Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
EN LA INDUSTRIA
Curso on line
Beatriz Soledad
Contenido
INTRODUCCIÓN................................................................................................7
MÉTODOS DE VALIDACIÓN.......................................................................11
MÉTODOS ANALÍTICOS....................................................................................11
Exactitud......................................................................................................13
Precisión......................................................................................................14
Especificidad...............................................................................................14
Límite de detección......................................................................................15
Límite de cuantificación..............................................................................15
Linealidad....................................................................................................15
Rango..........................................................................................................15
Robustez......................................................................................................16
Rudeza.........................................................................................................16
Estudios Colaborativos.............................................................................................................16
MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS.........................................................................18
Exactitud...................................................................................................................................22
Recuperación............................................................................................................................22
Curva de Calibración................................................................................................................22
2
Linealidad.................................................................................................................................23
Limites de detección.................................................................................................................23
Precisión...................................................................................................................................23
Exactitud...................................................................................................................................30
Recuperación............................................................................................................................30
Curva de Calibración................................................................................................................30
Linealidad.................................................................................................................................30
Limite de detección...................................................................................................................31
Precisión...................................................................................................................................31
PROCESOS DE FABRICACIÓN............................................................................36
Tipos de validación......................................................................................37
Prospectiva....................................................................................................................................38
Concurrente...................................................................................................................................38
Revalidación.................................................................................................................................39
Retrospectiva.................................................................................................................................39
Revalidación................................................................................................40
3
Implicación de la Dirección...........................................................................................................41
Bibliografía.........................................................................................................43
PROLOGO
4
El e-learning es el aprendizaje asistido por tecnologías de la
información y fomenta el uso intensivo de las Tecnologías de Información y
Comunicación facilitando la creación, adopción y distribución de contenidos,
así como la adaptación del ritmo de aprendizaje y la disponibilidad de las
herramientas de aprendizaje independientemente de límites horarios o
geográficos. Esto permite que el alumno intercambie opiniones y aportes a
través de las TIC.
Este sistema está dirigido a personas que desean ampliar sus destrezas
sin necesidad de interrumpir sus actividades o gastar tiempo en largos
traslados, por lo que las personas se pueden capacitar sin desplazarse de su
lugar de trabajo, ni interrumpir su horario.
Acceso las 24 horas del día, todos los días, desde cualquier lugar.
5
Si el curso que bajó fue de su agrado y desea colaborar con nosotros
para el desarrollo y mantenimiento de esta actividad, puede hacernos una
donación cuyo monto queda a su criterio, anticipadamente le manifestamos
nuestro reconocimiento.
http://www.habilidadesyconocimiento.com
6
INTRODUCCIÓN
7
Manufactura (Good Manufacturing Procedures (GMP´s)) la Food and
Agricultura Organization of the United Nation (FAO) y los Buenos
Procedimientos de Laboratorio (Good Laboratory Procedures (GLP´s)) han
venido formulando diferentes programas y parámetros para lograr el
aseguramiento de la calidad de los distintos productos que elaboran las
empresas.
8
“Es el acto de demostrar y documentar que el procedimiento opera
efectivamente”.
9
Con el propósito fundamental de asegurar que el proceso productivo se
encuentra bajo control, es necesario contar con procedimientos escritos para
todas las operaciones que se realizan. Esto incluye tanto las operaciones de
producción, como los procesos de control de calidad.
10
Métodos de validación
En este capítulo se mostrarán diferentes métodos de validación
utilizados con propósitos distintos los cuales se describen a continuación:
MÉTODOS ANALÍTICOS
11
Tabla 1.- Características analíticas típicas usadas en métodos de
validación.
Exactitud
Precisión
Especificidad
Límite de detección
Límite de cuantificación
Linealidad
Rango
Robustez
Rudeza
12
reporten datos válidos y más frecuentemente incluyan réplicas ciegas que
aseguren los parámetros de repetibilidad de los ensayos entre laboratorios.
Exactitud.
Precisión
13
Los documentos IHC recomiendan que la repetibilidad debería
ensayarse usando un mínimo de nueve determinaciones cubriendo el rango
especificado para el procedimiento (esto es tres concentraciones y tres
réplicas de cada concentración o usando un mínimo de seis determinaciones a
100 % de la concentración del análisis).
Especificidad.
Límite de detección
Límite de cuantificación
14
concentración de muestra en un analito que puede ser determinada con
precisión y exactitud aceptables, bajo las condiciones experimentales
establecidas.
Linealidad
Rango
Es el intervalo entre el nivel más alto y más bajo del analito en el que se
ha demostrado que puede ser determinado con exactitud, precisión y
linealidad, tal y como lo indica el método.
Robustez
15
Rudeza
Estudios Colaborativos
16
Cuando se realizan estudios colaborativos, deben utilizarse, si es
posible, muestras homogéneas del mismo lote. Deben analizarse
estadísticamente los resultados comparativos, discutirse y explicar cualquier
anormalidad, el número mínimo de laboratorios es de 8 y sólo en casos
especiales en los cuales se utiliza equipos muy costosos pueden conducirse
estudios con un mínimo de 5 laboratorios. En el caso de análisis cualitativos,
es necesario un mínimo de 10 laboratorios (AOAC INTERNATIONAL.
Apéndice D. 2002).
17
MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS
18
que el método mida sólo eventos ciertos y no proporcione falsos positivos, por
lo que es preciso plantearse y responder a las siguientes preguntas:
19
Los métodos de ensayo microbiológicos cualitativos, tales como
aquellos en los que el resultado se expresa en términos de detectado/no
detectado, y los procedimientos de confirmación e identificación, deben ser
validados estimando, cuando sea apropiado, su especificidad, exactitud
relativa, desviación positiva, desviación negativa, límite de detección, efecto
matricial, repetibilidad y reproducibilidad
Incertidumbre de la medida
20
directamente y evaluarse fácilmente para demostrar que realizan una
contribución insignificante a la incertidumbre global. Otros componentes, como
la estabilidad y preparación de las muestras, no pueden medirse directamente
y su contribución tampoco puede evaluarse por métodos estadísticos, pero
debe considerarse también su importancia en la variabilidad de los resultados.
Características de operación
Exactitud
21
Pueden utilizarse muestras de referencia inoculadas si están disponibles y son
aplicables.
Recuperación
Curva de Calibración
Linealidad
No es aplicable.
Limites de detección
22
Este bajo nivel se conoce como el resultado de alrededor de 40
verdaderos negativos. La interferencia en la microflora de la matriz que es
relativamente resistente a los agentes selectivos usados en el medio de
enriquecimiento, así como a otros factores, pueden afectar los valores
observados.
Precisión
Repetibilidad Intralaboratorio.
Reproducibilidad Interlaboratorios.
23
Falsos negativos y falso positivos
Sensitividad
Especificidad.
Ensayo de Rudeza
24
Cuando se tiene una matriz particularmente difícil, vale la pena utilizar el
método de comparación.
Matrices de muestra.
Microorganismos analitos.
25
Estado de estrés del microorganismo analito
26
Microflora Interferente
Criterios de aceptación.
27
ejemplo, un método da un valor de 21 % de falso negativo a 0.08 ufc/g de
muestra de carne podría probablemente no ser aceptada para la carne en
estudios precolaborativos, sin embargo podría aceptarse bajo esta guía
porque ellos están haciendo asignaciones para la falla estadística para fijar
este nivel de siembra. Esta asignación es hecha automáticamente por el
método de 50 % del punto final (con 95 % de limite de confianza).
28
Características de rendimiento
Exactitud
Recuperación
Curva de Calibración.
29
Generalmente no es aplicable.
Linealidad
Limite de detección.
30
es cercano a 100 ufc/g en la metodología del plaqueo y tan bajo como 0.01
ufc/g en la metodología de NMP
Precisión
Repetibilidad Intralaboratorio
Reproducibilidad Interlaboratorio.
Sensitividad
Especificidad
31
Ensayo de Rudeza
Matrices
El ensayo puede ser realizado con una célula inoculada viable y/o con
células con un contaminante natural. Se ha recomendado que 10 cepas
32
diferentes de microorganismos relevantes sean estudiadas como cantidades
agregadas o como analitos incurridos. Sin embargo si solo una cepa particular
o serotipo es el analito de interés, puede ser suficiente una cantidad menor (p.
Ej. 5). Pero es preferible que el laboratorio que conduce el estudio tenga cepas
apropiadas para las matrices involucradas, que sean pocas para ser
estudiadas en profundidad y que, preferiblemente, se use solo una cepa por
matriz. Deben evitarse cepas mezcladas a pesar de que un método de amplia
categoría esté involucrado tal como para el conteo de mohos y levaduras,
bacterias coliformes o bacterias gram negativas. Cuando los segmentos de
inclusividad/exclusividad son realizados en los Métodos Oficiales de estudios
precolaborativos, se recomiendan 30 – 40 cepas de analitos y 10 -20 cepas de
no analito
Niveles.
Microorganismos interferentes
33
microflora. Idealmente la microflora debería exceder los microorganismos
indicadores en al menos 2 a 3 logaritmos en las muestras con alto nivel de
microflora.
Criterios de aceptación.
34
PROCESOS DE FABRICACIÓN.
35
La FDA (1983) la define como:
Tipos de validación
36
metodología debe ser aplicada a cada uno de los factores críticos
contemplados dentro del proceso productivo
Prospectiva
Concurrente
37
Revalidación
Retrospectiva
38
Prioridad de los productos y/o sistemas a validar
- Los nuevos productos que han de salir al mercado. Estos tendrán una
prioridad absoluta, la cual viene dada por imposición legal. Se hará una
validación de tipo prospectiva.
Revalidación
39
podrá ser más sencilla que una validación prospectiva. La periodicidad de esta
revalidación estará determinada por la experiencia de cada proceso o sistema.
Implicación de la Dirección
40
Plan Maestro de Validación
41
Bibliografía.
42
Food Microbiological Official Methods of Analysis. Journal of AOAC
INTERNATIONAL, Vol 85, Nº 5, pp 1187-1199.
43
OGA-GEC-016. 2004.Política de Selección y Validación de Métodos de
Ensayo. Oficina Guatemalteca de Acreditación para la Selección y Validación
de Métodos de Ensayo. Guatemala.
Van Dyck, K., Robberecht, H., Van Cauwenbergh, R., Deelstra, H.,
Arnaud, J., Willemyns, L., Benijts., F., Centeno, J., Taylor, H., Soares, M.,
Bastos, M., Ferreira, M., D'Haese, P., Lamberts, L., Hoenig, M., Knapp, G.,
Lugowski, Moens, L., Riondato, J., Van Grieken, R., Claes, M., Verheyen, R.,
Clement L., y Uytterhoeven, M. 2000. Spectrometric determination of silicon in
food and biological samples: an interlaboratory trial. J. Anal. At. Spectrom., 15,
pp. 735 -741
44