08/11/2017

• Introducción al concepto de “transgénesis”

•¿Qué son los animales transgénicos?
• Aplicaciones
• Técnicas empleadas para su obtención
• Su uso como Bioreactores
• Otros ejemplos de interés
• Proyecciones futuras

Conceptos generales
Desde sus inicios el hombre ha seleccionado plantas y
domesticado animales mediante el cruzamiento selectivo de
individuos con el fin de transferir los caracteres deseados.
TRANSGÉNESIS
Hace referencia a los procedimientos que permiten la
LIMITANTE  cuando los organismos son muy divergentes
genéticamente, la incompatibilidad sexual impide la introducción de ADN exógeno al genoma de un organismo
modificándolo de forma permanente y posibilitando que este
transferencia de caracteres
cambio se mantenga estable, sea heredable y afecte a todas
las células del organismo
La ingeniería genética ha
permitido romper esta barrera
posibilitando la incorporación
El ADN exógeno que se transfiere de un
de genes desde otras especies organismo a otro se denomina
que de otra forma sería TRANSGÉN
imposible con los métodos de
mejoramiento tradicional

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¿Qué son los animales transgénicos? El ratón como organismo modelo

OGM VENTAJAS
Organismos Genéticamente Modificados • Estrechamente relacionado con los
seres humanos
• Tamaño pequeño y fácilmente
Los animales transgénicos son organismos vivos que han sido manipulable
• Facilidad de cría en cautiverio
manipulados genéticamente para introducirles un gen exógeno Por este motivo, se • Tiempos de reproducción cortos y
a su genoma que se mantenga estable, le otorgue nuevas ha impulsado el descendencia numerosa
• Tolera la endogamia
características y se transmita a la progenie afectando todas lasdesarrollo de
células del organismo modelos de la
enfermedad en LIMITACIONES
otras especies
• La anatomía, fisiología y ciclo de vida
animales del ratón difieren significativamente de
La modificación genética se puede realizar los humanos, por lo que el uso del
transfiriendo genes a un animal de la ratón como modelo genético ha
demostrado algunas limitaciones con
misma especie o de una especie diferente respecto al estudio de numerosos
caracteres humanos.

Necesidad de nuevos modelos animales

Se ha impulsado el desarrollo de animales transgénicos Investigación:
filogenéticamente más cercanos al ser humano
como así también de mayor interés productivo - Modelo de estudios para ayudar a los investigadores a identificar, aislar y
caracterizar los genes y así entender cómo funcionan.

ANIMALES DE VACAS - OVEJAS - CABRAS - CERDOS - AVES

GRANJA

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Producción Animal:
- Mejoramiento animal (mejores características físicas – productos de consumo)
- Introducción de genes de resistencia a enfermedades
-Mejorar la digestibilidad de los alimentos
Salud:
-Desarrollo de modelos animales de enfermedades que afectan al hombre y así
poder desarrollar nuevas drogas y nuevas estrategias de tratamiento.
- Para la producción de órganos para xenotransplante: Fuente de tejidos y
órganos para transplantes en humanos temporarios hasta obtener donantes
compatibles
- En Terapia génica como modelos de prueba y/o ensayos preclínicos
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Medio ambiente:
-Biosensores de contaminación: uso de peces transgénicos susceptibles a la
presencia de contaminantes en agua
-Producción animal más limpia para el medioambiente: lograr una eliminación
menor de fósforo en sus excretas (menor contaminación hídrica).
-Controladores biológicos modificados: uso de invertebrados depredadores o
parasitoides como agentes de control biológico.
Industria farmaceútica:
- Bioreactores para la producción de fármacos (“Molecular Pharming): para
producir proteínas recombinantes humanas de importancia farmacéutica por
ejemplo en leche.
-Testeo de nuevos fármacos
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ADNg
Intrones
Promotor y otras secuencias reguladoras UTR
ARNm
ADNc
Vector (distintos tipos)
Para la expresión de proteínas en una célula huésped se
requiere de vectores de expresión
Debe emplearse un promotor
específico compatible con la célula
huésped y que dirija la expresión
en un determinado tejido
(ej. glándula mamaria para lograr la
producción de la proteína de
interés en la leche)
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•VECTOR: depende de la cantidad y tamaño del material a incorporar
•GEN ESTRUCTURAL: Para la producción de una proteína en particular el gen
estructural debe ser ADNc, el cual se puede obtener por RT-PCR
•ELEMENTOS REGULADORES  PROMOTOR: Se pueden utilizar
promotores constitutivamente activos o promotores específicos, que sólo son
activos en un tipo celular concreto. Se pueden emplear promotores inducibles,
que requieren la presencia de un elemento concreto para ejercer su función.
•GEN REPORTERO: Permite analizar fácilmente la expresión. Uno de los más
empleados es el gen lac Z porque permite la detección rápida a través del color.
•MODIFICACIÓN EN EL EXTREMO DEL ADNc de manera que la proteína
expresada pueda ser separada con facilidad. Ejemplo: residuos de histidina en el
C-terminal. Esta modificación no interfiere en la actividad posterior de la
proteína.
Transferencia de ADN a células animales
Los retrovirus pueden penetrar naturalmente las células, insertando en
Retrovirus ellas su material genético. Antes de usarlos deben modificarse para
eliminar los genes virales que les permiten replicarse y causar enfermedad.
Es un simple proceso mecánico en el cual se utiliza microagujas que
Microinyección permiten penetrar la membrana celular y/o la envoltura nuclear para
introducir el ADN exógeno dentro de la célula viva.
Coprecipitación Se emplea fosfato cálcico que permite precipitar el ADN y formar
del ADN pequeñas partículas que serán internalizadas por la células.
El ADN que contiene el gen de interés se empaqueta dentro de pequeñas
Liposomas vesículas de grasa que pueden transportar sustancias al interior de las
células.
Utiliza pulsos eléctricos que abren temporalmente poros en las membranas
Electroporación de las células, permitiendo insertar el ADN.
Expresión transitoria Integración estable
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CÉLULA ORGANISMO
TRANSGÉNICA TRANSGÉNICO
Células Células
somáticas germinales

Transgénesis mediada por retrovirus Transgénesis mediada por retrovirus

Los retrovirus son especialmente útiles para El vector se compone deLos retrovirus son especialmente útiles para
secuencias
introducir ADN en las células ya que su ciclo introducir
retrovirales clonadas en un plásmido ADN
queen las células ya que su ciclo
de vida incluye una integración estable del de vida
puede propagarse en E. coli. El ADNincluye
exógenouna integración estable del
ADN vírico en el genoma de la célula infectada ADNretrovirales.
se inserta en las secuencias vírico en elSegenoma de la célula infectada
produce las transfección de células animales
Se introduce el transgén en un en cultivo. Una pequeña parte de las células
DESVENTAJAS
vector viral, reemplazando capta el ADN retroviral y producen retrovirus
genes que que no son recombinantes, los cuales• tienen
La integración
el ADN del ADN se produce
esenciales para el virus insertado. Estos retrovirus en diferentes etapas del embrión en
recombinantes
pueden ser utilizados paradesarrollo
infectar de manera
• Noel se
eficaz nuevas células, donde genoma
integraviral
en todas las células
con los genes insertados sesomáticas
integra eno el
enADN
la línea germinal
Partículas Virales cromosómico en forma de • provirus.
No hay transmisión del transgén a
recombinantes (Transducción) la descendencia
• Múltiples sitios de integración
• Limitada capacidad : hasta 8 kb de
Inyectadas en el Incubadas con
ADN exógeno
espacio perivitelino embriones sin ZP
de embriones con ZP

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Transgénesis mediada por retrovirus Transgénesis mediada por retrovirus

La microinyección de ADN fue la primer técnica OBTENCIÓN DE OVOCITOS Y FECUNDACIÓN

exitosa para lograr un mamífero transgénico  Obtención de óvulos de hembras en las que se ha
inducido una superovulación y han sido fertilizadas
1966 Primer embrión de ratón microinyectado “in vivo”, o bien se fertilizan posteriormente “in vitro”
1981 Primer ratón transgénico (Gordon y Ruddle)
1982 Obtención del “Supermouse” al que se le incorporó el gen MICROINYECCIÓN
de la hormona de crecimiento humana (Brinster y Palmiter)
1983 Expresión específica de tejido en ratón Se inmoviliza el óvulo fecundado y se inyecta en el
1987 Obtención de cerdos, ovejas, conejos y peces transgénicos pronucleo masculino una solución que contiene
1988 Primer ratón transgénico patentado “Oncomouse” muchas copias del transgén (ADN lineal)
TRANSFERENCIA A MADRES RECEPTORAS
 Los cigotos microinyectados se cultivan in vitro unos
días y luego se introducen en madres receptoras,
sincronizadas hormonalmente para poder gestarlos
CHEQUEO DE EMBRIONES Y POSTERIOR ENDOCRÍA
 Los recién nacidos son examinados para ver si en ellos
se ha producido la incorporación del transgén y posterior
OVOCITO FECUNDADO EN ESTADIO
MICROMANIPULADOR endocría permite obtener homocigotas con el transgén
PRONUCLEAR

El ADN exógeno se incorpora al genoma a través de La técnica de microinyección de cigotos resulta muy poco eficiente
integración aleatoria en los cromosomas del cigoto diploide
Cigotas microinyectadas 2.800
Cuerpo polar Sobreviven la microinyección 2.500
Pronúcleo masculino Embriones transferidos a receptoras 250
Preñeces 50
Nucleolo
Terneros transgénicos 1
Pronúcleo femenino

Menos de un 5% de cigotos microinyectados

determinan una descendencia transgénica
Si el transgén se integra al genoma
ANTES de la primer mitosis

VENTAJAS
Si el transgén se integra al genoma •Se puede lograr la integración del
DESPUÉS de la primer mitosis
transgen al genoma de todas las células
y que el mismo sea heredado por la
descendencia
La integración aleatoria por recombinación no homóloga tiene lugar a una
frecuencia mucho mayor que la inserción por medio de recombinación homóloga
DESVENTAJAS
•Técnicamente exigente
•Baja tasa de éxito en especies donde la
visualización de los pronúcleos es compleja.
•La concentración y forma del ADN y el contexto
donde se inserta condiciona el éxito
• Difícil controlar el lugar donde se integrará el
transgén y riesgo de integración múltiple

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Implica la introducción del ADN extraño en células madre
embrionarias obtenidas del macizo celular interno de blastocistos
•Fibroblastos irradiados
•Inhibidores de diferenciación
VENTAJAS
•Se puede seleccionar previamente las
células transfectadas lo que permite:
- Confirmar la incorporación del transgén
- Controlar el número de
insertadas en el genoma
- Controlar la inserción en un sitio
favorable
- Evitar la inserción al azar posibilitando
la recombinación homóloga
DESVENTAJAS
•Limitada sólo al ratón por la imposibilidad de
aislar células madre embrionarias de otras
especies que conserven la capacidad de
totipotencialidad en cultivo
Trofoectodermo
Blatocele
Macizo celular
interno
Las células se cultivan en
condiciones especiales para evitar
que se diferencien y se mantengan
en su estado embrionario
Esta tecnología no sólo
mejoró las estrategias para
introducir ADN exógeno al
genoma sino también
copias permitió “desactivar genes”
y anular la función de los
mismos y obtener los
conocidos ratones knock out
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El ADN extraño se introduce en las células
embrionarias mediante diversas técnicas
Electroporación/Transfección/Microinyección
Posteriormente las células transfectadas son
seleccionadas y reintroducidas en un
blastocisto, el cual es tranferido a una
hembra receptora para permitir su
implantación y desarrollo
Las crías obtenidas son quimeras pero
mediante el cruce con aquellas quimeras que
hayan incorporado el transgén en su linea
germinal se consiguen animales transgénicos
Ampliamente utilizada para la obtención de ratones “knock out”
Los knockout son ratones modificados genéticamente a los que se les ha
inactivado o eliminado uno o más genes
El primer ratón Knockout fue producido en 1989 por Oliver
Smithies, Mario R. Capecchi y Martin Evans, logro por el que
recibieron el Premio Nobel de Medicina en 2007
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TRANSGÉNICO: Portador de un gen extraño (de otro organismo) o

Introducir un nuevo gen modificado. El alelo normal también está presente.
•TRANSGÉNICO
(GANANCIA DE FUNCIÓN)
Irreversible Reemplazo del gen normal o parte del mismo. No hay copia
KNOCK OUT: en el genoma del alelo normal.
Dependiendo de la
construcción de Eliminar un gen •KNOCK OUT Este tipo de ratones tienen una modificación en el gen de
ADN exógeno que (PÉRDIDA DE FUNCIÓN) •KNOCK OUT CONDICIONALES interés que se activa en un determinado tejido o estadio
se introduzca se Irreversible KNOCK OUT/IN
CONDICIONAL e del desarrollo o en respuesta a un agente exógeno para
puede
INDUCIBLE: activar la expresión del transgen o inactivar la expresión
Inducir el aumento o del gen en estudio.
disminución o suprimir •KNOCK OUT/ IN INDUCIBLES
Reemplazo del gen normal o parte del mismo por uno
temporalmente la expresión de modificado en un locus específico. No hay copia en el
un gen de manera controlada KNOCK IN: genoma del alelo normal. Permite generar líneas
Reversible transgénicas “humanizadas” mediante inserción de un gen
humano. Estudiar mutaciones puntuales. Sobre-expresar
el gen. Insertar un gen reportero.

Construcción para producir la “desactivación génica”

El proceso de inactivación génica requiere de la inserción de una
secuencia mediante recombinación homóloga entre secuencias de
una construcción de ADN clonada en un vector y secuencias del
gen que se intenta inactivar

Genoma Gen blanco

Vector neo
r TK

La construcción de ADN debe incluir dos genes marcadores de selección:

• neo r que confiere resistencia a G-418 y este gen se inserta dentro del gen diana (X) y lo
interrumpe
r •Gen de timidinacinasa tkHSV del virus herpes simple, confiere sensibilidad al
neo ganciclovir (análogo citotóxico de nucleótido). Este gen se encuentra fuera de la secuencia
del gen diana

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Selección de células Inyección de células

recombinantes seleccionadas en blastocisto

RECOMBINACIÓN RECOMBINACIÓN
HOMÓLOGA NO HOMÓLOGA

Obtención y cruza de las crías

Selección de células Inyección de células

recombinantes seleccionadas en blastocisto

Obtención y cruza de las crías

Cruza de animales hasta la obtención de individuos homocigotas en

las que el gen se haya inactivado en ambos alelos

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El sistema de recombinación loxP-Cre permite inactivar genes en tipos Cabe destacar que así como se puede “apagar” un gen también se
celulares específicos o en tiempos específicos durante el ciclo de vida puede “encender” un gen en un momento determinado generando
un ratón transgénico o KNOCK IN
•Utiliza una recombinasa sitio
específica: Cre
La construcción de interés se incorpora en un locus determinado
•Esta recombinasa reconoce una
secuencia de 34bp: loxP
•En el vector, la secuencia a
integrar al genoma debe tener a
ambos lados sitios loxP
•Solo en aquellas células que
expresen el gen Cre, se producirá
la deleción de la secuencia que se
quiere eliminar (secuencia
flanqueada por dos sitios loxP)

La TRANSFERENCIA NUCLEAR se describió

por primera vez en 1952 en anfibios y
consiste en extraer el material genético
de un ovocito para posteriormente
introducirle el material genético de una
célula del animal a clonar

•Para obtener animales transgénicos como una

vaca, oveja o cabra, en lugar de usar células
madre embrionarias, se utilizan células
diferenciadas. Estas son transfectadas con la 1996 - DOLLY 1997 - POLLY
secuencia de interés y seleccionadas. primer mamífero clonado a partir primera mamífero clonado y
de una célula adulta transgénico a la vez
•Los núcleos de estas células modificadas
genéticamente (transgénicas) luego se utilizan
para obtener un animal clonado (mediante La diferencia entre la clonación y la transgenésis mediada por
transferencia nuclear) y que además es clonación radica en la célula donante que en este último caso es
transgénico! transgénica. La metodología para la obtención es la misma.

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AÑO ANIMAL TÉCNICA AUTORES Célula Ovocito

1996 Ovejas Clonadas
Transferencia nuclear de células
embrionarias en cultivo
Campbell y col. Donante Recipiente
Transgénica Enucleado
Transferencia nuclear de células
1997 Ovejas Clonadas diferenciadas fetales y adultas en
cultivo
Wilmut y col. Transplante
Ovejas Clonadas y Transferencia nuclear a partir de Nuclear
1997 Schnieke y col.
transgénicas células fetales diferenciadas
Vacas Clonadas y Transferencia nuclear a partir de
1998 Cibelli y col.
Transgénicas células fetales diferenciadas Fusión y activación
Cabras
1999 Transferencia nuclear Baguisi y col.
Transgénicas

A diferencia de la microinyección pronuclear, donde sólo un 3-5% de los animales Desarrollo embrionario in vitro y
nacidos son transgénicos, la transferencia nuclear asegura que el 100% de los
animales nacidos sea transgénico. transferencia a hembra receptora

A) Obtención y transfección de la Célula Donante

Biopsia de piel Transfección

de animal adulto

Selección de
células
transfectadas

Explante
Células fetales

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B) Obtención y enucleación del Ovocito Recipiente C) Transferencia Nuclear

10-12 h 10-12 h
Vesicula germinal Metafase I Metafase II

CP
24 h
24hs

D) Fusión y Activación E) Cultivo in vitro de embriones

Placas de cuatro celdas Estadío pronuclear Embrión de 2 células 4- a 8- células

Embriones en pajuelas
listos para se tranferidos

Mórula Blastocisto

Blatocistos en diferentes
estadios de expanción

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F) Transferencia embrionaria
VENTAJAS
• Se puede chequear previamente el
transgén en las células donantes
• Es posible seleccionar el sexo del
animal a producir
• Posibilita la recombinación homóloga
en células somáticas
• Transmisión a la descendencia
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G) Confirmación de transgénesis
PCR en muestras de
ADN obtenidas a partir
de la sangre de las crías
para detectar la
presencia del transgén
SDS-PAGE y WESTERN BLOT
en muestras de leche obtenidas de las
crías para confirmar que el transgén se
expresa y que los animales producen
la proteína de interés
Consiste en la introducción de ADN foráneo en gametos
masculinos y su posterior inyección citoplasmática
La transferencia nuclear
asegura que el 100% de Plásmido pCX-EGFP
los animales nacidos sea
transgénico en la
primera generación
DESVENTAJAS
• Técnicamente Se requiere gran destreza del
operador Se usa a los espermatozoides
• Baja supervivencia de los embriones y fetos
clonados 0.5 ug plásmido/millón como vectores para la entrega
espermatozoides durante 5 min del DNA exógeno
a 0ºC en citrato de Na al 2.8%.
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ICSI : Intracitoplasmatic
Sperm Inyection
Los transposones son
secuencias de
ADN capaces de moverse
a lo largo del genoma,
característica que se
aprovecha
para utilizarlos como
vectores recombinantes,
que se microinyectan en
los embriones, al tiempo
que se suministra la
transposasa
DESVENTAJAS
• Cuestionado por su reproducibilidad
• Alta frecuencia de mosaicismo dado que el transgén
no se integra en el genoma del embrión antes de las DESVENTAJAS
primeras divisiones celulares • No existe control sobre el número de copias que se integran ni sobre el lugar de integración
• El transgén puede permanecer extracromosómico y • Las integraciones al azar tienen la desventaja de incrementar la probabilidad de efectos secundarios no deseados,
causados por mutagénesis insercional
perderse durante sucesivas divisiones mitóticos • Pueden originarse animales mosaico si la integración se produce después de la primera división celular.

MOLECULAR PHARMING
Consiste en producir proteínas recombinantes de interés en
animales en vez de en biorreactores o fermentadores industriales
Utilizar animales de granja (ovejas, vacas, cerdos, cabras,
gallinas, conejos, etc.) modificados genéticamente para
ESTRATEGIA:
producir proteínas de interés para diferentes industrias,
como la farmacéutica, la alimenticia, la química, etc.

Producir proteínas recombinantes que necesitan modificaciones

postraduccionales que sólo pueden ser producidas en células animales

Elevar los niveles de producción obtenidos en bioreactores industriales

Disminuir los costos y tiempos de producción

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El objetivo es inducir al transgén mediante la regulación de promotores

específicos, de manera tal que la proteína de interés se exprese en un
determinado tejido y/o fluido corporal y que pueda ser fácilmente purificada

LECHE

SANGRE

ORINA

HUEVOS

BIORREACTOR PROTEÍNA DE
INTERÉS

EMPRESAS PIONERAS
PROTEÍNAS DE INTERÉS EMPRESA PAÍS ANIMALES PRODUCTO

BIOFÁRMACOS •Factores de Coagulación AAT (alfa-1-antitripsina) Tratamiento

•Agentes trombolíticos Pharmaceutical
Proteins Ltd
Escocia Ovejas de efisema pulmonar y cirrosis
•Hormonas hepática hereditaria

•Factores de Crecimiento Genzyme

EEUU Cabras
Antitrombina
•Interferones Transgenic Proteína anticoagulante

•Vacunas Gene Pharming

Holanda Vacas
Lactoferrina Humana
Actividad antimicrobiana fundamental
•Anticuerpos Monoclonales Europe
para la inmunidad innata.
• etc… BIOSIDUS Argentina Vacas
Hormona de crecimiento humana
Insulina humana

INTA Argentina Vacas Leche Maternizada

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ANIMAL FÁRMACO PRODUCIDO TRATAMIENTO

Interleukina-2 Deficiencias inmunológicas

Conejo
Calcitocina Humana Osteoporosis
Activador tisular del plasminógeno Trombosis
Cabra
Insulina Diabetes
Factor VIII humano Hemofilia
Cerdo
Proteína C Prevención de trombos
a1-antitripsina Fibrosis quística
Oveja
Factor de coagulación IX Hemofilia

Lactoferrina Deficiencia de hierro EL SUEÑO DEL TAMBO FARMACEÚTICO

Vaca
Hormona de crecimiento humano Enanismo …INDUSTRIA ARGENTINA

PRODUCTOS EN MERCADO
ESTRATEGIAS DE PRODUCCIÓN
Eritropoyetina

Producción en humana Tratamiento de anemia Cultivo masivo de

recombinante células de mamífero
genéticamente
cultivo celular Interferón
Tratamiento de la esclerosis múltiple modificadas
beta 1a

Producción en
Interferón alfa
Tratamiento de hepatitis B y C
2b

Desarrollo y producción
fermentación bacteriana Filgrastim
Tratamiento de la neutropenia, un efecto Producido por
colateral de la quimioterapia fermentación
de materias primas

Animales transgénicos
bacteriana
y productos La hormona de crecimiento humana
biotecnológicos para la Somatropina recombinante (hGH) estimula el crecimiento y
salud humana la reproducción celular en los seres humanos

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PRODUCTOS EN DESARROLLO PRODUCCIÓN DE PROTEINAS EN LECHE DE

ANIMALES TRANSGÉNICOS
 Método natural con bajo impacto ambiental
Hormona de Tratamiento del
Permite obtener en gran cantidad proteínas que tienen una
crecimiento humana enanismo alta demanda y que son muy costosas de obtener por otros
recombinante (hGH) hipofisiario Producción en leche a partir de medios
vacas transgénicas obtenidas por
clonación y transgénesis animal Permite una purificación relativamente simple de la proteína
de interés
Tratamiento de
Insulina
diabetes La nueva molécula no debe interferir con el crecimiento y
metabolismo del animal
Se introduce el gen de interés junto con una secuencia
(promotor) que permite su expresión únicamente en la
glándula mamaria

CAPACIDAD DE PRODUCCIÓN DE LECHE EN DISTINTAS ESPECIES

DINASTÍA PAMPA
Productoras de la Hormona de
Crecimiento Recombinante Humana

DINASTÍA PATAGONIA
250 litros/año Productoras de Insulina

400 litros/año

500 litros/año
DINASTÍA PORTEÑA
Productoras de Hormona de
TAMBO FARMACEÚTICO Crecimiento Bovina
10000 litros/año

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DINASTÍA PAMPA Primeras vacas Jersey clonadas y transgénicas que producen en su

leche Hormona de crecimiento recombinante humana (hGH)

Segunda Generación
Clonada y transgénica

Clonada
(no transgénica)
Primera Generación
Clonada y transgénica

Fue necesario poner a punto primero la clonación en bovinos CULTIVO DE

CELULAS FETALES ÓVULO
por transferencia nuclear FETO BOVINO VACA DONANTE
RAZA JERSEY RAZA ABERDEEN ANGUS
DE 75 DÍAS

AISLAMIENTO DE
UN FIBROBLASTO
EXTRACCION DE NUCLEO
ÓVULO SIN NÚCLEO

PAMPA
TERNERA CLONADA
RAZA JERSEY
EMBRIÓN
OVULO
FUSIÓN
5ACTIVADO
- 9CELULAR
DÍAS CON
NUCLEO DE FIBROBLASTO

PAMPA pesó 37 kilos, cuando un 278

TRANSFERENCIA
animal normal de la raza Jersey EMBRIONARIA DÍAS
suele pesar unos 25 kilos. VACA RECEPTORA
RAZA ABERDEEN ANGUS

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Una vez puesto a punto la técnica de clonación en bovinos

se llevó a cabo la transgésis mediada por clonación

Segunda Generación
Clonada y transgénica

Primera Generación
Clonada y transgénica

PRODUCCIÓN DE HORMONA DE CRECIMIENTO

EN LECHE DE VACA

Confirmación de indentidad
Detección de hGH en Leche molecular EQUIVALE

Productividad de 1 animal transgénico: 28 Kg proteína terapéutica/año

Productividad de fermentación bacteriana: 4,4 Kg proteína terapéutica/año
1 animal transgénico = 4 fermentadores de 500 L

Demanda anual de hormona de crecimiento (hGH):

- Mercado mundial: producción de 15 animales transgénicos
Salamone y col., 2006 - Latinoamérica: producción de 1 animal transgénico

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Perpetuador de especie

LA IMPORTANCIA DE PAMPERO

 Asegura la perpetuación de la estirpe transgénica: cada uno de

sus espermatozoides contiene el gen de la hGH, no se necesita
seguir produciendo vacas por clonación
 Hace posible la reproducción natural, más rápida y menos
costosa que la clonación.
 Semen puede guardarse congelado en nitrógeno líquido,
conservar la estirpe para siempre
 Con una eyaculación, puede inseminar entre doscientas y
trescientas vacas normales
 La mitad de los hijos serán transgénicos, la mitad será de sexo
femenino, vacas productoras de hGH

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Primeras vacas Jersey clonadas y transgénicas que producen en su

leche la Insulina recombinante humana

8 nacimientos de Razas Jersey y Holstein

DINASTÍA PATAGONIA

PROCESAMIENTO PARA OBTENER INSULINA HUMANA ACTIVA

PURIFICACIÓN PROCESAMIENTO MOLECULAR

Ternera clonada Vaca Jersey Leche con

transgénica transgénicaprecursor de
Raza Jersey adulta Insulina
ELABORACIÓN Humana
FARMACEÚTICA
INSULINA PURIFICACIÓN
Proteina Pura
HUMANA

NUEVA ESTRATEGIA FEBRERO 2007

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Primera vaca Jersey clonada y bi-transgénica que produce

Leche Maternizada
(2 genes humanos: Lactoferrina + Lisozima)

6 de Abril, 2010 4 Junio, 2012

ROSITA ISA (1 año y 2 meses – 350 Kg)

OBJETIVO: Aumentar el valor nutricional de la leche bovina El sumo salmón “AquAdvantage”

LISOZIMA Tiene propiedades antifúngicas,
antibacteriales y antivirales

Permite una mejor captura del

TRANSFERRINA hierro

-No busca reemplazar el vínculo madre-hijo

-Está destinada a aquellos lactantes que, por distintas razones,
no pueden ser amamantados por sus mamás
- Podría cubrir las carencias de niños desnutridos
NOVEDAD: Bi-transgénica
AquaBounty creó un salmón que es capaz de desarrollarse dos
veces más rápido, a pesar de tener el mismo olor, color, textura
y sabor del estándar. Esto se consiguió agregando al salmón del
Atlántico la hormona de crecimiento del salmón Chinook y un
activador de la misma del abadejo del océano. La variedad se
llama salmón AquAdvantage y EEUU y Canadá lo aprobaron a
principios de este año como “apto para el consumo humano”

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Enviropig, el “Ecocerdo”
Enviropig, también conocido como Frankenswine, es un tipo de cerdo que
se ha modificado genéticamente: contiene ADN de ratón y de E. Coli. Ello
le permite procesar y digerir mejor el fósforo y se ha creado con la idea
de no solo no tener que darle fósforo adicional, sino que sus excrementos
sirvan como abono sin que el exceso de este elemento acabe en los
mares y ríos y afecte negativamente al medio ambiente y a otros
animales.
El caso de las "Azules Belgas", gigantes vacas transgénicas
Hay vacas que están siendo modificadas genéticamente con el fin de aumentar la
producción de carne: son animales con poco pelo y un desarrollo muy notorio de
la musculatura. Estas “super vacas” llevan intencionadamente el gen de la
miostatina defectuoso que les permite crecer anormalmente grande, con una
“doble músculatura
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La “Cabraraña”
La seda de la tela de las arañas es muy valiosa por su fuerza y
flexibilidad, por lo que si se consiguiera producir en cantidades más
grandes sería un producto muy útil para el ser humano. Esta es la
premisa para la creación de esta cabra, a la que Nexia Biotecnologías
concibió para producir la proteína de la tela de araña en su leche.
Para ello insertaron un gen de las arañas en los óvulos y los
fecundaron.
Mosquitos transgénicos contra la malaria
Algunos mosquitos fueron diseñados como una manera de combatir la malaria
que causa un millón de muertes al año. Por esto se crearon mosquitos
resistentes al Plasmodium, el parásito que provoca la enfermedad y que
transmiten esta característica a su descendencia y también otros que se mueren
en cuanto están a punto de llegar a la madurez sexual.
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Los caballitos de mar de oro Glow Fish, los peces brillantes Ranas y peces transparentes Pollos sin plumas

Y muchos ejemplos más…….

Se produce en Vietnam y consiste en un
caballito de mar al que se le insertó en
sus genes una mezcla de proteínas de
medusa y polvo de oro. Se venden como
mascotas y tienen gran aceptación
La justificación de la creación de estos Resultarán más fáciles de procesar,
animales es para analizar el serán más baratos y no
Estos peces están modificados con contaminarán tanto. Pero los
funcionamiento de los órganos
un gen de las medusas que hace científicos siguen trabajando en su
internos y la circulación sanguínea sin
que brillen ante la luz blanca o prototipo, porque la ausencia total
necesidad de hacer disecciones.
ultravioleta. En Canadá y Europa de plumas es un inconveniente a la
no está permitida su venta. hora de la protección del animal

PROYECCIONES FUTURAS Los “PRO” de los OGM…

- Producción de anticuerpos monoclonales
TRANSGÉNESIS
- Resistencia a enfermedades
BOVINA
- Vacas resistentes al síndrome de la “vaca loca”, mastitis.., etc.
- Cambios cualitativos en la producción de leche:
- Mayor contenido de caseínas para la producción de quesos
- Leches que sin b-lactoglobulina (menos alérgicas)
- Leche libre de lactosa apta para consumo humano
- Cambios cualitativos en la producción de carne:
TRANSGÉNESIS - Carne bovina libre de riesgo de enfermedades
PORCINA - Carne bovina más saludable (menos colesterol)
- Xenotransplante:
La eliminación de genes para la alfa 1-3 galactosil
transferasa permitiría obtener cerdos que no posean el residuo
galactosa en su endotelio y, por lo tanto, sean menos proclives al
TRANSGÉNESIS rechazo agudo y puedan ser donantes de órganos para humano
CAPRINA
-Producción de fibras
La empresa Nexia (Canadá) ha logrado producir cabras que
expresan fibroína (proteína de la tela de araña) en su leche

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Los “CONTRA” de los OGM

•Alteración del orden natural

•Explotación de los animales
•Desequilibrio en los ecosistemas
•Peligro para otros animales o plantas
•Riesgo para consumo humano
(alergias o hipersensibilidades, cáncer,
enf. autoinmunes)
•Efectos secundarios hasta el
momento no son claros

Muchas Gracias!!!

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