ESTUTURA E REPLICAÇÃO DO

DNA
Profª Drª. Glêzia Renata da Silva Lacerda
GENÉTICA HUMANA
gleziarenata@gmail.com
Watson e Crick

• Em 1953, James Dewey Watson e

Francis Crick, conheceram-se em
1951 em um congresso na Itália e
deram início a uma parceria. Usando
análises de difração de raio X de DNA
cristalizado, descobriram que o DNA
nativo consistia em duas longas
cadeias (filamentos) formando uma
hélice bifilamentar.
• Em 25 de abril de 1953, Watson e
Crick publicaram seus resultados em
uma edição da revista
científica Nature - e em 1962
receberam o Prêmio Nobel de
Medicina e Fisiologia, tornando-se
dois dos cientistas mais importantes
da história moderna.
Análise de Difração de Raios-x do
DNA

• Análises por difração de raios X

• Enquanto alguns grupos se dedicavam à
análise química do DNA, ou três estudavam
a estrutura da molécula por meio da
difração de raios-X, uma metodologia que
vinha sendo usada e que estava dando
formidáveis conclusões sobre a estrutura
das proteínas.
• Os resultados mais importantes de difração
de raios-x sobre a molécula de DNA foram
obtidos por Maurice Wilkins (1916-2004) e
Rosalind Franklin (1920 – 1958). Os
resultados obtidos indicavam que o DNA
tinha uma estrutura helicoidal.
 ÁCIDOS NUCLÉICOS

DNA (ácido desoxirribonucléico) – molécula composta por uma sequência de nucleotídeos

ligado um após o outro. Embora possa parecer complicado, o DNA em uma célula é
simplesmente um padrão feito de quatro partes diferentes, chamadas nucleotídeos.
Imagine um conjunto de blocos que possui somente quatro formas, ou um alfabeto com
apenas quatro letras.

O DNA é uma longa fileira desses blocos ou letras. Cada nucleotídeo

consiste em um açúcar (desoxirribose) ligado a um lado a um grupo
de fosfato e ligado ao outro lado para uma base nitrogenada.

Fosfato

Nucleotídeo Desoxirribose

Base Nitrogenada
 ÁCIDOS NUCLÉICOS

RNA (ácido ribonucléico) – São três tipos:

RNAm – RNA mensageiro
RNAr – RNA ribossomal
RNAt – RNA transportador

O RNA é também uma longa fileira desses blocos ou letras. Cada

nucleotídeo do RNA consiste em um açúcar (ribose) ligado a um lado
a um grupo de fosfato e ligado ao outro lado para uma base
nitrogenada.

Fosfato

Nucleotídeo ribose

Base Nitrogenada
 Nucleotídeos

O pareamento das bases de cada fita se dá de maneira padronizada, sempre uma purina com uma
pirimidina, especificamente: adenina com timina e citosina com guanina.
DNA

Em cada fita simples de DNA, o grupo fosfato de um nucleotídeo se liga ao

açúcar do outro nucleotídeo formando uma fita contínua.

Os nucleotídeos do DNA são unidos por ligações

fosfodiéster, com o grupo fosfato do carbono 5’
de um nucleotídeo ligado ao grupo 3’-OH da
desoxirribose do nucleotídeo adjacente.
Tipos de Ligações do DNA e RNA
Tipos de Ligações do DNA e RNA
O DNA fita dupla se forma a partir da ligação entra duas fitas
simples de DNA, onde cada base nitrogenada se ligará ao seu
nucleotídeo correspondente. A ligação é feita através de
pontes de hidrogênio.

Cada cromossomo é composto por uma molécula dupla-fita de DNA.

O DNA consiste de duas cadeias helicoidais de

DNA, enroladas ao longo de um mesmo eixo,
formando uma dupla hélice de sentido
rotacional à direita (Hélice dextrógira). As duas
fitas de DNA estão em direção opostas, isto
significa que são anti-paralelas. O termo anti-
paralelas deve-se ao fato de que uma das fitas
tem a direção exata da sua síntese (5'---3')
enquanto que a outra está invertida (3'----5').
Com base na estrutura de dupla hélice do DNA e nas características de hidrofobicidade
das moléculas, a estrutura do DNA fica da seguinte forma:
* O grupo fosfato e o açúcar (parte hidrofílica) - estão localizados na parte externa
da molécula.
* As bases nitrogenadas (parte hidrofóbica) - estão localizadas na parte interna da
molécula.
Regra de Chargaff da composição
de bases

• Um trabalho realizado por Erwin Chargaff contribuiu fortemente

para que Watson e Crick desvendassem a molécula de DNA.

• Regra de Chargaff:

• 1. A quantidade total de nucleotídeos pirimidínicos (T+C) é sempre igual a

quantidade total de nucleotídeos purínicos (A+G);

• 2. A quantidade de T é sempre igual à de A, e a quantidade de C é sempre

igual à quantidade de G. Mas, a quantidade de A + T não é necessariamente
igual a quantidade de G+C.
A dupla hélice é mantida
unida por duas forças:
• Por pontes de
hidrogênio formadas
pelas bases
complementares
• Por interações
hidrofóbicas, que
forçam as bases a se
"esconderem" dentro
da dupla hélice.
 Curiosidades...

• O DNA humano é constituído por cerca de

3 milhões de bases e cerca de 20.000
genes;

• O DNA de uma célula humana apresenta

um comprimento de quase dois metros;

• A tecnologia pode ser usada para

determinar a ordem de bases em genes,
cromossomos, ou um genoma inteiro. Em
2000, os investigadores concluíram a
primeira sequência completa do genoma
humano (projeto genoma).
REPLICAÇÃO
DO DNA
Replicação

• Processo de síntese de DNA.

• Cada filamento de DNA atua como um molde para a produção de

um novo filamento.
 Replicação

• Replicação semiconservativa: Cada fita do

DNA é duplicada formando uma fita híbrida, 50%
isto é, a fita velha pareia com a fita nova 50%
formando um novo DNA (experimento de 50%
50%
Meselson-Stahl).
Replicação

• A replicação do DNA é
bidirecional, à partir de
uma origem de replicação
ou forquilha de
replicação. A forquilha de
replicação “move-se”
através da fita de DNA;
 (Lagging)

(Leading)
DNA Polimerases

• Enzima que adiciona desoxirribonucleotídeos trifosfatos à

ponta 3’ de uma cadeia crescente de nucleotídeos, usando
como molde um único filamento de DNA que foi exposto
pela deselicoidização.

dATP dGTP dCTP dTTP

1ª Fase: Desenrolamento
Topoisomerase
Quebram momentaneamente o
DNA, fazendo com que este sofra
algumas rotações e em seguida
este mesmo grupo de enzimas
refazem a ligação "quebrada"
Helicase
A helicase ou DNA helicase é
uma enzima que promove a
abertura da hélice de DNA,
separando-o em duas fitas simples
para que possa sofrer replicação
SSB são proteínas que se
juntam a fita do DNA,
impedindo de que ela volte a
se ligar, mantendo a
estabilidade da forquilha de
replicação.
1ª Fase: Desenrolamento

• Ação da DNA polimerase III (5’

→ 3’): responsável pela
polimerização das novas fitas
de DNA. Atua adicionando
nucleotídeos à nova fita de
DNA.
2ª Fase: Síntese Contínua

• A síntese é realizada no sentido da abertura da forquilha de

replicação.
 3ª Fase: Síntese Descontínua

• A síntese é realizada no sentido oposto da abertura da forquilha de replicação.

3ª Fase: Síntese Descontínua

• Primase: enzima acoplada à helicase, que produz um primer para

que seja possível iniciar a replicação da fita descontínua;

• Primer: pequeno fragmento de RNA, com aproximadamente 10

pb, que atua como inicializador, pois se liga ao DNA para que seja
iniciada a síntese de DNA da fita descontínua.
3ª Fase: Síntese Descontínua

• Fragmento de Okazaki: pequenos fragmentos de DNA recém

sintetizados, acoplados a um primer.
3ª Fase: Síntese Descontínua

• DNA polimerase I: é
uma enzima relacionada ao
reparo do DNA. Ela atua
verificando a sequência de
nucleotídeos adicionados pela
DNA polimerase III, onde
houver um nucleotídeo
incorreto, a DNA polimerase I
troca pelo correto.
3ª Fase: Síntese Descontínua

• DNA Ligase: enzima que atua ligando os fragmentos de Okazaki. Liga um

fragmento de DNA a outro, através de ligações fosfodiéster (conecta o átomo
de carbono 5’ de uma desoxirribose ao átomo de carbono 3’ da desoxirribose
adjacente).
Telômeros e Telomerase

São estruturas constituídas por fileiras repetitivas de proteínas e DNA

não codificante que formam as extremidades dos cromossomos. Região
Telômeros
que protege as pontas do DNA do encurtamento e mantém a estabilidade
estrutural do cromossomo.

Replicação dos Telômeros

Grande problema da replicação

Fita Contínua (leading) → A replicação ocorre até a ponta do

DNA;
Fita descontínua (lagging) → necessita do uso de primers.
Quando um primer é removido são perdidas sequências na ponta
do filamento.
Telômeros e Telomerase

Remoção dos Primers

Encurtamento do DNA

Telomerase → É
uma enzima descoberta
por Elizabeth
Blackburn e Carol
Greider em 1985. Esta
enzima adiciona à ponta do
DNA uma sequência de RNA
3’-AAUCCC-5’, que atua
como molde para a unidade
repetida 5’-TTAGGG-3’.
ESTUTURA E REPLICAÇÃO DO
DNA
Profª Drª. Glêzia Renata da Silva Lacerda
GENÉTICA HUMANA
gleziarenata@gmail.com