Manual de

Biossegurança
Laboratório de Análises Clínicas Gonzaga

Elaborado por:Dr. José Reinaldo Oliveira da Conceição

Aprovado por: Dr. Celso Alberto Pessoa da Silva

07/2018

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 ÍNDICE

Objetivos do documento
Responsabilidades
2.1 Descrição das responsabilidades
Vestimenta e equipamentos
3.1 Vestimenta obrigatória para os funcionários da área técnica
3.2 Equipamentos de proteção individual
3.3 Equipamentos de proteção coletiva
3.4 Recipientes para descarte de material não contaminado, contaminado ou
esterilização de material
3.5 Apoio à biossegurança
3.6 Mapa de risco (segundo a NR5)
Armazenamento de substâncias
5. Disponibilidade, montagem e uso dos Equipamentos de proteção
5.1 Placas indicativas
5.2 Jalecos
5.3 Luvas
5.4 Máscaras e óculos de proteção
5.5 Lava-olhos
5.6 Escudo de proteção contra respingos
5.7 Kit de primeiros socorros
5.8 Kit de desinfeção
5.9 Ducha de segurança
5.10 Capelas de exaustão e câmaras de fluxo laminar
6 POP de biossegurança: Instruções de trabalho
6.1 Controle ambiental
6.1.1 Descontaminação de áreas após derramamento de material biológico
ou culturas de microrganismos
6.1.2 Descontaminação de pequenas áreas
6.2 Esterilização e descontaminação
6.2.1 Procedimentos gerais de descontaminação
6.3 Autoclavação
6.3.1 Controle do processo
6.3.2 Critérios de aceitabilidade
6.3.3 Registro
6.4 Forno Pasteur
6.5 Desinfetantes
6.5.1 Desinfetantes líquidos
6.6 Segurança biológica de centrífugas

2
7.0 Manejo do lixo
7.1 Tipos de lixo
8 Rotulagem de resíduos do laboratório
8.1 Principais resíduos químicos do laboratório
9 Recolhimento e desativação de resíduos do laboratório
10 Manipulação de produtos químicos
11 Armazenamento e transporte de produtos químicos
12 Preparo de soluções
12.1 Procedimentos em caso de acidentes com soluções

13 Incêndios
13.1 Equipamentos para controle de incêndios
14 Telefones úteis
15- REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
16– Documentos anexos e legenda dos símbolos

1. Objetivos deste documento

Este documento objetiva garantir a segurança dos trabalhadores, descrevendo as
rotinas de trabalho com um mínimo de risco, esclarecendo os princípios básicos de
biossegurança, bem como o correto uso dos Equipamentos de proteção individual (EPIs),
além de medidas que evitem os acidentes mais comuns no laboratório clínico.

2. Responsabilidades
Os chefes dos setores, juntamente com a comissão de biossegurança são os responsáveis pela
segurança biológica do laboratório, cabendo a cada funcionários executar as rotinas de acordo
com as normas descritas neste manual, uma vez que segurança é uma responsabilidade de
cada indivíduo.

2.1-Descrição das responsabilidades em biossegurança:

A. Comissão de Biossegurança:
1. Preparar o manual de biossegurança, dentro das legislação vigente e suas
revisões quando necessário.
2. Distribuir a todos os setores do laboratório que estejam envolvidos direta ou
indiretamente com rotina que envolva o contato com material clínico. Isto
envolve os setores burocráticos uma vez que as visitas aos setores técnicos
constitui uma atividade de rotina.
3. Investigar os acidentes e suas causas buscando soluções que minimizem a
repetição do mesmo .
4. Coordenar a coleta e descarte de rejeitos.
5. Garantir o treinamento em biossegurança dos funcionários
6. Garantir a realização do programa de biossegurança e o registro de todas as
atividades ligadas à biossegurança.
B. Chefe de setor:
1. Verificar e relata à comissão de biossegurança os riscos decorrentes das
atividades do seu setor.

3
 2. Assegurar a realização das atividades de biossegurança
3. Treinar o pessoal do seu setor em biossegurança
C. Coordenador de segurança do setor:
1. Cooperar com o chefe do setor na garantia das atividades de biossegurança ,
incluindo treinamento.
D. Criação e manutenção da CIPA (COMISSÃO INTERNA DE PREVENÇÃO DE
(ACIDENTES) composta por funcionários de todos os níveis, que deve atender às
exigências legais vigentes.
E. Implantação e manutenção do SESMT - (Serviços Especializados em Engenharia de
Segurança e Medicina do Trabalho). Sob responsabilidade de um médico do trabalho.
F. Implantação e manutenção do PCMSO - (Programa de Controle Médico de Saúde
Ocupacional). Sob responsabilidade de um médico do trabalho

F. Implantação e manutenção do PPRA - (Programa de Prevenção de Riscos Ambientais)

Sob responsabilidade direta da Comissão de biossegurança.

3. Vestimenta e equipamentos

3.1-Vestimenta obrigatória para funcionários da área técnica:

 Calça comprida confeccionada em tecido resistente. Calças até os tornozelos, ou acima,
não são admitidas.
 calçado fechado (sapato ou tênis)
 blusa com manga curta ou comprida ,
 As bijuterias como brincos, em tamanho e número discretos, podem ser utilizadas durante
o trabalho técnico, entretanto os anéis, pulseiras e relógio devem ser evitados.
 Maquiagem pode ser utilizada, porém de forma discreta (ex. batom), uma vez que podem
interferir com o resultado de alguns exames (ex. bases, e outras em forma de pó)
 Cabelos compridos devem estar presos ao manusear equipamentos rotativos ou
manipulação e coleta de material biológico.
 Homens com barba deverão seguir as mesmas precauções que indicadas para cabelos
compridos.

3.2-Equipamentos de proteção individual (EPIs):

 Jaleco branco, de manga comprida e com a logomarca da empresa
 Luvas de látex
 Luvas plásticas para manipulação de equipamentos não contaminados durante a rotina
 Luvas em tecidos resistentes para trabalhos em altas temperatura
 Óculos de proteção
 Máscara de proteção
 Protetor de ouvidos
 Toca para os cabelos
 Escudo de proteção contra respingos

3.3-Equipamentos de proteção coletiva (EPCs)

 Lava olhos
 Chuveiro
 Kit de primeiros socorros

4
 Extintores de incêndio
 Capelas de exaustão
 Câmara de fluxo laminar

3.4-Material para descarte de material não contaminado, contaminado ou esterilização

de material
 Recipiente de lixo plástico
 Pá plástica
 Lata de lixo de metal com acionamento por pedal
 Carrinho para transporte de sacos de lixo
 Frascos contendo solução germicida (germekil ou hipoclorito 2%)
 Saco plástico autoclavável
 Saco plástico branco para material contaminado
 Lâmpadas ultravioleta
 Autoclaves
 Forno Pasteur
 Reservatórios para produtos químicos
 Frascos para pipetas e ponteiras contaminadas

3.5-Apoio à biossegurança
 Os setores que apresentarem alguma particularidade nos procedimentos de limpeza devem
apresentar um programa de treinamento aos funcionários da limpeza.
 A superfície das bancadas e piso deve ser de material impermeável à água, ácidos, bases,
solventes orgânicos e no mínimo moderadamente termoresistente.
 Todos os setores devem apresentar um conjunto de toalhas descartáveis, além de solução
germicida e sabão líquido.
 Adesivos associados à Biossegurança, segundo as normas da ABNT.

3.6-Mapa de risco (segundo a NR5)

Um mapa constando das diferentes áreas do laboratório onde deverão estar sinalizados e
potencializados os riscos, tais como: Físico, Químico, Biológico, Mecânico e Ergonômico.
As áreas deverão ser indicadas com círculos de diferentes cores para um entendimento mais
fácil, conforme indicado abaixo:

VERDE: Físico
VERMELHO: Químico
MARROM: Biológico
AZUL: Mecânico
5
 AMARELO: Ergonômico
a. Agentes Físicos: são representados no ambiente de trabalho através de ruídos,
vibrações, temperaturas anormais, radiações ionizantes, radiações não-ionizantes,
iluminação e umidade.

b. Agentes Químicos: por agentes químicos em Higiene do Trabalho, entendem-se

aqueles que quando penetram no organismo podem afetar vários órgãos, causando
alterações em sua estrutura e/ou funcionamento.

c. gentes Biológicos: são microorganismos causadores de doenças com os quais pode o

trabalhador entrar em contato no exercício de diversas atividades profissionais. Como
por exemplo: bactérias, fungos, helmintos, protozoários, vírus, etc.

d. Agentes Mecânicos: o agente mecânico é toda situação de risco que pode gerar
acidentes imediatos.

e. Agentes Ergonômicos: são aqueles relacionados com fatores fisiológicos e

psicológicos inerentes à execução das atividades profissionais. Estes fatores podem produzir
alterações no organismo e no estado emocional dos trabalhadores, comprometendo a sua
saúde, segurança e produtividade.
 Principais fatores: trabalho físico pesado, postura incorreta de trabalho e de
levantamento de peso, posição incômoda, ritmo excessivo, monotonia, trabalho de turnos,
jornadas prolongadas, ansiedade, responsabilidade, desconforto, ocasionando danos à
saúde que podem se manifestar por: hipertensão arterial, úlceras digestivas, doenças
nervosas, além de alteração no sono, problemas de coluna, taquicardia, tensão, ansiedade,
medo, etc. Para evitar que estes agentes afetem as atividades do trabalhador, faz-se
necessário o ajustamento mútuo do homem ao trabalho, que se obtém através da
modernização e higienização dos ambientes de trabalho, da modificação de processos, do
projeto de máquinas e de ferramentas perfeitamente adaptadas e da adoção de ritmos e
posições adequadas ao trabalho e racionalização de trabalho.

4. Armazenamento de substâncias

6
4.1-combustíveis
Os cilindros de gás devem ser armazenados em local externo, amplo, coberto, naturalmente
ventilado e devidamente protegido.
Os reagentes inflamáveis e combustíveis deverão ser armazenados em local arejado e ao
abrigo da luz. A área de armazenagem deve conter adesivos informando a presença de
substâncias combustíveis.

4.2-substâncias químicas
Todas as substâncias consideradas nocivas deverão ser armazenadas em ambiente
devidamente sinalizado com a simbologia que represente risco. Estas devem estar em
ambientes ventilados e mantidas preferencialmente próximas ao solo para evitar acidentes de
queda sobre o manipulador ao tentar apanhá-la.

5. Disponibilidade, montagem e uso dos Equipamentos de

proteção:

O laboratórios deve se responsabilizar pelo fornecimento de EPIs para os funcionários,

bem como garantir a limpeza e/ ou descarte dos mesmos, evitando que não sejam levados para
a casa dos funcionários ou descartados em locais impróprios, o que representa um risco de
difusão de patógenos à comunidade.

5.1-Placas indicativas: Representam a principal ferramenta de educação dos funcionários

e devem estar em todas as partes do laboratório onde uma informação sobre biossegurança
tiver que ser passada.

5.2-Jaleco: Deve ser de uso individual e utilizado em todas as áreas do laboratório que
desenvolvam atividades técnicas, inclusive corredores de acesso a estas áreas. Este deve ser
retirado apenas nas áreas de transição entre os setores técnicos e de apoio.
É proibida a circulação de funcionários com EPIs nos setores não técnicos, bem como
o de funcionários sem jaleco nos corredores e setores técnicos.

7
 O laboratório deve garantir a disponibilidade de jalecos para os visitantes e
funcionários de setores não técnicos que necessitem entrar nos setores técnicos.

5.3-Luvas:
 As diferentes luvas disponíveis para os funcionários devem conferir proteção contra
risco biológico, agentes químicos específicos, temperaturas extremas e injúria
traumática.
 Quando utilizadas com material biológico ou químico devem ser descartadas em
container para descarte de lixo biológico. As mãos devem ser lavadas após a remoção
das luvas.
 Devem ser retiradas ou uma Segunda luva de proteção deve ser colocada para trabalho
com material não contaminado, como atender o telefone ou utilizar o terminal de
computador.
 Ser descontaminada após cada uso e estocada em uma área limpa no caso das luvas
não descartáveis.
TODO MATERIAL BIOLÓGICO, deve ser manipulado com o uso de luvas de
borracha. Isto se aplica mesmo aqueles em recipientes APARENTEMENTE LIMPOS

E SECOS.

5.4-Máscara e óculos de proteção: Devem ser utilizados em todas as atividades que

envolvam a formação de aerossol ou suspensão de partículas ( ex.: pipetagem, centrifugação,
execução de raspados epidérmicos, semeadura de material clínico, etc.).
As mãos deverão ser lavadas freqüentemente durante o dia. Lavá-las sempre que retirar as
luvas, antes de sair do laboratório, antes e após o contato com pacientes , come ou fumar, ou
contato acidental com material biológico.

5.5- Lava-olhos: Devem estar localizados dentro do laboratório e os funcionários treinados

para o uso. Deve ser verificado semanalmente para o correto funcionamento.

8
Quando ocorrer acidente com derrame de material nos olhos, estes devem ser lavados por no
mínimo 15 minutos.

5.6-Escudo de proteção contra respingos : Devem ser fornecidos para qualquer

funcionário que esteja envolvido em atividades geradoras de aerossol como a abertura de
tubos de sangue.

5.7-Kit de primeiros socorros: Deve estar disponível em todos os setores e constar de

material necessário para tratamentos, como pequenos ferimentos na pele ocorridos na área de
trabalho. Os funcionários devem ser treinados para o uso.

5.8-Kit de desinfeção: Deve estar disponível em todos os setores para contenção e

descontaminação em caso de acidentes com material biológico no laboratório. Os
funcionários devem ser treinados para seu uso.

5.9-Ducha de segurança: Deve estar montada dentro da área do laboratório em local de

fácil acesso por todos os setores. O acionamento deve ser fácil para que funcionários mesmo
com os olhos fechados possam acioná-la. Devem ser checadas mensalmente para seu correto
funcionamento.

5.10-Capelas de exaustão e câmaras de fluxo laminar: Devem ser utilizadas para

proteção contra material volátil ou proteção microbiológica respectivamente. As câmaras de
fluxo laminar podem ser utilizadas na proteção do operador ou do material no seu interior
dependendo da rotina efetuada.

6. Quadro de níveis de riscos biológicos

Labs Patologia - Distinção dos níveis de risco biológico associado à rotina de trabalho
Nível do
Risco
NRB-1 NRB-2 NRB-3 NRB-4
Biológico
(NRB)
A. NÍVEL DE RISCO
GRAU DE Baixo: Baixo a moderado: Moderado a alto: Alto risco:
RISCO  Serviços  Transporte de  Coleta de  Preparo de soluções
burocráticos material para espécimes clínicos. corrosivas

9
 
Processamento de
espécimes para
exames (urinálise,
parasitologia, anat.
Patol., etc).  Manipulação de
 Preparo de culturas de
 Cadastro de análise em lâminas para Mycobacterium
exames bandejas colorações ou tuberculosis e
 Preparo de  Autoclavação microscopia direta, demais espécies de
reagentes não  Técnicas de etc) Mycobacterias
tóxicos coloração  Centrifugação de patogênicas
 Transporte de  Microscopia sangue, urina, ou  Material
material entre  Calibração de outros líquidos sabidamente
os postos equipamentos sem biológicos. contaminado com
 Liberação de cultura de  preparo de lâminas. HIV ou HBV
resultados microrganismos  Semeadura de  Extração e
 Atendimento material clínico manipulação de
para cultura material genético
 Manipulação de (RNA ou DNA)
microrganismos ou
culturas
potencialmente
contaminadas
B. PRÁTICAS DE SEGURANÇA
1. Acesso
de pessoal permitido Não recomendado proibido Proibido
não Técnico
2. Acesso
de pessoal
permitido Permitido restrito Proibido
de outros
setores
Alertas de
atividades de risco
para o setor
(proibido fumar,
proibido
alimentos ,
proibido uso de
EPIs na área não
técnica, etc.) Alertas de risco para o Alertas de risco para o Alertas de risco para o
Placas indicativas: executante (risco executante (risco executante (risco
 Saída de biológico, uso de EPIs, biológico, uso de EPIs, biológico, uso de EPIs,
emergência material contaminado, material contaminado, material contaminado,
 Chuveiro e etc) etc) etc)
3.
lava olhos Alerta de atividades de Alerta de atividades de Alerta de atividades de
Sinalização
 Delimitação risco para o setor risco para o setor risco para o setor
entre setores (proibido fumar, (proibido fumar, (proibido fumar,
técnicos e proibido alimentos , proibido alimentos, proibido alimentos,
burocráticos lavar as mão, utilizar lavar as mão, utilizar lavar as mão, utilizar
 Área de EPIs, etc.) EPIs, etc.) EPIs, etc.)
alimentação
 Extintores
 Lista e
interpretação
dos sinais
encontrados
nas instalações
do laboratório
3. origem Cruzada: mãos e Frascos e equipamentos Frascos, aerossol, Queimaduras

10
 equipamentos
contaminados por
perfurações com
pessoal dos setores contaminados com
material biológico ou
técnicos ou visita a patógenos de espécimes Contaminação
equipamentos
do risco estes setores clínicos Acidentes em geral:
contaminados
Acidentes em Acidentes em geral: Queimaduras, choque
Acidentes em geral:
geral: Queimaduras, choque elétrico, corte
Queimaduras, choque
Queimaduras, elétrico, corte
elétrico, corte
choque elétrico,
corte
Todo o material
utilizado deve ser
esterilizado por
As bandejas devem ser Todo o material
flambagem ou
descontaminadas com utilizado deve ser
autoclavação ou
solução de hipoclorito esterilizado por
descartado em solução
de sódio flambagem ou
germicida
Lâminas usadas devem autoclavação ou
4. Riscos Os perfuro-cortantes
nenhum ser descartadas em descartado em solução
dos rejeitos devem ser descartados
solução germicida germicida
na caixa rígida para
As toalhas de papel ou Os perfuro-cortantes
material conataminado
qualquer lixo resultante devem ser descartados
Os resíduos químicos
desta atividade devem na caixa rígida para
devem ser estocados em
ser autoclavados material conataminado
recipientes fechados e
coletados por uma
empresa especializada
Sacos plásticos para Sacos plásticos para
5. Sacos plásticos para
autoclavação dentro de autoclavação dentro de
Transporte autoclavação dentro de
baldes com indicação baldes com indicação
de lixo Não realizada baldes com indicação de
de material de material
biológico material contaminado
contaminado contaminado
Jaleco, luvas
Jaleco, luvas Jaleco, luvas
Auxiliada por Auxiliada por Auxiliada por
6. pipitarem Não realizada
equipamento equipamento equipamento
7.
Alimentaçã
o ou
proibida Proibida proibida proibida
aplicação
de
cosméticos
Bico de bunsen
8. Câmara de fluxo
Câmara de fluxo
Minimização Não necessária Não necessária laminar
laminar
de aerossóis exaustão
exaustão
C. EPIs NECESSÁRIOS PARA AS ATIVIDADES
1. JALECO OBRIGATÓRIO OBRIGATÓRIO OBRIGATÓRIO OBRIGATÓRIO
 Termoresistentes
para autoclavação
2. LUVAS Não necessário  látex para outras De látex De látex
atividades

3. MÁSCARA Não necessário Não necessário Somente em atividades Não necessário

com formação de Obs: o trabalho será
aerossol :semeadura de realizado apenas em
espécimes para cultura. câmara de fluxo laminar
Preparo de lâminas para ou capela de exaustão
coloração pelo Ziehl
Nielsen.
Processamento de

11
 material para exames
Manipulação de
culturas
Centrifugação, etc.

Somente em atividades
com formação de
aerossol :semeadura de
espécimes para cultura.
Preparo de lâminas para Não necessário
coloração pelo Ziehl Obs: o trabalho será
4. ÓCULOS Não necessário Não necessário Nielsen. realizado apenas em
Processamento de câmara de fluxo laminar
material para exames ou capela de exaustão
Manipulação de
culturas
Centrifugação, etc.

Somente no preparo
de espécimes
5. Protetor
Não necessário Não necessário onde a Não necessário
de ouvidos
centrifugação
é empregada
D. EQUIPAMENTOS DE CONTENÇÃO DE CONTAMINAÇÃO
Obrigatório, podendo
1. Bico de ser substituído pela
Não necessário Não necessário Não necessário
bunsen câmara de fluxo
laminar
2. câmara
de fluxo Não necessário Não necessário Pode ser utilizado, OBRIGATÓRIO
NÃO OBRIGATÓRIO
laminar
USO obrigatório AO
3. USO obrigatório AO FINAL DO trabalho -
LÂMPADAS
Não necessário Não necessário FINAL DO DIA - 30 30 minutos (somente
ULTRAVIOLE
TA minutos para material
contaminado)
 Descontaminação
 Descontaminação
de superfícies após  Descontaminação
após qualquer
qualquer contato após qualquer
contato com
5. com espécimes contato com
espécime clínico
DESCONTAM Limpeza diária de clínicos ou culturas espécime clínico
(equipamentos e
INAÇÃO rotina com hipoclorito 2% (equipamentos e
superfícies)
QUÍMICA DA  Limpeza diária superfícies)
ÁREA  Limpeza diária
com hipoclorito 2%  Limpeza diária com
com hipoclorito 2%
nas bancadas e hipoclorito 2% nas
nas bancadas e
pisos bancadas e pisos
pisos
E. OUTRAS NECESSIDADES
Programa semestral ou Programa semestral ou Programa semestral ou
1. Necessário, com
após a entrada de um após a entrada de um após a entrada de um
TREINAMEN registro das
TO novo funcionário. Com novo funcionário. Com novo funcionário. Com
atividades
registro das atividades registro das atividades registro das atividades
2.
Necessário quando Necessário quando Necessário quando Necessário quando
vigilância
apropriado apropriado apropriado apropriado
médica
3.
vacinação obrigatória obrigatória obrigatória obrigatória
(hepatite)
4. acidentes Comunicar Comunicar Comunicar Comunicar

12
 imediatamente ao
diretor do imediatamente ao imediatamente ao imediatamente ao
laboratório ou diretor do laboratório diretor do laboratório diretor do laboratório ou
médico ou médico responsável ou médico responsável médico responsável no
responsável no no momento. no momento. momento.
momento. Realizar registro do Realizar registro do Realizar registro do
Realizar registro acidente e medida acidente e medida acidente e medida
do acidente e tomada tomada tomada
medida tomada

6.1- Controle ambiental

6.1.1-Descontaminação de área após derramamento de material biológico ou
cultura de microrganismos
1. Notifique imediatamente aos demais funcionários do setor.
2. Se houver algum risco biológico associado com a liberação do aerossol todos os
funcionários devem deixar imediatamente o setor. No setor de microbiologia a área deve
ser irradiada por 30 minutos com ultravioleta.
3. Os indivíduos envolvidos no acidente devem verificar suas vestimentas quanto a
contaminação com o material. Caso tenha ocorrido, as medidas de descontaminação da
roupa devem ser tomadas.
6.1.2-Descontaminação de pequenas áreas
(INSTRUÇÃO PARA DESCONTAMINAÇÃO)
4. Colocar os EPIs necessários.
5. Identificar a área que necessita de descontaminação.

6. Preparar os sacos para descarte de material contaminado

7. Mover-se lenta e cuidadosamente durante o tratamento da área com o descontaminante

próprio (álcool iodado, hipoclorito, glutaraldeído, álcool 70%, germekil, etc.) evitando a
formação de novos aerossóis.

8. Cobrir a área inteira com uma toalha absorvente e deixar o germicida agir por 30
minutos antes de recolher com os fragmentos grosseiros.

9. Colocar o material absorvente nos sacos para descarte e os perfuro cortantes nas caixas
rígidas.

11. Remover as luvas cuidadosamente e descarta-las juntamente com o material

contaminado.

12. Lavar as mãos com água e sabão e solução anti-séptica.

13. Registrar o acidente.

13
Kit de limpeza
 Instrução para descontaminação por escrito e em local de fácil visualização
 EPIs
 Pá plástica
 Desinfetantes apropriados (dentro da validade)
 Toalha de papel absorvente
 Saco plástico para descarte de material contaminado e caixas rígidas para perfuro
cortantes
 Documentação

6.2 - Esterilização e descontaminação

6.2.1-Procedimentos gerais de descontaminação
Estes procedimentos devem ser seguidos para o descarte de rejeitos:
1. Todo material infeccioso ou equipamento utilizados na rotina do laboratório devem ser
desinfetados antes da lavagem ou de ser jogados no lixo. A autoclavação deve ser o
método de escolha , exceto para todo e qualquer material reaproveitável termolábil ou
produtos oxidantes ou que liberem subprodutos tóxicos quando aquecidos.
2. O material a ser autoclavado deve ser estocado em sacos brancos fechados, com
indicação de MATERIAL CONTAMINADO PARA SER AUTOCLAVADO, dentro
de baldes fechados caso não sejam autoclavados no mesmo dia.

3. Material oxidante como hipoclorito ou outro oxidante forte

não deve ser autoclavado com material orgânico como papel
ou óleo. A combinação destes compostos pode produzir uma
explosão.
4. O material para ser lavado após a autoclavação deve ser estocado em baldes com
tampa com a indicação MATERIAL NÃO INFECCIOSO (PARA SER LAVADO).

6.3-AUTOCLAVAÇÃO
O termo esterilização refere-se à completa eliminação de patógenos, agente biológico
com capacidade de reprodução ou potencial infeccioso. A esterilização é o melhor método de
eliminação do risco biológico. O uso da autoclave é o método mais utilizado nas instituições
de saúde e pesquisa, assegurando a completa destruição de microrganismos. Este processo
geralmente envolve aquecimento da água em uma câmara sob pressão gerando vapor sob uma

14
pressão de 15 psi, o que ocorre em temperatura de cerca de 121° C por no mínimo 15
minutos. O tempo é medido após a temperatura do material envolvido atingir 121° C.
O fator crítico nesta fase é a garantia que não fique ar preso no interior do autoclave, o
que pode impedir que a temperatura no interior do aparelho atinja os 121 o C . para isto deve
haver um monitoramento da temperatura com um termômetro-manômentro, bem como
controle do processo com uso de um indicador químico ou biológico.
Caso ocorra interrupção no processo de aquecimento durante a marcação do
tempo, TODO O PROCESSO deve ser repetido.

6.3.1-Controle do processo
O melhor controle para esterilização é o uso de esporos de Bacillus stearothermophilus, que
são incluídos com o material a ser esterilizado dentro do autoclave. Esta cultura pode ser
adquirida comercialmente sendo a apresentação em ampolas com meio de cultivo e indicador
de pH. Após a esterilização as ampolas são incubadas na temperatura adequada e verificadas
para a viragem do indicador, o que indica que houve crescimento microbiano e falha no
processo de autoclavação. Em uma perfeita esterilização não haverá crescimento microbiano
ou viragem do pH.
Os indicadores químicos também podem ser empregados no controle de esterilização
por autoclavação. A fita de autoclave é um exemplo deste indicador. Neste caso o indicador na
fita branca muda para uma cor negra ou cinza, indicando que houve uma autoclavação
eficiente.

Material necessário para a validação do processo.

Um dos processos deve ser utilizado
FITA INDICADORA ou INDICADOR BIOLÓGICO- Para este ultimo ainda são
necessários os seguintes complementos:

1. Ampolas contendo esporos de Bacillus stearothermophilus

2. Incubadora para a cultura

121o C
Teste atividade
Sobrevive por Morre em
B. stearothermophilus autoclavação 5 min. 13 min.
Fita indicadora autoclavação Não muda de cor Torna-se escura
Em relação Em relação
tempo/ temperatura tempo/ temperatura
ineficientes eficientes

15
 121o C /15 minutos

6.3.2-Critérios de aceitabilidade
 A fita indicadora deve mudar de cor
 Os esporos não devem crescer após incubação da ampola

6.3.3-Registro
 Registrar o resultado em uma planilha de controle de esterilização.

6.4-Forno Pasteur
O uso de esterilização seca (Forno Pasteur) é menos eficiente que a esterilização
pelo vapor do autoclave. A esterilização pelo calor seco é eficiente quando realizada à 160°-
180° C por períodos de 2 à 4 horas. Neste processo o ponto crítico é a composição química de
material que está sendo esterilizado, bem como o arranjo do material no forno. Material
termolábil não deve ser utilizado no processo.

6.5-Descontaminação (Desinfecção)
Pode ser definida como a redução da maioria ou eliminação dos microrganismos patogênicos
em uma superfície ou objeto, tornando este objeto incapaz de transmitir doenças.
Fatores que determinam a efetividade de um desinfetante

a) concentração do princípio ativo

b) quantidade de material orgânico no material a ser descontaminado
c) tempo necessário para a ação
d) temperatura e pH
e) nível de contaminação
f) tipo de contaminação envolvida
g) características físicas do material a ser descontaminado

6.5.1- Desinfetantes líquidos

Estes devem ser estocados nos frascos originais em um ambiente de uso exclusivo do pessoal
de limpeza. Apenas pequenas quantidades devem ser estocadas no ambiente nos setores para
uso rotineiro. As soluções diluídas de acordo com as especificações para uso devem ser
estocadas por um pequeno período, no máximo 48 horas para evitar perda de atividade do
produto. Estes frascos devem conter as especificações do produto, bem como o grau de
toxicidade que este apresenta, além da data de preparo e validade.

16
1) Álcool etílico 80%
Eficiente desnaturante de lipídios de vírus envelopados e células vegetativas de bactérias. Não
é corrosivo.
Evapora rapidamente e é bastante inflamável.
Uso: descontaminação de superfícies (exceto acrílico) ou na antisepsia da pele, durante
a coleta de material para análise. Não utilizar em região de mucosas.

2) Álcool etílico iodado (álcool etílico 80% + 2% de iodo cristal dissolvido)

Mais eficiente que o álcool etílico puro devido ao efeito halogêneo do iodo. Eficiente
desnaturante de lipídios de vírus envelopados e células vegetativas de bactérias. Não é
corrosivo.
Evapora rapidamente e é bastante inflamável.
Uso: descontaminação de superfícies (exceto acrílico). Seu uso deve ser evitado na anti-
sepsia durante a coleta devido à alergia ao iodo apresentada por alguns pacientes.

3) Formaldeido e glutaraldeído
O uso do Formaldeído na descontaminação é ideal a 5% de concentração do gás na água.
Atividades de descontaminação sob refrigeração utilizando formaldeído devem ser evitadas,
pois este ultimo em baixas temperaturas perde atividade. Uma desvantagem do seu uso é o
odor irritante liberado, podendo causar hipersensibilidade. O glutaraldeído é preferível por ser
menos irritante.
EPIs especiais principalmente com proteção para os olhos e aparelho respiratório devem ser
utilizados.
Uso: Descontaminação de pequenos equipamentos, ou superfícies com alto grau de
contaminação. Principalmente em equipamentos metálicos por ser menos corrosivo.

4) Componentes fenólicos
Com odor desagradável e altamente corrosivo, deve ser evitado no laboratório.
Uso: latas de lixo (creolina)

5) Quaternários de amônio
Excelentes desinfetantes, com baixa toxicidade e resíduos corados, bem como liberação de
odores. Apresentam em grande espectro de ação, inclusive contra os bacilos da tuberculose,
esporos bacterianos e fungos

17
Descontaminação de tubos, lâminas, pipetas e ponteiras, bem como superfícies. Ex.
GERMEKIL

6) Componentes clorados
Amplamente utilizados , apresentam um grande espectro de ação. Pouco ativo em presença
de grandes quantidades de material orgânico. Altamente oxidante e extremamente corrosivo
em metais. As soluções diluídas perdem atividade rápido principalmente quando expostas à
luz. Desta forma, os frascos devem ser escuros e as soluções trocadas a cada 24 horas. A água
sanitária, 25 hipoclorito de sódio, é a mais utilizada entre as preparações comerciais.
Uso: Superfícies e chão para a limpeza de rotina. Deve ser utilizada proteção especiais
para os olhos e aparelho respiratório durante a aplicação.

7) Compostos iodados
Utilizados geralmente associados com outros compostos (detergentes, álcool, etc). Deve haver
um cuidado especial com os indivíduos alérgicos.
Uso: Equipamentos e superfícies contaminadas ou na anti-sepsia da pele em pacientes
não alérgicos.
Ex. iodine

6.6 - SEGURANÇA BIOLÓGICA DAS CENTRÍFUGAS

Devido ao alto índice de acidentes neste aparelho, principalmente a quebra de tubos com
espécimes clínicos e conseqüente formação de aerossol que pode expor vários funcionários à
agentes infeciosos, as centrífugas merecem uma atenção especial em relação à segurança
biológica.
As centrífugas devem ser instaladas em um compartimento isolado, bem ventilado,
que deve ser evacuado durante o processo. Caso ocorra um acidente, quebra de tubos, o
equipamento deve ser descontaminado com glutaraldeído ou mesmo hipoclorito de sódio.

O que fazer em caso de ACIDENTES NA CENTRÍFUGA:

1- Deixe o aerossol baixar durante 30 minutos.

2- Coloque seus EPIs , luvas, máscara e óculos de proteção.
3- Descontamine o suporte da centrífuga com glutaraldeído ou
hipoclorito (água sanitária), álcool iodado ou lizoforme por no mínimo 15minutos.
4- Retire os demais tubos da centrífuga e descontamine a parte interna do
equipamento com uma gaze embebida em uma das soluções germicidas descritas
acima.

18
 5- Descarte os fragmentos do tubo na caixa amarela para perfuro-cortantes.
6- Comunique o incidente ao responsável pelo setor para que seja providenciada uma
nova amostra.

7.0 – Manejo do lixo

O lixo do laboratório é dividido em: Não contaminado, contaminado e lixo químico.
Todo o lixo contaminado gerado pelo laboratório deve ser esterilizado antes do descarte. A
coleta deverá ser efetuada por uma empresa especializada em lixo hospitalar que possua
contrato de serviço com o laboratório (Koleta –Serviços Técnicos LTDA. Processo em
anexo).

7.1 -Tipos de Lixo:

1. Lixo patológico- Tecidos humanos ou partes do corpo removidas durante cirurgias

incluindo material de obstetrícia, autópsias e de procedimentos laboratoriais. Este tipo de lixo
deve ser incinerado ou autoclavado e enviado para uma área de descarte de lixo hospitalar
regulamentada.
2. Lixo Biológico – Sangue e produtos sangüíneos, exsudatos, secreções, aspirados , fezes e
outros fluidos corporais que NÃO devem ser descartados diretamente no sistema de
esgoto. Este tipo de lixo DEVE ser tratado de forma que se transforme em um lixo que não
ofereça risco ambiental. O principal tratamento é a AUTOCLAVAÇÃO 121 oC/ 35 min.
3. Culturas e estoque de agentes infecciosos – Culturas microbianas, equipamentos
utilizados para manipulação de culturas (ponteiras, alças, agulhas, etc.). Estes devem ser
colocados em sacos plásticos branco com a indicação de lixo biológico com o símbolo de
RISCO BIOLÓGICO e autoclavados antes do descarte.
4. Pérfuro-cortantes (contaminados ou não) – Qualquer material capaz de causar
perfurações ou cortes na pele. Entre estes incluem-se agulhas de seringas, pipetase tubos
quebrados. Estes deverão ser descartados em uma caixa rígida AMARELA que devera ser
autoclavada antes do descarte, (em caso de material contaminado).
5. Equipamentos e aparelhos utilizados nos exames- Estes só poderão deixar o laboratório
após sofrerem uma rígida descontaminação a fim de minimizar os riscos de contaminação do
pessoal de transporte e manutenção.
6. Resíduos líquidos combustíveis contaminados- Estes devem ser mantidos em um
reservatório fechado e recolhido por uma empresa especializada.

19
8.0- ROTULAGEM DE RESÍDUOS DO LABORATÓRIO:

Material contaminado- Devem ser coletados, entre eles: os resíduos sólidos, luvas
contaminadas, papéis, etc, em sacos plásticos brancos com O SÍMBOLO DE RISCO
BIOLÓGICO, que indica material contaminado. Em caso de necessidade de estocagem antes
da autoclavação, estes devem ser depositados em baldes de lixo que apresentem a indicação
de lixo contaminado não autoclavado.

Material não contaminado- Coletar em sacos plásticos de cor preta e depositar em latas de
lixo, com a indicação de LIXO COMUM.

Material pérfuro-cortante contaminado - Coletar os resíduos utilizando os EPIs

necessários e depositar caixas rígidas (cor amarela) própria para este tipo de material. Esta
deve ser autoclavada e enviada para descarte por uma empresa especializada.

Líquidos - devem conter a descrição da natureza de solutos e solventes e concentrações.

Também descrever a quantidade de água presente. Procure ser o mais exato possível nas
descrições.

INDICAÇÃO DE RESÍDUOS LÍQUIDOS: todos devem ser devidamente indicados com

sinais de acordo com as normas da ABNT.

1. Resíduo COM POTENCIAL fonte de ignição

Um líquido que tenha o ponto de fulgor de menos que 140ºC. Um sólido capaz de causar fogo
por fricção ou absorção de umidade ou que sofre mudanças químicas espontâneas que
resultem em queima vigorosa e persistente.

2. Resíduos corrosivos
Soluções aquosas de pH menor ou igual a 2 ou maior ou igual a 12,5

3. Resíduos reativos
Soluções aquosas de materiais instáveis que sofram mudanças químicas violentas sem
detonação, possam reagir violentamente com água formando misturas potencialmente
explosivas ou que possam gerar gases perigosos ou possivelmente letais.

4. Resíduo tóxico
Resíduo que contém um dos seus componentes em concentrações iguais ou maiores que os
valores das tabelas de concentração máxima de resíduos tóxicos.

5. Resíduos de processos
Utilizado para aqueles resíduos que em virtude de algum uso, processo ou procedimento, não
atende as especificações originais do fabricante. Ex.: produtos diluídos, misturas reacionais.

Observações importantes
Um produto comercial (nunca processado) deve ser descartado no frasco
original.
Ex.: pequenos frascos de reagentes antigos nunca utilizados ou com a
validade vencida.

20
8.1-Principais resíduos químicos no laboratório
1. Soluções de formol ou formaldeído:
Soluções diluídas devem ser estocadas em recipentes fechados para posterior coleta para uma
empresa especializada. O formaldeído é um agente suspeito de provocar câncer com baixos
índices de exposição permitida e poucos sintomas de advertência.

2. Soluções de brometo de etídio

Soluções muito diluídas podem ser descartadas nas linha de esgoto especiais. A concentração
máxima para a execução destes procedimentos é de 5 ppm. Não dilua soluções
propositadamente para atingir este valor. Estas soluções são mutagênicas em altas
concentrações.

3. Líquidos que sejam fontes de ignição e solventes orgânicos

Manter separados solventes halogenados de solvente não-halogenados se possível. Separe os
solventes orgânicos de soluções aquosas quando possível.
Mantenha os solventes acidificados separados de outros solventes e resíduos ácidos.

4. Ácidos, bases e soluções aquosas

Não misturar ácidos inorgânicos fortes ou oxidantes com compostos orgânicos. Manter
ácidos, bases e soluções aquosas contendo metais pesados separados de outros resíduos.
Evite misturar ácidos e bases concentradas num mesmo recipiente.

5. Soluções contendo mercúrio

Mantenha estes resíduos separados de todos os outros

6. Materiais corrosivos
O piso dos locais de manipulação de produtos corrosivos deve ser conservado o mais seco
possível.
Quando diluir ácidos com água, este deverá ser adicionado à água, lentamente, agitando
continuamente a mistura; a água nunca deverá ser adicionada ao ácido.
O derrame ou escape de líquidos corrosivos não deve ser absorvido por meio de serragem,
estopas, pedaços de pano ou outro material orgânico. Deve-se neutralizar com cal ou absorvê-
lo com granulado absorvente.
Em caso de contato físico, deve-se lavar abundantemente com água corrente e procurar
imediatamente socorro médico.

7. Peróxidos

O uso de peróxidos deve ser limitado à quantidade mínima necessária. Qualquer respingo
deve ser imediatamente limpo. Espátulas de metal não devem ser usadas para manusear
peróxidos; e sim, de madeira ou cerâmica. Evitar fontes de calor. Soluções de peróxidos

21
devem ser armazenadas em frascos de polietileno com tampa esmerilhadas, jamais frascos de
vidro. Evitar qualquer tipo de impacto tais como, moagem, fricção, etc..
Para minimizar a decomposição, os peróxidos devem ser estocados em temperaturas baixas,
de acordo com a sua solubilidade e ponto de congelamento.

9.0-RECOLHIMENTO E DESATIVAÇÃO DE RESÍDUOS DO LABORATÓRIO

A finalidade destas indicações é transformar produtos químicos ativados em derivados
inócuos para permitir o recolhimento e eliminação segura.
Todos os trabalhos devem ser executados por pessoal habilitado com o uso EPIs adequados
para cada finalidade. Esta inativação deve ser feita em escala reduzida.

Métodos de eliminação e desativação

Soluções aquosas de ácidos orgânicos: São neutralizadas cuidadosamente com bicarbonato
de sódio ou hidróxido de sódio
Ácidos inorgânicos: São diluídos em processo normal ou em alguns casos sob agitação em
capela adicionando-se água. A seguir neutraliza-se com solução de hidróxido de sódio. Bases
inorgânicas: São diluídas como ácidos e neutralizadas com ácido sulfúrico.

10.0-MANIPULAÇÃO DE PRODUTOS QUÍMICOS

Rotulagem
Todos os frascos, originais do produto ou não, devem conter um rótulo com as seguintes
informações:

Nome do produto
Quem preparou
Concentração
Cuidados
Data do preparo
Data da validade
Condições de estocagem

OBSERVAÇÕES IMPORTANTES
A) Ao reutilizar um frasco vazio certifique-se de que a etiqueta original foi complemente
retirada antes de colocar a nova etiqueta.
B) Quando encontrar uma embalagem sem rótulo de identificação, descarte o produto.

22
11- Armazenamento
Ao armazenar substâncias químicas, considerar:
Incompatibilidades entre os materiais armazenados, principalmente nos almoxarifados.
Sistema de ventilação.
Sinalização correta.
Disponibilidade de EPIS e EPCs.
Área administrativa separada da área técnica e da armazenagem.

Produtos Químicos Incompatíveis

Substâncias Estocagem Incompatível com:
Acetileno Cloro, bromo, flúor, cobre, prata, mercúrio
Óxido de cromo IV, ácido nítrico, ácido perclórico, peróxidos,
Ácido Acético
permanganato, ácido acético, anilina, líquidos e gases combustíveis.
Ácido Nítrico Ácido acético, anilina, líquido e gases combustíveis
Ácido Oxálico Prata, sais de mercúrio
Anidrido acético, álcoois, papel, madeira, clorato de potássio,
Ácido Perclórico
perclorato de potássio
Amoníaco Mercúrio, hipoclorito de cálcio, iodo, bromo
Ácidos, metais em pó, substâncias orgânicas ou combustíveis
Amônio Nitrato
finamente divididos
Anilina Ácido nítrico, peróxido de hidrogênio
Carvão Ativo Hipoclorito de cálcio, oxidantes
Cianetos Ácidos
Cloratos Sais de amônio, ácidos, metais em pó, enxofre
Cobre Acetileno, peróxido de hidrogênio
Cromo IV Óxido Ácido acético, naftaleno, glicerina, líquidos combustíveis.
Hidrocarbonetos Flúor, cloro, bromo, peróxido de sódio
Hidrogênio Peróxido Cobre, cromo, ferro, álcoois, acetonas, substâncias combustíveis
Nitrato de amônio, peróxido de hidrogênio, ácido nítrico, peróxido
Líquidos inflamáveis
de sódio, halogêneos
Mercúrio Acetileno, amoníaco
Metais Alcalinos Água, tetracloreto de carbono, halogêneos
Permanganato de
Glicerina, etilenoglicol, ácido sulfúrico
Potássio

11.1 - TRANSPORTE DE SUBSTÂNCIAS PERIGOSAS

23
 É proibido o transporte de material de risco (inflamáveis, explosivos, tóxicos, irritantes
e corrosivos), em motocicletas. O transporte destes produtos deverá ser efetuada apenas em
carros de carroceiria fechada estando o produto devidamente acondicionado e claramente
identificado quanto ao risco que representa (vide informação no rótulo do produto).

Alguns produtos incluídos nesta categoria e freqüentemente transportados por nossos

funcionários:

Álcool (etanol, metanol)

Ácidos (clorídrico, acético, sulfúrico, etc.)
Formaldeído
Gás combustível (comercial)
Hipoclorito
Xilol
Solventes orgânicos
Frascos para coleta de urina de 24 horas com conservante

Nos casos em que o risco da substância não for identificado , favor contactar o setor
de Qualidade- Biossegurança da Patologia (ramal 2121 - Marco Miguel, Márcio, Nilson,
Valéria Lessa ou Pedro Ventura).

12-Preparo de Soluções
 Fazer uma leitura prévia das características da substância que está manuseando.
 Utilizar sempre, EPI específico.
 A vidraria utilizada no preparo de soluções deve ser de boa qualidade, de preferência de
vidro boro-silicato.
 Usar sempre, bastão com proteção de borracha, teflon ou plástico, para evitar trincar o
vidro.
 Não usar vidraria que esteja trincada, lascada ou corroída.
 Nunca pipetar substâncias químicas com a boca
 Usar peras de borracha ou pipetadores automáticos.

2.1-Procedimentos em caso de acidente com soluções:

24
Como as substâncias apresentam diferentes propriedades, a metodologia de primeiros
socorros e descontaminação da área deverão ser realizadas de acordo com a substância
envolvida e as instruções do fabricante contidas no rótulo.

13-INCÊNDIOS
Como evitá-los:
uso adequado das tomadas conforme recomendações especificadas na "normas básicas para

uso de equipamento elétrico".

bujões de gás devem ser armazenados em local bem ventilado na área externa do prédio.

Atenção com substâncias potencialmente inflamáveis na hora de utilizar o fogo.

Estocar substâncias potencialmente inflamáveis longe de fontes de calor ou tomadas.

anutenção do bom estado da parte elétrica do prédio.

Manutenção de funcionários que garantam a segurança do prédio, vigias, durante os fins de

semana e feriados.

13.1-EQUIPAMENTO PARA CONTROLAR INCÊNDIO

 Extintores de incêndio para produtos químicos (extintores PQS de pó), eletricidade

(extintores a gás CO2) e para papéis (extintores de água comprimida) devem estar

disponíveis. Em Ambientes que utilizam muito equipamento elétrico deve-se ter maior

número de extintores para eletricidade enquanto aqueles em que o número de produtos

químicos for muito grande devem conter extintores PQS em número suficiente. Os dois

podem ser utilizado em ambos os casos mas com meno do extintor devem ser guardados

em local livre e não distantes mais do que a 1 metro do piso e devidamente sinalizados.

Os extintores devem estar com a carga válida e devem estar a disposição em local acessível a

todos. Recomenda-se em locais com maior periculosidade que haja uma extintor a cada 10m.

Também é recomendável dentro de laboratórios que contenham muitos solventes ou eqos

elétricos.

Deve existir no laboratório uma dio treinada por órgão oficial.

25
Utilizesempre o extintor de incêndio adequado:

Pressão de água  papel

CO2 - eletricidade ( pode ser utilizado c/ menor eficiência para material químico).

PQS - material inflamável (pode ser utilizado c/menor eficiência p/eletricidade).

 OUTRAS ATIVIDADES QUE DEVEM SER REALIZADAS:

Fechar e remover o bujão de gás, quando possível.

Remover todos os produtos inflamáveis, quando possível.

 Fechar janelas e portas, quando possível.

Incêndio de pequeno porte

- Seguir corretamente as instruções de uso do extintor que devem ser alocados em
local livre e não distantes mais do que a 1 metro do piso e devidamente sinalizados.

- Após o uso do extintor, notificar o serviço de segurança para recarregamento.

Precauções em caso de incêndio de grande porte

- Manter a calma e dar o alarme.
- Desligar imediatamente a capela e fechar as saídas de gás.
- Fazer a evacuação com calma.
- Em caso de fumaça, ande o mais rente possível do piso.

14. Telefones úteis

Bombeiros 193
Polícia 190
Defesa Civil 199
Luz e Força 196

26
15- REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1- M. M. de Souza. 1998. Biossegurança no laboratório clínica. Ed. Eventos

2- CDC/NIH- Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories
3- Manuais de Legislação Atlas; 39a edição. 1998. Volume 16: Segurança e Medicina do
Trabalho.
4- WHO-Laboratory Biosafety Manual. Geneve, 1994.
5- International Organization for Standartization ISO/TC 212/WG
1, Quality management in the Clinical Laboratory

16 – Documentos anexos e legenda dos símbolos

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