Scientia et Technica Año XVIII, No xx, Mesxx de Añoxx. Universidad Tecnológica de Pereira.

ISSN 0122-1701 1

Propiedades físicas y químicas de los

aminoácidos. Cromatografía de capa fina.
Physical and chemical properties of amino acids. Fine coats chromatography.

Autor 1: Juan Esteban Loaiza 2: Laura Vanessa Cardona Duque

Escuela de Química, Universidad Tecnológica de Pereira, Pereira, Colombia
Correo-e: estebanloaiza@utp.edu.co; lvcardona09@utp.edu.co

Resumen— En el presente estudio se llevaron a cabo diferentes Los aminoácidos son importantes en la alimentación humana,
ensayos cualitativos para la identificación de las principales adquiriendo cantidades adecuadas de 10 aminoácidos esenciales
propiedades fisicoquímicas de diferentes aminoácidos que las porque el ser humano y los demás animales superiores pueden
relaciona con su función y estructura, realizando también la sintetizar estos aminoácidos en las proporciones necesarias para
cormatografía en capa fina con el fin de llevar a cabo y conocer
mantener el crecimiento infantil o conservar la salud en los
la separación de los aminoácidos.
adultos. En forma de proteínas, los aminoácidos realizan una
multitud de funciones estructurales, hormonales y catalíticas
Palabras clave – Aminoácidos, propiedades, cromatografía. esenciales para la vida. Por ello, trastornos graves pueden ser
Abstract— In the present study different qualitative tests were causados por defectos genéticos en el metabolismo de los
carried out for the identification of the main physicochemical aminoácidos.
properties of different amino acids that related them to their
function and structure, also performing the thin layer
cormatography in order to carry out and know the separation of
the amino acids.

Key Words — Amino acids, properties, chromatography.

I. INTRODUCCIÓN

Los aminoácidos son las unidades estructurales básicas de las

proteínas. Hay 20 L-a -aminoácidos que forman las unidades
monoméricas, que conforman a las proteínas. Al principio se
estudiaron los aminoácidos libres procedentes de las proteínas.
El primer aminoácido descubierto en las proteínas fue la
asparagina (1806), encontrada por primera vez en el espárrago,
y el último en descubrirse fue la treonina (1938). El tipo de
aminoácido, el orden en que se unen y su relación espacial
mutua dictan las estructuras tridimensionales y propiedades
biológicas de las proteínas simples, y son determinantes
importantes de la estructura y función de proteínas complejas,
que contienen además de aminoácidos, carbohidratos, lípidos,
ácidos nucleicos, etc. [1]
Figura 1. Estructura general de un aminoácido.[2]
Figura 2. 20 aminoácidos principales.
Además de sus actividades como proteínas, los aminoácidos y
sus derivados participan en funciones intracelulares diversas:
transmisión nerviosa, regulación del desarrollo celular, y en la
biosíntesis de porfirinas, purinas, pirimidinas, urea, etc. Los
aminoácidos de péptidos de peso molecular bajo actuan como
hormonas, y tanto lod D como los L aminoácidos están
presentes en los antibióticos polipeptídicos elaborados con
microorganismos.
Como su nombre lo indica, los aminoácidos poseen 2 grupos
funcionales característicos: el grupo amino –NH2 y el grupo
carboxílico –COOH. Además posee un grupo distintivo R
(cadena lateral) unido al átomo de carbono a (el grupo –NH2 se
encuentra siempre en posición a con respecto al grupo

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carboxilo). El representante más simple es la glicina H2N-CH2-
COOH . Con excepción de la glicina (R=H), los demás
aminoácidos presentan actividad óptica (Ca asimétrico).
SOlamente los aminoácidos L son constituyentes de
lasproteínas.
Los aminoácidos en disolución, a pH neutro, son
predominantemente iones dipolares (zwitteriones), en vez de
moléculas no iónicas. En la forma dipolar de un aminoácidos el
grupo amino está protonado (-NH3+) y el grupo carboxilo está
disociado (-COO-). El estado de ionización de un aminoácido
varía de acuerdo al pH.
Los aminoácidos se pueden agrupar según las propiedades de
sus grupos R, en especial su polaridad o tendencia a interactuar
con el agua a pH biológico. La polaridad de los grupos R varía
enormemente desde totalmente apolar o hidrofóbico a altamente
polar o hidrofílico. Existen 5 clases principales de aminoácidos:
 Con grupos R apolares y alifáticos.
 Con grupos R aromáticos (generalmente apolares).
 Con grupos polares sin carga.
 Con grupos cargados negativamente.
 Con grupos cargados positivamente.
II. CONTENIDO
1. Solubilidad
Generalmente, los 20 aminoácidos esenciales que constituyen
las proteínas son de característica hidrofilia, es decir, son
completamente solubles en agua gracias a los grupos amino y
carboxilo que poseen esta biomoléculas capaces de formar
puentes de hidrógeno con el solvente universal.
Se determinó la solubilidad del aminoácido glicina, el más
simple y el único no quiral presente en las células, para
determinar su solubilidad en agua, etanol, HCl 0.1 M y
cloroformo obteniendo los resultados contenidos en la tabla 1.
HCl
Solubilidad Agua Etanol CHCl3
0.1M
Glicina + + + -
Tabla 1. Solubilidad de la glicina en diferentes medios.
Los resultados muestran que la glicina presenta completa
solubilidad en los solventes polares próticos (agua y etanol)
indicando que como se esperaba, se forman los puentes de
hidrógeno necesarios para su disolución. Semejante ocurre
con el ácido clorhídrico que se ioniza completamente en agua,
no influyendo en el efecto que el solvente ejerce sobre el
aminoácido en cuestión.
Contrario a lo anterior, la glicina fue completamente
insoluble en el medio compuesto por triclorometano
(cloroformo). Lo anterior se debe a que el solvente es de
característica polar aprótica por lo que no se forman los
puentes de hidrógeno necesarios para la miscibilidad de estos;
además la glicina presenta un grupo R contrario a la
polaridad del solvente.
2. Reacción con la Ninhidrina
La reacción de muestras biológicas con la ninhidrina ha sido
ampliamente usada para la identificación de aminoácidos
presente. Según Teijón (1) la reacción entre este reactivo con
los aminoácidos da lugar a sustancias coloreadas debido a que
la ninhidrina descarboxila y desamina el aminoácido gracias a
su poder oxidante, en donde la ninhidrina reducida reacciona
con la ninhidrina no reducida y con el amoniaco resultante de
la desaminación del aminoácido formando complejos
coloreados.
La experiencia se llevó a cabo utilizando seis aminoácidos
proporcionados: Fenilalanina, glicina, tirosina, arginina, ácido
aspártico e hidroxiprolina, a los cuales se les ajustó el pH con
hidróxido de sodio hasta neutralidad. A lo anterior se le
adicionó 5 gotas de reactivo de ninhidrina y se llevó a baño
maría obteniendo los siguientes resultados.
Fenilalanina Glicina Tirosina
Posición 3 2 No
de Ácido Arginina Hidroxiprolina
reacción aspártico
5 4 1
Tabla 2. Resultados de la reacción la Ninhidrina.
Los resultados de la prueba para 5 aminoácidos concordaron
con lo esperado según la teoría al dar formación de
compuestos coloreados (fig 3), en donde el tiempo de reacción
varió según el aminoácido, siendo la hidroxiprolina el
aminoácido de más rápida reacción y el ácido aspártico el más
lento.
Sin embargo, el resultado de la prueba con la tirosina no
presentó algún color a simple vista, siendo contrario a lo
expresado por la literatura. La tirosina, al igual que los 20
aminoácidos presentes en la célula, es un α-aminoácido, por lo
que la prueba debió de resultar positiva, por lo cual se deduce
que al necesitar una gran cantidad de solución alcalina para la
neutralización del aminoácido, la concentración de este en la
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solución disminuyó notablemente resultando en un falso a arginina, 5 a ácido aspártico y 6 a hidroxiprolina. El
negativo de la prueba en donde sumado al tiempo de revelado de la placa se realizó usando solución de ninhidrina
calentamiento en el baño maría, que pudo haber sido expuesta a calor para la formación del complejo coloreado
insuficiente. La utilización de una base más concentrada igual al de la prueba de ninhidrina, en donde se obtuvo el
podría llevar a mejores resultados. cromatograma mostrado en la (Fig 3)

Figura 3. De izquierda a derescha: äcido aspáritco, Tirosina, Fenilalanina,

Arginina, Hidroxiprolina y Glicina.
Figura 4. Placa de sílica gel revelada después de la siembra de los
aminoácidos en estudio.

3. Prueba del Nitroprusiato

Se observa que aunque no resulto en un buena cromatograma,
El reactivo de nitroprusiato reacciona con los grupos tioles debido a un posible exceso de solución de ninhidrina que
presentes en los aminoácidos como la cistina y la cisteína para llevo a una dispersión de los aminoácidos en la placa, el
formar un compuesto de color rojo intenso en un medio tiempo de retención de cada aminoácido varía, detectándose
amoniacal. que la fenilalanina fue el aminoácido que más corrió en la
placa debido a que su cadena “R” compuesto por un grupo
La prueba se llevó a cabo utilizando los seis aminoácidos fenil le confiere polaridad similar a la de la fase móvil
anteriormente usados (Fenilalanina, glicina, tirosina, arginina, utilizada.
ácido aspártico e hidroxiprolina), en donde se sometió a
reacción con 0.5 mL de nitroprusitato con 0.5 mL de Contrariamente, el ácido aspártico fue el aminoácido que
hidróxido de amonio. menos corrió en la placa ya qué debido a la fuerte polaridad
de la sílica gel utilizada como fase estacionaria se pudo haber
El resultado de la prueba fue el esperado: Negativo para todos; producido una fuerte atracción con el grupo carboxilo
ya que, como se indicó anteriormente, el nitroprusiato sólo presente cómo grupo R en la molécula del ácido aspártico.
reacciona con la cistina y la cisteína.

III. CONCLUSIONES
4. Cromatografía de capa fina
 Los aminoácidos adquieren sus propiedades
fisicoquímicas debido al grupo R que poseen en su
La cromatografía en capa fina, es un método de identificación estructura, en lo cual interfiere el impedimento estérico
por separación de diferentes compuestos debido a su tiempo que conlleva, sea a que reaccione lento o rápido o
de retención. En la identificación de aminoácidos, este método simplemente que no reaccione con ciertas pruebas,
se basa en la polaridad que le confiere el grupo “R” basado en permitiendo esto hacer la determinación cualitativa con
el espacio recorrido en la placa cromatográfica. respecto a qué aminoácido pueda referirse.

Se llevó a cabo la experiencia usando como fase móvil una

solución medianamente polar compuesta por butanol, acetona, REFERENCIAS
ácido acético y agua en proporción 35:35:10:20; y como fase [1] Aminoácidos.
estacionaria una placa de sílica gel. http://acemucsc.galeon.com/articulos/Bioquimica/aminoacido
s.htm
El sembrado de la muestra se realizó por micropipetas en [2] https://www.definicionabc.com/salud/aminoacidos.php
donde 1 corresponde a fenilalanina, 2 a glicina, 3 a tirosina, 4

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1. Las notas de pie de página deberán estar en la página donde se citan. Letra Times New Roman de 8 puntos