subunidad · equivalentes. La subunidad "/ atraviesa el
~ ..~intrara err la?fdrma 0, 0 abierta (open). Estaforma tiene una confonnacidn centre de! hexamero a.3{?>3 hacienda que las
sitios de union a nucleotides de las subunidades
-e __ &t;S abierta y puede unir o liberar nucleotides de adenina.
{?> sean distintos entre sL Obsetvese que cada
··- - . - La intercon\rersi6n entre estas tres form.as esta promovida por la rotaci6n de subunidad ct. contiene ATP unido, pero estas
la suhunidad 'Y (Figura 18·.28). El ADP y el Pi unidos a la subunidad en forma subunidades no partidpan en ninguna de las
_Tse comhinan transitoriamente para formar ATP. Supongamos que la subuni- reacdones, Las subunidades fl .est3.n coloreadas
para cfJStinguir unas de otras.
· __ (i;w-y gira 120 grades en sentido antihorario (mirando desde la parte superior).
Esta rotaci6n convierte al centro en conformacion T en un centre en conforma-
ci.6n 0 con el nucle6tido unido coma ATP. Al mismo tiempo,.el centre en con-
fonn.aci6nL se convierte encentro en conformacidn T, permitiendo la conversicn
- - -de:l-ADP--y-Pi unidos en-ATP:-El-A'fP-en:.ekentro·en conforreaeien-O puedc
entoncesliberarse del enzima para ser reemplazado par ADP y Pi. Una rotacion
Aiteraciones progresivas de las
adicional de 120 grades convierte a este centro en coriformaci6n 0 en uno en forrnas de las tres centres actives
conformacion L, atrapando estos sustrat~s. Cada subunidad 'avanza de la con- de la ATP sintasa
fonnacion T a la 0 y a la L sin que dos subunidades puedan estar nunca presen- Subunidad 1 l -+ T-+ 0 -+ L -+ T -+ 0 .
tes en la misma conformaci6n. Este mecanismo sugiere que se puede sintetizar Subunidad 2 . 0 -+ L-+ T-+ 0 -+ L-+ T .
y liberar el ATP promoviendo la rotaci6n de la subunidad 'Y en ~I sentido. apro- Subunidad 3 T-+ 0 -+ L-+ T-+ 0 -+ L..
piado. · · · . · · · . .' · · . ·. · · · ·

0 Rotadon de

Figura 18.28 Mecanisrno de cambio de

Catalisis rotaciona! en el motor molecular mas pequefio de! mundo union de la ATP sintasa. la rotad6n.de la
subunidad '{ transforma las tres subunidades {?>.
(ES posible observar directaznente la rotaci6n propuesta? Mediante refinados La subunidad en estado T (tenso), traiisfoITT1a
experimentos utilizao.do tecnicas con una sola rnolecula (Secci6n 8.6), se ha ADP y Pi en ATP, pero este no se puede liberar.
Cuando la subunidad "/ gira 120° en c!irecci6n ·
demostrado la rotacion utilizando un sistem~ experimental sencillo formado Uni- contraria a las agujas del reloj (CON), la
camente par las subunidades a3133-y clonadas (Figura 18.29). Las subunidades I=) subunidad en forma Tse .convierte en la forrna
£ueron diseifadas para que tuviesen en s-u. extremo amino una cola de polihistidi- 0, permitiendo la fiberad6n de ATP. El ADP y Pi
pueden unirse entonces a la subunidad en
na, que presenta gran af'midadhaoalos iones niquel (Secci6n 3.1). Gracias a esta
forma 0. Una rotad6n adidonal de 120°
propi~dad, fue pbsible inrnoviliiar el complejo a3J33 sobre {ma superficie de eris-· (no mostrada) abapa a estos sustratos en
tal recubierta de iones niquel. La suburi.idad ""{ estaba unida a un filamen~o de la subunidqd en forma L
547
548
CAPITULO 18 Fosforilaci6n oxidativa
Figura 18.29 Observaci6n directa de la
rotaci6n impulsada per ATP en Ia ATP
sintasa. Se fija el hexarnero 0:3fo de la ATP
sintasa sobre una superficie, de rnanera que
la subunidad "/ se proyecta hacia arriba y esta
unida a un filamento de actina rnarcado
fluorescentemente. La adici6n y posterior
- hldrolisis de! ATP da (ugar a la rotad6n de la
subunidad "'I en sentido antihorario, lo que
puede observarse directamente con un
mlcroscopio de fluorescencia.
- mente toda la energia liberada porlahi:d1:6EsiS.del ATP se convierte en mo~
- Addo aspartico
Subunidad c solida evidencia en favor del mecanismo rotacional de la sintesis de ATP. La pre-
.:;ernicanal de! citop[asma
Sernicanal de la matriz
Subunidad a
Figura 18.30 Componentes .de la unidad
transportadora de protories de la ATP
sintasa, La subunidad c esta forrnada por dos
helices a: que atraviesan la rnembrana. Un ·
residua de acido aspartico en una de las helices
esta situado en el centre de la membrane, La
estructura de la subunidad a todavia no se ha
observado directamente, pero parece induir dos
semicanales que perrniten la entrada de las
protones y su desplazamiento pardal, pero no
cornp[etarnente a traves de la mernbrana
actina marcado fluorescentemente, formando un largo segrnento que podia ~
observado con un microscopic de fluorescencia. Sorprendentemente, la adiciiia
de ATP provocaba la rotaci6n unidireccional del filamento de actina en sentido
antihorario. La. suhunidad "{ estaba rota.ndo unpuisoda por la fiidn5lisis dil ATP.
-Por tanto, era posible-observar la actividad catilitica de una.iinica molecula, I.a
rotaciou en sentido .antihorario es ·consistente con el.mecanismo de hidrolisis IKD-
puesto porque la molecula se observaba desde abajo si tomamos coma refaea:ia
la perspectiva mostrada en la Figura 18.29. ·
Un anilisis mas detallado en presencia de concentraciones rnenores de ATP
revelo que la subunidad 'Y gira en incrernentos de 120°. Cada paso correspandeala
hidrdlisisde una iinica molecula de ATP. Ademas, los resultados obtenidos 21
rnedir la velocidad de rotacion utilizando filamentos de actina de distinta)oogitod
indican que el enzima trabaja con una eficacia cercana al 100%; es decir, pr2ctica-
rotacional. ·
Ef flujo de protones alrededor de! anillo c impulsa la sfntesis de ATP
La observacion directa del movirnienfo rotatorio de la subuilldad "f constituye una
. gunta que queda par responder~: zC6mo el flujo de protones a traves de F 0 prove-
ca la rotaci6n de la subunidad "{? Howard Berg y George Oster han ·propuesto un
elegante mecanismo que proporciona una dara respuesta a esta pregunta. El meca-
nismo se basa 'en las estructuras d~ ias subunidades a y c de F o (Figura 18.30). La
subunidad a es contigua directa.rr;.ei:i.te al anillo de 10 a 14 subunidades c que atra-
viesan la mernbrana. Aunque la estructura de la subunidad a no se ha determinado
todavfa ·exp~?(talmente, existe una amplia evidencia consistente con una estruc-
tura que incluye dos semicanales hidrofilicos que no atraviesan la mernbrana (vease
la Figura 18.30). De este modo, los protones pueden entrar en cualquiera de estos
canales, pero no. pueden moverse completamente a traves de la membrana. La
subunidad a esta posicionada de tal forma que cada semicanal interaccionadirec'"..a-
mente con una subunidad c. ·
·La estructura de la subunidad c se ha determinado tanto por metodos de R1v.EN
come por cristalografi:a de rayos X. Cada cadena polipeptidica forma una pareja de
helices a. que atraviesan la membrana. Un residue de acido aspartico (Asp 61) esta
situad6 en la mitad de una de las helices. La clave del mo~ento de protones a
traves de la menibrana es que, en un entorno.rico en pro tones, como el Iado citoplas-
matico de la membrana mitocondrial, un proton entrara en un canal y se unira al
resid~o de aspartato (Figura 18.31). La subunidad c con el proton unido rotara
entonc~ a traves de la membrana hasta que el acido aspartico. se encuentre en un
entomo poqre ~ protones del otro semicanal, 9-onde el proton es liberado. EI movi-
miento de protones a traves de Ios semicana.Ies desde la concentracion alta cl.<; protones
del ci.topiasma a Ia concentradon baja. 'en_protones de la mat~ impulsa. la rotaci6n del
 ·.:: - '•S:49
18.4 Sfntesis de llJ'P

·Figura 18.31 El movimiento de protones a traves de Ia memb~na provoca la rotaci6n del

anillo c. Un proton procedente de! espado intermembranal se introduce en el seffiicanal dtosolico para
• -neutralizar la-carga-det.>1i--;-ES1duo de aspartato-delasubunidad c. Con esta cafg<rneutralizada, el..anilloc " · ··
puede girar en sen1ido horario el equivalente a una subunidad c, desplazando un residua de addo
aspartico desde la membrana hasta el semicanal de la matriz. Este proton puede fluir hacia !a matriz,
reinstaurando las condiciones iniciales de[ sistema

anillo c. Su rotado:O: esta fuvorecida por la capacid~d-del residue de icido aspartico

recien protonado (neutralizado) para ocupa:r el entorno hldrof6bico de la membra-
na. A.sf, la subunidad c con el acido aspartico recien protonado semneve delcontac-
to· con el semicanal citoplasrnatico .hacia la memb:rana, y las otras subunidades ~ se
mueven a la vex. Cuando el anillo c gira, la unidad, a pe:rmanece estacionaria, Cada ·
proton que entra en el semicanal citoplasmatico de la unidad ::1- se mueve traves de a
la mernbrana desplazandose en el anillo c :rotatorio ~~.@lira traves del semicanal
de la matriz al entorno pobre en protones de la matriz (Figura 18.32).
(De que manera el giro del anillo c produce la sfntesis de ATP? El anillo c Figura 18.32 Vfa de las protones a traves
de la membrane, Cada proton entj'a par el
esta unido firm.em~nte a las subunidades "/ y .s. Par ello, mientras que el anillo semicanal citos8Jico, da una vuelta cornpleta de!
c gira, las subunidades "'{ y e giran en el interior de la unidad hexamerica cx3fo de anm~ c y sale p~ el otro 'semi~n~l_haci,a ~
: la F1. La rotaci6n de la subunidad "'{produce a su vez la sfntesis de ATP por matrtz. .v ~~.i·;: . .,_. . ,.~.;: ,~,. . . ~~
·::. _=\
medio del mecanismo de cambio de union. La columna exterior formada par las
dos cadenas by la subunidad .o evifa que el hexamero cx3)33 gire, Recuerdese que
el mimero de subunidades c en el anillo c parece estar en un rango de entre 10 y Lo poco l!ega a mucho ..
•14 subunidades. Este nfunero es significativo po:rque determina el nfune;o de A pesar de las diversas "mequinadonas"
protones que deben transportarse para generar una molecula de ATP. Cada giro rnoleculares y de la enorme cantidad de
y
de 3 6 0 grados de la· subunidad "/ lleva a la sintesis liheraci6n de tres m~leculas molecules de ATP sinteti:iadas y de proto-
de ATP. Asf, si hay 10 subunidades c en el anillo (como se ha observado en la nes bornbeados, un ser humano en repose
estructura cristalina de la ATP sintasa mitocondrial de levadura), ~da ATP requiere sorprendentemente poca potenda
producido necesita el transporte de 10/3 = 3,3·3 protones, p3!3- simplificar, _se Aproximadamente 116 watios, el gasto
asume que'tres protones-deben mcorpo:rarse a la matriz par cada ATP form.ado, energetico de una bornbilla tfpica, propor- ·
dona suficiente energfa para rnantener una
aun cuand~ debemos teri.er en cuenta que el val~r real puede ser distinto, Como persona en reposo,
I

veremos, los electrones del NADH bombean suficientes protones para generar
550
CAPf11JLO 18 -~ Fosforilad6n oxidativa

' .,
'·. ',,
-~

Figura 18-33 Panorama de la fosforilad6n

oxidativa. la cadena transportadora de
electrones genera un gradiente de protones
que se utiliza para sintetizar ATP. Cadena transportadora de e!ectrones ·

2, 5 molecules de AT!;\ mientras que las dd FADH2 permiten producir 1, 5 mole-

culas de-ATP.· · ····· ··
Volvamospor un memento al ejemplo con el que se ha cornenzado este capftulo.
Si un ser humane en reposo'requiere 85 kg de ATP diaries para las funciones cor-
porales, 3,3 X 1025 protones debieran fhiir a traves de la ATP sintasa cada dia, o
3,3 X 1021 protones por' segundo. La Figura 18.33 resume el proceso de la fosfori-
laci6ri.oxidativa.
. . ... ·. . .
La ATP sintasa y las protefnas G tienen varias
caracterfsticas cornunes
~ )' LaS stibunidades a y j3 de la ATP sintasa pertenecen a la familia de profeinas
las
-y NTPaS<is con bude P. En el Capitulo 14 vimos que propiedades de· seiia-
lizaci6n de otros m.iembros de esta familia, fas protefnas G, ·depend en de su capaci-
dad para , ~e~ nucleosidos trifosfato y difosfato . con gran firmeza. No
intercambian los nucle6tidos a menos que se les induzea a ello mediante la interac-
ci6n con otras protefnas, El mecanismo de cambio en la uni6p. de la ATP sintasa es
una variante de este esquema. Las regiones bucle p de las subunidades j3 uniran
.ADP o ATP (o liberarin ATP), dependiendo con cual de las tres caras diferentes de
. la subunidad 'Y interaccionan. Los cam.bias de conformaci6n se sucederi de fo.rrna
ordenada,.dirigidos por la rotacion de la subunidad 'Y· ·

18.5 Muchas lanzaderas perrniten Ios movimientos a

traves de las membranas mitocondriales ·
La ~embran~ interna mitocondrial debe ser impermeable a la may~ri~ de las mole-
culas a pesar d~ q1:1e deben producirse nurnerosos intercambios entre el citoplasma
y las mitocondrias. Este intercambio esta mediado par unaserie de proteinas trans-
portadoras transme:mbranales (Secci6ni3.4). : . . : ·

._J
 . ·551

~~~~~r~=~
NADH+W NAD+
185 Lanzaderas mrtocondriales
~

citoplasmatica
/CH20H
· O=C
b20P~2-
Dihidroxiacefona Glicerol
fosfato 3-fosfato

' Matriz

: . Figura 18.34 Lanzadera de gliceral 3-fosfato. Los electrones de! NADH pueden introducirse en
. :.:P.' i$;ca9ena trafisportadora de e!ectrones mitocondrial una ve: que han sido utilizados para reducir la
::~.. "9_lhiaroxiacet;?na fosfat~. a glicerol 3-fosfato. El glicero! 3-fosfato se reoxida al transferir SUS electrones al
.: i,'.',grupo prostetico FAD de una gficerol 3-fosfato deshidrogenasa unida a la mernbrana.. Posteriormente,
<'. , la: transferencia de los electrones a Q para former QH2 permite que estos eledrones se introduzcan
:. en la cadena trar;sportadora de electrones. ·

Los electrones de! NADH citoplasrnatico entran en las mitocondrias

· rnediante Ianzaderas - -·
. un:a :fund6~ de"i;{ cadena ~~pktori~ es regen~ NAD~ para.su ~o ~la gli~6lisi~:.
lC6"mo se reoxida el NADH citoplasmatico a NAD+ er+ condiciones aer6,bicas? El
NADH no puede simplemente introducirse en las mitocondrias para oxidarse
in~ante la cadena transportadora de electrones porquela membrana intema mite- ·.
~ndrial es impermeable al NADH y al NAD+. Ll sohici6~ consiste en que sean los
electtones del NADH, y no el propio N.ADH, los que atraviesen. la membrana mite-
condrial. Una de las diversas maneras decondncir lo~ electrones delNADHhacia la
cadena transportadora de electrones es la la.rizadera de glicerol 3-fosfato (Figura.18.34).
El primer paso en.esta lanzadera consiste en la transferencia "de un par de electrones
desde el NADH a la dihidroxiacetona fosfato, un intermediario de la glicolisis, para
· formar glicerol 3-fosfato. Esta reacci6n esta catalizada par la glicerol 3-fosfato deshi-
. drogenasa del citoplasma. El glicerol 3-fosfato se reoxi:da a dihidroxiacetona fosfato
en la cara extema de la membrana intema mitqcop_ciriaj. .mediante un isozima de la
glicerol 3-fosfato deshidrogenasa unido a ill.ernbran~~ar de electrones del glicerol
3-fosfato se transfieren al grupo prostetico FAD de este enzim.a para formar FADH2•
• Esta reacci6n tambien regenera la dihidroxiacetona fosfato. '.:· ..
La flavina reducida transfi.ere sus electrones al transportador de electrones Q,
que se incorpora a la cadena respiratoria en forma de QHz. Guan.do &z cadena respi-
ratoria oxida. eI NADH ci.tos6lico transportado por la laneadera. de glicerol 3-fosfato,
se Jorma.n 1,5 moliculas de ATP, en -uez de 2,5. El rendimiento es menor porque en
la glicerol 3-fosfato deshidrogenasa mitocondrial el aceptor de electrones es el FAD
en lugar del NAD+. La utilizaci6n del FAD permite que Ios electrones del NADH
citosolico sean transportados hacia las mitocondrias en contra de un gradiente de NADH + H+ + E-E®
concentraci6n de NADH. El caste de este transporte es de una molecula de ATP Citoplasrnatico Mitocondrial
par cada dos electrones, La lanzadera de glicerol 3-fosfato es especialmente abun-
dante en miisculo, lo que permite que se pueda efectuar la fosforilacion oxidativa a
una velocidad muy alta. De hecb.o, algunos insectos carecen de la lactate deshidro- NAD+ +
1E-FADH2
genasa y dependen por complete de la lanzadera de glicerol 3-fosfato para regenerar Gtop!asmatico Mitocondrial
el NAD+ citoplasmatico. I..anzadera de glicero! 3-fosfato
F

552 NAO+
CAPITuLO 18 Fosforilad6n oxidativa
NADH~ Oxalacetatc XGfut;,=W
Ma!ato · a;-Cetoglutarato Aspartato ------

I'
:
I
i

Ma!ato

~AD~
ce-Cetoglutarato

Oxalacetato.
x Aspartato

Glutamato+------

Figura 18-35 Laniadera de malato- NADH

aspartato.

.· ..En corazon e higado; los electron es del NAD H citosolico entrar1 en la;
mitocon-
drias por media de la lanzadera tnalaio-aspartato, en la que intervi~nen dos trans-
portadores de membrana y cuatro enzim.as (Figura 18.35). Los electrones se
transfieren desde el NADH del citoplasma al oxalacetato, formando ,malato, que
atraviesa la membrana interna mitocondrial intercarnbiandose por «-cetoglutarato
para posteriormente reoxidarse por el NAD+ de la matriz y generar NADH en una
NADH + NAO+ reaccion catalizada por el enzima del ciclo del acido citrico rnalato deshidrogenasa,
Citoplasrnatico Mitocondrial El oxalacetato resultante no puede atravesar directamente la .mernbrana interna

. . . . 1t . mitocoadrial, per lo que se necesita una reacci6n de transarninacion (Seccion 23.3)

para formar aspartato, que si puede ser transportado hacia el lado citoplasmatico
intercambiandose por glutamato. El glutamato cede uri grupo amino al oxalacetato,
NAO+ + NADH
formando aspartato y a-cetoglutarato. En el citoplasma, el aspartato se desamina y
Citoplasmatico Mitocondrial
origina oxalacetato, co~.lo que el ciclo comienza de nuevo.
Lanzadera de malato-aspartato

La entrada de! ADP en las mitocondrias esta "acoplada'a la salida de!

ATP par media de la ATP-ADP translocasa
La principal :funci6n de la fosforilaci6n oxidativa es generar ATP a partir de ADP.
Sin embargo, el ATP y el ADP no di:funden Iibrernente a traves de la membran,;_
intema mitocondriaL lC6mo atraviesan estas moleculas tan cargadas la membrana
intema para llegar al citoplasma? Una proteina transportadora especlfica, la ATP-
ADP transfoc~~$.rmite que estas moleculas atraviesen la barrera de permeabili-
dad. Y lo que esi:na;importante, los flujos de ATP y ADP estan acoplados. El ADP
etitra. en la matriz mitocondrial solo si el ATP sale, y viceoersa. Lareacci6n es catali-
zada por la translocasa, un antiporte: ·

ADP3citoplasma + ATP4~atriz-+ ADP3~triz +ATP4citoplasma

La ATP-ADP translocasa es muy abundante, representando aproximadamente el

15% del contenido proteico de la membrana interna mitocondriaL La abundancia
·es una manifestaci6n del hecho de que el ser humano intercambia el equivalente
de su peso en ATP cada dfa, La translocasa, de 30 kDa, contiene un tinico centro
de union anucle6tido que se orienta alternativamente hacia el lado de la matriz y
hacia el lado citoplasmatico de la membrana (Figura 18.36). El ATP y el ADP se
unen a la translocasa sin Mg2+, teniendo el ATP una carga negativa masque el
ADP. Asf, en un:a mitocondria que se. encuentra respirando activamente con un
potencial de membrana positive, estan favorecidos el transporte de ATP fuera de

j
la matriz :nlltocondrial y el transporte de ADP dentro de la matriz, Este intercam-
bio ATP-ADP es energeticaznente costoso: aproximadamente una cuarta parte
 (1) (2) .. -· ..

.x,
ADP(cit)

A1P'"i (5) (4)

~ADP(-"l
(6)

ATP
(matriz)

Figura 18..36 Mecanismo de Ia ATP-ADP translocasa mitocondriaL La translocasa cataliza la

~,t(ada en la matriz del ADP acoplada a la safida def ATP. La union de! ADP (1) desde el citoplasma
.• @~e,r~~;ra ev$rsi6n del. tr;!!:_15portador (2) para liberar el ADP en la maniz (3). La union subsiguiente de
·.'ATf'M~)a. matriz a la forrna evertida (4) favorece la reeversion a la conformadon original (5) liberando
.· ATP,e'r{o~~ dtoplasrna (6). · . .
...~. ~·:

·dtl reD:d.imiento ene;getico de la transferencia electronica por la cadena respirato-

ri~ se consume para regenerar el potencial de membrana que se pierde en este
proceso de intercam.bio. La inhibicion de este proceso tambien provoca la inme-
diata illhibid6n de la respiraci6n celular (p. 558).
- . -- - . •. . -.· ... . .... -.- ... . . . .. . . . . . -~- .. -.. . ..._. . . -.. ....... . ... .... - ....... ~ . .... -- --··· -
Los.transportadores mitocondriales de metabolitos ti~nen una
estructura tripartite cornun ·
El examen de la secuencia de aminoacidos de la ATP-1,DP trcfuslocasa revel6 que
esta protefna consiste en tres repeticiones con.juntas de un modulo de 100 aminoa-'.
cidos, cada uno de. los cuales parece tener dos segmentos transmembranales. Esta
estructura tripartita se ha confrrmado recientemente ~ la determinaci6n de la
estroctura tridiµi.ensional de este transportador (Figura 18.37). Las helices trans-
men?bi:an3.les forrD..an una estructura como de tienda india. con el sitio deunion al

Lado dtoplasrnatico · .:.:.

'·,•
•7

k; Figura 1337 Estructura de Ios

transportadores mttocondriales, Se muestr.a
la estrudura de la ADP-ATP trans!ocasa
Obswese que esta estructura esta cornpuesta
por tres unidades siml1~res(en rojo, azt,i! y
amarillo) que se juntan para former un centro de
-unlon, aquf orupado por im inhibidcir de!
transportador, Otres miembros de la familla del
transportador 11Jilocondnal adoptari estruduras
tripartitas similares. [Iomado de ! OKCpdb.]
553

------------ .
 ~
~
554 ow ow

•
Malato C"rtrato+ W
CAPITULO 18 Fosfon1aci6n oxidativa
Citcplasrna ATP
ti
r:

Membrana ~

"ti!
intern a
mitocondria[
Ii
Figura 18..38 Transportado res
mitocondriales.. Los transportadores
(tarnbien llarnados 'carriers") 'son protelnas
transrnembranales que transportan iones
espedficos y metabolitos cargados a traves
Matriz ADP··

ATP-ADP
Fosfato Ma!ato Piruvato

Transportador Transportador Transportador

Fosfato

Transportador -
,.
de la rnernbrana interna mitocondrial translocasa de dkarboxilato de tricarboxilato de piruvato de fosfato ~
;i

.
~

,
nucleotide (marcade por un inhibidor unido) ubicade en el centre. Cada una de las
tres repeticiones adopta una estructura similar. .
La ATP-ADP translocasa es uno de los muchos transportadores de iones ode ~
_ metabolites .cargados. que-se . encuentran en-las .mitocondrias (Figura 18.38). El
transporiador de fosfato,. .que-actiia de-man era coordinada ccn la-ATP-ADP translo-
casa, interviene'en. el intercambio electricamenteneutro de H2P04 - por OH-. La •
-f
accion conjunta de estos dos transportadores produce el intercambio de ADP y Pi
citoplasmaticos por ATP de la matriz, a costa de la entrada de un B;+ (debido al
transporte de un OH- fuera de-la matriz). Estos dos transportadores, que proveen
a la ATP sintasa con sus sustratos, estan asociados con la sintasa para formar un f
gran complejo Ilamado ATP siniasoma. ·
f
Otros transportadores hom6logos estan tambien presentes en· la membrana
intema mitocondrial. El transportador de compuestos ro.__carb.oxilicos posibilita .que.
y
- . - .. el maiato; el succinato cl :fum:a~.-t~ se exporten de la matriz mitocondrial median-
te un intercambio con P;: EI transportador de tricarboxilatos inte~cambia citrate y
,
_j

..
H+ por malato. E~ piruvato del citoplasma entra en la rriatriz mitocondrial a cambio @
de OH:- por media del transportador de piruvato. En total, el genomahumano _
codifica mas de 40 de estos transpoi:--tadores.. .- -
f

n11
~J~~~; La regulacion de la· respiraci6n celular esta gobemada
en prirnera instancia por la necesidad de ATP
Como el ATP es el producto fmal de la respiraci6n celular, las necesidades celulares
.
.
\\,, de ATP son ~J,.rminante fmal de la velocidad de las ruta:s
respiratorias y sus
componentes., -

'La oxidaci6n complete de la glucosa origina aproximadamente 30

molecules de ATP
Se puede calcular cuantas rnoleculas de ATP seforrnan durante la oxidaci6n com-
pleta de la glucosa a C02. El niimero de moleculas de ATP ( o GTP). que se forman
durante la glic6lisis y el ciclo del -acido citrico se conoce con certeza porque esta
determinado por la estequiometifa de-las reacciones qufmicas. Par el contrario, la
producci6n de ATP en la-fosforilaci6n oxidativa es mas ambigua debido a que las
estequiometrfas de los procesos de bombeo de protones, sintesis de ATP y trans-
porte de metabolites no tienen par que corresponder a mimeros enteros 0 inclnso
tener UilOS valores fij OS. Como ya Se vio anteriormente, en la actualidad, las mej ores
estimaciones sobre el mimero de protones bombeados ppr par de- electrones hacia el
exterior de la matriz por la NADH-Q oxidorreductasa, Q-citocromo c oxidorre-
du~tasa y eitocromo c oxida-sa son de cuatro, dos y cuatro, respectivamente. La
sintesisde una molecula de ATP esta impulsada por el flujo de; aproxirnadamente,
tres protones a traves de la 1}.TP sintasa. Un P;rot6n adicional se consume en el

-- .. - ... ·-- .-- . ::~·-

Tabla 18.4 Rendimiento de ATP a partir de la oxidaci6n comp!eta de la glucosa ·: .5.55
... ··--,------~-
ATP praducido par 18:6 Regu[aci6n de Ia
Secuencia de reacciones molecula de glucosa fosforilaci6n oxidativa

Glic6lisis: conversion de glucosa en pi:ruvato (en el citoplasma)

Fosforilaci6n de la glucosa .. -1
F osforilaci6n de la fructosa 6-fos:fu.to -1
Desfosforilaci6n de 2 moleculas de 1,3-BPG +2
Desfosforilaci6n de 2 moleculas de fosfoenolpiruvato +2
Se forman 2 moleculas de NADH durante la oxidaci6n de
2 moleculas de gliceraldehido 3-fosfato
.Co~j~~~~f-~~t~~~ ;_~fil:..¢q4(~el1?-terior .dl! Ia mitocondria)
~mefoiiuai12 riio1eCU!a.S'deNADH ·:·>:. ·.: ·· · ··. · .. . - - .
--:L..o .;.....
...... ~- 0 -- ..... :.. .... •oo ·-
· ·· .
0 0. - ._. __ .. ·-···Ho•,•

Cicio del acido citrico (en el interior de la mitocondria)

Se forman 2 molecules de adenosina trifosfato a partir de
2 moleculas de succinil-CoA +2
Se forman 6 moleculas de NADH durante la oxidaci6n de 2 m61eculas de
isocitrato, 2 de ce-cetoglutarato y 2 demalato
Se fo~an 2 moleculas de FADH2 durante la oxidaci6n de 2 moleculas de
succinato

Rendimiento neto por molecula de gl~cosa +30

---:--.:--::·::-
. Fuente: el rendimiento de ATP en
la fosfocilaci6n oxidativa esta basado en las valores que aparecen en P. C..
Hinkle, MA. Kumar, A. Resetar y D.'L. Hanis. Biochemistry 30: 3576-3582, 199L.
Nate el valor actual. de 30 molecu!as de ATP por mol&ula de glucosa reeinplaza valor anterior de 36 ar
molecnlas de ATP. Debemos considerar quelas estequiomctrias del bombeo de protones, lasfntesis de ATP y
el transporte de metabolites son solo aproxirmcion~. Ccando se uti1iza la lanzadera de aspartato-malato en
Ingar de lalanzadera de gliceral 3-fosfuto, sefonnan aproximadamente dos mol€culas mas de ATP par
molecula de glucosa oxidada, .. . .

transports del ATP de la matriz al citoplasma. Por tanto,· como resultado del flujo
.de un par de electrones del NADH al 02 se generan unas 2,5 moleculas de ATP
citoplasmatico. Para los electrones que se incorporan a nivel de la Q-citocromo c
oxidorreductasa, como los que provienen de la oxidaci6n del succinato o del NADH
citosolico, el rendimiento es de aproximadamente 1,5 moleculas de ATP por par
e!ectr6nico. Por lo tanto, tal y como se indica en.I~~ 18.4, cuando la. glucosa. se
oxida piYT complete a C02, se Jarman aproximada.mente'-'30 moleculas de ATP; este
valor reemplaza el calculo tradicional de 36 moleculas de ATP. Lamayor parte del
ATP, 26 de las 30 molecules que se forman, se generan por la fosforilaci6n oxidati-
va, Recordemos que el metabolismo anaerobio de la glucosa produce Uni.cam.ente .. ;.;1.,;r

2 qmoleculas de j\.TP. La eficiencia de la respiracion celular se manifiesta en el f71.@;_,:

hecho de que unode los efectos de los ejercicios de resistencia, una pcictica que
demanda mucho ATP en un periodo de tiempo prolongado, es increment.ar el
mirnero de mitocondrias y vasos sangufneos en el rmisculo y, por consiguiente,
aumentar el lfmite de generaci6n de ATP por fosforilaci6n oxidativa. .

Lavelocidad de la fosforilaci6n oxidativa esta determinada per la

necesidad d·e ATP
. lComo se regula la velocidad de la eadena transportadora de electroiles? En las
. coricliciones fisiologicas hahituales, el transporte de electrones se encuentra fu.tima-
mente ligado a la fosforilacion, Los electrones no sueleii desplaza.rse a. lo largo di la.
cadena tiansportadota de eiectrones hasta. el 02 a. menos que .al mismo tiempo el ADP
se fosforile para. [ormar ATP. Cuando la concentraci6n de ~P aumenta, como

;--------
 11111111

8
556 ocurre en el miisculo activo, la velocidad de la.fosforilaci6n oxidativa se incrementa
8

.
CAPITulO 18 Fosforilad6n oxidativa para cubrir las n~dades de ATP del mtisculo. La regulaci6n de la velocidad de la ii
fosforilaci6n oxidativa por el nivel de ADP se conoce como control respiratorio o con- ii
trol -poi medio del aceptor. Experimentos en mitocondrias aisladas demuestran la

•.
importancia del nivel de ADP (Figura 18.3_9). La velocidad de consumo de oxigeno
por la mitocondria se incrementa. notablemente cuando se afiade ADP y vuelve a sus
valores iniciales cuando el ADP aiiadido se ha convertido en ATP. ·
El nivel de ADP afecta igualmente a la velocidad del ciclo del acido citrico. A
\ Surninjstro de.
ADP casi agotado
concentraciones bajas de ADP, come.en unrmisculo en repose; el NADH y el 8
ADP afiadido FADH2 nose consumen por la cadena transportadora de electrones. El cido del
~
\ acido citrico se hace mas lento porque hay menos NAD+ y F.AD para alimen.tar cl
ciclo. Cuando el nivel de ADP sube y la fosforilaci6n oxidativa se acelera, el NADH
"81
..
y el FADH2 se oxidan y el ciclo se vuelve J:?-<is activo. Los electrones no jluyen desde
Tiempo
las combustibles hasta el 02 a menos que se necesite sinteiizar ATP. Este es otio ejem-
Figura 18.39 Control respiratorio, Los plo de la importancia reguladora de la carga energetica (Figura ,18. 40). 8
electrones se transfieren hasta el 02 solo si
al mismo tiempo e[ ;,\DP se fosfonla a ATP.

~
@
@
llJ
81

-. -~
•
~
@

•
Figura 18.40 La carga energetica regula el
uso de las combustibles, La sfntesis de·ATP a
partir de ADP y Pi controla el ilujo de electrones
desde el NADH y el FADH2 hasta el oxfgeno. La

••
cfisponibilidad de NAD+ y FAD controls, a su vez; Esp ado ~
la veloddad de! ddo de! addo dtrico (CA.CJ. interrnernbranal ·

El desacoplarniento regulado provoca Ia generaci6n de calor

Algunos organismqs poseeri la capacidad de desacoplar lafosforilacion oxidativa de la
••
sintesis de A'TP~'r&generar color. Este desacoplamiento es una forma de mantener
"•
••
la temperatura corporal en animales que hibeman, en algunos animales recien naci-
dos (incluyendo los seres humanos) y en mamiferos adapta.dos al frio. La col fetida
utiliza un mecanismo · analogo para 'calentar sus brotes florales al principio de la
primavera, con lo que aumenta la evaporaci6n de moleculas olorosas que atraen a
los insectos parafertilizar sus flares. En animales, el desacoplamiento esta en el
tejido adiposo pasdo (BAT, broum adipose tissue}, el ruaI es un tejido especializado en
••
••
este proceso de teimogenesis sin tiritar. Por ei contrario, el tejido adipose blanco
(WAT, white adipose tissue) que constituye la mayor parte del tejido adiposo, no
desempefia ningun papel en la terrnogenesis, pero sirve coma fuente de energia y de

••
glandula endocrina (Capitulos 26 y 27).
El tejido adipose pardo esmuyrico en rnitocondrias, conocidas amenudo coma
mitocondrias de la grasa parda: El t~jido aparece pardo por la combinaci6n de las

•
citocromos, de color verdoso, de las numerosas mitocondrias, y la hemoglobina,
roja, presente en el importante suministro de sangre, que ayuda a distribuir el calor
por el cuerpo. La membrana interna mitocondrial de estas ·mitocondrias contiene
una cantidad grande de proteina desacop Lanie (UCP-1 ), o teimogenina, un dimero de ·~

subunidades de 33 kDaquesi:;parecealaATP-ADP translocasa. La UCP-1 esta-

~

. ·:1:: ~· ._ ... -.
 blece una rota para el flujo de protones desde el cito-
plasma hacia la·matriz. En pocas palabras, UCP-1
genera. color cortocircuita.ndo la pila prot6nica mitocon-
cl:ria.l. La energfa del gradi.ente de protones, normalmen-
te captada coma ATP, se libera como calor cuando los
protones fluyen a traves de la UCP-1 hacia la matriz
mitocondrial Es~ rota di.sipadora de protones se activa
cuando la temperatura corporal ernpieza a descender.
En respuesta a una caida de la temperature, la secreci6n
de hormonas lleva a la .liberaci6n de acidos grasos libres ADP+P;~PJP
desd~ los triacilgliceroles que a su vez activan la termo-
· genina (Figura 18.41). · Figura 18.41 Accidn de una protefna desacoplante. La protelna desacoplante
- ·. Podemos verificar los efectos de una carencia de (UCP-1) genera calor perrnitiendo la entrada de protones en Ia rnitocondria sin sfntesis
de !ifP. · ·
termogenesis sin tiritar examinando el comportamiento
porcine. Los cerdos son unos mamfferos alga especiales,
ya que tienen grandes camadas y son las iinicos ungu-
lados que construyen sus anidamientos para el parto.
;Estas caracteristicas de su comportamiento parecen ser el resultado de una deficien-
;'.:$a bioqufmica, Loslcerdos carecen de UCP-1 y, par lo tanto, de grasa parda, Los
; l~ones deben recurrir a otros medi.os de termogenesis, tales como la anidaci6n, el
',.:~ tamaiio de la ~ada, y tiritar. . ·
-~/; Hasta hace poco tiempo, se crefa que los humanos adultos carecian de tejido
. /~diposo pardo. Sin embargo, recientes estudi.os han establecido que los adultos,
~· especialmente las mujeres, tienen tejido adipose pardo en el cuello y en la parte
superior del t6rax que se activan par el mo (Figura 18.42). La obesidad conduce a
una disminuci6n del tejido adiposo pardo .

. ~yAdem::i' de la.UCP,..1, se han descubiertQ..ob:as-dos.protefnas.desacoplantes

s .. • •·••'"••of , ....,....... ..._~ ''•• • I••,,._ • ._.,.._,._ ,,.,, .., '

· .La UCP-2, cuya secuencia es identica a la de UCP-1 en un56o/o, sehaencon-

trado en una amplia gama de tejidos, La UCP-3 (identica en un 57% a UCP-1 yen.
un 73% a UCP-2) se localiza en el miisculo esqueletico y en la grasa parda, Esta
familia de-proteinas desacoplantes, especialmente UCP-2 y UCP-;3, pueden des-
ernpefiar un papel en la homeostasis energetica, De hecho, en ratones yen huma- -
nos, los genes de UCP-2 y UCP-3 se encuentran en regiones del cromosomaque se
han relacionado con la obesidad, lo que refuerza la idea de que podrian representar
una forma de regulaci6n del peso corporal.

.-. , ..

··.~ :

Figura 18.42 EI tejido adipose pardo se revela en Ia expcsidon al frfo, 8 resultado de! esciner
PET-CT muestra la toma y distribuden de 18.Rluorodesoxiglucosa (18F-FDG) en el tejido adipose, El mode!o
de aistribuci6n de! 18F-FOG en el mismo padente es extracrdinariamente diferente ep oondiciones termicas
normales (izquierda) y·despues de la exposici6n al frfo (derecha). [Cortesra de Woutervan Marken
Lichtenbelt Copyright 2009 Massachusetts Medical Society. Todos las derechos reservados{

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