UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA E INDUSTRIAS

ALIMENTARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA

INFORME DE LABORATORIO DE

MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL.

Elaborado por:

Carranza Luliquis Merlita

Docente:

Dra. Carmen Carreño Farfán

Lambayeque – 2018
 PRÁCTICA 8

BIODEGRADACIÓN ANAEROBIA DE
RESIDUOS AGROPECUARIOS:

METANOGÉNESIS
I. INTRODUCCIÓN

El término biogás define la mezcla de gases resultantes de la descomposición de la materia

orgánica, por acción bacteriana en condiciones anaerobias (Barreto & Córdova,
2011). El biogás es producido en un recipiente cerrado o tanque denominado biodigestor, el cual
puede ser construido con diversos materiales como ladrillo, cemento, metal o plástico. El
biodigestor de forma cilíndrica posee un ducto de entrada, a través del cual se suministra materia
orgánica (estiércol animal o de humano, aguas sucias de las ciudades, residuos del matadero), en
forma conjunta con agua (afluente) y un ducto de salida para que el material ya digerido por acción
bacteriana abandone el biodigestor (efluente).

El proceso de digestión que ocurre en el interior del biodigestor libera energía química contenida
en la materia orgánica, la cual es convertida en biogás, cuyos componentes son metano (CH4) y
dióxido de carbono (CO2), además de pequeñas cantidades de sulfuro de hidrógeno, hidrógeno y
nitrógeno (Benavides & Plasencia, 2012). El metano es el principal componente del biogás y le
confiere las características combustibles al mismo. El valor energético del biogás, por lo tanto estará

determinado por la concentración de metano, alrededor de 20 – 25 MJ/m3, comparado con 33 – 38

MJ/m3 del gas natural. A pequeña y mediana escala, el biogás ha sido utilizado para cocinar en
combustión directa en estufas simples; sin embargo, también puede ser utilizado para la
iluminación, calefacción y como reemplazo de la gasolina o el combustible Diesel en motores de
combustión interna.

Adicionalmente al beneficio energético, en la producción del biogás, se logra la transformación

de los vertimientos y biodegradables que constituyen hoy en día en su conjunto, una de las
principales fuentes de contaminación del ambiente, originando un biofertilizante rico en potasio y
activo como mejorador de suelos que también puede ser aprovechado como alimento de peces y
aves de corral.

1.1 Parámetros de operación en la producción de biogás

Los parámetros de operación son aquellos que se fijan antes del inicio del proceso y señalan
las condiciones en las cuales va a trabajar el sistema (Rojas, 1992; Acuña & Villalta, 1998).
  Temperatura
La producción de biogás puede ser mesofílica (28 – 38º C) o puede ser
termofílica (40 – 60º C).
 Sustrato
El contenido de materia orgánica del sustrato para la producción de biogás deberá
tener una relación C: N entre 25 a 30.
 Dilución o contenido de sólidos totales
Los sólidos totales están constituidos por el porcentaje de material seco que queda
después del secado de la muestra a 104 ºC y están formados por los sólidos digeribles y los
sólidos no digeribles. En un sistema discontinuo el porcentaje de sólidos totales será de 25 – 35 % y
en un sistema continuo o semicontinuo será de 6 – 10 % .
 pH
El pH óptimo está entre 6,6 – 7,6.

 Tiempo de retención
Depende de la temperatura en la que se lleve a cabo la producción de biogás. Si es
termofílica serán 6 a 10 días y si es mesofílica serán 15 a 60 días.

1.2 Parámetros de control

Permiten evaluar el desarrollo del proceso, previenen y explican fenómenos que afectan
el normal desenvolvimiento del digestor, así como permiten calcular la eficiencia.

 Contenido de ácidos volátiles (sólidos volátiles)

Representan en gran parte a los sólidos biológicamente digeribles. Son los ácidos
orgánicos de cadena corta que presentan alta presión de vapor a 104 ºC. Incluyen los ácidos acético,
propiónico, butírico, fórmico, valérico y caproico producidos durante la acidogénesis y constituyen
un factor limitante cuando una alta concentración de ellos origina un descenso del pH afectando
la actividad de las bacterias metanogénicas. El límite máximo es 2000 ppm, aunque este valor
depende mucho de la capacidad de amortiguamiento del sistema.
  Alcalinidad
Es la capacidad de amortiguamiento que presenta el sistema generada por aniones
de ácidos débiles y bases fuertes como bicarbonatos, carbonatos e iones hidroxilo formados durante
la digestión anaerobia. Los valores pueden fluctuar entre 1500 – 5000 ppm como ácido acético.
 pH
Es la función de la relación entre el contenido de ácidos volátiles y la acalinidad.
Cuando no existe equilibrio entre estos dos parámetros se manifiestan cambios en el valor del pH. El
rango de operación está entre 6.6 – 7.6.

 Producción y composición del biogás

Es un parámetro que permite evaluar el comportamiento del proceso y a la vez calcular
su eficiencia. Es conveniente expresar la producción del biogás en términos de sólidos volátiles
introducidos porque expresan la forma directa cómo la población bacteriana los está
utilizando. Normalmente en un proceso de digestión se dan
fluctuaciones en la producción y composición del gas; sin embargo, si los descensos en la
producción del gas persisten por 4 o 5 días se debe pensar que existe algún problema. En cuanto
al contenido de metano, cuando se trabaja con estiércol de vacuno y pajas, fluctúa entre 50 – 60
% con un 40 a 50 % de CO2. Durante los primeros días de iniciado el proceso el contenido de
metano es muy bajo pero luego se va incrementando.

 Degradación de la materia orgánica

Permite evaluar la eficiencia de la actividad bacteriana en la transformación del material
orgánico al biogás. El contenido de materia orgánica se puede expresar como sólidos volátiles.
Estos son aquellos que desaparecen cuando se somete la muestra seca a ignición a 550 ºC

Rendimiento de biogás (m3/kg fresco)

Estiércol vacuno 0,0372

Estiércol equino 0,0573
Estiércol porcino 0,0520
Estiércol ovino 0,152
Estiércol de aves 0,091
Estiércol humano 0,042
Desechos de maíz 0,190
Desechos de arroz 0,190
II. OBJETIVO

2.1 Obtener biogás a partir de residuos agropecuarios.

III. METODOLOGÍA

3.1 Producción de biogás en fundo Casa Blanca, Pachacámac,

Lima

Finca de producción, investigación y capacitación en agricultura ecológica y agroturismo,

situada en el lote 20, parcelación Casa Blanca en el distrito de Pachacámac (Figura 1), valle Lurín
de Lima, conducida por los Ingenieros agrónomos Ulises moreno y Carmen Felipe, ambos
docentes cesantes de la Universidad Nacional Agraria La Molina.

Figura 1. Fundo Casa Blanca, Pachacámac en Lima.

 Figura 2. Los Ingenieros agrónomos y esposos Ulises moreno y Carmen Felipe.

Las prácticas agroecológicas que se aplican en la finca son: Crianza ecológica de Cavia
porcellus “cuy” (Figura 3), producción y uso de abonos orgánicos, funcionamiento de un
biodigestor modelo Chino que produce biogás, rotación de cultivos y asociaciones, riego
tecnificado por sifón, microaspersión y goteo, uso de plantas hospederas de organismos benéficos
controladores de plagas y de preparados a base de plantas repelentes de insectos dañinos,
conservación de la agrobiodiversidad.

Figura 3. Crianza de Cavia porcellus “cuy”.

 El biodigestor tipo Chino tiene 10 m3 de capacidad. Una vez al año se prepara pre-
compost con 625 kg de estiércol y 483 kg de rastrojo de maíz picado. El rastrojo del maíz se
deposita sobre una manta de polietileno para humedecerlo con agua de caño antes de armar la
cama compostera, con una capa de 25 cm de rastrojo y una capa de 5 cm de guano y así
sucesivamente hasta terminar con una capa de rastrojo. Luego se coloca un bambú en el centro
de la cama, para favorecer la aireación y se deja a temperatura ambiental, removiendo
semanalmente, durante 1 mes (Figuras 4 a 7).

Figura 4. Residuos celulósicos: rastrojo de Zea mays L.

Figura 5. Prefermentación: mezcla de estiércol de Cavia porcellus y rastrojo de

Zea mays L.
 Figura 6. Prefermentación: Cama compostera

Figura 7. Pre-fermentación para la obtención de pre-compost.

Figura 8. Volteo del pre-compost.

 El digestor se carga con 1 tonelada de pre-compost de 1 mes (Figuras 9, 10, 11),
400 kg de bazofia y 200 L de solución de agua de cal al 2%, de tal manera que se completa hasta

8 m3, dejando libre 2 m3 para el almacenamiento del biogás.

Figura 9. Pre-compost para alimentar el biodigestor.

Figura 10. Biodigestor tipo Chino.

 Figura 11. Biodigestor tipo Chino enterrado en el fundo Casa Blanca, Lurín.

Después de 1 mes, comienza la producción de biogás (Figura 12).

Figura 12. Orificio para la salida del biogás a través de una cañería.
Semanalmente se extraen 200L de Biol (Figura 13) y se introducen 200L de una mezcla de 50 kg
de estiércol fresco de cuy, remojados en 150 L de agua durante 24 horas. En promedio, al día

se obtienen 3 m3 de biogás con 70% de metano.

Figura 13. Extracción de abono líquido Biol.

Una vez al año se saca el biofertilizante sólido Biosol del interior del biodigestor (Figuras 14, 15,
16).

Figura 14. Área para limpieza del digestor y extracción del biofertilizante sólido.
 Figura 15. Extracción del biofertilizante Biosol.

Figura 16. Productos de la digestión anaerobia: metano, biol y biosol.

3.2 Diseño y acondicionamiento de biorreactor anaerobio con sistema de
purificación

Acondicionar un biorreactor anaerobio, constituido por un depósito rectangular, cerrado

de latón de 1/16 pulgadas (utilizado para el transporte de aceite) con capacidad de
18 L y cuyas dimensiones son de 0,24m de largo y ancho por 0,36 m de altura. Sobre el extremo
superior el biorreactor presentará una abertura de 10 cm de diámetro, cubierta con una tapa rosca
plástica provista de un agujero (0,5 cm) en la parte central. La abertura servirá para realizar
la carga y descarga del biorreactor y el agujero central permitirá la salida del biogás a través de
una manguera plástica de 0,5 cm de diámetro y 60 cm de longitud (Figura 17).

Figura 17. Biorreactor anaerobio con sistema de purificación.

Anexo al biorreactor se encontrará el sistema de purificación que estará constituido por

un frasco lavador de CO2, de vidrio y de 500 mL de capacidad, conteniendo 200 mL de una
solución de cal 2 %. Cerrar herméticamente el frasco lavador con una tapa rosca plástica que
presentará un agujero en la parte central por donde ingresará el extremo final de la manguera de
plástico (0,5 cm de diámetro y 60 cm de longitud) llevando el biogás desde el biorreactor y
saldrá una manguera de plástico (1 cm de diámetro y 50 cm de longitud) sacando el biogás para su
almacenamiento en un globo fuertemente sujeto a su extremo final (gasómetro).
3.3 Recolección de la materia prima para la producción de
biogás
En un centro de engorde de porcinos recolectar estiércol fresco y en campos agrícolas
recolectar residuos celulósicos (tallos, raíces, malezas, corontas) en las cantidades de 20 kg y 5
kg, respectivamente.

Figura 18. Centro de engorde de porcinos.

Figura 19. Recolectar residuos celulósicos (tallos, raíces, malezas, corontas).

3.4 Preparación de la carga inicial para la producción de biogás
(fermentación aerobia o pre-fermentación)

Para lograr una relación de C:N de 25 a 30 : 1 mezclar 9 kg de estiércol de cerdo

previamente desmenuzados por trituración con 2 kg de residuos celulósicos, cortados en pedazos
de más o menos 3 – 5 cm. Mezclar el material resultante con agua de cal al 2 %, en la proporción
de 1 : 2, equivalente a 11 Kg de residuos y 22 L de agua de cal al 2 %. Colocar la mezcla
sobre un plástico ubicado en el suelo, homogeneizarla y airearla durante 15 minutos
interdiariamente durante 16 días. También se pueden mezclar 6 kg de estiércol de cuy más 1 kg de
residuos celulósicos, adicionar 14 L de agua de cal 2 % y dejar que se degrade por 10 días con
aireación.

3.5 Fermentación anaerobia para la producción de

biogás
Determinar el contenido de sólidos totales en el sustrato previamente sometido a una
fermentación aerobia. El valor será aproximadamente de 50 %. Debido a que para la producción de
biogás en sistema discontinuo se requiere 25 – 35 % de sólidos totales, pesar el sustrato y diluirlo
con agua de cal 2 %, en la proporción 1: 1 (9 kg de sustrato más 9 L de agua de cal al 2 %).
Posteriormente, mezclar el sustrato pesado y humedecido con 200 mL de líquido ruminal y
colocarlo inmediatamente en el biorreactor (4/5 del volumen) con llenado intermitente o tipo
Batch, lo cual significa que será cerrado herméticamente y no se abrirá hasta que cese la
producción del biogás. El tiempo de retención será aproximadamente de 30 días. También
se pueden pesar 5 kg de la mezcla estiércol de cuy pre-fermentada y agregar 5 kg de agua de cal
más 50 mL de líquido ruminal.

Figura 20. Colección del líquido ruminal.

3.6 Parámetros de control de la producción de biogás

 Diariamente registrar la temperatura, pH y volumen del gas producido.

 Al inicio y al final de la producción de biogas determinar:
Sólidos totales (%)
Sólidos volátiles (%)
 Antes de la pre – fermentación y después de la digestión del sustrato determinar el
porcentaje de nitrógeno, carbono y fósforo.

3.7 Purificación del biogas para la obtención del metano

El biogás que sale del biorreactor y que es conducido a través de la manguera plástica será
llevado hacia un frasco lavador conteniendo 200 mL de agua de cal 2% para eliminar el CO2 y
posteriormente será almacenado en el globo de polietileno (gasómetro). De ser posible
acondicionar también un filtro para la captación del sulfuro de hidrógeno, que deberá ser
instalado en la manguera de conducción del biogás desde el lavador de CO2 hacia el
reservorio de biogás o gasómetro; constituido por un tubo de PVC relleno en las
2/3 partes con limadura de hierro y el tercio restante con esponjilla de hierro utilizada para la
limpieza doméstica de utensilios domésticos. El biogás ingresará por un extremo del filtro y
lo abandonará por el extremo opuesto. El sulfuro de hidrógeno será atrapado por el material
ferroso formándose sulfuro de hierro.

3.8 Descarga total de lodos

Terminado el proceso de producción de biogás con un determinado tipo de sustrato, sacar

totalmente el contenido del digestor (bioabono), limpiar y preparar el biorreactor para la siguiente
etapa de producción.
3.9 Ejemplo de valores obtenidos en la producción de biogás

Biodigestor: cilindro de 55 galones de capacidad: diámetro = 0.56; altura = 0.87 m;

Volumen total = 0.214 m3 (Rojas, 1992; Acuña & Villalta, 1998).

 Mayo – Junio con una Tº promedio de 28.7º C

 Volumen de sustrato : 4/5 del biodigestor = 0.172 m3
 Sustrato : 70 kg de estiércol (conejos, cuyes, gallinas,
vacuno) más restos vegetales más 70 kg de agua
(Dilución 1:1)

 Fecha de carga : 20/04

S.T. (%) Inicial : 47.5
S.V. (%) Inicial : 85.45
pH inicial : 6.9

 Fecha de término : 09/06

S.T. : 64.27
S.V. : 54.22
pH final : 7.2
 Buffer : 2% (1.4 kg de CaO)
 Fecha de inicio de la producción del biogás : 30/04
 Día de máxima producción diaria : 26avo
 Tiempo de retención : 40 días

Antes de la pre – Después de la Pre Después de la

Características
fermentación – fermentación digestión

Sólidos totales (%)

64,27
Sólidos volátiles (%)
90,77 54,22
pH 47,5
79,58 7,2
Alcalinidad (%) 85,45
6,7 1,9
Nitrógeno (%) 6,9
0,21 1,79
Carbono (%) 0,86
0,68 0,173
Fósforo (%)
20,37 1,79
Tiempo de retención (días) 14
0,68 40
Producción de biogas / m3
0,7407 m3
IV. BIBLIOGRAFÍA

Acuña, A. & Villalta, P. (1998) Evaluación de parámetros en la obtención de biogás

en una planta piloto. (Tesis de Ingeniería). Universidad Nacional Pedro Ruiz
Gallo, Perú.
Barreto, G. & Córdova, J. (2011). Bacterias aisladas del Dren 4000 para la
obtención de proteína a partir de metano producido con excretas de Cavia
porcellus “cuy” y residuos lignocelulósicos en Lambayeque, 2011. (Tesis de
Licenciatura). Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Perú.
Benavides, A. & Plasencia, C. (2012). Caracterización físico-química y biológica
del abono líquido Biol obtenido por digestión anaerobia de tres sustratos
orgánicos en Jayanca, Lambayeque. (Tesis de Licenciatura). Universidad
Nacional Pedro Ruiz Gallo, Perú.
Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura, FAO.
(1986). Reciclaje de materias orgánicas y biogás. Una experiencia en China.
Chile: FAO.
Rojas, S. (1992) Diseño y construcción de una planta de biogás para dotar de
energía a un laboratorio. (Tesis de Ingeniería). Universidad Nacional Pedro
Ruiz Gallo, Perú.

V. ANEXOS

4.1 Método gravimétrico para determinar los sólidos totales (FAO, 1986)

a) Pesar una muestra de sustrato.

b) Colocar la muestra en un crisol y llevarla a la estufa a una temperatura de 105 ºC
durante 24 horas.
c) Sacar la muestra de la estufa y llevarla a un desecador durante 15 minutos.
d) Pesar la muestra seca.
e) Calcular el porcentaje de sólidos totales.

S.T (%) = PS_ X 100

PT
Dónde:

ST = Sólidos totales (%)

PS = Peso de la muestra seca
PT = Peso total inicial de la muestra
4.2 Método gravimétrico para determinar los sólidos volátiles

a) Calcular el peso de los sólidos totales.

b) Llevar la muestra seca a un horno de incineración o mufla a una temperatura de 550
ºC durante 3 horas.
c) Sacar la muestra del horno de incineración y llevarla a un desecador durante 15
minutos.
d) Pesar la muestra (cenizas) y calcular el porcentaje de sólidos volátiles.

S.V (%) = (P.S.T - PC) _ X 100

P.S.T

Dónde:

S.V = Sólidos volátiles (%)

P.S.T = Peso de sólidos totales
P.C = Peso de las cenizas

4.3 Formulación de carga para un biodigestor modelo chino

Para la carga inicial del biodigestor, se requiere determinar las cantidades de materiales
que van a ingresar (estiércol de cuy y rastrojo de maíz), para lo cual se pueden utilizar
diferentes métodos y ecuaciones. A continuación se presenta un método simplificado
utilizando la siguiente ecuación N° 1 de balance de materia C/N.

a. Balance de materia C/N

C1X1 + C2X2 = 30 ….…………… (1)

N1X1 + N2X2
 Dónde:

C1 = % de carbono en el estiércol
C2 = % de carbono en el rastrojo de maíz
N1 = % de nitrógeno en el estiércol
N2 = % de nitrógeno en el rastrojo de maíz

Para una concentración del 10% de sólidos totales de la masa de digestión y un

volumen útil del 80% del digestor, se tiene la siguiente ecuación N° 2:

10% = ST1 X1 + ST2 X2 ….…………… (2)

80% (volumen total)

Dónde:

ST1 = % Sólidos totales del estiércol

ST2 = % Sólidos totales del rastrojo de maíz

b. Ejemplo de aplicación

Se tiene los valores de % de carbono, % nitrógeno y % sólidos totales en la

siguiente tabla:

Material %C %N % ST C/N
Estiércol 38,7 1,98 80 19,5
de
Cuy
Rastrojo 51,9 0,94 90,8 55
de
Maíz
Fuente: Bioagricultura Casa Blanca

Se trabaja a una dilución del 10% de sólidos totales, en un biodigestor de 10 000 litros
(10 M3).
 Primer paso

Los valores de carbono y nitrógeno se reemplazan en la ecuación N°1:

38,7 X1 + 51,9 X2 = 30
1,98 X1 + 0,94 X2

38,7 X1 + 51,9 X2 = 30 (1,98 X1 + 0,94 X2)

X1 = 1,14 X2 …………… (a)

 Segundo Paso

Usando los valores del % de sólidos totales de la tabla y la ecuación N° 2, se obtiene

lo siguiente:

10% = 80% X1 + 90,8 X2 ………… (b)

80% (10 000)

Reemplazamos (a) en (b) y desarrollamos la ecuación:

800 = 80% (1,14 X2) + 90,8% X2

X2 = 439 Kg rastrojo de maíz ………… (c)

Reemplazamos la ecuación (c) en la ecuación (a):

X1 = 500 kg de estiércol de cuy

 Como los pesos del estiércol del cuy y el rastrojo maíz se dan en materia
seca, se realiza una simple regla de tres para determinar los pesos húmedos,
entonces finalmente se obtienen los valores para realizar el material de carga para
el biodigestor de 10 M3.

100………………………… 80
X ………………………… 500

X = 625 Kg de estiércol

100………………………. 90,8
Y ……………………… 439

Y = 483 Kg de rastrojo de maíz