Cinética de crecimiento

Cultivo por lote

Crecimiento bacteriano

Medio definido mínimo

 Cinética de Crecimiento Celular en Cultivo por Lote

[C]
LnN

Crecimiento Balanceado

Zona donde el incremento por unidad de tiempo de masa

celular, n° de células, ADN, ARN, proteínas, etc., es un valor
constante y similar en cada caso.
⇒ Condiciones ambientales y nutricionales adecuadas y
constantes
 32 64 128 256 568 1024….

tD
 Velocidad específica
de crecimiento, h-1
dX
=µ X
dt
•Cinética de primer orden

•Autocatalítica
 µ = 1 dX = dlnX
X dt dt

lnX

µmax

tiempo
 dX
=µ X
dt

µt
X = X0 e
µ = constante
Ln X = ln X0 + µt
 Crecimiento celular
Cinética de crecimiento MD3
OD Biomasa Ln
muestra tiempo abs Fd λ620 (g/L) (Biomasa)
1 0 0,314 1 0,31 0,09 -2,408
2 16 0,65 1 0,65 0,20 -1,609
3 26 0,539 2 1,08 0,32 -1,139
4 38 0,552 4 2,21 0,66 -0,416
5 44 0,541 5 2,71 0,81 -0,211
6 50 0,638 5 3,19 0,96 -0,041
7 62 0,682 6 4,09 1,23 0,207
8 68 0,761 6 4,57 1,38 0,322
9 74 0,808 6 4,85 1,47 0,385
10 89 0,75 6 4,50 1,36 0,307
11 101 0,539 6 3,234 0,96 -0,041
 Crecimiento celular
6,00 1
0,5
5,00
0

Ln (biomasa)
4,00 -0,5 0 20 40 60 80 100 120
Biomasa (g/L)

-1
3,00
-1,5
2,00 -2
-2,5
1,00
-3
0,00 y = 0,0519x - 2,431 Tiempo (h) y = 0,0219x - 1,1572
0 20 40 60 80 100 120 R² = 0,9973 R² = 0,9949
Tiempo(h)
 32 64 128 256 568 1024….

tD

ln 2
tD =
µ
 tD, h
BACTERIAS 0,3 – 2,5
LEVADURAS 1,0 – 4,0
HONGOS 1,5 – 7,0
MICROALGAS 18 - 35
CELULAS MAMIFERAS 20 – 40
 Factores ambientales que afectan µ
Tipo de Sustrato

Ecuación de Monod

µ = µm S
µ
µm KS + S
µm
2

KS dX S
s µ
= m X
dt KS + S
Nutriente Organismo KS (mg/L)
limitante
Glucosa E.coli 0.07 - 2
A.niger 5
Lactosa E.coli 20
Ribosa H.polymorpha 3
Metanol Psedomonas sp 0.7
Fosfato E. coli 1.6
Mg++ Klebsiela sp 0.6
SO4= E. aerogenes 3
 E. coli

FUENTE DE CARBONO
Y ENERGÍA tD (min) µm (h-1)
Succinato + SM 300 0,14

Acetato + SM 80 0,52

Glucosa + SM 50 0,82
 Nutrientes

ƒ(C): carbohidratos, lípidos, ácidos orgánicos

azúcares, ác. grasos, ...., hidrocarburos, ...., CO2

ƒ(N): proteínas, sales de amonio, amoniaco, nitratos, ..., N2

ƒ(O): usualmente contenida en f(C) y en el agua

ƒ(H): usualmente contenida en f(C) y en el agua

ƒ(P): fosfatos

Otros: sales minerales, vitaminas, nutrientes específicos

 Factores ambientales que afectan µ
Inhibición por Sustrato

µ = µm S
(KS + S) (1 + S/Ki)

Inhibición por Producto

µ = µm S
(KS + S) (1 + P/KP)
Se tienen los siguientes datos para un cultivo por lote:

Tiempo (h) Biomasa

6 2
(g/l)
5

Concentración de
0 0.10 1

Biomasa (g/l)
4
1 0.15 0

ln X
2 0.20 3
-1
3 0.25 2
-2
4 0.68 1

5 1.80 0 -3
0 2 4 6 8 10
5.5 3.00
Tiempo (h)
6 5.00
7 5.30 µ = 0.996 h-1
8 5.30

Estimar la duración de la fase de latencia; µMax y tD.

Una cepa de Aerobacter aerogenes fue inoculada,
simultáneamente, en tres medios de cultivo diferentes: peptona y
dos medios químicamente definidos conteniendo glucosa y ácido
cítrico, respectivamente, como única fuente de carbono.

El inóculo en cada caso fue de 3 x 105 células/ml. Luego de 4.5 h

la concentración celular en cada cultivo fue de: 97.32 x 106, 41.11
x 106 y 1.43 x 106 células/ml, para peptona, glucosa y ácido cítrico,
respectivamente. El cultivo con ácido cítrico fue el único que
presentó una fase lag, cuya duración fue de 90 min. En los tres
cultivos la fase de crecimiento exponencial fue superior a 5 h.

Determine el tiempo de duplicación del microorganismo para

cada uno de los cultivos y comente los resultados.
 Factores ambientales que afectan µ
Temperatura
Clasificación Rango Optima

Termófilos 25 - 80 °C 50 - 60 °C

Mesófilos 10 - 45 °C 20 - 40 °C

Psicrófilo -5 - 30 °C 10-20 °C

Ea
−
µ= A ⋅ e R⋅T
Factores ambientales que afectan µ

pH
Clasificación pH externo
Acidófilos 1.0 - 5.0
1.5 < pH* < 1.5
Neutrófilos 5.5 - 8.5
Alcalófilos 9.0 - 10.0

Microorganismo pH externo
microalgas 6.0 - 9.0
Bacterias 3.0 - 6.0
No hay gran efecto
Hongos 4.0 - 7.0 sobre µ
 Rendimiento y diseño de
medio de cultivo

Rendimiento experimental

∆X
YX / S =
− ∆s

∆X = X final - X 0

− ∆s = s 0 - s final = s 0
 Rendimiento y diseño de
medio de cultivo
Rendimiento teórico máximo

% elemento en nutriente
YX / S =
% elemento en biomasa
Rendimiento teórico máximo FC y FE

% elemento en nutriente
YX / S = xf
% elemento en biomasa
Sistema aerobio f = 0,5 – 0.6
Sistema anaerobio f = 0,1
 Composición Celular

Elemento % en peso, base seca

bacterias levaduras mohos
Carbono 46-52 46-52 45-55
Nitrógeno 10-14 5-9 3-7
Oxígeno 18-24 18-24 18-24
Hidrógeno 8-12 8-12 8-12
Fósforo 2-3 0.8-1.5 0.4-4.5
Potasio 1-4 1-4 0.2-2
Azufre 0.1-1 0.01-0.3 0.1-0.5
Magnesio 0.1-0.5 0.1-0.5 0.1-0.3
 Rendimiento Celular

Compuesto YX/s exp. YX/s teórico

(f= 0.55)
Glucosa 0.45 0.46
Fructosa 0.42 0.46
Glicerol 0.45 0.45
Metanol 0.40 0.43
Maltosa 0.46 0.48
Acetato 0.32 0.46
Consumo de sustrato:
velocidad específica de consumo

dS µ X
= = -qS X
dt YX/S
Rendimiento y diseño de medio de Cultivo

Diseño de medio de cultivo

S0 = Sf + (Xf – X0)
YX/S

Aplicación Rango (g/l)

Investigación matraces 0.5 - 2.0

Investigación (fermentador) 1- 8
Producción
Usual 10 - 25
Alto 30 - 50
Alta densidad (recirculación) 100 - 250