Principios de la técnica

En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una

columna que contiene a la fase fija. La separación cromatográfica en HPLC es el
resultado de las interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas
fases, móvil y estacionaria

A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto

rendimiento (HPLC, de high-performance liquid chromatography) no está limitada por
la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra.

La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos

naturales lábiles, materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos
polifuncionales de alto peso molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro
parámetro se encuentra disponible para la selectividad, en adición a una fase
estacionaria activa.

La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor
gama de estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación.

Elementos que tiene

Los disolventes más utilizados son el agua, el metanoly elacetonitrilo. El agua puede
contener tampones, sales, o compuestos como el ácido trifluoroacético, que ayudan a
la separación de los compuestos.

Cual es el equipo que supera a HPLC

Presión del sistema

La presión de las bombas es variable según el modelo y fabricante, pero su

rendimiento se mide en su habilidad para generar un flujo constante y reproducible.
La presión puede lograr valores de hasta 40 MPa (o unas 400 atmósferas). Los
aparatos más modernos de HPLC incorporan mejoras para poder trabajar a presiones
más altas y, por lo tanto, poder utilizar partículas de tamaño más pequeño en las
columnas (< 2 micrómetros). Estos nuevos aparatos, denominados ultra performance
liquid chromatography (UPLC) pueden trabajar con valores de hasta 100 MPa de
presión (unas 1000 atmósferas). (Hay que tener en cuenta que las siglas UPLC son
una marca registrada de Waters Corporation aunque a veces se utilizan de forma
general para designar este tipo de aparatos).