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Relaciones antígeno-
anticuerpo
El complejo molecular del receptor del antígeno del Linfocito B y el BCR está
formado por un anticuerpo de membrana y es anticuerpo de membrana está
asociado con otras dos moléculas que son las inmunoglobulinas α y β, es decir,
estas inmunoglobulinas son importantes porque aparecen desde el estadio pro-B y
permiten el ensamble de la cadena pesada con VpreB y lambda5 para que se
produzca el paso al estadio pre-B temprano y posteriormente al pre-B pequeño.
Esas tirosincinasas son las encargadas de insertar los grupos fosfato; para hacer
que un linfocito efectivo no se requiere tantas cosas como un Linfocito T que se
active. Primero no se requieren moléculas del complejo mayor de
histocompatibilidad tampoco se requiere de presentación Aunque algunos textos
que se hablan de que se requiere presentación pero en una presentación como la
que veremos cuando se hable del Linfocito T la presentación del antígeno a Linfocito
B no es asociada con moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad El
Linfocito B reconoce la molécula en su forma nativa el Linfocito T debe reconocer la
molécula luego de que esa molécula es procesada entonces hay grandes
diferencias entre proceso de activación del Linfocito B con respecto al del Linfocito
T.
Luego de que los expresen su membrana para poder presentar los antígenos el
linfocito B debe migrar del folículo primario que es el sitio donde él está localizado
hacia la zona marginal desde folículo para poder encontrarse con el linfocito T pero
no se va a encontrar con cualquier linfocito T se va a encontrar con el linfocito T que
ya ha sido estimulado a nivel de la para corteza, debido a esta estimulación ese
linfocito T migra hacia la zona marginal del folículo y esa migración se produce
porque hay un cambio en el receptor de quimioquinas que esa célula T expresa,
para llegar al órgano linfoide secundario expresa el receptor CCR7 que permite que
la célula es estimulada por los quimioquinas que son las CCL21 y CCL19.
El resultado de esta interacción del Linfocito T con el Linfocito B son varias cosas:
Una vez fosforilados, estos ITAMs se convierten en sitios activos que van a permitir
que otras moléculas como es el caso de SYK se una a esos ITAMs y las
tirosinaquinasas (Lyn, Flyn y Blk) van a actuar sobre el SYK fosforilandolo
adicionalmente, el cual una vez activo puede actuar activando otras moléculas como
es el caso del SLP 65, como también a otra tirosina quinasa como la BTK, y esas
dos moléculas juntas van a actuar uniendo una serie de moléculas que conocen con
el nombre de Moléculas adaptadoras que son la Grb2 y la SOS; estas son
moléculas de intercambio de grupos fosfato, por lo cual estas dos actúan sobre
moléculas presentes en el citoplasma de la célula que es el RAS-GDP convirtiéndolo
en RAS-GTP, el cual se va a encargar de activar una serie de enzimas llamadas
Tirosinquinasas asociadas con mitógeno (MAPK).
RAS-GDP
Grb2 + SOS
RAS-GTP
MEK-1
MAPK
MEK-2
ERK-1
CFOS ERK-2
Y de esas tirosincinasas asociadas con mitógenos hay varias como MEK-1, luego
MEK-1 activa a MEK-2, y éstas activan a RK-1, y ésta activa RK-2, y ésta se encarga
de activar la primera parte de un factor de transcripción que es el factor C-Fos. De
igual manera, esas dos moléculas se encargan de activar a RAK-GDP a RAK-GTP,
que va a activar otra molécula que es la tirosincinasa de Janus, que va a producir
un segundo factor que es C-Jun, que unido a C-Fos forman un factor de
transcripción en el núcleo que es el factor de transcripción AP-1. Ese es el primer
factor de transcripción producido para la activación del LB.
SYK fosforilado, junto con las cinasas SRC y otras moléculas como por ejemplo la
tirosincinasa de Broton, o también la fofatidilinositol-3-cinasa, va actuar activando
otra molécula que es la fosfolipasa Cγ-2, que al ser activada va a actuar sobre los
fosfolípidos de membrana, y específicamente sobre el fosfatidilinositol-2-fosfato,
hidrolizándolo en dos moléculas, que son inositol-3-fosfato (IP3) y diacilglicerol. El
IP3 se libera al citoplasma y va a actuar sobre el RER liberando calcio.
Normalmente, la celula en su estado inactivo tiene alrededor de 100 nanomoles de
calcio en su citoplasma, pero cuando se activa pasa a tener de 400 a 1000
nanomoles. Como el RER se escasea en su reserva de calcio, entonces se aben
unos canales iónicos asociados con el calcio que permiten la entrada de calcio
extracelular, entonces, la fuente de calcio ya no será solo el RER sino que también
será el medio externo. Ese calcio activa otra molécula que es la calmodulina, que
activa a la calcineurina y esa calcineurina activa otro factor de transcripción que es
NFAT (Factor Nuclear Asociado con el linfocito T).
Luego hay una tercera vía asociada con el DAG. El DAG se encarga de activar a la
proteincinasa C, y al activarla, como tirosincinasa que es, va a actuar fosforilando
una molécula llamada IKKB (Inhibidor del NF-kB). Cuando la proteincinasa lo
fosforila ocurre un cambio conformacional en él que hace que fosforilado se
despegue del NF-kB (Factor Nuclear Kappa B), el cual migra hacia el núcleo y es
entonces el tercer factor de transcripción producido y que va a servir para activar al
LB.
Adicionalmente, no solo las tirosincinasas SRC van a fosforilar a las Igα y β, sino
que también van a fosforilar al CD19 que también tiene una cola intracitoplasmática
larga con tirosinas. CD19 hace parte del CR2, formado además por CD81, CD21 y
EU-13. Entonces al fosforilarse estos ITAMS del CD19, este se encarga de activar
la fosfatidilinositol-3-cinasa, que se va a encargar de generar a nivel de la membrana
celular fosfatidilinositol-3-fosfato, y es una molécula muy importante porque se
encarga de ayuda en el proceso de activación de SYK, de BTK, de SLP-65. Además
posteriormente va a dar lugar al fosfatidilinositol-2-fosfato, que es necesario para la
creación de NF-kB y del NFAT. Si en un momento determinado se inhibe esta
cinasa, entonces el proceso de activación se bloquearía porque faltarían 2 de los 3
factores de transcripción importantes en la activación del LB.
El LB folicular, por acción del LT, tiene la posibilidad e generar celular plasmáticas
de corta vida o los centrocitos, dependiendo de la sobreexpresión de IRF4 y de
BLIMP1, que hacen que la célula vaya a ser célula plasmática de corta vida, porque
este BLIMP1 es un factor de transcripción que bloquea la expresión de CD19, de
CD21, BCR, porque bloquea al PAX5 y BCL6, que son otros dos factores de
transcripción presentes en esa célula B virgen. Si por el contrario prevalecen PAX5
y BCL6, esa célula va a inhibir la producción de células plasmática y se va a convertir
en un centrocito. Un marcador importante de células plasmáticas de corta y larga
vida es el syndecan. Posiblemente haya algunas citoquinas aquí involucradas,
como el TNF-β, BAFF y TACI, son moléculas asociadas con el proceso de activación
de estas células hacia células plasmáticas de corta vida o hacia centrocitos.
Centrocitos
Migra hacia la parte central del folículo y se ubica en una zona conocida como zona
oscura, porque cuando se hacen biopsias de ganglios linfáticos y se colorean, esa
parte se colorea de rojo oscuro porque al llegar el centrocito allí se convierte en
centroblasto y éste tiene la capacidad de dividirse, de hacer mutación somática,
de hacer cambio de clases, es decir, prácticamente de generar un nuevo BCR. Es
como un proceso de blastogénesis que tiene esa celula o de reversión hacia un
estado inmaduro, para volver a generar una célula madura conocida como
centrocito. Entonces, el centroblasto posteriormente da lugar al centrocito, y ese
centrocito migra a la zona clara y allí empieza a hacer el fenómeno de maduración
de la afinidad. El centroblasto puede hacer hipermutación somática.
1. Ese centrocito por medio del BCR reconozca el antígeno con alta afinidad,
ese centrocito empieza a dividirse a generar células plasmáticas de larga vida
y nuevos centrocitos los cuales migran de nuevo a la parte oscura para volver
a convertirse de nuevo en centroblasto y volver a hacer hipermutación
somática y el cambio de clases.
Hipermutación somática:
Para que ocurra este fenómeno a nivel de los CDR tanto de la cadena pesada como
de la liviana tiene que haber una secuencia de 4 nucleótidos que son patrones de
nucleótidos que sirven para que una enzima llamada Deaminasa de Citosina
Inducida por Activación actúe sobre citosinas desaminándolas y convirtiéndolas en
uracilo:
Nucleótidos: DGYW (guanina) HCRW (citosina)
Se forman varias secuencias diferentes que lo que importa es que en esa secuencia
haya citosina para que la deaminasa convierta esa citosina en uracilo. El uracilo no
hace parte del ADN, sino del ARN, entonces va llegar otra molécula que es la
uridil glicosilasa va a quitar ese uracilo ya que no pertenece al ADN y forma un sitio
ahí conocido como sitios abásicos, es decir que no hay una base nitrogenada. Este
sitio abásico puede por la acción de enzimas como por ejemplo endonucleasas y
polimerasas propensas allí, pueden insertar cualquier nucleótido. Si se llegara a
insertar una citosina no pasa nada, ya que esta se puede volver a convertir en
uracilo, pero si se inserta una timina, adenina o una guanina se puede producir un
codón diferente el cual en el ARN va a generar la inserción de un aminoácido
diferente.
Otra cosa que puede pasar es que sin la acción la uridil glicosilasa ese uracilo puede
ser interpretado por algunas enzimas como si fuera una timina, en este caso la
citosina se convertiría en timina y pasaría lo mismo, ya que hay un codón diferente
que va a dar lugar a un aminoácido diferente. También puede ocurrir que alrededor
de ese sitio abásico entren unas endonucleasas las cuales van a quitar los
nucleótidos que hay alrededor de ese sitio abásico y reemplacen esos nucleótidos
por otros, por lo que habría un cambio en la secuencia de nucleótidos lo que lleva a
cambios de codones y cambios de aminoácidos posteriormente dando un cambio
de afinidad a la molécula de anticuerpo por el antígeno. De esta manera es que se
produce la hipermutación somática que solamente ocurre en la porción variable de
la cadena pesada y de la cadena liviana.
Cambio de clases:
Todos los genes que codifican para las diferentes clases de anticuerpos y al
producirse la recombinación de V con D y con J, estos recombinados se pueden
unir Cµ y a Cγ de manera espontánea, y esto lleva a que el linfocito B exprese
inmunoglobulinas M e inmunoglobulinas G, pero de ahí en adelante para que
exprese cualquier otro subtipo de inmunoglobulinas G o Ig A se requiere entonces
del cambio de clases. Para que se produzca el cambio de clases se requiere
citoquinas como el interferón Gamma que puede hacer que se produzca Ig G1 e
Ig G3, o como la interleucina 4 que hace que se produzca Ig E, o también como
otras citoquinas como APRIL, BAFF, TGF-B o interleucina 6 que hace que se
produzca inmunoglobulinas A.
Entonces ese centrocito es estimulado por estas citoquinas y estas a su vez activan
factores de transcripción los cuales se encargan de activar nuevamente a la
Deaminasa de Citosina Inducida por Activación (AID), la cual va a actuar
convirtiendo citosinas en uridinas tanto en la porción 5’ de Cα1 como en la región 3’
de la porción Cγ1. Entonces al producir uridinas viene la uridil glicosilasa y genera
sitios abásicos y posteriormente llegan unas enzimas ADNasas que cortan el
fragmento de ADN perdiéndose de esta manera todo es fragmento Cμ, Cδ, Cγ3
para empalmar entonces el Cγ1 con el segmento VDJ, y de esa manera se produce
el empalme de la porción constante de la cadena pesada con el VDJ para que se
produzca entonces la Ig G1 en este caso.
Interacción antígeno-anticuerpo:
Como se puede ver no hay enlaces covalentes ni iónicos, o sea, que no hay
reacciones químicas sino que es una reacción física. La unión antígeno-anticuerpo
que está asociada a la ley de acción de masas, que está representada por la
siguiente ecuación:
K: (AbH)
(Ab) (H)
Esta ecuación nos dice que la concentración de complejos inmunes (la unión Ag-
Ac) va a depender de la manera como varia la composición de ese complejo, es
decir, la concentración de antígenos y anticuerpos. Si yo cambio la concentración
de antígeno la concentración del complejo inmune cambia, hay disociación y re-
asociación o sea que se disocian los complejos inmunes para re-asociarse
nuevamente debido al cambio de concentración de antígeno y del anticuerpo.
Esto da lugar a la constante de afinidad. Entre más bajita sea esa constante mayor
afinidad hay entre el antígeno y el anticuerpo. Dos factores importantes en la
permanencia de ese Ag unido al anticuerpo son la afinidad y la avidez.
Afinidad: se define como la fuerza de unión del antígeno con respecto al
anticuerpo, matemáticamente se define por la sumatoria de las fuerzas de
atracción menos la sumatoria de las fuerzas de repulsión.
T independiente: siempre se van a producir IgM y siempre van a ser a producir los
mismos niveles de IgM