“AÑO DEL BUEN SERVICIO AL CUIDADANO “

“UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA”

FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES

DEPARTAMENTO ACADEMICO DE MANEJO

FORESTAL Y MEDIO AMBIENTE

CURSO : ANATOMIA DE LA MADERA

PRACTICA : 04

TITULO : MICROTECNIA: PREPARACION DE LAMINAS

CON CORTES HISTOLOGICOS PARA IDENTIFICACION DE
CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS DE LA MADERA.

ESTUDIANTE : CRISTHIAN ADRIAN PAIMA RUIZ

DOCENTE : JARLIN ARELLANO VALDERRAMA

FECHA DE INICIO : 11/07/2017

FECHA DE ENTREGA : 20/07/2017

IQUITOS – PERÚ
2017
RESUMEN
La práctica consistió en aprender la manipulación del micrótomo de
deslizamiento, para la preparación de láminas ó cortes histológicos, en sus
distintas secciones: Transversal, Radial y Tangencial. Al mismo tiempo
sacamos láminas de la especie Cumala colorada. Puesto que los objetivos de
la práctica fueron: Adquirir la destreza en el conocimiento y manejo del
micrótomo de deslizamiento; Así como determinar parámetros apropiados
para la muestra de madera asignada.
El micrótomo fue la herramienta que se utilizó para esta práctica el cual es
una herramienta de corte, con la que se puede seccionar láminas (cortes
histológicos) de preparados para muestras. Para ello cada alumno contó con
un cubo de madera sin ablandar o previamente ablandada para el corte de la
madera según el ángulo y espesor asignado. Y luego se dispuso a destilar a
la lámina, para luego pásalo a la pigmentación o coloración.

De las láminas se tuvo que observar los cortes tangenciales, radiales y

transversales, de los cuales se tenía que observar sus poros, sus parénquimas
y sus radios. Luego de ello, cada alumno hecho safranina (el cual es una
pigmentación que da coloración a la madera) a las láminas.
 I. INTRODUCCIÓN

La safranina es un colorante biológico también conocido como dimetil

safranina y rojo básico 2. Al ser una molécula cargada positivamente
(catión) es capaz de combinarse con elementos celulares de cargas
negativas. La tinción de safranina O es de contraste, ya que se usa para
diferenciar una estructura celular previamente teñida con otro colorante.
Se utiliza en distintas técnicas histológicas que detectan células
enterocromafines del tracto gastrointestinal, el protoplasma y núcleo de
microorganismos patógenos. Este colorante también se ha convertido en
una guía básica en la identificación de procesos degenerativos como la
osteoartritis, debido a que la safranina O se une por cargas a los grupos
carboxilo y a los grupos sulfato (ambos con carga negativa) de los
glicosaminoglicanos (GAGs), los cuales abundan en la matriz extracelular
del cartílago articular.

Para esta práctica fue necesario; antes de usar la coloración, el micrótomo

para hace los cotes histológicos, tangenciales, radiales y transversales.

Una sección histológica o corte histológico es una sección o rodaja fina de

un tejido biológico adherida sobre un portaobjetos y generalmente
coloreada con alguna tinción específica para resaltar una parte de la
estructura.1 Por lo general, se cortan con un micrótomo con un espesor de
unos 0,5 a 10 micras, porque deben ser atravesados por la luz para que
puedan ser observados bajo un microscopio.

La pigmentación es la coloración de una parte determinada del organismo

de un ser vivo por el depósito en ella de pigmentos. Tales principios son
sustancias con propiedades cromáticas e intervienen en numerosos
procesos biológicos, tanto en los vegetales como en los animales. En los
primeros destacan la clorofila y los carotenoides y en los segundos,
la melanina y los pigmentos respiratorios.

En esta práctica se utilizó la pigmentación de la serafina, el cual por su forma

permite cubrir superficies grandes con poco esfuerzo del que los usa, siendo
especiales para recoger texturas mediante técnicas de frotado.

La importancia de este informe es que al finalizar la práctica el alumno

estará condiciones de elegir los cortes histológicos de calidad y realizar el
montaje de los mismos, en láminas para su observación microscópica.
II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
1. Aguirre, H. 2012. En su publicación “Colorante safranina”: La
safranina es un colorante biológico también conocido como dimetil
safranina y rojo básico 2. Al ser una molécula cargada positivamente
(catión) es capaz de combinarse con elementos celulares de cargas
negativas. La tinción de safranina O es de contraste, ya que se usa
para diferenciar una estructura celular previamente teñida con otro
colorante. Se utiliza en distintas técnicas histológicas que detectan
células enterocromafines del tracto gastrointestinal, el protoplasma
y núcleo de microorganismos patógenos. Este colorante también se
ha convertido en una guía básica en la identificación de procesos
degenerativos como la osteoartritis, debido a que la safranina O se
une por cargas a los grupos carboxilo y a los grupos sulfato (ambos
con carga negativa) de los glicosaminoglicanos (GAGs), los cuales
abundan en la matriz extracelular del cartílago articular.
(http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2012/ir122f.pdf )
2. PCE. 2010. En su publicación Micrótomo menciona:
Los micrótomos son instrumentos de corte para la elaboración de
preparados que se usan en la microscopía. Para cumplir con las altas
exigencias de tales preparados, los micrótomos permiten realizar
cortes extremadamente finos. Normalmente los micrótomos
modernos permiten cortes de un espesor de 0,1 hasta 100
µm. (http://www.pce-iberica.es/instrumentos-de-
edida/instrumentos-aboratorios/equipos-
laboratorios/microtomos.htm )
3. Iglesias, B. 2007. En su publicación Interpretación de imágenes:
una habilidad esencial para el aprendizaje en Histología dispone:
La interpretación de imágenes de cortes histológicos es una habilidad
(capacidad o destreza para realizar una acción) que se aprende y
perfecciona con la práctica. El trabajo con las imágenes en Histología,
además de posibilitar una mejor comprensión de la estructura
microscópica, así como las relaciones morfo-funcionales a este nivel,
es una forma de trabajo didáctico para el desarrollo del sistema de
habilidades que forma parte de los contenidos de la
disciplina: describir, identificar, comparar, clasificar, explicar, definir
e interpretar, con las cuales se tributa al desarrollo de competencias
cognitivas en el estudiante, mediante la capacitación para el trabajo
con la información.
Con el estudio de los primeros temas de la disciplina: células y tejidos,
el estudiante aprende a interpretar imágenes correspondientes a
niveles organizativos básicos en la constitución del organismo
humano. Este conocimiento resulta un precedente importante para la
posterior comprensión de la organización funcional del conjunto dado
por los órganos.
En la interpretación de cortes histológicos, la identificación y
descripción de células y tejidos, antecede a la comprensión global de
la compleja estructura microscópica que caracteriza a órganos y
aparatos corporales. De esta forma, la habilidad de interpretación va
exigiendo cada vez más profundidad en el trabajo del estudiante:
primero objetos específicos y, posteriormente, la significación morfo-
funcional de éstos dentro de la organización funcional en la que se
presentan como componentes estructurales.
(http://www.sld.cu/sitios/histologia/temas.php?idv=17531 )
4. MATERIALES Y MÉTODOS
- Materiales
 Porta y cubre objeto, etiquetas.
 Pincel fino.
 Vaso pirex marcado de 2mL.
 Bálsamo de Canadá.
 Cubos de madera bien orientadas de 3x3x3 cm a identificar.
 Alcohol de 30, 60 y 96 grados.
 Safranina (colorante).
 Agua destilada.
 Pinza.
 Guantes quirúrgicos
 Algodón
 Bisturí N° 22
 lupa 10x
- Equipos e insumos
 Cocina eléctrica
 Baño Maria
 Micrótomo
 Afilador de cuchilla
 Microscopio
 Xilol
 Glicerina
- Procedimiento
Ablandamiento:
Existen varios métodos de ablandamiento los cuales están de acuerdo al
tipo de madera básicamente influyen su dureza y presencia de
inclusiones principalmente sílice.
Mencionaremos 3 métodos de ablandamiento de mayor uso para
nuestras maderas tropicales
1. Agua caliente
En este método debe diferenciarse 2 formas, un ablandamiento directo
y el otro en baño María. Experiencias en el laboratorio de anatomia de
la madera, han demostrado que mejores cortes se logran con este
último procedimiento.

2. Glicerina-alcohol (50/50) y glicerina (100%).

Usada generalmente para maderas de densidad básica menores a 0.40.
Ejemplo Lupuna, huimba, entre otros.

3. Ácido nítrico (10%) y/o ácido acético glacial y peróxido de

hidrogeno con agua destilada.
Usada principalmente para maderas con sílice. Ejemplo Mashonaste,
tahuari, etc.
Para la presente práctica se hará con agua caliente cuyo procedimiento
se ha detallado anteriormente
Tomar el cubo de madera de 3x3x3 cm de arista bien orientado y
someterla a cocción en agua caliente durante aproximadamente 30 min
a mas según la especie. Controlar cada cierto tiempo con una pinza y
pinzón. Estará lista cuando el punzón penetre fácilmente o el cubo se
 precipite al fondo del vaso para evitar accidentes. Repetirá varias veces
los intentos de corte con la finalidad de tener la lámina con el espesor
deseado. El monitor de práctica realizará una demostración de la forma
y la calidad de corte a obtener antes de entregar el equipo al alumno.
- Métodos
El método que se utilizó en la práctica fue el explorativo y descriptivo.
5. RESULTADOS

Nombre Nombre Familia Procedencia Método de Parámetro Ejecutor

común científico ablandamiento del
micrótomo
Cumala Virola sp Myristicaceae Laboratorio Baño María. U= 25 - 30 CRISTHIAN
Colorada de micras. ADRIAN
Anatomía <= 0 - 05% PAIMA
de la RUIZ
madera

5. DISCUCIONES
La Cumala colarada o virola sp. Es una especie muy comercial y se puede
hacer fácil manejo de la madera porque es trabajabilidad.
6. CONCLUSIONES
 Los cortes histológicos nos ayudan a ver como esta los parénquimas,
los granos, los poros de las láminas de los diferentes cortes, ya sean
tangencial, radial y transversal.
 La coloración es determinante para ver la resistencia de una madera,
 en este caso la safranina la cual es un colorante catiónico que aporta
color rojo a las estructuras histológicas. Es muy usada en histología
vegetal donde tiñe de rojo los núcleos y la lignina de las paredes
celulares secundarias. También se usa en las tinciones Gram para
bacterias.
7. RECOMENDACIONES
 Tener buenos materiales al momento de ejecutar la práctica y
deben estar en buenos estados.
 Prestar atención al momento que explican la practica

8. BIBLIOGRAFÍA

 http://www.buenastareas.com/materias/microtecnia-vegetal/0
 https://es.slideshare.net/dLOnE1/microtecnia
 http://www.sld.cu/sitios/histologia/temas.php?idv=17531
ANEXO