Universidad Nacional de Trujillo

Facultad de Ciencias Biológicas

E.A.P. Microbiología y Parasitología

Efecto de Azospirillum brasilense y Azotobacter chroococcum en el

crecimiento de Saccharum officinarum H-32 en condiciones de
invernadero.

AUTORES

Laurente Mejía, Brenda Patricia

Urbina Castillo, Kevin Javier

ASESOR

Dr. Villanueva de Cueva, Eva Elizabeth

GRUPO 08

Trujillo-Perú

2018
1. Antecedentes y justificación del problema.

La caña de azúcar es uno de los cultivos más importantes a nivel económico en el mundo.
Aproximadamente el 67% del azúcar que se consume proviene de la caña de azúcar. La caña
de azúcar se desarrolla en un amplio rango de condiciones físicas, químicas y biológicas se
suelo y variados climas, por esto una nutrición balanceada de la planta es clave para
obtener altos rendimientos y calidad. Es un típico cultivo que soporta varias
cosechas a partir de una sola siembra, lo que ocasiona altos requerimientos y la
consecuente reposición de nutrientes en el suelo. Dentro de las variedades más cultivadas
en el Perú se encuentra Saccharum officinarum H-32, una planta tropical. La producción
agrícola de caña de azúcar representa para el estado peruano el 50,8% del PBI agrario de
aquí la trascendental importancia de asegurar una buena producción de este cultivo
(MINAGRI).

Garantizar la producción agrícola de Saccharum officinarum sugiere el uso desmedido de

fertilizantes químicos. Los nutrientes proporcionados actúan ayudando a incrementar la
tasa de crecimiento y productividad vegetal, aportando un soporte nutricional, fácil, rápido
y asimilable. No obstante, la aplicación en exceso o continua de los fertilizantes acidifica los
suelos, favorece la erosión y afecta los organismos (flora y fauna) y altera las propiedades
químico-físicas de los componentes del suelo. Es por esta razón que se necesita desarrollar
prácticas agrícolas sostenibles, con estabilidad en la producción a largo plazo y un mínimo
impacto negativo en el medio ambiente. La tecnología de inoculación con bacterias
promotoras del crecimiento de las plantas (PGPB) se ha presentado en todo el mundo como
una herramienta importante para alcanzar la sostenibilidad en la agricultura debido a sus
bajos costos ambientales y de producción en comparación con los insumos industriales. (1)

Las Rizobacterias promotoras de crecimiento vegetal (PGPR), bacterias de vida libre,

encontradas en la rizosfera de las plantas constituye una alternativa al uso de fertilizantes
químicos favoreciendo el rendimiento de los cultivos. A través de diferentes mecanismos,
que incluyen la secreción de fitohormonas, suplemento de macro y microelementos, la
fijación biológica del nitrógeno, etc. Dentro de este grupo se encuentran los géneros
Azospirillum y Azotobacter pertenecientes a las Alphaproteobacterias Gram-negativas. (2-5
)
La inoculación de plantas con Azospirillum afecta significativamente su crecimiento. Esta
asociación también puede aumentar el peso seco total, el N total en brotes, el número total
de macollas y espigas fértiles, el peso del grano, el tamaño de la hoja, la tasa de
germinación, el desarrollo del sistema radicular, la absorción de nutrientes y la producción
de fitohormonas. Azospirillum brasilense incrementa el rendimiento entre un 5 y 30% en
maíz, trigo, sorgo, arroz y leguminosas.(6)

El efecto de inoculación de especies de Azotobacter se asocia en gran medida con la fijación

de nitrógeno, la formación de diversas hormonas de crecimiento fisiológicamente activas,
la protección contra patógenos de raíz, la estimulación de microorganismos rizosféricos
beneficiosos y mejora del rendimiento de la planta.(7,8)

Claramente, la aplicación de fertilizantes biológicos es la forma más natural y adecuada

para mantener los biosistemas del suelo vivos y activos. Esto requiere agregar estos
microorganismos, especialmente en suelos con baja materia orgánica y baja actividad
microbiana. En tales suelos, proporcionan nutrientes a las plantas, mantienen la
biodiversidad y bioactividad del suelo y mejoran la calidad del suelo y el medio ambiente.

El presente trabajo de investigación se realizó para evaluar los efectos de diferentes

inoculaciones con bacterias promotoras del crecimiento de las plantas como Azospirillum
brasilense y Azotobacter chroococcum sobre la densidad radicular y el número de brotes de
Saccharum officinarum H-32 en condiciones de invernadero. Los que están llamados a ser
una de las tecnologías claves para asegurar la sustentabilidad y productividad de este sector
tan importante para la economía y la sociedad. La posibilidad de obtener elevados
rendimientos agrícolas y al mismo tiempo preservar el medio ambiente está
irremediablemente ligada al uso generalizado de estos productos, como alternativa al uso
masivo de fertilizantes de origen químico, que son costosos y tienen un impacto negativo.

2. Problema

¿Cuál es el efecto de Azospirillum brasilense y Azotobacter chroococcum sobre la densidad

radicular y el número de brotes de Saccharum officinarum H-32 en condiciones de
invernadero?
3. Hipótesis

Azospirillum brasilense y Azotobacter chroococcum incrementan la densidad radicular y

el número de brotes de Saccharum officinarum H-32 en condiciones de invernadero.

4. Diseño de investigación

4.1. Material biológico

 Cepas de Azospirillum brasilense y Azotobacter chroococcum.
 Estacas de Saccharum officinarum H-32
 Tierra de cultivo de Saccharum officinarum H-32 del distrito de Laredo.

Caña de azúcar

4.1.1. Población
Tierra de cultivo de Saccharum officinarum H-32 del distrito de Laredo.
4.1.2. Muestra
500 estacas de Saccharum officinarum H-32 de la parcela 69, del sector Santo Domingo de
Laredo.
4.1.3. Unidad muestral
30 estacas elegidas al azar en el total de 500 de Saccharum officinarum H-32 de la parcela
69, del sector Santo Domingo de Laredo.

Rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal

4.1.4. Población
Cepas de Azospirillum brasilense y Azotobacter chroococcum obtenidas de la colección
española de cultivos.
4.1.5. Muestra
Cepas CECT 590 de Azospirillum brasiliense y CECT 203 de Azotobacter chroococcum
obtenidas de la colección española de cultivos.
4.1.6. Unidad muestral
10 610 810 10cel/ml de Azospirillum brasiliense.
10 6 10 810 10cel/ml de Azotobacter chroococcum.

4.2. Métodos y técnicas

4.2.1. Procedimiento
4.2.1.1. Obtención de estacas de Saccharum officinarum H-32
Las estacas fueron proporcionadas por el área de corte de semilla de la empresa
Agroindustrial Laredo S.A.A.
4.2.1.2. Preparación del suelo para la siembra de estacas de Saccharum officinarum
H-32
El suelo agrícola fue tamizado y esterilizado en autoclave a 121° por 45 min.

4.2.1.3. Acondicionamiento del invernadero

La presente investigación se ejecutó en el invernadero de Fisiología vegetal, ubicado en el
campus de las Ciudad Universitaria, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional
de Trujillo. Las macetas con suelo fueron establecidas en el invernadero para el control y
monitoreo de las condiciones ambientales óptimas como riego, luz humedad, temperatura.

4.2.1.4. Inoculación de estacas de caña de azúcar con cepas CECT 590 de Azospirillum
brasilense y CECT 203 de Azotobacter chroococcum

El efecto de las cepas de Azospirillum brasilense y Azotobacter chroococcum sobre la

densidad radicular y el número de brotes de Saccharum officinarum H-32 se estudió en
condiciones de maceta. Las estacas de Saccharum officinarum H-32 se inocularon
con cepas de Azotobacter (10 6 ,10 8 ,10 10 cel/ml ) y se sembraron en macetas que
contenían 1 kg de suelo esterilizado por triplicado. El experimento se realizó con tres
tratamientos utilizando dos dosis de fertilizante nitrogenado (úrea) 90 Kg N ha -1 y 120 Kg
N ha -1 y un testigo (sin fertilizante y inóculo).

4.2.1.5. Recolección y análisis de datos

El peso seco de raíces y el número de brotes en las plantas se determinaron a los 60 días
después de la siembra. Con los datos obtenidos se realizó un análisis de varianza simple
ANOVA, para establecer si estadísticamente si existen diferencias entre tratamientos.

5. Referencias bibliográficas

1. Oliveira LM , Santos JAP , Marcelino RF , Milani ML , Zuluaga YA, Zucareli C, et al. Maize
Inoculation with Azospirillum brasilense Ab-V5 Cells Enriched with Exopolysaccharides and
Polyhydroxybutyrate Results in High Productivity under Low N Fertilizer Input. Front
Microbiol . 2017; 8: 1873.
2. Zhihua Bao, Kazuhiro Sasaki, Takashi Okubo, Seishi Ikeda, Mizue Anda, Eiko Hanzawa,
et al. Impact of Azospirillum sp. B510 Inoculation on Rice-Associated Bacterial Communities
in a Paddy Field. Microbes Environ. 2013; 28(4): 487–490.
3. Fukami F, Cerezini P, Hungria M. Azospirillum: benefits that go far beyond biological
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4. Steenhoudt O, Vanderleyden J. Azospirillum, a free-living nitrogen-fixing bacterium
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Microbiol Rev. 2000;24(4):487-506.
5. Fibach-Paldi S, Burdman S, Okon Y. Key physiological properties contributing to
rhizosphere adaptation and plant growth promotion abilities of Azospirillum brasilense.
FEMS Microbiol Lett. 2012;326(2):99-108.
6. Reza A, Mazaheri D, Mafakheri S, Moghaddam A. Absorption efficiency of N, P, K
through triple inoculation of wheat (Triticum aestivum L.) by Azospirillum brasilense,
Streptomyces sp., Glomus intraradices and manure application. Physiol Mol Biol Plants.
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7. Deepika Chaudhary, Neeru Narula, Sindhu SS, Behl RK. Plant growth stimulation of
wheat (Triticum aestivum L.) by inoculation of salinity tolerant Azotobacter strains. Physiol
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8. Bageshwar UK, Srivastava M, Pardha-Saradhi P, Sangeeta P, Gothandapani S, Ranjeet
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9. Fukami J , Ollero FJ , Megías M , Hungria M. Phytohormones and induction of plant-
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brasilense cells and metabolites promote maize growth. AMB Express . 2017; 7: 153.
10. Bohner A, Kojima S, Hajirezaei M, Melzer M, Wirén N. Urea retranslocation from
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11. Vargas-Madríz H, Bautista-Martínez N, Vera-Graziano J, Sánchez-García P, García-
Gutiérrez C, Sánchez-Soto S, et al. Logrank Test and Interval Overlap Test for Bactericera
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