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live/movie/el-impacable-2017/Resumen

La reproducción es una propiedad fundamental de todos los sistemas vivos. Es un proceso que puede

observarse en diferentes niveles: los organismos se duplican por medio de la reproducción sexual o

asexual, las células por división celular y el material genético por replicación del DNA (ácido

desoxirribonucleico). La maquinaria que replica el DNA también tiene otra capacidad: la reparación

del material genético dañado. Estos dos procesos (replicación y reparación del DNA), son los temas

de este capítulo. Se presume que la capacidad de autor replicación fue una de las primeras propiedades

importantes que aparecieron durante la evolución de las formas de vida primitiva más tempranas. Sin

la capacidad de propagarse, cualquier molécula biológica primitiva estaba destinada a desaparecer.

Los portadores tempranos de la información genética fueron tal vez las moléculas de RNA (ácido

ribonucleico), capaces de autoreplicarse. A medida que la evolución progresó y las moléculas de RNA

se reemplazaron por moléculas de DNA como material genético, el proceso de la replicación adquirió

complejidad y requirió un gran número de componentes auxiliares. En consecuencia, a pesar de que

una molécula de DNA contiene la información para su propia duplicación, carece de la capacidad

para realizar esta actividad por sí misma. Como Richard Lewontin expresó, “la imagen común del

DNA como molécula autorreplicable se describe de mejor forma como una carta que se autoduplica.

La carta necesita una fotocopiadora; el DNA necesita una célula”. A continuación, se describe la

forma en que las células llevan a cabo esta actividad.

 REPLICACION DE ADN
1. Introducción:
El proceso de replicación de ADN es el mecanismo que permite al ADN duplicarse (es decir,
sintetizar una copia idéntica). De esta manera de una molécula de ADN única, se obtienen dos o más
"réplicas" de la primera. Esta duplicación del material genético se produce de acuerdo con un
mecanismo semiconservador, lo que indica que los polímeros complementarias del ADN original, al
separarse, sirven de molde cada una para la síntesis de una nueva cadena complementaria de la cadena
molde, de forma que cada nueva doble hélice contiene una de las cadenas del ADN original. Gracias
a la complementación entre las bases que forman la secuencia de cada una de las cadenas, el ADN
tiene la importante propiedad de reproducirse idénticamente, lo que permite que la información
genética se transmita de una célula madre a las células hijas y es la base de la herencia del material
genético.

La molécula de ADN se abre como una cremallera por ruptura de los puentes de hidrógeno entre
las bases complementarias puntos determinados: los orígenes de replicación.
Las proteínas iniciadoras reconocen secuencias de nucleótidos específicas en esos puntos y facilitan
la fijación de otras proteínas que permitirán la separación de las dos hebras de ADN formándose
una horquilla de replicación. Un gran número de enzimas y proteínas intervienen en el mecanismo
molecular de la replicación, formando el llamado complejo de replicación o replisoma.
Estas proteínas y enzimas son homólogas en eucariotas y arqueas, pero difieren en bacterias.

La estructura que propusieron Watson y Crick en 1953 para el DNA incluía un mecanismo que sugería
su “autoduplicación”. Las dos cadenas de la doble hélice se mantienen juntas por medio de puentes
de hidrógeno entre las bases. De manera individual, tales puentes son débiles y pueden romperse con
facilidad. Watson y Crick supusieron que la replicación ocurría por separación gradual de las cadenas
de la doble hélice algo muy semejante a la separación de las dos mitades de una cremallera. Como
las dos cadenas son complementarias, cada cadena contiene la información requerida para la
construcción de la otra cadena. Una vez que las cadenas se separan, cada una puede actuar como
plantilla para dirigir la síntesis de la cadena complementaria y restaurar el estado de doble cadena
2. Características Generales de ADN
 Es una cadena molecular, quiere decir que es una sustancia constituida por distintos tipos de
moléculas sencillas ligadas entre sí para así ir formando cadenas.
 Es bastante largo y extremadamente delgado. Si aumentáramos cien veces el tamaño del núcleo
celular alcanzaría el tamaño de la punta de un alfiler, mientras que el ADN plegado en ese mismo
núcleo alcanzaría la longitud de un campo de fútbol.
 Hay cuatro tipos de eslabones, esos son las moléculas denominadas nucleótidos en la cadena. Sus
nombres son: ácido adenílico (adenina), ácido guanílico (guanina), ácido citidílico (citosina) y
ácido timidílico (timina) y las abreviaturas, A, G, C, T, para cada una.

3. Semiconservadora
En cada una de las moléculas hijas se conserva una de las cadenas originales, y por eso se dice que la
replicación del ADN es semi conservadora. Hasta que finalmente se pudo demostrar que la
replicación es semiconservadora, se consideraron tres posibles modelos para el mecanismo de la
replicación:

 Semiconservadora (modelo correcto). En cada una de las moléculas hijas se conserva una de las
cadenas originales.
 Conservadora. Se sintetiza una molécula totalmente nueva, copia de la original.
 Dispersora, o dispersante. Las cadenas hijas constan de fragmentos de la cadena antigua y
fragmentos de la nueva

El experimento de Meselson y Stahl en 1958 permitió demostrar que el mecanismo real se ajusta a la
hipótesis de replicación semiconservadora. Para ello se hicieron crecer células de Escherichia coli en
presencia de nitrógeno-15, un isótopo del nitrógeno más pesado de lo habitual. En consecuencia, el
isótopo se incorporó a las cadenas de ADN que se iban sintetizando, haciéndolas más pesadas.

Una vez conseguido el primer objetivo, las células fueron transferidas a un medio que
contenía nitrógeno-14, es decir, un medio más ligero, donde continuaron su crecimiento (división
celular, que requiere la replicación del ADN). Se purificó el ADN y se analizó mediante
 una centrifugación en gradiente de cloruro de cesio, en donde hay más densidad en el fondo
del tubo que en la parte media del mismo.

En la primera generación se obtuvo una única banda de ADN con densidad intermedia. En la segunda
generación se obtuvieron dos bandas, una con densidad ligera y otra con densidad intermedia o
híbrida. En la tercera generación se obtuvieron dos bandas, una ligera (con una abundancia del 75 %)
y otra intermedia (con el 25 % restante).

La banda intermedia o híbrida representa una molécula de ADN que contiene una cadena pesada
(original) y otra ligera (recién sintetizada). Las cadenas ligeras representan una molécula de ADN en
la que las dos cadenas han sido sintetizadas (no existían aún cuando las células se pusieron en
presencia de nitrógeno-15).

El hecho de que cada vez haya más moléculas ligeras y se mantenga el número de moléculas
intermedias demuestra que la replicación del ADN es semiconservadora. Si fuera conservadora,
aparecería siempre una banda pesada y el resto ligeras Si fuera dispersante sólo aparecerían bandas
híbridas de densidad intermedia en todas las generaciones.

4. Secuencial y bidireccional desde puntos fijos

Los orígenes de replicación son los puntos fijos a partir de los cuales se lleva cabo la replicación, que
avanza de forma secuencial formando estructuras con forma de horquilla. Por otro lado, la replicación
se lleva a cabo bidireccionalmente, es decir, a partir de cada origen se sintetizan las dos cadenas en
ambos sentid

4.1. El Origen de replicación

La cantidad de ADN que se puede sintetizar a partir de un único origen de replicación se
denomina replicón o unidad funcional de replicación. El genoma bacteriano es un replicón única
circular. En organismos eucarióticos, la replicación del ADN se inicia en múltiples orígenes a la vez
(hay uno cada 20 kb aproximadamente), es decir, hay varios replicones.2
 Los experimentos realizados por Cairns (1963) con bacterias Escherichia coli permitieron
determinar la existencia de ese punto fijo u origen de replicación a partir del cual el genoma empezaba
a replicarse. Los experimentos consistían en mantener un cultivo de E. coli creciendo en un medio
que contenía timidina tritiada (timina marcada con tritio), de forma que el ADN quedara marcado
radiactivamente pudiendo efectuarse una autorradiografía. A continuación, se observaba
al microscopio. Los resultados indicaban que la replicación en E. coli se iniciaba en un punto concreto

4.2. Secuencialidad
Sueoka y Yoshikawa (1963) realizaron estudios genéticos de complementación de mutaciones que
permitieron determinar que desde los orígenes la replicación avanza de forma secuencial. Trabajaron
con Bacillus subtilis porque era posible obtener cultivos sincronizados de forma que todas
las células del cultivo estuvieran en la misma fase del ciclo celular. El método consistía en
la conjugación bacteriana de cepas silvestres con cepas mutantes incapaces de sintetizar
determinados aminoácidos. Conociendo la localización de los genes que codifican las proteínas
implicadas en la síntesis de los diferentes aminoácidos en el cromosoma bacteriano, y haciendo crecer
las bacterias receptoras en un "medio mínimo" (donde sólo pudiesen crecer las que hubieran recibido
alguno de estos genes), al extraer ADN a diferentes tiempos se observó que, tras la última extracción
aparecía con mayor frecuencia el gen implicado en la síntesis de uno de los aminoácidos (el
correspondiente a la "posición 1"), que el gen adyacente implicado en la síntesis de otro aminoácido
("posición 2"). De la misma forma, el gen que ocupaba la "posición 3" aparecía con menor frecuencia
que el que ocupaba la "posición 2", y así sucesivamente.

Como los primeros genes en replicarse en la bacteria donadora serían los primeros en transferirse, el
experimento permitió demostrar, a partir de las frecuencias relativas de los diferentes genes en las
bacterias receptoras, que la replicación sigue un orden (es secuencial).

4.3. La Replicación Avanza en forma de horquilla

Debido a que en la célula ambas cadenas de la doble hélice de ADN se duplican al mismo tiempo,
éstas deben separarse para que cada una de ellas sirva de molde para la síntesis de una nueva cadena.
Por eso, la replicación avanza con una estructura en forma de horquilla formándose una burbuja u ojo
 de replicación (también llamada estructura θ cuando el ADN es circular debido a la similaridad entre
la letra griega y la forma que adopta el cromosoma bacteriano en estados intermedios de replicación,
no obstante pudiendo aparecer estructuras alternativas), que avanza en dirección a la región de ADN
no duplicado dejando atrás los dos moldes de ADN de cadena simple donde se está produciendo la
replicación.

4.4. Bidireccionalidad
El movimiento de la horquilla es bidireccional en la mayoría de los casos, es decir, a partir de un
punto se sintetizan las dos cadenas en ambos sentidos. Esto ocurre en la mayoría de los organismos,
pero se dan excepciones en algunos procariontes debido a que los mecanismos de replicación que
tienen lugar dependen de la propia estructura de su material hereditario (si el ADN es circular, lineal,
bicatenario o monocatenario).Así, en casos particulares como el ADN mitocondrial,
algunos plásmidos y algunos genomas monocatenarios de fagos pequeños, la replicación se da
unidireccionalmente pudiendo haber uno o dos orígenes de replicación.

No obstante, la replicación se puede considerar, de forma general, bidireccional.

La evidencia experimental del crecimiento bidireccional de la hebra de ADN viene dada por una
técnica basada en el marcaje radiactivo del ADN usando timidina marcada con tritio. Primero se
añade timidina sin marcar y luego marcada con tritio; siguiendo el rastro de tritio se observa hacia
dónde se ha replicado la molécula de ADN. También se puede, mediante el recuento de copias
de genes marcadores, determinar si la replicación es unidireccional o bidireccional. Otras técnicas se
basan en medir la distancia desde los ojos de replicación hasta los extremos de un ADN lineal (o
circular convertido en lineal mediante enzimas de restricción).

5. SEMIDISCONTINUA
La replicación siempre se produce en sentido 5' → 3', siendo el extremo 3'-OH libre el punto a partir
del cual se produce la elongación del ADN. Esto plantea un problema, y es que las cadenas tienen
que crecer simultáneamente a pesar de que son antiparalelas, es decir, que cada cadena tiene el
extremo 5' enfrentado con el extremo 3' de la otra cadena. Por ello, una de las cadenas debería ser
sintetizada en dirección 3' → 5'.
 Este problema lo resolvieron los científicos japoneses Reiji Okazaki y Tsuneko Okazaki en la década
de 1960, al descubrir que una de las nuevas cadenas de ADN se sintetiza en forma de trozos cortos
que, en su honor, se denominan fragmentos de Okazaki. Su longitud suele variar entre 1000 y
2000 nucleótidos en las bacterias y entre 100 y 400 nucleótidos en eucariontes.

La cadena que se sintetiza en el mismo sentido que avanza la horquilla de replicación se denomina
hebra adelantada (en inglés, leading strand, que a veces se traduce por líder o conductora) y se
sintetiza de forma continua por la ADN polimerasa, mientras que la que se sintetiza en sentido
contrario al avance se denomina hebra rezagada o retrasada (en inglés, lagging strand), cuya síntesis
se realiza de forma discontinua teniendo que esperar a que la horquilla de replicación avance para
disponer de una cierta longitud de ADN molde.

6. ADN polimerasa
La ADN polimerasa es la enzima que cataliza la síntesis de la nueva cadena de ADN a partir
de desoxirribonucleótidos y de la molécula de ADN plantilla o molde que es la que será replicada. La
enzima copia la cadena de nucleótidos de forma complementaria (A por T, C por G) para dar a cada
célula hija una copia del ADN durante la replicación.

7. Modo de operación
En cada horquilla de replicación, el ADN polimerasa y otras enzimas sintetizan dos nuevas cadenas
de ADN que son complementarias respecto a las 2 cadenas originales. Durante este proceso, el ADN
polimerasa reconoce una base nucleotídica no apareada de la cadena original y la combina con un
nucleótido libre que tiene la base complementaria correcta. Luego, el ADN polimerasa cataliza la
formación de nuevos enlaces covalentes que ligan el fosfato del nucleótido libre entrante con el azúcar
del nucleótido previamente agregado en la cadena hija en crecimiento. De esta forma, el ADN
polimerasa sintetiza el esqueleto de azúcar-fosfato de la cadena hija

El ADN polimerasas también realizan otras funciones durante el proceso de replicación. Además de
participar en la elongación, desempeñan una función correctora y reparadora gracias a su
 actividad exonucleasa 3', que les confiere la capacidad de degradar el ADN partiendo de un extremo
de éste. Es importante que existan estos mecanismos de corrección ya que de lo contrario los errores
producidos durante la copia del ADN darían lugar a mutaciones

8. Proceso General
La helicasa rompe los puentes de hidrógeno de la doble hélice, abriendo las dos hebras, permitiendo
el avance de la horquilla de replicación.

La topoisomerasa relaja la tensión provocada por el superenrrollamiento del ADN al abrirse las dos
hebras.

Las proteínas SSB estabilizan las cadenas abiertas y las mantienen separadas una de otra.

El cebador fragmentos de ARN que se unen a la cadena molde por puentes de hidrógeno para que el
ADN polimerasa III reconozca donde debe unirse para empezar a añadir nucleótidos.

La ADN polimerasa III sintetiza la cadena complementaria de forma continua en la hebra adelantada
y de forma discontínua en la hebra rezagada, ya que solo puede sintetizar en dirección 5'→ 3'.

La ADN polimerasa I reemplaza los cebadores de ARN por nucleótidos de ADN.

La ARN primasa sintetiza el cebador de ARN necesario para la síntesis de la cadena complementaria
a la cadena rezagada.

La ADN ligasa une los fragmentos de Okazaki.

El proceso se puede dividir en 3 fases: iniciación, elongación y terminación

8.1. Indicación
Mediante consumo de ATP en dirección a la horquilla de replicación, es decir, en dirección 3' → 5'
en la hebra rezagada y 5' → 3' en la hebra adelantada, la helicasa actúa rompiendo los puentes de
hidrógeno que mantienen unida la doble hélice.3 El siguiente conjunto de proteínas reclutadas son las
denominadas proteínas SSB encargadas de la estabilización del ADN monocatenario generado por la
acción de las helicasas, impidiendo así que el ADN se renaturalice o forme de nuevo la doble hélice,
de manera que pueda servir de molde. Estas proteínas se unen de forma cooperativa, por lo que su
unión al DNA conforme avanza la helicasa es rápida. Por otro lado, conforme las helicasas van
avanzando se van generando superenrollamientos en la doble cadena de ADN por delante de la
horquilla y si éstos no fueran eliminados, llegado a un punto el replisoma ya no podría seguir
 avanzando. Las topoisomerasas son las enzimas encargadas de eliminar los superenrollamientos
cortando una o las dos cadenas de ADN y pasándolas a través de la rotura realizada

8.2. Elongación
En el siguiente paso, el ADN Pol III cataliza la síntesis de las nuevas cadenas
añadiendo nucleótidos sobre el molde. Esta síntesis se da bidireccionalmente desde cada origen, con
dos horquillas de replicación que avanzan en sentido opuesto. Cuando el avance de dos horquillas
adyacentes las lleva a encontrarse, es decir, cuando dos burbujas se tocan, se fusionan, y cuando todas
se han fusionado todo el cromosoma ha quedado replicado.

Puesto que el ADN Pol III necesita de un extremo 3'-OH libre, es necesario que un ARN
primasa catalice la formación de un fragmento corto específico de ARN llamado cebador, que
determinará el punto por donde la ADN polimerasa comienza a añadir nucleótidos. Así, durante la
síntesis, en cada horquilla de replicación se van formando dos copias nuevas a partir del cebador
sintetizado en cada una de las dos hebras de ADN que se separaron en la fase de iniciación, pero
debido a la unidireccionalidad de la actividad polimerasa de la ADN Pol III, que sólo es capaz de
sintetizar en sentido 5´ → 3', la replicación sólo puede ser continua en la hebra adelantada; en la hebra
rezagada es discontinua, dando lugar a los fragmentos de Okazaki.

La mitad del dímero de la ºADN Pol III sintetiza la hebra adelantada y la otra mitad la hebra
rezagada.3 La elongación de la hebra rezagada ocurre por medio del modelo del trombón.

En la hebra rezagada, cuando la ADN Pol III hace contacto con el extremo de otro fragmento de
Okazaki contiguo, el cebador de ARN de éste es eliminado y los dos fragmentos de Okazaki de ADN
recién sintetizado son unidos. Una vez se han juntado todos se completa la doble hélice de ADN. La
eliminación de cebadores también se da en la hebra conductora, de síntesis continua, pero debido a
que en ésta hay un solo cebador es un proceso que sólo tiene lugar una vez, mientras que en la hebra
rezagada se dará tantas veces como fragmentos de Okazaki haya.

En la eliminación del cebador (también denominado iniciador o primer) intervienen dos enzimas: por
un lado la ADN Pol I, que va eliminando el ARN con su actividad exonucleasa 5' → 3' y
simultáneamente rellenando con ADN mediante su actividad polimerasa 5' → 3' (proceso
denominado nick-traslation). Al final queda rotura (o "mella") entre el extremo 3'-OH libre y el
fosfato 5' de la cadena sintetizada; por último, la ADN ligasasella esa rotura catalizando la reacción
de condensación entre el grupo fosfato y el OH de la desoxirribosa del nucleótidocontiguo,
completando el enlace fosfodiéster; para ello, es preciso hidrolizar una molécula de ATP.

Nota: diversos autores difieren en los enzimas implicados en esta etapa. Para algunos no es la propia
ADN Pol I la que rellena el hueco tras eliminar el primer, sino que lo hace la ADN Pol III (la misma
que polimeriza el resto de la cadena). Del mismo modo, algunos autores siguen empleando el
término ribonucleasa o (RNasa) para referirse a la ADN Pol I en esta etapa, ya que hasta hace poco
se desconocía que la propia ADN Pol I tenía la capacidad exonucleasa 5' → 3, y se pensaba que esto
lo realizaba otro enzima, que recibía este nombre genérico

8.3 Terminación (De los genomas lineales)

El final de la replicación se produce cuando el ADN polimerasa III se encuentra con una secuencia
de terminación. Se produce entonces el desacople de toda la replisoma y la finalización de la
replicación.

Reparacion del ADN

La reparación del ADN es un conjunto de procesos por los cuales una célula identifica y corrige daños
hechos a las moléculas de ADN que codifican el genoma. En las células humanas, tanto
las actividades metabólicas como los factores ambientales, como los rayos UVA o la radiactividad,
pueden causar daños al ADN, provocando hasta un millón de lesiones moleculares por célula por
día. Muchas de estas lesiones causan daños estructurales a la molécula de ADN, y pueden alterar o
eliminar la capacidad de la célula de transcribir el gen que codifica el ADN afectado. Otras lesiones
producen mutaciones potencialmente nocivas en el genoma de la célula, lo que afecta la supervivencia
de sus células hijas a la hora de la mitosis. Por consiguiente, el proceso de reparación del ADN es
constantemente activo, respondiendo a daños a la estructura del ADN.
La velocidad de la reparación del ADN depende de muchos factores, como el tipo de célula, su edad,
y el ambiente extracelular. Una célula que haya acumulado una gran cantidad de daños en el ADN, o
que no pueda reparar eficazmente los daños producidos en su ADN, puede entrar en uno de tres
estados posibles:

-Un estado irreversible de inactividad, llamado senescencia.

-Suicidio celular, llamado apoptosis o muerte celular programada.
-Carcinogénesis, o formación de cáncer.
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6a_capitulo_muestra.pdf+&cd=1&hl=es&ct=clnk&gl=pe

https://es.wikipedia.org/wiki/Replicaci%C3%B3n_de_ADN