EL CICLO DE KREBS

El ciclo de Krebs, o ciclo del ácido cítrico o ciclo de los ácidos tricarboxílicos,
toma su nombre de su descubridor, Hans Adolf Krebs, un bioquímico alemán
premiado con el Nobel en el 1953.
Esta ruta metabólica es la tercera etapa de la respiración celular, el proceso de
producción de energía en las células. Forma parte de la respiración aerobia, es
decir, se realiza en presencia de oxígeno y se desarrolla entre los procesos
deglicolisis y cadena respiratoria. Su fin es la obtención de NADH, una molécula
con poder reductor, que se utiliza para la producción de ATP mediante la cadena
respiratoria.
Es un ciclo metabólico de importancia fundamental en todas las células que
utilizan oxígeno durante el proceso de respiración celular. En estos organismos
aeróbicos, el ciclo de Krebs es el anillo de conjunción de las rutas metabólicas
responsables de la degradación desasimilación de los carbohidratos, las grasasy
lasproteínasen anhídrido carbónico yagua, con la formación de energía química.
El ciclo de Krebs es unaruta metabólicaanfibólica, ya que participa tanto en
procesos catabólicos como anabólicos. Este ciclo proporciona muchos
precursores para la producción de algunosaminoácidos, como por ejemplo el
cetoglutarato y el oxalacetato, así como otras moléculas fundamentales para la
célula.
En células eucariotas se realiza en la mitocondria. En las procariotas, el ciclo de
Krebs se realiza en el citoplasma, específicamente en el citosol. El catabolismo
glucídico y lipídico (a través de la glucolisis y la beta oxidación),produce acetil-
CoA, un grupo acetilo enlazado alcoenzima A. El acetil-CoA constituye el
principal sustrato del ciclo. Su entrada consiste en una condensación con
oxalacetato, al generar citrato. Al término del ciclo mismo, los dos átomos de
carbono introducidos por el acetil-CoA serán oxidados en dos moléculas de CO2,
regenerando de nuevo oxalacetato capaz de condensar con acetil-CoA. La
producción relevante desde el punto de vista energético, sin embargo, se
produce a partir de una molécula de GTP (utilizada inmediatamente para
regenerar una molécula de ATP), de tres moléculas de NADHy una de FADH2.
Los cofactores reducidos, NADH y FADH2, se comportan como intermediarios
óxido/reductores. Cuando están reducidos, son capaces de transportar
electrones a energía relativamente alta (por ejemplo sustraída a los sustratos
oxidados en la glucolisis o en el mismo ciclo de Krebs), hasta la cadena
respiratoria mitocondrial. Cerca de tal cadena se reoxidan a NAD+ y a FAD, y
ceden los electrones a la cadena misma, que será así capaz de regenerar
moléculas de ADP y ATP.
La energía que se saca de la ruptura completa de una molécula de glucosa pasa
los tres estadios de la respiración celular (glucolisis, ciclo de Krebs y cadena de
transporte de electrones), es idealmente de 36 moléculas de ATP. En realidad,
son 38 las moléculas netas de ATP que se producen, pero dos de ellas se
consumen para transportar (mediante transporte activo), desde el citoplasma a
la matriz mitocondrial, las dos moléculas de NADH + H+ producidas en la
glucolisis.

ETAPAS DEL CICLO DE KREBS

 Reacción 1: Citrato sintasa (De oxalacetato a citrato)

El sitio activo de laenzima, activa el acetil-CoA para hacerlo afín a un centro
carbonoso del oxalacetato. El grupo tioéster (CoA) se hidroliza, formando así
la molécula de citrato.
El citrato producido por la enzima, además, es capaz de inhibir
competitivamente la actividad de la enzima. Incluso estando la reacción muy
favorecida, el citrato sintasa puede ser perfectamente regulada. Este aspecto
tiene una notable importancia biológica, puesto que permite una completa
regulación del ciclo de Krebs completo, convirtiendo a la enzima en una
especie de marcapasos del ciclo.

 Reacción 2: Aconitasa (De citrato a isocitrato)

La aconitasa cataliza la isomerización del citrato a isocitrato, por la formación
de cis-aconitato.
La unión al sustrato se asegura por la presencia de un resto de serina, de
arginina, de histidina y de aspartato, que permiten sólo la unión
estereospecifica del citrato 1R,2S, rechazando la forma opuesta.
  Reacción3: Isocitrato deshidrogenasa (De isocitrato a oxoglutarato)
La isocitrato deshidrogenasa mitocondrial es una enzimadependiente de la
presencia de NAD+ y de Mn2+o Mg2+.
Inicialmente, la enzima cataliza la oxidación del isocitratoa oxalsuccinato, lo
que genera una molécula de NADH a partir de NAD+. Sucesivamente, la
presencia de un ión bivalente, que forma un complejo con los oxígenos del
grupo carboxilo en posición alfa, aumenta la electronegatividad de esa región
molecular. Esto genera una reorganización de los electrones en la molécula, con
la consiguiente rotura de la unión entre el carbono en posición gamma y el
grupo carboxilo adyacente. De este modo se tiene una descarboxilación, es
decir, la salida de una molécula de CO2, que conduce a la formación de α-ceto
glutarato, caracterizado por dos carboxilos en las extremidades y una cetona en
posición alfa con respecto de uno de los dos grupos carboxilo.

 Reacción 4: α-cetoglutarato deshidrogenasa (De oxoglutarato a

Succinil-CoA)
La descarboxilación oxidativa del α-chetoglutarato es muy parecida a la del
piruvato, otro α-acetoacido. Ambas reacciones incluyen la descarboxilación
de un α-acetoacido y la consiguiente producción de una unión tioester a alta
energía con la coenzima A. Los complejos que catalizan tales reacciones son
parecidos entre ellos
La α-cetoglutarato deshidrogenasa está compuesta de tres enzimas
diferentes:
▫ Subunidad E1: Las dos cetoglutarato deshidrogenasas.
▫ Subunidad E2: La transuccinilasa.
(La subunidad E1 y E2 presentan una gran homología con las del piruvato
deshidrogenasa.)
▫ Subunidad E3: La dihidrolipoamida deshidrogenasa, que es el mismo
polipéptido presente en el otro complejo enzimático.

 Reacción 5: Succinil-CoA sintetasa (De Succinil-CoA a succinato)

El succionil-CoA es un tiroester a alta energía. La citrato sintasa se sirve de
un intermediario con tal unión a alta energía para llevar a cabo la función
entre una molécula con dos átomos de carbono ( acetil-CoA) y una con cuatro
(oxalacetato).
Se trata del único paso del ciclo de Krebs en el que se produce una
fosforilación a nivel de sustrato.

 Reacción 6: Succinato deshidrogenasa (De succinato a fumarato)

La parte final del ciclo consiste en la reorganización de moléculas a cuatro
átomos de carbono hasta la regeneración del oxalacetato. Tal conversión
ocurre mediante tres pasos: una primera oxidación, una hidratación y una
segunda oxidación. Estos tres pasos además permiten la extracción ulterior
de energía mediante la formación de FADH2 y NADH.
La primera reacción de oxidación es catalizada por el complejo enzimático
del succinato deshidrogenasa, la única enzima del ciclo que tiene como
aceptor de hidrógeno al FAD en vez de al NAD+. El FAD es enlazado de
modo covalente a la enzima por un residuo de histidina. La enzima se vale
del FAD ya que la energía asociada a la reacción no es suficiente para reducir
el NAD+.
El complejo enzimático también es el único del ciclo que pasa dentro de la
membrana mitocondrial. Tal posición se debe a la implicación de la enzima
en la cadena de transporte de los electrones. Los electrones pasados sobre
el FAD se introducen directamente en la cadena gracias a la unión estable
entre la enzima y el cofactor mismo.

 Reacción 7: Fumarasa (De fumarato a L-malato)

La fumarasa cataliza la adición en trans de un protón y un grupo OH-
procedentes de una molécula de agua. La hidratación del fumarato produce
L-malato.

 Reacción 8: Malato deshidrogenasa (De L-malato a oxalacetato)

La última reacción del ciclo de Krebs consiste en la oxidación del malato a
oxalacetato. La reacción, catalizada por la malato deshidrogenasa, utiliza otra
molécula de NAD+ como aceptor de hidrógeno, produciendo NADH.
La energía libre de Gibbs asociada con esta última reacción es decididamente
positiva, a diferencia de las otras del ciclo. La actividad de la enzima es
remolcada por el consumo de oxalacetato por parte de la citrato sintasa, y de
NADH por parte de la cadena de transporte de electrones.
 El ciclo de Krebs ocupa una posición central en el metabolismo de los
seres vivos, revistiendo sobre todo un papel clave en las rutas
catabólicas.
 Catabolismo de los carbohidratos
El ciclo de Krebs es la segunda etapa del catabolismo de los carbohidratos.
 Catabolismo de las proteínas
En lo que concierne a las proteínas, son degradadas mediante mecanismos
de proteolisis por enzimas proteasas, que las trocean en sus constituyentes
fundamentales: los aminoácidos.
 Catabolismo de los lípidos
En el catabolismo de los lípidos, los triglicéridosson hidrolizados por enzimas
lipasas para formar ácidos grasos y glicerol. En los organismos superiores, el
glicerol puede entrar en el glucolisis a nivelhepáticoo ser transformado
englucosaa través de la hidroxiacetona fosfato y el gliceraldehído-3- fosfato,
siguiendo la ruta metabólica de la gluconeogénesis.
 Cadena de transporte de electrones
El ciclo de Krebs siempre es seguido por una fosforilación oxidativa, una
cadena de transporte de electrones. Una no tendría sentido sin la otra en
cuanto que el ATPy el GTP producidos por el ciclo es escaso y la producción
deNADHyFADH2 llevaría a un entorno mitocondrial excesivamente reducido,
mientras que la cadena respiratoria por sí sola necesitaría una fuente de
cofactores reducida parala oxidación del entorno.

Reacciones en las que intervienen los intermediarios del ciclo

Los intermediarios del ciclo de Krebs están implicados en numerosas rutas
metabólicas:
 Acetil CoA: beta oxidación; biosíntesis de los ácidos grasos; degradación
de la lisina; degradación de la valina, leucina e isoleucina; metabolismo
de la fenilalanina.
 α-cetoglutarato: biosíntesis de la lisina; metabolismo del ácido ascórbico;
metabolismo del glutamato.
 Succinil CoA: metabolismo del propanato; degradación de la valina,
leucina e isoleucina metabolismo de la fanilalanina.
 Succinato: metabolismo del butanato; metabolismo de la tirosina.
 Fumarato: ciclo de la urea; metabolismo de la arginina y la prolina;
metabolismo de la tirosina
 Oxalacetato: metabolismo del glioxilato; metabolismo del glutamato y
elaspartato; gluconeogénesis.

Estructura del Ciclo de Krebs