PROCEDIMIENTO:

Proceso para la extracion de ADN

1. Eliminacion de proteinas
Por medio de calor
Por la enzimaproteasa K.
2. Eliminación de lípidos
Detergentes SDS
NaCl
3. Romper enlaces
ß- Mercaptoetanol
4. Mantener el ADN
EDTA

Purificación del ADN para realizar electroforesis

1. A la muestra de ADN añadirle 500 µL de Fenol Cloroformo alcohol isoamilico, mezclar y

centrifugar
2. Después de la centrifiguración se forma dos partes una acuosa otra orgánica, tomar
350 µL de la parte acuosa

Parte acuosa: ADN + fenol

Parte acuosa: Proteína

3. A los 350 µL de la parte acuosa agregarle 600 µL alcohol isopropanol y centrifugar

4. Se obtendrá el precipitado blanco (ADN) y desechar la otra parte (fenol).

5. Lavar3 veces al precipitado con alcohol 70, después de cada lavado centrifugar y luego
dejar secar por 30 minutos en el horno.

Preparación del Gel de agarosa

• 0.30 de agarosa
• Trisborato RTA 30 ml

Agregar al microondas durante 30 segundos por dos veces, hasta obtener un color
transparente y luego agregar Syver Safe. Luego se verterá en la cubeta para formar el gel de
electroforesis, colocar el peine dentro del gel y dejar gelificar por 30 minutos. Retirar el peine.

Colocar el gel dentro de la cámara de electroforesis, llenar la cámara con buffer TBE hasta
cubrir el gel.
Preparación de las muestras de ADN Y el MPM para el corrido electroforético.

Preparación del marcador el peso molecular.

• 2 µL de DNA Ladder.
• 1 µL de Loading Dye.
• 3 µL de agua ultra pura.

Preparación de la muestra de ADN

• 5 µL de muestra de ADN.
• 1 µL de Loading Dye.