7. Explica que es un sistema en equilibrio líquido-vapor.

10. ¿El sistema era un sistema abierto o cerrado? Explica.

11. Si el sistema fuera abierto ¿se alcanzaría el equilibrio líquido-vapor? ¿cuándo se alcanzaría
el equilibrio? Explica

Autoclave
En el laboratorio de Microbiología es imprescindible trabajar con material y soluciones estériles con objeto de
que los resultados que se obtengan correspondan al microorganismo o microorganismos que están presentes
en la muestra en estudio y no a contaminantes que procedentes del medio o los materiales, puedan
desarrollarse y falsear las pruebas. Para ello antes de comenzar el trabajo práctico se esterilizará, junto con
los medios de cultivo, el material que posteriormente va a ser utilizado. Se entiende por esterilización los
procedimientos por los cuales se eliminan todas las formas vivas de microorganismos, sean patógenos o no,
que se hallen en un material. Esta esterilización suele efectuarse con calor húmedo en unos aparatos
denominados autoclaves.

¿Qué es el autoclave?

El autoclave es un instrumento habitual en los laboratorios de Microbiología. Es un sistema cerrado donde se

forma vapor de agua que se somete a una presión elevada, una atmósfera, lo que hace que el agua alcance
una temperatura de 121ºC causando la desnaturalización de enzimas lo que conlleva a la muerte de los
microorganismos y la destrucción de las esporas. Habitualmente, se esteriliza a 121ºC durante 20 minutos.

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El funcionamiento del autoclave

El proceso completo de esterilización en un autoclave se compone de diferentes fases:

1. Fase de purgado: A medida que la resistencia calienta el agua del fondo del calderín, se va
produciendo vapor que desplaza el aire, haciéndolo salir por la válvula de purgado que está abierta.
Esta fase termina cuando se alcanza la temperatura de esterilización.
2. Fase de esterilización: Una vez cerrada la válvula de purgado y alcanzada la temperatura de
esterilización previamente seleccionada se inicia el proceso de esterilización.
3. Fase de descarga: Terminado el proceso de esterilización, deja de funcionar la resistencia
calefactora, con lo que deja de producirse vapor y la presión y temperatura del calderín empieza a
bajar poco a poco.
 Algunas consideraciones para una correcta esterilización del material

1. Para que la esterilización de medios de cultivo sea eficaz, la temperatura y el tiempo seleccionados
deben alcanzarse en todo el líquido.
2. Los recipientes con cierre hermético deben ser introducidos en el autoclave sin cerrar totalmente el
tapón, para facilitar la entrada del vapor durante el proceso. Al vaciar el autoclave después de la
esterilización procederemos a cerrar totalmente estos recipientes.
3. Los recipientes vacíos precisan de un tiempo de esterilización mayor que los recipientes con líquido
en su interior.

Funcionamiento de un autoclave.
EL agua desmineralizada se encuentra inicialmente en un depósito (fig)
ligeramente elevado con el fin de que el agua baje por su propio peso hasta la
cámara. Supongamos un proceso automático.

Cuando iniciamos el ciclo el sistema electrónico da paso a través de la válvula de

llenado v1 a una cierta cantidad de agua al tiempo que se bloquea la puerta.
Secuencialmente se inicia el calentamiento del agua. En este instante la válvula de
purga, de funcionamiento térmico, permanece abierta permitiendo al aire caliente
fluir a su través hacia el exterior. De este modo se llega a desalojar hasta un 25%
del aire interior. Cuando a los 100 ºC el agua comienza a hervir, empieza a
formarse vapor saturado que va abandonando paulatinamente la cámara a través
de la citada válvula, condensándose en el depósito recuperador. Como quiera que
todo este proceso se realiza a 1 bar de presión absoluta (0 bar manométrica),
suponiendo que esa sea la presión atmosférica en ese instante, a medida que
aumenta el vapor formado parte del aire también es expulsado. Una vez que toda
el agua se ha evaporado entonces comienza a incrementarse la temperatura.
Cuando esta alcanza un valor por encima de los 100 ºC la válvula de purga
(también llamada selectora) se cierra y la presión paulatinamente comienza a subir
hasta alcanzar 1 bar en el manómetro a la temperatura de 120 ºC. Aquí el
calefactor comienza a disminuir su emisión con el fin de mantener esta presión. En
este preciso instante arranca el temporizador de ciclo que según el fabricante va
de 8 a 20 minutos. No es preciso decir que la comodidad ahorra tiempo pero el
riesgo lo pide. Es el propio doctor el que debe elegir según su criterio entre unos u
otros.

Una vez completado el ciclo se abre la válvula V2 permitiendo salir el vapor al

depósito de recuperación a través de un serpentín de condensación. Cuando la
presión se iguala a la atmosférica para algunos autoclaves comienza el proceso de
secado pero en todos es posible abrir la puerta y retirar utensilios. No es
recomendable precipitarse en la apertura de la cabina ya que los materiales están
todavía muy calientes y además favorecemos las condensaciones indeseables.
Siempre que un equipo disponga de fase de secado se debe intentar cumplirla.
OMPONENTES DE UNA AUTOCLAVE BÁSICA
Un esterilizador a vapor tiene los siguientes componentes principales:

Recipiente de alta presión con tapa junta.- El envase o recipiente sólido donde el
agua se calentará en los equipos de vapor bajo presión se llama autoclave. El
espacio donde se ponen los objetos a ser esterilizados se llama cámara
esterilizadora. Para evitar escapes entre el recipiente y la tapa el esterilizador
cuenta con una junta entre ambos. Además tiene un mecanismo de cerradura con
tornillos, o caso contrario, un sistema tipo bayoneta compuesta de autoclaves
pequeñas y portátiles.

Válvula de control de presión.- La válvula de control de presión se encuentra sobre

la base para mantener el nivel de vapor deseado. De ser necesario, este permitirá
el escape de cierta cantidad de vapor. En las unidades modernas este instrumento
es un sensor de presión para el vapor y un sensor de temperatura para el calor.

Válvula de seguridad.- Es útil cuando existe la posibilidad que la válvula de control

no funcione bien. Si ello ocurre, no habrá escape del vapor y este podría subir
tanto que podría explosionar. En ese caso, la válvula de seguridad permitirá el
escape del vapor. En algunos países esta válvula de seguridad es obligatoria por
ley.

Mecanismo de expulsión del aire: Llamado también el purgador. Las autoclaves

modernas están equipados con un sistema de expulsión de aire que opera
mediante una pieza o fuelle relleno con una mezcla de agua y alcohol.