MANUAL DE GUIAS DE LABORATORIO DE BIOLOGIA CELULAR

RESUMEN

Este cuadernillo de Prácticas del Laboratorio está diseñado como material didáctico para cursar la asignatura Biología Celular.
Como estudiantes que inician su experiencia en el manejo del microscopio, se les darán las indicaciones básicas del trabajo
en el laboratorio para que comprendan la importancia de realizar un trabajo seguro y eficiente.
Este cuadernillo inicia con un capítulo sobre Seguridad en el laboratorio y con las reglas de seguridad más importantes que
deberán conocer y tener en cuenta siempre que se va a realizar un trabajo.
Cada práctica de laboratorio contiene los Objetivos y la Introducción para facilitar la comprensión de los fundamentos de las
mismas. Luego se indican los Materiales que se requieren y los Procedimientos a realizar los, cuales se complementan con la
descripción y con la esquematización de lo observado.
Al final de cada laboratorio el alumno deberá realizar una conclusión sobre el trabajo realizado, para ello deberá tener en
cuenta los objetivos formulados y los resultados obtenidos
De igual forma, encontrarán en este cuadernillo las instrucciones para la preparación de soluciones, así como las referencias
bibliográficas de apoyo.
Es importante resolver las preguntas complementarias las cuáles invitan a reflexionar sobre el trabajo realizado, además de
servir como material de profundización de los contenidos teóricos.
Las prácticas propuestas tratan sobre el manejo del microscopio, propiedades del microscopio, observación microscópica de
células procariontas, observación y estudio de células eucariontas, propiedades físicas de la materia viva, observación de
organelas en células vegetales, observación de organelas en células animales, fotosíntesis y mitosis en raíces de cebolla.
Considero que son las necesarias para que los alumnos aprendan las bases de trabajo que necesitarán en sus posteriores
asignaturas.
NORMAS DE SEGURIDAD PARA EL USO DEL LABORATORIO

Antes de realizar una práctica, el auxiliar, el profesor y los alumnos, deberán tomar en cuenta las siguientes
recomendaciones:

1. Debemos tener en cuenta que en el laboratorio debe realizarse un trabajo serio, con mucha responsabilidad y estar atento
a las instrucciones del profesor.

2. No deben efectuarse experimentos a menos que estén supervisados y aprobados por el profesor

3. El alumno debe Leer cuidadosamente cada práctica antes de entrar al laboratorio. Las instrucciones deben seguirse al pie
de la letra y tener en cuenta todas las precauciones. Cualquier anomalía debe consultarse con el profesor.

4. Es indispensable el uso de bata de laboratorio la cuál debe ser blanca, de mangas largas y a la altura de las rodillas, zapato
cerrado y para algunas actividades será obligatorio el uso de guantes, tapabocas y gafas de seguridad.

5. No se debe ingerir alimentos ni fumar dentro del laboratorio.

6. No se debe trasladar varios objetos de vidrio al mismo tiempo.

7. Se debe Leer cuidadosamente la etiqueta de los frascos hasta estar seguro que es el reactivo que se necesita, después de
usar un reactivo tenga la precaución de cerrar bien el frasco.

8. Debe informar inmediatamente de cualquier accidente, aunque sea leve, al profesor o auxiliar de laboratorio.

9 Al terminar cada práctica se procederá a limpiar cuidadosamente los equipos, los materiales y las mesas de trabajo que se
ha utilizado.

10. Cuando se ha calentado vidrio, se le debe colocar sobre tela y en lugar no muy accesible de la mesa de trabajo y dar
suficiente tiempo para que se enfríe antes de tocarlo. Recuerde que el vidrio caliente tiene el mismo aspecto que
el vidrio frío.

11. Cuando se calientan sustancias contenidas en un tubo de ensayo, no se debe apuntar la boca del tubo al compañero o así
mismo, ya que pueden presentarse proyecciones de líquido caliente.

12. En caso de incendio, utilice una tela para apagarlo y tenga siempre presente la ubicación de los extintores.

13. Los sólidos y papeles que se desechen deben colocarse en los recipientes destinados para este fin.

14. No debe devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados sin consultar con el profesor.

15. Todo el material, especialmente los equipos delicados, deben manejarse con cuidado evitando golpearlos o forzar sus
mecanismos.

16. Los productos flamables (gas, alcohol, éter, etc.) deben mantenerse alejados de las llamas de los mecheros. Si hay que
calentar tubos de ensayo con estos productos, se hará a baño María, nunca directamente a la llama. Si se manejan mecheros
de gas se debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso para apagar la flama.

17. Cuando se manejan productos corrosivos (ácido, álcali, etc.) deberá hacerse con cuidado para evitar que salpique el
cuerpo o bata.

18. Cuando en una reacción se desprendan gases tóxicos o se evaporen ácidos, la operación deberá hacerse bajo una campana
de extracción o en un lugar ventilado.
19. Cuando se calienten a la llama tubos de ensayo que contengan líquidos debe evitarse la ebullición violenta por el peligro
que existe que puede producir salpicaduras. El tubo de ensayo se acercará a la llama inclinado y procurando que este actúe
sobre la mitad superior del contenido, cuando de observe que inicia la ebullición rápida, se retirará, acercándolo nuevamente
a los pocos segundos y retirándolo otra vez al producirse otra nueva ebullición, realizando así un calentamiento intermitente.
En cualquier caso, se evitará dirigir la boca del tubo hacia la cara o hacia otra persona.

20. Cuando se quiera diluir un ácido, nunca se debe agregar agua sobre ellos; siempre, al contrario: ácido sobre agua.

21. No se debe oler directamente una sustancia, si se desconoce que es.

22. No pipetear nunca con la boca. Se debe utilizar una perilla de succión.

23. Las pipetas se agarrarán de forma que sea el dedo índice el que tape su extremo superior para regular la caída del líquido.

24. Cualquier material de vidrio no deberá enfriarse bruscamente justo después de haberlos calentado con el fin de evitar
roturas.

25. Manipule con cuidado el equipo de vidrio para que no se rompa; en caso de que esto suceda, se debe recoger con cuidado
los fragmentos de vidrio envolverlos en un papel y tirarlos en el bote de la basura destinado para este fin.

26. En ocasiones es necesario reconocer una sustancia por su olor, la manera adecuada de hacerlo consiste en abanicar con
la mano hacia la nariz un poco de vapor y aspirar indirectamente; nunca inhalar directamente del recipiente.

27. En caso de heridas, quemaduras con objetos calientes, salpicadura de sustancias causticas o de malestar por gases
aspirados, acudir inmediatamente al profesor y de ser necesario al médico.

28. No debe tirar o arrojar residuos químicos de los experimentos al desagüe. En cada práctica deberá preguntar al profesor
sobre los productos que puede arrojar al desagüe, para evitar la contaminación de ríos y lagos.

29. Debe evitar el manejo de sustancias o reactivos si no se encuentra en buenas condiciones de salud, o bajo tratamiento
médico.

30. Está prohibido el uso de celulares dentro del laboratorio como medio de comunicación. Solo podrán ser utilizados para la
toma de fotografías de las preparaciones cuando así lo requieran, para una mayor calidad en el informe final

31. Debe lavarse las manos antes y después del trabajo en el laboratorio.

32. Al terminar el laboratorio se debe cerciorar que las llaves de agua, luz y gas estén bien cerradas.

33. El(la) alumno(a) no deberá abandonar el laboratorio por ningún motivo, antes de que concluya la práctica, a menos que
el(la) profesor(a) lo autorice, en caso contrario se le cancelará su asistencia.

¿QUÉ HACER EN CASO DE ACCIDENTE?

QUEMADURAS POR COMPUESTOS QUÍMICOS

Durante la quemadura
* Ojos: lavar inmediatamente con el chorro de agua por lo menos durante 15 minutos, con los ojos abiertos.
* Piel: lavar inmediatamente el área afectada en el chorro de agua por lo menos durante 15 minutos. En caso necesario,
eliminar la ropa contaminada.
* Inhalación: transportar a la víctima a un lugar bien ventilado.
NOTA: Es importante que siempre se identifique la sustancia que provocó el problema; si es desconocida, asumir un riesgo
extremo y notificarlo

Después de la quemadura
* Acudir a una revisión por personal especializado (oftalmólogo, dermatólogo, otorrinolaringólogo, etc.)

QUEMADURAS POR TEMPERATURAS EXTREMAS Se refiere a las quemaduras por fuego, o materiales muy calientes o muy
fríos
Siempre:
Contar con el equipo de seguridad necesario según la actividad que se realice
Durante la quemadura:
Mantener la CALMA.
Lavar con agua el área afectada
Avisar al instructor.
En caso de que esté involucrada una flama y se prenda la ropa de alguna persona, cubrirla con una manta.

CORTADURAS
Lavar con agua el área afectada
Cubrir el área con gasa; si es posible, hacer presión directa.
NO tratar de sacar trozos de vidrio u otro material involucrado.
Dar aviso a los servicios de emergencia

EQUIPO DE SEGURIDAD NECESARIO EN CADA LABORATORIO

Botiquín
Extintor
Manta
Una cubeta con arena u otro material para derrames
Solución de cloro al 0.5% para limpiar el área de trabajo

5. SÍMBOLOS DE PELIGRO:
Existen símbolos (imágenes) que se utilizan en las etiquetas de los envases que contienen los reactivos, para indicar el grado
de peligrosidad de los mismos:
 LABORATORIO No. 1

MICROSCOPIO, TÉCNICAS PARA HACER PREPARACIONES MICROSCÓPICAS

INTRODUCCIÓN

La biología es una ciencia netamente experimental, la que ha avanzado gracias a la implementación tecnológica, el éxito de
su estudio depende de varios factores tales como la observación, el empleo de instrumentos y técnicas especiales; para lo
cual es necesario apoyar las explicaciones teóricas con prácticas de laboratorio; en donde cada persona puede realizar sus
propias observaciones e investigaciones y de esta forma llegar a sacar conclusiones.

Los seres vivos presentan variedad en tamaño, forma, estructura, función, etc. Con relación al tamaño éste varía, el ojo
humano logra identificar objetos hasta de 200 micras, por lo que se hace necesario recurrir a instrumentos ópticos que
faciliten la observación de objetos de menor tamaño, este instrumento es el microscopio, que consiste en juegos de lentes
que agrandan la imagen.
Al principio, el microscopio surgió como una lente que agranda la imagen (lupa), lo que dio origen al microscopio óptico
compuesto, que consta de juego de lentes (parte óptica), sostenida por estructuras metálicas (parte mecánica).

En esta práctica se darán los lineamientos generales para el uso del microscopio, así como para hacer preparaciones
microscópicas y efectuar el reporte de laboratorio.

OBJETIVOS

Al finalizar la práctica, el estudiante será capaz de:

* Identificar las partes ópticas y mecánicas del microscopio

* Realizar preparaciones microscópicas temporales
* Reconocer el uso adecuado de cada una de las partes del microscopio óptico compuesto.
* Elaborar adecuadamente sus reportes de laboratorio

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ESTUDIANTE

* Porta-objetos y Cubre-objetos
* Flores con Polen
* Corcho
* Hilos de lana de diferentes colores
* Polvillo de ala de mariposa
* Cuchilla de afeitar nueva
* Cinta de enmascarar
* Papel absorbente

EQUIPOS A UTILIZAR

* Microscopio óptico compuesto

MATERIALES A UTILIZAR

* Pipetas de Pasteur
* Beaker
 CARACTERÍSTICAS Y FUNCIONAMIENTO DEL MICROSCOPIO

¿CÓMO SE FORMA LA IMAGEN?

Algunos principios físicos...

La posición y tamaño de la imagen de un objeto formada por una lente delgada, puede hallarse por un método gráfico sencillo.
Este método consiste en determinar el punto de intersección, después de atravesar la lente, de unos cuantos rayos, (llamados
rayos principales), que divergen desde un punto determinado del objeto que no está sobre el eje, como el punto Q de la
siguiente figura.

* Un rayo paralelo al eje, después de la refracción por la lente, pasa por el segundo foco de una lente convergente.
* Un rayo que pasa por el centro de curvatura de la lente no es desviado apreciablemente (si la lente es delgada).
* Un rayo que pasa (o se dirige hacia) el primer foco emerge paralelo al eje.

P F F’

Q’

La mayor parte de los sistemas ópticos comprenden más de una superficie reflectante o refractante. La imagen formada por
la primera superficie sirve de objeto a la segunda y así sucesivamente.

¿CÓMO SE PREPARA EL MATERIAL PARA SU OBSERVACIÓN BAJO EL MICROSCOPIO?

Existen diversas técnicas de preparación del material para su observación bajo el instrumental óptico. Fundamentalmente,
se requiere que los portas y cubreobjetos se encuentren perfectamente limpios, preferiblemente enjuagados con alcohol fino
y secos. La preparación del material se debe realizar sobre una superficie limpia y plana. En caso de realizar cortes, éstos
deben ser sumamente delgados como para permitir el paso de la luz a través del material. Además del montaje húmedo
existen dos técnicas especiales para realizar el montaje del material: SQUASH o aplastado y FROTIS o extendido.

* SQUASH: consiste en la disgregación de la muestra mediante el aplastamiento del material entre el porta y cubreobjetos.
Para realizarlo se siguen los siguientes pasos:

• Se disgrega el material con la ayuda de pinzas y alfileres o agujas. Si se requiere, se lo somete a coloración durante el
tiempo necesario.
• Se cubre el material con un cubreobjetos.
• Se apoya el portaobjetos sobre una superficie dura y completamente plana.
• Se coloca sobre el cubreobjetos un papel secante o un papel de filtro doblado y se aplasta con el dedo pulgar sin deslizar
ni rotar el cubreobjetos.
• Se debe operar con precaución, pero con firmeza para evitar la rotura del material.
* FROTIS: consiste en esparcir el material generalmente líquido o semilíquido de modo que quede distribuido uniformemente
en una delgada capa. Para ello se utiliza otro portaobjetos de borde muy parejo que se desliza sobre el primero desde un
extremo al opuesto. Se procede del siguiente modo:

• Se coloca una gota de material sobre

un extremo del portaobjetos limpio y seco .

• Se apoya sobre la gota un borde del

otro portaobjetos formando un
ángulo agudo.

• Cuando la gota se extienda por

capilaridad a todo el ancho del
portaobjetos, se desliza hacia el otro
extremo con un movimiento suave,
rápido y uniforme.

PROCEDIMIENTO

1. PARTES Y FUNCIONES DEL MICROSCOPIO:

Se explicarán las partes ópticas y mecánicas del microscopio:
Partes Ópticas:
• _____________________
• _____________________
• _____________________
• _____________________
• _____________________
• _____________________

Partes Mecánicas:
• _____________________
• _____________________
• _____________________
• _____________________
• _____________________
• _____________________
• _____________________
• _____________________
• _____________________

2. ENFOQUE DEL MICROSCOPIO

* Baje completamente la platina del microscopio

* Haciendo uso del mecanismo del revólver, coloque frente a la preparación el objetivo de menor aumento (4x)
* Coloque la preparación microscópica sobre la platina sujetándola con las pinzas del carro y centre la preparación haciendo
uso de los tornillos del carro
* Regule la luz mediante el uso del mecanismo del diafragma
* Haciendo uso del tornillo Macrométrico suba al máximo la preparación hasta que encuentre tope sin observar por los
oculares
* Observando a través del ocular, accione el tornillo Macrométrico hasta que visualice la imagen en el campo microscópico.
* Una vez enfocada la imagen, afine el enfoque microscópico, haciendo uso del tornillo micrométrico
* Si desea mayor detalle, cambie de aumento rotando el mecanismo del revolver a un objetivo que le proporcione el aumento
deseado, corrigiendo el enfoque de imagen moviendo el tornillo micrométrico, y graduando la intensidad de luz con el
diafragma
* Después de haber finalizado las observaciones, se limpian los lentes con papel limpia lente, se coloca el objetivo de menor
aumento en posición de enfoque, se baja la platina, se apaga, se desconecta y se guarda.

3. PREPARACIONES MICROSCOPICAS TEMPORALES

A) PREPARACIÓN DE CORCHO:
Haga varios cortes delgados de corcho utilizando la hoja de afeitar nueva y escoja el corte más fino
En un porta-objetos coloque una gota de agua destilada y coloque en él el pedazo de corcho seleccionado y colóquele un
cubre-objetos, procurando que no le quede burbujas de aire. Proceda a su observación microscópica. Haga su esquema
correspondiente utilizando los objetivos de 4x, 10x y 40x. Haga una breve descripción de lo observado.

4x 10x 40x

Descripción
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________

B) OBSERVACIÓN DE GRANOS DE POLEN:

Coloque granos de polen del estigma de una flor en un porta-objetos, con ayuda de una pipeta de Pasteur ponga una gota de
agua y observe al microscopio. Es necesario colocar el cubre-objeto.
Esquematice sus observaciones utilizando los objetivos de 4x, 10x y 40x. Describa las imágenes de estas con los diferentes
aumentos.
 4x 10x 40x

Descripción
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_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
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3. OBSERVACIÓN DE POLVILLO DE ALA DE MARIPOSA

Espolvoree el ala de la mariposa sobre un portaobjetos con golpes suaves para no maltratar la mariposa, agregue una gota
de agua y coloque el cubreobjetos, observe al microscopio con objetivos de 10x y 40x y luego esquematice lo observado

10x 40x

Descripción
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_____________________________________________________________________________________________________
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4. OBSERVACIÓN DE HILOS DE LANA

tome fragmentos de hilos de lana de diferentes colores de aproximadamente 3mm, separe cuidadosamente las hebras, luego
colóquelos en el porta objetos y agréguele una gota de agua, coloque el cubre objetos y observe al microscopio con objetivos
de 4x, 10x y 40x. Esquematice lo observado y realice la descripción
 4x 10x 40x

Descripción
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
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CONCLUSIONES
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_____________________________________________________________________________________________________
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PREGUNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIAS

1. ¿Por qué es importante utilizar microscopio en el estudio de la Biología?

2. ¿Qué diferencia encuentra entre las imágenes observadas al microscopio y las observadas a simple vista?
3. ¿Las imágenes observadas al microscopio son reales o virtuales? Explique
4. Llene los espacios en blanco en la imagen del microscopio (Fig. 1)
5. Elabore una conclusión a cerca de su trabajo en el laboratorio realizado.
 LABORATORIO No. 2

PROPIEDADES DEL MICROSCOPIO Y DETERMINACIÓN DE MEDIDAS AL MICROSCOPIO

INTRODUCCIÓN

En el Mundo microscópico, es difícil determinar el tamaño de los organismos. En Biología microscópica, la unidad de medida
más frecuentemente usada es la micra. Que equivale a 0.001 mm y cuya abreviatura se representa por la letra griega (µ)

La µ es la unidad de medición para objetos tan pequeños que para ser vistos requieren del uso del microscopio. Un milímetro
equivale a 1.000 µ y 1µ equivale a 1.000 milimicras. De tal forma que una µ es igual a 0.001 mm y un milímetro cuadrado
equivale a 1.000.000 de µ² En los trabajos en donde los objetos por medir son moléculas y longitudes de onda de ciertos
tipos de luz o partículas (como sucede en microscopía electrónica), la unidad de medición es el Angstrom Å, que equivale a
0.0001 µ. 1 µ equivale a 10.000 Å y un nanómetro (nm) es igual a 10 Å y 1 Å equivale a 10⁻⁷ mm.

En los laboratorios de investigación se utiliza el micrómetro para obtener mediadas microscópicas, sin embargo, si no se
dispone de este equipo es posible estimar el tamaño de los objetos determinando el diámetro del campo visual del
microscopio.

OBJETIVOS
Adquirir habilidades en la medición aproximada del tamaño microscópico de estructuras, microorganismos y células.

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ESTUDIANTE

• Porta objetos y Cubre objetos

• Papel Absorbente
• Papel milimetrado
• Revista o papel periódico con letra impresa
• Tijeras
• Micro-algas
• Insecto pequeño

EQUIPOS A UTILIZAR
 Microscopio y Estereomicroscopio

MATERIALES A UTILIZAR
* Pipetas de Pasteur
* Beaker
* Caja de petri
PROCEDIMIENTO

Corte un pedazo de papel milimetrado de 1cm² y móntelo sobre el porta-objetos. Agregue una gota de agua y luego coloque
el cubre-objeto evitando la formación de burbujas.
Coloque la preparación sobre la platina del microscopio y observe con menor aumento, el papel milimetrado debe quedar de
tal manera que una línea pase por todo el centro del campo visual. Ver figura
 1 Medición del diámetro del campo visual utilizando papel milimetrado

¿Cuánto mide el diámetro del campo visual?

a. En milímetros ____________________
b. En micras _______________________
c. En Angstrom _____________________

Calcule en milímetros el área del campo visual del objetivo de menor aumento, para ello utilice la siguiente fórmula:
Área = π . r²

Con el dato anterior es posible determinar el diámetro correspondiente al objetivo de mayor aumento. Par ello basta dividir
el diámetro encontrado del campo visual de menor aumento por la razón resultante entre el número del objetivo de mayor
aumento y el número de objetivo de menor aumento. Por ejemplo, si el número del objetivo de mayor aumento es 45X y el
de menor aumento 15X, la razón será 45X / 15X =3. Si el Ø del campo visual de < aumento es de 1.500 µ, el Ø del campo
visual de > aumento será 1.500 µ/3=500µ.

Puesto que el diámetro del campo visual es inversamente proporcional al poder de aumento de los objetivos, también se
p8ede determinar mediante la siguiente fórmula:

d₁ a₂
d₂ a₁

Donde d₁ es Ø < aumento, d₂ es Ø > aumento, a₁ Obj. < aumento, a₂ Obj.> aumento

*Calcule el Ø y área del campo visual de cada uno de los Obj. De su microscopio
*Monte sobre el pre-parado del papel milimetrado una muestra de micro-alga, cúbrala con la laminilla cubre-objeto, observe
con objetivo de 10X, Calcule el tamaño de una hojita de micro-alga, realice los esquemas correspondientes

Obj. 10x
Descripción___________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________

OBSERVACIÓN DE LETRA IMPRESA

Busque en el periódico o revista una letra como la “e”, “n”, “r”, “a”, recorte la más pequeña que encuentre, colóquela en un
porta-objeto que tenga una gota de agua destilada, cúbrela con el cubre-objeto y obsérvela con objetivos de 4X, 10X y 40X,
haga sus esquemas correspondientes

Observación a simple vista Obj. 4x

Obj. 10x Obj. 40x

Haga los dibujos comparativos de la imagen que observa con sus ojos y de la imagen vista a través del microscopio

Descripción
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________

OBSERVACIÓN DEL INSECTO AL ESTEREOMICROSCOPIO

Tome el insecto cuidadosamente y deposítelo en una caja de petri, llévelo al Estereomicroscopio y observe todas sus
características con los diferentes objetivos. Realice los esquemas correspondientes y haga sus comentarios
Descripción
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES
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_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. ¿Cuál es la posición de la letra al observarla al microscopio?

2. ¿Por qué la imagen aparece invertida en el microscopio compuesto?
3. ¿El Ø del campo visual es directa o inversamente proporcional al poder de aumento del objetivo?
4. ¿A > aumento hay < o > área del campo visual?
5. ¿Por qué es importante conocer el tamaño de un organismo microscópico?
6. Establezca diferencias entre la observación con el microscopio óptico y el Estereomicroscopio
7. ¿La imagen vista al Estereomicroscopio es virtual o real?, ¿En posición derecha o invertida?
8. Identifica las partes del microscopio Estereomicroscopio, haz un esquema y anota sus funciones
 LABORATORIO No. 3

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE CÉLULAS PROCARIÓTICAS

INTRODUCCIÓN

Los seres vivos presentan diversidad en forma, dimensión y estructura, características que dependen de las células que lo
integran de la actividad que realizan y del entorno que les rodea. La biología estudia las células en función de su constitución
molecular y la forma en que cooperan entre sí para constituir organismos muy complejos, como el ser humano. Para poder
comprender cómo funciona el cuerpo humano sano, cómo se desarrolla y envejece y qué falla en caso de enfermedad, es
imprescindible conocer las células que lo constituyen.

La célula como unidad morfológica lleva un patrón general de estructura, pero existen variantes que establecen diferencia
entre ellas, como son, ausencia o presencia de material genético rodeado por una envoltura lo cual permite la clasificación
en dos grandes grupos: células procariontes y células eucariontes.

Entre las células procarióticas y eucarióticas hay diferencias fundamentales en cuanto a tamaño y organización interna. Las
procarióticas, que comprenden bacterias y cianobacterias (bacterias fotosintéticas), son células pequeñas, de entre 1 10 µm
de diámetro, y de estructura sencilla; carecen de citoesqueleto, retículo endoplasmático, cloroplastos y mitocondrias. El
material genético (ADN) está concentrado en una región, pero no hay ninguna membrana que separe esta región del resto
de la célula. Las células eucarióticas, que forman todos los demás organismos vivos, incluidos protozoos, plantas, hongos y
animales, son mucho mayores (entre 10 y 100µm de longitud) y tienen el material genético envuelto por una membrana que
forma un órgano esférico conspicuo llamado núcleo. De hecho, el término eucariótico deriva del griego “núcleo verdadero”,
mientras que procariótico significa “antes del núcleo”

Cocos Gram Positivos Bacilos Gram Negativos

OBJETIVOS
Observar a través del microscopio óptico las células procariotas (bacterias)
Conocer los pasos en la técnica de tinción de GRAM
Utilizar correctamente las partes del microscopio

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

* Yogurt
* Guantes desechables
* Papel absorbente
 EQUIPOS A UTILIZAR
• Microscopio Óptico Simple

MATERIALES A UTILIZAR
* Pipetas de Pasteur
* Beaker
* Caja de petri
* Asa bacteriológica
* Porta objetos y Cubre objetos
* Mechero de alcohol
* Frasco lavador
* Cultivo bacteriano

REACTIVOS: Cristal Violeta, Safranina, Lugol, Alcohol Cetona

PROCEDIMIENTO

OBSERVACIÓN DE CÉLULAS PROCARIONTES (Observación de frotis bacteriano con técnica de Gram)

 Aplique una capa delgada de la muestra (cultivo bacteriano y Yogurt) en el porta-objeto, realice un frotis con una gota de
agua, déjelo secar o fíjelo con calor utilizando un mechero
 Cúbralo con Cristal Violeta por un minuto, luego lávelo con agua
 Aplique solución de Lugol durante un minuto, luego lávelo con agua
 Decolore cuidadosamente la laminilla con alcohol cetona hasta que el color azul se torne celeste claro, lávelo nuevamente
con agua
 Aplique solución de Safranina por un minuto, lávelo nuevamente con agua y deje secar al medio ambiente
 Coloque una gota de aceite de inmersión y enfoque al microscopio con objetivo de 100X
El aceite forma un medio continuo entre el vidrio y el sistema de lentes del objetivo lo cual permite un mayor aumento de la
imagen observada. Las bacterias GRAM⁺ se ñen de color azul violeta, las bacterias GRAM⁻ se ñen de rosado. Haga los
esquemas y describa lo observado.

Obj. 100x Obj. 100x

Cultivo bacteriano Yogurt

Descripción__________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. ¿Qué es un medio de cultivo? Enumera algunos medios

2. ¿Qué diferencias encuentras entre las bacterias del cultivo y las bacterias del yogurt?
3. ¿Qué diferencias hay entre una bacteria GRAM positiva y una bacteria GRAM negativa?
4. ¿Por qué es importante conocer cuando una bacteria es GRAM negativa y GRAM positiva?
5. ¿Para qué se le agrega Lugol a la muestra durante el proceso conocido como técnica de GRAM?
6. ¿Cuál es el objetivo de utilizar alcohol cetona durante el proceso de coloración de GRAM?
7. Explique en que consiste el proceso de fijación y cuál es su utilidad
8. ¿Porque durante la técnica de coloración de GRAM algunas bacterias se tiñen de rosado y otras se tiñes de violeta? ¿A qué
se debe este resultado?
 LABORATORIO No. 4
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS, PROTEÍNAS Y LÍPIDOS POR REACCIONES
QUÍMICAS, DE COLOR Y MICROCOPÍA DE LUZ

INTRODUCCIÓN

Los compuestos químicos del protoplasma se clasifican en dos grandes grupos: sustancias inorgánicas y sustancias orgánicas.
Las primeras se caracterizan por la ausencia de uniones carbono-carbono en su estructura química; pudiéndose mencionar
entre este grupo: agua, gases y sales disueltas. Las segundas se caracterizan por presentar uniones carbono-carbono y
carbono-hidrógeno y átomos de oxígeno en su estructura química, además de estos elementos, pueden existir átomos de
nitrógeno, fósforo, azufre y algunos metales.

Las principales sustancias orgánicas responsables de las características estructurales y funcionales del protoplasma son:
carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos, dichas sustancias pueden ser identificadas por una gran variedad de
pruebas químicas y físicas. En esta práctica se efectuarán algunas de estas pruebas químicas para identificar carbohidratos y
lípidos, en forma cualitativa.

OBJETIVOS

* Identificar carbohidratos, proteínas y lípidos a través de reacciones químicas y microscopía de luz.

* Utilizar correctamente el microscopio óptico compuesto

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

* Palillos
* Cuchilla de afeitar nueva
* Orina 5 cm
* Jugo 5 cm
* Leche 5 cm
* Pan
* Fruta (un pedazo pequeño)
* Un huevo
* Gelatina sin sabor
* Un pedazo pequeño de grasa animal (tocino o grasa de la carne)
* Aceite vegetal (aceite de cocina)
* Una papa pequeña
* Cinta de Enmascarar

EQUIPOS A UTILIZAR
* Microscopio óptico compuesto
* Baño María

MATERIALES A UTILIZAR
* 15 tubos de ensayo
* Porta objetos y Cubre objetos
* 2 Pipetas graduadas de 10 ml
* 2 goteros
* 1 Beaker de 50 ml
* 1 Gradilla para tubos de ensayo
* 1 Pinza para tubos de ensayo
REACTIVOS:
* Solución de Lugol,
* Solución de Sudan III o IV
* Solución de Benedict
* Solución de Glucosa al 1%
* Solución de Sacarosa al 1%
* Solución de Almidón al 1%
* Solución de Sulfato de Cobre al 1%
* Solución de Hidróxido de Sodio concentrado
* 100 ml Ácido Clorhídrico al 50%
* Agua Destilada

PROCEDIMIENTO:

1. IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

El almidón se identifica con Lugol dando un azul o morado intenso y los azúcares reductores se identifican con la solución de
Benedict, los cuales después de calentarse en baño maría durante 3 minutos dan una gama de colores que va del azul verdoso
pasando por el amarillo hasta un precipitado color rojo ladrillo que demuestra un mayor porcentaje de azúcar.

A. DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE AZÚCARES

Enumere 7 tubos de ensayo

1. Tubo N°1. Agregue 1 ml de almidón
2. Tubo N°2. Agregue 1 ml de glucosa
3. Tubo N°3. Agregue 1 ml de jugo
4. Tubo N°4. Agregue 1 ml de leche
5. Tubo N°5. Agregue 1 ml de orina
6. Tubo N°6. Agregue 1 ml de sacarosa
7. Tubo N°7. Agregue el macerado de un pedacito de fruta madura y adiciónela a un tubo de ensayo. Agregue 1 ml de
solución de Benedict y colóquelo en un Baño María por 3 minutos

Observe y anote los resultados obtenidos en el siguiente cuadro

PRUEBA DE BENEDICT
TUBOS
COLOR INICIAL COLOR FINAL
1. ALMIDÓN

2. GLUCOSA

3. JUGO

4. LECHE

5. ORINA

6. SACAROSA

7. MACERADO DE FRUTA
 Compare los resultados obtenidos en los tubos con el siguiente cuadro y explíquelo

COLOR RESULTADO

Azul Negativo
Azul Verdoso Ligeros vestigios de glucosa
Verde Aproximadamente 0,5 %
Pardo Verdoso Aproximadamente 1,0 %
Amarillo Aproximadamente 1,5 %
Rojo Ladrillo Mayor del 2,0 %

B. DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE LA PRESENCIA DE ALMIDÓN

en un tubo de ensayo vierta 2 ml de solución de almidón. Agréguele a la anterior solución 4 gotas de solución de Lugol.
¿Qué cambios se experimentan? Anote los resultados

Ahora caliente hasta ebullición esta solución por 2 minutos. ¿Se experimenta algún cambio?

Deje el tubo de ensayo en reposo hasta que se enfríe. ¿Qué sucede?

En otro tubo de ensayo prepare una solución acuosa de macerado de pan aproximadamente 3 ml, agregue 4 gotas de Lugol
¿Qué sucede? Saque conclusiones

2. DETERMINACION CUALITATIVA DE LA PRESENCIA DE PROTEINAS

PROCEDIMIENTO:

1. Enumere 4 tubos de ensayo, adicione materiales de la siguiente forma:

Tubo N°1. 3 ml de solución de yema de huevo

Tubo N°2. 3 ml de solución de clara de huevo
Tubo N°3. 3 ml de solución de gelatina sin sabor
Tubo N°4. 3 ml de Leche

Agregue en cada tubo 1 ml de solución de sulfato de cobre más 2 ml de hidróxido de sodio concentrado (Reactivo de Biuret).
Agite los tubos hasta que se produzca una coloración violeta o púrpura, color que indica que la prueba es positiva. Observe,
anote y explique los resultados.

2. En un Beaker agrega la clara de huevo, añade 10 ml de ácido clorhídrico diluido y observa la coagulación de las proteínas
encontradas en la clara de huevo (se forma un sólido blanco)

3. IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS

Los lípidos son identificados usando el reactivo Sudán III o IV los cuales al mezclarse dan un color rojo brillante.

Coloque en un tubo de ensayo 5 ml de agua destilada, adicione una pizca de Sudán y agite ¿Qué sucede?
Ahora agregue 2 ml de aceite de vegetal, observe inmediatamente y anote los resultados; deje reposar el tubo y al cabo de 5
minutos obsérvelo y anote los resultados.

En otro tubo de ensayo coloque 2 ml de grasa animal y agregue una pizca de Sudan III, si la grasa está solidificada caliente un
poco para derretirla. Agite y anote los resultados, comparándolos con los del tubo anterior. Saque conclusiones.

4. OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA

A. Gránulos de Almidón
Por medio de la hoja de afeitar haga un corte muy fino del tubérculo de papa y colóquelo sobre un portaobjeto, haga una
preparación utilizando Lugol diluido como medio de montaje y obsérvela al microscopio usando el objetivo de 10x y 40x para
hacer el esquema de lo observado.

Obj. 10x Obj. 40x

Descripción___________________________________________________________________________________________
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_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
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B. Tejido Adiposo
Usando una hoja de afeitar haga un corte delgado de la grasa animal. Móntela en el portaobjeto y agréguele una gota de
Sudán IV cúbrala con el cubreobjeto y presione suavemente, coloque la preparación sobre la platina del microscopio enfoque
y observe con el objetivo de 10x y 40x para hacer el esquema de lo observado.

Obj. 10x Obj. 40x

Descripción___________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
DISCUSIÓN DE RESULTADOS

1. ¿Qué reactivos empleó para identificar almidones, azúcares reductores, proteínas y lípidos?
2. ¿Qué es un azúcar reductor? Cite ejemplos de azucares reductores y no reductores. Explique la razón
de esta clasificación y de ejemplos.
3. ¿Cuáles son los componentes del reactivo de Benedict? ¿Qué reacción se produce cuando se calienta
el tubo de ensayo que contiene el reactivo de Benedict y glucosa? ¿Cuál es la naturaleza del precipitado
de color rojo ladrillo que se forma en la anterior reacción?
4. ¿A qué se debe la desaparición del color azul violáceo de la solución de almidón cuando se calienta
hasta ebullición? ¿Por qué aparece nuevamente el color cuando la anterior solución se enfría?
5. de acuerdo a la coloración obtenida en la identificación de proteínas ¿Cuál de las muestras estudiadas
tiene mayor concentración de proteínas? Explique.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. las plantas habitualmente almacenan reservas energéticas en forma de polisacáridos, mientras que
en la mayoría de los animales los lípidos son la forma principal de almacenamiento de energía. ¿Por qué
es ventajoso para los animales tener su reserva de energía almacenada como lípidos y no como
polisacáridos?

2. ¿De qué manera las diferencias de estructuras de grasas neutras y fosfolípidos determinan sus
funciones en las células?

3. Consulte que otros reactivos se pueden utilizar para identificar carbohidratos y proteínas.

CONCLUSIONES
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 LABORATORIO N° 5
ACCIÓN ENZIMÁTICA

INTRODUCCIÓN

Cuando se realizan reacciones químicas a veces es necesario agregar sustancias que aceleren o faciliten la reacción, a estas
sustancias se les llama catalizadores. Las enzimas son proteínas, también llamadas catalizadores biológicos, porque son de
naturaleza orgánica, producidas por la célula para acelerar la velocidad de las reacciones químicas, quedando estas intactas
al terminar estas reacciones.

Las enzimas actúan sobre sustancias llamadas sustratos, que es la molécula que van a transformar, son altamente específicas,
variando su actividad con la modificación del Ph, Temperatura, concentraciones de enzima y sustrato, estas pueden ser
inhibidas por sustancias llamadas venenos enzimáticos.

Durante esta práctica se tratará de poner de manifiesto alguno de los factores que afectan la actividad enzimática.

OBJETIVOS
* Interpretar los mecanismos subyacentes de la acción enzimática sobre sustratos específicos.
* Analizar los mecanismos subyacentes de la actividad de la catalasa en tejido animal y vegetal.

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

* Pastilla de cuajo
* 30 ml de Leche
* Crayón graso o Maskin tape
* Guantes desechables
* Papa y Rábano
* Trozo de Hígado y Riñón de Res
* Cuchilla de afeitar nueva

MATERIALES A UTILIZAR
* 3 Pinzas de tubo de ensayo
* 12 tubos de ensayo
* 4 goteros
* 4 pipetas graduadas de 5 ml
* 1 vidrio de reloj

REACTIVOS A UTILIZAR

* Solución de Almidón al 1%
* Solución de Lugol
* Reactivo de Benedict
* Ácido clorhídrico al 10%
* Agua oxigenada (peróxido de hidrógeno)
PROCEDIMIENTO

ACCIÓN DE LA AMILASA SOBRE EL ALMIDÓN

1. Rotule 2 tubos de ensayo con las letras A y B

2. Agregue al tubo A 1 ml de saliva y al tubo B 3 ml de saliva. Caliente el tubo B hasta ebullición
3. Rotule 4 tubos del número 1 al 4, agregándoles 3 ml de solución de almidón al 1%
4. Del tubo A extraiga una muestra y agregue 5 gotas de este tubo al tubo N°1 y 20 de gotas al tubo N°2
5. Del tubo B extraiga una muestra y agregue 5 gotas al tubo N°3 y 20 gotas al tubo N°4
6. Después de 5 minutos
7. Tome otros 4 tubos y enumérelos del 5 al 8. Ahora:
Tome 1 ml del tubo N°1 y adiciónelo al tubo N° 5
Tome 1 ml del tubo N°2 y adiciónelo al tubo N°6
Tome 1 ml del tubo N°3 y adiciónelo al tubo N°7
Tome 1 ml del tubo N°4 y adiciónelo al tubo N°8

Realice pruebas de Lugol a los tubos del N°1 al N°4 (5 gotas de Lugol), observe y saque conclusiones.
Realice pruebas de Benedict a los tubos del N°5 al N°8 (adicione 1 ml de Benedict y caliente a baño María), observe y analice
sus resultados en el cuadro de reporte

PRUEBA A LOS CINCO MINUTOS

N° DE TUBO CANTIDAD DE ENZIMA LUGOL BENEDICT

1 ACTIVA
2
3 INACTIVA
4

1. ¿Por qué razón calienta la saliva del tubo B?

2. ¿Por qué se hace necesario esperar 5 minutos para observar el resultado?

ACCIÓN DE LA AMILASA SOBRE EL ALMIDÓN

1. Rotule 2 tubos con las letras A y B

2. Agregue al tubo A 1 ml de saliva. Y al tubo B 3 ml de saliva a este tubo agregue 10 ml de HCL
3. Rotule 4 tubos del N°1 al N°4, agregándoles 4 ml de solución de almidón al 1%
4. Del tubo A extraiga una muestra y agregue 2 gotas del tubo N°1 y 10 gotas al tubo N°2
5. Del tubo B extraiga una muestra y agregue 2 gotas al tubo N°3 y 10 gotas al tubo N°4
6. Después de 5 minutos
7. Tome otros 4 tubos y enumérelos del N°5 al N°8. Ahora
Tome 1 ml del tubo N°1 y adiciónelo al tubo N°5
Tome 1 ml del tubo N°2 y adiciónelo al tubo N°6
Tome 1 ml del tubo N°3 y adiciónelo al tubo N°7
Tome 1 ml del tubo N°4 y adiciónelo al tubo N°8

Realice pruebas de Lugol a los tubos del N°1 al N°4 (5 gotas de Lugol) observe y saque conclusiones y realice pruebas de
Benedict a los tubos del N°5 al N°8 (adicione 1 ml de Benedict y caliente a baño de María)
8. Observe, anote y analice sus resultados en el cuadro de reporte
 PRUEBA A LOS CINCO MINUTOS

N° DE TUBO CANTIDAD DE ENZIMA LUGOL BENEDICT

1 ACTIVA
2
3 INACTIVA
4

1. ¿Por qué razón le agrega HCL a la saliva del tubo B?

2. ¿Por qué se hace necesario esperar cinco minutos para observar el resultado?

ACCIÓN DE LA RENINA SOBRE LA CASEINA DE LA LECHE

1. Disuelva ¼ de pastilla de cuajo (renina) en 25 ml de agua destilada.

2. Numere 3 tubos de ensayo (1, 2 y 3)
3. En el tubo N°1 coloque 5 ml de leche
4. En el tubo N°2 coloque 5 ml de leche más 2 gotas de HCL al 10%
5. Agregue 10 gotas de solución de renina a cada tubo numerado
6. En el tubo N°3 coloque 5 ml de leche y agregue 1 ml de renina previamente calentada.
Observe anote y analice sus resultados

TUBO N° DESCRIPCIÓN DE OBSERVACIONES

1 (Leche + Renina)

2. (Leche + Renina + HCL)

6. (Leche + Renina calentada)

Explique los procesos ocurridos que llevaron a los resultados obtenidos

¿Cuál es la función del HCL en la reacción?
ACTIVIDAD DE LA CATALASA

El término peroxisoma fue introducido por De Duve para identificar cualquier micro cuerpo que presente la secuencia flavin
oxidasa-catalasa.
Los peroxisomas son cuerpos delimitados por una membrana y contienen algunas enzimas
Son abundantes en las células hepáticas y en la de los túbulos renales, pero muy escasos o ausentes en otros tipos de células.
Los peroxisomas contienen 3 enzimas que actúan catalizando reacciones en las que se forma peróxido de hidrogeno y una
enzima que constituye alrededor de 40% del total de enzimas del peroxisoma, que degrada el peróxido de hidrógeno en agua
y oxigeno gaseoso, recibiendo el nombre de CATALASA

Flavin oxidasa
R H₂ + O₂ R + H₂O₂

Catalasa
2H₂O₂ 2H₂O + O₂ (gas)

PROCEDIMIENTO

Para poder estimar la velocidad de reacción considere una escala entre 0 y 5 (0 = no hay reacción, 1= muy lento. 5= muy
rápido)

A. Actividad de la Catalasa de Tejido Vegetal sobre Agua Oxigenada

1. Haga un corte fino de rábano y uno de papa, cuyas dimensiones sean iguales, colóquelos cada uno en diferente vidrio de
reloj. Agregue 3 gotas de H₂O. ¿Qué observa)

2. Haga un corte fino de rábano y uno de papa, cuyas dimensiones sean iguales, colóquelos cada uno en diferente vidrio de
reloj. Agregue 3 gotas de HCL, espere 1 minuto y 3 gotas de H₂O₂ ¿Qué ocurre en la actividad de la enzima?

3. Haga un corte fino de rábano y uno de papa, cuyas dimensiones sean iguales, colóquelos cada uno en diferente vidrio de
reloj. Colóquelos en el calentador hasta cocinarlos, espere 1 minuto y 3 gotas de H₂O₂ ¿Qué ocurre en la actividad de la
enzima?

B. Actividad de la Catalasa de tejidos animales sobre Agua Oxigenada

1. Hacer un corte fino de tejido hepático y renal, cuyas dimensiones sena iguales, colóquelos sobre diferentes vidrios de reloj,
agregue 3 gotas de agua oxigenada. ¿Qué deduce?

2. Hacer un corte fino de tejido hepático y renal, cuyas dimensiones sena iguales, colóquelos sobre diferentes vidrios de reloj,
agregue 3 gotas de HCL espere 1 minuto y agregue 3 ml de agua oxigenada. ¿Qué deduce?

3. Hacer un corte fino de tejido hepático y renal, cuyas dimensiones sena iguales, colóquelos sobre diferentes vidrios de reloj,
agregue 3 gotas de HCL espere 1 minuto y agregue 3 ml de agua oxigenada. Colóquelos en el calentador hasta cocinarlos,
espere 1 minuto y 3 gotas de H₂O₂ ¿Qué ocurre en la actividad de la enzima?
 REPORTE DE LABORATORIO

TEJIDO / ESCALA 0 1 2 3 4 5
Papa
Rábano
Hígado
Riñón

INTERPRETACIÓN DE RSULTADOS

 ¿Cuál es el tejido con mayor actividad y cuál el que tiene menor actividad?
 ¿Qué tienen en común y en qué se diferencian?
 Cuando es agregado a heridas produce burbujas. ¿Qué indica esto?
 En base a sus observaciones ¿qué puede concluir acerca de Cómo afecta a la actividad enzimática el tiempo, la
concentración y la temperatura?

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. ¿Qué cambios pueden sufrir, en relación a la estructura química y el número inicial de moléculas, el sustrato y la enzima
en una reacción enzimática?

2. Si usted hace reaccionar la amilasa con el almidón y espera hasta que termine la reacción. ¿Cómo comprobaría que la
enzima no ha sufrido alteración catalítica?

3. Cite 5 ejemplos de enzimas con sus sustratos respectivos.

 LABORATORIO No. 6
PROPIEDADES FÍSICAS DE LA MATERIA VIVA
INTRODUCCIÓN
Con la aparición de la vida en el planeta, se inicia una nueva etapa de desarrollo de la naturaleza, caracterizada por la
predominancia de las leyes biológicas. A pesar de sus características específicas, los fenómenos bilógicos tienen una base
fisicoquímica, consecuencia del desarrollo de la vida a partir de la materia inorgánica.
Las bases estructurales de la materia viva son moleculares, el funcionamiento del ser viviente se reduce en última instancia
a trasformaciones moleculares o movimientos energéticos de naturaleza física. La diferencia básica entre material viviente y
material inerte radica en el grado de complejidad, el ordenamiento estructural y funcional. La estructura de la materia viva
a pesar de su carácter molecular, revela un elevado grade de organización y complejidad. Las trasformaciones energéticas y
los movimientos del ser vivo son de tal magnitud, que a no ser por la precisión y forma organizada como trascurren, podrían
generar grandes explosiones.
El paso de sustancias en las células y sus organelas, está regulado por las
membranas celulares. Las células en general, están sumergidas en una
diversidad de ambientes (agua dulce, salada o salobre, agua de solución del
suelo, humedad del aire, condiciones extremas de salinidad y condiciones
medioambientales, entre otros en todos los casos, la membrana celular tiene la
función de mantener el equilibrio químico entre el interior de la célula y su
medio. El transporte activo de moléculas hacia dentro y hacia fuera de la célula
es igualmente importante, pues la célula tiene la capacidad de trasportar iones
y moléculas a través de su membrana en contra de gradientes de concentración,
usando el mecanismo de trasporte activo. En esta práctica estudiaremos los
fenómenos de difusión y ósmosis además los efectos que sobre estos tienen la
temperatura, tamaño de moléculas y concentración.

OBJETIVOS
* Determinar el efecto de la concentración de solutos y la temperatura sobre el tiempo de difusión de
una sustancia.
* Visualizar los fenómenos de difusión, ósmosis y modelos celulares
* Comprender la importancia de éstos fenómenos para la célula y los efectos que puede tener sobre ella.

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

* Semillas de frijoles o lentejas (50)
* Cebolla
* Papel celofán
* Elodea
* Hielo
* Almidón

EQUIPOS A UTILIZAR
* Plancha de calentamiento
* Microscopio óptico Compuesto
* Cronómetro
* Balanza de precisión 300 gr.

MATERIALES A UTILIZAR
* Beaker de 100 ml
* Beaker de 200 ml
* Pipetas graduadas de 10 ml
* Termómetros
* Pipetas de Pasteur
* Porta y Cubre-objetos
* Pinzas de madera para tubo de ensayo
* Tubos de ensayo

REACTIVOS
* Solución de Glucosa al 0.1 M
* Solución de NaCl de alta concentración
* Solución de Safranina o Azul de metileno
* Solución de Lugol
* Reactivo de Fehling A y B
* Nitrato de Plata

PROCEDIMIENTO

1. DIFUSIÓN
Movimiento de moléculas de áreas de mayor concentración hacia otras de menor concentración debido a la energía cinética
Coloque en 3 Beaker de 100 ml 5 ml de H₂O destilada en c/u de ellos a igual Tº y numerelos. Agregue gotas de safranina o
azul de metileno de la siguiente manera:

Beaker Nº 1 : una gota

Beaker Nº 2 : tres gotas
Beaker Nº 3 : cinco gotas

Mida el tiempo de difusión en cada caso, para ello anote el tiempo inicial cuando se agregó el colorante y el tiempo final en
que difundió totalmente. La diferencia de ambos es el tiempo de difusión. Haga una gráfica representativa del proceso en
papel milimetrado o cuadriculado

Coloque en otros 3 Beaker Agua destilada pero a diferentes condiciones de Tº y numerelos. Agregue a cada Beaker 5 gotas
del colorante de la siguiente manera:

Beaker Nº 4 : Agua helada

Beaker Nº 5 : Agua a Tº ambiente
Beaker Nº 6 : Agua caliente

Mida el tiempo de difusión en cada caso, para ello anote el tiempo inicial cuando se agregó el colorante y el tiempo final en
que difundió totalmente. La diferencia de ambos es el tiempo de difusión. Haga una gráfica representativa del proceso en
papel milimetrado o cuadriculado

2. OSMOSIS

Las membranas que rodean a las células y a algunos organelos de ella,m poseen permeabilidad diferencial, lo cual significa
que la membrana celular deja pasar unas sustancias y otras no, sirviendo de barrera para el paso de una sustancia disuelta
(soluto) dándose el fenómeno llamado Diálisis y la difusión del solvente (agua) dándose el fenómeno llamado Osmosis.

Tome 3 tubos de ensayo y enumerelos del 1 al 3 en cada uno coloque los siguientes materiales:

Tubo Nº 1 : 3ml de solución de Almidón al 1%

Tubo Nº 2 : 3ml de solución de Glucosa
Tubo Nº 3 : 3ml de solución de NaCl

Haga reconocimiento de la presencia de glucosa, almidón y NaCl como sigue:

Reconocimiento de Almidón: al tubo Nº 1 agregue 3 gotas de Lugol agite observe y anote el resultado
Reconocimiento de Glucosa: al tubo Nº 2 agregue 3 gotas de Reactivo de Fehling A y 3 gotas de Reactivo Fehling B, Agitelos,
coloquelos a baño maría durante 5 minutos, observe y anote los resultados
Reconocimiento de NaCl: al tubo Nº 3 agregue 3 gotas de Nitrato de Plata, agite, observe y anote los resultados
Conserve los tres tubos de ensayos para utilizarlos posteriormente como control

Descripción de las observaciones

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____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
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Usando papel Celofán elabore una bolsa y coloque en ella una mezcla de 10ml de solución de almidón, 10ml de glucosa y
10ml de NaCl. Coloque la bolsa de papel celofán cerrada en un Beaker con agua destilada. Después de haber transcurrido
entre 30 y 40 minutos haga prueba de reconocimiento de glucosa, almidón y NaCl, compare los resultados con los obtenidos
en las pruebas del procedimiento anterior

3. PLASMOLISIS

Por el contrario, si se coloca a una célula en una solución de mayor concentración de soluto que la concentración interna de
la célula, se dice que la solución es HIPERTÓNICA o HIPEROSMOTICA, y la difusión del solvente será en sentido contrario, al
anterior, con la difusión del agua de adentro hacia afuera de la célula: EXOSMOSIS, la célula perderá líquido del citoplasma y
se encogerá, el fenómeno se denomina CRENACIÓN.
En las células vegetales, frente a soluciones HIPERTÓNICAS o HIPEROSMÓTICAS, puede verse el efecto de la salida de líquido
porque la membrana se contrae hasta poderla apreciar separada de la pared celular, a este fenómeno se le llama
PLASMOLISIS. El caso contrario, la CITOLISIS, no se aprecia porque la pared celular protege a la membrana.
Si la célula es colocada en un medio ISOTONICO o ISOOSMOTICO, la célula no sufre ningún cambio visible ya que la difusión
del solvente a ambos lados está equilibrada. En esta práctica pondrá de manifiesto el comportamiento de células eucariontes
ante soluciones HIPO, ISO e HIPERTONICAS

Monte una placa porta-objeto con una hoja de Elodea póngale el cubre-objeto obsérvela al microscopio con objetivo de 40x
y haga los dibujos respectivos. Luego monte otra lámina porta-objeto con una hoja de Elodea y agréguele una gota de NaCl
de alta concentración, póngale el cubre-objeto, obsérvela al microscopio con objetivo de 40x y haga los dibujos respectivos,
y compárela con los del montaje anterior.
Elodea con Agua Elodea con NaCl ↑ [ ]
Obj. 40x Obj. 40x

Descripción__________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
Repita el proceso anterior utilizando en vez de Elodea, Epitelio de Cebolla. Dibuje y saque sus propias conclusiones

Epit de Cebolla con H₂O Epit de Cebolla con NaCl ↑[ ]

Obj. 40x Obj. 40x

Descripción__________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________

4. IMBIBICIÓN
La planta dispone de otro sistema para tomar agua, proceso conocido como IMBIBICION Al igual que la ósmosis, la imbibición
puede ser considerada como un tipo especial de difusión puesto que el movimiento de agua se realiza según un gradiente de
potencial hídrico entre la sustancia que se embebe y el líquido imbibiente. Si se coloca un vegetal seco se produce un
hinchamiento visible que en algunos casos alcanza un aumento considerable del volumen del vegetal.

Tome una porción de semillas de frijoles o lentejas (50 como mínimo) que deberán pesarse, estas quedaran como testigo del
experimento. Tome otras 50 semillas del mismo tipo, péselas y sumérjalas en agua durante 30 minutos sáquelas y péselas.

Determine:
 Diferencias de peso entre las semillas embebidas y las testigos
 El volumen y textura del tegumento
 Diferencias de tamaño
 Cantidad de agua tomada por las semillas

Comentarios ______________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. ¿Para qué le sirve a las células los procesos de intercambio a través de la membrana?
2. ¿Qué relación hay entre el peso molecular de las sustancias y la velocidad de difusión?
3. ¿Cuál es la importancia del proceso de Imbibición?
4. ¿Dónde se puede apreciar mejor el proceso de plasmólisis en la Elodea o en la epidermis de Cebolla?
5. ¿Qué factores cree usted que pueden condicionar el paso de sustancias y moléculas a través de la membrana celular?
 LABORATORIO No. 7
OBSERVACIÓN DE ORGANELAS EN CÉLULAS VEGETALES

INTRODUCCION
La célula es un microcosmos con límites definidos por una membrana celular, dentro de la cual se desarrolla
continuamente una gran actividad bioquímica; constituye un sistema organizado complejo, dinámico y auto dirigido
de moléculas y agregados moleculares, que toma y emplea energía del medio que la rodea para utilizarla en procesos
de biosíntesis, crecimiento y reproducción celular.

La citología trata de definir la diversidad de células existentes para comprender su organización y estructura, en
relación con su función, y ver a la célula no solo como una entidad individual independiente, sino como parte
integrante de tejidos, órganos y sistemas complejos de los seres vivos. La actividad de un organismo es el resultado
de la sumatoria de las actividades de las células que lo componen y de sus interacciones.

OBJETIVOS
* Identificar y describir algunos de los organelos celulares que forman parte de los tejidos vegetales.
* Comparar la diversidad de las formas celulares.

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

* Algodón
* Cuchilla de afeitar
* Palillos
* Bulbos de Cebolla
* Banano Maduro
* Tomate
* Papa
* Yuca
* Zanahoria
* Espinaca

EQUIPOS A UTILIZAR
* Microscopio Óptico Simple

MATERIALES A UTILIZAR
* Porta-objetos
* Cubre-objetos
* Pipeta de Pasteur
* Lanceta Estéril

REACTIVOS
* Solución Lugol
* Solución verde Janus
* Solución de azul de metileno
* Agua destilada
* Alcohol
PROCEDIMIENTO

OBSERVACIÓN DE ORGANELAS EN CÉLULAS VEGETALES EN FRESCO

1. EPIDERMIS DE CEBOLLA; Tome un bulbo de cebolla y con un bisturí o cuchilla de afeitar haga un corte en forma de V hacia
el centro del bulbo y sepárelo, observe que está formado por capas que se desprenden por sí solas. Tome una de estas
cáscaras y con ayuda de una aguja o un alfiler, desprenda la epidermis de la cara interna. Coloque este tejido epidérmico
transparente sobre un porta-objeto, extiéndalo evitando que se formen arrugas, agregue una gota de agua y cubra el
preparado con una laminilla o cubre-objeto. Observe al microscopio primero con objetivo de 10x y luego con objetivo de
40x. Esquematice sus observaciones.
Ahora con ayuda de una pipeta de Pasteur, coloque una gota de solución diluida de Lugol en el borde del cubre-objeto,
dejando que la solución entre al preparado por capilaridad. Observe al microscopio primero con objetivo de 10x y luego con
objetivo de 40x. Esquematice sus observaciones e identifique las organelas vistas

Obj. 10x Obj. 40x

Comentario___________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________

2. PULPA DE TOMATE: Seleccione un tomate no muy maduro y utilizando una cuchilla de afeitar, haga una incisión y separe
una parte del epicardio o cáscara. Extraiga una pequeña porción de pulpa o mesocarpio con el extremo de un palillo fino, y
espárzalo sobre un porta-objeto seco y limpio (sin agua). Coloque el cubre-objeto sobre el preparado haciendo leve presión.
Observe al microscopio primero con objetivo de 10x y luego con objetivo de 40x. Esquematice sus observaciones e identifique
las organelas observadas

Obj. 10x Obj. 40x

Comentario___________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________

3. CÁSCARA DE BANANO: Seleccione un banano maduro y quítele la cáscara, luego con un palillo extraiga de la cara interna
de la cáscara, una pequeña porción de tejido y colóquelo con una gota de agua sobre un porta-objeto. Con el palillo mezcle
hasta lograr un macerado homogéneo. Cubra el preparado con la laminilla cubre-objeto y observe al microscopio primero
con objetivo de 10x y luego con objetivo de 40x. Esquematice sus observaciones e identifique las organelas observadas

Obj. 10x Obj. 40x

Comentario___________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________

4. ZANAHORIA: Tome una porción de la zanahoria y con una cuchilla corte una porción del tejido externo luego colóquelo en
un porta-objeto con agua, cúbralo con la laminilla cubre-objeto y observe al microscopio primero con objetivo de 10x y luego
con objetivo de 40x. Esquematice sus observaciones e identifique las organelas celulares observadas

Obj. 10x Obj. 40x

Comentario___________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________________

5. ESPINACA: Retira cuidadosamente, con ayuda de unas pinzas de disección, la epidermis del tallo de apio, colócala en un
portaobjetos, agrega una gota de agua de la llave y pon un cubreobjetos. Observa en el microscopio con el objetivo de 10x,
después cambia al objetivo de 40x. Realiza esquemas de tus observaciones e identifica las organelas observadas

Obj. 10x Obj. 40x

Comentario___________________________________________________________________________________________
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6. LEUCOPLASTOS EN PAPA (AMILOPLASTOS): Seleccione una papa y córtela en dos porciones. Luego con una cuchilla de
afeitar o un bisturí haga un raspado suave sobre el corte recién hecho y coloque este material sobre un porta-objeto agregue
una gota de agua y cubra el preparado con una laminilla. Observe al microscopio primero con objetivo de 10x y luego con
objetivo de 40x. Esquematice sus observaciones
Ahora agregue sobre el mismo preparado en el borde de la laminilla o sobre otro preparado nuevo una gota de solución
diluida de Lugol que tenga un color pálido (si la solución es muy concentrada, la reacción será de color negro, impidiendo la
observación de la estructura interna) y observe nuevamente al microscopio. Anote los resultados. Esquematice sus
observaciones.
Repita este procedimiento para la observación de Amiloplastos en muestras de yuca.

Obj. 10x Obj. 40x

Comentario___________________________________________________________________________________________
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CONCLUSIONES
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. Fuera de la estructura u organelas que usted observó en las diferentes células, hay otras que no se hicieron visibles,
explique ¿por qué? y ¿Cómo podría observarse?
2. ¿Puede usted dar algunas razones por las cuales ciertos colorantes son específicos para determinadas estructuras
celulares? Investigue sobre cada una de ellas
3. ¿Hay alguna diferencia entre los Plastidios de los materiales estudiados? ¿Cuáles son?
4. Explique cuál es la función de los diferentes plastidios estudiados
5. Observas movimientos en el citoplasma de algunas células? Explica cómo se llama y a que se debe este movimiento
6. ¿En qué consiste el fenómeno de ciclosis?
 LABORATORIO No. 8
OBSERVACIÓN DE ORGANELAS EN CÉLULAS ANIMALES

INTRODUCCIÓN
Las células son estructuras altamente organizadas en su interior, constituidas por diferentes orgánulos implicados, cada uno
de ellos en diferentes funciones.
Gracias a los avances tecnológicos posteriores a la invención del microscopio, los científicos pudieron comprobar que todos
los seres vivos están formados por pequeñas celdas unidas unas a otras. Estas celdas, llamadas células, son la mínima unidad
del ser vivo que puede realizar las funciones de nutrición, relación y reproducción.
Entre los grupos de células se distinguen los eucariontes (organismo unicelular o multicelular cuyas células contienen un
núcleo verdadero, entre estas se encuentran las células animales y vegetales Célula Animal).
Las células de los integrantes del reino Animal pueden ser geométricas, como las células planas del epitelio; esféricas, como
los glóbulos rojos; estrelladas, como las células nerviosas, o alargadas, como las células musculares. La diversidad también se
extiende a los tamaños: varían entre los 7,5 micrómetros de un glóbulo rojo humano, hasta unos 50 centímetros, como ocurre
con las células musculares.

OBJETIVOS
* Identificar las diferentes organelas presentes en algunas células animales.
* Conocer distintos componentes celulares y sus funciones.
* Observar algunas células animales que le permitirán al estudiante ir comprendiendo e integrando conceptos nuevos.
* Dibujar e interpretar lo observado en el microscopio

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

* Algodón
* Palillos
* sangre
* Epitelio bucal
*Semen Animal

EQUIPOS A UTILIZAR
* Microscopio Óptico Simple

MATERIALES A UTILIZAR
* Porta-objetos
* Cubre-objetos
* Pipeta de Pasteur
* Lanceta Estéril

REACTIVOS
* Solución Lugol
* Solución verde Janus
* Solución de azul de metileno
* Agua destilada
* Alcohol absoluto
* Hematoxilina
* Eosina
PROCEDIMIENTO

OBSERVACIÓN DE ORGANELAS EN CELULAS ANIMALES

1. MITOCONDRIAS, EN EPITELIO BUCAL: Prepara un porta-objeto estéril y limpio con ayuda de un palillo de dientes obtenga
una muestra haciendo un raspado en la pared interna de la boca, con otro porta-objeto haga un extendido de la muestra
obtenida sobre el porta-objeto preparado, agregue sobre el extendido una gota de verde Janus (0.1 gr., 9 gr. De NaCl en 1
litro de agua destilada) deje acentuar el colorante durante 3 minutos, luego coloque un cubre-objeto sobre el preparado y
observe al microscopio con 400 aumentos aproximadamente. Esquematice sus observaciones. Compare la forma de éstas
células con las vegetales.

2. OBSERVACIÓN DE GLOBULOS ROJOS Y BLANCOS

Técnica Nª 1
Con una lanceta estéril “pinchese” un dedo para sacar una gota de sangre. Previamente debe desinfectarse el dedo con
alcohol. Una vez obtenida la gota de sangre colóquela en el extremo de un portaobjeto y haga un extendido o frotis
ayudándose con otro portaobjeto limpio, acercando el borde de uno de sus extremos hasta que toque la gota de sangre.
Incline este portaobjeto hasta formar un ángulo agudo, dejando que la sangre se extienda por capilaridad en el borde que
toca la gota de sangre. Deslice, con un solo impulso, el portaobjeto inclinado hacia el extremo contrario procurando que este
deslizamiento sea suave. Deje secar al aire. Observe con objetivo de 100x sin ponerle cubre-objeto y agregue al frotis seco
una gota de aceite de inmersión. Esquematice lo observado.

Obj. 100x

Comentario___________________________________________________________________________________________
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Técnica Nª 2
* Con la lanceta estéril realizar una punción en un pulgar.
* Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos.
* Colocar un portaobjetos como indica el dibujo anterior y deslizarlo sobre toda la superficie del porta objeto de manera que
se pueda obtener una fina película de sangre. El porta objetos absorbe la gota y la arrastra, pero sin pasar nunca por encima
de ella para no dañar los hematíes.
* Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tinción y añadir unas gotas de alcohol absoluto y dejar que el alcohol se
evapore para fijar la preparación.
* Cubrir con unas gotas de hematoxilina y dejar actuar durante 15 minutos. Evitar la desecación del colorante agregando más
líquido.
* Lavar la preparación y añadir unas gotas de eosina dejándola actuar 1 minuto.
* Volver a lavar hasta que no queden restos de colorante.
* Dejar secar aireando el porta o bien al calor muy lento de la llama del mechero.
* Observar al microscopio.

3. OBSERVACIÓN DE FLAGELOS EN ESPERMATOZOIDES

Tome una pequeña muestra de líquido seminal a un animal doméstico, deposítela en una lámina portaobjetos e
inmediatamente cúbrala con una lámina cubreobjetos. Asegúrese de observar la muestra rápidamente y realizar los
respectivos gráficos

Obj. 10x Obj. 40x

Comentario___________________________________________________________________________________________
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CONCLUSIONES
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PREGUNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA

1. ¿Cuáles células de la sangre son las primeras en atacar a las bacterias en una infección?
2. ¿Qué tipo de células sanguíneas están más implicadas en la inmunidad de los organismos?
3. Clasifique las células sanguíneas observadas
4 ¿Qué forma tienen los glóbulos rojos? ¿Tienen núcleo?
5 Busca información sobre la función que tienen cada uno de los componentes celulares de la sangre.
6 ¿Qué significa que las células de epitelio bucal observadas proceden de la capa de descamación del epitelio que recubre la
cavidad bucal?
7. Elabora un cuadro comparativo entre célula animal y célula vegetal.
8. ¿Qué le sucede a un organismo que no tiene la cantidad suficiente de glóbulos rojos?
9. Que estructuras celulares observo en los espermatozoides? Diga sus funciones
 LABORATORIO No 9
FOTOSÍNTESIS

INTRODUCCION

Nosotros somos criaturas del sol. Su luz es la fuente (directa o indirecta) de energía gratis que nos permite vivir en la tierra.
Fotosíntesis es la conversión de energía lumínica a energía química por seres vivientes. Los organismos que llevan a cabo
fotosíntesis (plantas, protistas fotosintéticos y móneras), mantienen la entrada de energía de los seres vivientes del mundo,
en la interfase orgánica inorgánica. La extensión mundial de la actividad fotosintética es imponente: Cada año decenas de
billones de toneladas de átomos de carbono son tomadas como CO₂ e incorporadas en las moléculas de azúcar, aminoácidos
y otros compuestos (PURVES, ORIANS AND HLLER, 1995). La mayor parte de los glúcidos producidos por la fotosíntesis se
convierten en almidón, que q2ueda depositado en los tejidos de la planta (DEVLIN, 1980)

Los principales ingredientes de la fotosíntesis son: El agua, CO₂ y luz, y produce además de alimentos, oxígeno en forma de
gas (O₂). los científicos han encontrado que la planta toma el agua para la fotosíntesis principalmente del suelo, el CO₂ es
tomado de la atmósfera a través de los estomas de sus hojas y que la luz es absolutamente necesaria en la producción de
oxígeno y alimento.

La reacción general del proceso de fotosíntesis es:

CO₂ + H₂O + Energía radiante C₆ H₁₂ O₆ + O₂

Clorofila

Sin embargo, el proceso no es tan simple. Ocurre en varios pasos. El primero de ellos es la “captura” de la luz por la clorofila
y utilización de esta energía para romper la molécula de agua y producir ATP a partir de ADP y Pi, energía que es usada con
la incorporación del CO₂ para formar los carbohidratos.

Si bien, el O₂ es en un sentido un producto de desecho en el proceso, es de vital importancia como requerimiento para
organismos (plantas y animales) en el proceso de respiración celular

Se sabe que la clorofila y las enzimas que participan en la fotosíntesis son componentes estructurales de los cloroplastos.
Casi todas las reacciones de la fotosíntesis han sido demostradas experimentalmente muchas veces, aunque se desconocen
aún algunos mecanismos por los cuales ocurren estas reacciones.
OBJETIVOS

* Comprobar los efectos lumínicos y de concentración de CO₂ en el rendimiento energético del proceso de fotosíntesis
realizado por las plantas.

* Demostrar el desprendimiento de oxígeno durante la fotosíntesis

MATERIAL POR LABORATORIO

Tubos de ensayo
Solución de Bicarbonato de sodio (NaHCO3)
Acetona
Etanol
Gradilla
Pipeta de 1 ml
Mortero
Papel filtro

MATERIAL QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

Ramas de planta acuática (elodea)
Bombilla de 100w

PROCEDIMIENTO

1. PRODUCTOS DE LA FOTOSÍNTESIS. PRODUCCIÓN DE OXÍGENO

- Toma una ramita de Elodea y colócala en un tubo de ensayo o vaso con agua que contiene bicarbonato de sodio ( en el vaso
de precipitado coloca una solución que contenga 3 partes de bicarbonato de sodio 2,5% y una parte de agua), coloca la
preparación frente a una bombilla de 100 w que proveerá la energía lumínica. La preparación debe estar a 20 cm de la
bombilla espera 5 minutos mientras se estabiliza el sistema y empieza a contar el número de burbujas de oxígeno que se
producen por minuto. Repita el ejercicio con una bombilla de 40w y de 25w
¿Qué pasa durante el proceso?
- ¿Qué gas se produjo en el tubo de ensayo?
- ¿A qué etapa de la fotosíntesis corresponde este experimento?
- ¿Qué diferencia encuentra al utilizar las otras dos bombillas?
Discutir los resultados y se sacarán conclusiones
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2. OBSERVACIÓN DE LA FOTOSÍNTESIS

1. Prepara un litro de agua con 2 cucharadas de bicarbonato de sodio NaHCO₃. Esta solución puede servir para dos o tres
equipos.
2. Llena con la solución de bicarbonato un tubo de ensayo de 18x 150mm hasta el borde e introdúcele una ramita de
elodea.
3. Invierte el tubo de ensayo en un vaso de precipitados de 250ml que contenga solución de bicarbonato de sodio hasta la
mitad de su capacidad, sin derramar nada del líquido ni que entren burbujas de aire al interior
4 .Coloca el vaso de precipitados cerca de una ventana a la luz del sol o coloca una lámpara muy cerca. Deja en reposo el
sistema y observa después de 30 minutos el interior del tubo de ensayo.
5. Dibuja lo que observas.

Descripción___________________________________________________________________________________________
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CONCLUSIÓN__________________________________________________________________________________________
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Resuma con sus propias palabras lo que ocurre durante las reacciones luminosas de la fotosíntesis
2. ¿Qué efectos produce sobre la fotosíntesis, la intensidad lumínica, la temperatura, la humedad del suelo y la concentración
de CO₂ y O₂ en la atmósfera?
3. Compare la fotosíntesis con la respiración
4) ¿Qué función realizan los estomas?
 LABORATORIO No. 10
OBSERVACIÓN DE MITOSIS EN RAICES DE CEBOLLA

INTRODUCCIÓN

La división celular es el fenómeno citológico por el que una célula origina dos células hijas, cada una de las cuales recibe
idéntica información genética.
Dentro de las funciones que realiza la célula eucarionte, dos de las más importantes: la regulación y la reproducción celular
descansan en el núcleo.
El núcleo contiene la mayor parte de la información hereditaria de la célula, es decir, las instrucciones necesarias para el
desarrollo y el metabolismo de las especies. Este Organelo es el encargado de duplicar su información genética para
transmitirla a las nuevas generaciones cuando la célula se reproduzca.

Los procesos que se manifiestan desde la formación de una célula hasta su propia división en dos hijas, son lo que se denomina
ciclo celular. Este ciclo se divide en dos etapas principales: la interfase y la división celular, de acuerdo con los sucesos que se
presentan en la célula. La interfase se caracteriza por una serie de procesos que implican la fabricación activa de moléculas
tales como las proteínas y la duplicación del DNA. Mientras que la división celular consta de la mitosis o cariocinesis en la que
ocurre la condensación y separación de los cromosomas y de la citocinesis o división citoplásmica. La mitosis se subdivide
según los cambios que presente el núcleo y la morfología que presenten los cromosomas en: profase, metafase, anafase y
telofase.
El significado biológico de la mitosis es asegurar la conservación del patrimonio hereditario nuclear en el proceso de
formación de un individuo adulto a partir de una célula inicial o cigoto.

OBJETIVO
Observar e interpretar figuras de distintas fases de la Mitosis en células vegetales
Hacer una preparación microscópica de células meristemáticas de la raíz de cebolla

MATERIALES Y EQUIPOS:
Microscopio óptico simple
Aguja de disección.
Plancha de calentamiento
Caja de petri

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

Ápices de cebolla.
Portaobjetos.
Cubreobjetos.
Papel absorbente
Cinta de enmascarar

REACTIVOS A UTILIZAR
HCl diluido, Colorante aceto - orceína.

.
PROCEDIMIENTO

PREPARACIÓN PREVIA
Tres o cuatro días antes de hacer la práctica se pone un bulbo de cebolla en un vaso de precipitados lleno de agua, de tal
manera que la parte inferior del mismo esté en contacto con el agua. no permita que la cebolla caiga dentro del recipiente,
sino que quede suspendida sobre el agua (si es necesario, inserte unos palillos de dientes en los lados de la cebolla para que
la sostengan).
Al cabo de esos tres o cuatro días se habrán formado numerosas raicillas, cuyos ápices se utilizarán en esta práctica. Conviene
realizar la práctica cuando las raicillas todavía no han crecido demasiado. Se debe cambiar el agua del frasco por agua limpia,
al menos dos veces, a los 3 y 4 días. La raíz de la cebolla debe de estar sumergida en agua hasta el momento de realizar la
práctica

PROCEDIMIENTO:

1. Con una tijera se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su longitud sea de unos 2 a 3 mm., ya que es en
esta zona de la raíz donde se encuentran las células en división.
2. Enjuague los ápices de cebolla (fijados) en agua destilada por 30 segundos.
3. Coloque las raíces en un plato Petri que contenga unos 3mL de HCl 1% por 7-8 min.
4. Mientras transcurre el tiempo anterior, corte y conserve la porción del ápice de raíz que posea un tejido blanquecino
(casi 2-3 mm del extremo de la raíz) y deseche el resto.
5. Transferir los ápices a agua destilada y dejarlos allí 30 segundos (enjuague).
6. Coloque el tejido sobre un portaobjetos e inmediatamente agregue dos gotas de aceto-orceína sobre éste.
7. Coloque un cubreobjetos sobre el tejido y caliente la muestra suavemente por 1 minuto, por medio de toques
intermitentes sobre la superficie de un plato de calentamiento (durante este tiempo vigile que el tejido permanece
humedecido con el colorante, no permita que hierva ni que se seque; agregue más colorante si es necesario). Esta etapa
es opcional
8. Coloque un trozo de papel toalla sobre el cubreobjetos; presione fuerte y cuidadosamente por medio de un borrador de
lápiz (esta técnica se llama "extendido por aplastamiento" o "squach”). Recuerde que mientras esté más aplastado, las
células se separarán más unas de las otras y se encontrarán en el mismo plano, distinguiéndose mejor las distintas etapas
de mitosis.
9. Después del aplastamiento, si es necesario, levante el cubreobjetos con la ayuda de una aguja de disección y agregue una
gota adicional de aceto-orceína; coloque nuevamente el cubreobjetos sobre la muestra.
10. Observe al microscopio (primero con el objetivo 10x localice el área adecuada, luego pase a 40x para observar con
detalles).
11. Encuentre las cuatro etapas de la mitosis, además observe la apariencia de las células que se encuentran en interface
(aquellas que no están en mitosis). Realiza un conteo de campo.

Descripción___________________________________________________________________________________________
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CONCLUSIÓN__________________________________________________________________________________________
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Describe las etapas del ciclo celular.

2. Explica en qué etapa del ciclo celular se encontraban la mayoría de las células observadas
3. Por qué crees que se utilicen las partes en crecimiento de la cebolla para observar la mitosis?
4. Con que fin se utiliza el HCL y la aceto-orceina?
5. Cuál es la importancia de la mitosis en la transmisión de la información genética?

FASES DE LA MITOSIS
 LABORATORIO No. 11
OBSERVACIÓN DEL ADN

INTRODUCCIÓN

El ADN es una de las partes fundamentales de los cromosomas, son estructuras constituidas por dos pequeños filamentos o
brazos, que pueden ser iguales o desiguales, están unidos por un punto común llamado Centrómero; varían en forma y
tamaño, pueden verse fácilmente al momento de la división celular por medio de un microscopio.
Los cromosomas químicamente están formados por proteínas y por el Ácido desoxiribonucleico o ADN.

ESTRUCTURA DEL ADN

El ADN está formado por unidades llamadas nucleótidos, cada una de las cuales tiene tres sustancias: el ácido fosfórico, un
azúcar de cinco carbonos llamada pentosa y una base nitrogenada.
El ácido fosfórico forma el grupo fosfato; la base nitrogenada es de cuatro clases: adenina (A), guanina (G), citocina (C) y
timina (T).
Según los descubridores del ADN, James Watson y Francis Crick, el ADN está formado por una doble cadena de nucleótidos
que forman una especie de doble hélice semejante a una escalera en espiral; a los lados se disponen en forma alternada un
fosfato y un azúcar y en los peldaños dos bases nitrogenadas.

FUNCIONES Y PROPIEDADES DEL ADN

a) El ADN controla la actividad de la célula.
b) Es el que lleva la información genética de la célula, ya que las unidades de ADN, llamadas genes, son las responsables de
las características estructurales y de la transmisión de estas características de una célula a otra en la división celular. Los
genes se localizan a lo largo del cromosoma.
c) El ADN tiene la propiedad de duplicarse durante la división celular para formar dos moléculas idénticas, para lo cual necesita
que en el núcleo existan nucleótidos, energía y enzimas.

OBJETIVO:
Observar el ADN presente en muestras biológicas
Complementar los fundamentos teoricos con las imágenes observadas

MATERIALES Y EQUIPOS A UTILIZAR:

Mortero con pistilo
Vaso de precipitados
Bisturí
Agitador de vidrio
Tubo de ensayo
Microscopio optico simple

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

Hígado de pollo
Detergente líquido
Enzimas (suavizador de carne en polvo o jugo de papaya)

SOLUCIONES : Alcohol
PROCEDIMIENTO:
1) Cortar en pequeños trozos el hígado de pollo, luego lo colocamos en el mortero y lo maceramos con ayuda de un poco de
agua hasta obtener una consistencia de una crema.
2) Vertemos el macerado en un vaso de precipitados, por medio de un colador para separar algunas partes que no se hayan
licuado lo suficiente.
3) Medir el macerado en el recipiente y añadimos ¼ de detergente líquido del total del macerado y agitamos suavemente con
una varilla de vidrio.
4) Agregar 1 cucharada de Enzimas y agitamos suavemente y lentamente por unos 5 minutos. Si mezclamos con demasiada
rapidez o con mucha fuerza se corre el peligro de romper el ADN, con lo que no podríamos observarlo.
5) Vertemos la mezcla en un tubo de ensayo hasta la mitad de éste
6) Vertemos cuidadosamente alcohol, evitando que se mezcle con el líquido de abajo.
7) Luego de unos minutos se podrá observar unos filamentos blancos dentro del alcohol y que se elevan de la mezcla de
hígado, detergente y enzimas.
8) Observar al microscopio y realizar los esquemas y la descripción correspondiente

Obj. 40x Obj. 100x

Comentario___________________________________________________________________________________________
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CONCLUSIONES
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1) Cuales son las características de la molécula del ADN
2) Que función realiza el ADN
3) Explique como se lleva a cabo el proceso de replicación del ADN
4) ¿Solamente las cosas vivas contienen ADN?
 BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA

DE ROBERTS, E. M. F.; HIB, Jose. Bases da biologia celular e molecular. Tradução por Célia Guadalupe Tardeli de Jesus
Andrade; Sérgio Ferreira de Oliveira; Telma Maria Tenório Zorn. 3 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2001

CURTIS, H., N.S.BARNES, A. SCHNEXK Y G. FLORES. 2006. Invitación a la Biología. Editorial Médica Panamericana. Buenos Aires.

Solomon,E.P., Berg L.R. yMartin D.W.(2008).Biología. México: McGraw-Hill

SOLOMON, E. P., L. R. BERG, D. W. MARTIN Y C. VILLÉE. 1998. Biología de Villee. 4ta edición. Editorial McGraw – Hill
Interamericana. México

DE ROBERTIS, E. F. Y R. PONZIO. 2000. Biología celular y molecular. 12ma edición. Editorial El Ateneo.

Paniagua Gómez Álvarez, R., M. Nistal Martín de Serrano, P. Sesma Egozcue, M. Alvarez Uría, B. Fraile Láiz, R. Anadón Alvarez
& F.J. Sáez Crespo. 2007. Citología e histología vegetal y animal: biología celular. Editorial Mc GrawHill.
Interamericana

CAMPBELL, N. Y J. REECE 2007. Biología. 7ma. Edición. Editorial Médica. Panamericana. Buenos Aires.
 MANUAL DE GUÍA DE LABORATORIO

BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

MARTA CELINA VERGARA MARTÍNEZ

Médico Veterinario y Zootecnista Esp.

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS

PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 1

MICROSCÓPIO, TÉCNICAS PARA HACER PREPARACIONES

MICROSCÓPICAS

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria – 2017
 LABORATORIO N° 2

PROPIEDADES DEL MICROSCOPIO Y DETERMINACIÓN

DE MEDIDAS AL MICROSCOPIO

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 3

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE
CÉLULAS PROCARIÓTICAS

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 4

IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS, PROTEÍNAS Y LÍPIDOS POR

REACCIONES QUÍMICAS, DE COLOR Y MICROCOPÍA DE LUZ

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 5

ACCIÓN ENZIMÁTICA

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 6

PROPIEDADES FÍSICAS
DE LA MATERIA VIVA

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 7

OBSERVACIÓN DE ORGANELAS EN
CÉLULAS VEGETALES

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 8

OBSERVACIÓN DE ORGANELAS EN
CÉLULAS ANIMALES

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 9

FOTOSÍNTESIS

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 10

OBSERVACIÓN DE MITOSIS EN
RAICES DE CEBOLLA

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017
 LABORATORIO N° 11

OBSERVACIÓN DEL ADN

INTEGRANTES

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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
ASIGNATURA BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR – LABORATORIO

GRUPO ______________ FECHA _________________

NOTA ____________________

Monteria - 2017