Aminoácidos y proteínas

Las proteínas son los materiales que desempeñan un mayor número de

funciones en las células de todos los seres vivos.
Por un lado, forman parte de la estructura básica de los tejidos
(músculos, tendones, piel, uñas, etc.) y, por otro, desempeñan
funciones metabólicas y reguladoras (asimilación de nutrientes,
transporte de oxígeno y de grasas en la sangre, inactivación de
materiales tóxicos o peligrosos, etc.). También son los elementos
que definen la identidad de cada ser vivo, ya que son la base de la
estructura del código genético (ADN) y de los sistemas de
reconocimiento de organismos extraños en el sistema
inmunitario.

Son macromoléculas orgánicas, constituidas básicamente por carbono (C), hidrógeno (H),
oxígeno (O) y nitrógeno (N); aunque pueden contener también azufre (S) y fósforo (P) y, en
menor proporción, hierro (Fe), cobre (Cu), magnesio (Mg), yodo (I), etc.
Estos elementos químicos se agrupan para formar unidades
estructurales llamados AMINOÁCIDOS, a los cuales podríamos considerar como los
"ladrillos de los edificios moleculares proteicos".
Los aminoácidos son sustancias cristalinas, casi siempre de sabor dulce. Los aminoácidos
se caracterizan por poseer un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo amino (-NH2).
Los aminoácidos son las unidades elementales constitutivas de las moléculas denominadas
Proteínas. Son pues, y en un muy elemental símil, los "ladrillos" con los cuales el organismo
reconstituye permanentemente sus proteínas específicas consumidas por la sola acción de
vivir.
Se sabe que de los 20 aminoácidos proteicos conocidos, 8 resultan indispensables (o
esenciales) para la vida humana y 2 resultan "semi-indispensables". Son estos 10
aminoácidos los que requieren ser incorporados al organismo en su cotidiana alimentación
y, con más razón, en los momentos en que el organismo más los necesita: en la disfunción
o enfermedad. Los aminoácidos esenciales más problemáticos son el triptófano, la lisina y
la metionina. Es típica su carencia en poblaciones en las que los cereales o los tubérculos
constituyen la base de la alimentación. El déficit de aminoácidos esenciales afectan mucho
más a los niños que a los adultos.
 Hay que destacar que, si falta uno solo de ellos (aminoácido esencial) no será posible
sintetizar ninguna de las proteínas en la que sea requerido dicho aminoácido. Esto puede
dar lugar a diferentes tipos de desnutrición, según cual sea el aminoácido limitante.
Objetivo General
 Seleccionar pruebas de laboratorio que permitan el estudio de las propiedades
fisicoquímicas de aminoácidos y proteínas, así como su identificación.

Objetivo Específico
 Utilizar técnicas analíticas que permitan la identificación de aminoácidos en general,
aminoácidos específicos y proteínas en cualquier espécimen biológico.

Desarrollo Experimental
Experimento núm. 1
Prueba de la ninhidrina

La ninhidrina reacciona específicamente con el grupo de a-amino de los aminoácidos, ya

sean libres o bien unidos mediante enlaces peptídicos.

La ninhidrina a pH entre 4 y 8 es un oxidante muy fuerte y siempre reacciona con los grupos
de a-amino libreando amonio, el cual se condensa con la ninhidrina reducida y con otra
molécula de ninhidrina formando un compuesto coloreado que varía de azul a violeta
púrpura.

Reacción

Esta reacción también se conoce como condensación de ninhidrina.

Material
 Solución de albumina de huevo (clara de huevo diluida 1:50)
 Solución de glicina al 1%

 Solución de ninhidrina al 0.2%

 Agua destilada

Procedimiento
1. Enumeramos tres tubos de ensayo.

2. En el tubo número uno colocamos 1 ml de agua (blanco).

3. En el tubo número dos colocamos 1 ml de solución de glicina al 1%.

4. En el tubo número tres colocamos 1 ml de solución de albumina de huevo.

5. Agregamos a cada tubo 10 gotas de solución de ninhidrina al 0.2%.

6. Mezclamos y colocamos en baño maría durante cinco minutos.

Agua Glicina al Albúmina de Reactivo ninhidrina al

Tubo
destilada 1% huevo 0.2%
Núm. ---------------
1ml ---------------- 10 gotas
uno Blanco ---
Núm. dos
-------------- 1ml ---------------- 10 gotas
Patrón
Núm. tres ---------------
--------------- 1ml 10 gotas
Problema ---

Resultados
 En el tubos dos que debieron presentar color azul violeta, al reaccionar con la
ninhidrina cambió casi inmediatamente a azul violeta; lo cual nos reveló la presencia de
aminoácidos.
 En el tubo tres se dio un cambio de color a celeste bajo o amarillo al reaccionar con
la ninhidrina y este demoró más tiempo en cambiar de color y la presencia de aminoácidos
fue menos que la del tubo dos.

Experimento # 2.
Prueba de Biuret
Existen varias pruebas para la cuantificación de proteínas de muestras biológicas. La
elección del método depende de varios factores, uno de ellos es la cantidad de proteínas en
la muestra. Por ejemplo, si la cantidad es del orden de microgramos se recomienda utilizar
la prueba de Lowry. Por lo contrario, en muestra donde la cantidad es mayor, una prueba de
elección es la de biuret.

Fundamento
La prueba llamada biuret sirve para investigar la presencia de enlaces peptídicos, los cuales
son iones especificas entre los aminoácidos. Se basa en la formación de sales complejas
de color violeta al añadir sulfato cúprico en solución alcalina. El complejo está formado por
enlaces de coordinación, donde los pares electrónicos proceden de los grupos aminos de
los aminoácidos de cadena polipéptica.

Reacción

Material

Biológico. Químicos.
Solución de albumina de huevo( clara Solución de fenilalanina al 1%.
de huevo diluida 1:50) Reactivo e biuret.
Agua destilada.

Procedimiento
1. Enumeramos tres tubos de ensayo.

2. En el tubo número uno colocamos 2ml de agua destilada (blanco).

3. En el tubo dos, colocamos 2ml de solución de glicina al 1%.

4. En el tubo número tres, colocamos 2ml de albumina de huevo al 1%.

5. Añadimos a cada tubo 2ml del reactivo de biuret.

6. Mezclamos y observamos.

Reactivo de
Agua Glicina al Albumina de huevo
Tubo. biuret.
destilada. 1%. al 1%.
Núm. Uno
2ml. - - 2ml.
blanco.
Núm. Dos patrón. - 2ml. - 2ml.
 Núm. Tres
- - 2ml. 2ml.
problema.

Observaciones
 En el primer tubo pudimos observar que cambio a un color celeste claro, con textura.
 En el tubo dos observamos que pudo cambiar a color azul con blanco con más
espumas.
 En el tercer tubo observamos que cambio a color lila claro sin espumas, este cambio
a lila ya que es aquel que contiene albumina de huevo, debido que contiene enlaces
peptídicos.

Conclusiones
 Las proteínas están enlazadas con enlaces peptídicos, disulfuros puentes de
hidrógeno de la cadena carbonada.
 Las fuentes dietéticas de proteínas incluyen carne, huevos, soya, granos,
leguminosas y productos lácteos tales como queso o yogurt. Las fuentes animales de
proteínas poseen los 20 aminoácidos. Las fuentes vegetales son deficientes en
aminoácidos y se dice que sus proteínas son incompletas. Por ejemplo, la mayoría de las
leguminosas típicamente carecen de cuatro aminoácidos incluyendo el aminoácido
esencial metionina, mientras los granos carecen de dos, tres o cuatro aminoácidos
incluyendo el aminoácido esencial lisina.
 Las proteínas constituyen una de las moléculas más importantes en el organismo
ya que cumplen muchas funciones
 Al realizar las diferentes pruebas con la albúmina se pudo comprobar
experimentalmente efectivamente que se trata de una proteína.
 El reactivo biuret sólo funciona para detectar la presencia de proteínas, mas no
incluye aminoácidos, puesto que el biuret reacciona con enlaces peptídicos formados por
la unión de aminoácidos propios de las proteínas.
 La reacción con la ninhidrina produce colores que sirven como base para la
cuantificación de todos los aminoácidos primarios.

Anexos
Publicado por Tecnología Médica ULat en 23:13
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Etiquetas: agua, agua
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