Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
UNIFAL- MG
Projeto de Pesquisa
1 – RESUMO
2
O uso de plantas medicinais no sul de Minas Gerais é um traço cultural
marcante e entre as muitas espécies utilizadas com potencialidades medicinais se
destacam os diferentes tipos de boldo. Existem pelo menos quatro espécies
denominadas indistintamente de boldo, o Plectranthus barbatus Andrews (Boldo-
Brasileiro) da família Lamiaceae, a Vernonia condensata Backer (Boldo-Baiano)
da família Asteraceae e o Peumus boldus Lyons (Boldo-do-Chile) que pertence à
família Monimiaceae. Praticamente todas estas plantas são utilizadas para os
mesmos fins, e por apresentarem sabor e aroma bem parecido, a população
acabou denominando todas elas de boldo. Dessas plantas já se conhece muito do
ponto de vista botânico-agronômico, morfofisiológico e fitoterápico, no entanto,
esses aspectos não são suficientes para elucidação de problemas taxonômicos ou
mesmo na reformulação de estudos filogenéticos. Assim sendo, a citogenética é
uma ferramenta ideal já que maioria desses parâmetros morfológicos ou
bioquímicos estão sujeitos à constantes alterações devido a variações de caráter
ambiental. Nesse sentido, esse trabalho tem por finalidade identificar e
caracterizar genótipos de espécies de boldo e seus complementos cromossômicos
visando contribuir com subsídios para a citotaxonomia, evolução cariotípica e
programas de melhoramento dessas espécies, bem como para que a introdução
dos genótipos de boldo no horto de plantas medicinais da UNIFAL-MG seja feita
com maior rigor descritivo.
2 – INTRODUÇÃO
3
O uso de plantas medicinais no Brasil é uma alternativa para as pessoas
que possuem restrições de acesso à medicina tradicional. A medicina popular tem
sido usada no tratamento e na cura de enfermidades nas regiões mais pobres do
país bem como nas grandes cidades brasileiras. As plantas medicinais são
comercializadas em feiras livres, mercados populares e encontradas em quintais
residenciais. Esse tipo de cultura medicinal desperta o interesse de pesquisadores
em estudos envolvendo áreas multidiciplinares, como por exemplo, botânica,
farmacologia, fitoquímica, genética, entre outras, que associadas enriquecem os
conhecimentos sobre a inesgotável fonte medicinal natural (VIEIRA e SILVA,
2002).
Segundo Scheffer et al. (2007), o Brasil é muito rico no que se refere à
diversidade de espécies vegetais. Dentre as nativas, existem espécies que têm
um aspecto comercial importante e são consumidas em grande escala, seja no
mercado brasileiro como no exterior, esta lista inclui o guaraná (Paulinia cupana),
ipê-roxo (Tabebuia sp), catuaba (Trichilia catigua), pata-de-vaca (Bauhinia sp),
faveira (Dimorphandra mollis), entre outras. Algumas têm importância regional,
com consumo em menores proporções, sendo comercializadas em barracas de
raizeiros ou enviadas a centros urbanos regionais: carqueja-doce (Baccharis
articulata), marcela (Achyrocline satureioides), jatobá (Hymenea sp), guaco
(Mikania glomerata).
Várias espécies de plantas medicinais são exóticas e foram trazidas pelos
mais diversos imigrantes, em distintas épocas e seu uso foi gradativamente
incorporado pelas diversas etnias no Brasil, acabando por constituir-se em
espécies bastante utilizadas. Algumas espécies desse grupo são hoje importantes,
como a camomila (Chamomilla recutita), algumas hortelãs (Mentha sp.), o
manjericão (Ocimum basilicum) e o alecrim (Rosmarinus officinalis). Muitas
acabaram aclimatando-se bem em algumas regiões brasileiras, constituindo-se em
espécies ruderais, muito utilizadas por diversas populações, rurais ou urbanas.
Na variabilidade genética de plantas medicinais, ressalta-se que as
variabilidades inter e intraespecíficas resultante da pressão ambiental nos diversos
biomas produzindo características que são muito importantes nos trabalhos de
4
conservação e citogenética, em especial nas populações cultivadas (SHARMA e
SHARMA, 1999). Essas diferenças ainda não estão suficientemente estudadas,
principalmente quando em nível intra-específico. A evolução dos estudos
botânicos e genéticos, onde são envolvidos estudos fitoquímicos, moleculares e
ambientais, tem resultado na proposição de alguns re-enquadramentos
taxonômicos .
A região Sul de Minas Gerais está entre os locais de ocupação mais antiga
do Brasil e seu histórico mostra que a economia local sempre se baseou na
exploração dos recursos naturais. O uso de plantas medicinais na região é um
traço cultural marcante e entre as muitas espécies utilizadas com potencialidades
medicinais se destacam os diferentes tipos de boldo.
Existem pelo menos quatro espécies denominadas indistintamente de
boldo, o Plectranthus barbatus Andrews (o Boldo-Brasileiro) da família Lamiaceae,
a Vernonia condensata Backer (o Boldo-Baiano) da família Asteraceae e o
Peumus boldus Lyons (Boldo-do-Chile) que pertence à família Monimiaceae
(JOLLY, 2002; LORENZI e MATOS, 2002). Praticamente todas estas plantas são
utilizadas para os mesmos fins, e por apresentarem sabor e aroma bem parecido,
a população acabou denominando todas elas de boldo.
Dessas plantas já se conhece muito do ponto de vista botânico-agronômico,
morfofisiológico e fitoterápico, no entanto, esses aspectos não são suficientes para
elucidação de problemas taxonômicos ou mesmo na reformulação de estudos
filogenéticos. Assim sendo, a citogenética é uma ferramenta ideal já que maioria
desses parâmetros morfológicos ou bioquímicos estão sujeitos à constantes
alterações devido a variações de caráter ambiental.
Nesse sentido, esse trabalho tem por finalidade identificar e caracterizar os
genótipos de espécies de boldo e seus complementos cromossômicos visando
contribuir com subsídios para a citotaxonomia, evolução cariotípica e programas
de melhoramento dessas espécies, bem como para que a introdução dos
genótipos de boldo no horto de plantas medicinais da UNIFAL-MG seja feita com
maior rigor descritivo.
5
3 – REVISÃO DE LITERATUA
6
óleo essencial de odor bem marcante, lembrando levemente a cânfora (LORENZI
e MATOS, 2002).
Vermonia condensata é outra espécie de boldo conhecida também como
Boldo-Baiano, Boldo-Japonês ou Aluman na região Nordeste do Brasil. É uma
espécie pertecente a família Asteraceae com origens na África tropical, Índia e
Ceilão. A morfologia da lâmina da folha desta planta é simples com uma forma
elíptica e ápice agudo, sua base cuneada e a margem dentada. Sua consistência
é membranosa e a superfície é pilosa. A folha é anfihipoestomática, na epiderme
são inseridos estômatos anomocíticos e tricomas. Na superfície adaxial o teste
padrão cuticular ocorreu enquanto os striaes e se viu somente em células
adjacentes às células-guarda ou na base do tricoma (CASTRO, 1995; JOLLY,
2002).
Embora todas essas plantas sejam conhecidas como boldo elas são de
diferentes espécies e famílias além de possuir diferentes propriedades medicinais.
Medicinalmente, o P. barbatus é utilizado como antitóxicos do fígado, por
diminuir o volume e a acidez do suco gástrico, no tratamento do cálculo biliar,
depurativo, diurético, fungicida, antiinflamatório, antidiarréico, para insuficiência e
congestão hepática, cicatrizantes, calmante e fortificante do estômago, hoje está
sendo utilizado em cremes antirugas e para dor de ouvido (BOTSARIS, 1998),
citado por Silva, 2005. Suas raízes são fonte de Forskolina, uma importante droga
utilizada no tratamento do glaucoma, cardiopatias e asma. O Forskolina é um
diterpenóide do tipo labdano obtido pelo isolamento de suas raízes, seu emprego
estimula a adenil ciclase em muitos tecidos e inibe a formação de plaquetas,
possuindo propriedade inotrópica positiva (SOUZA e SHAH, 1988). Na Índia já se
encontram relatos de cultivo da planta com o objetivo de se ter uma provisão dos
tubérculos de raízes para uso medicinal, e também de melhoramento genético
para aumentar o desenvolvimento e rendimento dessa substância nas espécies
cultivadas (ROBBERS et al. 1997; ALMEIDA e LEÔNICA, 2000).
7
Quanto á utilização medicinal de Peumus boldus, é empregado para dores
reumáticas e em casos de luxações e também é indicado para afecções do fígado
e da vesícula, cálculo biliar, cólica, diarréia, digestão, dispepsia, febre, fraqueza
orgânica, gota, hepatite, insônia, má-flatulência, previr icterícia, prisão de ventre,
problemas diuréticos, reumatismo, uréia. P. boldus é apresentado no mercado
brasileiro na formula de extrato fluido, tinturas, cápsulas e na forma de chá. Em
altas doses pode provocar vômitos, diarréias e alterações do sistema nervoso
(efeito narcótico). Pode ser abortivo e provocar hemorragias internas (LORENZI e
MATOS, 2002).
Vermonia condensata é utilizada para as mesmas indicações do boldo
verdadeiro, possui propriedades depurativas, diuréticas, antidiarreicas,
principalmente utilizado como antitóxico do fígado e propriedades cicatrizantes
(CASTRO, 1995).
8
Sobre o gênero Coleus e Plectranthus os números cromossômicos, variam
de acordo com a espécie e o pesquisador, muitas vezes, a mesma espécie chega
a apresentar números cromossômicos diferentes. Silva (2005) trabalhando com
uma população de P. barbatus do Horto de Plantas Medicinais da Universidade
Vale do Rio Verde (UninCor) verificou-se a ocorrência de citotipos com números
cromossômicos variando de 2n = 28, 2n = 30, 2n = 32 e 2n = 34 cromossomos. A
autora confirmou que o citotipo introduzido no horto, apresenta um cariótipo de 2n
= 2x = 28 cromossomos para o qual foram apresentadas as descrições do
complemento cromossômico e o idiograma. Os cromossomos foram classificados
como metacêntricos de acordo com a classificação de Levan et al. (1964) e
apenas os cromossomos 6, 21 e 26 foram classificados como submetacêntricos
de acordo com a classificação de Guerra (1988).
Para as demais espécies de boldo não foram encontradas na literatura
consultada informações sobre a descrição do complemento cromossômico. Neste
contexto comprova-se a importância do estudo citogenético tanto de plantas ainda
não estudadas como daquelas já analisadas. Apesar do Boldo-Brasileiro já
apresentar número cromossômico determinado, este fator não invalida a
realização de novas análises, pois há um grande número de informações sobre
número de cromossomos da literatura que está incorreto (GUERRA e SOUZA,
2002). Assim novos estudos sobre os complementos cromossômicos são
relevantes e necessários não só como meio de confirmação dos dados já
existentes, como para no futuro servirem de base para experimentos de
melhoramentos genéticos das espécies estudadas.
4 – JUSTIFICATIVA
9
família Lamiaceae, Vernonia condensata (Boldo-Baiano) da família Asteraceae e
Peumus boldus (Boldo-do-Chile) que pertence à família Monimiaceae. Essas
espécies por apresentarem sabor e aroma bem parecidos e serem utilizadas para
os mesmos fins, a população acabou denominando todas elas de boldo. Essas
plantas apresentam características botânico-agronômicas, morfofisiológicas e
fitoterápicas amplamente descritas na literatura. Contudo, esses aspectos não são
suficientes para elucidação de problemas taxonômicos ou mesmo na reformulação
de estudos filogenéticos. Nesse sentido, a citogenética é uma ferramenta ideal já
que a maioria desses parâmetros morfológicos ou bioquímicos estão sujeitos à
constantes alterações devido a variações de caráter ambiental. Associado a essa
temática a descrição do complemento cromossômico das espécies de boldo ainda
é insipiente e carece de maiores investigações.
5 - OBJTIVOS
6 – METODOLOGIA
Estacas e/ou sementes das três espécies citadas serão obtidas de três
populações a serem coletadas em localidades dos municípios da região ou serão
obtidos em hortos de plantas medicinais da UNINCOR, UFLA ou da Embrapa
Recursos Genéticos - CENARGEN.
10
As análises citogenéticas mitóticas serão feitas a partir da observação de
células meristemáticas de pontas de raízes, obtidas da germinação de sementes
ou do enraizamento de estacas das populações obtidas, conforme descrito Guerra
e Souza (2002) e Peñaloza et al. (2005).
Serão realizadas as seguintes análises:
11
BC; comprimento total do lote diplóide: CTLD = Σ Cti; comprimento relativo: CR =
Cti/CTLH x 100; índice centromérico: ic = BC x 100/ Cti.
Com estes dados será feita a identificação dos pares homólogos em cada
metáfase. Uma vez identificados os cromossomos, serão calculadas as médias
dos valores de relação de braços (RB) e de comprimento relativo (CR). Os
cromossomos serão organizados e numerados em ordem decrescente e
representados na forma de idiograma. Os dados cariotípicos de cada célula serão
analisados para cada um dos cromossomos do complemento, com exceção do
comprimento total do lote haplóide que envolve todos os cromossomos.
A classificação morfológica dos cromossomos será feita de acordo com a
nomenclatura de Levan, Fredga e Souberg (1964), baseada na relação de braços.
7 – RESULTADOS ESPERADOS
12
Espera-se com o desenvolvimento desse trabalho obter a cariotipagem das
espécies de Plectranthus barbatus (Boldo-Brasileiro), Vernonia condensata
(Boldo-Baiano) e Peumus boldus (Boldo-do-Chile) que pertence à família
Monimiaceae. A cariotipagem e o estudo do comportamento do complemento
cromossômico dessas espécies poderão vir a ser utilizadas na elucidação de
problemas taxonômicos e na compreensão da evolução cariotípica dessas
espécies.
Associada a essa expectativa, espera-se ainda que esse trabalho possa
conferir a estudante uma oportunidade de treinamento e amadurecimento
profissional na área da genética vegetal ampliando a sua visão de mundo a
respeito da Ciência e das questões conservacionistas da flora medicinal brasileira.
8 – REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BOTSARIS, A.S. As fórmulas mágicas das plantas. Rio de Janeiro : Nova Era.
1998.
13
CUCO, S.M.; MONDIN, M.; VIEIRA, M.L.C. PERECIN, M.L.R.A. Técnicas para a
obtenção de preparações citológicas com alta freqüência de metáfases mitóticas
em plantas: Passiflora (Passifloraceae) e Crotalaria (Leguminosae). Acta
botânica brasileira, São Paulo, v. 17(3), p. 363-370, 2003.
MILAN, P.; HISSAE, A.H.; GLORIA, B.A. Comparative Leaf Morphology and
Anatomy of Three Asteraceae Species. Brazilian Archives of Biology and
Technology Aninternational Journal, São Paulo, V. 49, n. 1: p. 135-144, 2006.
14
ROCHA, L. O.; SOARES, M. M. S. R.; CORRÊA, C. L. Análise da contaminação
fúngica em amostras de Cassia acutifolia Delile (sene) e Peumus boldus (Molina)
Lyons (Boldo-do-Chile) comercializadas na cidade de Campinas, Brasil. Revista
Brasileira de Ciências Farmacêuticas. Campinas, v. 40, n. 4, out./dez., 2004.
SCOOT, A. J.; KNOTT, M. A cluster analysis method for grouping measn in the
analysis of variance. Biometrics, Releigh, v. 30, p.507-512, 1974.
15
Prof. Dr. Sandro Barbosa
Orientador
16
2007 2008
Atividades desenvolvidas Ago
Se
Out Nov Dez Jan Fev Mar Abr Maio Jun Jul
t
Revisão de literatura X X X X
Coleta ou obtenção do
X X X X
material botânico
Enraizamento das estacas e
X X X X
sementes
Pré-tratamentos utilizando
bloqueadores do ciclo celular e X X X X X X
antimitóticos
Confecção das preparações
X X X X X X
citogenéticas
Análises das lâminas X X X X X X X X X
Digitalização das melhores
X X X X X X X X X
metafases
Construção dos cariótipos X X
Análise cariotípica das
X X
espécies de boldo
Redação de artigos científicos X X
17
Item Unid Qt. Preço Total Justificativa
. Unit.
Ácido clorídrico L 1ud 11,50 11,50 Utilizado na Hidrólise
Álcool etílico absoluto L 3ud 8,90 26,70 Para fixação de tecidos
Ácido acético glacial L 1ud 16,50 16,50 Fixação e preparo de lâminas
Colchicina g 1 ud 327,00 327,00 Bloqueador do ciclo celular
Lâmina de vidro cx 6ud 3,60 21,60 Preparação citológica e citogenética
Lamínula de vidro (24 x 10u
cx 5,60 50,60 Preparação citológica e citogenética
24 mm) d
Papel filtro (10cm de Utilizado na germinação das sementes e na preparação
cx 1ud 5,10 5,10
diâmetro) citológica e citogenética
Placa de Petri cx 2ud 45,00 90,00 Germinação de sementes
Pipeta 5 mL de vidro
un 5 ud 5,00 25,00 Rotina laboratorial
graduada 1/10
Giemsa (corante) un 2 ud 198,00 396,00 Coloração das preparações citogenéticas
Reativo de Schiff
un 1ud 170,00 170,00 Coloração das preparações citogenéticas
(corante)
TOTAL 1140,00
18
Se
Ago Out Nov Dez Jan Fev Mar Abr Maio Jun Jul
t
Revisão de literatura X X X X
Coleta ou obtenção do
X X X X
material botânico
Enraizamento das estacas e
X X X X
sementes
Pré-tratamentos utilizando
bloqueadores do ciclo celular e X X X X X X
antimitóticos
Confecção das preparações
X X X X X X
citogenéticas
Análises das lâminas X X X X X X X X X
Digitalização das melhores
X X X X X X X X X
metafases
Construção dos cariótipos X X
Análise cariotípica das
X X
espécies de boldo
Redação de relatório parcial X
Redação de relatório de férias X
Redação de relatório final X
Redação de artigos científicos X X
19
Comprometo-me a orientar a aluna Thaís Furtado Nani no desenvolvimento do
projeto: “Variabilidade citogenética de espécies de boldo com
potencialidades medicinais utilizadas no sul de Minas Gerais.” e saliento que
existem as condições para a execução do projeto.
20
Declaro, para os devidos fins, que estou ciente das normas de iniciação
científica constantes no edital PRPGP 001/2007 – ABERTURA DE INSCRIÇÕES
AOS PROGRAMAS INSTITUCIONAIS DE BOLSAS DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA
– PIBIC / CNPQ e PROBIC / UNIFAL-MG.
21
TERMO DE COMPROMISSO DO ALUNO
22
DECLARAÇÃO DO ALUNO QUE NÃO É BENEFICIÁRIO DE
NENHUM OUTRO TIPO DE BOLSA
Declaro, para os devidos fins, que não sou beneficiária de nenhum outro tipo
de bolsa, não possuo vínculo empregatício e não realizo estágio remunerado.
23
DECLARAÇÃO DA ALUNA DE CIÊNCIA
DAS NORMAS DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA
Declaro, para os devidos fins, que estou ciente das normas de iniciação
científica constantes no edital PRPGP 001/2007 – ABERTURA DE INSCRIÇÕES
AOS PROGRAMAS INSTITUCIONAIS DE BOLSAS DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA
– PIBIC / CNPQ e PROBIC / UNIFAL-MG.
24