UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACIA

ESCUELA DE QUÍMICA BIOLÓGICA
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
QUÍMICA CLÍNICA I

PRÁCTICA No. 4
DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO
12/2/2010.

(9710111) Sergio Paz, (200216307) Susan Cáceres, (200510457) Allan Vásquez, (200710686)
Ferdiner Gonzáles.

INTRODUCCION

El ácido úrico del suero es un producto de desecho del catabolismo de las purinas en los tejidos y
es eliminado a través de los riñones por filtración celular. Altos niveles de ácido úrico en sangre
son el resultado de enfermedades como leucemia, policitemia, la ingestión de comidas ricas en
núcleo-proteínas (p.ej., hígado y riñón) o cuando la función renal esta deteriorada. Otras
enfermedades como la gota se originan por el depósito de ácido úrico en las articulaciones. En la
sangre humana, la concentración de ácido úrico comprendida entre 3.0 y 6.2 mg/dl es considerada
normal, pero cada laboratorio establece sus propios valores esperados. Para determinar los
niveles de ácido úrico se han empleado varios métodos, entre ellos esta: el método del ácido
fosfotungstico, el procedimiento de uricasa y el procedimiento de TPTZ. Estos métodos nos
ayuda a un dar un diagnostico de alguna enfermedad. Pero se debe de tomar en cuenta los
interferentes como anticoagulante (EDTA, citrato, oxalato), acido ascórbico, muestras
hemolizadas y contaminación bacterial. En la práctica se utilizó el método TPTZ, ya que ofrece
una determinación sensible y rápida del ácido úrico en el cual la interferencia es minima.
METODOLOGIA

En la presente practica se determinó la concentración de acido úrico en suero por medio de

espectrofotometría según la casa stanbio, con el procedimiento según se observa en la Tabla No.
1 obteniéndose los valores que aparecen en la Tabla No. 2

RESULTADOS
Tabla No. 1 Volúmenes de muestra, reactivo y estándar

BLANCO STÁNDAR MUESTRA

REACTIVO 500µl 500µl 500µl

ESTÁNDAR 10 µl

MUESTRA 10 µl

La muestra se dejo incubar por 15 minutos a temperatura ambiente y se leyó a 520 nm.

Tabla No. 2 Concentraciones de Ácido Úrico.*

No. De Muestra** Absorbancia [Acido úrico] mg/dl

1 0.06 3.56

2 0.068 4.03

3 0.071 4.23

4 0.110 6.48

5 0.113 6.65

6 0.149 8.77

7 0.159 9.35

* Fuente: datos experimentales de laboratorio

**
muestra de paciente masculino

Media= 6.15 mg/dl

Desviación = 2.32 Ecuación: y= 0.0179x + 0.0237
Coeficiente de variación = 37.8%
% de error = 23.12 %

DISCUSION DE RESULTADOS

La excreción neta del ácido úrico total en personas sanas es de, en promedio, de 3.4 – 7.2mg/dl.
Muchos interferentes como anticoagulantes, acido ascórbico pueden alterar el resultado final. Los
resultados obtenidos en la Tabla No.2 muestra que dos determinaciones están fuera del rango de
referencia, esto debido a un sin numero de factores tal como, ingesta de carne antes de la
prueba, aunque si tomamos en cuenta el porcentaje alto de error también se puede inferir que
pudo haber sido algún tipo de equivocación a la hora de la manipulación de la muestra de sangre.

Estadísticamente los datos muestran un porcentaje de error alto, esto debido, a varios errores
cometidos en la determinación entre los cuales se puede citar:

• Tiempo de incubación: no haber dado el tiempo correcto que necesitaba la muestra.

• Pipeteo: mal uso de las pipetas automáticas dándose así que no se colocara la cantidad
correcta de muestra o de reactivo.

Los cuales influenciaron en la obtención de datos fuera del rango normal.

CONCLUSIONES

• Casi todos los valores obtenidos de ácido úrico en suero estuvieron dentro de los
valores normales.
• Solamente 2 de las 7 muestras se encontraron en el valor alto de ácido úrico.
• Una buena dieta ayuda a mantener los niveles de ácido úrico estables para salud
del paciente, de manera de evitar patologías asociadas a ácido úrico.
BIBLIIOGRAFIA

• José Laguna, E.P. “Bioquímica” 4 edición. Editorial JGH, Págs., 64, 107-110.
• Harrison “Principios de Medicina Interna” 13ª edición. Editorial Interamericana.
Págs. 438, 499.
• Murray, Mayes, G. R. “Bioquímica de Harper” 15ª edición. Editorial Manual
Moderno. Págs. 356.
 ANEXO

CUESTIONARIO

1. Cuál es la diferencia entre calibrador y estándar

Un estándar es una preparación que contiene una concentración conocida de un elemento

específico o sustancia, y un calibrador es un instrumento de medición y trazado que se utiliza en
los laboratorios de metrología y control de calidad, para realizar todo tipo de trazado en piezas
como por ejemplo ejes de simetría, centros para taladros, excesos de mecanizado etc.

2. Calcule el coeficiente de variación de la prueba, utilizando los datos de los otros

grupos de laboratorio

Media= 6.15 mg/dl

Desviación = 2.32
Coeficiente de variación = 37.8%

3. Qué cálculos debe usted realizar si la muestra de suero es insuficiente (menor de

0.01ml) para realizar la prueba?

a) Si se diluye el suero (1:5)

Mismo factor de dilución para el estándar y reactivo.

b) Si se coloca 0.005ml

Mismo factor de dilución de estándar y reactivo que en la práctica.

4. Identifique la Trazabilidad petrologíca del estándar del acido úrico utilizado.

8mg/dl

5. Indique cuales son los parámetro Utilizados para calibrar la prueba del acido úrico

Es un método enzimático que utiliza la copulación del 4 aminoantipirina, en presencia de

peroxidasa para formar un complejo coloreado que se lee a 520nm.
El acido úrico es oxidado por la úricas en alantoina y peróxido de hidrogeno. La intensidad de
color es directamente proporciona a la cantidad de acido úrico en la muestra.
6. Si el suero esta hemolizado, la concentración de acido urico estará elevado.

Las hematiees se encuentran rotas, virtiendo al torrente sanguíneo su contenido, son sueros de
color rojizo y con alto contenido de potasio, la maquina detectara la concentración de la
hemoglobina 200nm por lo que la concentración se reporta elevado.

7. Si el suero esta ictérico habrá interferencias con los reactivos utilizados:

Las muestras ictéricas producirán una falsa elevación de los valores de ácido úrico. Las muestras
con lipemia e ictericia visible no debieran ser utilizadas con este procedimiento.

8. Investigue si existe un método cinético para la determinación de acido úrico:

Método espectrofotométrico indirecto mediante una reacción química: el ácido úrico reduce al
fosfotungstato de sodio, en medio alcalino, originando la formación de un cromógeno azul que se
determina espectrofotométricamente a 640 nm.

9. explique que sucede si el estándar de acido úrico, se queda destapado por varios días en
la refrigeradora. Tendrá implicaciones en la determinación de acido úrico de los pacientes.

El estándar de ácido úrico es estable por 3-5 días a 2-8°C o por 6 meses a –20 - 0°C. Se
puede utilizar siempre y cuando La solución del reactivo sea clara. Una turbidez indicaría
deterioro y error en los resultados

Bibliografía

• R.J. HENRY, D.C. CANNON y J.W. WINKELMAN. Química Clínica. Bases y Técnica.
Barcelona (1996).
• L.A. KAPLAN y A.J. PESCE. Química Clínica. Técnicas de laboratorio. Fisiopatología.
Métodos de análisis. Editorial Panamericana (1998).

• D.A. SKOOG, F.J. HOLLER y T.A. NIEMAN. Principios de Análisis Instrumental (5ª
edición). McGrawHill. Madrid (2001)

• C.A. BURTIS y E.R. ASHWOOD. Fundamentals of Clinical Chemistry (5th edition).W.B.

Saunders Company (2001).
 Determinacion de Acido Úrico en sangre

0.18
0.16
0.14
y = 0.0179x + 0.0327
absorbancia

0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
3.56 4.03 4.23 6.48 6.65 8.77 9.35
concnetracion de Acido úrico