ASIGNATURA

Histoquímica

DOCENTE

Lic. Angélica Oblitas Guerrero

TEMA

Preparación de fijadores para Histoquímica

CARRERA PROFESIONAL

Tecnología Médica

ALUMNO

Anthonny Aldana Gómez

CICLO
IV

Jaén - Cajamarca
 Practica 03: Preparación de fijadores para Histoquímica

Introducción

Los fijadores son moléculas o mezclas de moléculas en solución que se usan

para preservar las características tisulares lo más parecido posible a su estado
vivo. Permiten que las muestras de tejidos sean conservadas o procesadas en
las diversas técnicas histológicas sin deteriorarse.
Los fijadores químicos son los más frecuentemente empleados, bien
compuestos por un solo tipo de sustancia fijadora o con mezclas de varias de
ellas.
Un fijador tiene como misión:
 Evitar la autolisis debida a los propios enzimas.
 Proteger el corte o la pieza del ataque bacteriano.
 Insolubilizar los componentes celulares que se desean estudiar.
 Preparar a las distintas estructuras para posteriores tratamientos.
 Evitar la disolución de determinados compuestos en el fijador.
 Conservar o provocar determinadas reacciones químicas.
 Mantener las propiedades físicas.

¡Atención! La mayoría de las sustancias fijadoras son tóxicas por inhalación o

por contacto, algunas de ellas cancerígenas. Hay que seguir las indicaciones de
seguridad para su manejo y utilización.

Objetivos
o Conocer los diferentes materiales a usar para preparar formol neutro y
líquido de Bouin.

o Aprender cada uno de los pasos a reliazar para preparar formol neutro y
líquido de Bouin.
1. Materiales

 Agua destilada: el agua destilada es aquella sustancia

cuya composición se basa en la unidad de moléculas de
H2O y ha sido purificada o limpiada mediante destilación.
Esto hace, en teoría, que el agua destilada sea agua
potable, ya que es una sustancia pura.

 Formol comercial al 40%: las disoluciones acuosas al 40%

se conocen con el nombre de Formol, que es un líquido
incoloro de olor penetrante y sofocante; estas disoluciones
pueden contener alcohol metílico como estabilizante.

 Fosfato de sodio monobásico: un químico importante de tu

cuerpo, el fosfato de sodio monobásico, también posee
propiedades altamente deseadas en muchos experimentos
de laboratorio. esta solución amortiguadora ayuda a
controlar las fluctuaciones rápidas del pH.

 Fosfato de sodio dibásico: posee propiedades altamente

deseadas en muchos experimentos de laboratorio, ayuda a
controlar las fluctuaciones rápidas del pH, tanto en tu
cuerpo como en los experimentos de laboratorio. Aunque
pueden ser tóxicas, especialmente en combinación con
otras drogas, las soluciones de fosfato de sodio ayudan a
aliviar los síntomas del estreñimiento

 Solución acuosa saturada de ácido pícrico: se suele usar

del 2 al 15 % de una solución saturada de ácido pícrico.
Preserva bien la estructura celular, no produce retracciones
cuando el tiempo de fijación es óptimo, preserva bien
glucógeno y lípidos. Es un buen fijador para tinciones
generales puesto que tiene efecto mordiente y favorece la
unión de los colorantes.

 Ácido acético glacial: es un ácido de origen natural y se

encuentra en la mayoría de las frutas. Su principal forma
de producción es la fermentación bacteriana, debido a
esto está presente en todos los productos fermentados.
Se le da el nombre de glacial ya que cuando el ácido
acético se congela tiende a precipitarse dejando el agua en
forma de cristales sobre él.
 2. Procedimiento

A. Preparación de formol neutro

 Ponemos 900ml de agua destilada en un Beaker de 1000ml.

 Agregamos 4 gramos de sal monobásica.
 Agregamos 6 gramos de sal dibásica.
 Con la ayuda de una varilla revolvemos la sustancia hasta
disolver completamente las sales.
 Finalmente agregamos 100ml de formol comercial al 40%.

900ml H2O 4g fosfato sodio monobásico + 6g Homogenizar hasta

destilada de fosfato sodio dibásico disolver las sales

100ml de formol al 40% Homogenizar

 B. Preparación de líquido de Bouin

 Ponemos 250ml (25ml) de formol comercial al 40% en un

Beaker.
 Agregamos 750ml (75ml) solución acuosa de ácido pícrico.
 Finalmente agregas 50ml (5ml) de ácido acético glacial.
 Homogeniza.

3. Cuestionario

 ¿Qué ventajas y desventajas presentan el formol como fijador de

Histoquímica?

Ventajas Desventajas

 Es un buen fijador único que determina una  Produce abundantes vapores de

moderado conversación de la estructura tisular. carácter irritante sobre la conjuntiva y
 Posee una velocidad de penetración intermedia mucosa nasal.
entre la de los alcoholes y la del sublimado.
 Posee una relativa capacidad de fijación
 Provoca escasa retracción tisular. sobre las proteínas, los pigmentos que
 Es compatible con la mayor parte de las tinciones contienen hierro y los derivados de la
que se utilizan rutinariamente en Anatomía bilirrubina, a éstos últimos les da una
patológica. coloración verdosa

 Además de los fijadores antes mencionados ¿qué otros fijadores se usan

en histoquímica?

- Etanol, metanol, acetona: fijan por deshidratación y coagulación de las

proteínas, sobre todo las citosólicas. Extraen los lípidos de los tejidos,
pero no afectan a los carbohidratos.

- Cloruro o sulfato de zinc: el cloruro de zinc se utilizó inicialmente como

fijador pero más tarde pasó a ser un componente de mezclas fijadoras.
Se emplea normalmente en combinación con el paraformaldehído.

- Glutaraldehído: es uno de los fijadores más usados. En solución

polimeriza formando dímeros y trímeros. Los grupos aldehídos que
quedan dentro en la molécula polimerizada reaccionan con los grupos
aminos de los aminoácidos de las proteínas, formando puentes entre las
moléculas de los tejidos.

- Tetróxido de osmio: es uno de los fijadores más antiguos, se usa desde

al menos 1865. En solución penetra poco en los bloques de tejido, y se
 recomiendan tamaños no mayores de 0.5 o 1 mm. Se puede usar tanto
en solución como en vapor.

4. Conclusiones

Logramos reconocer y diferenciar los diferentes materiales que

serían empleados en la preparación de formol neutro.

Logramos realizar con éxito la preparación de formol neutro

siguiendo uno a uno los pasos indicados por la docente.
 5. Linkografía

https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/protocolos/s-fijador-FAA.php

https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/2-fijadores.php

http://www.euita.upv.es/varios/biologia/tecnicas_de_histologia_vegetal/Documentos/Fijacio
n.htm

https://definicion.de/agua-destilada/

http://www.oxidial.com.ar/es/productos/liquidos/formol-40-_B.2.3.html

https://muyfitness.com/que-es-el-fosfato-de-sodio-monobasico_13120653/

https://www.quiminet.com/articulos/acido-acetico-glacial-usos-y-aplicaciones-2587611.htm

http://michellesanchez-th.blogspot.pe/2016/02/formol.html