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Carreras del área de Salud

BIOLOGÍA CELULAR CAMB1102


LABORATORIO Nº1
RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS

Realiza las actividades señaladas a continuación y considera la siguiente lista de materiales.

Materiales

De Laboratorio

- Pipetas graduadas de 2 ml y 5 ml - Pipetas Pasteur con bulbillo


- Tubos de ensayo - Mortero
- Gradillas - Espátula
- Papel absorbente - Bisturí con mango
- Placa de petri - Pinzas
- Baño maría

Reactivos

- Suspensión de almidón - Solución de glucosa al 1%


- Suspensión de albúmina - Reactivo de Fehling
- Solución de hidróxido de sodio al 10% - Agua destilada
- Solución de sulfato de cobre al 1% - Lugol
- Reactivo de Fehling

Muestras biológicas

- Leche líquida
- Macerado de papa
- Macerado de hígado de pollo

El reconocimiento de biomoléculas requiere previamente extraer las diferentes moléculas de los tejidos y células
mediante métodos que pueden ser físicos y/o químicos. Esos métodos se incluyen dentro de lo que se conoce
como fraccionamiento celular. En esta actividad práctica se realizará el reconocimiento molecular en material
biológico previamente fraccionado, así como en soluciones preparadas con antelación.
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I.- Reconocimiento de Hidratos de Carbono

1.- Monosacáridos reductores mediante reactivo de Fehling (o mediante reactivo de Benedict).

Reactivo de Fehling: Solución ácida (A)= Sulfato cúprico disuelto en agua. Solución básica (B) = Citrato de sodio
y tartrato de sodio y potasio.

a) Tubo control: Coloque 1 ml de solución de glucosa en un tubo de ensayo. Agregue 2 ml de solución A y


luego 2 ml de solución B. Caliente 10 min en un baño de agua en ebullición hasta que se observe el color cobre
característico de la reacción.
Ese color indica reacción positiva y presencia de
azúcares reductores como la glucosa.

b) Tubo de muestra 1: Coloque 3 ml de suspensión de agua con miel en un tubo de ensayo. Luego, agregue
2 ml de solución A y luego 2 ml de solución B. Caliente 10 min en un baño de agua hirviendo hasta que se observe
el color característico de la reacción ¿Cuál es el resultado de la reacción? Fundamente su respuesta.

c) Tubo de muestra 2: Coloque una pequeña cantidad de macerado de hígado en un tubo de ensayo.
Adicione 2 ml de agua destilada y agite hasta homogenizar el contenido. Luego, agregue 2 ml de solución A y 2
ml de solución B. Caliente 10 min en un baño de agua hirviendo hasta que se observe el color característico de
la reacción ¿Cuál es el resultado de la reacción? Fundamente su respuesta.

2.- Polisacáridos (almidón) mediante Test de Lugol.

a) Tubo control 1: Coloque 2 ml de suspensión de almidón en un tubo de ensayo. Luego agregue 1 ml de


Lugol. Registre el color obtenido que indica una reacción positiva.
Ese color indica reacción positiva y presencia de
polisacáridos vegetales.

b) Placa de muestra: En una placa de petri coloque una pequeña cantidad de macerado de papa. Agregue
2 gotas de Lugol ¿Qué indica el color observado en la reacción? Fundamente su respuesta.

II.- Reconocimiento de proteínas:

1.- Proteínas mediante Test de Biuret.

a) Tubo control: Coloque 2 ml de suspensión de albúmina de huevo en un tubo de ensayo. Agregue 3 ml


de hidróxido de sodio al 10%. Luego, gota a gota incorpore al tubo sulfato de cobre al 1%. La solución se torna
de un color violáceo claro.

Ese color indica reacción positiva y presencia de


Proteínas

b) Tubo muestra 1: Coloque 2 ml de leche líquida en un tubo de ensayo. Agregue 3 ml de hidróxido de


sodio al 10%. Luego, gota a gota incorpore al tubo sulfato de cobre al 1% ¿Cuál es el resultado? Fundamente su
respuesta.
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c) Tubo muestra 2: Coloque una pequeña cantidad de macerado de hígado en un tubo de ensayo. Adicione
2 ml de agua destilada y agite hasta homogenizar el contenido. Agregue 3 ml de hidróxido de sodio al 10%. Luego,
gota a gota incorpore al tubo sulfato de cobre al 1% ¿Cuál es el resultado? Fundamente su respuesta.

Cuestionario

1.- ¿En que consiste el fraccionamiento celular? Averigüe que métodos físicos y químicos se utilizan para
fraccionar tejidos y células animales y vegetales.

2.- Averigüe en la literatura acerca de métodos para el reconocimiento de moléculas inorgánicas presentes en
tejidos y células.

3.- ¿Qué aplicaciones tienen en biomedicina los métodos utilizados en el laboratorio? Investigue en diferentes
medios sobre ejemplos de aplicación de estos métodos.

Biomoléculas
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