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MEJORA GENÉTICA

DE LA VID
El problema fundamental de
la Mejora

Descubrir los individuos poseedores


de los mejores genotipos conociendo
únicamente sus fenotipos
La selección en la vid

• Los métodos clásicos:


selección clonal, cruzamientos (inter o
intraespecíficos) y los métodos de
manipulación cromosómica y
mutagénesis

ƒ Biotecnología:
ingeniería genética
Selección masal

¾ Origen en la denominada selección tradicional.


¾ Se tiende a mejorar la producción partiendo de cepas
cuyo valor cultural parece superior al de otras cepas.
¾ Se hacen registros de la plantación (peso de la
vendimia, número de racimos, estado de los racimos y
vigor aparente de la cepa, infertilidad o esterilidad,
distinguir medio de cultivo de cualidades intrínsecas de
la planta, síntomas de degeneración).
¾ Recomendable en dos casos:
a) en el cuadro nacional, cuando se trata de paliar lo
más rápido posible la extensión de una enfermedad
b) en el cuadro de una explotación privada, para ubicar
la plantación en su sitio ideal
Selección clonal

¾ Objetivo: aislar y estudiar los clones del cultivar


¾ La selección clonal se emparenta
estrechamente con la Ampelografía.
¾ Es el único método de mejora hecho en vid.
¾ Caracteres seleccionados: contenido de ciertos
compuestos como polifenoles, antocianos,
azúcares, agua, hormonas que controlan la
maduración, aminoácidos, parámetros
cuantitativos como número y peso de las uvas, y
la expresión de mecanismos de defensa frente a
patógenos y plagas.
1º Aislamiento de clones:

Prospección detallada:
Prospección amplia:

• Cada cepa es seguida con ƒ Considera los datos relativos a


atención desde la brotación la geografía botánica histórica.
hasta la caída de la hoja.
• La selección debe estar
• Las cepas que presentan precedida de un estudio previo
caracteres señalables son de la ampelografía histórica,
enseguida multiplicadas y estudio que será a menudo
estudiadas separadamente. incompleto e hipotético, pero
• Método lento pero ha dado que permitirá operar con
resultados muy interesantes. mucha más certeza para
detectar, los principales clones
que componen el cultivar.
MEJORA GENÉTICA EN VITICULTURA

Selección por cruzamientos

• Objetivo: mejora de una variedad transfiriéndole


un carácter procedente de otra variedad.
• Método: retrocruzamientos entre la línea
donadora y la variedad útil ya existente
(parental), seleccionando el carácter deseado
en cada generación. El carácter a transferir
debe identificarse fácilmente en los sucesivos
retrocruzamientos.
MEJORA GENÉTICA EN VITICULTURA

Mejora por manipulación


cromosómica

• POLIPLOIDES :

• 3N
• 4N
MEJORA GENÉTICA VEGETAL EN VITICULTURA

• Operaciones:

– Comprobar el momento en el que la flor tiene las anteras a


punto de estallar: es el estado ideal para la fuente de polen.
– Hacer lo mismo para la receptividad del estigma de la flor que va
a ser polinizada.
– Castración
– La polinización. Cuando el estigma esté receptivo, se aplica
sobre él el polen de la planta masculina, forzando el contacto, y
proteger la flor.
– Trabajar en condiciones controladas
– Realizar siembras escalonadas para asegurar que solapen los
periodos de floración de macho y hembra
– Casos especiales. En formas androestériles o absolutamente
autoincompatibles la polinización se realiza sin castrar.

• Obtención de semillas: máximo cuidado en la


identificación, manejo y conservación hasta su siembra
Principales caracteres que condicionan la calidad
y la cantidad en la vid:

• El tipo floral
• Color de la piel
• Apirenia
• Tamaño y forma de la baya
• Consistencia de la pulpa
• Sabor de la baya
• Época de maduración
• Tamaño del racimo
• Otros caracteres morfológicos y fisiológicos
MEJORA DE LA RESISTENCIA DE
LA VID A ENFERMEDADES Y PLAGAS
MUTACIONES Y MEJORA

La mutación es la base de la variabilidad genética


(especiación y evolución)

-Espontáneas (tasa baja: 10-5-10-8)

-Inducidas
(Agentes químicos: 5-bromouracilo, naranja de
acridina, gas mostaza, colchicina)
(Agentes físicos: Raciaciones)
(Agentes biológicos: transposones)
Mutagénesis dirigida
• Sólo debe utilizarse este
método cuando falta lo que
se busca.

• Las mutaciones inducidas


pueden llevarse a cabo por
agentes físicos, agentes
químicos o agentes
biológicos

• La tasa de mutación
mediante agentes físicos y
químicos es mayor que la de
agentes biológicos pero a
cambio, estos se llevan a
cabo de forma más
específica, ya que permite
introducir genes nuevos.
Ingeniería genética

• Manipulación de genes. Se recomienda para


acortar la duración del proceso clásico de
cruzamiento y selección

• Inconvenientes:
– Modificación de otras cualidades
– Problemas de expresión del gen introducido. Poligenes
– Planta transgénica

• Técnicas:
– Fusión protoplastos
– Transformación con A. tumefaciens (Plasmido Ti)
– Cañón de ADN
Métodos de ingeniería genética

Técnicas:
• Transferir genes • Fusión de protoplastos
entre especies que no
• Cañón ADN (biolística)
pueden cruzarse
• Transformación con
naturalmente
A. tumefaciens: plásmido Ti
• Recomendado para
acortar la duración
del proceso
• No útil para
caracteres
cuantitativos
CLONACIÓN DE GENES
Algunos ejemplos de mejora

a) Botrytis cinerea
b) Filoxera (Daktulospharia vitifoliae)
c) Nematodos
d) Mildiu (Plasmopara vitícola)
e) Oidio (Uncinula necator)
a) Botrytis cinerea
Interacciones H-P:

• Vid:β-1-3-glucanasa. Hongo:
lacasa y catalasa.
• Vid: fitoalexinas y catequinas.
• Vid: resveratrol (estudios sobre
el gen BcatrB de Botrytis
cinerea).
• Vid: actividad
poligalacturonasa (PI 5,5), en
presencia de Botrytis, su
isoforma ácida (PI 3,3).
• En cultivos celulares de
Merlot, Chardonnay y Pinot
noir se ha experimentado la
introducción del gen de la
quitinasa que degrada la pared
celular de hongos como
Botrytis (la mejora no depende
de un solo gen).
b) Filoxera (Daktulospharia vitifoliae)

• Uso de portainjertos

• Cruzamientos (HPD)

• Estudios con vides


resistentes y tolerantes,
en ensayos de campo y
mediante cocultivo con A.
rhizogenes.
c) Nematodos (Xiphinema index )

• Vitis rodundifolia es resistente al


nematodo Xiphinema index y filoxera,
pero no es posible el uso como
potainjerto por su incompatibilidad con
V vinifera, por su pobre enraizamiento,
y por la alta susceptibilidad a clorosis.

• Estudios de hibridación entre:

V vinifera (2n=38) x V. rotundifolia (2n=40)

• Retrocruzamiento prueba de
F1 x V. vinifera
(Su descendencia presenta ciertas
características de ambos parentales
que lo hacen adecuado para su uso
como Pi, es resitente a Xiphinema y
filoxera y tiene bastante
compatibilidad con el injerto de
vinífera)
d) Mildiu (Plasmopara vitícola)

• Necrosis de estoma (herencia


monogénica N/n)

• Limitación de expansión del


micelio por herencia poligénica
(quitinasas, celulasas,
poligalacturonasas,...)

• Expresión de genes de
quitinasa en frutos y hojas de
vid (Pinot noir) ante presencia
de hongos.
e) Oidio (Uncinula necator)
• Resistencia total de la vid al oidio
debida al gen Run 1, presente en
V. rotundifolia (provoca necrosis de
estomas)
• Transferencia del gen desde V.
rotundifolia a V. vinifera mediante
técnicas clásicas de cruzamiento y
selección durante 25 años. Se
concluyó que la resistencia era
debida a la presencia de un solo
gen, y la susceptibilidad debida a
ausencia de un solo gen.
• Se ha secuenciado el gen y se ha
introducido a través del plásmido
Ti en un cocultivo de A
tumefaciens con células de
Cabernet-S y Chardonnay.
Resultados: resistencia total a
oidio, parcial al mildiu y se han
mantenido las características
organolépticas del vino.
¿Qué futuro le espera a la mejora
genética de la vid?
• Uso prometedor de marcadores:
-Posibilidad de diagnosticar características
vitícolas importantes ( como R a enfermedades)
en las primeras etapas de los cruzamientos
-Identificación rápida de otros genes
importantes desde pto de vta agronómico
ƒ Transferencia génica como mejora de rasgos
puntuales de variedades
ƒ Cambio de escenario geográfico en el tema
vitivinícola
LA NUEVA GENÉTICA:
GENÓMICA
PROTEÓMICA
METABOLÓMICA
Caracterización mediante DNA-microarrays

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APLICACIONES DE LA GENÓMICA A LA MEJORA
GENÉTICA DE LA VID

• Son aproximaciones globales al estudio de la estructura y función


de los genomas (genómica)
• El análisis genómico es en la actualidad la estrategia más eficiente
para generar información biológica en sistemas complejos.
• Creación del International Grape Genome Program.

• Este programa tiene como objetivos generales:


• 1. El descubrimiento de todos los genes del genoma de la vid,
• 2. La identificación de las secuencias responsables de los
caracteres de mayor relevancia agronómica en este cultivo
• 3. El desarrollo de aplicaciones de la información genómica en
viticultura.

• Este Programa no cuenta con fondos propios para financiar la


investigación en genómica de la vid. Sin embargo, trata de
promover las iniciativas nacionales y supranacionales de
investigación en el genoma de la vid y demarcar objetivos y marcos
de referencia que eviten solapamientos y aceleren la diseminación
de la información (www.vitaceae.org).
GENÓMICA DE LA VID En
España:
• 1. Iniciativas están financiadas por el INIA, a través de su Plan de
Proyectos Estratégicos
• 2. Fundación Genoma España en su programa de colaboración
bilateral con Genoma Canadá.

• La primera iniciativa pretende el desarrollo de herramientas básicas


en genómica de la vid: construcción de genotecas de BACs y de
ESTs y de progenies segregantes para el análisis funcional. A nivel
biológico, este proyecto se centra en el estudio del desarrollo
reproductivo, desde la inducción de la floración hasta la antesis,
utilizando como sistema la variedad Tempranillo.

• La segunda iniciativa pretende también el desarrollo de


herramientas de análisis molecular y funcional, pero se centra en el
proceso de desarrollo y maduración del grano de uva en la variedad
de uva de mesa, Moscatel de Hamburgo.

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