LABORATORIO BIOTECNOLOGÍA AMBIENTALUNT

FORMULACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS

BÁSICOS

I. INTRODUCCIÓN
Un medio de cultivo es un material alimenticio que se usa en el laboratorio para el desarrollo de
los microorganismos. Una vez que ha sido preparado, un medio de cultivo puede ser inoculado, (es
decir se le añaden organismos) y a continuación incubado en condiciones que favorezcan el
crecimiento microbiano .En 1881 Koch ideo un método para reproducir bacterias en un medio de
cultivo sólido hecho con gelatina, e introdujo el método de la placa para asegurar cultivos puros.
Sembró en gelatina una mezcla de bacterias, después de fundir el medio por calentamiento, y
vertió en este medio inoculado en una placa de cristal esterilizada y fría, para endurecerlo. Allí
donde las bacterias quedaban atrapadas al irse solidificando el medio, se multiplicaban formando
una masa, llamada colonia, visible a simple vista, dichas colonias debían ser puras, es decir
contener un solo tipo de bacteria. Para asegurar el cultivo puro era necesario tomar una muestra
de una colonia con un alambre estéril y trasladarlo a un tubo de medio estéril fresco. Este método
de cultivos puros es en esencia el que se usa actualmente con la salvedad de que se usa agar en
lugar de gelatina; para los cultivos en placa empleamos una cajita de vidrio llamada cápsula o caja
de Petri introducida por Petri, uno de los ayudantes de Koch durante 1887.En el año 1882 tiene
lugar uno de los grandes avances de la microbiología en relación con los medios de cultivo: el
médico alemán Walter Hesse introduce el agar-agar (polisacárido extraído de algas rojas) como
solidificante .En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri, comienza a utilizar placas de cristal
planas, que se llaman desde entonces placas de Petri, para sustituir a las clásicas bandejas de
vidrio cubiertas con campanas que se usaban hasta entonces.

Además existen varios tipos de medios de cultivos las cuales son:

1. MEDIOS GENERALES: Son aquellos que permiten el crecimiento de una

gran variedad de microorganismos.

2. MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO: Son aquellos que favorecen el

crecimiento de u determinado tipo de microorganismo sin llegar a inhibir
totalmente el crecimiento de los demás.

3. MEDIOS SELECTIVOS: Son aquellos que permiten el crecimiento de un

tipo de microorganismos determinado, inhibiendo el desarrollo de los demás.

4. MEDIOS DIFERENCIALES: Son aquellos en los que se pone de manifiesto

propiedades que un determinado tipo de microorganismos posee .
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II. OBJETIVOS

Objetivo General:

Aprender a preparar un medio de cultivo adecuado para nuestras muestras

 Objetivo Específico:

-Aprender a manejar adecuadamente los instrumentos de laboratorio.

-Comprobar la importancia del trabajo bajo condiciones de esterilidad

III. MATERIALES

 MATERIALES

MATERIAL IMAGEN

MECHERO
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TUBO DE ENSAYO

PROBETA
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BALÓN

AGITADOR
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PLACA PETRI

MATRAZ DE ERLENMEYER

 EQUIPO

EQUIPO IMAGEN

BALANZA
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COCINA INDUSTRIAL

 MUESTRA

MUESTRA IMAGEN

NaCl
Peptona
Extracto de carne
Agar Agar

IV. PROCEDIMIENTO

1. Agua Peptonada:
 Se empezó la práctica pesando una cantidad exacta de peptona para 50 ml
de medio de cultivo.
 Luego se procedio a pesar una cantidad exacta de NaCl para 50 ml de
medio de cultivo.
 Despues se diluyó las porciones pesadas en 50 ml de agua destilada en un
matraz de Erlenmeyer.
 Enseguida se estandalizo a un pH = 7.
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 A continuación se calento en la parrilla eléctrica y se homogenizo con la

varilla de vidrio hasta que el precipitado desaparezca.
 Y finalmente se coloco en tubo de ensayo.

2. Agar Nutritivo
 Es casi parecido a lo anterior, se empezó pesando una cantidad exacta de
peptona (0.5%) para 50 ml de medio de cultivo
 Luego se pesó una cantidad exacta de NaCl (0.5%) para 50 ml de medio de
cultivo
 Luego se pesó una cantidad exacta de extracto de carne (0.3%) para 50 ml
de medio de cultivo.
 A continuación se pesó una cantidad exacta de Agar-agar (1.5%) para 50
ml de medio de cultivo.
 Consecuentemente se diluyo las porciones pesadas en 50 ml de agua
destilada en matraz de Erlenmeyer.
 Enseguida se estandarizó a un pH=7.
 Para luego calentarlo en la parrilla eléctrica, homogenizando con la varilla
de vidrio hasta que el precipitado desaparezca.
 Y finalmente Llenar en tubo de ensayo.
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V. RESULTADOS

Para la preparación de agua peptonada la cantidad preparada fue de 50 ml, en

el cual se aplicó los siguientes cálculos para su contenido:

Gramos de peptona para 50 ml:

1 g de peptona ------------------ 1000 ml

X ---------------- 50 ml

1𝑔 ∗ 50 𝑚𝑙
𝑋= = 0.05𝑔
1000 𝑚𝑙

Gramos de NaCl para 50 ml:

8.5 g de NaCl ------------------ 1000 ml

X ----------------- 50 ml
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8.5 𝑔 ∗ 50 𝑚𝑙
𝑋= = 0.425𝑔
1000 𝑚𝑙

Para la preparación de agar nutritivo la cantidad preparada fue de 50 ml, en el

cual se aplicó los siguientes cálculos para su contenido:

Gramos de peptona para 50 ml de agar nutritivo:

0.5 g de peptona ------------------ 100 ml

X ---------------- 50 ml

0.5𝑔 ∗ 50 𝑚𝑙
𝑋= = 0.25𝑔
100 𝑚𝑙

Gramos de extracto de carne para 50 ml de agar nutritivo:

0.3 g de extracto de carne ------------------ 100 ml

X ---------------- 50 ml

0.3𝑔 ∗ 50 𝑚𝑙
𝑋= = 0.15𝑔
100 𝑚𝑙

Gramos de NaCl para 50 ml de agar nutritivo:

0.5 g de NaCl ------------------ 100 ml

X ---------------- 50 ml

0.5𝑔 ∗ 50 𝑚𝑙
𝑋= = 0.25𝑔
100 𝑚𝑙

Gramos de Agar-agar para 50 ml de agar nutritivo:

0.5 g de Agar-agar ------------------ 100 ml

X ---------------- 50 ml

0.5𝑔 ∗ 50 𝑚𝑙
𝑋= = 0.25𝑔
100 𝑚𝑙
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VI.CONCLUSIONES

 En el ambiente se encuentran diversos microorganismos, desde hongos

hasta bacterias, incluso por él se propagan gran parte de los virus. por esto
es necesario esterilizar los objetos y sustancias para prevenir margen de
error en los laboratorios debido a la contaminación microbiana que se
encuentra en el ambiente

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

 Manual práctica Microbiología General, José María Botero Ospina