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ANTECEDENTES
3. El Comité tomó nota de las dificultades que habían encontrado los países para la
determinación y cuantificación de la acrilamida y otros contaminantes. Debería
prestarse especial atención a los niños, habida cuenta de que eran el grupo de la
población que más consumía algunos de los alimentos relacionados con la
exposición a la acrilamida. El Comité también destacó que se necesitaba la
ayuda de la FAO y de la OMS para reforzar la creación de capacidad en este
ámbito, particularmente en los países en desarrollo.
I. OBJETIVO GENERAL
Las acrilamidas se forman cuando los alimentos son sometidos a temperaturas superiores de
120ºC, aumentando con el tiempo de calentamiento y el corte del producto Aunque la
concentración máxima de acrilamidas se da después de ocho minutos, la concentración tiende
a disminuir espontáneamente, sugiriendo una degradación por el calor. La formación de
acrilamidas en los alimentos fritos depende de no solo del tipo de aceite utilizado, sino
también de la presencia del aminoácido asparagina y glucosa en el mismo alimento (
Se encontró que una gran variedad de fuentes de carbonilos, podían generar acrilamida
de la asparagina bajo calor. Mientras la cadena del azúcar es más corta, la molécula se
tensiona, para formar una estructura cíclica hemiacetal y posteriormente el carbonilo
llega a estar más fácilmente disponible para el ataque nucleofílico alfa-amino de la
asparagina. Así, las cadenas más cortas de azúcares llegan a ser más reactivas. En base
de los resultados de la sustitución por isótopo y los estudios de carbonilos descritos
arriba, se propone el mecanismo exhibido en la figura 2. El grupo libre alfa-amino de la
asparagina reacciona con un azúcar fuente de grupo carbonilo, formando una base de
Schiff. Bajo calor, la base Schiff se descarboxila (facilitado por la descolocación de la
carga negativa, que permite la formación de la base de Schiff), formando un producto
que puede reaccionar por dos vías. Se puede hidrolizar para formar 3-
aminopropionamida que se puede degradar más aún, vía la eliminación del amoníaco
para formar la acrilamida cuando se somete a calor.
Las primeras evidencias concretas sobre el origen de la acrilamida en los alimentos que
involucraban a la asparragina se publicaron en el año 2002 por varios grupos de
investigadores, que trabajaron de forma independiente en los Estados Unidos, Canadá,
Suecia, Alemania e Inglaterra. Utilizando asparragina marcada con nitrógeno
radioactivo y posterior detección por espectometría de masa, se demostró que los tres
carbonos del esqueleto y la amida que forman la acrilamida corresponden a la molécula
de asparragina. En la figura 2 se ilustra un esquema simplificado con las moléculas
iniciales y los precursores que se han propuesto para la formación de acrilamida en los
alimentos.
Se encontró que a altas temperaturas, la decarboxilación y deaminación de la
asparragina producía acrilamida. Sin embargo, otros estudios no detectaron formación
de acrilamida al someter asparragina por sí sola a altas temperaturas. Finalmente, se
estableció que la formación de acrilamida requería la presencia de azúcares reductores y
temperaturas sobre 100 ºC. Esto llevó a la conclusión de que la formación de acrilamida
está íntimamente ligada a la bien conocida reacción de Maillard.
EFECTOS
TOXICOLOGÍA
Se ha demostrado que la acrilamida causa tumores en los animales de experimentación,
y el Centro Internacional de Investigaciones sobre el Cáncer (CIIC) la ha clasificado
como “probablemente cancerígena para el hombre”. La acrilamida produce mutaciones
genéticas y alteraciones cromosómicas en células cultivadas in vitro. También ha dado
resultados positivos en estudios de genotoxicidad in vivo. Se sabe que como
consecuencia de la acción metabólica da lugar a glicidamida, un epóxido químicamente
reactivo que origina aductos de ADN y puede ser la sustancia directamente genotóxica.
En estudios a largo plazo realizados con ratas se puso de manifiesto un aumento
dependiente de la dosis en la frecuencia de tumores de las glándulas mamarias y tiroidea,
de la boca y del aparato reproductor, así como ciertos indicios de tumores cerebrales
Asimismo, en las pruebas de detección realizadas con ratones, se ha demostrado la
existencia de una acción cancerígena. La consulta FAO/OMS también examinó en
detalle las propiedades tóxicas de la acrilamida y llegó a la conclusión de que era
necesario realizar más estudios sobre diferentes aspectos relacionados con la toxicidad
de esta última. En el Anexo 1 se resumen los datos de toxicidad de la acrilamida.
En 1991, el Comité Científico de los Alimentos (CCA) de la Unión Europea (UE)
evaluó la acrilamida como monómero presente en materiales que entraban en contacto
con los alimentos, y llegó a la conclusión de que se trataba de una sustancia cancerígena
con acción genotóxica. Tras los resultados obtenidos en 2002 en relación con la
acrilamida de los alimentos, el CCA llevó a cabo una nueva evaluación de dicha
sustancia y mantuvo la conclusión de que la acrilamida era una sustancia cancerígena de
acción genotóxica, pero señaló que, en ese momento, no era posible determinar el riesgo
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real de la presencia de acrilamida en los alimentos . El CCA llegó a la conclusión de
que debería reducirse la exposición tanto como fuera posible y razonable, aunque era
necesario recabar más datos en distintos ámbitos para poder reducir los niveles de
acrilamida y ayudar a aclarar sus efectos tóxicos. Además, el CCA destacó que la
acrilamida era neurotóxica para los animales de experimentación y para las personas
expuestas a la sustancia en sus lugares de trabajo. En los estudios realizados con ratas y
ratones, se habrá demostrado que la acrilamida disminuyía la fertilidad en los machos,
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aunque no estaba claro si dicho efecto se debía a la acción neurotóxica . No obstante,
basándose en los datos disponibles, el SCF señaló que las cantidades de acrilamida
ingeridas en la alimentación probablemente eran muy inferiores a las concentraciones
con efectos neurotóxicos.
Una vez confirmados los resultados arrojados por el estudio sueco, los investigadores se
focalizaron en encontrar estrategias para mitigar la formación de acrilamida en los
alimentos. Los resultados de estas investigaciones permitieron establecer dos líneas
principales de acción destinadas a reducir la formación de acrilamida en los alimentos.
Estas acciones se enfocan en: - controlar la influencia de la concentración de
precursores y - controlar las temperaturas de cocción.
CONCLUSIONES
PARTE EXPERIMENTAL
MÉTODOS ANALÍTICOS PARA DETERMINAR ACRILAMIDAS
Se han utilizado varios métodos analíticos para la determinación cuantitativa de la
acrilamida en los alimentos. Los más habituales son:
La cromatografía de gases/espectrometría de masas (derivado), (CG-EM
(derivado))
La cromatografía de gases-espectrometría de masas (no derivado) CG-EM (no
derivado).
La cromatografía de líquidos-espectrometría de masas (CL-EM).
La cromatografía de líquidos de alto rendimiento/espectrometría de masas en
tándem (HPLC-EM/EM).
MATERIALES Y METODOS
Materia prima
La variedad escogida para el desarrollo del estudio fue la Frisia, siendo ésta una
variedad óptima para fritura. Se trata de una variedad semitemprana a semitardía, de
piel amarilla y carne blanca-amarillenta y forma ovalada. Puesto que el trabajo
experimental se prolongó durante 6 meses se trabajó con patata con un contenido bajo y
alto de azúcares reductores.
METODOLOGIA EXPERIMENTAL
Etapa de fritura
DETERMINACIONES ANALÍTICAS
DETERMINACIÓN DE ACRILAMIDA
Extracción de la muestra
Análisis HPLC/MS-MS.
Linealidad
La linealidad del método (R2 ) se estudió mediante la fortificación de la matriz,
cruda y frita (patata escaldada 85ºC, 5min y posteriormente frita en aceite
durante 4 min), estudiando 4 niveles (0, 10, 20 y 50 µg/kg) para la matriz cruda
y 6 niveles (0, 10, 20, 50, 100 y 200 µg/kg) en el caso de la matriz frita. En la
matriz frita se estudió un mayor rango de concentraciones, puesto que cabía
esperar un mayor contenido de acrilamida en ésta. Para la construcción de las
curvas de linealidad se representó el área obtenida del pico cromatográfico (ión
producto de m/z 55.2) frente a la concentración de estándar de acrilamida
adicionada.
Exactitud
La exactitud o recuperación, se calculó por el método de adiciones con tres
niveles para la matriz cruda (10, 20 y 50 ppb) y cinco para la frita (10, 20, 50,
100 y 200ppb). La recuperación se evaluó a partir de tres curvas de cruda y tres
de frita realizadas en tres días diferentes.
Se calculó a partir de la fórmula siguiente (ecuación 2):
precisión.
La precisión, la cual se define a partir de la repetibilidad y reproducibilidad, se
calculó en base a los resultados de recuperación. Con los resultados obtenidos en
el primer día, para cada nivel estudiado, se obtuvieron los estudios de
repetibilidad. Para ello se extrajeron las medias (X) y desviaciones (SD) para
cada nivel, a partir de los cuales se calcularon los coeficientes de 9 variación
(SD/ X · 100). Los cálculos de reproducibilidad se obtuvieron a partir de los
resultados de recuperación tanto del día 1, como del día 2 y 3, para cada nivel.
Los criterios de aceptación o tolerancias de repetibilidad y reproducibilidad se
basaron en la ecuación de Hortwitz (ecuación 3):
Los resultados obtenidos muestran un claro efecto del tipo de pretratamiento aplicado
En el tiempo óptimo de fritura se observa como los pretratamientos más efectivos para
reducir el contenido en acrilamida son el escaldado, la inmersión de ácido cítrico o
ácido nicotínico, seguidos del lactato cálcico, glicina y del NaCl, siendo mayor esta
reducción conforme aumenta la concentración de la disolución de pretratamiento
empleada, a excepción de la glicina. Por otro lado, la congelación favoreció la
formación de acrilamida, generando incluso más del doble que en muestras sin pretratar,
como consecuencia del aumento del contenido de azúcares reductores generado por el
estrés por frío. La reducción de acrilamida a la inmersión de la muestra en ácido cítrico
estaría relacionada con la protonización del grupo amino (-NH2) de la asparagina
limitando su unión con el grupo carbonilo de los azúcares (Rydberg et al., 2003; Stadler
et al., 2004).
CONCLUSIONES
El contenido en azúcares reductores en la patata fresca condicionó el tiempo óptimo ya
que a menor contenido inicial mayor tiempo transcurre hasta alcanzar valores del
parámetro de color a* superiores a 0. El efecto del pretratamiento sobre el color no fue
significativo, a excepción del escaldado y de la congelación, para los últimos tiempos.
Los pretratamientos aplicados 19 dieron como resultado una disminución del contenido
inicial de azúcares reductores de la patata fresca, siendo el escaldado el pretratamiento
más efectivo. Por otro lado, el contenido en azúcares reductores inicial de la materia
prima condicionó el tiempo óptimo de fritura, aunque sin embargo es posiblereducir
dicho contenido mediante la aplicación de ciertos pretratamientos entre los que destaca
el escaldado, el cual provoca una lixiviación de compuestos solubles, entre ellos los
azúcares reductores, al medio externo.
Respecto a la reducción de acrilamida, los resultados ponen de manifiesto que es posible
reducir su contenido mediante la aplicación de diferentes pretratamientos, siendo los
más efectivos, de entre los evaluados, la inmersión de la patata en disoluciones de ácido
cítrico o nicotínico al 2%. Además, la aplicación de una elevada temperatura y poco
tiempo (condiciones de escaldado) también resultó más efectiva frente a la aplicación de
temperaturas moderadas y tiempos prolongados de inmersión (control). Por último, es
importante tener en cuenta que el pretratamiento óptimo no será aquel que más limite la
generación de acrilamida durante la fritura sino también el que no modifique las
características organolépticas del alimento frito tales como color, textura, aroma y
sabor. Por lo que sería necesario llevar a cabo un análisis sensorial de las muestras para
evaluar la percepción de estos atributos por parte del consumidor.
https://es.scribd.com/document/361220309/determinacion-de-acrilamida