PREFACIO

La Docencia universitaria ha evolucionado positivamente con los progresos de la

comunicación, que hacen posible una fácil búsqueda de conocimientos, así como el poder
compartir experiencias en tiempo real.

La idea de elaborar el presente documento pedagógico, destinado a los estudiantes de

Medicina Humana, en la etapa Pre-clínica, es que tengan a su alcance un instrumento de trabajo
complementario, con los conceptos básicos esenciales en microbiología para un futuro médico y,
que les facilite el diálogo. De ninguna manera el presente Manual pretende reemplazar la lectura
de las distintas obras escritas en microbiología, así como la información divulgada en “internet”,
que son documentos de consulta obligatoria para las tareas de seminarios, temas de discusión,
protocolos a desarrollar y para la investigación.

El alumno encontrará en el Manual la información distribuida en cinco Secciones. La

primera, se refiere a conceptos generales sobre Bacteriología; la segunda, sobre los principales
gérmenes patógenos agrupados por su patogenia; la tercera, está dedicada a los Virus, agrupados
en capítulos de acuerdo al órgano principalmente comprometido; la cuarta, desarrolla los
conceptos básicos de Micología aplicada en Medicina Humana; y la quinta, es una revisión somera
sobre los diversos agentes infecciosos involucrados en el ser humano, por aparatos y sistemas.

Los progresos en la ciencia médica, las sugerencias de los alumnos, las críticas y las
necesidades pedagógicas, serán suficientes motivos para que el Manual sea revisado con la
frecuencia necesaria, y llegue siempre actualizado al alumno.

Nicanor Domínguez Navarrete

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 ÍNDICE DE CAPÍTULOS

Página
SECCIÓN I Bacteriología general
Capítulo 1 Bacterias: Introducción. Estructura. Clasificación 4
Capítulo 2 Fisiología y genética bacteriana 12
Capítulo 3 Antimicrobianos: Agentes físicos, químicos y antibióticos 19
Capítulo 4 Relación huésped-microorganismo. Poder patógeno 27

SECCIÓN II Bacteriología especial

Capítulo 5 Infecciones localizadas y sistémicas. Género Staphylococcus 31
Capítulo 6 Infecciones localizadas y sistémicas. Género Streptococcus 36
Capítulo 7 Infecciones localizadas y sistémicas. Bacillus anthracis. 45
Neisseria meningitidis
Capítulo 8 Infecciones con colonización. Géneros Corynebacterium, Actinomyces 50
y Nocardia
Capítulo 9 Infecciones con colonización. Géneros Haemophilus, Bordetella 55
y Gardnerella
Capítulo 10 Infecciones entéricas. Géneros Escherichia, Salmonella y Shigella 61
Capítulo 11 Infecciones entéricas ulcerosas. Géneros Campylobacter y Helicobacter 68
Capítulo 12 Infecciones entéricas secretoras. Géneros Vibrio y Aeromona 71
Capítulo 13 Bacterias ambientales. Géneros Pseudomonas, Acinetobacter 74
y Legionella.
Capítulo 14 Bacterias zoonóticas. Géneros Brucella y Yersinia 78
Capítulo 15 Bacterias invasivas con vida intracelular. Géneros Bartonella y Listeria 82
Capítulo 16 Bacterias anaerobias. Géneros Bacteroides y Clostridium 86
Capítulo 17 Bacterias espirilares. Géneros Leptospira y Borrelia 94
Capítulo 18 Bacterias de transmisión sexual: T. pallidum, H. ducreyi, 98
N. gonorrhoeae, K. granulomatis y Linfogranuloma venéreo.
Capítulo 19 Género Mycobacterium: M. tuberculosis, M. leprae 106
Capítulo 20 Bacterias filtrables. Géneros Rickettsia, Chlamydia y Mycoplasma 113

SECCIÓN III Virología

Capítulo 21 Virus: Estructura. Genoma. Replicación. Patogenia. Diagnóstico. 118
Capítulo 22 Virus bacterianos: bacteriófago 125
Capítulo 23 Virus de la Hepatitis: VHA, VHB, VHC, VHD 127
Capítulo 24 Virus respiratorios: Ortomyxovirus, Paramyxovirus, Rubeola, 132
Adenovirus
Capítulo 25 Virus entéricos: Rotavirus, Enterovirus 138
Capítulo 26 Herpesvirus: VHS, VVZ, CMV, VEB 141
Capítulo 27 Virus transmitidos por artrópodos y roedores 145
Capítulo 28 Virus de la rabia 149
Capítulo 29 Retrovirus 151

SECCIÓN IV Micología
Capítulo 30 Hongos: Generalidades. Hongos ambientales 154

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Capítulo 31 Levaduras: Candida albicans, Cryptococcus neoformans 158
Capítulo 32 Hongos productores de micosis cutáneas y superficiales 161
Capítulo 33 Hongos productores de micosis sistémicas y subucutáneas 165

SECCIÓN V Microbiología sistemática

Capítulo 34 Infecciones del tracto respiratorio 170
Capítulo 35 Infecciones cutáneas y tejidos blandos 174
Capítulo 36 Infecciones del aparato digestivo 176
Capítulo 37 Infecciones de las vías urinarias 178
Capítulo 38 Infecciones del sistema nervioso 180
Capítulo 39 Infecciones de transmisión sexual 182
Capítulo 40 Infecciones sistémicas 184

Referencias bibliográficas 186

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 SECCIÓN I
BACTERIOLOGÍA GENERAL

CAPÍTULO 1
BACTERIAS: INTRODUCCIÓN. ESTRUCTURA. CLASIFICACIÓN
_______________________________________________________________
INTRODUCCIÓN

El conocimiento de los microorganismos comienza en 1674 con la construcción del

microscopio, que permitió descubrir un mundo, hasta ese entonces, desconocido. El mundo
microbiano incluye a organismos vivientes muy pequeños, en el rango de 0,2 – 20 µm, agrupados
por sus características estructurales en tres dominios: Eucaria, Archaea y Bacteria.

El dominio Eucaria, está formado por células eucariotas, y comprende a las algas, hongos y
protozoarios. Los dominios Archaea y Bacteria están formados por células procariotas (núcleo
primitivo o nucleoide), caracterizadas por tener una pared externa rígida que las rodea y no
poseer membrana nuclear.

Los microorganismos integrantes del dominio Archaea no son patógenos para las plantas
ni para los animales, algunas de sus proteínas son muy semejantes a las contenidas en las células
eucariotas, y la composición química de la pared y membrana citoplasmática es diferente a la de
las células procariotas. Algunas especies del dominio Archaea tienen comportamientos
ambientales extremos, como vivir en medios hipertónicos (mar muerto o salado), en los polos y en
ambientes con temperaturas superiores a 100°C (geiseres); en éste hábitat se encontró a la
especie Thermos aquaticus, de la cual se obtuvo la enzima ADN polimerasa, útil para el análisis de
la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

Los integrantes del dominio Bacteria son células procariotas, con una pared constituida
por un polisacárido único, denominado peptidoglucano, la membrana celular contiene ácidos
grasos propios, y su genoma corresponde a un filamento de ADN bicatenario.

ARCHAEA
BACTERIA Termófilas
Proteobacteria Metanógenas EUCARIA
Gram positivos Halofílicas ext Animales
Chlamydia Hongos
Espiroquetas Plantas

Tabla: 1-1: El mundo microbiano

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 La vida en la Tierra está representada en su mayoría por microorganismos, y debe tenerse
en consideración el papel benéfico que ellos desempeñan como responsables de la supervivencia
de otros seres vivientes. Es importante señalar algunas funciones exclusivas de las bacterias, que
nos proporciona continuidad en nuestro planeta, como: a) ser encargadas de degradar la celulosa
de las plantas, que los animales y los humanos no pueden digerir; b) que, conjuntamente con las
plantas, reponen el oxígeno ambiental, indispensable para la vida; y c) que sólo las bacterias
pueden convertir el gas nitrógeno en forma química, útil para las plantas y los humanos.

El concepto de consderar a las bacterias como agentes causales de enfermedades se

concreta con Frederich Henle, al propoener la teoría “los gérmenes de las enfermedades”, teoría
ampliamente demostrada con los experimentos de Luis Pasteur y Robert Koch, en la década del
1870 a 1880. En la actualidad las técnicas moleculares permiten ampliar el conocimiento, sobre
todo, de los mecanismos de la acción patógena de los micrioorganismos.

En este manual se hace un apretado resumen de los microorganismos que tienen un rol
como causantes de enfermedades infecciosas en el ser humano, destacando sus características
biológicas, rol patógeno, métodos de diagnóstico y medidas preventivas.

ESTRUCTURA BACTERIANA

Las bacterias presentan tres formas bien definidas: redondas (cocos), alargadas (bacilos) y
helicoidal larga (espiroquetas). A su vez, los cocos se pueden agrupar en pares (diplo), en cadenas
(estrepto) y en racimos (estafilo). Así mismo los bacilos pueden diferenciarse en cortos, largos y
curvados (vibriones). Todas las bacterias están constituidas por estructuras bien definidas como la
pared, la membrana citoplasmática, el genoma disperso en el citoplasma y estructuras externas
opcionales como los pili, flagelos y cápsula. Algunos géneros bacterianos tienen la capacidad de
formar una estructura interna denominada endospora.

A.PARED BACTERIANA

Es la estructura rígida que rodea a la célula bacteriana, le da forma y resiste la presión

interna de las bacterias, que es de 5 a 20 atmósferas. La composición química es exclusiva de las
bacterias, una macromolécula denominada peptidoglucano o mureína.

El peptidoglucano está constituido por dos moléculas de hexosas: N-acetilmurámico

(NAM) y N-acetilglucosamina (NAG), unidas entre ellas en forma alterna, para formar un polímero
lineal. Estos polímeros lineales se unen entre sí por puentes peptídicos, formando una malla. Los
puentes peptídicos unen los polímeros lineales entre las moléculas de NAM y están constituidos

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por cuatro aminoácidos (D-alanina, lisina o ácido diamino pimélico, ácido D-glutámico y glicina).

Figura: 1-1: Esquema de la molécula peptidoglucano

La composición química de la pared bacteriana explica el comportamiento inmunogénico

y los mecanismos de patogenia de las bacterias. Así mismo, divide a las bacterias en dos categorías
cuando son coloreadas con Gram. El colorante cristal violeta y el yodo forman un complejo con los
ribonuicleótidos bacterianos. Cuando se añade el decolorante (alcohol-acetona) no se puede
extraer el complejo en bacterias con pared gruesa, luego se tieñen de violeta: grampositivas. En
cambio, en otros grupos bacterianos el complejo se extrae fácilmente quedando incoloras,
debiendo teñirlas con un colorante de contraste rojo (fucsina o safranina), son las gramnegativas.

1. Bacterias grampositivas: se caracterizan por poseer una capa gruesa de peptidoglucanos

(30 capas), contienen moléculas de ácido teicoico unidas al NAM y de lipoteicoico unidas a
la membrana citoplasmática. Ambas moléculas sobresalen al exterior y se comportan
como antígenos de superficie, de utilidad para diferenciar el grupo bacteriano en
serotipos. Además cumplen una función importante como adherente a la célula receptora
del huésped.
Las micobacterias son una excepción del grupo, porque están rodeadas de un lípido
complejo, el ácido micólico, que les otorga comportamiento tintorial, patogénico e
inmunogénico diferente.

GRAM POSITIVA GRAM NEGATIVA

porina polisacáridos

ácido lípido A lípido A

lipoteicoico ácido teicoico
membrana
externa

peptidoglucano lipoproteína espacio

Membrana citoplasmática Membrana citoplasmática

memmMMnn Membrana
Figura: 1-2: Estructura de la pared bacteriana citoplasmática

6
 2. Bacterias gramnegativas: estas bacterias tiene una pared compleja formada por una
delgada capa de peptidoglucanos, rodeada de una membrana externa, separadas ambas,
por el espacio periplasmático.
La membrana externa es una bicapa lipídica, que tiene por función proteger a las bacterias
de macromoléculas y de condiciones ambientales adversas. La capa externa de esta
membrana está constituida por dos sustancias: a) un lipopolisacárido (LPS), conocido
como “endotoxina”, con actividad antigénica, pirógena y capaz de ocasionar la reacción
Schwartzman (coagulación intravascular diseminada) y, b) un polisacárido que sobresale al
exterior, y que constituye el antígeno O de superficie.
Un grupo de proteínas denominadas porinas, se ubican en la membrana externa, y son las
que permiten la difusión de moléculas hidrófilas (metabolitos y antibióticos).
El espacio periplasmático es un compartimento que contiene enzimas (fosfatasas, lipasas,
nucleasas, etc.), las que se encargan del transporte y degradación de los nutrientes y,
también es un reservorio de factores de virulencia (hialuronidasas, proteasas, beta
lactamasas, etc.).

Las espiroquetas tienen una pared semejante a los gramnegativos, pero con flagelos
situados en el espacio periplasmático.

Los Micoplasmas son bacterias estructuralmente diferentes, pues carecen de pared, vale
decir de peptidoglucano. Por lo tanto, estos microorganismos no tienen forma, no se tiñen con los
colorantes habituales y sobreviven en medios hipertónicos; más aun, su membrana citoplasmática
está constituida por esteroles, como las células eucariotas.

Por otro lado, hay situaciones en que las bacterias pueden perder la capacidad de formar
pared, (Ejemplo: acción de la lisozima de las lágrimas), creándose estructuras denominadas
protoplastos cuando este proceso ocurre en gérmenes grampositivos; y esferoplastos si ocurre en
gérmenes gramnegativos. Otras veces, los bacilos gramnegativos pierden la capacidad de formar
pared por acción de los antibióticos beta lactámicos, pudiendo aun sobrevivir temporalmente,
constituyendo las “formas L de bacteria”.

B. MEMBRANA CITOPLASMÁTICA

Es una estructura delgada que rodea a la bacteria y está compuesta por dos capas de
fosfolípidos unidas por proteínas, pero carentes de esteroles (con excepción de los micoplasmas).
Las funciones de la membrana citoplasmática son: a) permeabilidad selectiva, b) participar en los
mecanismos de transporte de metabolitos, c) participar en los procesos de excreción de las
sustancias sintetizadas por las bacterias, d) formar una gradiente de protones para generar la
energía suficiente que permita dar movilidad a los flagelos, y e) presentar los receptores de
quimiotaxis.

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 El cromosoma bacteriano está fijado a la membrana citoplasmática en un punto
denominado “mesosoma”. Esta zona tiene singular interés, porque es allí donde se inicia y termina
la replicación del ADN, así como la zona donde se produce la división celular.

C. ESTRUCTURAS INTERNAS

1. El genoma: la composición interna de las bacterias es básicamente moléculas de ácido

nucleico. El cromosoma de los procariotes es una molécula única de ADN (haploide), circular de
doble cadena enrollada, que contiene 1000 a 9000 kb y está ubicada en una zona denominada
nucleoide, sin membrana que la rodee. En algunas bacterias, como Vibrio cholerae, se han
encontrado más de un nucleoide (cromosoma). El ADN bascteriano carece de histonas, elemento
que mantiene el enrollado en las células eucartiotas. Una característica particular de las bacterias
es que muchos de los genes implicados en una función determinada se agrupan en fragmentos del
ADN, constituyendo el elemento funcional denominado “operon”. Ejemplo: metabolismo de
lactosa, factores de virulencia, etc.

2. Dispersas en el citoplasma o integradas al cromosoma bacteriano se encuentran otras

moléculas de ADN (extracromosómicas), de tamaño muy pequeño (1.5 a 400 kb), denominadas
plásmidos. Estas moléculas de ADN contienen información genética que le otorgan características
especiales a las bacterias (fenotípicas), como producción de toxinas, enzimas, formación de pili o
factores de resistencia a los antibióticos. No son indispensables para la vida de la bacteria. Son
muy móviles y pueden ser transferidas de una bacteria a otra.

3. Transposones e Integrones: son moléculas de ADN más pequeñas que las anteriores
(150 a 1500 b), que para replicarse deben estar adheridas al cromosoma bacteriano; son muy
móviles y pueden cambiar de un sitio a otro en el mismo cromosoma de la bacteria. Los integrones
captan genes exógenos (resistencia a antibióticos) y los integran al cromosoma.

4. Bacteriófagos: son moléculas de ADN viral (fagos) que parasitan a las bacterias, las que
pueden producir lisis bacteriana, o permanecer inactivas, sea en el citoplasma o adheridas al
cromosoma. Las proteínas que codifican otorgan propiedades diferentes a la bacteria. Ejemplo:
producción de toxinas.

5. Las bacterias poseen numerosos ribosomas, que son estructuras que se fijan al ARNm y
permiten la unión de los aminoácidos para la formación de proteínas. La molécula del ribosoma
bacteriano es 70S, formada por dos sub unidades (30S y 50S); estas estructuras son el objetivo de
la acción de algunos antibióticos.

Además, se encuentran dispersos gránulos de almacenamiento de energía, como

glucógeno, beta hidroxibutírico y de volutina o metacromático.

6. Endospora: algunos géneros bacterianos (Bacillus y Clostridium) son capaces de formar

esta estructura, que les permite permanecer viables por mucho tiempo, soportando cambios
ambientales de temperatura, desecación, radiación y deficiencia nutricional. El proceso de
esporulación implica cambios en la célula bacteriana, como la formación de una capa gruesa que la

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rodea y acúmulo de calcio unido al ácido dipicolínico. Cuando las condiciones ambientales son
favorables a la reproducción de la bacteria, la endospora se vuelve a la forma vegetativa. En el
género Clostridium, la endospora deforma al bacilo (engruesa) y puede estar ubicada en la zona
central, terminal o subterminal, ubicación que contribuye a la identificación de la especie.

D. ESTRUCTURAS EXTERNAS

1. Cápsula: Muchas bacterias se rodean de una capa gelatinosa, formada en la mayoría por
polisacáridos, sólo en el Bacillus anthracis la composición química es un polipéptido. A esta
estructura se le denomina cápsula o glucocálix, la que tiene diversas funciones, como: a) adherirse
a la superficie celular; b) crear micropelículas, como la placa dental; y c) bloquear los mecanismos
de defensa innatos, como la fagocitosis, por lo que su presencia se considera un factor de
virulencia. En los cultivos las bacterias capsuladas forman colonias lisas, brillantes y mucoides
(colonias S).

2. Flagelos: Son estructuras proteicas helicoidales (flagelina) unidas desde la membrana

citoplasmática hacia el exterior, encargadas de la movilidad bacteriana. Según la ubicación del
flagelo le proporciona a la bacteria un tipo de movilidad diferente. Si la ubicación del flagelo es
polar, se denomina monotrico; si dispone de varios flagelos en un extremo, se denomina lofotrico;
en cambio, si posee flagelos en todo su rededor, se denomina peritrico. La movilidad también
puede ser direccionada hacia un sustrato determinado, propiedad que caracteriza al fenómeno de
quimiotaxis.

El constituyente proteico del flagelo tiene propiedad antigénica (antígeno H), luego los
anticuerpos formados por el huésped contra el flagelo, son utilizados en clínica como marcadores
de respuesta inmune.

Las espiroquetas carecen de flagelos, pero poseen filamentos axiales que recorren a la
bacteria de un extremo a otro, ubicados en el espacio periplasmático, y les otorgan movimientos
de rotación, flexión y extensión.

3. Pili o fimbria: Son pequeños apéndices proteicos que rodean a las bacterias, cuya
función principal es la de adherirse a la células huésped, como primer paso para la colonización
bacteriana; reciben también otras denominaciones como adhesinas, lectinas o agresinas. Hay un
tipo de pili especial, denominado pili sexual, cuya formación está codificada por genes del
plásmido F (fertilidad), y participa en la trasferencia de material genético entre bacterias,
mecanismo denominado conjugación.

CLASIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS

El objetivo biológico es la especie bacteriana, y se define como el conjunto de individuos

que tienen características genéticas, morfológicas y fisiológicas semejantes; que pueden
intercambiar naturalmente sus genes, y compartir un mismo nicho ecológico. La denominación de
una especie tiene dos palabras, la del género que lleva la primera letra con mayúscula y la de la

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propia especie que se escribe con minúscula. Ejemplo: Escherichia coli, Mycobacterium
tuberculosis, Salmonella typhi, etc.

El texto de referencia para la clasificación de los Procariotes es el de Bergey, que utiliza la

información relacionada con la similitud genética y con las características fenotípicas. Para ello se
siguen procedimientos que pueden ser divididos en dos categorías:

A) Con cultivo del microorganismo, en medios inertes (líquidos o sólidos) o en tejidos vivos. Con el
germen puro, se identifica el género y la especie empleando procedimientos basados en la
morfología (coloración de Gram); comportamiento metabólico frente a diversos sustratos;
pruebas genéticas (secuenciación del ARNr 16S, reacción en cadena de la polimerasa,
homologación de ADN-ADN); pruebas químicas para identificar las cadenas de los lípidos de la
membrana citoplasmática; o el uso de métodos inmunológicos.

B) Sin cultivo, cuando por razones clínicas o propias de la bacteria, no se puede realizar el
aislamiento in vitro. Luego se utilizan técnicas que permitan detectar la presencia de los antígenos
bacterianos en el paciente, como: coloraciones apropiadas a partir de las secreciones, detección
de fracciones antigénicas (inmunofluorescencia, enzima inmunoensayo, PCR); o la detección de
anticuerpos en líquidos orgánicos (serología).

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 ALGORITMO PARA IDENTIFICACIÓN DE GÉRMENES GRAMNEGATIVOS

Cocos Bacilos cortos Bacilos Bacilos curvados

Neisserias Haemophilus fermentan no fermentan oxidasa ++

(oxid ++) Brucella lactosa lactosa
Bordetella Vibrio
Campylobacter
Helicobacter
maltosa E. coli oxidasa
++ -- Klebsiella -- ++
N. gonorrhoeae Enterobacter
N.meningitidis Serratia Salmonella Pseudomonas
Otras Shigella
Proteus

ALGORITMO PARA IDENTIFICACIÓN DE GÉRMENES GRAMPOSITIVOS

Cocos Bacilos Bacilos

Filamentosos

Corynebacterium
Catalasa Listeria Actinomyces
++ -- Bacillus (anaerobios)
Staphylococcus Clostridium (anaerobios)
Nocardia
Streptococcus (aerobios

hemólisis

alfa beta gamma

S. neumoniae S. pyógenes Enterococcus

(optochin S) (bacitracina S)
S. viridians S. agalactiae Peptoestreptococcus
(optochin R) otros St. (anaerobio)

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 CAPÍTULO 2
FISIOLOGÍA Y GENÉTICA BACTERIANA
_______________________________________________________________
FISIOLOGÍA BACTERIANA

El conocimiento de la fisiología microbiana deviene del estudio de líneas celulares aisladas

que crecen en condiciones óptimas; en cambio, en el medio ambiente natural los microorganismos
compiten para mantener su nicho ecológico y probablemente su estado fisiológico sea distinto.
En la práctica se evalúa el comportamiento fisiológico de una población bacteriana uniforme, con
un mismo origen, denominada “cepa”, que se expresa por el crecimiento y multiplicación de la
bacteria.

A. CRECIMIENTO BACTERIANO

Para que una bacteria realice los procesos de biosíntesis y pueda reproducirse, debe encontrar
en el medio ambiente que la rodea, alimentos energéticos, alimentos constitutivos, y condiciones
físico químicas compatibles con la vida de dicha bacteria, que favorecen su multiplicación.

1. Alimentos energéticos: las bacterias que son comensales para el hombre toman la energía
necesaria para la biosíntesis a partir de los procesos de oxido-reducción de un sustrato
orgánico, por lo que se les denomina microorganismos quimiotrofos. El agente reductor
(donador de electrones), generalmente es un azúcar, un aminoácido o un ácido orgánico. En
cambio, las bacterias primitivas toman la energía necesaria de la luz solar (fotosintéticas).
2. Alimentos constitutivos: son las sustancias fuentes de carbono, de nitrógeno y de minerales
en estado iónico (fosfato, sulfato, calcio, cloro, sodio, hierro, etc.). Si la bacteria obtiene el
carbono a partir de una molécula orgánica se dice que es heterótrofa, en cambio, si lo obtiene
a partir del CO2 ambiental o sustancias químicas inorgánicas (autótrofas).
3. Alimentos específicos: muchas bacterias son capaces de crecer con alimentos simples y se les
dice prototrofas, es decir son capaces de sintetizar todas las enzimas y los metabolitos
esenciales para su crecimiento. Sin embargo, ciertas cepas salvajes o mutantes prototrofas,
son incapaces de sintetizar algún metabolito esencial, por lo tanto, no podrán crecer si en el
medio ambiente que las rodea no está presente dicho metabolito indispensable o factor de
crecimiento, y se les denomina cepas auxotrofas.
4. Factores físico químicos: para la mayoría de bacterias de interés médico, la temperatura
óptima para el desarrollo in vitro es de 37°C, y se les denomina mesófilas (20°C a 45°C). Hay
excepciones como Campylobacter jejuni, Pseudomonas aeruginosa y Pasteurella pestis, que
desarrollan también a 42°C, o el caso de Bartonella bacilliformis que lo hace a 29°C.

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 Los sistemas enzimáticos, de la mayoría de bacterias, funcionan a pH alrededor de 7.0, por ello
para el desarrollo in vitro, los medios de cultivo deben contener tampones que regulen los
cambios bruscos del pH.
La concentración de solutos que ejercen presión osmótica en el medio que rodea a las
bacterias es similar a la del ser humano, con excepción de las bacterias de origen marino, que
soportan concentraciones hasta diez veces superiores de cloruro de sodio, llamadas bacterias
halofílicas.
La mayoría de bacterias requieren para su desarrollo la presencia de oxígeno como aceptador
final de electrones, y se les denomina aerobias. En cambio hay un grupo de bacterias que no
pueden realizar la fosforilación oxidativa, son las anaerobias estrictas, incluso el oxígeno les es
letal porque carecen de las enzimas peroxidasa, catalasa y superóxido dismutasa. En cambio,
hay un grupo de bacterias aerotolerantes, a las que el oxígeno no les es perjudicial y
desarrollan tanto en aerobiosis como en anaerobiosis.

B. CRECIMIENTO BACTERIANO EN MEDIO LÍQUIDO

El uso de medios de cultivo líquidos tiene por finalidad incrementar la población inicial de
una cepa bacteriana. El desarrollo bacteriano se aprecia por turbidez del medio líquido, que es
proporcional a la masa bacteriana y puede ser cuantificado midiendo la luz absorbida en un
espectrofotómetro (que mide la densidad óptica de una solución).

Cuando experimentalmente se inocula una bacteria en un volumen definido de medio

líquido, luego de un tiempo de incubación, se apreciará la presentación de turbidez, que va en
incremento conforme avanza el tiempo y dibuja una curva llamada “curva de desarrollo
bacteriano”. En las dos primeras horas de iniciado el proceso, la población bacteriana se mantiene
constante, llamada fase de latencia. Luego viene una etapa en que la bacteria se multiplica en
forma exponencial, en esta etapa se puede calcular la tasa de crecimiento o tiempo de
multiplicación, ya que la bacteria se multiplica en forma constante en razón del tiempo.
Posteriormente cuando se agotan los nutrientes, el número de bacterias viables es constante,
denominándole fase estacionaria. Por último, el medio de cultivo se acidifica, se incrementan los
desechos metabólicos y el número de bacterias viables disminuye, es la fase de declinación.

Figura: 2-1: Curva de desarrollo bacteriano

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C. CRECIMIENTO BACTERIANO EN MEDIO SÓLIDO

Los medios de cultivo sólidos se obtienen añadiendo agar al medio líquido, lo que ofrece
una serie de ventajas en la identificación de las bacterias. La siembra por dispersión permite la
formación de colonias en la superficie del medio; cada colonia independiente constituye un clon
puro, formado por células todas provenientes de la misma bacteria y que poseen por lo tanto el
mismo patrimonio hereditario y las mismas características fisiológicas.

Los gérmenes formarán colonias con características propias a cada género o especie, en
relación al tamaño, opacidad, bordes, elevación, superficie, pigmento, etc., elementos que son
útiles para la identificación. Al agregar sustancias químicas, colorantes o antibióticos en el medio
de cultivo sólido, se obtienen los medios selectivos para determinado grupo bacteriano,
procedimiento de utilidad en el diagnóstico clínico, porque facilita la identificación del patógeno.

D. METABOLISMO

En los procesos de síntesis, las células bacterianas deben formar subunidades, que luego
se constituyen en macromoléculas básicas (ácidos nucleicos, polisacáridos y lípidos), las que en
presencia de elementos constitutivos y energía se ensamblan en estructuras definidas de la célula
bacteriana como ribosomas, membrana, pared, etc.

La glucosa 6 fosfato es la subunidad base precursora de los carbohidratos: triosas,

pentosas, hexosas y polisacáridos. Así mismo, las triosas con la participación de la coenzima
nicotinamida del ácido dinucleótido formarán la triosa fosfato, necesaria para la construcción de
ciertos aminoácidos. La mayoría de los aminoácidos tienen como origen al fosfoenol piruvato. El
nitrógeno necesario lo obtienen a partir del amonio (NH4). Las subunidades ácido graso y glicerol,
necesarias para la síntesis de lípidos, utilizan como precursores a la acetil coenzima A y la
dihidroxil acetona fosfato respectivamente.

En los procesos metabólicos de descomposición y/o catabolismo, las sustancias químicas

generan energía. En la degradación de los carbohidratos se utilizan tres vías: a) Glucólisis:
mediante la cual se genera piruvato y moléculas de ATP y NADH. b) Ciclo de pentosas: que genera
precursores metabólicos como gliceraldehido fosfato, ribosa fosfato y eritrosa fosfato. y c) Ciclo
tricarboxilo: que produce ATP por fosforilación oxidativa. Otros compuestos orgánicos se
destruyen por la acción enzimática específica, como las disacaridasas, amilasas, lipasas, y las
proteasas que rompen los enlaces peptídicos, reutilizando luego el grupo amino.

En el anabolismo bacteriano se habla de respiración aeróbica, cuando al final del proceso

de óxido reducción, los electrones excedentes son recibidos por el oxígeno molecular. En cambio,
se habla de respiración anaeróbica, cuando el receptor final de electrones es un compuesto
químico inorgánico (nitrato o sulfato). Para algunas bacterias el oxígeno no les es útil, incluso
puede ser tóxico, y utilizan como receptor final de electrones a un compuesto orgánico: el
piruvato; a este proceso se le denomina fermentación, de gran utilidad, ya que los productos

14
químicos que se generan son ácidos orgánicos (láctico, butírico, propiónico), o alcoholes (etílico,
butanodiol, etc.).

GENÉTICA BACTERIANA

El tamaño pequeño de las bacterias y la rapidez de su reproducción (cada 10 a 30

minutos), son condiciones que las bacterias disponen para formar, en espacios reducidos y en
poco tiempo, grandes poblaciones. Situación muy favorable para observar in vitro la aparición de
cambios en las nuevas generaciones bacterianas, los que pueden ser fenotípicos o genotípicos.

Replicación: Las bacterias tienen una replicación semiconservadora y bidireccional. El proceso

sucede en tres etapas: iniciación, elongación y terminación. La enzima ADN polimerasa facilita el
añadido de los ribonucleótidos, con participación de las enzimas topoisomerasa y helicasa. Las
bacterias no poseen intrones, a diferencia de las células eucariotas.

Las bacterias, en el medio ambiente, realizan cambios continuos, con la finalidad de

adaptarse con rapidez y competir con otras bacterias en el nicho ecológico; a estas modificaciones
se les denomina variaciones fenotípicas, que son el resultado de la activación o restricción de
determinados genes, haciendo cambios reversibles, inestables y no hereditarios. Otros cambios
obedecen a mutaciones o variaciones genotípicas, que producen modificaciones bruscas de un
carácter, el cual es transmisible hereditariamente, creando un individuo diferente, que se
distingue del tipo normal o salvaje. Los descendientes constituyen una nueva cepa.

A. LAS MUTACIONES

La mutación es un cambio en la secuencia de las bases nitrogenadas del ADN de la

bacteria. Si el cambio producido corresponde a uno o varios nucleótidos y no conduce a ninguna
modificación observable, se trata de una mutación silenciosa. Pero cuando el cambio es más
profundo y compromete a un aminoácido, da como resultado la formación de una proteína no
funcional, que conduce a una bacteria dependiente de dicho aminoácido, denominándole
“bacteria auxotrofa”. En la literatura se le consigna con un signo negativo. Ejemplo: dependiente
del aminoácido triptófano: Trp-. Existen dos formas de mutación:

1. Mutación espontánea: ocurre en el ambiente natural, al azar y con una frecuencia

característica para cada grupo bacteriano, que puede ser en el rango de 10-7 a 10-12., a lo
que se denomina tasa de mutación. En raras ocasiones el nucleótido retorna a su estado
original, este cambio se llama reversión. La mutación más común es el resultado de un
error en la síntesis del ADN al incorporar una base incorrecta, llamado sustitución de
bases. Si sólo se cambia un par de bases, se denomina mutación puntual. Puede haber
también delección o adición de nucleótidos que modifica el marco de lectura, de manera
que la proteína sintetizada será incompleta o no funcional.
2. Mutaciones inducidas: cuando las bacterias son sometidas a la acción de sustancias
químicas mutágenas o radiaciones, éstas pueden incrementar la tasa de mutación. En
genética experimental se utiliza la bacteria Escherichia coli para ampliar los conocimientos

15
 metabólicos y propiedades de los microorganismos, estudios que dieron nacimiento a la
biotecnología. Las sustancias químicas con propiedades mutágenas son los agentes
alquilantes, que alteran las purinas y pirimidinas, o los agentes intercalantes como el
bromuro de etidio. Las radiaciones ultravioletas y los rayos X producen alteraciones y
rupturas de los enlaces peptídicos.

En la práctica médica, durante el proceso de terapia antibiótica, se eliminan las bacterias

susceptibles al antibiótico empleado; pero indirectamente se seleccionan (no mueren) las
bacterias que mutaron espontáneamente, con cambios en el aminoácido o proteína objetivo del
antibiótico. Se crea así una cepa bacteria mutante resistente al antibiótico empleada.

B. TRANSFERENCIA DE GENES: El intercambio de material genético entre las bacterias es muy

común, lo que permite la aparición de cepas con comportamientos diferentes. Este intercambio
puede ser beneficioso para la bacteria que recepciona los genes, sobre todo cuando le otorga
cambios en el mecanismo de resistencia a los antibióticos, con la apariciópn de nuevas cepas multi
resistentes. La fracción de ADN transferido puede integrarse al cromosoma de la bacteria
receptora, creándose una bacteria con resistencia cromosómica; o también puede mantenerse
libre en el citoplasma, incluso pudiendo perderlo y retornar a su comportamiento original.

La información que los plásmidos llevan en su ADN, le otorgan diferencias a la bacteria,

como metabolizar sustratos, producir toxinas, resistir la aación de los antibióticos, etc., y pueden
ser transferidos a otras bacterias. En cambio, los transposones transfieren genes de una posición a
otra dentro del genoma bacteriano o entre distintas moléculas de ADN; incluso, algunos
transposones pueden insertarse dentro de los genes e inactivar sus funciones.

Los bacteriófagos o fagos, son virus que infectan a las células bacterianas. En su forma
infecciosa se replican dentro de ellas hasta producir lisis celular y los nuevos bacteriófagos
infectarán nuevas bacterias. Otras veces, los fagos denominados temperados, infectan a las células
bacterianas pero sin producir lisis celular, se integran al cromosoma bacteriano creando un estado
de profago. A las cepas bacterinas portadores de profagos, se dice que están en estado lisogénico.
Ejemplo: Vibrio cholerae, Corynebacterium diphtheriae y S. pyógenes. Cada cierto tiempo los fagos
temperados se liberan del cromosoma bacteriano, se replican y lisan las células, esta situación
puede ser inducida por las radiaciones ultravioletas.

Tres son los mecanismos que utilizan las bacterias para transferirse el material genético:
transformación, transducción y conjugación.

1. Transformación: descrito por Griffith en 1928, mediante el cual una bacteria incorpora a
su cromosoma fragmentos de ADN desnudo, provenientes de bacterias cuya pared se ha
destruido. Muchas bacterias grampositivas (Streptococcus pneumoniae) y gramnegativas
(Haemóphilus influenzae y Neisserias) son capaces de captar y conservar el fragmento
de ADN en forma estable integrado, adquiriendo nuevas propiedades. Ejemplo:
formación de cápsula del neumococo, así como la resistencia a la penicilina.

16
 Virulencia

Bacteria con cápsula (donante)

No virulencia

Bacteria sin cápsula

--------------------------------------------------------------------------------------

+ CALOR

Bacteria con cápsula bacteria muerta

ADN fragmentado

Fragmentos + Bacteria
de ADN sin cápsula Virulencia

Figura: 2-2: Transferencia genética por transformación

2. Transducción: en éste mecanismo participa un bacteriófago (infeccioso), el cual, cuando

infecta a la bacteria huésped e inicia el proceso de replicación, capta fragmentos del
ADN de la célula huésped y los almacena en su interior. El nuevo fago liberado al medio
ambiente al infectar nuevas células bacterianas suministra su ADN, más fragmentos del
ADN de la bacteria huésped anterior. Se denomina transducción especializada cuando el
fago transfiere algunos genes específicos; en cambio, generalizada cuando transfiere
fragmentos del genoma bacteriano huésped.

bacteriófago bacteria
La bacteria se lisa
Se liberan los fagos

Fase Fase lítica El fago se multiplica

Lisogénica e integra fragmentos
de ADN bacteriano

El ADN viral se integra

al cromosoma bacteriano

Figura: 2-3: Transferencia genética por transducción

17
 3. Conjugación: es el mecanismo de transferencia genética, reportado por Lederberg en el
año 1946, en el que se requiere contacto entre bacterias de la misma especie o
relacionadas. Para ello la bacteria que dona el ADN (bacteria macho) debe poseer el
plásmido F (fertilidad), que codifica pili sexual, filamento tubular que sirve para
acoplarse a la célula receptora (bacteria hembra). El plásmido F, es un ADN circular
monocatenario, ubicado en el citoplasma bacteriano, que tiene los genes necesarios
para transferirse por sí solo a otra célula, y convertirla en una nueva bacteria macho (F+).
Cuando el plásmido F se encuentra integrado en el cromosoma de la bacteria donante,
se le denomina Hfr (alta frecuencia de fertilidad), y permite transferir porciones del
cromosoma de la bacteria donante. Este concepto básico permitió conocer la carta
genética o ubicación de los genes en el cromosoma de las bacterias.
La conjugación es un ejemplo de la transferencia de genes (de virulencia o resistencia a
los antibióticos) en forma horizontal a otras bacterias, formando nuevas poblaciones
bacterianas en un nicho ecológico determinado.

FFFFF

Bacteria donante Bacteria receptora Bacteria donante Bacteria receptora

plásmido F plásmido integrado

Figura: 2-4: Transferencia genética por conjugación

18
 CAPÍTULO 3
ANTIMICROBIANOS: AGENTES FÍSICOS, QUÍMICOS Y ANTIBIÓTICOS
_______________________________________________________________
ANTIBACTERIANOS

Los procedimientos físicos como la temperatura, radiaciones o filtración, son utilizados en

medicina para eliminar las bacterias existentes en un material determinado, y así obtener la
esterilidad del material a utilizar en curaciones, en procedimientos quirúrgicos o en insumos del
laboratorio. Así mismo, comercialmente se dispone de numerosas sustancias químicas con
actividad antimicrobiana, las que son de utilidad para eliminar a las bacterias presentes en
instrumentos, superficie contaminada de la piel o mesas de trabajo e impedir las infecciones
iatrogénicas.

A.CONCEPTOS BÁSICOS

1. Infección: proceso mórbido producido por un microorganismo

1. Estéril: ausencia total de microorganismos en un medio definido.
2. Esterilización: procedimiento por el cual se consigue la destrucción total de los
microorganismos de un medio determinado
3. Desinfección: la destrucción de los microorganismos ubicados en medios inertes, capaces
de producir infección, empleando procedimientos físicos o químicos.
4. Antiséptico: soluciones de uso tópico que disminuyen el número de bacterias e impiden la
infección (prevención de infección).

B.AGENTES FÍSICOS

Los agentes físicos más empleados en medicina para destruir a los microorganismos son el
calor, la filtración y las radiaciones.

Calor: las temperaturas elevadas destruyen a los microorganismos por desnaturalización

de las proteínas, desecación y, toxicidad debido a la elevada concentración de los electrolitos. El
calor seco aplicado en los hornos, a la temperatura de 180°C durante una hora, se utiliza para
esterilizar material metálico y de vidrio. El calor húmedo, (baño maría) destruye rápidamente las
enzimas de las bacterias mesófilas a 60°C durante una hora, y toda forma vegetativa a 80°C
durante 10 minutos. Con la finalidad que se preserven las proteínas de los alimentos lácteos se
utiliza la pasteurización, en la que se eleva la temperatura a 62°C durante 30 minutos, seguido de
enfriamiento rápido; con lo que se obtiene la destrucción de formas vegetativas bacterianas, como
M. tuberculosis y Brucella sp. (para otros alimentos se utiliza temperatura de 72°C durante 15
segundos u 82°C durante 20 segundos). El procedimiento que garantiza la destrucción de toda
forma microbiana, incluso de las esporas, es el calor húmedo a presión o autoclave; que se
consigue luego de 15 minutos de exposición a una presión de 15 libras por pulgada cuadrada con
la que se obtiene 121 °C.

19
 Filtración: para la esterilización de líquidos o sustancias orgánicas lábiles al calor, es
recomendable tamizar el producto a través de filtros. Los filtros son muy antiguos en su uso,
existiendo de diversa composición, así: de tierra (Chamberland), de porcelana (Berkefeld), de
asbesto (Seitz) y los sintéticos (Millipore). Actualmente se dispone de membranas porosas con
diversos diámetros de poros; se emplean los de 0,45 µm a 0,22 µm. Debe tenerse en
consideración que los virus, por su pequeñísimo tamaño (milésima de micra), atraviesan los filtros.

Las radiaciones de longitud de onda en el rango del ultravioleta (inferior a 300 nm), al ser
absorbida por las células generan excitación de los electrones e inhiben la síntesis del ADN. La luz
solar tiene un contenido de radiaciones ultravioleta (260 nm) con acción bactericida. Las lámparas
de mercurio al estar incandescentes liberan radiaciones UV, y son utilizadas con la finalidad de
esterilizar ambientes, como salas de operaciones, cubículos de siembra en el laboratorio y
superficies diversas. Así mismo, hay que tener en cuenta que durante su uso, hay riesgo potencial
de lesión a nivel de la retina. Las radiaciones gamma también son utilizadas en la industria
alimentaria por tener mayor capacidad de penetración.

C.AGENTES QUÍMICOS

Son numerosos los agentes químicos con acción antibacteriana, los de utilidad para uso
humano no deben tener toxicidad. El efecto depende de variables como: la concentración del
compuesto, el tiempo de exposición, la temperatura, el pH, y la presencia de materia orgánica,
que modifican la actividad del compuesto químico.

Las sustancias químicas antibacterianas pueden clasificarse de acuerdo al nivel de acción

en la célula bacteriana, así: A) Las que actúan a nivel de la membrana citoplasmática como el
amonio cuaternario (jabones de cloruro de benzalconio), cationes tensioactivos, compuestos
fenólicos (hexaclorofeno) y alcoholes (etílico a 70°, isopropílico); B) Las que desnaturalizan las
proteínas, como los ácidos, álcalis, alcoholes y solventes orgánicos y, C) Las que alteran los grupos
funcionales de las proteínas, como metales pesados, halógenos (Cloro, Yodo), colorantes (azul de
metileno), agua oxigenada, formaldehido (glutaraldehido) y óxido de etileno (gas para
instrumentos).

Otro enfoque en la clasificación de los desinfectantes es por el grado de acción. Así, se

consideran de alto grado, los que se utilizan para desinfectar instrumentos invasivos que se
detrioran con el calor (endoscopios): glutaraldehido, formol, peróxido de hidrógeno y compuestos
de Cloro. Los de grado medio, que se emplean para instrumentos de uso semicrítico
(endoscopios): alcoholes y yodados. Por último, los de grado bajo, útiles para desinfectar
superficies diversas (estetoscopio, otoscopio): amonio cuaternario.

D.ANTIBIÓTICOS

La era del tratamiento de los procesos infecciosos con el uso de sustancias químicas se
inicia en el año 1935 con el Prontosil, sustancia que al ingresar a nuestro organismo es
metabolizada y se convierte en sulfanilamida, de acción antimicrobiana. Posteriormente,

20
Alexander Fleming demuestra que sustancias sintetizadas por algunos microorganismos tienen la
capacidad de impedir el crecimiento de otros microorganismos. El primer antibiótico desarrollado
fue la Penicilina, iniciándose su uso en humanos en 1941. Luego se desarrollaron, con rapidez,
numerosas sustancias con acción antimicrobiana, y es a partir del los años ´60, que los científicos
alteran la estructura química de los fármacos, obteniendo sustancias semisintéticas, con nuevas
propiedades farmacológicas benéficas para el paciente.

Los antibióticos se pueden clasificar en dos categorías, los bacteriostáticos, que impiden la
multiplicación de las bacterias, y los bactericidas que las destruyen. La conveniencia de utilizar
uno u otro ante un proceso infeccioso, lo determinará el conocimiento clínico. En esta sección se
describirán los mecanismos de acción de los antibióticos, agrupándolos en cinco categorías, de
acuerdo a la zona de acción dentro de la bacteria:

1. Inhibición de la síntesis de la pared celular

2. Alteración de la función de la membrana citoplasmática
3. Inhibición de la síntesis de proteínas
4. Inhibición de la síntesis del ácido nucleico
5. Bloqueo de las vías metabólicas

1. Inhibición de la síntesis de la pared celular

El componente principal de la pared bacteriana es el peptidoglucano, estructura formada

por polímeros de moléculas de N acetilglucosamina y N acetilmurámico, unidas por puentes
peptídicos, que le dan rigidez a la cubierta. Unas proteasas catalizan la formación de las cadenas y
de los puentes peptídicos, denominadas “proteínas de unión a la penicilina” (PBP).

Este grupo de antibióticos, cuya estructura química básica es el anillo β-lactámico, incluye
a las Penicilinas, Cefalosporinas, Carbapenémicos, Monobactams y Cefaminas; todos comparten
un mecanismo similar de acción, cual es unirse a las proteasas (PBP) mientras la bacteria se
encuentra en proceso de reproducción, e inhibir la formación de los puentes entre las cadenas de
los polímeros. Esta alteración de la biosíntesis de la pared conduce a la lisis celular, por lo tanto los
β-lactámicos son bactericidas y sólo son efectivos cuando las bacterias están en crecimiento.

Penicilinas:

a. Penicilinas naturales. Son producidas a partir del hongo Penicillium chrysogenum.

Penicilina G, de uso parenteral y Penicilina V de uso oral. Ambas son inactivadas por la
enzima beta lactamasa (penicilinasa), que destruye el anillo β-lactámico y transforma a
estas bacterias en resistentes a las penicilinas.
b. Penicilinas resistentes a la penicilinasa. Son modificaciones químicas de los radicales
del anillo β-lactámico, que las convierte en resistentes a la enzima penicilinasa. Incluye
a la Meticilina, Oxacilina, Nafcilina.
c. Penicilinas de amplio espectro. Las cadenas laterales de la penicilina han sido
modificadas, lo que les confiere actividad contra bacterias grampositivas y

21
 gramnegativas. Son también inactivadas por beta lactamasas. Incluye a la Ampicilina y
Amoxicilina.
d. Penicilinas de espectro extendido. Estas tienen especial actividad contra bacilos
gramnegativos, como las Pseudomonas. Pueden ser destruidas por alguna beta
lactamasa. Incluye a la Ticarcilina y la Piperacilina.
e. Penicilinas + Inhibidor de penicilinasa. Sustancias químicas como el sulbactam, ácido
clavulánico y tazobactam, que tienen la propiedad de unirse en forma irreversible con
la enzima beta lactamasa, obteniendo la inactivación de la enzima. Al asociar el
inhuibidor con una ampicilina o ticarcilina, el antibiótico mantiene la actividad
bactericida frente a bacterias productoras de beta lactamasa.

Cefalosporinas: Las primeras cefalosporinas fueron aisladas a partir del hongo Cephalosporium
acremonium, resisten a muchas beta lactamasas. La estructura química ha sido modificada en el
laboratorio y se han obtenido mejores propiedades farmacológicas, dando origen a varias
generaciones:

a. Primera generación o de espectro reducido: Cefalotina, Cefalexina, Cefradina. De uso

contra algunos cocos grampositivos, así como para Escherichia coli.
b. Segunda generación o de espectro ampliado: Cefaclor, Cefoxitina, Cefuroxima. Se
emplea contra Haemóphylus influenzae y Enterobacterias.
c. Tercera generación o de amplio espectro: Cefotaxima, Ceftazidima, Ceftriaxona,
Cefixima. De uso por vía parenteral y con la capacidad de ingresar a líquido céfalo
raquídeo.
d. Cuarta generación o de máximo espectro: Cefepime. Con actividad para gram
negativos, en especial Pseudomonas aeruginosa.

Carbapenems: presentan resistencia a la mayoría de las beta lactamasa, por lo que son útiles en
infecciones por diversas bacterias. Se dispone del Imipenem y del Meropenem.

Monobactams: son resistentes a la beta lactamasa y tienen sinergismo con los aminoglucósidos.
No son útiles para los anaerobios ni para los gérmenes grampositivos. El aztreonam se emplea en
infecciones por enterobacterias muy resistentes.

Glucopéptidos: antimicrobianos que actúan inhibiendo la síntesis de los peptidoglucanos, pero a

nivel del extremo de la D-alanina, provocando una interferencia estérica de la molécula N-
acetilmurámico e impidiendo así la formación de la pared celular, están representados por la
Vancomicina. Este antimicrobiano provienen del hongo Streptomyses orientalis, se utiliza para el
tratamiento de infecciones por estafilococo productor de beta lactamasa. La molécula no atraviesa
la membrana externa de los gramnegativos, por lo tanto no debe emplearse en ellos.

Polipéptidos: provenientes del Bacillus licheniformis, constituyen la Bacitracina, que interfieren

con el transporte de los precursores del peptidoglucano, así mismo, pueden inhibir la transcripción
del ácido ribonucleico. Sólo tienen utilidad tópica.

22
Ciclocerina: es un análogo de la D-alanina, por lo que interfiere la formación del polipéptido de la
pared bacteriana. Útil en el tratamiento de las micobacterias.

Isoniazida y Ethambutol: bloquean la formación de ácido micólico de la pared de las micobacterias.

La resistencia bacteriana a los β-lactámicos se produce por tres mecanismos: A) Alteración de la

zona diana, por síntesis de PBP con poca afinidad por los β-lactámicos. B) Alteración del acceso al
objetivo, por cambio de la permeabilidad de las porinas de los gramnegativos, y C) Producción de
la enzima beta lactamasa, que cataliza la hidrólisis del anillo β-lactámico (codificado por plásmidos
o cromosoma).

2. Alteración de la función de la membrana citoplasmática

Las sustancias químicas que actúan a este nivel alteran la permeabilidad de la membrana
citoplasmática, permitiendo la salida de los componentes endocelulares, lamentablemente estas
sustancias también se unen a las células eucariotas, por lo que se limitan a uso tópico.

El Bacillus polymyxa genera los polipéptidos denominados polimixina B y polimixina E o

colistina, de gran utilidad como uso tópico en infecciones óticas y oculares. La colistina se puede
utilizar en infecciones sistémicas a gramnegativos multiresistentes.

Los polienos, pertenecen al grupo de los macrólidos, y se utilizan fundamentalmente en el

tratamiento de infecciones micóticas, ya que se unen al ergosterol, componente de la membrana
citoplasmática de los hongos, destruyendo su capacidad osmótica. A este grupo pertenecen la
Anfotericina B, de uso parenteral, y la Nistatina, de uso tópico y oral

3. Inhibición de la síntesis de proteínas

La actividad de estos productos se fundamenta en la acción directa sobre la estructura de

los ribosomas, subunidad 30S (aminoglucósidos y tetraciclinas) y 50S (macrólidos, cloranfenicol,
lincosamidas, oxazolidonas y estreptograminas).

a. Aminoglucósidos: los primeros (Streptomicina, Kanamicina, Neomicina y Tobramicina)

tienen como origen a especies del hongo Streptomyces, y la Gentamicina, del hongo
Micromonospora. La industria ha sintetizado a la Amikacina, Netilmicina y Sisomicina.
Los aminoglucósidos son transportados en forma activa a la célula bacteriana hasta llegar
al citoplasma, este proceso requiere metabolismo aeróbico; luego se une en forma
irreversible a la sub unidad 30S del ribosoma, hecho que ocasiona una lectura errónea del
ARN mensajero, produciendo proteínas anómalas, por lo que son bactericidas. Su uso está
dirigido a infecciones producidas por bacilos gramnegativos. Son inactivos para los
gérmenes anaerobios.
Las bacterias adquieren resistencia por tres mecanismos: A) por mutación del receptor en
el ribosoma, B) por destrucción enzimática del fármaco, transferido por un plásmido, y C)
por ausencia de permeabilidad o falta de transporte activo, debido a una mutación
cromosómica o codificación por plásmido.

23
b. Tetraciclinas: las primeras tetraciclinas se obtuvieron a partir de especies ambientales de
Streptomyces, las últimas, de acción retardada, son modificaciones semisintéticas. El
antibiótico se une de manera reversible a la sub unidad 30S del ribosoma, bloqueando la
unión al ARN de transferencia. Las tetraciclinas se acumulan dentro de la célula bacteriana
y son bacteriostáticos. Se utiliza en diversas infecciones, pero en especial en infecciones
por gérmenes de vida intracelular como Rickettsia y Chlamydia. Las de uso actual son la
tetraciclina, doxiciclina y minociclina.
La resistencia de las bacterias a las Tetraciclinas está bajo el control de plásmidos
transferibles, que hace que no se concentre el antibiótico, expulsándolo por eflujo.
c. Macrólidos: el producto representativo es la Eritromicina y tiene como origen el
Streptomyces erythreus, las modificaciones de la molécula han creado a la Azitromicina y
la Claritromicina, que tienen un tiempo de vida más prolongado. Los macrólidos se unen
de manera reversible a la sub unidad 50S e impiden la elongación de los polipéptidos. Son
bacteriostáticos y se emplean en infecciones de vías respiratorias.
La resistencia bacteriana a los macrólidos se produce cuando hay un cambio, por
metilación, del receptor en el ARN, proceso codificado por un plásmido transferible.
d. Cloranfenicol: se obtiene del microorganismo Streptomyces venezuelae, tiene una
actividad similar a las tetraciclinas, se une de manera reversible a la peptidil transferasa de
la sub unidad 50S impidiendo la elongación peptídica. Es bacteriostático para la mayoría
de las bacterias; aunque a las dosis usuales en infecciones meníngeas por neumococo o
meningococo se comporta como bactericida.
Las bacterias que hacen resistencia al cloranfenicol son productoras de la enzima acetil
transferasa, que destruye al antibiótico, y es codificada por un plásmido.
e. Lincosamidas: aisladas del Streptomyces lincolnensis, inhibe la elongación de las proteínas
al unirse al ribosoma 50S, inhibiendo a la enzima peptidil transferasa. La modificación
química da origen a la Clindamicina, con mejores capacidades farmacológicas. Es activa
para cocos grampositivos y bacilos gramnegativos anaerobios. Carece de actividad para
bacilos gramnegativos aerobios.
f. Oxazolidonas: antibióticos preparados por síntesis orgánica, que interfieren el inicio de la
síntesis proteica en el ribosoma 50S. Su mecanismo de acción exclusivo no permite la
existencia de resistencia cruzada con otros inhibidores de la síntesis proteica. La Linezolide
representa a este grupo y su uso se reserva para infecciones por cepas de enterococo
multiresistentes.
g. Estreptograminas: son péptidos cíclicos producidos por el género Streptomyces. Las dos
moléculas, quinupristina y dalfopristina, actúan en forma sinérgica uniéndose en forma
irreversible en diferentes sitios de la sub unidad 50S; la primera molécula inhibe la
elongación peptídica, mientras que la segunda interfiere directamente a la peptidil
transferasa. Este antibiótico combinado es bactericida, denominado Synercid, su uso está
restringido para bacterias grampositivas resistentes a beta lactámicos y vancomicina.
h. Nitrofurantoina: es un compuesto sintético, que al producir reducción enzimática se
generan derivados con capacidad de ligarse a las proteínas del ribosoma y bloquean la

24
 traducción. A dosis normales alcanza concentraciones elevadas en el tejido renal y en la
orina, por lo que se utiliza casi exclusivamente en infecciones del tracto urinario.

4. Inhibición de la síntesis del ácido nucleico

Las enzimas que participan en la síntesis del ácido nucleico son bloqueadas por este grupo de
antimicrobianos, luego son bactericidas, entre los que se señala a las quinolonas,
fluoroquinolonas, rifampicinas y metronidazol.

a. Quinolonas: de origen sintético, actúan inhibiendo las enzimas topoisomerasas (girasa),

encargadas de mantener el superenrollado circular del ADN dentro de la célula bacteriana.
El ácido nalidíxico fue la primera quinolona; las nuevas son modificaciones químicas que
han dado origen a las fluoroquinolonas (ciprofloxacino, levofloxacino, ofloxacino), con
actividad contra bacterias grampositivas, gramnegativas y micobacterias.
La resistencia a las quinolonas se produce por mutación cromosómica de la bacteria,
pudiendo ocasionar: a) alteración de la enzima ADNgirasa, o b) cambio en la
permeabilidad de la membrana externa.
b. Rifampicina: son derivados semisintéticos de sustancias producidas por el Streptomyces
mediterranei, que bloquean la polimerasa del ARN de los procariotes al inicio de la
transcripción. Tienen actividad bactericida para gérmenes grampositivos como
gramnegativos, así como contra las micobacterias. Se emplea para el tratamiento de la
tuberculosis y lepra, y para la prevención en personas expuestas a Neisseria meningitidis.
c. Metronidazol: sustancia química que al ingresar a la bacteria reduce su grupo amino, lo
que genera metabolitos tóxicos que alteran la integridad del ADN bacteriano. El
metronidazol es de utilidad para el tratamiento de infecciones por gérmenes anaerobios.

5. Bloqueo de las vías metabólicas

a. Sulfonamida: El sustrato que las bacterias usan para construir el ácido fólico, es el ácido
para aminobenzoico (PABA), estructuralmente similar a la sulfonamida. Luego, éste se une
a la dihidropteroato sintetasa y se produce un compuesto análogo no funcional de ácido
fólico, que la bacteria no puede utilizar y el crecimiento bacteriano se detiene. El
comportamiento de la sulfonamida es de tipo bacteriostático. Las células de los animales
no sintetizan ácido fólico luego no son afectadas por este mecanismo.
b. El trimetoprim: es un metabolito que inhibe la enzima dihidro folato reductasa,
dificultando la síntesis de purinas. La combinación con el sulfametoxazol forma un
compuesto con actividad sinérgica, que actúa en dos etapas de la síntesis de ácido fólico.
La asociación es empleada con éxito contra diversas infecciones, principalmente las de vías
urinarias.
c. El ácido para amino salicílico (PAS): actúa por inhibición competitiva de la pteridin
sintetaza para la formación de ácido nucleico, se emplea en el tratamiento de la
tubreculosis.

25
 Síntesis de pared
Beta lactámicos Síntesis de ácido nucleico
Vancomicina Replicación (ADN girasa)
Bacitracina Quinolonas
Isoniazida Metronidazol

Membrana Transcripción (ADN polimerasa)

Citoplasmática Rifampicina
Polimixina Novobiocina
Polienos

Síntesis de proteínas
Ribosoma 30S
Aminoglucósidos
Tetraciclinas
Vías metabólicas Ribosoma 50S
Sulfonamida Cloranfenicol
Trimetoprim Macrólidos
Ac PAS Lincosamidas
Dapsone Oxazolidona

Figura: 3-1: Nivel de acción de los antibióticos en una célula bacteriana

26
 CAPÍTULO 4
RELACIÓN HUÉSPED-MICROORGANISMO. PODER PATÓGENO

_______________________________________________________________
RELACIÓN HUÉSPED-MICROORGANISMO

Los microorganismos que viven en nuestro cuerpo, sea en la piel, mucosas o tubo
digestivo, constituyen la flora microbiana normal y son saprofitos. Ellos viven de los productos
terminales de los compuestos orgánicos y aseguran el ciclo biológico del carbono y del nitrógeno.
Estos gérmenes han adquirido propiedades que les permite permanecer por largo tiempo en
determinadas áreas o nichos, protegiendo al huésped de la colonización por gérmenes patógenos;
tal es caso de la Escherichia coli en el colon o el Lactobacillus acidóphilus en el canal vaginal,
constituyendo la flora residente.

Hay situaciones anómalas del huésped que lo hacen vulnerable, de tal manera, que las
bacterias que constituyen la flora normal del cuerpo y las del medio ambiente aprovechan esta
condición para desarrollar enfermedad, por lo que se les denomina patógenas oportunistas. Es el
caso de la infección de quemaduras o escaras de decúbito producidas por Pseudomonas
aeruginosa.

La enfermedad infecciosa es el resultado del daño producido en un tejido u órgano,

ocasionado por una cepa bacteriana portadora de atributos de patogenicidad. Muchos factores
determinantes del rol patógeno de una cepa bacteriana están contenidos en los genes del
cromosoma, de un plásmido o de un bacteriófago; los que generan sustancias químicas causantes
de alteraciones en células del huésped, u ocasionan cambios en el comportamiento de las
bacterias frente a los sistemas de defensa del huésped. El inóculo o cantidad de bacterias que
ingresan al organismo para producir enfermedad es variable, por ejemplo, bastan 200 bacterias
de Shigella para ocasionar colitis; en cambio, para infecciones con Vibrio cholerae o
Campylobacter se necesitan cantidades superiores a 108 microorganismos.

A.BARRERA ANATÓMICA

La integridad anatómica y funcional de la piel y mucosas es de suma importancia para

impedir el ingreso de los microorganismos patógenos. Las aberturas naturales (boca, nariz, vía
respiratoria, ojos, oídos, vía urogenital y ano) están protegidas de mucosa con epitelio ciliado, o
epitelio con secreción de mucus y de sustancias antibacterianas para dificultar el ingreso de los
patógenos. Diversas situaciones, como lesiones de piel que destruyen la capa córnea, o un tejido
tumoral que altera la función de la mucosa digestiva, permitirán el ingreso de bacterias al torrente
sanguíneo.

La flora bacteriana normal constituye un ecosistema de protección del huésped humano,

interfiriendo, por competición, la colonización de bacterias extrañas, y estimulando al sistema
inmune adquirido. Se puede apreciar, por ejemplo, que durante la administración oral de

27
antibióticos, la flora intestinal normal disminuya y permita la proliferación de cepas productoras
de toxinas, como es el caso del Clostridium difficile.

B. PODER PATÓGENO Y VIRULENCIA

Se define como microorganismo patógeno a aquel que tiene la capacidad de instalarse en

el huésped y producir cambios mórbidos o enfermedad. En cambio se entiende por virulencia a la
medida cuantitativa de la patogenicidad, o a la probabilidad de producir enfermedad. Los factores
de virulencia se refieren a las propiedades (genéticas) que permiten que un microorganismo se
establezca en un huésped. Ejemplo: el neumococo que forma cápsula es más virulento que el que
no la forma.

El microorganismo patógeno debe acceder al huésped en cantidad suficiente para

colonizar, y debe utilizar los mecanismos que contrarresten las defensas del huésped, como
secreción de proteasas, enzimas, toxinas o formación de cápsula, para invadir los tejidos. Pero
existen otros microorganismos que son permanentemente patógenos o estrictos, su sola
presencia representa ya un diagnóstico de enfermedad. Ejemplo: Treponema pallidum o Neisseria
gonorrhoeae.

Postulados de Robert Koch

En el año 1884, R. Koch, con la finalidad de establecer cuál es el microorganismo ó agente

etiológico de una enfermedad infecciosa, formuló los siguientes postulados:

1. El microorganismo debe estar presente en el huésped enfermo

2. El microorganismo debe crecer en cultivos puros a partir del huésped enfermo
3. La enfermedad debe reproducirse en animales susceptibles
4. El microorganismo debe recuperarse del huésped experimental

El cumplimiento de los cuatro postulados muchas veces no es posible, ya que hay situaciones
en las que algunos microorganismo aún no han sido cultivados in vitro, como el Mycobacterium
leprae o el Treponema pallidum. Así mismo, hay enfermedades que sólo las padece el ser humano,
como la gonorrea, luego no se dispone de animal para la experimentación. Por último, con los
conceptos actuales y técnicas en biología molecular (reacción en cadena de la polimerasa), no se
necesita ver ni cultivar el microorganismo, es suficiente con demostrar la presencia del ADN
microbiano.

C. MECANISMOS DEL PODER PATÓGENO

Las bacterias ejercen su poder patógeno utilizando diversos mecanismos: 1) Adhesión y

colonización de los tejidos. 2) Capacidad de invadir el tejido, órgano o huésped en general. 3) La
elaboración de sustancias químicas dañinas, llamadas toxinas. y 4) Alteración del sistema inmune
del huésped.

28
1. Adherencia y colonización: las bacterias patógenas para unirse a las células del huésped utilizan
adhesinas, que son proteínas filamentosas ubicadas en la superficie de las bacterias o de los pili.
Por otro lado, las células animales poseen receptores (glucoproteínas o glucolípidos) específicos
con los que interaccionan, por ejemplo: Neisseria gonorrhoeae se adhiere a las células mucosas de
la uretra con la molécula CD46; cepas de Escherichia coli que poseen la adhesina 1 se unen a la
manosa de las células que recubren el colon; en cambio, las cepas de Escherichia coli que causan
infecciones de las vías urinarias, producen el pili llamado PI; S. pyógenes, produce la proteína F
(fibronectina) que le sirve para adherirse a las mucosas faríngea. Seguidamente, las bacterias
deben multiplicarse para colonizar la zona, y para ello deben protegerse de las defensas del
huésped, lo que incluye recambio de pili, secreción de proteasas e inducción de cambios en la
célula huésped receptora.

2. Capacidad de invasión: siendo la piel la barrera más difícil de atravesar por los
microorganismos, algunos patógenos deben esperar un traumatismo que ocasione herida para
poder ingresar; así, Staphylococcus aureus es la causa más común de infecciones en heridas de
piel. En cambio, las mucosas representan las vías más comunes para que las bacterias ingresen a
los tejidos, para lo cual, las bacterias inducen a las células a un proceso de endocitosis.

Algunos patógenos evitan ser fagocitados por los macrófagos y neutrófilos, para lo cual emplean
diversos mecanismos como: a) formación de cápsula, de proteína M, que interfieren la activación
del complemento C3b evitando la acción opsónica, b) presencia de receptores Fc, que frustran la
opsonización mediada por anticuerpos, y c) producción de citocinas que destruyen la membrana
de las células fagocíticas.

Muy diferente es el mecanismo en otras bacterias que permiten ser fagocitadas, para luego
multiplicarse dentro de los macrófagos. En el caso de Salmonella typhi, que una vez fagocitada
evita la fusión del fagosoma con el lisosoma; o como Shigella sp., que produce lisis del fagosoma; o
mejor aun como Listeria monocytogena, que perfora la membrana del fagosoma para escapar al
citoplasma. Todas estas bacterias se benefician al estar dentro de los fagocitos para producir
enfermedad, pues evitan el contacto con los linfocitos presentadores de antígeno, disminuyendo
la respuesta inmune del huésped.

3. Elaboración de toxinas: la palabra toxina viene de “toxikon” (veneno de arco), son sustancias
químicas elaboradas por la bacteria que dañan directamente los tejidos o activan mecanismos
destructivos. En muchos casos la toxina es la única responsable de los síntomas de la enfermedad.
Clásicamente se dividen en dos categorías: exotoxinas y endotoxinas.

I) Exotoxinas: son proteínas producidas generalmente por gérmenes grampositivos, que ocasionan
daños específicos. El origen puede obedecer a genes cromosómicos (V. cholerae, Pseudomonas,
Shigella dysenteriae), a plásmidos (B. anthracis, C. tetani o E. coli) o a fagos (C. botulinum, C.
diphtheriae). En la mayoría de casos son secretadas por la bacteria en actividad, aunque en
algunos se difunden luego de la lisis bacteriana (Cl. botulinum). El huésped puede ingerir la toxina
preformada en los alimentos, ocasionándole intoxicación alimentaria, como es el caso del

29
botulismo, o la enterocolitis por Staphylococcus aureus. Las exotoxinas pueden actuar a nivel local
o ser transportadas y tener efectos sistémicos (C. tetani o C. diphtheriae).

Las exotoxinas, por su composición proteica son potentes antígenos, y los anticuerpos formados
por el huésped actúan inactivando su acción; de allí, el beneficio de las vacunas elaboradas a partir
de la toxina desnaturalizada por acción del formol, que crea el toxoide (sin efecto tóxico).
Ejemplo: vacuna contra la difteria o el tétanos.

El mecanismo de acción de las exotoxinas puede clasificarlas en tres categorías:

A) Toxinas A-B: formadas por dos moléculas, la fracción A, que por lo general es una enzima y es la
parte activa o tóxica; y la fracción B, que se une al receptor específico de la célula blanco. Ejemplo:
ADP ribosiladora del C. diphtheriae, que inhibe la síntesis proteica; la adenilciclasa del V. cholerae,
que incrementa la secreción de agua de los enterocitos; o las específicas del C. tetani, que afecta la
neurotransmisión produciendo espasmo muscular.

B) Toxinas que dañan membranas, las que son verdaderas citotoxinas, como la toxina delta del S.
aureus que destruye eritrocitos o la fosfolipasa del C. perfringes que remueve los fosolípidos de la
membrana citoplasmática. Y

C) Superantígenos: que activan en forma inespecífica a los linfocitos T cooperadores (TCD4), para
que se unan al complejo de histocompatibilidad clase II, liberando grandes cantidades de citocinas,
las que ocasionan la producción de intermediarios como: a) factor de necrosis tumoral (activador
de neutrófilos y endotelio), b) Interleucina 6 (activador de eosinófilos), c) Interleucina 2 (activador
de linfocitos T) y d) interferón gamma (activador de monocitos). Debido a los numerosos
intermediarios que se forman ante la presencia de un superantígeno, en la clínica se observa
diversos síntomas y signos, que se resume con la denominación: “insuficiencia multiorgánica”.
Ejemplo: la toxina 1 del Staphylococcus aureus, y la toxina eritrogénica del Streptococcus
pyógenes.

II) Endotoxinas: son moléculas de lipopolisacáridos (LPS), componentes de la membrana externa

de la pared de las bacterias gramnegativas (en algunas bacterias participan los peptidoglucanos y
el ácido teicoico). Las endotoxinas se excretan por lisis celular y están compuestas por dos
fracciones: la lipídica A, con propiedades tóxicas e iniciadora inespecífica de la inflamación, y el
polisacárido específico O, antígeno específico que permite la identificación bacteriana.

El lípido A, tiene tres niveles de acción: a) Activa los macrófagos y linfocitos B, generando
interleucina 1, (causa de fiebre, factor de necrosis tumoral, hemorragia) y de óxido nítrico que
genera hipotensión. b) Activa la vía alterna del complemento: el C3a, condiciona edema e
hipotensión y, el C5a activa la quimiotaxis.c) Activa el factor de Hageman, que participa en la
generación del síndrome de coagulación intra vascular diseminada.

4. Alteración del sistema inmune del huésped: produciendo una respuesta inmune excesiva, con
lesiones tisulares in situ y vaso dilatación capìlar. Ejemplo: S. pyógenes

30
 SECCIÓN II
BACTERIOLOGÍA ESPECIAL

CAPÍTULO 5
INFECCIONES LOCALIZADAS Y SISTÉMICAS
GÉNERO STAPHYLOCOCCUS
_______________________________________________________________
STAPHYLOCOCCUS

Los estafilococos son microorganismos ampliamente distribuidos en la naturaleza (agua,

aire y suelo), que viven como comensales en la piel y mucosas de los humanos y los animales.
Fueron descritos por Pasteur en el año 1880. Este grupo bacteriano se caracteriza por su forma de
cocos agrupados en racimos, por ser productores de la enzima catalasa, que desdobla el peróxido
de hidrógeno en agua y oxígeno. Algunas especies forman parte de la flora endógena del ser
humano, como S. aureus, que coloniza las fosas nasales; S. capitis, las glándulas sebáceas y S.
hominis y S.haemolíticus, las glándulas apocrinas de la axila. Estas bacterias pueden sobrevivir en
condiciones ambientales variables de temperatura, de humedad y de presión osmótica. La especie
S. aureus es la de mayor poder patógeno, por la capacidad de excretar diversas enzimas y toxinas,
pudiendo ocasionar lesión local, con formación de pus, con la posibilidad de diseminación
sistémica (sépsis).

Staphylococcus aureus

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son cocos de 0,8 a 1,0 µm, que se presentan en pares o en
pequeñas agrupaciones (racimos), Gram positivos. Son inmóviles y poseen una delgada cápsula de
polisacáridos, útil para clasificarlos en serotipos. La mayoría posee una biopelícula que les permite
adherirse a los tejidos y a los curpos extraños. La capa de peptidoglucanos de la pared, que es
muy rígida, contiene enzimas denominadas proteínas ligadoras de penicilina (PBP), que participan
en la construcción de esta capa, y son el blanco de los antibióticos beta lactámicos. Algunas cepas
han adquirido un gen (mecA) que se localiza en el cromosoma, y codifica PBP con poca afinidad
por los beta lactámicos, a estas cepas se les denomina S. aureus resistente a meticilina (SARM). El
peptidoglucano también posee actividad como endotoxina, pirógeno y de formación de pus. La
superficie del S. aureus está recubierta con proteínas diversas, entre las que destaca la Proteína A,
que tiene afinidad por la fracción Fc de la inmunoglobulina G, impidiendo la fagocitosis y la
inmuinidada mediada por anticuerpos. Esta proteína se utiliza como marcador diagnóstico de
antígenos bacterianos (coaglutinación).

31
 2. Fisiología: la especie S. aureus es una bacteria aerobia y anaerobia facultativa, que
desarrolla fácilmente en los medios de cultivo en rangos amplios de temperatura, pH y presión
osmótica, soportando concentraciones hipertónicas de cloruro de sodio de hasta 75 g/L. Es
productor de las enzimas catalasa y hemolisina. En medios sólidos las colonias toman una
coloración cremoso-amarillenta a dorado, aspecto que dio origen al nombre ”aureus”. El
metabolismo del carbohidrato manitol es un marcador útil para la identificación de cepas
patógenas.

3. Clasificación: en base al comportamiento bioquímico se describen más de 40 especies

en el género Staphylococcus. Otras especies coagulasa negativas de interés son: S. capitis, S.
haemolyticus, S. hominis, y S. lugdunensis

Biotipo Coagulasa Manitol Novobiocina

S. aureus ++ ++ Sensible
S. epidermidis --- variable Sensible
S. saprophyticus --- variable Resistente

Tabla: 5-1: Biotipos de estafilococo frecuentes en humanos

4. Enzimas y toxinas: la especie S. aureus puede generar una serie de sustancias que son
nocivas para el ser humano. Con fines didácticos se clasifican en:

I. Enzimas:

a. Coagulasa: proteína termoestable que estimula la conversión de fibrinógeno en fibrina con

la formación de coágulos; su presencia es considerada como un factor de patogenicidad.
Se describen dos tipos, una ligada a la pared bacteriana y otra libre que se detecta
fácilmente “in vitro” y se utiliza como marcador de patogenicidad.
b. Fibrinolisina: contribuye a la disolución de los coágulos de fibrina en los abscesos y facilita
la diseminación séptica.
c. Hialuronidasa: que hidroliza el ácido hialurónico de la matriz del tejido conectivo.
d. Nucleasas: que disuelven el ADN e intervienen en la formación de lesiones tisulares.
e. Beta lactamasas: enzimas codificadas por plásmidos y secretadas por la mayoría de cepas;
tienen por función hidrolizar el anillo beta lactámico de los antibióticos.

II. Toxinas: son polipéptidos de origen cromosómico o extra cromosómico.

a. Citotoxinas: alfa, que lesiona la membrana citoplasmática de las células eucariotas

(hematíes, leucocitos, hepatocitos y dermis). Beta, que hidroliza los fosfolípidos de la
membrana de los eritrocitos. Delta, que altera la función osmótica de la membrana celular
y está relacionada con diarrea aguda. Gamma o leucocidina de Panton-Valentin, son un
grupo de toxinas que lisan neutrófilos y macrófagos, y están presentes en todas las cepas
SARM.

32
 b. Toxina exfoliativa: es una proteasa que destruye la adhesión intercelular de las células de
la epidermis, produciendo lesiones ampollares, sin presencia de gérmenes, ni respuesta
inflamatoria local, constituyendo el síndrome de la “piel escaldada”.
c. Enterotoxinas: se describen hasta cinco (A – E), son estables al calor y resistentes a la
proteólisis gástrica, están relacionadas con las intoxicaciones alimentarias. Las toxinas C y
D se encuentran en productos lácteos contaminados, y la toxina B produce colitis
seudomembranosa.
d. Toxina 1: es una toxina que activa ciertos linfocitos T y liberan citocinas con efectos
sistémicos (fiebre, rash, hipotensión y falla multiorgánica). Se denomina síndrome del
shock tóxico (TSST-1) y actúa como superantígeno; la presentación clínica está asociada al
uso de tampones durante la menstruación.
NOTA: Las toxinas: exfoliativa, enterotoxina y TSST 1, son consideradas como
superantígenos.

Proteína A Fibronectina
(impide fagocitosis) (adhiere a mucosas)

Exotoxinas Superantígeno
citotoxinas Enzimas toxinas que activan
exfoliativa Coagulasa a los linfocitos T, los
entéricas Catalasa que producen:
toxina 1 Hialuronidasa Interleucina 2
fibrinolisina Interferón γ
beta lactamasa factor de necrosis tumoral

Figura: 5-1: Acción patógena del Staphylococcus aureus

B. PODER PATÓGENO

El ser humano es portador sano de diversas especies de estafilococo, se estima que el 20%
al 50% de la población es portadora de la especie patógena S. aureus en la nasofaringe. Para
invadir los tejidos va a requerir la participación de otros factores, como: adhesión, colonización,
producción de toxinas y enzimas, presencia de cuerpos extraños o traumatismos. Una vez que la
bacteria ha ingresado a través de la capa mucosa o epitelial, los productos bacterianos estimulan
la movilización de polinucleares y macrófagos hacia la lesión (quimotaxis), y se produce la
fagocitosis. Se describen los siguientes cuadros clínicos:

1. Infecciones piógenas oportunistas por invasión directa: forúnculos, acné, impétigo,

heridas, abscesos, osteomielitis, artritis séptica y supuración de órganos.
2. Intoxicaciones alimentarias por acción de enterotoxinas ingeridas con los alimentos,
productoras de vómitos y diarrea de corta duración.

33
 3. Exfoliación dérmica producida por acción de la toxina exfoliativa, codificada por
plásmidos o bacteriófago, ocasionando el síndrome “piel escaldada”.
4. Shock tóxico asociado al uso de tampones vaginales: la toxina activa los linfocitos
TCD4, que liberan gran cantidad de interleucinas, causantes de fiebre, prurito,
descamación dérmica, hipotensión y falla multiorgánica.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: la coloración de Gram es muy útil, cuando la muestra es material

purulento proveniente de un absceso o lesiones dérmicas, y se observan cocos grampositivos
agrupados en racimos. Tener reserva de opinión cuando los frotices provienen de mucosas o piel,
pues no se puede distinguir de los microorganismos que habitan normalmente en dichas zonas.

2. Cultivo: el medio de cultivo más empleado para el aislamiento es el hipertónico en

cloruro de sodio, que lo hace selectivo para todo el Género, al que se le añade manitol como
marcador para diferenciar los biotipos. En medios líquidos produce turbidez homogénea y en los
medios sólidos forma colonias de tamaño mediano, que luego presentan una coloración dorada.
En medios con sangre se aprecia hemólisis completa alrededor de las colonias.

3. Identificación: las reacciones bioquímicas como el metabolismo del manitol, o la

producción de la enzima coagulasa y la sensibilidad a la novobiocina, son suficientes para la
identificación. Con fines epidemiológicos, se puede emplear la susceptibilidad a los fagos y el
análisis del ADN.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

En el personal hospitalario el lavado de manos es una medida de suma importancia para

evitar el contagio; el control periódico de los portadores nasales y la limpieza adecuada de la piel
antes de procedimientos invasivos, juegan un rol importante en la prevención. No hay vacuna.

Los estafilococos poseen proteasas en su pared (PBP) con quienes se unen los antibióticos
con anillo beta lactámico; pero es común que cepas de Staphylococcus aureus generen la enzima
beta lactamasa, que inactiva en forma específica a algunos beta lactámicos. Ejemplo: penicilinasa.

En el año 1960 ingresan al mercado médico las penicilinas semisintéticas (meticilina,

mafcilina, oxacilina y cloxacilina), que son resistentes a la acción de la enzima beta lactamasa, por
lo tanto de indicación para el tratamiento de infecciones por Staphylococcus aureus.

En las últimas décadas se encuentran cepas de S. aureus portadoras del gen mecA, que
origina bacterias con proteasas (PBP) que tienen poca afinidad para los antibióticos beta
lactámicos, lo que las hace resistentes a todo éste grupo de antibióticos; debiendo utilizar, en
estos casos, la Vancomicina.

34
Staphylococcus coagulasa negativa

Este grupo de estafilococos ha tomado singular importancia en la etiología de las

infecciones en las que hay de por medio un cuerpo extraño, como catéteres, prótesis o
dispositivos introducidos a través de la piel. Este grupo de bacterias posee numerosos plásmidos,
que les codifican nuevas propiedades, como: adhesión a superficies plásticas, formación de
biopelículas o resistencia a los antibióticos; hechos que han llevado a ser considerados como
patógenos hospitalarios.

Todas estas bacterias son residentes saprofitas de la piel humana. Las especie más
frecuentes en la piel lampiña y mucosas son S. epidermidis, S. hominis, S. saccharolyticus, S.
haemolyticus, S. xylosus, S. simulans y S. lugdunensis. En cuero cabelludo, S. capitis. En conducto
auditivo, S. auricularis y en conducto génitourinario, S. saprophyticus.

Se describen los siguientes cuadros clínicos:

a. Bacteriemia adquirida en el hospital. Realizar hemocultivos seriados, obtenidos de zonas

diferentes, para la confirmación diagnóstica.
b. Endocarditis por prótesis valvular.
c. Infección por catéter intravenoso. Realizar cultivo semi cuantitativo del catéter, como
criterio diagnóstico.
d. Infecciones del tracto urinario, asociadas al S. saprophyticus.
e. Osteomielitis, como consecuencia de una prótesis articular.

35
 CAPÍTULO 6
INFECCIONES LOCALIZADAS Y SISTÉMICAS
GÉNERO STREPTOCOCCUS

STREPTOCOCCUS

Los estreptococos conforman una familia de gérmenes ampliamente distribuidos en el

hombre y en los animales, constituyendo parte de la flora microbiana saprofita. Ciertas especies,
con características metabólicas propias, son responsables de enfermedades infecciosas graves en
el hombre. El conocimiento de estos gérmenes en patología humana se inicia en el año 1874 con
Billroth, que observa en pacientes con erisipela, la presencia de cocos formando cadenas; luego
Pasteur, en 1879, cultiva al estreptococo a partir de la sangre de pacientes con sepsis puerperal.
Posteriormente Fowler señaló la asociación de la angina a estreptococo con un proceso
inflamatorio articular y cardiaco no supurativo, denominado Fiebre Reumática.

A. ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son cocos grampositivos que se orientan en cadenas, poseedores

de cápsula de ácido hialurónico. La pared bacteriana posee un carbohidrato “C” específico,
a partir del cual Lancefield clasifica a los estreptococos en grupos. Así mismo, poseen la
proteina M, que se ancla desde la membrana citoplasmática hasta el exterior, la cual está
asociada a la virulencia, y permite clasificar a los grupos en serotipos (más de 100
distintos). El análisis secuencial del gen emm, que codifica proteína M, es la base de la
clasificación epidemiológica actual de los estreptococos. Otras estructuras de la pared,
como la proteína F y el ácido lipoteicoico, están relacionadas con la adhesión a la fibro
nectina de las células de piel y mucosas.

cápsula
proteína M (ácido hialurónico)

péptidoglucano

membrana citoplasmática

ácido lipoteicoico
proteína F carbohidrato C

Figura: 6-1: Estructura del streptococcus

36
2. Fisiología: los estreptococos son anaerobios facultativos, que requieren de medios de
cultivo enriquecidos con sangre para el crecimiento “in vitro”. Fermentan carbohidratos
produciendo ácido láctico y carecen de la enzima respiratoria catalasa.
3. Clasificación: No existe un sistema único de clasificación de los estreptococos y depende
de una combinación de cualidades, como los patrones de hemólisis en placas con agar
sangre, composición antigénica de la pared y reacciones bioquímicas.
Al observar las colonias de los estreptococos en cultivos de agar sangre se puede apreciar
que ciertas cepas se rodean de una zona clara transparente, producida por la lisis total de
los glóbulos rojos (hemólisis beta); en cambio las colonias de otras cepas producen una
hemólisis parcial, con pigmento verdoso que rodea las colonias (hemólisis alfa o viridans),
ocasionado por la degradación de la hemoglobina; y un grupo de cepas no producen
hemólisis de los hematíes.
Lancefield clasifica a los estreptococos productores de beta hemólisis, según la capacidad
antigénica del carbohidrato “C” de la pared bacteriana, en grupos desde A hasta W, de los
cuales los grupos A, B, C, D y G son los más comunes en humanos.
Los estreptococos alfa hemolíticos, entre los que se encuentra el Streptococcus
pneumoniae, para su identificación, precisa ser sometidos a pruebas bioquímicas
adicionales y evidenciar el desarrollo bacteriano en presencia de determinados sustratos.

Figura: 6-2: Colonias beta hemolíticas y alfa hemolíticas de estreptococo

37
Streptococcus beta hemolítico

Nombre Serogrupo Hospedero

S. pyógenes A humanos
S. agalactiae B humanos / bovinos
S. disgalactiae C, G humanos / animales
S. equi C animales / humanos
S. canis G animales / humanos
S. porcinus E,P,U,V animales / humanos

Tabla: 6-1. Estreptococos beta hemolíticos

B. PODER PATÓGENO

La capacidad patógena de los estreptococos beta hemolíticos es variable, depende de la

puerta de entrada, y de las características de la cepa bacteriana involucrada. La virulencia de la
cepa está asociada a moléculas de estructura y a la capacidad de excretar productos tóxicos.

1.Estructuras celulares:

a. Prteína M: codificada por el gen emm, que estimula la formación de anticuerpos específicos de
“serotipo” que promueven la fagocitosis. Se une a la fibronectina para adherirse a las mucosas.

b. Proteína F: inactiva el complemento C3b e impide su reconocimiento por los polinicleares; asi
mismo, se une a la fibronectina para favorecer la adhesión e invasión a los tejidos .

c. Peptidasa C5a: destruye el complemento C5a e inhibe la quimiotáxis.

d. Acido hialurónico de la cápsula: que otorga a la bacteria resistencia la fagocitosis.

e. Presencia de gnes que forman parte del operón: Regulador (scrl). Activador (mga). Excitador
(mrp). Ello explica los diferentes comportamientos de serotipos, en relación a la resistencia a la
fagocitosis, severidad de la enfermnedad y capacidad de adherencia de la bacteria.

2.Productos excretados:

a. Hemolisinas: Capaces de destruir los glóbulos rojos. Estreptolisina O, con capacidad de lisar
hematíes, leucocitos y plaquetas. Es lábil al oxígeno y estimula la formación de anticuerpos:
antiestreptolisina O (ASO), cuya presencia en la sangre del paciente es diagnóstico de infección
reciente por S. pyógenes. Estreptolisina S, que también puede lisar a los hematíes, leucocitos y
plaquetas, pero no tiene función antigénica, y es responsable de la hemólisis total (tipo beta) que
se observa en los cultivos de agar sangre, ya que es resistente al oxígeno.

38
b. Estreptocinasa: Activador del plasminógeno, que libera mayor cantidad de plasmina, la que a su
vez degrada la fibrina disolviendo los coágulos. Todo ello permite la diseminación bacteriana. Este
producto es útil en la práctica médica para el tratamiento de trombosis coronaria.

c. Desoxiribonucleasas (DNasa): Reducen la viscosidad del pus y permiten la diseminación del

germen. Los anticuerpos producidos contra la DNasa son un buen marcador de infección dérmica
por S. pyógenes.

d. Proteasas diveras: que inactivan el complemento, disminuyendo su capacidad opsónica o

facilitan la inflamación y el daño tisular.

e. Toxina eritrogénica: Algunas cepas de Streptococcus del grupo A son portadoras de un fago en
estado temperado (cepa lisogénica), que codifica la excreción de cuatro toxinas termolábiles
(superantígenos), las que activan a los linfocitos T cooperadores para liberar citocinas, factor de
necrosis tumoral e Interferón, responsables de las manifestaciones graves de la infección por S.
pyógenes, como escarlatina, fascitis necrosante y shock tóxico.

Desde el punto de vista clínico se pueden distinguir dos niveles de infecciones.

1. Enfermedades por acción directa del estreptococo

a. En la rinofaringe: angina, amigdalitis, faringitis, sinusitis, otitis; que
generalmente se asocian con adenopatía regional. Los agentes más frecuentes
son beta hemolíticos del grupo A, C y G.
b. Infecciones cutáneo-mucosas: impétigo, infección de heridas, erisipela,
celulitis, que tienen como principal agente a los del grupo A.
c. Escarlatina: producida por un estreptococo secretor de toxina eritrogénica.
d. Fascitis necrosante: infección profunda del celular subcutáneo que
compromete músculo y tejido adiposo, complicándose con insuficiencia
multiorgánica.
e. Septicemia: ocasionada a partir de un foco de infección estreptocócica en
tejido celular subcutáneo que llega al sistema linfático, provocando
tromboflebitis; o secundaria a una endometritis en la fiebre puerperal. El
agente más frecuente pertenece al grupo B.
f. Endocarditis bacteriana: puede ser aguda, secundaria a una septicemia por
estreptococo que ocasiona lesiones valvulares; y subaguda, por invasión de un
estreptococo proveniente de vías respiratorias o intestino, en pacientes con
lesiones cardiacas anteriores. Los agentes responsables suelen ser del grupo C,
D, o G, incluso los no tipificables.
g. Infecciones urinarias: producidas por Streptococcus grupo D

2. Enfermedades post estreptocócicas (no supurativas)

Son enfermedades inflamatorias que se presentan, dos a seis semanas después, como
secuela de una infección aguda a S. pyógenes no tratada. Esta complicación se

39
 produce por defecto en el sistema inmune, cuya respuesta a la proteína M conduce a
desarrollar auto inmunidad.
a. Fiebre reumática aguda: las faringitis producidas por Streptococcus beta
hemolítico del grupo A, con proteína M de los serotipos 1, 3, 5, 6 y 18, están
relacionadas con alteraciones inflamatorias del corazón, articulaciones, vasos
sanguíneos y con la presentación de nódulos subcutáneos.
b. Glomerulonefritis aguda: el S. pyógnes serotipo 12 aislado en faringitis y el
serotipo 49 aislado en piodermitis, están muy relacionados con la
presentación de inflamación aguda de los glomérulos renales, ocasionando
edema, hipertensión, hematuria y proteinuria.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: la coloración de Gram es muy útil, cuando la muestra proviene de

secreciones purulentas o líquido céfalo raquídeo (LCR), ya que permite observar cocos
grampositivos en cadenas; en cambio, en muestras de bucofaringe, la microscopía no tiene valor
diagnóstico, pues los estreptococos forman parte de la flora normal.

2. Cultivo: las muestras de exudado faríngeo son adecuadas; en lesiones cutáneas es

conveniente levantar la costra y obtener la secreción purulenta; si la lesión es ampollar, romperla,
y tomar la muestra del contenido. Tener en cuenta que en lesiones abiertas puede haber sobre
infección con estafilococos. El medio de cultivo recomendado es el agar tripticase soya, con 5 % de
sangre de conejo o de carnero. El desarrollo de las colonias se aprecia dentro de 24 a 48 horas de
incubación a 37°C.

3. Identificación: Observar colonias pequeñas constituidas por cocos grampositivos en

cadenas, que no reaccionan con el peróxido de hidrógeno (catalasa negativa), y que puede tener
un halo de hemólisis alrededor, tipo beta o alfa. Seguidamente se deben hacer resiembras para
demostrar el comportamiento frente a la bacitracina, optoquina, producción de la enzima
pilrrolinodil arilamidasa (PYR), solubilidad con la bilis y producción de acetil metil carbinol (Voges
Proskauer). Las colonias beta hemolíticas deben sembrarse cruzando con siembras de
Staphylococcus aureus, para apreciar el fenómeno CAMP (Christie, Atkins, Munch, Petersen)
característico del grupo B. También se pueden realizar reacciones de aglutinación o precipitación a
partir de las colonias con antisueros específicos de grupo.

Especie Grupo Prueba de identificación y sensibilidad

S. pyógenes A Sensible a bacitracina. PYR positivo
S. agalactiae B CAMP positivo. Hidrólisis de hipurato positivo
S. disgalactiae C,G PYR negativo. Voges Proskauer negativo

Tabla: 6-2. Identificación bioquímica de S. beta hemolítico

El principal factor de virulencia del S. agalactiae es la cápsula, cuyos anticuerpos son

protectores de infección. Coloniza aparato digestivo y génito-urinario. La prevalencia de infección
séptica se produce en gestantes portadoras y neonatos.

40
 4. Diagnóstico indirecto: Es muy importante en las infecciones post estreptocócicas, así
como en las faringitis a S. pyógenes. Se debe evidenciar la presencia de anticuerpos
contra la estreptolisina O (ASO), de aparición tardía pero persistente. En pacientes que
tuvieron impétigo, se buscan los anticuerpos anti ADNasa como marcador de
glomerulonefritis.

5. Técnicas moleculares: Se dispone de amplificación del ácido nucelíco para detectar S.

pyógenes en faringe.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Las infecciones por estreptococo se diseminan con facilidad por gotitas respiratorias al
toser, gritar, estornudar o en alimentos contaminados a partir de portadores; las condiciones de
hacinamiento facilitan el contagio. No hay vacuna disponible a la actualidad.

El antibiótico de elección es la penicilina, aunque se observa tolerancia en algunos grupos,

sobre todo en los no tipificables; por este motivo se utiliza la combinación de penicilina y un
aminoglucósido para las infecciones graves. En faringitis, con la finalidad de prevenir la fiebre
reumática, se recomienda dosis elevadas y prolongadas, hasta por diez días, con penicilina
benzatínica. El tratamiento alternativo es la eritromicina o las cefalosporinas orales.

Streptococcus pneumoniae

Es un microorganismo habitante del aparato respiratorio superior del hombre. Es el

principal agente de la neumonía en adultos. La infección por S. pneumoniae es considerada como
el modelo de patógeno bacteriano extracelular; con él se sentaron las bases de la inmunidad
humoral (Avery, 1940), y se demostró, por primera vez, la transferencia de material genético en la
resistencia bacteriana adquirida (Griffith, 1928).

A. ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: Son cocos grampositivos de forma lanceolada y dispuestos en

pares o cadenas cortas. Las cepas virulentas se encuentran recubiertas de una cápsula compuesta
por polisacáridos, base de la clasificación serológicas de los neumococos, identificando más de 90
serotipos diferentes.

La pared del neumococo posee un polisacárido, denominado C, que es capaz de reaccionar

con una globulina del suero que se encuentra en pacientes con procesos inflamatorios agudos; en
clínica es de utilidad diagnóstica y de seguimiento de procesos inflamatorios bacterianos,
denominada proteína C reactiva.

2. Fisiología: a las características generales de los estreptococos se añade que las colonias de
las cepas capsuladas son lisas; en cambio, las no capsuladas desarrollan colonias pequeñas y secas.
La hemólisis tipo alfa o viridans, es producto de la degradación de la hemoglobina por acción de la

41
neumolisina. Los cultivos de neumococo se autolisan fácilmente, este proceso se evidencia cuando
se añade bilis de buey o desoxicolato de sodio a una suspensión densa de microorganismos.

B. PODER PATÓGENO

La virulencia del neumococo está directamente relacionada con la presencia de la cápsula

y la capacidad de multiplicarse en los tejidos. Las personas que tienen anticuerpos contra el
polisacárido específico de tipo, están protegidas contra ese serotipo, concepto base para el uso de
la vacuna. Para la instalación de la enfermedad neumocócica se pueden establecer 3 etapas, así:

1. Colonización: el neumococo, por acción de las adhesinas, se fija a las células epiteliales
y coloniza la mucosa nasal y oro-faringe. La producción de: proteasas, inactivan a la
Inmunoglobulina A; la citotoxina (neumolisina), destruye las células ciliadas del aparato
respiratorio y a los macrófagos.

2. Resistencia a la fagocitosis: la cápsula del neumococo interfiere la acción del

complemento 3b, responsable de la opsonización. Seguidamente se suceden una serie de eventos
como: la inflamación de los alveolos, la presencia de fragmentos de la pared bacteriana y la acción
de la neumolisina, que activan la ruta clásica del complemento, cuyos productos de degradación
producen daño tisular.

3. Factores predisponentes: infecciones virales previas, abuso del alcohol, desnutrición e

insuficiencia respiratoria pulmonar, favorecen la infección por neumococo.

Cuadros clínicos:

La incidencia de portadores sanos de Streptococcus pneumoniae es variable, se señala en el rango

del 5% al 75%, dependiendo del método utilizado para el aislamiento y de la población estudiada.

1. Neumonía: las bacterias proliferan rápidamente en el exudado alveolar y la evolución de la

enfermedad depende, en gran medida, de la respuesta inmune humoral. La neumonía suele
localizarse en los lóbulos inferiores (neumonía lobar) y la complicación septicémica no es
infrecuente, con compromiso meníngeo, endocardio o articular.

2. Sinusitis y otitis media: neumococo es el agente etiológico que con más frecuencia se encuentra
en senos para nasales y oído, generalmente posteriores a un proceso viral.

3. Meningitis: puede presentarse en pacientes de todas las edades, como consecuencia de una
bacteriemia. La mortalidad y secuelas neurológicas de esta infección son elevadas.

42
C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: es útil en casos de neumonía, cuando la muestra de esputo es purulenta,

así mismo, si la muestra es obtenida por punción de áreas estériles, como LCR, o seno para nasal,
se observan diplococos grampositivos lanceolados.

2. Cultivo: para el desarrollo requiere de medios enriquecidos con sangre, formando

colonias con superficie umbilicada. Las colonias están rodeadas de un halo verdoso por la
hemólisis tipo alfa. La incubación en ambiente con 10 % de CO2 mejora el aislamiento. También se
puede detectar el antígeno polisacárido C eliminado por la orina.

3. Identificación: el desarrollo de colonias productoras de hemólisis alfa debe ser

diferenciado de los Streptococcus viridans, que son saprofitos de vía respiratoria alta. S.
pneumoniae es sensible a la etilhidrocupreina (optoquina), observable por la ausencia de
desarrollo alrededor del disco impregnado con esta sal; así como el aclaramiento de la turbidez de
los cultivos líquidos al añadir bilis; y la reacción de Quellung positiva, que es la hinchazón de la
cápsula cuando se mezclan neumococos con suero anti polisacárido capsular polivalente.

4. Detección de antígeno: en pacientes con neumonía o meningitis purulenta, se puede

detectar el polisacárido C del neumococo en la sangre o líquido céfaloraquídeo, utilizando la
técnicva de inmunoanálisis.

5. Inoculación: el ratón es un animal altamente susceptible a la infección por neumococo,

produciéndole la muerte en 18 a 48 horas

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La vacuna conjugada, compuesta por terce serotipos capsulares, está indicada en

lactantes. En cambio, para niños mayores de 2 años y adultos en riesgo, se recomienda la vacuna
de polisacáridos con 23 serotipos.

El tratamiento de elección es la Penicilina, pero se han descrito cepas resistentes, por lo

que se recomienda el uso de Cefalosporina de tercera generación. El uso de Cloranfenicol se
reserva para los casos de meningitis.

ENTEROCOCCUS

Varias especies de estreptococos poseen un antígeno similar en la pared celular y forman

el grupo D o Enterococcus. Se diferencian de los otros estreptococos por poseer ciertas
características, como: a) desarrollar en medios de cultivo con elevadas concentraciones de cloruro
de sodio (6,5 g%), b) desarrollar en presencia de sales biliares, c) desarrollar en medios con pH
alcalino (9,6), y d) hidrolizar la esculina. En patología clínica, las especies más frecuentes aisladas
son: faecalis, faecium, durans y bovis.

43
 Los enterococos habitan el tracto gastrointestinal de humanos y animales, por lo que se
les puede encontrar como contaminantes en el agua y los alimentos. El factores de virulencia de
estos microorganismos se relaciona con la capacidad de adherirse a los tejidos y elementos
inertes, así como a la resistencia a diversos antibióticos. Por lo que revisten importancia en
infecciones adquiridas por estadías hospitalarias prolongadas, complicaciones post operatorias,
presencia de sonda vesical o catéteres y terapia antibiótica previa recibida por el paciente.

El manejo terapéutico es complicado, ya que presenta patrones inusuales de sensibilidad

o resistencia antibiótica. En infecciones urinarias, la nitrofurantoina y las fluoroquinolonas han
mostrado ser útiles. En infecciones sistémicas se recomienda la terapia combinada de
aminoglucósido con un agente de acción en la pared celular (ampicilina o vancomicina). En
infecciones con cepas multiresistentes se está empleando la quinupristina/dalfopristina.

Streptococcus viridans

Integran la flora microbiana normal de la orofaringe. Se caracterizan por: a) producir

hemólisis alfa en medios de cultivo con sangre, b) no ser inhibidos en su desarrollo por la acción
del optochin, y c) resistir la acción de las sales biliares. Son saprofitos, pero pueden ocasionar
infecciones dentarias (S. mutans) y endocarditis sub aguda (S. sanguis).

44
 CAPÍTULO 7
INFECCIONES LOCALIZADAS Y SISTÉMICAS
Bacillus anthracis. Neisseria meningitidis
______________________________________________________________
BACILLUS

Las bacterias integrantes del género Bacillus tienen como hábitat el medio ambiente
(suelo, agua y vegetación); se caracterizan por ser aerobias, tener forma bacilar y capacidad de
formar esporas, que les permite sobrevivir a los cambios ambientales. Algunas especies son
utilizadas en biotecnología para la producción de alcoholes, vitaminas, enzimas y antibióticos
(polimixina, bacitracina). Sólo la especie B. anthracis es patógena para el hombre, causando el
carbunco o ántrax maligno. En las últimas décadas, la espora, está siendo utilizada como arma
biológica en conflictos bélicos.

El Bacillus anthracis es la especie reconocida como responsable de la quinta plaga en

Egipto (1500 a.C.), y de la pandemia acaecida en el siglo XVII, llamada “peste negra”. Robert Koch,
en 1876, cultiva al germen in vitro y descubre el fenómeno de la esporulación; más tarde, Luis
Pasteur, demuestra la patogenia de la enfermedad y elabora la vacuna.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos gruesos, con los extremos rectos, de 4 a 6 µm de

largo, que se orientan formando cadenas, son inmóviles, y a la coloración de Gram se tiñen como
positivos. Las formas vegetativas tienen cápsula, cuya formación depende del plásmido pXO2, la
cual está compuesta por polipéptidos con ácido glutámico. Las esporas del ántrax son centrales,
no deformantes y muy resistentes a los cambios ambientales, permaneciendo por años en
materiales inertes (piel, lana, cerdas, etc.).

2. Fisiología: B. anthracis es aerobio, de fácil desarrollo en medios de cultivo; las esporas

se forman con facilidad en cultivos viejos, mas no en muestras clínicas. En los cultivos las colonias
son grandes, de superficie áspera, no hemolíticas, características que orientan su identificación.

3. Enzimas y toxinas: poseen un plásmido denominado pXO1, que produce el antígeno

protector (AP), con gran capacidad inmunogénica, el cual se une a los receptores de las células del
huésped para facilitar el ingreso de los otros factores de virulencia. B. anthracis genera dos
proteínas: factor edema (FE), que es una adenil ciclasa que origina edema por incremento del AMP
cíclico; y factor letal (FL), que es una proteasa que estimula a los macrófagos para excretar el
factor de necrosis tisular y la interleucina 1. Ambos factores necesitan del antígeno protector para
ingresar a la célula.

45
B. PODER PATÓGENO

El carbunco es una enfermedad propia de los animales herbívoros; el humano la adquiere,

en la mayoría de casos, por inoculación o contaminación de una herida con tierra o pelo de
animales. En el sitio de la inoculación se presenta una pápula que se ulcera, y luego se forma una
escara necrótica llamada “pústula maligna”. Esta lesión puede ser controlada médicamente, pero
se reportan complicaciones de sepsis, con el 20 % de mortalidad. Los factores de virulencia del
Bacillus anthracis se se resume en la capacidad de inhibir la fagocitosis por la cápsula, la
acumulación de liquidos por el factor edema, y el factor letal que estimula la formación de factor
de necrosisi tumoral, e interleucina pro inflamatorios.

Las esporas pueden también ingresar por inhalación, como es el caso de los trabajadores
en curtiembres, los que esquilan las ovejas, o por acto de terrorismo. En los alveolos pulmonares
las esporas son fagocitadas por los macrófagos y transportadas a los linfáticos del mediastino,
donde se transforman en vegetativas y producen el cuadro infeccioso general. Seguidamente la
adenopatía produce ensanchamiento del mediastino, observable en la radiografía de tórax. Puede
presentarse complicación meníngea y shock; la mortalidad es elevada que puede llegar al 95%.

La infección oral con B. anthracis es más frecuente en animales y muy rara en humanos,
con la presentación de úlceras en la cavidad oral o intestinal y hemorragias.

La enfermedad producida por el B. anthracis es conocida como anthrax, en el idioma

anglosajón; pero en español se le denomina carbunco o ántrax maligno.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: este estudio se realiza a partir de muestras obtenidas de lesiones

dérmicas, ganglios linfáticos o torrente sanguíneo; debido a las numerosas bacterias presentes y al
tamaño del germen, el examen resulta sencillo. El examen microscópico supera en calidad cuando
se emplea la técnica de fluorescencia directa, utilizando anticuerpos contra el polipéptodo
capasular. Se recuerda que el baciio sólo forma cápsula “in vivo” y no en los cultivos. .

2. Cultivo: desarrolla con facilidad en el agar sangre, forma colonias de tamaño grande,
con superficie rugosa, bordes irregulares y no hemolíticas. La confirmación de la especia B.
anthracis, se hace por la presentación de lisis de un cultivo por acción del fago gamma, o con el
uso de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

3. Diagnóstico indirecto: la detección de anticuerpos no tiene utilidad, debido a la agudeza

del proceso infeccioso.

4. Inoculación experimental: el ratón y el cobayo son muy susceptibles de infectarse por

vía subcutánea, produciendo edema local, seguido por hemorragia y septicemia. Este
procedimiento se utiliza para inducir, a la bacteria aislada, a que forme cápsula, demostrable sólo
in vivo.

46
D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

El control de la enfermedad está orientado a la vacunación del ganado y al cumplimiento

de medidas preventivas en los trabajadores de la industria del cuero y carnicerías. La vacuna para
animales es atenuada y procede de una cepa avirulenta. Para los humanos, en riesgo de contagio,
se emplea el filtrado estéril del cultivo de una cepa avirulenta.

Para el tratamiento se utiliza penicilina, doxiciclina o ciprofloxacina.

E. OTROS BACILLUS

Los Bacillus ambientales son numerosos, y se puede señalar:

a) Bacillus cereus: potencialmente patógeno, productor de dos toxinas: una termoestable,

que se transmite por la ingesta de arroz cocido, que ocasiona vómitos; y otra termolábil,
que se transmite con la ingesta de carne o verduras y ocasiona diarrea. Esta bacteria
también puede producir infección ocular (panoftalmitis), en casos de traumatismo ocular
o contaminación con tierra.
b) Bacillus subtilis: microorganismo ambiental no patógeno.
c) Bacillus sterothermophilus: germen cuya forma esporulada resiste temperaturas
elevadas, y se le utiliza en biotecnología como marcador del buen funcionamiento del
equipo de esterilización con calor húmedo a presión (autoclave).

NEISSERIA

El número de microorganismos integrantes de la familia Neisseriaceae se ha

incrementándo en los últimos tiempos; constituido por los géneros: Neissria, Moraxella, Eikenella,
Kingella y Acinetobacter. El de mayor interés para los humanos es la Neisseria. El tracto
respiratorio alto y otras mucosas del hombre son reservorio de este género, constituyendo parte
de la flora microbiana saprofita, sólo las especies Neisseria meningitidis y Neisseria gonorrhoeae,
son patógenas exclusivas del hombre.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son diplococos gramnegativos, con la característica propia de

tener el lado adyacente achatado (en grano de café). La estructura de la bacteria es similar a todos
los gérmenes gramnegativos; algunas especies, como N. meningitidis, posen cápsula, base de la
clasificación en 13 serogrupos. La mayoría de neiserias están rodeadas de pili, que les sirve para
adherirse al epitelio no ciliado de las mucosas, y como mecanismo para la transferencia de
material genético. En la membrana externa de la pared de las neiserias patógenas, se ubican tres
proteínas: porinas, proteina Opa y proteina Rmp, que participan en los mecanismos de
patogenicidad.

47
 2. Fisiología: son bacterias aerobias, lábiles a variaciones ambientales que les provoca lisis;
son portadoras de la enzima respiratoria citocromo oxidasa y metabolizan los carbohidratos por
vía oxidativa. Las especies patógenas son exigentes para desarrollar “in vitro”, requieren de
medios con sangre calentada (agar chocolate), el agregado de almidón para neutralizar la acción
tóxica de los ácidos grasos y la incubación a 37°C con ambiente que contenga el 10 % de CO 2. El
medio de cultivo”Tayer Martín” es el de elección, por su contenido de inhibidores de la flora
saprofita y de factores de enriquecimiento. Las especies saprofitas son menos exigentes, incluso
desarrollan en medios sin sangre.

3. Clasificación: La diferenciación de las neiserias saprofitas y patógenas se realiza

mediante el estudio de las características bioquímicas y de crecimiento.

Glucosa Maltosa Sacarosa Lactosa SH2 DNasa Crecimiento Pigmento

Especie a 22°C
-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
N. gonorrhoeae + -- -- -- -- -- -- --
N. meningitidis + + -- -- -- -- -- --
N. lactámica + + -- + + -- -- +
N. sicca + + + -- + -- + --
N. flava + + v -- + -- + --
Moraxella catarrhalis -- -- + -- + + v +
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Tabla: 7-1: Clasificación del género Neisseria

Neisseria meningitidis

B. PODER PATÓGENO

El agente etiológico de la meningitis epidémica fue descrito por primera vez por
Vieusseaux en el año 1805, e identificado por Weichselbaum, en 1887, en muestras de líquido
cefalorraquídeo y en la nasofaringe de portadores sanos. Posteriormente Dopter, en 1909, señaló
la importancia de los serogrupos bacterianos en la presentación de epidemias.

La infección se adquiere por inhalar gotitas del tracto respiratorio de otras personas. Las
bacterias se adhieren a la mucosa y se multiplican; luego pasan a través de éstas células e invaden
el torrente sanguíneo para ser transportadas a las meninges y al líquido cefalorraquídeo (LCR). Las
bacterias y los leucocitos en el cerebro originan algunos cambios, como: marcado descenso de
glucosa en el LCR, obstrucción de capilares (infarto cerebral) y daño en los nervios auditivo, visual
o motor. Al destruirse la N. meningitidis en el organismo, se libera la endotoxina que ocasiona
hipotensión y lesión del endotelio capilar, expresándose clínicamente por micro hemorragias
dérmicas (petequias). La exposición repetida a la endotoxina produce sensibilización y formación
de inmuno complejos que conducen al síndrome de coagulación intravascular diseminada (CID),
así mismo las proteínas Rmp liberadas inhiben la actividad bactericida del suero.

48
 El polisacárido capsular permite clasificar a la N. meningitidis en 13 serogrupos
antigénicamente distintos, los que inducen a la formación de anticuerpos específicos de grupo;
concepto base de la vacunación. Los serogrupos más frecuentes son: A, B, C, Y y W135. Es preciso
anotar que el serogrupo B tiene baja antigenicidad, razón por la cual las epidemias a este
serogrupo son más frecuentes.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: La coloración de Gram del LCR es de gran utilidad, la observación de

diplococos gramnegativos y numerosos leucocitos polimorfonucleares, hacen diagnóstico. Las
muestras de exudado naso faríngeo no son válidas para la microscopía.

2. Cultivo: Para el aislamiento “in vitro” se utilizan muestras de LCR, sangre o exudado
naso faríngeo. El medio de cultivo adecuado es el de “Tayer Martin” con suplemento de
inhibidores, incubado a 37°C en ambiente con 10 % de CO 2. La identificación de las colonias se
realiza mediante la coloración de Gram y la reacción de citocromo oxidasa. Para la confirmación
del biotipo se utilizan los parámetros de la Tabla II-7-1.

3. Detección de antígenos: La presencia de antígenos capsulares en muestras de LCR,

sangre u orina puede realizarse empleando técnicas de aglutinación de partículas de látex
recubiertas con anticuerpos monoclonales. El uso de técnicas moleculares, como la reacción en
cadena de la polimerasa, es muy útil.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La vacuna está compuesta de polisacáridos capsulares de los serogrupos A, C, Y, y W135,

disponible para niños; y la conjugada para adultos.

Las personas expuestas a pacientes con meningococemia, (médicos, enfermeras, etc.),

deben recibir tratamiento profiláctico con rifampicina. Los antibióticos de elección para el
tratamiento son la penicilina, las cefalosporinas de tercera generación y el cloranfenicol.

49
 CAPÍTULO 8
INFECCIONES CON COLONIZACIÓN
GÉNEROS CORYNEBACTERIUM, ACTINOMYCES Y NOCARDIA

CORYNEBACTERIUM

El género Corynebacterium agrupa bacterias que tienen morfología irregular: en mazo,

letra china, extremos gruesos, y disposición diversa. Numerosas especies se encuentran
distribuidas en el medio ambiente, plantas y animales; algunas especies colonizan piel y mucosas
del hombre como saprofitas, aunque pueden comportarse como patógenos oportunistas. Loefler,
en el año 1884, cultiva y demuestra el rol patógeno de la especie C. diphtheriae en la enfermedad
denominada difteria. Luego Roux y Yersin, confirman que las lesiones orgánicas encontradas lejos
del foco infeccioso son producidas por acción de una toxina. En el año 1923, Ramón, preparó la
vacuna, luego de transformar la toxina en toxoide.

Corynebacterium diphtheriae

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos con los extremos redondeados, unidos de forma
irregular dando imágenes de letras chinas, algunos tienen los extremos más gruesos. Son positivos
a la coloración de Gram y presentan granulaciones de polifosfatos, generalmente de ubicación
polar. Las formas virulentas presentan una cubierta que es el antígeno K. No forman espora ni
poseen flagelos.

2. Fisiología: la bacteria es aerobia, aunque puede desarrollar en la profundidad de un

medio semisólido, es lábil a la acción de los desinfectantes y muere luego de un minuto a 100°C.
Para el desarrollo in vitro requiere de los aminoácidos cistina y ácido glutámico. Para el
aislamiento a partir de muestras clínicas se utiliza el agar sangre chocolate con telurito de potasio,
el cual inhibe la flora saprofita faríngea y se reduce por acción de los Corynebacterium, formando
colonias negras.

3. Toxinas: la producción de exotoxina por C. diphtheriae depende de la presencia del

bacteriófago beta, portador del gen (tox+), que codifica la formación de toxina. El ADN circular del
fago se integra en el material genético de la bacteria, creando el estado de profago, lo que impide
la lisis de la célula bacteriana. En la práctica clínica se encuentran cepas de C. diphtheriae no
productoras de toxina, por lo tanto carentes del bacteriófago; aunque pueden adquirirlo sin son
expuestas a cepas portadores del fago beta. La toxina es un polipéptido, constituida por dos
fracciones: la B, que se une a los receptores específicos de las células del corazón y células
nerviosas, y la A, que actúa interrumpiendo la elongación de las cadenas peptídicas, y así inhibe la
síntesis de las proteínas.

50
B. PODER PATÓGENO

El ser humano es el único reservorio del C. diphtheriae, por lo tanto, tiene distribución
mundial. La enfermedad de la difteria se transmite entre personas por exudados respiratorios y
contacto directo; tiene mayor prevalencia en localidades con hacinamiento y sin programas de
vacunación. Tras el contagio se desarrollan signos y síntomas locales de inflamación en el tracto
respiratorio alto (nariz, faringe, laringe y tráquea), donde se forman membranas blancas, que se
tornan grises y necróticas, acompañadas con síntomas generales. Luego se presentan síntomas de
miocarditis y neuropatía. Las lesiones cutáneas son poco frecuentes, y se presentan con úlceras de
evolución crónica, que no se asocian a signos de intoxicación y que induce a la formación de
elevados títulos de antitoxina (inmunización natural).

La resistencia a la infección por C. diphtheriae está estrechamente relacionada con niveles

de antitoxina circulante superiores a 0,01 unidad de floculación por mililitro (Uf/ml).

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: los frotices de secreciones coloreados con Gram son sólo sugestivos de
difteria y debe realizarse el cultivo.

2. Cultivo: el diagnóstico de difteria se fundamenta en el aislamiento del microorganismo y

la demostración de formación de exotoxina. Para el aislamiento se utilizan medios enriquecidos
con sangre y selectivos, añadiéndoles aminoácidos y telurito de potasio. Las colonias de color gris
oscuro son sospechosas y se debe investigar la actividad contra la cisteína, la producción de
exotoxina y mejor aún, la secuenciación del ácido nucleico.

La demostración de que la cepa aislada es productora de exotoxina se puede realizar de

tres maneras: a) in vitro, por inmunodifusión (test de Elek), para lo cual, en una placa petri con
agar suero fundido se deposita un trozo de papel de filtro, previamente embebido en antitoxina
diftérica; una vez solidificado el agar, la cepa sospechosa se siembra en estrías transversales al
papel de filtro. Luego de 24 a 48 horas de incubación, cuando la cepa es productora de exotoxina,
se observarán líneas de precipitación ubicadas en la intersección entre el papel de filtro y la línea
de siembra. b) In vivo, para éste fin, la suspensión de la colonia sospechosa se inocula por vía
intradérmica a un conejo; luego de 24 horas se observará dermonecrosis en la zona de
inoculación. Esta reacción dérmica debe ser inhibida por la inyección previa de antitoxina. c) La
demostración de la presencia de exotoxina diftérica en muestras clínicas puede realizarse con la
técnica de inmunoprecipitación.

3. Técnicas moleculares: la reacción en cadena la polimerasa (PCR) se utiliza para detectar

la presencia del gen tox, a partir de muestras clínicas y de cepas asiladas en el laboratorio.

51
Figura: 8-1: Test de Elek. Demostración de líneas de precipitación toxina-antitoxina

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

El control de la enfermedad se realiza mediante la inmunización. El cuadro clínico de la

enfermedad de la difteria es expresión de la exotoxina, y los anticuerpos antitóxicos circulantes
neutralizarán específicamente dicha actividad. La vacuna se obtiene a partir de cultivos en medios
líquidos, los cuales se filtran y se les añade formol, para inactivar la toxina y convertirla en toxoide
(sin actividad tóxica). La vacunación se aplica en niños.

El uso de la inmunidad pasiva, mediante la aplicación de suero con antitoxina diftérica,

está indicado sólo en los primeros días de la enfermedad; para lo cual se emplea suero equino
hiperinmune en concentraciones de 60.000 a 100.000 unidades de inmunoglobulinas. La
administración de antibióticos, como penicilina o eritromicina es necesaria para erradicar el foco
infeccioso.

ACTINOMYCES

Los microorganismos que integran el género Actinomyces son anaerobios, que colonizan
normalmente la boca, el colon y la vagina. Las infecciones producidas por estos gérmenes son de
evolución lenta, y afectan aparato digestivo, respiratorio o genital con la característica común de
la formación de fístulas, por donde drena secreción con agregados bacterianos denominados
“granos”.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos grampositivos, con tendencia a formar filamentos y

ramificaciones. No forman esporas ni flagelos.

2. Fisiología: son anaerobios estrictos o facultativos. Para el desarrollo in vitro se requiere

de medios enriquecidos y tardan más de dos semanas en formar colonias. La identificación de la
cepa aislada se basa en las características de la colonia y reacciones bioquímicas frente a la urea,
la gelatina y la formación de la enzima catalasa.

52
B. PODER PATÓGENO

El ingreso del actinomices en los tejidos está en relación a diversas lesiones producidas en
las mucosas: traumatismos por procedimientos odontológicos; aspiración bronquial de alimentos;
presencia de divertículos inflamados, apendicitis o cuerpos extraños; asi como el uso de
dispositivos endocervicales. Las lesiones aparecen como tumefacciones fibrosas, únicas o
múltiples, que se ablandan y fistulizan a órganos adyacentes donde supuran.

La secreción purulenta que drena contiene los denominados “gránulos de azufre”, que son
conglomerados de bacterias cuyos tamaños varían desde microscópicos hasta macroscópicos.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

La adecuada obtención y manipulación de la muestra es necesaria para el éxito en el

diagnóstico. La asociación con estudios histológicos mejora al máximo el diagnóstico. La muestra
debe ser obtenida por aspiración con aguja, No se deben emplear los hisopos.

1. Microscopía: Depositar una gota de la secreción en un portaobjetos y observar al

microscopio con objetivo 40X (en fresco); la presencia de gránulos en la muestra y bacilos
filamentosos en la periferia del gránulo es muy sugestivo. A la coloración de Gram se
comportan como bacilos delgados, ramificados y grampositivos.

2. Cultivo: Sembrar la muestra en condiciones anaeróbicas, se recomienda el medio líquido

de thioglicolato. La formación de colonias se observará a partir de las dos semanas.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La prevención de este proceso infeccioso se realiza con la buena higiene buco dental y el
uso profiláctico de antibiótica en procedimientos invasivos. El tratamiento se nicia con el drenaje
quirúrgico del absceso y la administración, por períodos prolongados, de penicilina. Como
alternativa se puede indicar eritromicina, doxiciclina o clindamicina.

NOCARDIA

El género Nocardia pertenece al grupo de los actinomicetos aerobios. El nombre

corresponde a Edmond Nocard que, el 1888, hizo el primer aislamiento a partir de muestras de
bovinos. Estructuralmente este género tiene dos características propias: el poseer ácido micólico
en la pared, responsable de la resistencia a la decoloración con alcohol ácido, y contener ácido
diamino pimélico, en vez de lisina, como integrante de los péptidos del peptidoglucano.

Las especies de Nocardia habitan en el medio ambiente: suelo, materia orgánica en

descomposición y aguas detenidas. En el ser humano son saprofitas, pero pueden ocasi
onar infecciones como consecuencia de contaminación, sea por inoculación o inhalación.

53
A.MORFOLOGÍA Y ESTRUCTURA

1. Morfología y estructura: son bacilos filamentosos, que forman ramificaciones tanto en las
muestras biológicas como en los cultivos in vitro. Tiñen débilmente con el Gram, pero la
estructura de la pared corresponde a una bacteria grampositiva. Son ácido-alcohol
resistentes débiles, por lo que se recomienda el uso de la coloración de Kinyoun.

2. Fisiología: desarrollan con facilidad en la mayoría de medios de cultivo, luego de 2 a 3 días

de Incubación, formando colonias secas de aspecto céreo, con presencia de hifas aéreas.

3. Clasificación: para la identificación de especie es necesario el empleo de técnicas

moleculares, ya que las actividades metabólicas in vitro son limitadas. Se describen las
especies N. asteroides, N. brasiliensis, N. nova, N. farcinica, etc.

B. PODER PATÓGENO

El principal poder de virulencia está relacionado con la capacidad de evitar la destrucción

mictopbiana por acción de la fagocitosis. Las infecciones respiratorias se producen por inhalación,
que produce colonización del tejido pulmonar. En cambio, las infecciones primarias de la piel, se
producen por inoculación traumática, que lleva la formación de abscesos, luego, vía sanguínea van
al sistema nervioso central. La evolución clínica de las infecciones dérmicas es crónica y se
caracteriza por ser indolora, subcutánea y con presentación de fístulas que supuran. A la lesión
organizada se le denomina “micetoma”. La especie N. brasiliensis es las mas frecuencte.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: el frotis de la secreción purulenta, coloreado con kinyoun para bacterias

ácido resistentes, es de gran importancia para el diagnóstico; se observarán filamentos
ramificados gram positivos pálidos, ácido resistente.

2. Cultivo: para el aislamiento se utilizan los medios empleados para el cultivo de los
hongos, como el Sabouraud.

3. Identificación: para la determinación de la especie se utilizan técnicas moleculares.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Es imposible prevenir la colonización o infección por Nocardia, pues son bacterias de

hábitat ambiental. Para el tratamiento, la asociación sulfametoxazol con trimetoprim es la
recomendada.

54
 CAPÍTULO 9
INFECCIONES CON COLONIZACIÓN
GÉNEROS HAEMOPHILUS, BORDETELLA Y GARDNERELLA

HAEMOPHILUS

Son microorganismos que, en su mayoría, forman parte de la flora bacteriana normal de la

cavidad oral y tracto respiratorio alto. Su nombre obedece a la necesidad de factores presentes en
la sangre para desarrollar in vitro. Las especies patógenas son los agentes que con frecuencia son
aislados en patología infecciosa humana. Correspondió a Pffeifer, en 1982, identificar al
Haemophilus influenzae como agente causal de la influenza epidémica bacteriana.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son coco-bacilos, pequeños y pleomorfos, gramnegativos.

Muchas especies patógenas poseen un polisacárido capsular que contiene ribosa ribitol
fosfato (RRP), base de la clasificación en serotipos (a,b,c,d,e,f). Las especies que no poseen
cápsula son menos agresivas. La pared bacteriana está constituida por lipooligosacáridos,
que son los responsables de la actividad endotóxica. No poseen flagelos.

2. Fisiología: éstas bacterias son aerobias o anaerobias facultativas. Para desarrollar in vitro
necesitan la presencia de factores de crecimiento, como la hemina (factor X, termoestable
que contiene hierro y protoporfirina), y la nicotinamina del ácido nucleótido (factor V,
termolábil, que contiene coenzimas de la dehidrogenasa); ambos factores están presentes
dentro de los eritrocitos; para que el factor V sea liberado se requiere calentar
ligeramente el agar sangre. Algunas especies requieren la presencia de CO 2. Es común que
posean plásmidos que codifican resistencia a los antibióticos, los que son transferidos por
conjugación; así como un transposón que codifica beta lactamasa.

3. Clasificación: Se conocen hasta ocho biotipos de Haemophilus, los que se diferencian por
los requerimientos para desarrollar in vitro; así como por la capacidad de metabolizar
azúcares, ornitina, urea, y la producción de catalasa o indol.

Biotipo Factor X Factor V Catalasa CO 2 Hemólisis Glucosa Sacarosa

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
H. influenzae + + + + -- + --
H. aegyptus + + + -- -- + --
H. aprophylus + -- -- -- -- + +
H. parainfluenzae -- + +/- -- -- + +
H. haemolíticus + + + -- + + --
H. ducreyi + -- -- +/- +/- -- --

Tabla: 9-1: Biotipos de Haemophilus

55
Haemophilus influenzae

B. PODER PATÓGENO

El único reservorio del H. Influenzae es el hombre, en mucosa buco-faringea y genital. La

patogenia de esta especie tiene varios factores: A) La presencia de pili o adhesinas, que facilitan la
colonización de las células epiteliales de las vías respiratorias. B) Los lipooligosacáridos de la pared,
con actividad de endotoxina e inactivan los cilios de las células bronquiales. C) La producción de
cápsula, con carácter invasivo e inmunogénico, por su composición de RRP, estimula la formación
de anticuerpos y resisten a la fagocitosis. D) La síntesis de proteasas, que degradan las
inmunoglobulinas A secretoras. A ello se añaden factores condicionantes del huésped (infecciones
virales recientes), o elementos irritantes como el humo. Una vez que las bacterias colonizan las
mucosas respiratorias, pasan a través de las células epiteliales al torrente sanguíneo, donde H.
influenzae se provee de cápsula. Los cuadros clínicos que produce H. influenzae son: meningitis,
epiglotitis, neumonía y artritis; siendo el serotipo b el más frecuente.

Hay un grupo de H. influenzae, que carecen de cápsula, por lo tanto, no se pueden tipificar
en serotipos, y se les denomina “no tipificables”. El conocimiento de ellos es importante porque
son causa de procesos infecciosos localizados: otitis, sinusitis, conjuntivitis, vaginitis y neumonía
en gerontes. El biotipo H. aegyptus, merece especial atención porque es portador de un plásmido
y ocasiona conjuntivitis purulenta con fiebre purpúrica, denominada enfermedad de Koch-Weeks.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: La coloración de Gram es útil cuando la muestra procede de cavidades

normalmente estériles, como líquido cefalorraquídeo, donde se puede observar bacilos
gramnegativos cortos y largos (pleomorfos).
2. Cultivo: el uso de agar chocolate (agar sangre calentado), es el recomendado, porque
contiene los dos factores X y V. Si la muestra se cultiva en agar sangre, se debe hacer, a su
vez, un trazo recto de siembra con una cepa de Staphylococcus aureus, la cual al lisar los
eritrocitos libera el factor V. El germen desarrolla en 24 horas dando colonias pequeñas,
lisas y opacas alrededor de las colonias del estafilococo (satelitismo).

Figura: 9-1: Desarrollo de haemophilus por satelitismo

56
 3. Identificación: se realiza siguiendo el comportamiento y las necesidades metabólicas que
figuran en la tabla: 9-1. Es aplicable el uso de procedimientos moleculares.

4. Detección de antígenos en la muestra: la presencia del antígeno capsular ribosa ribitol

fosfato del serotipo b, en LCR o en orina, es detectable mediante la reacción de
aglutinación con látex recubierto de anticuerpos monoclonales. Este estudio es de uso
fácil, pero adolece de limitaciones cuando la infección es producida por Haemophilus de
otro serotipo capsular o no tipificable.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Existe la vacuna elaborada a partir del antígeno capsular purificado, que se distribuye en la
forma conjugada, para ser administrada en los esquemas de vacunación infantil.

Para el tratamiento de un proceso agudo se recomienda el uso de cefalosporinas de

tercera generación. El uso de ampicilina ha sido descontinuado por el elevado índice de cepas
productoras de beta lactamasa. Otras alternativas terapéuticas son: cloranfenicol, rifampicina,
fluoroquinolonas y la asociación de ampicilina con ácido clavulánico.

BORDETELLA

Bordetella pertussis, agente causal de una enfermedad muy conocida desde el siglo XVI,
como: “tos quintosa”, “tos convulsiva”, “coqueluche”, “pertusis” y “tos ferina”; fue descrita por
primera vez por Bordet y Gengou en 1906. En la actualidad el género Bordetella comprende ocho
especies, de las cuales sólo dos son patógenas para el hombre: B. pertussis y B. parapertussis; la
especie B. bronchiseptica es más frecuente en animales.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son cocobacilos gramnegativos, muy pequeños (inferiores a una

micra); los patógenos humanos son inmóviles y presentan cápsula en ciertas etapas del
proceso infeccioso.

2. Fisiología: son bacterias aerobias estrictas, desarrollan colonias diminutas, brillantes,

luego de 3 a 5 días de incubación. El medio de cultivo con sangre y almidón, ideado por
Bordet y Gengou, sigue siendo el recomendado. La nicotinamida (ácido niciotínico) es un
factor de crecimiento indispensable. B. pertussis produce diversas sustancias que se
consideran juegan un papel en el desarrollo de la enfermedad, como: hemaglutinina,
toxina adenilciclasa, toxina pertussis, citotoxina traqueal, toxina dermonecrótica y factores
de colonización. Así mismo presenta cambios genéticos, que se expresan fenotípicamente
por modificaciones del aspecto de las colonias, denominadas “variaciones de fase”, que
conducen a la pérdida de factores de virulencia.

57
 3. Clasificación: los estudios moleculares no han demostrado diferencias importantes entre
las diversas especies de Bordetella, por lo que aun se sigue utilizando la clasificación por
biotipos.

Especie Oxidasa Ureasa Movilidad

B. pertussis ++ -- --
B. parapertussis -- ++ --
B. bronchiseptica ++ ++ ++

Tabla: 9-2: Biotipos de Bordetella

B. PODER PATÓGENO

B. pertussis sólo afecta al humano y se transmite por vía respiratoria; las bacterias se
adhieren al epitelio ciliado con la participación de adhesinas (pili) y hemaglutininas; luego segrega
tres toxinas: a) la toxina pertussis, que facilita la unión de las bacterias a las células ciliadas, y
controla la actividad de la adenil ciclasa produciendo incremento de secreciones respiratorias; así
mismo, la toxina se une a los macrógafos e inhibe la quimiotaxis, y promueve la linfocitosis. b) La
toxina dermonecrótica, que produce necrosis tisular por el mecanismo de vasoconstricción capilar.
Y c) la citotoxina traqueal, que ocasiona daño a las células ciliadas impidiendo su regeneración, lo
que conlleva a una recuperación lenta de la enfermedad.

Bordetella
pertussis Control de adenil ciclasa
Secreción bronquial
Toxina pertusis Linfocitosis
 Adhesinas quimiotaxis
 Hemaglutinina
Toxina dermonecrótica: vasoconstricción

Citotoxina traqueal: inhibe células ciliadas

Inhibe regeneración celular

La enfermedad se caracteriza por presentar, en la fase catarral, febrícula, enrojecimiento

conjuntival, abundante secreción nasal y bronquial; luego de una a dos semanas se presenta tos
exigente, paroxística con estridor, pudiendo estar asociada a vómitos y falta de oxigenación con
cianosis. En el hemograma se observa leucocitosis con linfocitosis. La evolución del proceso
infeccioso es lenta y tarde 3 a 4 semanas en resolverse.

C. DIAGÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: se utiliza el frotis de la expectoración, teñido con anticuerpos marcados con

fluoresceína, que tiene buena sensibilidad, pero pueden presentarse reacciones cruzadas
que dan falsos positivos.

58
 2. Cultivo: la sensibilidad del cultivo es variable y está en relación con diversos factores;
mejora cuando el cultivo se procesa en la fase catarral de la enfermedad y cuando se
emplea el medio de cultivo apropiado de Bordet Gengou, modificado con carbón y
glicerol, e incubado en cámara húmeda hasta por diez días.

3. Molecular: el uso de la reacción en cadena de la polimerasa es de gran ventaja.

4. Identificación: las colonias desarrolladas se enfrentan a antisueros específicos, mediante

procedimientos de aglutinación o fluorescencia directa.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La vacuna acelular, que contiene toxina pertussis inactivada y hemaglutinina, otorga un

elevado porcentaje de inmunidad, a diferencia de la antigua que era inactiva entera.

El tratamiento de la infección por B. pertussis es básicamente sintomático. Los macrólidos

son los antibióticos de elección, pudiendo utilizar como alternativa las tetraciclinas o el
sulfametoxazol+trimetoprim.

GARDNERELLA

En el año 1953, Leopold describe, en pacientes con prostatitis y cervicitis, la presencia de

microorganismos semejantes a los Haemophilus. Luego, Gardner, los identifica como agentes
causales de las vaginitis inespecíficas (vaginosis), denominándole Gardnerella vaginalis, esta
patología también puede ser causada por Mobiluncus sp., que son bacterias anaerobias en forma
de hoz gramvariable, que colonizan las células epiteliales vaginales.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos cortos, pleomorfos, que toman la coloración de Gram
en forma variable, son inmóviles y no presentan cápsula ni espora. La presencia de pilli les
facilita la adherencia al epitelio y produce una toxina citolítica.

2. Fisiología: son anaerobios facultativos, negativos para las reacciones de oxidasa, catalasa,
indol, ureasa y nitratos. A partir de algunos carbohidratos, como dextrosa, maltosa y
almidón, producen ácido acético. Tienen la capacidad de desaminar la lisina, ornitina y
arginina, liberando aminas tipo cadaverina, putresina y trimetilamina, que son las
responsables del olor a pescado de la secreción vaginal. Para el desarrollo in vitro
requieren la presencia de vitaminas y bases purínicas.

59
B. PODER PATÓGENO

G. vaginalis habita en la vagina humana, sin producir síntomas ni signos en la mayoría de

las mujeres. En el 100% de casos con síndrome de “vaginosis bacteriana”, está presente en la
vagina y en la uretra de sus contactos masculinos. La capacidad de adherencia a las células
epiteliales vaginales y uretrales es el principal mecanismo de colonización, reemplazando a la flora
residente.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: la observación microscópica del frotis coloreado con Gram hace el

diagnóstico, ya que se aprecia la presencia de bacilos gramnegativos o grampositivos
cortos, que invaden las células epiteliales, conocidas como “clue cells” o células clave. La
flora vaginal residente, constituida por lactobacilos, desaparece.

2. Cultivo: en la práctica médica este procedimiento es de poca importancia.

3. Otros: pH vaginal superior a 4,5, y si es posible, determinar de actividad enzimática de

sialidasa, prolina y aminopeptidasa en la secreción vaginal.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

No hay vacuna para esta infección. El microorganismo es sensible a diversos antibióticos,

se recomienda el uso tópico y sistémico de metronidazol o clindamicina. Para rehabilitar la flora
vaginal, a la terapia anti infecciosa, se debe asociar los estrógenos.

60
 CAPÍTULO 10
INFECCIONES ENTÉRICAS
GÉNEROS ESCHERICHIA, SALMONELLA Y SHIGELLA

ENTEROBACTERIAS

El nombre de estos microorganismos se debe a que son huéspedes naturales del intestino
del ser humano y de muchos animales, aunque se les encuentran también en el agua, suelo y
vegetales. La facilidad con que desarrollan in vitro ha permitido estudiar sus propiedades
metabólicas, estructura antigénica, composición genética y mecanismo patogénico; así mismo, ha
conducido a clasificarlos en géneros, especies, serotipos y fagotipos.

Las características comunes de las enterobacterias son: a) bacilos gramnegativos, b)

aerobios y anaerobios facultativos, c) metabolizan la glucosa por vía fermentativa, d) reducen los
nitratos a nitritos, e) no producen la enzima citocromo oxidasa y f) pueden ser inmóviles o móviles
por flagelos distribuidos en forma peritrica.

La función de las enterobacterias en el intestino es beneficiosa para el huésped, pues

concluyen el metabolismo de las proteínas e hidratos de carbono que han sido ingeridos. La
especie representativa de esta familia que coloniza el colon es Escherichia coli. Algunos géneros se
asocian siempre con infecciones intestinales, como Salmonella o Shigella; otros pueden ocasionar
infecciones oportunistas, como Escherichia coli, KJebsiella, Proteus. En cambio, hay especies que
siendo normalmente comensales, pueden adquirir genes de virulencia de un reservorio animal o
un portador humano, y convertirse en patógenos.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos de longitud variable, de 1 a 6 µm, con los extremos
redondeados, no forman esporas, la mayoría de los géneros presentan flagelos de tipo
peritrico (excepto Klebsiella y Shigella). A la coloración de Gram se comportan como
negativos.
En la pared de la enterobacterias se encuentra el lipopolisacárido central (LPS), que
corresponde al antígeno somático “O”, y es compartido por todos los géneros de esta
familia. El componente polisacárido permite clasificar a las diferentes especies en
serotipos e induce la formación de anticuerpos IgM en el huésped; en cambio, el
componente lipídico es el responsable de la actividad endotóxica. Los flagelos son
proteínas, que constituyen el antígeno “H” e induce la formación de anticuerpos tipo IgG.
Algunas especies de esta familia poseen una verdadera cápsula denominada antígeno K
(Klebsiella), en cambio otras poseen una delgada capa llamada antígeno Vi (Salmonella
typhi), ambas estructuras están relacionadas con la virulencia de la especie bacteriana, al
impedir la unión con los anticuerpos anti somáticos.

61
 2. Fisiología: todas las especies se desarrollan con facilidad en los medios de cultivo en
forma aeróbica o anaeróbica facultativa, metabolizan numerosos sustratos, base de la
clasificación en géneros. La ausencia de la enzima citocromo oxidasa hace la diferencia
con otros grupos morfológicamente similares como Pseudomonas o vibrio. La capacidad
de fermentar la lactosa, se utiliza para agrupar a estas bacterias en dos categorías, las
positivas (Escherichia, Klebsiella, Enterobacter) y las negativas (Salmonella, Shigella,
Proteus). Algunas especies patógenas son resistentes a la acción de las sales biliares,
comportamiento que se utiliza para incluirla en los medios de cultivo y hacerlo selectivo
para aislarlas a partir de muestras clínicas.

3. Clasificación: la familia Enterobacteriaceae se clasifica en tribus y géneros, según la

capacidad metabólica sobre diversos sustratos (biotipo). Se describen más de 30 géneros,
pero los de mayor importancia en patología humana son: Escherichia, Shigella,
Salmonella, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter (Hafnia y Serratia), Proteus, Morganella y
Yersinia.

Lactosa SH2 Indol Citrato Urea Desami Decarbo Movi V.P.

nasa xilasa lidad
Escherichia ++ -- ++ -- -- -- ++ ++ --
Klebsiella ++ -- -- ++ ++ -- ++ -- ++
Salmonella -- ++ -- ++ -- -- ++ ++ --
Shigella -- -- -- -- -- -- -- -- --
Proteus -- ++ +/- +/- ++ ++ -- ++ --

Tabla: 10-1: Biotipos de enterobacterias más frecuentes en patología humana

4. Enzimas y toxinas: Las enterobacterias poseen algunos factores de virulencia comunes,

por ejemplo, el componente lipídico de la endotoxina, que se libera con la lisis bacteriana
y tiene acciones diversas: activar el complemento, liberar citocinas, producir fiebre,
inducir coagulación intravascular, shock y muerte.

B. PODER PATÓGENO

Casi todas las bacterias de ésta familia están cubiertas por pilis, estructuras que participan
en la adherencia a la superficie de las células mucosas digestivas, primer paso para la colonización.
Las especies de los géneros Salmonella y Shigella, son enteropatógenas, y ciertas cepas de la
especie Escherichia coli han adquirido factores de virulencia, luego se comportan también como
patógenas intestinales.

En la práctica clínica, las enterobacterias son los microorganismos que con más frecuencia
ocasionan infecciones diversas, como: urinarias, heridas operatorias, septicemias, meníngeas y
neumónicas; representando el 80% de los bacilos gramnegativos aislados en pacientes
hospitalizados. La elevada frecuencia de estas bacterias en patología humana, se explica tal vez

62
por su capacidad de adaptabilidad genética, además porque experimentan intercambios de
factores de virulencia y de resistencia a los antibióticos. A ello se añade, el uso no controlado de
antibióticos en la población, lo que ejerce una presión selectiva de cepas resistentes.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: la coloración de Gram, de las heces de pacientes con enterocolitis, no

brinda ningún aporte; pero su presencia en muestras procedentes de heridas, abscesos o líquidos
de punción, es muy orientador.

2. Cultivo: para el aislamiento de las enterobacterias se utilizan medios selectivos, como:

agar Mac Conkey, agar SS, agar XLD, agar Drigalski, etc., que impiden el desarrollo de cocos y de la
flora saprofita intestinal. Si por diversas razones la muestra no se puede procesar de inmediato,
ésta debe inocularse en un medio de conservación o transporte (Cary Blair), y así evitar el riesgo
de destrucción de los patógenos.

Las colonias aisladas deberán ser sometidas a estudios bioquímicos frente a diversos
sustratos, y ubicar el género y biotipo al que pertenecen. Frecuentemente es necesario confirmar
el estudio con reacciones inmunológicas de aglutinación frente a antisueros específicos (somático
o flagelar).

4. Pruebas moleculares: se utiliza cuando el gen productor de la virulencia está deinido.

Ejm: la toxina shiga del E.coli enterohemorrágico
5. Indirecto: sólo en el caso de infecciones por salmonelas tífica o paratífica, en las que se
producen bacteriemias, se utiliza la búsqueda de anticuerpos en sangre contra los
antígenos somáticos O y flagelares H, aunque con relativa importancia.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La presencia de las enterobacterias en la flora intestinal y en el medio ambiente, hace

difícil elaborar un protocolo ideal para prevenir las infecciones. La adquisición de hábitos
higiénicos adecuados para la elaboración y la venta ambulatoria de alimentos, así como la higiene
personal y el lavado de manos frecuente, disminuirá el riesgo de la infección vía fecal oral. No se
dispone de vacuna con buena protección.

El tratamiento de la infección por Salmonella typhi tiene un esquema bien establecido con
cloranfenicol o fluorquinolonas. En enterocolitis por Shigella se recomienda el uso de
sulfatrimetoprim o fluoroquinolonas. En salmonelosis no complicada, el tratamiento sintomático
es primordial, algunas escuelas no recomiendan el uso de antibióticos; de ser necesario, se puede
emplear amoxicilina, quinolonas o sulfatrimetoprim. Para el tratamiento de las infecciones extra
intestinales, la elección del antibiótico está basada en pruebas de sensibilidad “in vitro”.

63
Escherichia coli

El biotipo correspondiente a E. coli, se refiere a bacterias que metabolizan glucosa y

lactosa, que producen Indol a partir del aminoácido triptófano y que no producen hidrógeno
sulfurado. Es la especie saprofita que habita en mayor proporción en el colon, y a su vez la que con
más frecuencia se aísla en patología humana.

E. coli, es la causa del 90% de infecciones de las vías urinarias, incluso se relaciona a las
cepas portadoras de ciertos pili como las causantes de pielonefritis; así mismo como la primera
causa de sepsis neonatal. La presencia de esta cepa bacteriana en el agua, se utiliza como
marcador para inhabilitar el agua como potable. Hay 5 cepas de E. coli que han adquirido factores
de patogenicidad y producen gastroenteritis, cada una mediante un mecanismo diferente.

1. E. coli enteropatógena (ECEP): estas bacterias poseen un factor de virulencia, que es

codificado por un plásmido, y les otorga la capacidad de adherirse a las células epiteliales del
intestino delgado, destruir las vellocidades y formar micro colonias; todo ello conlleva a la
producción de diarrea acuosa. Es la diarrea más frecuente en niños de países en desarrollo.

2. E. coli enterotoxigénica (ECET): estas cepas elaboran dos toxinas, codificadas por un
plásmido transferible, que actúan a nivel del intestino delgado. Una de ellas es termolábil, que
activa la enzima adenil ciclasa y la otra es termoestable, que activa la enzima guanil ciclasa,
produciendo incremento del monofosfato de adenosina (AMP cíclico), lo que induce a la diarrea
acuosa intensa. Este germen se adquiere por la ingesta de agua o alimentos contaminados con
heces, se le denomina “diarrea de los viajeros”.

3. E. coli enterohemorrágica (ECEH): el serotipo O:157:H7 es el más frecuente, ha

adquirido un bacteriófago, que es el productor de la toxina tipo shiga. Esta toxina tiene capacidad
de destruir las células endoteliales del glomérulo, produciendo alteración de la función renal; así
mismo estimula la actividad de las citocinas inflamatorias y del factor de necrosis tumoral. Los
casos clínicos se relacionan con la ingesta de carne de ternero mal cocido, leche no pasteurizada o
verduras crudas, produciendo colitis hemorrágica, fiebre y riesgo del síndrome hemolítico
urémico. La dosis infectante es muy pequeña.

4. E. coli enteroinvasiva (ECEI): pocos serotipos de E. coli poseen los genes transportados
en un plásmido, que les codifiquen la capacidad de invadir y destruir las células del colon,
ocasionando diarrea acuosa, en un inicio; luego con sangre y leucocitos (pus), similar a la
producida por Shigella.

5. E. coli entreroagregadora (ECEA): estas bacterias tienen la propiedad de

autoaglutinarse y adherirse firmemente a las células epiteliales intestinales formando una
biopelícula que las protege, produciendo diarrea crónica.

64
Salmonella

El biotipo Salmonella incluye a bacilos móviles que no fermentan lactosa, son productores
de hidrógeno sulfurado (excepto S. paratyphi A), metabolizan el aminoácido lisina por
decarboxilación, y pueden utilizar citrato como única fuente de carbono (excepto S. typhi y S.
paratyphi A). Salmonella se encuentran en el tracto intestinal de diversos animales mamíferos,
aves y reptiles como comensales, pudiendo ejercer acción patógena en el ser humano.

De acuerdo a la composición antigénica somática y flagelar, se han descrito más de 2500

serotipos distintos; pero sólo algunos serotipos como Salmonella typhi y Salmonella paratyphi (A,
B, o C) se encuentran muy bien adaptadas al ser humano y no poseen otro huésped natural. Otros
serotipos se han adaptado mejor a especies animales, como: Salmonella typhimurium en roedores,
Salmonella dublin en ganado vacuno, Salmonella cholerasuis en cerdos y Salmonella gallinarum en
los pollos; todas ellas son fuentes de infección para el ser humano. Los estudios de hibridación de
ADN han demostrado la existencia de siete grupos; las cepas que afectan al ser humano
pertenecen al grupo I, y se les denomina Salmonella entérica.

La infección por S. typhi y S. paratyphi se adquiere por contacto estrecho con una persona
enferma, una portadora sana o por ingesta de alimentos contaminados (aves de corral, huevos,
productos lácteos, etc.). La dosis infectante para S. typhi es baja (103), en cambio para otras
salmonellas es elevada (106 – 108). Las bacterias atraviesan la mucosa del intestino delgado, se
localizan en los enterocitos y en las células M de las placas de Peyer; seguidamente son
transportadas hasta el tejido linfático submucoso, para luego ingresar a la circulación linfática y
sanguínea, ocasionando bacteriemia; luego colonizan la vesícula biliar y reinfectan el intestino.

En el RES se multiplican.
Vía linfática llegan a la
sangre. Luego a hígado,
vía biliar e intestino.

Salmonella penetra a las

células del intestino delgado
En la sub mucosa es
fagocitada por macrófagos

Figura: 10-1: Patogenia de la infección por S. typhi

65
 La infección con S. typhi produce la entidad nosológica fiebre tifoidea y las otras especies
se relacionan con bacteriemias, lesiones focales de órganos y enterocolitis. Para el diagnóstico de
estas infecciones se debe demostrar la presencia del agente mediante cultivos de sangre, médula
ósea, bilis (cuerda encapsulada) o heces. La demostración de anticuerpos contra los antígenos
somático (O) y flagelar (H), son de utilidad cuando los títulos son superiores a 1/320.

Shigella

El biotipo corresponde a bacilos inmóviles que no fermentan lactosa, no metabolizan el

aminoácido lisina, no son productores de hidrógeno sulfurado y no son capaces de utilizar el
carbono a partir del citrato. El ser humano es el único reservorio y se transmite de persona a
persona, por las manos o alimentos contaminados con heces. El inóculo necesario para producir
enfermedad es bajo (100 a 200 bacterias).

Shigella incluye cuatro especies (dysenteriae, flexneri, boydii y sonnei), que se diferencian
por el antígeno somático; conocimiento que tiene utilidad epidemiológica. La infección por
Shigella es de persona a persona (fecal-oral) o alimentos contaminados. Las bacterias invaden las
células del colon y se diseminan de una célula a otra y forman micro abscesos en la pared del
intestino grueso. La virulencia de Shigella está asociada a un plásmido, con regulación
cromosómica, que facilita el ingreso a las células de la mucosa intestinal y su replicación dentro de
ellas, incluso, puede sobrevivir dentro de los polimorfonucleares. El cuadro clínico se caracteriza
por espasmos abdominales, diarrea con moco y sangre, se le denomina disentería bacilar.

Shigella penetra a las Invade las células Atrae macrófagos, forma

células del Intestino grueso vecinas, las destruye. abscesos.

Figura: 10-2: Patogenia de la infección por Shigella

La especie Shigella dysenteriae tipo 1, es la única enterobacteria productora de exotoxina

(shiga), con capacidad tóxica para el intestino, endotelio renal y neuronal. Es importante señalar
que estas cepas tienen relación genética con las cepas de E. coli entero hemorrágica.

66
OTRAS ENTEROBACTERIAS

Klebsiella

Este género se caracteriza por ser bacilos inmóviles, que poseen cápsula, la que confiere
un aspecto mucoide a las colonias. El biotipo característico corresponde a bacterias que
metabolizan lactosa y urea, producen acetil metil carbinol a partir de la dextrosa (Voges
Proskawer) y utilizan el citrato como única fuente de carbono.

La especie K. pneumoniae ocasiona cuadros respiratorios en pacientes hospitalizados, se

presenta con mayor frecuencia en grupos humanos comprometidos (alcohólicos, diabéticos, o
aquellos que sufren de enfermedad pulmonar obstructiva crónica). Las especies K. ozaenae y K.
rhinoescleromatis están relacionadas con rinitis crónica atrófica y enfermedad granulomatosa
crónica de la nariz respectivamente. Recientemente el agente causal de la donovanosis o
granuloma inguinal (enfermedad venérea), ha sido clasificado como Klebisella granulomatis.

Enterobacter y Serratia

Son bacterias integrantes de la Tribu Klebsielleae, pero se diferencian del género KJebsiella
por poseer movilidad y una cápsula muy delgada. El género Enterobacter está integrado por las
especies E. cloacae, E. agglomerans y E. aerogenes, diferenciables entre ellas por el
comportamiento frente a los aminoácidos lisina, arginina y ornitina. El género Serratia, en cambio,
se caracteriza por ser la única enterobacteria productora de la enzima extracelular DNasa; la
especie más estudiada es S. marcescens.

Estos microorganismos son patógenos oportunistas, responsables de la mayoría de

infecciones intrahospitalarias, quemaduras de larga evolución, heridas operatorias, vías
respiratorias por uso de respiradores y tracto urinario. La terapia antibiótica debe estar
fundamentada con pruebas de laboratorio.

Proteus

La tribu Proteeae incluye a los géneros Proteus, Morganella y Providencia, caracterizados

todos por desaminar el aminoácido fenilalanina. Los géneros Proteus y Morganella se diferencian
por poseer una potente enzima ureasa, que degrada la urea en dióxido de carbono y amonio. Los
miembros del género Proteus poseen gran movilidad, que se demuestra por el desarrollo invasivo
de sus colonias.

Es frecuente el aislamiento de cepas de Proteus en heces, asi como contaminante en

cultivos de orina. Es el reponsable del olor amoniacal que se percive en prendas de pacientes
crónicos, debido al metabolismo de la urea y formación de amonio. Así mismo, se menciona que
infecciones crónicas de vías urinarias por Proteus, pueden condicionar a la formación de cálculos,
como consecuencia de la precipitación de sales de amonio en medio alcalino.

67
 CAPÍTULO 11
INFECCIONES ENTÉRICAS ULCEROSAS
GÉNEROS CAMPYLOBACTER Y HELICOBACTER

CAMPYLOBACTER

El nombre Campylobacter proviene del vocablo griego campylos, que significa curvo,
término que se aplicó para diferenciarlos de los vibrios. Estos microorganismos se encuentran
habitualmente en el intestino de animales como: vacuno, oveja, cerdo, cabra, perro, gato y aves
de corral. La infección en el humano es una zoonosis, descrita desde el año 1947, siendo en la
actualidad una de las causas más frecuente de gastroenteritis.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos curvados, en forma de coma, en vuelo de gaviota, o

en S itálica; pequeños (0,5-5,0 µm) y muy delgados (0,2-0,5 µm); gramnegativos y móviles
por un solo flagelo polar que le imprime movimiento en dardo. Poseen una proteína de
superficie (S) que funciona como cápsula, e interfiere la fagocitosis. El lipopolisacárido de
la membrana externa de la pared es el principal antígeno. No forma esporas.

2. Fisiología: son bacterias microaerófilas, que para desarrollar in vitro necesitan una
atmósfera con 5% al 10% de CO2. No poseen la enzima citocromo oxidasa, ni metabolizan
los azúcares. Desarrollan bien a 37°C, pero la especie C. jejuni lo hace mejor a 42°C,
característica útil para el aislamiento a partir de muestras fecales.

3. Clasificación: El género Campylobacter lo integran hasta 30 especies, diferenciadas con

técnicas molecularestes. Sólo cuatro de ellas tienen importancia en patología humana: C.
jejuni, C. coli, C. upsaliensis y C. fetus.

B. PODER PATÓGENO

La enfermedad se produce por la ingesta de alimentos (leche o agua) contaminados,

generalmente con heces de aves de corral o de perro; el tamaño del inóculo es importante, ya que
son sensibles al ácido del estómago. El daño tisular se presenta en el yeyuno, íleon y colon,
produciendo infiltrado inflamatorio a neutrófilos, degeneración atrófica, abscesos y ulceración del
epitelio mucoso; debido a la acción de las citocinas y el factor de necrosis secretados por los
macrófagos, células dendríticas y polinuicleares que los han fagocitados. El paciente presenta
fiebre, dolor abdominal y diarrea, con heces que pueden ser blandas, con moco, acuosa o
sanguinolenta. La especie C. jejuni es la más frecuente en humanos; C. coli es patógena para los
porcinos; C. upsaliensis se asocia a patologías por contaminación con heces de perro; en cambio,
C.fetus produce manifestaciones sistémicas con compromiso vascular (endocarditis,
tromboflebitis) y meníngeo.

68
C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: la morfología es característica de bacilo gramnegativo, curvado en vuelo de

gaviota; se observa con mayor facilidad en frotis de heces coloreado con Vagó. La
observación de las heces en fresco, mediante la microscopía de contraste de fases o
campo oscuro, es muy útil para el diagnóstico, cuando la muestra corresponde a pacientes
en la fase aguda de la enfermedad.

2. Cultivo: para el aislamiento se requiere de medios con sangre o carbón y selectivos con el
agregado de antibióticos; deben ser incubados en atmósfera que contenga 5% a 10% de
CO2. El crecimiento de colonias se observa entre las 24 y 72 horas de incubación. C. jejuni
desarrolla mejor a 42°C, característica que se utiliza para separarlas de las enterobacterias.
Otra técnica para el aislamiento de esta especie, a partir de heces, es depositar una
suspensión de la muestra sobre un filtro millipore de 0,45 µm, ubicado en la superficie del
agar sangre; luego de 30 minutos se retira el filtro, y el petri se incuba a 37°C. Debido al
delgado grosor del Campylobacter, pasará los poros del filtro y formará colonias, en
cambio las otras bacterias más gruesas quedarán retenidas en el filtro.

3. Técnicas molesculares: se utilizas la amplificación del ácido nucleico a partir de muestras.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO:

La enfermedad se previene con medidas higiénicas en el manejo de los alimentos, así

como la ingesta de alimentos lácteos pasteurizados. No hay vacuna para ésta infección.

La gastroenteritis por Campylobacter se autolimita y sólo requiere hidratación. En caso de

requerir el uso de antibióticos, los macrólidos, tetraciclinas o quinolonas son recomendados.

HELICOBACTER

La especie Helicobacter pylori se aisló por primera vez en el humano el año 1982, y
correspondió a Barry Marshal y Robin Warren demostrar que era el agente etiológico de la
gastritis y úlcera péptica, por lo que recibieron el premio Nobel el año 2005. El ser humano es el
principal reservorio, y la prevalencia es elevada en diversas regiones del mundo. Una vez que las
personas adquieren la bacteria, son portadoras por décadas. Su presencia en úlceras duodenales y
gástricas es considerada un factor de riesgo para el desarrollo de cáncer gástrico.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos espirilares pequeños (1 - 2 µm), en los cultivos

adquieren forma bacilar o cocoide, móviles por múltiples flagelos polares, que le dan la
característica de movilidad en “sacacorchos”. Colorean como gramnegativos. En el cromosoma se
localizan el locus cog A de patogenicidad, y el locus Vac A que codifica una toxina vacuolizadora.

69
 2. Fisiología: la producción de la enzima ureasa es la característica más importante de la
bacteria, pues al producir amonio a partir de la urea le permite sobrevivir en el medio ácido del
estómago. No metaboliza carbohidratos. In vitro, desarrolla en medios enriquecidos con sangre,
almidón o yema de huevo, e inhibidores (Skirrow), en condiciones microaerófilas.

3. Especies: El género Helucobacter comprende dos grupos: Gástricos (H. pylori) y el

Enterohpático (H. cinaedi y H. fennelliae). habitan intestino y aisladas en pacientes con proctitis.

B. PODER PATÓGENO

H. pylori coloniza la mucosa gástrica. Para ello, neutraliza los ácidos del estómago por
acción del amonio, formado a partir de urea. La capacidad móvil le permite a la bacteria atravesar
el moco gástrico y fijarse en las células. La secreción de la citotoxina vacuolizante (VacA) hace que
la bacteria ingrese a las células; luego (gen cogA) se producen citocinas pro inflamatorias (IL 8),
que activan a los polinucleares y mononucleares para producir factor de necrosis tumoral y
superóxido, los que contribuyen a la inflamación de la mucosa gástrica y formación de úlcera. El
cuadro clínico más frecuente es la gastritis, que puede evolucionar a la cronicidad. La úlcera puede
localizarse entre el cuerpo y antro del estómago o parte proximal del duodeno.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: el estudio histológico de muestras obtenidas por biopsias gástricas tiene un

alto grado de sensibilidad y especificidad.

2. Cultivo: es poco práctico para uso en clínica. La determinación de la potente enzima

ureasa formada por el H. pylori, puede ser detectada por dos procedimientos: a) de
manera directa, en que la muestra obtenida por biopsia se pone en contacto con el
reactivo urea, y se apreciará en unos minutos el cambio de color del indicador por
alcalinización, debido a la formación de amonio; y b) de manera no invasiva (prueba del
aliento), en la que se detecta el CO2 con carbono radioactivo en el aire expirado del
paciente; luego de haber ingerido urea marcada con carbono radioactivo. El CO2, es el
producto de la degradación de la urea en el estómago por acción de la enzima ureasa,
producida por H. pylori. El paciente debe expirar en un detector de radioactividad.

3. Indirecto: La presencia de anticuerpos IgG e IgM en la sangre es poco útil en el diagnóstico

ya que los títulos persisten por mucho tiempo y no se correlacionan con la enfermedad.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

No hay vacuna. Para el tratamiento hay numerosos esquemas con antibióticos,

solos o combinados con bismuto. El uso de un macrólido (claritromicina), un betalactámico
(amoxicilina) y un inhibidor de protones (omeprazol) conjuntamente, es el esquema más
utilizado.

70
 CAPÍTULO 12
INFECCIONES ENTÉRICAS SECRETORAS
GÉNERO VIBRIO

VIBRIO

La familia Vibrionaceae agrupa a microorganismos que se encuentran ampliamente

distribuidos en la naturaleza, sobre todo en ambientes acuáticos, y son integrantes del
zooplancton marino. Son semejantes a las enterobacterias por ser bacilos Gram negativos,
aerobios y anaerobios facultativos y utilizar la glucosa via fermnentativa. Pero, se diferencian por
tener movilidad polar y poseer la enzima citocromo oxidasa. Se incluyen tres géneros: Vibrio,
Aeromona y Plesiomona.

En el género Vibrio, la especie patógena V. cholerae es endémica en la India, y ha sido el

agente causal de siete pandemias. Filippo Pacini hizo la primera descripción de esta especie en el
año 1854; en el Perú se diagnosticó por primera vez en el año 1991.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos curvados, tiñen como gramnegativos y son móviles
por un flagelo polar, que le otorga movilidad en dardo. El lípido A, del lipopolisacárido de
la pared, es la endotoxina; y la fracción polisacárido es el antígeno somático, base de la
clasificación en serogrupos. Algunas especies pueden formar cápsula, constituida por
polisacáridos.

2. Fisiología: son gérmenes aerobios y anaerobios facultativos, metabolizan glucosa por vía
fermentativa. Las especies de origen marino son halofílicas, luego necesitan
concentraciones elevadas de cloruro de sodio para desarrollar in vitro. Todas las especies
cultivan mejor a pH alcalino (8,0 – 9,0) y desarrollan con rapidez, debido a que el tiempo
de generación es de diez minutos. Son frágiles a la acidez y a temperaturas superiores a
60°C.

3. Clasificación: el género Vibrio está constituido por numerosas especies, las de mayor
interés médico son: V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. vulnificus, V. alginoliticus, V.
fluvialis, y V. furnissi. La especie V. cholerae se sub clasifica, en base al antígeno somático
O, hasta en 140 serogrupos.

4. Toxinas: todas las especies producen una toxina accesoria del cólera y un factor de
colonización. La especie V. cholerae, posee además el bacteriófago CTX, que se encuentra
integrado al cromosoma, el cual codifica la excresión de la toxina colérica; el mecanismo
de acción de la toxina es del tipo A-B.

71
B.PODER PATÓGENO

Vibrio cholerae

El hombre es el único reservorio. El serogrupo O1, es el responsable de las seis primeras

pandemias y el serogrupo 0139, de la última. Los vibrios cólera virulentos, son los portadores del
bacteriófago CTX, el cual codifica la síntesis de la exotoxina del cólera, con capacidad epidémica y
pandémica. Con fines epidemiológicos, es conveniente conocer que el serogrupo O1 tiene tres
serotipos: Inaba, Ogawa e Hikojima, y dos biotipos: el clásico y El Tor.

La infección por V. cholerae se produce por ingesta de agua o comida contaminada con
elevado número de bacterias (106-108), por lo tanto, la enfermedad se presenta, con más
frecuencia, en comunidades con condiciones sanitarias deficientes. Las bacterias se adhieren a la
mucosa del intestino delgado, por acción de los pilli y el factor de adherencia (cep), donde se
reproducen sin alterar el epitelio. Luego las bacterias producen la exotoxina, tipo A-B, que activa
la enzima adenilciclasa, la cual convierte el ATP en AMP cíclico, y éste secreta a la luz intestinal
gran cantidad de agua y electrolitos procedentes de la sangre. Los vibrios que no poseen el
bacteriófago CTX también ocasionan diarrea, por acción de la enterotoxina accesoria (ace), que
excreta líquidos; y la toxina oclusiva (zot) que relaja las uniones epiteliales de la mucosa del
intestino delgado incrementando la permeabilidad.

Los pacientes infectados con V. cholerae toxigénico sufren de diarrea intensa, acuosa, con
presencia de mucosidad, que toma el aspecto de “agua de arroz”. La pérdida de líquidos y
electrolitos ocasionan deshidratación, acidosis metabólica, shock e insuficiencia renal. Otros
serotipos de V. cholerae, denominados “no aglutinables con el antígeno O”, producen cuadros
diarreicos leves o infecciones extra intestinales.

Vibrio parahaemolyticus

Esta especie tiene como hábitat el mar, por lo tanto es halofílica. Se diferencia de otras
especies por la producción de una hemolisina termoestable, conocida como Kanagawa, que se
expresa produciendo colonias beta hemolíticas en el agar con sangre humana y no de carnero. El
mecanismo de acción de la enterotoxina se expresa incrementando la permeabilidad vascular.

El cuadro infeccioso se produce horas después de haber ingerido alimentos marinos

(mejillones, cangrejos, ostras, almejas, o pescado crudo) muy contaminados, con cuentas
bacterianas superiores a 106 bacterias, manifestándose con diarrea acuosa explosiva.

Vibrio vulnificus

Especie marina, cuya virulencia está en relación a la presencia de cápsula. El germen

ingresa por heridas contaminadas con agua de mar, para luego producir septicemia. Esta infección
tiene elevada mortalidad.

72
C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: la coloración de Gram de las heces es sólo orientadora, si bien los bacilos
adquieren formas curvadas, pero se confunden con otros bacilos gramnegativos.

2. Cultivo: las muestras deben ser procesadas lo más rápido posible, porque son muy
sensibles en medios ácidos. Depositar una alícuota de la muestra en caldo peptonado alcalino (pH:
8.6), luego de 4 a 6 horas sub cultivar en el medio selectivo agar tiosulfato-citrato-sales biliares-
sacarosa (TCBS). Las colonias desarrolladas deben producir la enzima citocromo oxidasa, luego se
identifican mediante pruebas bioquímicas y desarrollo en diversas concentraciones de cloruro de
sodio (halofilia). La especie V. cholerae metaboliza sacarosa. Las cepas aisladas sospechosas de
cólera deben ser confirmadas con el uso de antisueros.

3. Inmunoanálisis: Para detectar la presencia de toxina colérica, o el polisacárido O1 u

O139, en muestra de heces en la fase aguda de la enfernedad.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Se han desarrollado diversas vacunas para V.cholerae, pero no han sido efectivas. El
control de la enfermedad es posible mediante buenas condiciones sanitarias y adecuado manejo
de las aguas residuales.

El tratamiento del cólera es, básicamente, el buen manejo del equilibrio hidro electrolítico,
para evitar el shock hipovolémico y la acidosis. El antibiótico de elección es la azitromicina. Las
infecciones por V. vulníficus se controlan con la asociación de tetraciclina y fluoroquinolona.

AEROMONA

Son microorganismos que pertenecen a la Familia Vibrionaceae, con hábitat en

agua dulce, patógenos para animales de sangre caliente. Productor de una enterotoxina y
citotoxina. Causantes de gastroenteritis o infeccuión de heridas por contacto con agua
contaminada (residuales). Así mismo, se observa complicaciones infecciosas sistémicas con el uso
de sanguijuelas, en terapia de hematomas, pues, Aeromonas habita el intestino de éstos animales.

Se le diferencia de enterobacterias y vibrios marinos por no desarrollar en medios

hipertónicos y resistir la acción del compuesto químico fosfato diamino pteridina (O129).
Aeromona es productora de la enzima beta lactamasa, por lo que resiste a los antibióticos beta
lactámicos; por lo que se recomienda el uso de fluoroquinolonas.

73
 CAPÍTULO 13
BACTERIAS AMBIENTALES
GÉNEROS PSEUDOMONAS, ACINETOBACTER y LEGIONELLA

BACTERIAS AMBIENTALES

El medio ambiente que nos rodea es hábitat de microorganismos que, de alguna manera,
juegan un rol importante en nuestra vida; muchos de ellos se encargan de destruir los compuestos
orgánicos eliminados por nosotros, otros, se han integrado a nuestra flora microbiana normal y,
algunas especies han adquirido notoriedad al colonizar ambientes hospitalarios y ser potenciales
agentes infecciosos oportunistas.

Este grupo bacteriano lo constituyen diversas bacterias que tienen en común no

metabolizar la glucosa, o hacerlo por la vía oxidativa, y se le denomina “bacilos gramnegativos no
fermentadores”. Está integrado por los géneros Pseudomonas, Acinetobacter, Alcalígnes,
Moraxela, Flavobacterium, Stenotrophomonas, Burkholderia, Eikenella, etc. En las últimas décadas
las infecciones producidas por estos agentes son de gran preocupación, debido a la elevada
resistencia a los antibióticos.

Pseudomonas aeruginosa

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos gramnegativos, delgados, móviles por un flagelo

polar. No forman esporas. Algunas cepas poseen cápsula de polisacáridos, que dan el aspecto
mucoide a las colonias. La mayoría de cepas producen pigmentos difusibles como la pioverdina
(verde amarillento), piocianina (azul), de allí el término de bacilo piociánico, piorubina (rojo) y
piomelanina (negro). La presencia de pili les facilita la adhesión a las células epiteliales.

2. Fisiología: Son gérmenes que tienen gran capacidad para utilizar diversos compuestos
orgánicos como fuentes de carbono y nitrógeno. Son aerobios, pero pueden desarrollar en
anaerobiosis, cuando el medio contiene nitratos. Poseen, en la membrana citoplasmática, la
enzima citocromo oxidasa de gran ayuda para su identificación. In vitro cultivan bien, tanto a 37°C
como a 42°C. Estas bacterias soportan la acción de los desinfectantes, pero son frágiles al alcohol y
la desecación. P. aeruginosa posee numerosos plásmidos y fagos, que los transfiere por los
mecanismos de transducción y conjugación, lo que explica la producción de enzimas como las beta
lactamasas que le otorgan resistencia a diversos antibióticos.

3. Enzimas y toxinas: P. aeruginosa produce diversas sustancias que participan en los

mecanismos de patogenicidad, como:

74
a) Hemolisina: es la fosfolipasa C, con capacidad de destruir hematíes y leucocitos.
b) Exotoxina A: que altera la síntesis de proteínas, y se expresa por necrosis celular en los tejidos
infectados: quemaduras, córnea o tejido pulmonar.
c) Proteasas extracelulares: que degradan la elastina contenida en el tejido pulmonar y vascular,
ocasionando alteración de la función ciliar del epitelio bronquial y destrucción de los vasos
capilares.
d) Exoenzima S: que altera los mecanismos de defensa locales del huésped y facilita la
diseminación bacteriana.
e) Endotoxina: es la fracción lipídica del lipopolisacárido de la pared, que participa en las
alteraciones fisiopatológicas observadas en la septicemia, como fiebre, leucopenia, hipotensión y
coagulación intravascular diseminada.

B. PODER PATÓGENO

P. aeruginosa es un patógeno oportunista. Debido a la escasa exigencia para multiplicarse

se le encuentra en diversos ambientes: suelo, compuestos orgánicos en descomposición, áreas
húmedas (lavatorios, baños); o contaminando ungüentos, desinfectantes, gotas oculares; y
colonizando áreas húmedas de la piel (periné, axilas, oído, etc.). Es una de las principales causas de
infecciones adquiridas en el hospital. Para producir enfermedad necesita tener una puerta de
entrada y factores inmunitarios deficientes del huésped. Los primeros mecanismos utilizados por
la bacteria son: la fijación en los tejidos dañados, con la participación de los pili y el
lipopolisacárido; y luego la colonización para producir invasión local. La secreción de toxinas y
enzimas ofrecen la posibilidad de diseminarse sistémicamente.

Las infecciones más frecuentes son las producidas en la piel lesionada, como es el caso en
quemaduras, escaras de decúbito u otitis externa (oído del nadador). La colonización del tracto
respiratorio inferior se observa en pacientes con enfermedad pulmonar crónica, insuficiencia
cardiaca congestiva, fibrosis quística (enfermedad genética) o por el uso de equipos de asistencia
respiratoria. Las infecciones urinarias siempre están relacionadas con el cateterismo vesical. En el
ámbito hospitalario la bacteriemia por P. aeruginosa tiene elevada prevalencia, y se manifiesta con
lesiones dérmicas tipo ectima gangrenoso, a veces con vesículas que se necrosan, donde se
encuentran numerosos bacilos. Existen circunstancias predisponentes para adquirir infección por
P. aeruginosa, como es el caso de pacientes inmunodeprimidos y los que están recibiendo terapia
antibiótica prolongada.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: la presencia de bacilos gramnegativos en los frotices de heridas, es

sugestivo, en el contexto clínico del paciente.

2. Cultivo: la bacteria no es exigente, y es fácil recuperarla en medios de cultivo sencillos.

El reconocimiento de las colonias por el color (pigmentos), olor y aspecto es bastante orientador.
La identificación debe confirmar que se trata de un bacilo aerobio, oxidasa positiva, móvil polar,
no fermentador de glucosa.

75
D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

En la práctica hospitalaria es necesario el uso adecuado de material estéril para

tratamientos invasivos (respiradores, equipos de diálisis), así como fundamental, los cuidados por
el personal sanitario para evitar la contaminación cruzada de los pacientes; así mismo es
obligatorio el aislamiento de los pacientes con quemaduras infectadas o con septicemia.

P. aeruginosa suele presentar resistencia a la mayoría de los antibióticos, condición que la

adquiere por: a) proceso de inducción, generado por terapias antibióticas previas, b) transferencia
genética mediada por plásmidos y c) mutación de genes, que cambian las características de las
porinas. La elección del antibiótico requiere de la guía orientadora del antibiograma.

BURKHOLDERIA

Este género reagrupa a especies antes clasificadas como pseudomonas (cepacia, pseudomallei,
etc). Son bacterias patógenas oportunistas en pacientes susceptibles, Ejemplo: Fibrosis quística,
deficiencia de la actividad de los leucocitos, alcohólicos, nefropatías crónicas, etc). Al proceso
infeccioso se le deomina “meliodosis”. Una caracterísitica a considerara para la identificación, es
la sensibilidad “in vitro” a la suilfa-trimetoprim.

ACINETOBACTER

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología: estas bacterias tienen forma bacilar en cultivos que se encuentran en fase
exponencial, pero adquieren forma cocoide en cultivos con más de 24 horas de incubación; esta
variación hizo que, años atrás, recibiera diversas denominaciones. Son gramnegativos, no forman
espora ni cápsula y carecen de flagelos.

2. Fisiología: desarrollan con facilidad en medios de cultivo sencillos, son aerobios

estrictos. A diferencia de las Pseudomonas, carecen de la enzima citocromo oxidasa y pueden
producir acidez (vía oxidativa) a partir de glucosa. Se diferencian de la enterobacterias porque no
reducen los nitratos.

3. Clasificación: el género se divide en dos grupos, los que oxidan glucosa: A. baumannii, y
los que no lo hacen: A. lowffii y A. haemolyticus.

B. PODER PATÓGENO

Este microorganismo habita, en especial, en zonas húmedas del entorno hospitalario, y

puede sobrevivir en fomites secos por varios días. Se estima que un 25% de la población adulta

76
tiene alguna colonización en piel. No se han demostrado factores de virulencia inherentes al
Acinetobacter, luego el factor huésped juega un rol importante en el desarrollo de infecciones.

Como patógeno oportunista, se describen infecciones en vías respiratorias, vías urinarias,

heridas operatorias y septicemias.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Las infecciones por Acinetobacter suceden en pacientes que generalmente han recibido
terapias previas con antibióticos de amplio espectro, o han sido sometidos a ventilación mecánica.
El tratamiento es complicado y es indispensable tener la orientación del antibiograma.

LEGIONELLA

Son coco-bacilos gramnegativos, pleomorfos, aerobios estrictos, que para desarrollar “in
vitro” necesitan medios enriquecidos con L-cistina y hierro; no desarrollan en medio de agar
sangre. La especie L. pneumóphila, es la que origina la mayoría de las infecciones; la infección se
produce por inhalación de vapor de agua contaminada, a partir de estanques, fuentes
ornamentales, o sistemas de calefacción. Las bacterias invaden los macrófagos alveolares y células
epiteliales, donde se replican formando vacuolas intracelulares. Posteriormente los Linfocitos T
activan a los macrófagos para producir interferón y eliminar a als bacterias.

El proceso infeccioso se caracteriza por un cuadro sistémico con neumonía multilobar y

derrame pleural. Hay una forma de presentación atenuada, tipo gripal, llamada fiebre de Pontiac.
El diagnóstico se establece por la detección del antígeno bacteriano en la orina, empleando
procedimientos de inmunocromatografía o enzima inmunoensayo. Los títulos de anticuerpos se
incrementan con lentitud, luego son de utilidad tardía. El aislamiento de la bacteria se consigue
luego de 3 a 5 días, en medios especiales; para la identificación de las colonias se emplean
antisueros específicos. El tratamiento recomendado es el uso de macrólidos o fluoroquinolonas.

77
 CAPÍTULO 14
BACTERIAS ZOONÓTICAS
GÉNEROS BRUCELLA Y YERSINIA

BACTERIAS ZOONÓTICAS

Numerosas bacterias producen infecciones en animales domésticos o silvestres, que

pueden ser transmitidas al ser humano por diversos mecanismos, sea en forma accidental,
ingiriendo lácteos no pasteurizados, y/o por la intervención de un artrópodo. El médico debe
conocer la prevalencia de las infecciones que padecen los animales de la región en la que
desempeña sus actividades.

BRUCELLA

Bruce aisló este agente infeccioso en una paciente con “fiebre de Malta”, en 1886, y más
tarde, Bang, la identifica como agente causal de los abortos en el ganado vacuno. En los animales
vacuno, cabras, ovejas, cerdos y perros, la brucelosis es una infección crónica, que dura toda la
vida; la localización preferencial de la bacteria son los órganos de reproducción, debido al
contenido del azúcar eritrol. La Brucella se disemina por la orina, la leche y el producto de la
concepción del animal. La transmisión a humanos constituye un riesgo profesional, y se produce
en forma directa, por abrasiones cutáneas, o por la ingesta de productos lácteos no pasteurizados.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Forma y estructura: son coco-bacilos pequeños (0,5 – 1,5 µm), gramnegativos, no

poseen cápsula, no forman esporas y carecen de movilidad. El lipopolisacárido de la pared celular
es el principal determinante antigénico y el factor de virulencia.

2. Fisiología: todas las especies de Brucella son productoras de la enzima catalasa, pero
sólo algunas producen ureasa, citocromo oxidasa o hidrógeno sulfurado, y no todas tienen la
capacidad de crecer en presencia de los colorantes thionina y fucsina básica, todas éstas
cualidades permiten clasificarlas en biotipos; así mismo todas son frágiles al calor. Para el
aislamiento in vitro de la Brucella se necesita de medios enriquecidos y condiciones aeróbicas; en
aislamientos primarios, a partir de muestras patológicas (sangre o biopsia), es recomendable el
suplemento de CO2 en el ambiente y esperar períodos de 30 a 45 días para la formación de
colonias. En sub cultivos en el laboratorio desarrolla en 48 horas. Las colonias son pequeñas y lisas.

3. Clasificación: Cuatro especies de Brucella causan enfermedad en el humano, aunque los

estudios de ADN demuestran que todos pertenecen a una sola especie. La clasificación se
fundamenta en el anfitrión natural de cada una: B. abortus infecta el ganado vacuno; B. melitensis
a cabras y ovejas; B. suis a cerdos y renos; y B. canis a perros y zorros.

78
B. PODER PATÓGENO

Las vías de ingreso de Brucella son: la oral (productos lácteos) o las mucosas (heridas de
piel o conjuntiva). En el organismo la bacteria favorece los mecanismos de quimiotaxis para atraer
a los polinucleares y facilitar su fagocitosis; dentro de ellos puede sobrevivir y multiplicarse,
inhibiendo la actividad de la peroxidasa y superóxido dismutasa. Las bacterias son transportadas al
sistema RES (bazo, hígado, médula ósea y ganglios linfáticos), donde se reproducen. El
lipopolisacárido, factor de virulencia, es un potente antígeno que estimula la respuesta de
anticuerpos en el huésped, los que son de gran utilidad para establecer el diagnóstico, cuando el
aislamiento del agente causal es infructuoso.

En humanos la especie B. melitensis es la más agresiva, ocasionando enfermedad aguda,

que puede llevar a la cronicidad. El inicio es lento y la sintomatología inespecífica, correspondiente
a un proceso infecciosos general. La fiebre puede presentarse por períodos (ondulante), y es
frecuente la presencia de visceromegalia (hígado y bazo), así como el compromiso osteoarticular.

La infección en los animales corresponde básicamente a la esfera genital (útero, placenta,

epidídimo) y glándulas mamarias; la transmisión es por vía sexual.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: este estudio no tiene utilidad, debido al tamaño tan pequeño de la

bacteria y la ubicación en los tejidos.

2. Cultivo: las muestras para el aislamiento de Brucella pueden ser: sangre (hemocultivo),
médula ósea (mielocultivo), líquidos orgánicos (articular o LCR) y biopsia hepática; el momento
recomendado para tomar la muestra es durante la etapa febril. El medio de cultivo ideal para el
aislamiento es el “bifásico de Ruiz Castañeda”, preparado a base de tripticase de soya y que
contiene dos fases, una solida y una líquida. El cultivo se incuba a 37°C hasta por 45 días, en un
ambiente conteniendo el 10% de CO2. Observar la presencia de colonias en la fase sólida.

3. Diagnóstico indirecto: en todos los pacientes infectados con Brucella hay respuesta
humoral. Al inicio se presenta la Inmunoglobulina M, luego las Inmunoglobulinas G y A. La
determinación del título de anticuerpos se realiza mediante técnicas de aglutinación, Rosa de
bengala o de enzima inmuno ensayo (ELISA). En procesos crónicos, el título de las
inmunoglobuilinas es fundamental para el diferenciar una reagudización de una reinfección.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La brucelosis humana se puede prevenir consumiendo productos lácteos pasteurizados y

mediante el control de la enfermedad en el ganado, por vacunación o eliminación de los animales
infectados. El personal de los laboratorios y los trabajadores de los mataderos, deben cumplir con
las medidas de seguridad adecuadas para evitar el contacto con sus mucosas.

El tratamiento antibiótico de elección es la asociación de Doxiciclina y Rifampicina.

79
YERSINIA

El género Yersinia está considerado como miembro de las enterobacterias. Las yersiniosis
son infecciones propias de los roedores, cerdos y aves; el ser humano es un huésped accidental. La
infección en el ser humano se denomina peste bubónica, que tiene carácter epidémico,
ocasionada por la especie Y. pestis. La primera pandemia se presentó en el siglo VI en Egipto. La
que se produjo en el siglo XIV, se le llamó “peste negra”, que se estima provocó la muerte de la
cuarta parte de la población de Europa; y la última pandemia se inició en la década del 1890,
involucrando a China y América. Al Perú llegó a inicios del año 1903. Correspondió a A. Yersin
describir el agente etiológico en el año 1894. El principal reservorio es la rata urbana, la rata
silvestre y las ardillas, con su vector de transmisión la pulga Xenopsylla cheopis.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Forma y estructura: son bacilos gramnegativos, que se colorean con más intensidad en
los extremos de la bacteria, dando la imagen de tinción bipolar. Poseen cápsula, cuyo contenido es
el antígeno antifagocítico. No forma esporas ni posee flagelos. La bacteria contiene tres clases de
plásmidos relacionados con la patogénesis de la enfermedad: el más pequeño, codifica la proteasa
Pla, que disuelve los coágulos; el de tamaño intermedio, codifica proteínas que interfieren la
fagocitosis; y el plásmido más grande, codifica la proteína F1, constituyente de la cápsula.

2. Fisiología: este microorganismo desarrolla en aerobiosis; en los medios líquidos forma

una delgada película en la superficie, sin enturbiar el líquido; y en los medios sólidos, las colonias
son pequeñas y mucoides. La temperatura óptima para su desarrollo es de 28°C, aunque lo hace
incluso a 45°C.

3. Clasificación: el género Yersinia tiene tres especies de interés médico: Y. pestis, Y,

enterocolítica y Y. pseudotuberculosis. La diferenciación entre ellas obedece a la diferente
patología que producen y a características metabólicas propias, así: las dos últimas son móviles a
25°C y metabolizan urea; Y. pseudotuberculosis metaboliza sacarosa; y Y. pestis metaboliza lactosa.

B. PODER PATÓGENO

Los roedores infectados son el reservorio de la peste, las pulgas que parasitan a estos
roedores constituyen el vector principal al picar accidentalmente al ser humano. En el vector, las
bacterias se multiplican con tanta intensidad que llegan a obstruir el canal digestivo, de tal manera
que, cuando ésta pica a un nuevo huésped e intenta ingerir sangre, regurgita los microorganismos
en el nuevo huésped. En la sangre, Y. pestis, es fagocitada por los macrófagos, donde resiste su
destrucción e incluso se multiplica dentro de ellos, gracias a los siguientes factores de virulencia:
presencia de cápsula, secreción de proteínas que inician la apoptosis celular y de proteasas (Pla)
que activan el plasminógeno, el cual degrada los coágulos de fibrina, facilitando la diseminación
sistémica.

El paciente con peste bubónica presenta fiebre, cefalea e incremento del tamaño de los
ganglios de la región donde se produjo la picadura, que se tornan dolorosos y con la piel caliente

80
(bubón). Los pacientes presentan bacteriemias intermitentes, que llevan al shock séptico. La
diseminación hematógena se complica con neumonía secundaria, la que es sumamente contagiosa
por vía aérea.

Desde el punto de vista epidemiológico se señalan dos formas de peste: la salvaje, de

distribución universal, ubicada en nichos ecológicos naturales; y la urbana, que se presenta cuando
las pulgas de las ratas domésticas están infectadas, con riesgo de producir la peste humana.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: cuando la muestra proviene de punción ganglionar (bubón), se observa

con facilidad gran número de bacilos gramnegativos; mejor aun, si se utiliza la técnica de
fluorescencia directa.

2. Cultivo: el germen desarrolla en caldo peptonado o agar nutritivo, luego de 48 horas de

incubación a 30°C. La identificación se realiza mediante estudios metabólicos en diversos
sustratos (similar a los que se emplea para enterobacterias). Debe realizarse la confirmación
diagnóstica de las colonias aisladas, la cual se realiza al observar la lisis de las colonias por acción
del bacteriófago específico.

3. Indirecto: se suele buscar la presencia de anticuerpos que producen hemaglutinación de

hematíes sensibilizados con antígeno de Y. pestis.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La prevención es el resultado de medidas higiénicas ambientales, como: control de los

roedores, manejo de la basura y uso de insecticidas. Existe una vacuna, de tipo inactiva,
recomendada para uso en las personas expuestas en los laboratorios y para el control de las
epidemias; esta vacuna ofrece una protección parcial y de corto plazo. Se recomienda el uso de
tetraciclina como medida preventiva. El tratamiento clásico ha sido el uso de estreptomicina, una
buena alternativa es la tetraciclina; en casos de meningitis se recominda el cloranfenicol.

81
 CAPÍTULO 15
BACTERIAS INVASIVAS CON VIDA INTRACELULAR
GÉNEROS BARTONELLA Y LISTERIA
_______________________________________________________________________________
BARTONELLA

El género Bartonella está formado por bacterias muy pequeñas, que tienen la
particularidad de parasitar los hematíes y las células endoteliales y, ser transmitidas por vectores.
En la actualidad se conocen 29 especies. La especie representativa que infecta al humano es
Bartonella bacilliformis, agente causal de la enfermedad de Carrión o Bartonelosis humana,
descrita por primera vez, en el año 1905, por el Dr. Alberto Barton, durante la construcción del
ferrocarril central en Lima.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos gramnegativos de 1 a 3 µm. de largo, algunas veces

adquieren la forma cocoide. No forman cápsula ni esporas. Son móviles por flagelos (2-16)
ubicados en un polo.

2. Fisiología: son bacterias aerobias, inactivas frente a los azúcares, oxidasa y catalasa
negativas. Para desarrollar in vitro es necesario cultivarlas en medios con sangre e incubarlas a
29°C, con atmósfera enriquecida en CO2 No se aprecia turbidez en los medios líquidos, pero en los
sólidos se observan pequeñas colonias lisas brillantes y poco adherentes, a partir de los 15 a 30
días de incubación.

3. Clasificación: Las diversas especies han sido identificadas según el reservorio, el vector,
entidad nosológica o por características del ADN, siendo las de mayor importancia en medicina
humana:

a) B. bacilliformis, con el vector Lutzomyia verrucarum, agente de la bartonelosis

b) B. henselae, con la pulga como vector, agente de la angiomatosis por arañazo de gato
c) B. quintana, que tiene como vector el piojo del cuerpo, agente de la fiebre de las
trincheras

Bartonella bacilliformis

B. PODER PATÓGENO

Es el agente causal de la bartonelosis. Enfermedad que se presenta esencialmente en los

valles de las zonas montañosas de la cordillera de los Andes en Perú, Ecuador y Colombia (500 a
3,200 msnm), con un clima cálido y aire enrarecido (zona verrucógena). En estas zonas vive el
vector, Ludzomyia verrucarum, mosquito hematófago de hábito nocturno, descrito por A. Herrer
en 1962. El hombre es el reservorio de este agente infeccioso.

82
 La enfermedad tiene dos fases de presentación clínica, como lo demostró Daniel Carrión
con su sacrificio. La fase aguda, hemática (Fiebre de la Oroya), que se produce luego de la picadura
del vector; las bacterias alcanzan el torrente sanguíneo e invaden el endotelio vascular, donde se
reproducen. Las nuevas bacterias colonizan los eritrocitos, deforman la membrana citoplasmática
por acción de los antígenos flagelares, y penetran en su interior; éstos eritrocitos son fagocitados
por el sistema del RES (bazo, hígado y ganglios). La expresión clínica de esta fase es: fiebre, anemia
aguda, visceromegalia, compromiso de otros órganos y, sobre-infecciones microbianas.

La fase eruptiva (Verruga Peruana), se presenta en especial en niños y adultos jóvenes

moradores de las zonas verrucógenas. Luego de un período de semanas o meses, de haber
presentado la fase hemática (a veces no se refiere éste evento), el paciente presenta lesiones
dérmicas, que pueden ser: a) pequeñas de tipo miliar, b) nodulares subdérmicas, con formación de
neocapilares y c) lesiones mulares, de tamaño superior a 5 mm, sésiles, sangrantes. Estas lesiones
corresponden a proliferación de las células endoteliales y macrófagos; las que desaparecen sin
dejar cicatriz luego del tratamiento.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: Es útil, sólo en la fase hemática o aguda de la infección por B. bacilliformis.

En los frotices de sangre periférica, coloreados con Wright o Giemsa, se observan los bacilos
dentro de los hematíes.

2. Cultivo: Se recomienda utilizar medios sólidos enriquecidos con sangre e incubarlos en

ambiente con CO2 durante dos a seis semanas, B. bacilliformis desarrolla mejor a 29°C. Técnicas
de PCR e hibridación del ADN son empleadas con éxito para el diagnóstico.

3. Diagnóstico indirecto: la serología, empleando la inmunofluorescencia indirecta, es útil,

mejor aun la técnica de Western Blot.

4. En la fase eruptiva, la biopsia, es el procedimiento de elección, empleando técnicas de

inmunohistoquímica,

Bartonella henselae

Son microorganismo de distribución mundial entre los gatos, que tiene como vector a la
pulga. La transmisión a humanos es posible por contaminación de las garras del gato con
excremento de la pulga y la inoculación al momento del arañazo. La lesión inicial es local con
presencia de angiomas en el trayecto de la inoculación, luego los gérmenes son transportados por
los macrófagos a los ganglios linfáticos, donde generalmente se detiene la enfermedad. En los
casos de bacteriemia hay dos complicaciones: 1. La angiomatosis bacilar, que es la proliferación
lobulillar de los vasos sanguíneos, con contenido de células endoteliales cuboides entremezcladas
con neutrófilos, que involucra piel y ganglios regionales, y 2. La peliosis hepática, que es la
formación de quistes hepáticos llenos de sangre. El diagnóstico se puede establecer por la
determinación de anticuerpos mediante la técnica de ELISA, y el uso de la técnica de PCR.

83
Bartonella quintana

La enfermedad producida por esta bacteria es conocida desde la primera guerra mundial
como fiebre de las trincheras o fiebre quintana, por producir fiebre recurrente con cinco días de
duración. El paciente puede presentar angiomatosis en el subcutáneo, huesos o endocarditis. El
hombre es el reservorio y el piojo del cuerpo, el vector. El diagnóstico se establece por cultivo en
agar sangre incubado a 35°C a partir de muestras de sangre o tejidos. También se buscan
anticuerpos con técnicas ELISA e Inmunofluorescencia.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

No hay vacuna para ninguna forma de bartonelosis. Evitar el contacto con los vectores. En
el caso de la enfermedad de Carrión, hacer uso de mosquiteros cuando se pernocta en zonas
verrucógenas; tener en consideración que la población de mosquitos se incrementa en horas
posteriores a las lluvias. Las heridas producidas por arañazo de gato, deben limpiarse con jabón y
antisépticos.

La fase aguda (hemática) de la enfermedad de Carrión se trata con cloranfenicol o

tetraciclina, aunque es susceptible a diversos antibióticos. En la fase dérmica (verruga) se
recomienda el uso de azitromicina. En los casos de infecciones por otras especies de Bartonella se
puede utilizar azitromicina o fluoroquinolonas.

LISTERIA

Las bacterias miembros del género Listeria se encuentran ampliamente distribuida en la

naturaleza, como en el suelo, los vegetales e integrando la flora fecal de muchos animales. La tasa
de recuperación de Listeria en los cultivos de alimentos no procesados, como vegetales crudos,
leche, carnes de pollo o de vaca, está en el rango de 15% al 70%. La especie Listeria
monocytogenes tiene propiedades biológicas propias, como la capacidad de reproducirse a
temperaturas de refrigeración (4°C) y en medio salino; lo que hace posible se mantenga viable en
alimentos adecuadamente conservados, y explicar su rol patógeno. A pesar de su presencia en
intestino de animales domésticos como pollo, conejo, oveja, la incidencia de cuadros clínicos en el
ser humano es escasa y muy selectiva en grupos humanos, como en gestantes y en recién nacidos.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos grampositivos finos, cortos, en pares o en cadenas

cortas, no forman espora ni cápsula y sólo son móviles a temperatura ambiental (22° - 26°C).

2. Fisiología: L. monocytogenes desarrolla con facilidad en los medios de cultivo, es

aerobio y micro aerófilo, puede cultivar desde los 4°C hasta los 45°C. En medio semisólido
inoculado por puntura e incubado a medio ambiente, se puede apreciar desarrollo unos
milímetros debajo de la superficie (en sombrilla). Las colonias son pequeñas, que se presentan
desde las 24 horas de incubación. En medios con sangre las colonias muestran una discreta zona
de hemólisis tipo beta.

84
 3. Clasificación: se describen 19 especie de Listeria, pero sólo L. monocytogenes es
patógena para el hombre. Se reconocen 13 serotipos basados en el antígeno somático O y flagelar
H; sin embargo la mayoría de casos clínicos se deben a los serotipos 4b, 1/2a y 1/2b.

B. ROL PATÓGENO

La infección se produce por la ingesta de alimentos contaminados con heces de mamíferos

o aves (carne poco cocida y vegetales crudos), leche no pasteurizada o queso fresco. Las bacterias
se adhieren a los enterocitos y células de placa de Peyer, penetran dentro de ellos y se
reproducen; luego migran hacia la membrana celular para ingresar a la célula contigua o a los
macrófagos. Dentro de los macrófagos perforan el fagosoma y se liberan al citoplasma celular;
invaden el torrente sanguíneo y el paciente presenta síntomas de bacteriemia.

La endotoxina de la Listeria es la responsable del fenómeno de Anton, (conjuntivitis

experimental en el conejo), así como del incremento de los leucocitos mononucleares en sangre
periférica durante el cuadro agudo febril (origen del nombre monocytogenes). La capacidad del
germen de vivir dentro de los macrófagos, donde evade la actividad de los anticuerpos, explica la
predilección de infecciones en adultos con deficiencia en inmunidad celular.

La bacteria tiene predilección por el tejido placentario y sistema nervioso. Las gestantes
son el grupo humano más afectado, presentando aborto en el tercer trimestre del embarazo con
parto prematuro o feto muerto. El recién nacido puede adquirir la infección dentro del útero y
presentar la infección generalizada al nacer; o tardíamente, luego de dos semanas de nacido. Otra
forma de presentación es la meningitis en adultos con compromiso del sistema inmune.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: este procedimiento tiene limitaciones, porque en muestras biológicas es

posible confundirlo morfológicamente con corynebacterias, estreptococos o lactobacilos.

2. Cultivo: el aislamiento se realiza en medios de agar nutritivo o Mueller Hinton, donde

forma colonias pequeñas a las 48 horas de incubación. La demostración que son bacilos
grampositivos móviles sólo a temperatura ambiental (22°C a 26°C) e inmóviles a 37°C. es
patognomónico, así como la hidrólisis de la esculina. En muestras de biopsia o secreción de cuello
uterino, se recomienda inocular la muestra en caldo peptonado e incubarlo en refrigeración (4°C)
durante cuatro semanas, para luego hacer resiembra en medio selectivo. Las técnicas
moleculartes se emplean para estudios en brotes epidémicos.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La recomendación preventiva es evitar comer alimentos crudos o no procesados; los

vegetales empleados para ensaladas deben ser adecuadamente lavadas.

El tratamiento de elección es la asociación de ampicilina con gentamicina, se tiene como

alternativa al sulfametoxazol con trimetoprim.

85
 CAPÍTULO 16
BACTERIAS ANAEROBIAS
GÉNEROS BACTEROIDES Y CLOSTRIDIUM

BACTERIAS ANAEROBIAS

El conocimiento de la existencia de bacterias anaerobias es muy antiguo, pero

correspondió a L. Pasteur en 1861, con el Clostridium butyricum, demostrar el fenómeno de la
anaerobiosis; y a Levy en 1891, reportar el primer caso clínico de infección por una bacteria
anaerobia. Las bacterias anaerobias estrictas son aquellas que no utilizan al oxígeno como
receptor final de electrones, debido a la carencia de enzimas transportadoras de oxígeno, como: la
catalasa, que cataliza la reacción: 2H2O2 … … 2H2O + O2 ; o la peroxidasa, que cataliza la reacción:
NADH + H2O2 … … NAD + O2 ; o la superóxido dismutasa, que cataliza la reacción: O2 + O2 + 2H ……
H2O2 + O2. Algunas especies bacterianas son aero tolerantes, por tener escasa concentración de
radicales de superóxido dismutasa.

La flora bacteriana autóctona del cuerpo, está constituida predominantemente por

gérmenes anaerobios, incluso en zonas expuestas al aire, como la boca, la nariz o la piel; esto es
explicable por el consumo de oxígeno de las bacterias aerobias presentes, y por los
microambientes con bajo potencial de óxido reducción. La función más importantes de la flora
autóctona es impedir la colonización de los patógenos; así, especies de Propionibacterium
presentes en la piel, hidrolizan triglicéridos y producen ácidos grasos libres, los que inhiben a los
estafilococos; o como en el intestino delgado, los anaerobios producen ácidos grasos volátiles que
inhiben la multiplicación del E. coli.

La mayoría de infecciones producidas por anaerobios son de origen endógeno, y surgen de

la flora autóctona, por ello, Bacteroides fragilis es la especie que se aisla con más frecuencia en
clínica. Las de origen exógeno son las producidas por clostridium, que se presentan posteriores a
un traumatismo, o generadas por la ingesta de exotoxina pre formada. Hay condiciones del
paciente que favorecen una infección por anaerobios, como es el caso del uso de dispositivos
intrauterinos, la formación de úlceras de decúbito; o infecciones producidas por mordedura,
trauma peri odontal, neumonía por aspiración; o por shock, trauma, frío, que disminuyen la
oxigenación en los tejidos. Algunas especies de anaerobios producen enzimas como la
hialuronidasa, colagenasa, lecitinasa o fosfolipasa, que participan en el desarrollo de la infección.

La clasificación de los anaerobios es un tanto confusa, nosotros los vamos a agrupar en dos
categorías, los que no forman esporas y los que sí las forman.

86
ANAEROBIOS NO ESPORULADOS

Este grupo de bacterias está constituido por una diversidad muy grande de especies; la
mayoría de ellas colonizan la piel, las mucosas (oral, nasal, genital), las vías respiratorias, las vías
urinarias y el tracto digestivo. Son patógenos oportunistas, y en muestras clínicas suelen
encontrarse asociadas con gérmenes aerobios. Con fines didácticos se les estudia en dos grupos,
de acuerdo a la coloración con el Gram.

Bacterias anaerobias no esporuladas grampositivas:

1. Cocos: causan infecciones cuando se localizan en zonas normalmente estériles (senos

paranasales, parénquima pulmonar, cavidad intra abdominal, endometrio, celular
subcutáneo, etc.). El género más abundante es el Peptoestreptococcus, formado por diez
especies. El segundo género es el Peptococcus, dentro del cual se ubican algunas especies
aerotolerantes.
2. Bacilos: son un grupo heterogéneo, se describen como más frecuentes:
a) Propionibacterium: habita la piel y es productor de ácido propiónico; es el
contaminante aislado con más frecuencia en muestras obtenidas por punción de la piel. Se
identifica como causa en infecciones en prótesis, abscesos cerebrales, dentales,
osteomielitis y acné. Su aislamiento amerita evaluación de la toma de las muestras.
b) Bifidobacterium y Eubacterium: son habitantes de la mucosa intestinal, y contribuyen a
la defensa del huésped. Se les ha encontrado como causa de peritonitis, abscesos
cerebrales y bacteriemias en procesos malignos.
c) Mobiluncus: bacilo curvado, que se encuentra en mujeres con vaginosis bacteriana.

Bacterias anaerobias no esporuladas gramnegativas:

1. Cocos: el género Veillonella es el representante de este grupo, siendo la especie V.Parvula

la que se encuentra como habitante normal en la boca, vías aéreas superiores y vagina. El
rol patógeno es difícil de definir y se le encuentra como parte de un proceso infeccioso
polimicrobiano.
2. Bacilos: el género Bacteroides es el integrante más importante de la flora bacteriana
normal del intestino y de la vagina. Se mencionan diversos factores de virulencia, como:
cápsula, pili y lipolisacáridos, que contribuyen a la formación de abscesos; así como la
formación de ácido succínico que impide la fagocitosis. Son responsables de abscesos
cerebrales, infecciones de cavidad oral, intra abdominal, tracto genital femenino,
osteomielitis, etc.
a) Bacteroides fragilis: son bacilos pleomorfos, que colorean débilmente con el Gram,
forman colonias brillantes no hemolíticas y desarrollan en presencia de bilis.
b) Prevotella melaninogénica: se ubica en los surcos gingivales; en los cultivos produce
colonias de color negro.
c) Fusobacterium: son bacilos delgados con los extremos afilados, habitantes de vías
respiratorias altas.

87
ANAEROBIOS ESPORULADOS

El género Clostridium se define como bacilos grampositivos, anaerobios, formadores de

esporas deformantes y productores de exotoxinas. Todos son habitantes naturales del suelo,
aguas residuales e integrantes de la flora microbiana en intestino del hombre y de los animales.
Pocas especies son patógenas para el ser humano, las de mayor interés médico son:

1. Clostridium tetani
2. Clostridium histotóxicos
3. Clostridium botulinum
4. Clostridium enterotóxicos
Otros Clostridium de interés: Cl. septicum, Cl. sordelli y Cl. Tertium, Cl. hystoliticum

Clostridium tetani

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Forma y estructura: son bacilos de 2 a 4 µm de largo, grampositivos, móviles por

flagelos peritricos, la espora es terminal deformante que semeja al palillo de tambor, muy
resistente al medio ambiente y pueden germinar en tiempo indefinido; por el contrario, la forma
vegetativa es muy frágil a las variaciones ambientales.

2. Fisiología: es una bacteria anaerobia estricta, no metaboliza carbohidratos.

3. Toxinas: es productor de dos exo toxinas: a) la tétanolisina, polipéptido producido

durante la fase exponencial de reproducción del bacilo, lábil al oxígeno, a la acidez, a la alcalinidad
y con capacidad de producir lisis celular, responsable de la hemólisis que muestran las colonias en
los cultivos; y b) la tétanoespasmina, péptido codificado por un plásmido, que se libera durante la
lisis bacteriana, es una toxina tipo A-B que bloquea la liberación de la Glicina (neurotransmisor) en
las sinapsis inhibidoras, produciendo hiperactividad motineural, que se expresa por espasmo
muscular y parálisis espástica.

Nota: contracción muscular normal: La acetil colina induce la contracción muscular. La glicina
bloquea la liberación de acetil colina, produciendo relajación muscular.

B. PODER PATÓGENO

El Clostridium tetani se encuentra en el suelo fértil y en el intestino del hombre y de

muchos animales. Es un oportunista no invasivo. La espora ingresa por una herida traumática
sucia, producida por un elemento punzante: astilla, picadura de insectos, mordedura de animales,
inyectable, cirugía de hemorroides, etc., que, en condiciones anaeróbicas locales, se revierte a la
forma vegetativa. Sin crear lesión inflamatoria local, elabora las exotoxinas que se difunden vía
sanguínea o neural ocasionando espasmo muscular.

88
 Luego de unos días de la inoculación, los músculos maseteros muestran contracción
(trismus), seguido por irritabilidad, sudoración y espasmos de los músculos más potentes como
bíceps y para vertebrales. En el recién nacido se asocia a la contaminación del muñón del cordón
umbilical y ocasiona espasmo generalizado. La unión de la exotoxina con su receptor es
irreversible, luego la recuperación está en relación a la formación de nuevos terminales axonales.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: no tiene utilidad, debido al escaso número de bacterias en la herida es

imposible observarlas.

2. Cultivo: es necesario que la muestra sea obtenida por biopsia, y el proceso de cultivo
sea de inmediato y en condiciones anaeróbicas. La muestra es depositada en medio líquido
(thioglicolato) y el desarrollo es lento. Cultivos negativos no niegan la presencia del C. tetani .

3. Indirecto: La determinación de toxina o antitoxina en el suero del paciente es negativa,

la primera porque está adherida en los receptores y la segunda porque no hay tiempo suficiente
para la formación de anticuerpos.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La prevención se realiza con la vacunación de toxoide tetánico, la que es obligatoria con la

vacuna triple o penta. Existe una vacuna independiente para casos de urgencia.

El tratamiento de la herida es fundamental para la prevención, que consiste en limpieza

quirúrgica de la lesión y la administración de antibiótico tópico. Luego, la vacunación pasiva con
inmunoglobulinas antitetánicas y la vacunación con toxoide tetánico.

Clostridium histotóxicos (C. perfringes)

Son un grupo de clostridium que habitan el suelo en estado esporulado; ingresan al

organismo por heridas traumáticas contaminadas con tierra (accidentes automovilísticos, heridas
de bala, heridas por explosiones). Muchas de estas especies son aerotolerantes, pero la especie
que con más frecuencia produce infecciones en humanos, es el Clostridium perfringes. El cuadro
clínico corresponde a la denominada gangrena gaseosa, que compromete los tejidos celular
subcutáneo y muscular.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos grandes que pueden tener hasta 15 µm de largo,
grampositivos, inmóviles, poco formadores de esporas ovaladas y centrales; poseen una delgada
cápsula.

2. Fisiología: es un germen aerotolerante que desarrolla rápidamente en los medios en

condiciones anaerobias. En agar sangre, las colonias son grandes y presentan doble halo de

89
hemólisis, el halo interno es completo y corresponde a la toxina iota; en cambio el halo externo es
incompleto y corresponde a la acción de la toxina alfa. Es productor de lecitinasa, lipasa, fermenta
carbohidratos, hidroliza gelatina y digiere la caseína de la leche; todas estas características
permiten diferenciar a las diversas especies de clostridium. La producción de lecitinasa se
demuestra in vitro, por la presentación de un precipitado alrededor de las colonias en el medio
agar yema de huevo, la misma que debe ser inhibida por el anticuerpo específico.

3. Enzimas y toxinas: Es productor de diversas toxinas, siendo las más importantes:

Toxina alfa: capaz de lisar eritrocitos, plaquetas, leucocitos y células endoteliales, produce
destrucción tisular muscular, toxicidad hepática y miocárdica; es la responsable de la hemólisis
masiva. Toxina beta: produce necrosis de la mucosa intestinal, que evoluciona a enteritis
necrosante. Toxina épsilon: es activada por la tripsina e incrementa la permeabilidad vascular de la
pared del tubo digestivo. Toxina iota: con actividad de necrosis tisular. Enterotoxina: que se une a
los receptores del epitelio del intestino delgado y altera la permeabilidad, produciendo pérdida de
líquidos; la tripsina activa la capacidad tóxica.

4. Clasificación: todas las cepas de C. perfringes no poseen la totalidad de los factores de

virulencia, lo que ha permitido distinguirlas en tipos: A, B, C, D y E.

Tipo /Toxina alfa beta epsilon iota

A ++ -- -- --
B ++ ++ ++ --
C ++ ++ -- --
D ++ -- ++ --
E ++ -- -- ++

Tabla: 16-1: Tipos de toxina del C. perfringes

B. PODER PATÓGENO

El Clostridium perfringes tipo A, es el que ocasiona la mayoría de infecciones en el hombre:

a) Infecciones del tejido blando: que tienen como punto de partida infecciones de heridas
(traumáticas o quirúrgicas), iniciándose como una celulitis, que luego puede evolucionar a
miositis o mionecrosis. El tejido afectado muestra edema, con presencia de gas en los
tejidos (gangrena gaseosa). Otras especies de clostridium (septicum, hystoliticum, novy,
sporógenes, sordelli, etc) también pueden estar involucrados en este síndrome.
b) Sistémico: producido por bacteriemias, como consecuencia de cirugía abdominal o legrado
uterino, que ocasionan diseminación y hemólisis intra vascular, con compromiso renal.
c) Infecciones alimentarias: son consecuencia del consumo de carnes altamente
contaminadas y conservadas a temperatura de 40°C a 60°C; condiciones en las que las
esporas germinan. El síndrome ocasionado corresponde a la enteritis necrotizante, siendo
el Clostridium perfringes tipo C el agente etiológico.

90
C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: el frotis de la secreción de heridas, coloreado con Gram, es muy útil, dado
que el germen es de tamaño grande y la ausencia de respuesta inflamatoria contribuyen a la
orientación diagnóstica.

2. Cultivo: la bacteria desarrolla fácilmente en los medios de cultivo, obteniendo

aislamientos a las 24 horas de incubación. Para la identificación hay que observar la doble
hemólisis de las colonias en el agar sangre y demostrar la producción de lecitinasa en agar yema,
que serán inhibidas por acción de antisueros.

3. Indirecto: En sospecha de enterocolitis por clostridium, la búsqueda de la enterotoxina

por procedimientos de inmuno análisis, es lo adecuado.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

El cuidado de las heridas traumáticas puede evitar la contaminación por Clostridium.

El tratamiento de la gangrena gaseosa es la cura quirúrgica de la lesión, con eliminación

del tejido necrosado. El antibiótico de elección es la Penicilina a altas dosis.

Clostridium botulinum

El término botulismo viene de “botulus” o embutido, por la relación entre la intoxicación

con la ingesta de embutidos. Fue Von Ermengem en 1897, quien describió al Clostridium
botulinum y demostró la elaboración de la toxina. Las esporas del germen se encuentran
ampliamente distribuidas en suelo, agua de riego, contaminando las frutas y legumbres; así como
en el sedimento marino, por lo que se le encuentra en alimentos marinos enlatados. La
enfermedad es una intoxicación, producida por la ingesta de la toxina preformada en los
alimentos, ocasionando parálisis flácida.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos grampositivos grandes (2 a 20 µm), móviles, cuyas

esporas son sub terminales deformantes, muy resistentes, soportan 100°C durante 2 a 3 horas y
120°C durante 5 minutos. En cambio, la forma vegetativa es muy sensible a las temperaturas, se
destruye en 30 minutos a 60°C.

2. Fisiología: son anaerobios estrictos, muy exigentes para el desarrollo in vitro, son
formadores de enzimas proteolíticas, toxinas y tienen actividad frente a diversos azúcares.

3. Enzimas y toxinas: se describen siete toxinas (A … G), con estructura similares, pero con
diferencias antigénicas. Las toxinas A, B, E y F producen enfermedad en el ser humano, la C y D en

91
los animales. La toxina es un péptido, codificado por un fago, que se libera con la lisis bacteriana,
de tipo A-B, que actúa a nivel pre sinapsis de la placa mioneural, donde bloquea la liberación de
acetilcolina, produciendo parálisis flácida. La toxina es termolábil (se destruye en 10 minutos a
100°C), pero resistente a la acidez gástrica, lo cual explica su absorción digestiva y la presentación
clínica de la intoxicación alimentaria.

B. PODER PATÓGENO

El botulismo es una intoxicación, debido a la ingesta de alimentos procesados en

conservas, donde las esporas germinaron en condiciones anaeróbicas y liberaron la exotoxina. La
toxina resiste la digestión gástrica y es absorbida en el intestino delgado, luego se adhiere a los
nervios motores de los pares craneales. Las manifestaciones clínicas se presentan luego de 12 a 36
horas de haber ingerido el alimento, con vómitos, visión borrosa, midriasis, flacidez del párpado
superior, disfagia, disartria y luego debilidad de los miembros superiores e inferiores. La
recuperación es lenta y la mortalidad elevada por insuficiencia respiratoria.

El botulismo en lactantes afecta a niños menores de seis meses y es consecuencia de la

colonización del C. botulinum en el intestino del bebe, relacionada con la ingesta de miel de abeja.
La enfermedad se desarrolla en forma progresiva con parálisis flácida hasta la insuficiencia
respiratoria.

Se describe botulismo en pacientes drogadictos, producido por heridas infectadas, que

cursan con período de incubación largos, pero con sintomatología similar.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: no es útil por la escaso número de de bacterias y por la lisis de las formas
vegetativas al excretar la exotoxina.

2. Cultivo: para aislar el germen, la muestra debe ser sometida a calentamiento de 80°C
durante 10 minutos, con la finalidad de eliminar contaminantes aeróbicos, luego cultivar en
condiciones de anaerobiosis.

3. Toxina botulínica: para demostrar la presencia de exotoxina botulínica en el alimento

ingerido o en el contenido gástrico del paciente; así como la producción de una cepa aislada, se
procede a inocular la muestra, vía intra peritoneal, en el ratón. A las 24 horas se observará la
muerte de animal. Luego, repetir el experimento, pero añadiéndole antitoxina botulínica a la
muestra, y el ratón deberá sobrevivir.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Como la toxina es termolábil, se recomienda poner los alimentos enlatados en baño maría
hirviendo durante 10 minutos.

El tratamiento del botulismo se inicia con soporte ventilatorio y la administración de

antitoxina botulínica polivalente.

92
Clostridium enterotóxico (C. difficile)

La presentación de diarrea y colitis en pacientes que han recibido antibióticos, ha sido

descrita desde la década del 1950, responsabilizando de este síndrome a Staphylococcus aureus,
Cándida albicans o Clostridium perfringes. Desde el año 1977 se estableció que Clostridium
difficile, toxigénico, es la causa de la colitis seudomembranosa, asociada a la antibioticoterapia con
ampicilina, clindamicina o fluoroquinolonas.

Clostridium difficile, son bacilos grampositivos con espora central deformante, de difícil
desarrollo in vitro, requieren de medios de cultivo complejos y, aun así, la recuperación es pobre.
Se caracterizan por la producción de una enterotoxina A y una citotoxina B. La toxina A altera la
unión intercelular en el epitelio del colon, incrementando la permeabilidad; y la toxina B destruye
el citoesqueleto celular.

La presencia de C. difficile en la población humana es variable, así: en neonatos se reporta

del 15% al 70%; en adultos ambulatorios de 3% a 8%; y en adultos hospitalizados el 20%. Es
importante destacar que estas personas albergan cantidades no significativas de toxina A o B en
las heces. Se les ha encontrado también en el suelo, playas, piscinas de natación y en animales
domésticos.

La sintomatología por infección debido a C. difficile, suele iniciarse una semana después de
haber recibido tratamiento antibacteriano, cuando la colonización del intestino supera los 108
bacterias por gramo de heces. Las toxinas se liberan y ocasionan diarrea similar al cólera, asociado
con fiebre, dolor abdominal y leucocitosis (superior a 15.000pmmc) y albuminemia inferior a 3.0
g/dl.

El diagnóstico de la infección se realiza por varios procedimientos: A) Cultivo de heces,

para aislar la cepa toxigénica, con cantidad superior a 10 pg de toxina (método gold-estándar).
B)Técnica molecular tipo PCR, para detectar al Cl. difficile. C) Determinar el título de toxina A y B
en heces (técnica ELISA). D) Determinar el Glutamato deshidrogenasa (enzima inmunoensayo),
pero esta enzima se eleva en toda infección por Cl. difficile, no diferencia a las cepas toxigénicas.

El tratamiento se inicia con el retiro de los antibióticos administrados y su reemplazo por

metronidazol o vancomicina.

93
 CAPÍTULO 17
BACTERIAS ESPIRILARES
GÉNEROS LEPTOSPIRA Y BORRELIA

BACTERIAS ESPIRILARES

Las bacterias que tienen forma de hélice se agrupan en la familia Spirochaetaceae, que se
caracterizan por su gran longitud (hasta 500 µm), su movilidad debido a un aparato locomotor
interno y su flexibilidad. Están ampliamente distribuidas en la naturaleza, tienen vida libre en
aguas dulces o marinas, o como parásitos en metazoarios. Las espiroquetas patógenas para el
hombre y animales pertenecen a tres géneros: Treponema, Leptospira y Borrelia.

Todas las espiroquetas están rodeadas de una envoltura elástica constituida por lípidos y
poliósidos, con carácter antigénico, que permite diferenciarlas en especies y serotipos. En la cara
interna de la envoltura se ubica una delgada capa de glucolípidos, y luego sigue la membrana
citoplasmática. El aparato locomotor formado por fibrillas se extienden a lo largo de la bacteria, de
un extremo al otro, y se ubica en el espacio periplasmático, creado entre la envoltura y la capa de
glucolípidos. Estos flagelos axiales o fibrillas le otorgan a la bacteria movilidad de tipo helicoidal,
de flexión y de rotación, que se aprecia mejor en preparaciones en fresco observadas con
microscopio de campo oscuro.

LEPTOSPIRA

La enfermedad denominada leptospirosis, es una zoonosis de distribución mundial, en la

que el animal infectado excreta el microorganismo por vía urinaria, y el hombre se contagia por
exposición a material contaminado. La enfermedad de Weil, descrita en 1914, presenta ictericia,
hemorragia e insuficiencia renal.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Forma y estructura: son espiroquetas delgadas (0,1 µm), con un extremo doblado en
gancho y con dos flagelos axiales periplasmáticos. Son gramnegativas, pero colorean mejor con
Leishman o Wright. La clasificación de las leptospiras está basada en la variación antigénica del
lipopolisacárido de envoltura.

2. Fisiología: son aerobias obligadas, cultivan en medios líquidos enriquecidos con ácidos
grasos de cadena larga, a temperaturas entre 26°C y 30°C,y tardan 1 a 4 meses de para desarrollar.

3. Clasificación: el método tradicional de clasificación está basado en los antígenos de

superficie, y establece dos especies: Leptospira interrogans, patógena y Leptospira biflexa,
saprofita; ambas con numerosos serogrupos de utilidad epidemiológica.

94
B. PODER PATÓGENO

El reservorio de las leptospiras son los roedores y otros animales mamíferos, en quienes
producen infecciones asintomáticas con compromiso renal; eliminando grandes cantidades de
espiroquetas por vía urinaria, las que contaminan las aguas estancadas y tierras húmedas. El
hombre y los animales (perro), se contaminan accidentalmente a través de mucosas o heridas
superficiales. Leptospira interrogans produce bacteriemia y daña el endotelio vascular, lo que
ocasiona hemorragia pulmonar, isquemia de la corteza renal, y alteración de la arquitectura
hepática, que evoluciona con ictericia. La respuesta inmune facilita la opsonización y fagocitosis,
eliminando las espiroquetas de la circulación.

Muchas infecciones por Leptospiras son asintomáticas, o se presentan con síntomas

generales como fiebre y mialgias. Otras evolucionan con ictericia, pero sin necrosis hepática, o
cuadro clínico de síndrome meníngeo. Excepcionalmente se observa casos con compromiso
hepato-renal.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: El estudio del sedimento urinario del paciente, observado al microscopio

de campo oscuro, es el procedimiento clásico, aunque poco sensible. La fluorescencia directa con
anticuerpos marcados mejora la sensibilidad del estudio microscópico.

2. Cultivo: el aislamiento se realiza a partir de muestras de sangre o LCR tomadas en las

dos primeras semanas de la enfermedad; días posteriores se debe utilizar la orina. El medio de
cultivo líquido de elección es el de Fletcher o Reiter, incubado a 30°C hasta por cuatro meses.

3.Técnicas moleculares: El PCR es mas sensible que los cultivos.

4. Identificación: La espiroqueta aislada se identifica utilizando antisueros específicos;

para lo cual se pone en contacto una gota de cultivo de leptospiras y una gota del antisuero, se
observará, al microscopio de campo oscuro, la inmovilización de la Leptospira, seguido de la
aglutinación y luego se producirá la lisis bacteriana.

5. Indirecto: La determinación de anticuerpos aglutinantes debe realizarse en centros

especializados, puesto que se debe disponer de cultivos vivos de los diversos serotipos de
Leptospira.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Se recomienda las prácticas higiénicas en los corrales, mataderos; uso de ropa protectora
para el personal que labora en cloacas. La inmunización en animales puede reducir la transmisión
a otros animales y al hombre. La quimioprofilaxis puede ser una estrategia para personas con
exposición limitada. Para el tratamiento se emplea penicilina o doxiciclina

95
BORRELIA

Son espiroquetas grandes (hasta 30 µm), que poseen numerosos flagelos periplasmáticos.
Son transmitidas al hombre por un artrópodo hematófago. Dos formas de borreliosis se presentan
en el hombre: la fiebre recurrente o tifus recurrente, que fue la causante de epidemia en las dos
guerras mundiales, y la enfermedad de Lyme. La borrelia no se encuentra al estado libre en la
naturaleza, sólo dentro de un organismo viviente.

Borrelia recurrentis

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Forma y estructura: son espiroquetas irregulares de 8 a 30 µm de largo, que poseen

numerosas fibrillas periplasmáticas (8 a 20). Son móviles por flexión y rotación. Colorean bien con
Giemsa o Wright.

2. Fisiología: Son microaerófilas y exigentes para desarrollar in vitro. Muy sensibles a la

desecación y a las radiaciones ultravioletas.

B. PODER PATÓGENO

El hombre presenta dos formas clínicas de borreliosis: la fiebre recurrente epidémica

transmitida por el piojo del cuerpo y la fiebre recurrente endémica transmitida por la garrapata.

En la forma epidémica, el hombre es el único reservorio, y el piojo del cuerpo (Pedículus

humanus) transmite la enfermedad. El piojo se infecta al ingerir sangre humana infectada, luego
las espiroquetas penetran el intestino y se reproducen en la hemolinfa. La transmisión al hombre
se produce al momento de aplastar al piojo durante la picadura; no se transmite por vía digestiva
(picadura o heces del piojo). La enfermedad es mas frecuente cuando las condiciones sanitarias
son deficientes.

En cambio, en la forma endémica, el reservorio son las garrapatas blandas, roedores y

pequeños mamíferos, que se infectan con diversas especies de Borrelia. Las garrapatas infectadas
hacen infección generalizada y transmiten las espiroquetas por la saliva y las heces; el reservorio
endémico mantiene la infección por transmisión transovárica. Esta infección es una zoonosis.

La presentación clínica de ambas formas es similar, períodos febriles acompañados de

cefalea, mialgia, derrame conjuntival, petequias, hepatomegalia y esplenomegalia, con tres a cinco
días de duración. Después de 7 a 10 días sin fiebre los síntomas recurren súbitamente. Durante la
fase febril se encuentran abundantes borrelias en el torrente sanguíneo, que luego son
secuestradas por los órganos del RES. La presentación recurrente de la sintomatología, se debe a
variaciones antigénicas del lipopolisacárido de la pared bacteriana, presentes en las nuevas
generaciones de borrelias, que no son afectadas por la ausencia de anticuerpos específicos.

96
C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: los frotices de sangre coloreados con Giemsa o Wright, tomados en la

etapa febril, son de elevada sensibilidad y diagnóstico; la sensibilidad del método mejora cuando
se emplea la técnica de fluorescencia directa.

2. Cultivo: es utilizado como investigación, para luego, identificar la cepa en el animal

susceptible específico.

3. Indirecto: La demostración de anticuerpos por inmuno fluorescencia o ELISA, tiene

limitaciones por las variaciones antígénicas de la bacteria y las reacciones cruzadas con la sífilis.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La higiene personal y la eliminación de los piojos previenen la enfermedad epidémica. La

erradicación de las garrapatas es casi imposible, debido a las vastas regiones que habitan. El uso
de repelentes de insectos es aconsejable cuando se visita zonas rurales.

La tetraciclina y la penicilina son los antibióticos de elección. Hay que tener en

consideración una reacción tipo shock, fiebre e hipotensión, al inicio del tratamiento debido a la
liberación de endotoxinas bacterianas.

Borrelia burgdorferi

Es el agente causal de la enfermedad de Lyme, se presenta en América del norte, Europa y

Asia; los vectores son diversas especies de la garrapata dura (Ixodes), y los reservorios son ratones
y ciervos de cola blanca.

La enfermedad ocurre en etapas con manifestaciones clínicas diferentes (que semeja a la

sífilis). La infección temprana se localiza en la zona de inoculación, con eritema, mácula y pápula
que migra a muslos y brazos, luego de unas semanas desaparece (eritema migratorio). El segundo
estadio se inicia con la diseminación hematógena, en la que se presentan numerosas lesiones
dérmicas anulares con compromiso articular, neurológico y cardíaco. Las manifestaciones tardías
se presentan luego de varios meses, con ataques intermitentes de tumefacción y dolor de grandes
articulaciones.

El diagnóstico se establece mediante la técnica de ELISA, para detectar niveles de IgM e

IgG., aunque son poco sensibles en la fase aguda de la enfermedad (Positivas a partir de la cuarta
semana de enfermedad). En los casos positivos, se debe confirmar el diagnóstico con la técnica de
Western Blot.

El tratamiento recomendado es el uso de penicilina o doxiciclina.

97
 CAPÍTULO 18
BACTERIAS DE TRANSMISIÓN SEXUAL
Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi, Neisseria gonorrhoeae,
Klebsiella granulomatis y Chlamydia trachomatis

BACTERIAS DE TRANSMISIÓN SEXUAL

Las bacterias que causan enfermedades de transmisión sexual se caracterizan por ser
transmitidas luego de contacto directo íntimo de persona a persona, y se debe a que los
microorganismos involucrados no pueden sobrevivir en el medio ambiente; así mismo, ocasionan
enfermedades exclusivamente en el ser humano. Entre ellas no hay semejanza microbiológica y
corresponden a diversos géneros.

Treponema pallidum

Es el agente causal de la sífilis, fue descubierto por Schaudinn y Hoffmann en 1905. La

enfermedad es compleja, evoluciona en forma cíclica con manifestaciones clínicas diversas; y se le
describe desde el siglo XVI, llegando a ocasionar pandemia en la primera mitad del siglo XX,
conocida como “gran pústula”, para diferenciarla de la viruela. Se le denomina también “lues”,
que viene del latín “lues venereum”, que significa pestilencia.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Forma y estructura: son espiroquetas con 8 a 14 ondas regulares, que pueden tener de 5 a
20 µm de largo, con los extremos afilados. Poseen tres flagelos periplasmáticos que les otorgan
movilidad rotatoria y ondulante, observable en microscopía de campo oscuro. Las coloraciones de
impregnación con plata, se emplean para la observación de cortes histológicos.

2. Fisiología: son aerobios y no cultivan “in vitro” en medios sintéticos, porque dependen de
las purinas y pirimidinas del huésped; son frágiles a la sequedad y al oxígeno, por carecer de
catalasa. Pueden mantenerse vivos en el plasma y en la sangre por 2 a 5 días, y a temperaturas
inferiores a -70°C. Se pueden conservar viables y virulentos cuando son inoculados en el testículo
de conejo.

3. Clasificación: el género Treponema, de acuerdo a las características epidemiológicas y

clínicas, tiene dos especies: la especie: Treponema pallidum, que a su vez lo constituyen tres
subespecies, T. pallidum, agente etiológico de la sífilis, T. endémicum, agente del bejel y T.
pertenue, agente de la frambesia, (las dos últimas no son venéreas); la otra especie es el
Treponema carateum causante de la pinta.

98
 4. Antígenos: todos los treponemas poseen un antígeno común, lipídico, denominado
“cardiolipina” encontrado en el tejido del corazón de buey; y un antígeno proteico específico del T.
pallidum, responsable de la hipersensibilidad retardada.

B. PODER PATÓGENO

El hombre es el único reservorio. La dosis infectante es muy baja (menos de 100

espiroquetas), que penetran en las mucosas y en la piel lesionada adhiriéndose a la fibronectina.
La enfermedad tiene una evolución natural con varias fases: 1) período de incubación: que puede
durar de una a tres semanas; 2) sífilis primaria: que se caracteriza por la presencia de una lesión
cutánea en el sitio de la inoculación, rojiza, indolora, que se ulcera, con bordes duros, llamada
“chancro duro”, y que cicatriza,

en forma espontánea, diez a quince días después; acompaña a la úlcera la presencia de un solo
nódulo linfático regional; 3) período secundario: que se presenta luego de dos a diez semanas,
como expresión de la diseminación hematógena del treponema, con sintomatología general y
presencia de exantema en toda la superficie del cuerpo, en especial palmas de las manos y plantas
de los pies, denominada “roseola sifilítica”; algunas veces las lesiones son elevadas en pliegues
dérmicos, que toman el nombre de condilomas; 4) período latente: que suele durar meses o años,
asintomático y sólo detectable con pruebas serológicas; y 5) sífilis terciaria: con lesiones necróticas
llamadas gomas, en el tejido vascular, cerebral, óseo, entre otros. Las lesiones cutáneas de la sífilis
primaria y del período secundario contienen abundantes treponemas, por lo que son muy
contagiosas.

Durante el embarazo T. pallidum cruza la placenta y el feto se infecta; si la infección se

detecta antes del cuarto mes de gestación, es tratable y el feto no desarrollará enfermedad; de no
ser así muchos embarazos terminan en aborto. Otros recién nacidos desarrollan sífilis secundaria,
con malformaciones óseas, cardiovasculares, dentales, sordera o ceguera, denominada sífilis
congénita.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: la observación inmediata (con microscopio de campo oscuro) de

preparaciones en fresco, a partir del exudado de lesiones cutáneas, es un procedimiento muy útil;
pero requiere experiencia en la toma de la muestra. Este procedimiento mejora en calidad si se
utiliza la fluorescencia directa, empleando anticuerpos monoclonales.

2. Cultivo: T.pallidum no desarrolla en medio de cultivo artificial.

3. Indirecto: para la demostración de anticuerpos se dispone de dos tipos de pruebas: 1)

las que utilizan antígenos no treponémicas, inespecíficas, que se utilizan para despistaje, y 2) las
que utilizan como antígeno al T. pallidum o a su proteína, las que son específicas, por lo tanto de
uso confirmatorio.

99
No treponémicas: el antígeno empleado es la cardiolipina, obtenido del corazón del buey, que
reacciona con anticuerpos IgG e IgM, llamadas reaginas, que se presentan como respuesta a los
lípidos superficiales de las espiroquetas. Son pruebas de floculación como el VDRL (laboratorio de
investigación de enfermedades venéreas) o RPR (reagina rápida del plasma). Son muy sencillas,
económicas y con elevada sensibilidad pero dan reacciones cruzadas con otras enfermedades,
debido a que el antígeno no es específico. Estas reacciones pueden cuantificarse y permiten
evaluar el tratamiento.

Treponémicas: el antígeno empleado es el mismo T.pallidum, procedente de inoculación

experimental en el testículo de conejo. La prueba clásica es la FTA (fluorescencia con treponemas),
que es una prueba indirecta, en la que, a los cortes histológicos del testículo de conejo infectado,
se les añade el suero del paciente, luego la antiglobulina humana marcada con fluoresceína;
seguidamente se observa con microscopio de fluorescencia. Este procedimiento es de mucha
utilidad para detectar IgM en recién nacidos con sospecha de sífilis congénita. Actualmente se
emplean pruebas de enzima inmuno ensayo (EIA), que utilizan partículas de Treponema pallidum,
las que tienen elevada especificidad y sensibilidad.

4. Pruebas moleculares: se emplea la técnica de amplificación del ácido nuucleíco para

detectar el germen en la muestras.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La mejor prevención son los hábitos sexuales seguros. No hay vacuna para la sífilis.

La penicilina es el antibiótico de elección, a dosis elevadas y por periodos prolongados;

como alternativa se puede emplear doxiciclina o ceftriaxona.

Haemophilus ducreyi

Es el agente causal de la enfermedad de transmisión sexual denominada chancro blando,

descrito por Ducrey en 1889, asociada con la prostitución y de mayor presentación en hombres.
Para el diagnóstico se requiere diferenciar clínicamente, las úlceras dérmicas de las producidas por
herpes o sífilis.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Forma y estructura: son bacilos cortos gramnegativos, no poseen cápsula ni flagelos.

2. Fisiología: son bacterias aerobias, para desarrollar in vitro necesitan medios con 20% a
30% de sangre y períodos de incubación hasta por 7 días.

100
B. PODER PATÓGENO

Las lesiones se presentan luego de 2 a 7 días posteriores a la relación sexual y afectan en

forma casi exclusiva a los genitales. La lesión del chancroide se inicia con una pápula muy pequeña
eritematosa, que rápidamente se hace pústula y luego se ulcera. Estas lesiones son dolorosas,
irregulares, no induradas, pueden ser solitarias o múltiples; generalmente se ubican en la
superficie interna del prepucio y frenillo en los hombres, y en la horquilla y labios menores en las
mujeres. A ello se agrega incremento de tamaño de los ganglios inguinales, dolorsos a la
palpación; que puede supurar al exterior. Todos los síntomas y signos no desaparecen hasta
establecido el tratamiento.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: de gran utilidad. Ante una lesión ulcerosa genital es obligatorio realizar
preparaciones en fresco, para observarlas en campo oscuro y descartar treponema; luego frotices
para colorearlos con Gram y Leishman. Se observan numerosos bacilos gramnegativos pequeños,
ordenados en masas. Es muy orientador de H. ducreyi.

2. Cultivo: para el aislamiento se utiliza agar con sangre al 20%.

3. Detección de antígenos: hay pruebas por inmunofluorescencia y por reacción en cadena

de la polimerasa para detectar antígeno en muestras obtenidas de las lesiones dérmicas.

D.PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Evitar el sexo promiscuo. La eritromicina o la azitromicina son los antibióticos de elección.

La mayoría de cepas de H. ducreyi son resistentes a ampicilina y tetraciclina.

Neisseria gonorrhoeae

La gonorrea o blenorragia es una enfermedad muy antigua. Galeno introdujo el nombre

en el año 130 (dC), pero fue Neisser en 1879 quien describe al agente etiológico de esta
enfermedad exclusiva del hombre. La gonorrea es un modelo de enfermedad infecciosa en la que
los factores sociales y conductuales tienen marcada influencia en la epidemiología.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son diplococos gramnegativos, de aspecto en grano de café,

inmóviles y no forman esporas. Algunas cepas poseen numerosos pili, que les facilita unirse a las
células epiteliales de las mucosas y les dan mayor virulencia. Como bacteria gramnegativa posee
en su pared proteínas, denominadas porinas, que proveen canales, cuya capacidad antigénica es
utilizada para clasificar a los gonococos en serovares. En la membrana externa posee proteínas
como PorB, Opa y Rmp, que participan en la patogenia de la infección. Muchas cepas son

101
portadoras de plásmidos que producen betalactamasa (resistencia a la penicilina) o el TEM-1, que
da resistencia a la tetraciclina, transferibles por conjugación.

2. Fisiología: N. gonorrhoeae crece bien en agar chocolate con el aminoácido cistina y

almidón, incubado a 37°C en ambiente con 10% de CO2. La reacción de citocromo oxidasa es
positiva y metaboliza glucosa.

B. PODER PATÓGENO

La transmisión es fundamentalmente por contacto sexual, el microorganismo tiene

predilección por las células epiteliales no ciliadas del cuerpo, en especial uretra, cuello uterino,
conjuntiva y faringe. La infección se inicia con la fijación de los pili en los receptores de las células
huésped. En hombres se restringe a la uretra. Luego de 2 a 4 días de incubación, se presenta
exudado purulento uretral y disuria. En mujeres la infección prospera desde la uretra hacia el
cérvix y trompas de Falopio. Rara vez N. gonorrhoeae presenta infección sistémica, salvo en
mujeres, expresándose con fiebre, exantema y artritis supurativa. La conjuntivitis gonocócica en
recién nacidos es consecuencia de la contaminación en el canal del parto de madres con gonorrea
sintomática o asintomática.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: los frotices de secreciones purulentas, provenientes de uretra o cérvix,

coloreados con Gram, tienen alta especificidad (50-95%), asociados a la presencia de neutrófilos
con diplococos en su citoplasma.

2. Cultivo: es el método de diagnóstico estándar, en especial cuando la muestra proviene

de frotices vaginales, anales o uretritis crónica. Se recomienda el medio Tayer Martin, selectivo
con vancomicina, nistatina y colistina. También se emplean ensayos inmunoenzimáticos,
fluorescencia directa y la reacción en cadena de la polimerasa.

3. Indirecto: No es útil la búsqueda de anticuerpos en las fases aguda o crónica.

4. Pruebas moleculares: se utiliza la técnica de amplificación del ácido nuucleíco para

detectar el germen en muestras clínicas

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Las relaciones monógamas y el uso de protección son las formas para evitar la infección.
No hay vacuna. El tratamiento ha venido cambiando, por la producción de betalactamasa, que
ofrece resistencia a la penicilina. Actualmente se recomienda ceftriaxone, ciprofloxacino o
doxiciclina.

102
Chlamydia trachomatis

Llinfogranuloma venéreo

Es una enfermedad de transmisión sexual causada por los serotipos L1, L2 y L3 de

Chlamydia trachomatis. Las chlamydias son bacterias de tamaño muy pequeño que atraviesan los
filtros de 0.45 micras; tienen vida intracelular obligada y forman inclusiones intra citoplasmáticas.

Los serotipos de linfogranuloma venéreo (LGV) de C. trachomatis, se replican en los

fagocitos mononucleares del sistema linfático, produciendo destrucción de la célula infectada, y la
respuesta celular forma secreción purulenta en los ganglios linfáticos.

El microorganismo ingresa por una abrasión genital o rectal, donde se forma una lesión
herpetiforme que cura rápidamente. Semanas después, se presenta adenopatía inguinal regional
(ganglios inguinales, femorales o de la ilíaca profunda), con piel eritematosa, dolorosa, que luego
adquiere la forma de absceso y drena al exterior; incluso puede abrirse una fístula vaginal o rectal.
Antiguamente se le denominaba enfermedad de Nicolás Favre.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: las muestras obtenidas de exudado de mucosas o ganglio, pueden

colorearse con Giemsa, para observar las inclusiones citoplasmática.

2. Detección de antígenos: la búsqueda de antígenos de clamidias en muestras clínicas,

mediante las técnicas de inmuno cromatografía, inmuno fluorescencia directa y enzima inmuno
ensayo son muy utilizadas.

3. Pruebas moleculares: la técnica de amplificación de los ácidos nucleicos es la más

específica y adecuada.

4. Cultivo: cultiva en líneas celulares, pero de menos sensible que las técnicas moleculares.

5. Serológico: el título de anticuerpos en linfogranuloma es de gran utilidad; en cambio de

poco valor en infecciones urogenitales porque no diferencia infecciones actuales de las antiguas.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Las infecciones genitales se previenen teniendo prácticas sexuales seguras. El tratamiento

recomendado es la doxiciclina durante dos semanas, disponiendo de la eritromicina como
alternativa.

Infección urogenital

Actualmente se señala a Ch. trachomatis como responsable del mayor número de

pacientes con enfermedades de transmisión sexual. El microorganismo corresponde a los
serotipos D hasta K de Chlamydia trachomatis, que tienen como células susceptibles a las del
epitelio cilíndrico no ciliado, cúbico y de transición de la mucosa uretral, endocérvix, endometrio,

103
trompas de Falopio, ano, recto, epidídimo y conjuntiva. Por lo tanto, es agente causal de uretritis
no gonocócicas, endometritis, enfermedad inflamatoria pélvica e infertilidad.

La infección se produce por la presencia de pequeñas abrasiones en piel o mucosas, por

donde ingresan los cuerpos elementales; su presencia estimula la respuesta a polimorfo nucleares
y linfocitos. La sintomatología es escasa en la mayoría de pacientes y la inmunidad no es
protectora, por lo que se pueden producir reinfecciones.

C. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: Las inclusiones de los serotipos de Ch. Trachomatis que ocasionan esta
patología son yodófilas, luego los frotices de los exudados de la mucosa uretral o de cérvix, se
colorean con soluciones de Yodo, para observar las inclusiones citoplasmática.

2. Detección de antígenos: la peresencia de antígenos de Ch. Trachomatis en muestras de

frotis de mucosas, se puede detectar con técnicas de inmunofluorescencia o inmuno precipitación.

3. Cultivo: El aislamiento de Ch. Trachomatis en cultivos celulares es el método “gold

standard”, pero por su elevado costo no es práctico en diagnóstico clínico.

4. Pruebas moleculares: la detección del antígeno mediante la técnica de la reacción en

cadena de polimerasa es muy útil.

5. Serológíco: Las determinación de anticuerpos Ig G e Ig M por el método ELISA es muy

práctico. Pero, muchas veces, los títulos no se correlacionan con la presencia del antígeno en los
frotices de las mucosas.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Las relaciones monógamas y el uso de protección son las formas para evitar la infección.
No hay vacuna. El tratamiento recomendado es el uso de doxiciclina por tres semanas.

Klebsiella granulomatis

El agente causal de la enfermedad de transmisión sexual denominada “donovanosis”, fue

descubierto en 1905 por Donovan, pero la enfermedad ya había sido descrita por McLead en
1881. La enfermedad es frecuente en regiones de la India, Caribe, Brasil y Nueva Guinea; con la
presentación de ulceraciones crónicas, progresivas en la región genital, denominado “granuloma
inguinal”. Anteriormente al agente causal se le llamaba Calymatobacterium granulomatis.

104
A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos pequeños (1 a 2 µm), gramnegativos que se tiñen

con más intensidad en los extremos (coloración bipolar), inmóviles, con cápsula. Se les encuentra
dentro de vacuolas en el citoplasma de los mononucleares.

2. Fisiología: Es difícil el aislamiento en medios sintéticos, se ha logrado obtener desarrollo

en saco vitelino de embrión de pollo y en cultivos celulares Hep2.

3. Clasificación: Se encuentra homología molecular entre Calymatobacteriurm y Klebsiella,

por lo que ésta bacteria ha sido insertada en el grupo de Klebsiella.

B. PODER PATÓGENO

Luego de un periodo de incubación de 1 a 60 días, se presenta, en la región pubiana y

genital externo, una pápula indurada que evoluciona hacia úlcera granulomatosa, exuberante, de
color rojo carnoso, con borde bien definido e indolora. Las lesiones se multiplican y se diseminan
vía subcutáneo, hay compromiso linfático con edema regional.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: La coloración de Giemsa de los frotices de la secreción son muy útiles para
el diagnóstico, la presencia de bacilos con coloración en los extremos (bipolar) dentro del
citoplasma de los mononucleares, es muy sugestivo. El examen histológico de biopsias obtenidas
por sacabocado es confirmatorio.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

Evitar el sexo promiscuo. El tiempo del tratamiento debe ser por períodos prolongados
con doxiciclina, sulfatrimetoprim o eritromicina.

105
 CAPÍTULO 19
GÉNERO MYCOBACTERIUM
Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium leprae

MYCOBACTERIUM

La Familia Mycobacteriaceae está formada por bacilos delgados, que tienen la

característica en común de conservar los colorantes, a pesar de la acción combinada de alcohol y
ácidos fuertes como decolorantes, por lo que se les denomina “ácido alcohol resistentes”. Están
ampliamente distribuidos en la naturaleza, pero sólo el género Mycobacterium tiene interés
médico, y comprende:
a) Especies patógenas para el hombre: M. tuberculosis y M leprae.
b) Especies patógenas para los animales y a veces para el hombre: M. bovis, M. avium.
c) Especies saprofitas, pero ocasionalmente patógenas para el hombre: M. atípicos.

Mycobacterium tuberculosis

Las lesiones tuberculosas (granulomas) fueron individualizadas por Laennec, pero Robert
Koch, en 1882, descubre el bacilo y lo cultiva. Investigadores como Calmette y Guerin elaboraron
la vacuna (BCG), utilizada hasta la actualidad como una medida preventiva. M. tuberculosis es un
parásito estricto del hombre y es la causa más frecuente de muertes en el mundo.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacilos rectos y curvados que miden 0,2-0,6 x 2-10 µm, no
forman cápsula ni flagelos y se encuentran aislados o formando agregados. Colorean mal con los
colorantes habituales, por la propiedad hidrófoba de su pared; en cambio, retienen la fucsina
fenicada con acción del calor (coloración de Ziehl-Neelsen) y no se decoloran con alcohol ni ácidos.
En muestras clínicas se puede apreciar la presencia de granulaciones metacromáticas o de volutina
en los extremos del bacilo, que son acúmulos de fosfatos. La pared celular es rica en ácido micólico
(ácido graso con 70 a 90 átomos de Carbono), responsable de las propiedades biológicas de la
bacteria; y en proteínas con ácido glutámico, que son los antígenos que condicionan la respuesta
inmune celular.

2. Fisiología: son bacterias aerobias estrictas que desarrollan lentamente en medios

enriquecidos, ya que el tiempo de generación es de 15 a 18 horas; producen las enzimas catalasa
(que es destruida a 70°C), y la nitrato reductasa; así mismo es capaz de sintetizar ácido nicotínico.
M.tuberculosis es sensible a temperatura de pasteurización (62°C), a las radiaciones ultravioletas y
al alcohol. En cambio, es muy resistente a la desecación (soporta hasta 10 días en áreas
contaminadas y seis meses en el esputo protegido del sol), incluso puede permanecer inactivo por
años en los tejidos. Resiste la acción de los desinfectantes, de los ácidos y de las bases fuertes.

106
 El medio de cultivo clásico es el de Lowenstein Jensen, compuesto a base de huevos,
fécula de papa y glicerina, en el cual tarda de 2 a 4 semanas para formar colonias, caracterizadas
por ser secas, rugosas y de color cremoso. El medio sintético de Middlebrook se usa como
referencia para estudios fisiológicos de la bacteria; y el medio de Ogawa, que tiene alto contenido
en ácido glutámico (ají no moto), es el de mayor uso en la actualidad porque se observa desarrollo
a partir de los 7 días de incubación.

3. Clasificación: Los Mycobacterium que mayormente afectan al humano son: M.

tuberculosis, M. leprae, M. bovis, M. kansasii y M. africanum. Hay varias especies de
Mycobacterium saprofitas ambientales, que no se propagan entre las personas, pero pueden
producir infecciones en el ser humano, denominadas Mycobacterium no tuberculosas o atípicos, y
se describen más 50 en la actualidad. Rouyon, utilizando las diversas características de desarrollo
en los cultivos las clasificó en:

a) Fotocromógenos, que producen pigmento al exponerse a la luz solar: M. kansasii, M. simiae, M.

marinum.

b) Escotocromógenos, que producen pigmento en la oscuridad, no necesitan estimulo solar: M.

scrofulaceum, M. gordonae

c) No cromógenos: M. avium, M. intracellulare, M. terrae y M. xenopi

d) De crecimiento rápido, desarrolla antes de los siete días: M. fortuitum, M. phlei, M. smegmatis..

La diferenciación entre las especies más importantes, se aprecia en el cuadro siguiente:

M. tuberculosis M. bovis M. avium M. atípico

Catalasa a 22°C ++ ++ ++ ++
Catalasa a 70°C -- -- ++ ++
Acido nicotínico ++ -- -- --
Nitrato reductasa ++ -- -- --
Antibióticos sensible sensible resistente resistente
Animal experimental cobayo cobayo pollo --
conejo conejo --

Tabla: 19-1: Diferencias fenotípicas de las micobacterias

Para la identificación actual de los Mycobacterium no tuberculosos (atípicos) se emplean

métodos de cromatografía líquida, basada en la composición del ácido micólico, y métodos
moleculares, como la reacción en cadena de la polimerasa o sondas genéticas para ARN.

B. PODER PATÓGENO

M. tuberculosis no produce toxinas, pero todos sus constituyentes son antigénicos. El

poder patógeno más importante es la capacidad de multiplicarse dentro de los macrófagos, para

107
lo cual impide la unión del fagosoma con el lisosoma; produce sulfátides (sulfoglicolípidos) y óxido
nítrico que promueven la supervivencia intracelular y el factor cord (micolato de threalosa), que
facilita el agregado en cordones de los bacilos.

La transmisión se realiza por contacto inter personal, por inhalación de aerosol con
bacilos; los que alcanzan los alveolos, donde se multiplican, ocasionando alveolitis. Las bacterias
son ingeridas por los macrófagos alveolares, que secretan interleucina y factor de necrosis tumoral
alfa, los que incrementan la inflamación. La multiplicación bacteriana destruye a los macrófagos,
luego, linfocitos y monocitos sanguíneos se acercan al foco inflamatorio, se diferencian en
macrófagos e ingieren a los bacilos, que luego son transportados por los vasos linfáticos hasta los
ganglios linfáticos regionales causando adenitis. Ambas lesiones, pulmonar y ganglionar (alveolitis
+ adenitis), constituyen el complejo de Gohn. En esta etapa las bacterias tienen una tasa de
crecimiento muy intensa y pueden diseminarse vía hemática a todo el cuerpo (zona apical del
pulmón, áreas meníngeas, óseas, etc.).

Luego de 3 a 8 semanas, se desarrolla la inmunidad celular e hipersensibilidad. En la

mayoría de los casos la infección se controla y sólo queda como huella la hipersensibilidad tardía
(tuberculina +). En pocos casos, el foco inflamatorio inicial pulmonar se agranda, la concentración
bacteriana se incrementa asi como la respuesta inmune celular, a base de macrófagos y linfocitos
T, secretan interleucina, y factor de necrosis tumoral alfa; todo ello conduce a la necrosis tisular,
constituyendo el granuloma (células epitelioides, linfocitos CD4, CD8, NK, macrófagos y céluilas de
langhans). Los linfocirtos T se diferencian en TH (estimulados-Helper) secretan Interferón gamma.
El granuloma puede permanecer en fase latente, o reactivarse luego de años, cuando la respuesta
inmune celular disminuye.

Inmunología: la tuberculosis es la enfermedad infecciosa prototipo, que requiere respuesta

inmune celular para su control, los anticuerpos formados no desempeñan ningún papel en los
mecanismos de defensa. En las primeras semanas de la infección las bacterias se replican
intensamente hasta que se desarrolla la hipersensibilidad e inmunidad celular.

Tuberculina: (reacción de Mantoux) el primer preparado de tuberculina fue el extracto de un

cultivo hervido de bacilos tuberculosos. Siebert, en 1934, preparó un precipitado proteico
(derivado proteico purificado: PPD), en el que una dosis de 5 unidades de tuberculina PPD es
equivalente a 0,0001 mg de proteína contenida en 0,1 ml de solución. El preparado se incoula vía
intradérmica en el antebrazo y la lectura de la reacción se realiza a las 48 horas. La interpretación
es la siguiente: el 90% de las personas que están infectados con M. tuberculosis reaccionan
formando una pápula de 10 mm o más de diámetro. Reacciones con pápulas de 5 a 10 mm de
diámetro, sugiere sospecha de infección tuberculosa, en áreas endémicas, o es efecto de la
vacunación con BCG. Reacciones falsas positivas se dan en procesos infecciosos producidos por
micobacterias no tuberculosas. Reacciones falsas negativas se presenta en un 20% de personas
con tuberculosis activa.

108
PATOGENIA DE LA TUBERCULOSIS

1.Contacto: Los bacilos de Koch son fagocitados por los macrófagos alveolares

SALUD
Destrucción de las bacterias

Las bacterias se multiplican y producen

Öxido nítrico, factor Cord, impiden unión
INFECTADO del fagosoma con el lisosoma

2.Respuesta celular hacia el foco infeccioso

Monocitos sanguíneos … fagocitan bacterias
Linfocitos T … … … sensibilizado: LTh … activa macrófagos, madura fagososmas,
produce óxido nítrico sintetasa,
factor de necrosis tumoral (FNT) α,
Interferón (INF) γ
Linfocitos natural killer: LTk … … producen lisis celular

3.Formación de granuloma:
Estructura histológica formada por células epitelioides, células de Langhans, linfocitos,
Macrófagos alveolares con bacterias, linfocitos LTh y linofocitos LTk

4.Regulación de la diseminación bacteriana: mediadores químicos

Pro-inflamatorios Anti-inflamatorios
Interferón (INF) γ factor de necrosis tumoral (FNT) β
factor de necrosis tumoral (FNT) α Interleucina 10
Interleucina 1, 6, 8, β defecto de receptores
producción escasa de mediadores
pro inflamatorios

Destrucción del bacilo no se controla la

multiplicación bacteriana

Granuloma pequeño Granuloma grande, caseoso

INFECCIÓN LATENTE O INFECCIÓN ACTIVA

INACTIVA

SALUD ENFERMEDAD

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

109
 1. Microscopía: en muestras clínicas (esputo, LCR, orina, etc.) los frotices coloreados con
Ziehl-Neelsen, son adecuados para observar la presencia de bacilos ácido alcohol resistentes. El
uso de colorantes fluorescentes (auramina o rodamina) mejora la calidad del estudio
microscópico, ya que se observa al microscopio con objetivos de 40X ó 60X, evaluando asi todo el
preparado.

2. Cultivo: se recomienda el uso de muestras voluminosas con el objeto de obtener mayor

posibilidad de éxito, lo que obliga a concentrar las muestras por centrifugación. Debido a la
proliferación lenta de las micobacterias, se debe destruir las bacterias de desarrollo rápido
contenidas en la muestra, para lo cual se añaden “decontaminantes” como el hidróxido de sodio al
2%, o fosfato trisódico, durante 30 minutos. Luego se centrifuga y el sedimento es neutralizado
con ácido clorhídrico 1N, hasta obtener pH 7.0. Seguidamente se siembra en medios de
Lowenstein Jensen, Middlebrook u Ogawa.

Otros procedimientos son utilizados con la finalidad de disminuir el tiempo de diagnóstico,

como: la observación microscópica de la sensibilidad al fármaco (MODS), que emplea medio de
cultivo líquido con antibióticos, y la observación microscópica del desarrollo bacteriano por la
formación de cordones. Este método permite obtener resultados en 7 a 10 días, con la sensibilidad
antibiótica incluida. Así mismo el uso de medios de cultivo que incluye carbono radioactivo, es de
gran utilidad, puesto que no se espera la formación de colonias sino la presencia de CO2 con
carbono marcado, detectable en la primera semana de siembra, como expresión de metabolismo
bacteriano.

Para la identificación se utilizan las pruebas bioquímicas clásicas o las de amplificación

mediante la reacción en cadena de la polimerasa y el uso de sondas de ADN específicos de
especie.

3. Técnicas moleculares: El uso de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para

detectar secuencias del ácido nucleico presentes en la muestra, son útiles, pero un tanto costosas,
aunque ahorran mucho tiempo en relación a los cultivos y son de alta especificidad.

4. Inmunológicas: Hay dos procedimientos: A) Intradermo reacción de la tuberculina, que

detecta personas infectadas; el inconveniente es que la positividad dura toda la vida. B) La
determinación del Interferón gamma en el suero, con mètopdo ELISA, producido por los linfocitos
T sensibilizados y que se libera cuando son expuestos al bacilo de koch, y expresa actividad de la
infección.

5. Inoculación: el animal susceptible al bacilo tuberculoso es el cobayo. La inoculación

experimental para el aislamiento del M. tuberculosis está reservada para muestras clínicas con
escasas bacterias (LCR, biopsias), y se debe realizar en Instituciones especializadas que cuenten
con crematorios para eliminar el animal en estudio. La vía de inoculación es la subcutánea, en el
arco crural; para observar, luego de unos días, la presencia de adenopatía inguinal. El diagnóstico
se realiza con la biopsia del ganglio y la demostración de la presencia del bacilo de Koch.

110
C. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La vacuna contra la tuberculosis es viva atenuada, llamada de Calmette-Guerin (BCG), que

proviene del Mycobacterium bovis. Su uso es recomendado en países donde la enfermedad es
endémica. El efecto más importante de la vacuna es que evita totalmente la presentación de
formas graves de tuberculosis como el compromiso meníngeo y la diseminación sistémica o miliar.

El tratamiento es prolongado (6 a 9 meses) y se emplean combinaciones de varias drogas,

de acuerdo a los esquemas establecidos por las autoridades de Salud, empleando isoniazida,
etambutol, pirazinamida, rifampicina, kanamicina, amikacina o fluoroquinolonas. Se conoce con el
nombre de cepas multi drogo resistentes (MDR) cuando son resistentes al menos a isoniazida y
rifampicina. Las nuevas cepas resistentes de forma amplia o extremadamente drogo resistentes
(XDR), cuando son resistentes a las fluoroquinolonas y a una droga de la segunda línea.

Micobacterium no tuberculosos

Son micobacterias habitantes del medio ambiente, denominadas atípicas y no son

transferibles de una persona a otra.

1. Complejo avium, formado por las especies M. avium y M. intracelulare (MAC): desarrollan bien
a temperatura de 41°C, y son las especies que más afectan a los pacientes inmunodeprimidos.

2. M. kansasii y M bovis producen enfermedad pulmonar muy similar a la del M tuberculosis

3. M. escrofuláceum: escotocromógeno que ocasiona compromiso linfático a nivel cervical

4. M. ulcerans y M. marinum: habitan en medio acuático, desarrollan mejor a 31°C y ocasionan

lesiones dérmicas.

5. M. smegmatis: habitante de la secreción sebácea en el glande del hombre. Otras micobacterias

de desarrollo rápido como M. fortuitum, M.absessus y M chelonae se asocian a infecciones de
tejido subcutáneo como consecuencia de yatrogenia por endovenosos.

Mycobacterium leprae

Es el agente etiológico de la lepra, enfermedad muy antigua, que por presentar lesiones
dérmicas y deformaciones ha conducido a estigmas sociales en muchas culturas, fue descubierto
por Hansen en 1873. A pesar de la incidencia mundial de lepra, el conocimiento del M. leprae ha
demorado, debido a la incapacidad de la bacteria de desarrollar in vitro. Los progresos se
apreciaron luego de la inoculación en la almohadilla plantar del ratón y de tomar conocimiento de
que es una enfermedad endémica en el armadillo.

111
A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: es un bacilo ácido alcohol resistente que no se puede

distinguir de otras micobacterias, se presenta formando agregados o masas. El bacilo está rodeado
de una densa capa de lípidos y un glucolípido fenólico (PGL-1), útil como antígeno en la prueba
serológica.

2. Fisiología: el M. leprae no desarrolla en medios de cultivo sintéticos. El bacilo tiene vida

intracelular y se multiplica bien en la almohadilla plantar del ratón, con un tiempo de generación
de 15 días.

B. PODER PATÓGENO

Los seres humanos y el armadillo de nueve bandas son los únicos huéspedes. La
transmisión de la lepra se realiza por vía aérea; el período de incubación es largo, se estima en
promedio cinco años. La mucosa nasal es el sitio primario de infección, luego se disemina por vía
sanguínea al tejido subcutáneo y a los nervios periféricos, ocasionando pérdida de la sensibilidad
termo algésica. El armadillo, por inoculación experimental, desarrolla la forma clínica lepromatosa

La enfermedad evoluciona en forma muy lenta, y las manifestaciones clínicas son

determinadas por el estado inmunitario del huésped. Cuando no hay respuesta celular (anergia),
se presenta la forma lepromatosa, que es maligna, muy contagiosa, con bacteriemias continuas,
lesiones dérmicas papulosas infiltradas que se ulceran, donde se encuentran abundantes bacilos
dentro de los macrófagos; la cara adquiere el aspecto de león, con pérdida de las cejas; la
neuropatía periférica condiciona cambios tróficos en las extremidades. La prueba cutánea a la
lepromina es negativa. En cambio, los pacientes que reaccionan en forma hipersensible al bacilo,
presentan la forma clínica denominada tuberculoide, que es benigna, con lesiones dérmicas en
placa, hiperpigmentadas, con bordes nítidos y deterioro neuronal periférico; en estas lesiones la
presencia de los bacilos es escasa y la prueba cutánea a la lepromina es positiva.

C. DIAGNÓSTICO

El examen clínico nos muestra alteraciones características de lesiones en nervio periférico

con hipertrofia e hipoestesia, y la evidencia de bacilos ácido alcohol resistentes en el tejido
afectado. Se debe investigar la presencia de bacilos ácido-resistentes en mucosa del tabique nasal.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

El uso de la vacuna BCG (bacilos de Calmet y Guerin) tiene moderada eficacia. No está
recomendado el tratamiento con antibióticos a los contactos domésticos,

El tratamiento clásico es el uso de Dapsona (antimetabolito), Clofazimina (bloquea síntesis

de ADN) y Rifampicina (inhibe síntesis de ac. nucleico), administrados por períodos prolongados.

112
 CAPÍTULO 20
BACTERIAS FILTRABLES
GÉNEROS RICKETTSIA, MYCOPLASMA Y CHLAMYDIA

BACTERIAS FILTRABLES

En este capítulo se ha incluido a tres grupos bacterianos que tienen la característica de ser
muy pequeños, por lo tanto, capaces de atravesar los filtros de 0,45 µm; además, cada uno de
ellos posee cualidades propias que los identifica. Se trata del género Rickettsia, que tiene vida
intracelular obligada; del género Mycoplasma, que carece de pared celular; y del género
Chlamydia, que tiene un mecanismo de multiplicación endocelular propio.

RICKETTSIA

Son bacterias que se caracterizan porque se multiplican dentro de las células eucariotas, y
tienen como reservorio a roedores y artrópodos; la especie R. prowazekii es la excepción, pues el
ser humano es el único reservorio. Son transmitidas por artrópodos (piojo, pulga, ácaro y
garrapata). Dos géneros tienen interés para el ser humano, el género Rickettsia, que tiene
predilección por las células endoteliales de los vasos sanguíneos, y el género Ehrlichia que se ubica
dentro de los mononucleares y granulocitos.

Rickettsia prowazekii

Agente causal de la enfermedad denominada tifus exantemático, epidémico o transmitido

por piojos; enfermedad conocida desde el siglo XVI, descrita por Howard Ricketts en 1910, y que
produjo una elevada mortalidad en la segunda guerra mundial.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son coco-bacilos pleomorfos, de 0,3 a 1,0 µm de tamaño, con las
características de un germen gramnegativo, por lo tanto liberan endotoxina. Colorean
mal con el Gram, por lo que se utiliza la coloración de Giemsa.

2. Fisiología: Desarrollan in vitro en el citoplasma de las células eucariotas, donde se

multiplican en forma lenta, pues tienen un tiempo de generación de 10 horas; el
desarrollo intracelular conduce a lisis celular. La bacteria es frágil a temperaturas
superiores a 36°C.

113
B. PODER PATÓGENO

El ser humano es el principal reservorio, aunque se encuentra en la ardilla voladora de

Norte América El piojo del cuerpo (pedículus humanus) se infecta al picar al hombre, R. prowazekii
se reproduce en las células intestinales del piojo y se elimina por las heces. Cuando el piojo pica
defeca a la vez, produce escozor y al rascarse la persona se auto inocula. Dos a tres semanas
después el piojo muere infectado.

La sintomatología principal es fiebre, cefalea, mialgias y postración; el compromiso del

endotelio vascular (vasculitis) se expresa por máculas, petequias y micro hemorragia sistémica; el
estado de postración (tifoso) revela el compromiso del sistema nervioso central.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

La determinación de anticuerpos séricos mediante técnicas de inmunofluorescencia

indirecta o peroxidasa es útil; mejor aun el uso de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTIO

Mejorar las condiciones higiénicas de las viviendas y eliminar los piojos son las medidas
preventivas. Para el tratamiento se recominda el uso de tetraciclina o cloranfenicol.

Rickettsia typhi

Es el agente causal del tifus murino o endémico, tiene como reservorio a los roedores, y a
las pulgas como vectores. La infección en humanos es accidental y la sintomatología de tipo
“benigno”.

Ehrlichia

Estas bacterias son parásitos intracelulares obligados de las células hematopoyéticas

(monocitos y granulocitos) de los mamíferos. Las bacterias permanecen dentro de una vacuola en
la célula anfitriona, donde se multiplican por fisión binaria formando cuerpos elementales y
cuerpos reticulares; los cuerpos elementales se organizan en mórulas y llevan a la lisis celular.

Tienen como reservorio al ciervo de cola blanca, perro, zorro y cabra; y como vector a la
garrapata. La enfermedad es muy ocasional y se presenta con sintomatología de un proceso
infeccioso general semejante a la gripe, con exantema, leucopenia, trombocitopenia e incremento
de las transaminasas séricas.

El diagnóstico sólo es posible con la técnica de amplificación del ADN. La doxicixlina es el

antibiótico recomendado para el tratamiento.

114
MYCOPLASMA

Los micoplasmas son microorganismos ampliamente distribuidos en el reino vegetal y

animal. Fueron descritos en 1892, por Nocard y Roux, en secreciones respiratorias de bovinos.
Diennes, en 1937, identifica micoplasmas en humanos, a partir de una infección en la glándula de
Bartolino.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: son bacterias pequeñas (0,1 – 0,3 µm), carentes de pared
(peptidoglucano), luego no tienen forma definida (polimorfas). La membrana
citoplasmática está constituida por tres capas de esteroles, compuesto químico ausente
en bacterias y virus.

2. Fisiología: la mayoría de especies son anaerobias facultativas, excepto M. pneumoniae

que es aerobia. Para desarrollar in vitro requieren de alto contenido de lípidos en los
medios (30%), con agregado de inhibidores (Penicilina y acetato de talio). Formarán
colonias luego de 7 a 15 días, que se caracterizan por tener la superficie granulosa y la
zona central deprimida, en “huevo frito”. Metabolizan glucosa, arginina, úrea y reducen el
tetrazolium.

3. Clasificación: las especies de importancia para el ser humano son:

a. M. pneumoniae: traqueítis, neumonía, pericarditis, artritis.
b. M. genitalium: uretritis no gonocócica, enfermedad infecciosa pélvica.
c. M. hóminis: pielonefritis, fiebre puerperal
d. Ureoplasma ureolíticum: uretritis no gonocócica, aborto espontaneo, pielonefritis.

B. PODER PATÓGENO

M. pneumoniae

También denominado agente de Eaton, es causante de la neumonía atípica. Se sospecha

de su presencia patógena cuando se cumplen tres condiciones en una neumonía: 1) resistencia al
tratamiento con penicilina, 2) no se identifica agente alguno en los estudios microscópicos y de
cultivo en muestras de esputo y, 3) discordancia entre la sintomatología y las imágenes
radiológicas. Es un habitante exclusivo del hombre, que coloniza vías respiratorias altas.

M. pneumoniae posee la adhesina P1 con la que se adhiere al epitelio respiratorio,

destruyendo las células ciliadas y dejando la mucosa desprotegida para otros agentes infecciosos,
ocasionando el síndrome clásico de tráqueobronquitis, que puede evolucionar hacia la neumonía.
La infección genera respuesta inmune protectora con anticuerpos Ig G e Ig A; pero también se
forman autoanticuerpos de tipo Ig M, que tienen la característica de aglutinar los iso antígenos
presentes en los hematíes a temperatura de 4°C. (crioaglutininas); ésta reacción es reversible a
37°C.

115
 El diagnóstico microscópico no es útil. En los cultivos, a partir de lavado bronquial, pueden
desarrollar colonias microscópicas luego de dos semanas de incubación, que se identifican porque
el antisuero específico inhibe la formación de colonias. El cultivo tiene el inconveniente de que
sigue siendo positivo, incluso después de alcanzar la mejoría del paciente. La presencia de
crioaglutininas en la primera quincena de la enfermedad, puede ser verificable en el 40% a 70% de
casos. El procedimiento es sencillo: se obtiene sangre en tubo con heparina, el cual se guarda en
refrigeración (4°C) por dos horas y se observará la aglutinación de los eritrocitos, reacción que es
reversible al incubarlo a 37°C. Los método de ELISA para detectar Ig G e Ig M, es el mas
recomendado.

Mycoplasmas genitales

Diversas especies de micoplasmas habitan las mucosas genitales, las más frecuentes son:
M. genitalium, M. hóminis y Ureoplasma ureolíticum. Se observa una mayor colonización en
mujeres; en cambio, en la uretra de los hombres se empieza a observar desde el inicio de las
relaciones sexuales. La especie M. genitalium está muy relacionada con infecciones uretrales no
gonocócicas.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Se recomienda el uso de técnicas inmunológicas: fijación de complemento y ELISA, que

deben realizarse por duplicado con cuatro semanas de diferencia, para demostrar conversión
serológica

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La prevención es complicada, puesto que hay numerosas personas portadoras

asintomáticas. No hay vacuna aceptable. El tratamiento de preferencia es doxiciclina o
eritromicina.

CHLAMYDIA

El grupo bacteriano que comprende al género Chlamydia, se caracteriza por ser parásitos
intracelulares obligados, carentes de peptidoglucanos y que tienen un ciclo vital muy particular,
que lleva a la formación de cuerpos de inclusión. Desde muy antiguo, en China, se conoce una
enfermedad que produce ceguera, denominada tracoma ocular, causada por un miembro de éste
género. La especie de mayor interés para el ser humano es Chlamydia trachomatis.

A.ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

1. Morfología y estructura: estas bacterias poseen dos formas: a) el cuerpo elemental (CE),
esférico, de 0,3 µm y; b) el cuerpo reticular (CR), de 0,8 – 1,0 µm. Carecen de pared real
con mureina. La membrana citoplasmática que las rodea tiene dos capas, la capa externa

116
 es una proteína única en cada especie de Chlamydia y responsable de las variantes
serológicas.

2. Fisiología: los cuerpos elementales son muy resistentes a cambios ambientales, no se

replican, pero son infecciosos y se adhieren a la superficie de las células susceptibles;
ingresan a las células por endocitosis y permanecen dentro de los fagosomas, donde se
convierten en cuerpos reticulares. El CR tiene actividad metabólica, se replica por fisión
binaria e incrementa su tamaño hasta formar una inclusión. Luego de 24 a 48 horas el
cuerpo reticular se transforma en numerosos cuerpos elementales, los que se liberan al
producirse la lisis celular y son infectantes a otras células.

3. Serotipos: se clasifican en relación a la antigenicidad de la proteína de la membrana

externa en:
A, B, Ba, C … compromiso conjuntival: tracoma ocular
D hasta K … enfermedades del tracto genital y conjuntivitis de inclusión
L1, L2, L3 … compromiso ganglionar: linfogranuloma venéreo

B. PODER PATÓGENO

Tracoma

La infección se presenta en zonas endémicas del África y Medio Oriente, como una
queratoconjuntivitis folicular crónica. Si la enfermedad progresa se observan cicatrices
conjuntivales y compromiso de la córnea.

Infección urogenital

Actualmente se señala a Ch. trachomatis como responsable del mayor número de

pacientes con enfermedades de transmisión sexual. (Ver capítulo 18)

Conjuntivitis de inclusión

Es una conjuntivitis folicular aguda del adulto, en la que puede apreciarse adenopatía pre
auricular. Un porcentaje importante de estos pacientes presenta infección genital concomitante a
Ch. trachomatis.

Linfogranuloma venéreo (LGV)

Los serotipos de LGV, L1, L2 y L3, son considerados de transmisión vía sexual y tienen
como células susceptibles a los mononucleares de los ganglios linfáticos. (Ver capítulo 18).

117
 SECCIÓN III
VIROLOGÍA

CAPÍTULO 21
VIRUS: ESTRUCTURA. GENOMA. REPLICACIÓN. PATOGENIA. DIAGNÓSTICO
_______________________________________________________________
VIRUS

La palabra virus viene del latín y significa “fluido venenoso”, concepto que procede de los
experimentos realizados por Ivanowski (1892), luego de demostrar que los filtrados de extractos
de plantas infectadas con el mosaico del tabaco, podían aun transmitir la enfermedad. Entonces
se concluyó que existían otros agentes infecciosos más pequeños que las bacterias, capaces de
producir enfermedades.

Los primeros microbiólogos tuvieron dificultad para cultivar in vitro estos nuevos agentes,
aunque utilizaron animales vivos (perros, conejos, ovejas y vacas) para los experimentos con rabia
y viruela. En la década del 1930 se iniciaron los aislamientos de los virus utilizando suspensiones
celulares de tejido renal y embrión de pollo; luego se desarrollaron los cultivos de células de línea
(células cancerosas) y los de células diploides humanas. En la actualidad, con el uso de técnicas de
biología molecular, se puede identificar a los virus por la secuencia de sus nucleótidos.

Los virus se definen como fragmentos de ácido nucleico intracelulares obligados, que no
tienen la capacidad para obtener energía y de generar biosíntesis, por lo cual dependen de la
célula huésped para su replicación.

A.ESTRUCTURA

Los virus están constituidos por una molécula de ácido nucleico, sea ADN o ARN. Su
tamaño es muy pequeño, se encuentran en el rango de 20 a 150 nanómetros. Los virus dependen
de la célula anfitriona para la traducción de la información contenida en su genoma, que como
mínimo son tres genes: a) para fabricar la proteina del cápside que proteje al ácido nucleico,
b) la estructura de los receptores a la célula anfitriona y c) la polimerasa viral que da incio a la
replicación. Las enzimas y energía necesarias las obtiene de la célula huésped.

El conocimiento de las diferentes componentes de un virus contribuye para la

identificación, clasificación, comprensión del mecanismo de penetración a la célula huésped y su
replicación. Se describen las siguientes estructuras:

1. Ácido nucleíco (genoma)

La información hereditaria de los virus está codificada en una copia de ADN o de ARN,
según corresponda (sólo los retrovirus tienen dos copias de ARN). Los genomas son

118
 variados, pudiendo ser de doble cadena o cadena sencilla, lineales o circulares, y
continuos o segmentados.
Los genomas de los virus contienen menos de 200 genes, y se les puede medir por el
número de bases contenidas en el ácido nucleico; estando en el rango desde 5.2 hasta 375
kpb. Para los de cadena sencilla se utiliza la expresión “Kb” (kilo bases), y para los de
cadena doble “kpb” (kilo pares de bases).
2. Cápside
Está formado por proteínas idénticas que recubren al virus, las que se asocian en unidades
formando una estructura denominada capsómero que rodea a la partícula viral. La función
principal es proteger al ácido nucleico y facilitar el ingreso a la célula huésped.
Las estructuras 1 y 2 constituyen el nucleocápside.
3. Envoltura
La mayoría de virus poseen una cubierta de lípidos, por lo que son frágiles a la sequedad,
acidez, detergentes y solventes orgánicos. Son componentes químicos, como
glucoproteínas, hemaglutininas, neuroaminidasas, etc. con carácter antigénico, que
inducen reacción inmunitaria protectora. Algunos virus carecen de esta envoltura, como
polio o adeno, y se les denomina desnudo.
A la partícula viral completa se le denomina virión.

glucoproteínas

núcleo
cápside

Virus desnudo Virus con envoltura

Figura: 21-1: esquema de un virus desnudo y con envoltura

La estructura del nucleocápside tiene una organización geométrica, formando simetría

cúbica o helicoidal. La simetría cúbica básica es un icosaedro con 20 caras triangulares y 12
vértices. Esta configuración permite mantener una apariencia similar cuando se gira sobre
cualquiera de sus ejes. La simetría helicoidal es similar a una escalera de caracol, que es simétrica
a su eje central. Algunos virus, como los poxvirus, tienen estructura compleja. Sólo los
bacteriófagos, virus de las bacterias, tienen una estructura binaria: cabeza cúbica y cola helicoidal.

B. REPLICACIÓN

Los mecanismos íntimos de la replicación del genoma viral varían en relación a la

estructura del genoma, a la forma de penetración en las células susceptibles y al sitio de la
replicación (citoplasma o núcleo). Pero en líneas generales todos siguen los siguientes pasos:

1. ADSORCIÓN o unión a la célula diana: los virus se unen a los receptores de las células
susceptibles, lo que se define como tropismo celular. Ejemplo: El virus de Epstein Barr se
une al receptor C3d del linfocito B.

119
 2. PENETRACIÓN: el virus debe atravesar la membrana citoplasmática de las células y liberar
su genoma, pudiendo hacerlo de tres maneras:
a) Por fusión externa: los virus que carecen de envoltura se adhieren a la membrana
celular y el ácido nucleíco penetra directamente.
b) Los virus con envoltura: se fusionan con la membrana celular y se interiorizan dentro
de una vacuola, liberando luego el ácido nucleíco en el citoplasma.
c) Algunos virus penetran en forma similar a la fagocitosis.
3. PÉRDIDA DE LA COBERTURA DEL GENOMA: el genoma de los virus ADN se introducen en el
núcleo (excepto los virus Pox); en cambio la mayoría de virus ARN se quedan en el
citoplasma, donde completan la liberación de su cobertura (excepto Influenza y
retrovirus).
4. SÍNTESIS DE MACROMOLÉCULAS: primero se sinteriza el ARNm, para transcribir las
proteínas no estructurales (polimerasas y proteínas de unión al ADN). Luego se codifican
las proteínas estructurales.
5. REPLICACIÓN DEL ÁCIDO NUCLEICO: los virus ADN necesitan de polimerasa y desoxi-
ribonucleasa para su replicación. En cambio los virus ARN ya tienen un ARNm o bien una
plantilla de ARNm y el genoma viral debe codificar las polimerasas de ARN.
6. SÍNTESIS DE PROTEINAS VIRALES: todos los virus dependen de los ribosomas y del ARNt de
la célula hospedera para fabricar sus proteínas.
7. ENSAMBLAJE: es el proceso por el cual se unen todas las partes pre fabricadas del virión,
formando estructuras vacías, para luego rellenarse con el genoma. Algunos lo hacen en el
citoplasma como los poliovirus, en cambio otros, sólo en el núcleo como los adenovirus.
8. LIBERACIÓN: los virus ya formados pueden ser liberados por tres mecanismos: a) Lisis y
muerte celular, denominados también virus líticos, ejemplo: polio, sarampión. b) En
algunos casos la célula infectada no muere, se produce una infección persistente con una
gradual liberación de virus por exocitosis, ejemplo: herpes. Y c) las partículas virales se
liberan por gemación, como es el caso de virus de influenza.

El ciclo de multiplicación en promedio es de 6 a 8 horas. Es frecuente que durante la replicación

viral se produzcan mutaciones, lo que da origen a variantes antigénicas o variantes no viables.

C. PATOGENIA

El ser humano está expuesto a numerosos virus ubicuos, pero determinadas situaciones
como la higiene, el hacinamiento, los estilos de vida, o el contacto con vectores, hace que se
exponga a ciertos virus con capacidad patogénica para el hombre. La transmisión puede ser por
contacto directo, vía respiratoria, fecal-oral, secreciones, sangre, inyecciones o vectores. El virus se
adhiere a los receptores células susceptibles (piel, mucosas, etc.), donde se replican de inicio.

Una vez ingresado el virus al organismo, se va a diseminar, sea por vía sanguínea, linfática
o neuronal; y por tropismo se dirige hacia el tejido u órgano susceptible. El estado inmunitario del
huésped determinará el grado de infección, y las manifestaciones clínicas dependerán del tipo de
interacción entre virus y célula hospedera, pudiendo ser:

120
 1. Lisis celular: por interrupción de la síntesis de proteinas celulares (polio), o por
acumulación de grandes cantidades de cápside (adenovirus).
2. Fusión celular: glucoproteinas virales ubicadas en la superficie de las células permiten la
unión entre ellas y formación de células multinucleadas o sincitios (paramixovirus,
respiratorio sincitial, herpes); que facilita que el virus pase de una célula a otra.
3. Cuerpos de inclusión: son estructuras formadas por la acumulación de viriones maduros
(reovirus), o áreas de la célula con cambios por la replicación viral; observables al
microscopio de luz, pudiendo ser intracitoplasmáticos (rabia, poxvirus) o intranucleares
(citomegalovirus).
4. Formación de nuevos antígenos en la superficie celular: especificados por el virus
infectante, de manera que marca a las células infectadas como ajenas y quedan expuestas
al ataque de los linfocitos T citotóxicos (mixovirus, retrovirus).
5. Infección persistente: la célula infectada no muere, pero libera constantemente partículas
virales, por mecanismo de exocitosis o gemación (virus con envoltura).
6. Infección latente: sucede con los virus ADN, que se ubican en células que no poseen los
factores necesarios para su replicación (células en reposo), como es el caso del herpes
virus, que se ubica en las raíces ganglionares dorsales de las neuronas; o como el virus del
papiloma, que se integran a las células epiteliales del huésped.
7. Oncogénesis: algunos virus, por diversos mecanismos, pueden provocar transformación o
inmortalización de la célula huésped. Las células adquieren un crecimiento continuo sin
envejecimiento, se altera su morfología y pierden la propiedad de inhibición de
crecimiento por contacto, que las transforma en tumorales. Ejemplo: el virus de Epstein
Baar, que inmortaliza a los linfocitos B; el virus linfotrópico de linfocitos T humanos (HTLV-
1), codifica proteínas que estimula el crecimiento de los linfocitos provocando leucemia a
largo plazo y; los virus de la hepatitis B y C, debido a la infección persistente se producen
mutaciones que originan la formación de tumores.

Transformación
Lisis tumoral

Fusión celular
Infección
persistente
Cuerpo de
inclusión
Infección latente

Figura: 21-2: Interacción virus-célula huésped

121
D. DIAGNÓSTICO

La historia clínica del paciente orienta al diagnóstico y permite excluir infecciones

bacterianas o micóticas; además, debe tenerse en consideración factores externos, como las
estaciones del año o antecedentes de viajes a zonas endémicas. La muestra más adecuada, así
como la metodología a emplear para hacer el diagnóstico, dependerá de lo que queremos
demostrar: el virus, sus antígenos de estructura o los anticuerpos generados por el huésped.

1. Citología: muchos virus producen alteraciones celulares conocidas como “efecto

citopático”, que se pueden expresar como lisis celular (enterovirus); formación de sincitios
o células multinucleadas (herpes virus); o cuerpos de inclusión (rabia, citomegalovirus).
2. Aislamiento: la muestra para el aislamiento del virus debe ser obtenida al inicio de la fase
aguda de la infección y ser transportada en cadena de frío. El laboratorio debe disponer de
cultivos tisulares para ello.
El primer tejido utilizado para aislar un virus fue la membrana corio alantoidea del huevo
embrionado, que aun se utiliza para la elaboración de la vacuna para la gripe. Los cultivos
de células primarias, son los obtenidos de un órgano (riñón, fibroblastos de embrión de
pollo, suspensión de linfocitos), donde crecen en mono capa, son muy útiles, pero con el
inconveniente de tener corto tiempo de vida. Y los cultivos de líneas celulares tumorales,
que tienen la ventaja de sub cultivarse continuamente sin envejecer (Hela, Hep2, Vero,
etc.). La elección del cultivo celular dependerá del virus a estudiar.
El reconocimiento del virus en los cultivos celulares se realiza por diversos
procedimientos: a) por las características del efecto citopático, b) por la presencia de
propiedades del virus (hemaglutinación), y c) por la demostración del antígeno viral con
el uso de técnicas inmunológicas o moleculares.
3. Proteínas virales: el virus en su multiplicación sintetiza enzimas y proteínas, las que
pueden ser separadas por electroforesis e identificadas con el uso de anticuerpos mono
específicos (monoclonales), mediante técnicas de enzima inmuno ensayo, fluorescencia,
aglutinación con látex, etc.
4. Determinación de material genético del virus: el uso de sondas de ADN con secuencias
complementarias de regiones específicas del virus y la amplificación del genoma
empleando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), son técnicas actuales de gran
utilidad.
5. Estudio serológico: se utiliza para determinar si la enfermedad es aguda o crónica y definir
si se trata de infección primaria o reinfección. La presencia de anticuerpos Ig M nos indica
que se trata de una infección primaria reciente. Cuando hay seroconversión, o sea que el
título de anticuerpos se ha incrementado más del cuádruple en un intervalo de 2 a 3
semanas, confirma el diagnóstico de la enfermedad. En casos de reinfecciones frecuentes,
se suele mantener el título de anticuerpos elevado. La presencia de anticuerpos contra
antígenos del virus, determinan la evolución de la enfermedad (Ejemplo: anticuerpos
contra el antígeno de superficie de hepatitis B).

122
E. CLASIFICACIÓN

Para clasificar los virus se tienen diversos criterios, como: el tipo de ácido nucleico, el
número y tipo de cadenas del ácido nucleico, la polaridad del ARN, la simetría del nucleocápside,
la presencia o no de envoltura, etc. La clasificación de Baltimore, basada en el tipo de ácido
nucleíco y mecanismo de replicación, divide a los virus en 7 clases. En cambio, el Comité
Internacional de Taxonomía de los Virus del 2005, los clasifica en 73 familias, 287 géneros y más
de 1950 especies.

Desde el punto de vista médico práctico, los virus también se pueden distinguir por su
afinidad tisular o mecanismo mediante el cual producen enfermedad. Algunos son neurotropos,
dermotropos; otros se replican únicamente en el hígado (hepatitis); y algunos tienen en común la
vía de ingreso como la fecal oral (enterovirus). Es importante tener en consideración que los
miembros de una familia pueden ocasionar síndromes distintos y a veces se observa superposición
de síndromes debido a virus diferentes, como es el caso de los síntomas respiratorios.

Virus ADN

Cadena simple Cadena doble

Desnudo Desnudo Con envoltura

Parvovirus (B-19) Papovirus Herpesvirus

Papiloma Poxvirus
Poliomavirus Hepatitis B

Virus ARN

Cadena simple Cadena simple Cadena doble

positiva negativa

Desnudo Con envoltura Con envoltura Desnudo

Calcivirus Flavivirus Rabdovirus Reovirus

Hepatitis E Hepatitis C Orthomixovirus Rotavirus
Picornavirus Fiebre amarilla Paramixovirus
Enterovirus Dengue Filovirus (Ebola)
Hepatitis A Coronavirus Bunyavirus
Rhinovirus Togavirus Arenavirus
Rubeola
Retrovirus

123
F. RESISTENCIA DEL HUÉSPED

Al inicio de la infección viral el huésped produce factores solubles de defensas no

específicos, como el interferón y el complemento; así mismo hay respuesta inmune celular como
los fagocitos y la actividad de las células asesinas (natural Killer). La presencia de anticuerpos
previene infecciones virales posteriores, porque neutraliza la actividad del virus. La respuesta
inmune celular comienza a participar cuando la infección ya está establecida.

Los interferones (IFN) son proteínas elaboradas por linfocitos y fibroblastos, desde las
primeras horas de la presencia viral en el huésped. Son moléculas con actividad inespecífica de
virus, pero específica de especie animal. Se describen tres interferones antigénicamente distintos:
alfa, producido por células nucleadas (leucocitos y macrófagos); beta, producido por células
epiteliales y fibroblastos; y gamma, producido por los linfocitos (cooperadores y asesinos). Los
interferones tienen diversas funciones, como bloquear la replicación viral, producir cambios
profundos en las células afectadas, ampliar la distribución de los antígenos de histocompatibilidad
sobre la superficie celular y, modular la actividad de los linfocitos B y T con el incremento de la
citotoxicidad.

El sistema complemento lo conforma un grupo de nueve glucoproteínas, que se activan de

manera secuencial, y tiene por finalidad la atracción de las células inmunes al área de la infección,
ocasionando lisis de los microorganismos.

Los linfocitos B, identifican a las células presentadoras del antígeno específico y se inicia
la proliferación de clonas celulares con la misma especificidad antigénica. Las células clonadas
efectoras secretan anticuerpos (inmunoglobulinas), que se combinarán con los antígenos
específicos para neutralizar la actividad del virus. En muchas infecciones los linfocitos T
sensibilizados forman inmuno complejos, que inctementan la sintomatología: exantema en el
Saramión, hemnorragia en el dengue, etc

F. ANTIVIRALES

La mayoría de sustancias utilizadas como antivirales son también tóxicas para las células
del huésped, así tenemos:

a. Análogos a los nucleótidos: la zidovudina (AZT), se relaciona con la timidina y bloquea

la enzima transcriptasa inversa del VIH.
b. Los productos no análogos de nucleótidos: el ácido fosfonofórmico, que inhibe a la
enzima transcriptasa inversa.
c. Inhibidores de proteasas: que se unen al sitio activo de la proteasa y evitan así la
replicación del VIH.
d. Inhibidores de la fusión: es un péptido sintético que se une a la proteasa gp41 e
impide la unión del virus a la membrana del linfocito T.

124
 CAPÍTULO 22
VIRUS BACTERIANOS
________________________________________________________________________________

VIRUS BACTERIANOS

Los virus tiene vida intracelular obligada, luego podrán ubicarse dentro de células
eucariotas (vegetales o animales), así como de células procariotas (bacterias). Aquellos virus que
infectan a las bacterias se les conoce con el nombre de bacteriófagos o fagos. Este conocimiento
se incia con los trabajos de Twort, 1915 y Herelle, 1917, y ha permitido comprender la biología de
los virus en general. Son tan abundantes en la naturaleza como las bacterias, y participan
activamente en mantener la ecología acuática en el agua dulce como en la salada.

1. Estructura
La mayoría de los bacteriófagos tienen una estructura de simetría binaria: cabeza cúbica y
cola helicoidal. La longitud varía de 10 a 800 nm. El genoma, en el 96% de los
bacteriófagos, es ADN bicatenario; conteniendo de 17 a 500 kb. Los más conocidos son el
tipo T (T1 a T7) y lambda.

2. Propiedades
Los bacteriófagos se adhieren a los receptores de la superficie bacteriana (pili, proteínas,
oligosacáridos, etc) con las fibras del extremo de la cola; seguidamente ésta se contrae e
inyecta el ADN a la bacteria huésped, que para ingresar necesita de la digestión enzimática
del peptidoglucano.
La relación del bacteriófago con la célula bacteriana puede ser de dos formas:
A) Lítica, cuando el ADN viral al ingresar a la célula se replica y fabrica numerosos viriones
que lisan la bacteria; a los que se les llama virus virulentos, ejemplo: bacteriófago T4 del
Escherichia coli.
B) Atemperado, cuando el ADN del bacteriófago al ingresar se integra al cromosoma
bacteriano, y se replican conjuntamente con la bacteria, permaneciendo inactivo y
produce infección latente. La bacteria que lleva el ADN del fago se dice que se encuentra
en estado lisogénico, y el fago en estado atemperado, a quien también se llama profago.
Ejemplo: Escherichia coli con el fago lambda, o C. diphtheriae con el fago beta.
El 90 % de los fagos se encuentran en estado atemperado. Hay situaciones o condiciones
(radiaciones ultravioleta) que dañan el ADN de la bacteria y permiten que los profagos
cambien a la forma lítica, y se expresen destruyendo las bacterias, fenómeno que se
aprecia in vitro, por el aclaramiento de los cultivos líquidos o la formación de placas de lisis
en las colonias.
El conocimiento de los bacteriófagos atemperados ha permitido demostrar uno de los
mecanismos de transferencia de material genético entre bacterias, denominado

125
 “transducción”; mecanismo por el cual el bacteriófago es portador de genes de una
bacteria donatriz a una receptora. Concepto que ha contribuído a la genética experimetal.
Hay un escaso número de bacteriófagos denominados filamentosos, constituidos por ADN,
que no lisan las bacterias y sólo infectan a las bacterias que poseen el plásmido F, el cual
codifica la formación de pili sexual.

3. Poder patógeno
En principio los bacteriófagos son virus de las bacterias, luego no deberían tener rol
patógeno para los humanos, pero algunos contribuyen a la virulencia de ciertas cepas
bacterianas, con la codificación de proteínas tóxicas. Ejemplo: Streptococcus pyógenes,
portador del bacteriófago T12, la convierte en una cepa lisogénica productora de
exotoxina eritrogénica; Corynebacteriun diphtheriae, portador del profago beta es el
causante de la difteria; así mismo Vibrio cholerae, portador del bacteriófago CTX;
Escherichia coli, portador del bacteriófago H-19B; Staphylococcus aureus, portador de los
bacteriófagos lambda y el Clostriodium botulinum, portador de los bacteriófagos beta,
causante del botulismo.

4. Utilidad
a) La especificidad de los bacteriófagos, frente a los receptores de la superficie de las
bacterias, ha permitido elaborar un sistema para identificar bacterias, basado en el
uso de un panel de bacteriófagos. Este sistema tiene utilidad práctica para el
seguimiento epidemiológico en un brote epidémico. Ejemplo: Staphylocooccus o
Salmonella. Asi mismo para identificar a una cepa bacteriana específica como Yersinia
pestis.
b) La observación de Herelle, de la lisis bacteriana de los medios líquidos, al ser
expuestos a filtrados del mismo cultivo, lo llevó a acuñar el término “bacteriófago”,
que se come a las bacterias, y aplicarlo en el tratamiento de infecciones bacterianas.
La terapia con bacteriófagos tuvo auge en la era pre-antibiótica, sobre todo en la
Unión Soviética.
c) Muchas bacterias saprofitas colonizan superficies sólidas y forman cubiertas viscosas,
que se les denomina “biopelículas”, y constituyen un problema en pacientes
portadores de catéteres, implantes valvulares o dispositivos ortopédicos. Estas
bacterias producen polímeros de polisacáridos, que les facilita su adhesión a la
superficie. Es cada vez mayor el interés de pretratar los dispositivos con bacteriófagos,
para controlar la formación de biopelículas.
d) La industria de alimentos, biotecnología y farmaceútica utiliza bacterias en gran escala
para producir enzimas, hormonas, antibióticos, fármacos, alimentos fermentados, etc.
Por ello requiren de un control adecuado para evitar la infección de éstas bacterias
con bacteriófagos líticos durante la producción, que anularía la producción.

126
 CAPÍTULO 23
VIRUS DE LA HEPATITIS
_______________________________________________________________
VIRUS DE LA HEPATITIS

Se refiere a un grupo de virus que utilizan a los hepatocitos como principales células
blanco para su replicación, a diferencia de otros procesos infecciosos que lo hacen en las células
de Kuppfer, o lesionan al hígado como parte de un proceso sistémico (Epstein-Baar,
Citomegalovirus, Fiebre amarilla).

Los virus de la hepatitis (VH) “verdadera” pertenecen a diferentes familias, así: VHA
(Picornaviridae), VHB (Hepadnaviridae), VHC (Falviviridae), VHD (Deltaviridae), VHE (Calciviridae) y
VHG (Flavivirus); por lo tanto, tienen diferentes estructuras, diferentes mecanismos de replicación
o de transmisión, y la inmunidad post infecciosa adquirida por el huésped es homóloga. Desde el
punto de vista clínico las hepatitis virales producen sintomatología similar, con ictericia e
incremento de las transaminasas séricas.

Virus de la Hepatitis A (VHA)

1. Estructura
Es un virus ARN desnudo, con simetría cúbica de 27 nm de diámetro. Codifica cuatro
polipéptidos y posee un solo serotipo. Pertenece a la familia Picornaviridae (enterovirus),
pero es la excepción del grupo, ya que no es citolítico.

2. Propiedades
El VHA es estable al medio ácido, a los detergentes y al agua salada o dulce; en cambio es
sensible a las radiaciones UV y al formol.

3. Poder patógeno
La infección es de tipo fecal-oral, por la ingesta de agua, alimentos o manos contaminadas
con heces. La mayor incidencia se presenta en niños y adultos jóvenes, en poblaciones con
deficiente tratamiento de aguas servidas.
El virus alcanza el parénquima hepático, se replica en los hepatocitos y en las células de
Kupffer, y luego se excreta por vía biliar al intestino. La destrucción celular se presenta en
las áreas periportales como consecuencia de la acción de linfocitos T citotóxicos y
linfocitos citolíticos naturales (killer).

4. Aspectos clínicos
El período de incubación es breve, de 2 a 6 semanas, con malestar general, pérdida de
apetito y fiebre; luego se presenta ictericia e incremento de las transaminasas.
Generalmente la Hepatitis A se autolimita y tiene un tiempo de duración de 2 a 4

127
 semanas. También se le denomina hepatitis infecciosa, no genera estado de portador y la
recuperación total se observa en la mayoría de casos.

5. Diagnóstico de laboratorio
En la fase aguda de la enfermedad el diagnóstico se establece con la determinación de la
inmunoglobulina M anti VHA. En cambio, la determinación de los anticuerpos G anti VHA
nos ofrece información sobre la prevalencia de la enfermedad en una población.

6. Prevención y tratamiento
El control de la infección en la comunidad depende de la higiene de manos, en especial de
los manipuladores de alimentos, y el tratamiento del agua potable con cloro. Se
recomienda la vacuna inactivada con formol a personas que visitan regiones endémicas.

Virus de la Hepatitis B (VHB)

1. Estructura
Es un virus ADN de 32 kpb, con envoltura, que penetra a la célula por endocitosis y se
replica en el núcleo. El virión completo mide 42 nm y se le llama partícula de Dane. La
proteína que rodea al genoma constituye el antígeno del centro vírico (AgHBcore).
La envoltura del virus está formada por glucoproteinas (L, M y S), que se constituyen en
partículas esféricas o tubulares, de 22 nm de diámetro, y son los antígenos de superficie
(AgHBs), denominados inicialmente como antígeno de Australia; son las estructuras
necesarias para unirse a los receptores de los hepatocitos y participar en el ensamblaje
del virus, así mismo ellos determinan el genotipo del virus (A … F).
Además hay una proteína semejante a la del core, que es procesada de manera diferente
y que expresa determinantes antigénicos distintos: AgHBe.

2. Propiedades
El virión es muy estable, resiste al éter, al pH bajo, a la congelación y descongelación
repetida, pero es sensible a temperaturas superiores a 100°C.

3. Poder patógeno
El conocimiento del VHB se inicia en el año 1964 con la descripción hecha por Blumber,
que hizo referencia a que el suero de los aborígenes de Australia tenía un
comportamiento similar, en el laboratorio, al de los pacientes multitransfundidos con
hepatitis. Luego se demostró que dichas reacciones se debían a la presencia de un
antígeno, al que se le denominó “antígeno australiano”. Posteriormenete se confirmó
como el virus de la Hepartitis B.
El virus sólo se transmite por la sangre y líquidos corporales (transfusión, semen, saliva,
pinchazo de aguja, tatuajes; en recién nacidos durante el parto y leche materna); el riesgo

128
 se incrementa en trabajadores de la salud, cuando hay presencia de abrasiones en la piel
y salpicaduras de pequeñas gotas de secreciones en el ojo.
El virus se replica en los hepatocitos y las copias de los genomas se integran a la cromatina
celular, permaneciendo latentes por períodos largos sin provocar lesión celular. Hay
producción de gran cantidad de antígenos de superficie (AgHBs), que dan un aspecto de
“vidrio esmerilado” a los hepatocitos, luego son liberados al torrente sanguíneo. La
respuesta inmunitaria de la persona dictará la evolución de la enfermedad: aguda, crónica,
sintomática o asintomática.
Los linfocitos T citotóxicos (CD8+) son los causantes de la lisis de los hepatocitos. El virus
estimula la producción de interferón (IFN), que a su vez incrementa la distribución del
antígeno de histocompatibilidad de clase I en las células hepáticas, para ser presentadas a
los linfocitos T.

4. Aspectos clínicos
El período de incubación es largo (2 a 3 meses), luego se presentan los síntomas clásicos
con fiebre, ictericia, elevación de las enzimas transaminasas y la presencia del antígeno
AgHBs, en la sangre, seguido del antígeno AgHBe y de la ADN polimerasa.
En una evolución clínica deseable, que dura aproximadamente un mes, el primer
anticuerpo que se produce es el antiHBc, el siguiente es el antiHBe, que representa un
buen signo de recuperación en la mayoría de pacientes y es precursor de la desaparición
del antígeno AgHBe (infectividad). El último anticuerpo en aparecer es el antiHBs, y es
indicativo de recuperación completa e inmunidad.
Un 5% a 10% de los infectados evolucionan hacia la hepatitis crónica, debido a que no
forman anticuerpos antiHBs, y los antígenos AgHBs permanecen en la sangre por muchos
años, por lo tanto son contagiantes. Los anticuerpos antiHBe se presentan tardíamente. El
80% de los pacientes que presentan cáncer hepático primario son atribuidos a hepatitis
crónica por VHB, y se estima que un paciente de cada mil hace hepatitis fulminante y
muerte.

5. Diagnóstico de laboratorio
Se pueden emplear procedimientos como aglutinación de látex, hemaglutinación pasiva,
enzima inmuno ensayo; así como procedimientos moleculares o pruebas rápidas, para la
detección de antígenos o anticuerpos.
En la fase aguda y durante la replicación viral se encuentran en la sangre los antígenos
AgHBs y AgHBe, así como el ADN viral y la ADN polimerasa.
La forma crónica se caracteriza por la presencia de anticuerpos antiHBc y de los antígenos
AgHBs y AgHBe; asi como ausencia de anticuerpos contra el antígeno de superficie.
El paciente considerado curado presenta anticuerpos antiHBc, antiHBs y antiHBe.
Las personas vacunadas tendrán anticuerpos antiHBs.

129
 6. Prevención y tratamiento
Como esta infección se transmite de persona a persona y la concentración de partículas
virales en sangre o líquidos orgánicos es elevada, hay que evitar el contacto con
secreciones de personas infectadas.
El personal de la salud deberá tomar las precauciones y cumplir con los códigos de la
práctica médica. Control especial se deberá adoptar en unidades de diálisis y Bancos de
sangre, asi como a los grupos de riesgo: portadores del VHB, gestantes y drogadictos.
Se dispone de una vacuna, obtenida por ingeniería genética, constituida por el antígeno de
supericie generado por la levadura Saccharomyces. Recomendable a grupos de riesgo.

Virus de la Hepatitis C (VHC)

1. Estructura y propiedades
Es un virus ARN de 50 nm de diámetro, único integrante del género Hepacivirus de la
Familia Flaviviridae. El virus se replica en el citoplasma y su genoma actúa directamente
como ARNm. Existen seis variantes genéticas, siendo el genotipo 1b la más frecuente.
Codifica diez proteínas, de las cuales la C, del cápside, es el componente principal, que
inhiben la apoptosis de las células anfitrionas produciendo infección persistente.

2. Poder patógeno
En el año 1975, Prince describe casos de hepatitis postransfusionales que no
corresponden al VHA ni al VHB, acuñando el término “Hepatitis no A no B”. Con el uso
técnicas moleculares, en el año 1989, se pudo caracterizar el virus de la Hepatitis C.
El virus se transmite por vía parenteral (transfusiones, agujas, tatuajes) y sexual. En la
mayoría de casos se observa hepatitis asintomática o de evolución lenta, con viremia
persistente.
En el tejido hepático se observa infiltración linfocitaria en el espacio portal e inflamación
con fibrosis peri portal, respuestas que llevan a la cirrosis hepática. Los anticuerpos
antiVHC no confieren protección.

3. Aspectos clínicos
Luego de un período de incubación de dos meses, sólo el 10% al 20% de los infectados
presentan síntomas semejantes a las otras hepatitis; la ictericia en el resto es poco
manifiesta. El 80% de los infectados evoluciona hacia la hepatitis crónica y el 20% de ellos
desarrolla cirrosis hepática.

4. Diagnóstico de laboratorio
El fundamento del diagnóstico es determinar la presencia de anticuerpos antiVHC
mediante la técnica de enzima inmuno ensayo (ELISA), o la detección del ARN genómico
por la reacción en cadena de polimerasa (PCR).

130
 5. Prevención y tratamiento
El uso de protocolos para descartar portadores en donantes de sangre, reduce la
posibilidad de infección. No hay vacuna. El tratamiento basado en la administración de
interferón (INF) combinado con ribavirina es de moderada eficacia.

Virus de la Hepatitis D (VHD) o agente delta

1. Estructura y propiedades
Es un virus con genoma ARN muy pequeño, de cadena sencilla, cubierto por el centro
vírico y rodeado por una capa externa constituida por el antígeno de superficie del virus de
hepatitis B (AgHBs). El agente delta ingresa a los hepatocitos de manera semejante al VHB
y se replica en el núcleo.

2. Poder patógeno
La transmisión es semejante a la del virus de la hepatitis B y la población de riesgo es la
misma. Sin embargo sólo provoca enfermedad en pacientes con infección activa por VHB.
La replicación del VHD produce citotoxicidad del hepatocito y los anticuerpos contra el
agente delta no ofrecen protección.

3. Aspectos clínicos
El agente delta puede ingresar, conjuntamente, en la primera infección por VHB
(coinfección) o posterior a ella (superinfección). El período de incubación es muy variable;
puede no haber ningún efecto sobre la infección establecida, o agravarla, presentando
cuadro clínico de hepatitis fulminante con encefalopatía.

4. Diagnóstico de laboratorio
La determinación de anticuerpos (IgG e IgM) antiVHD mediante la técnica de enzima
inmuno ensayo (ELISA) o la detección del ARN genómico por la reacción en cadena de
polimerasa (PCR) son los métodos de diagnóstico.

5. Prevención y tratamiento
Las medidas preventivas para el VHD, son las mismas utilizadas para VHB. La vacuna
utilizada para VHB previene infecciones contra el agente delta. No hay tratamiento médico
para esta infección.

Virus de la Hepatitis E (VHE)

Es un enterovirus que pertenece a la familia Calciviridae, fue identificado en 1989 a partir

de muestras de un brote epidémico de hepatitis transmitidas por agua, ocurrido en la India. Es un
virus ARN que se transmite por vía fecal-oral y evoluciona en forma similar a la producida por VHA.
El diagnóstico se establece por la detección de anticuerpos IgM antiVHE.

131
 CAPÍTULO 24
VIRUS RESPIRATORIOS:
ORTOMYXOVIRUS (influenza)
PARAMYXOVIRUS (sarampión, paramyxovirus, parotiditis, respiratorio
sincitial)
OTROS VIRUS RESPIRATORIOS (rubeola, adenovirus, coronavirus, rinovirus
________________________________________________________________________________

VIRUS RESPIRATORIOS

En éste capítulo se han agrupado a virus propios del ser humano y que tienen como
mecanismo de transmisión la vía respiratoria. La mayoría de ellos ocasionan patología en el tracto
respiratorio alto, con cuadro clínico de un proceso infeccioso general; en cambio otros, durante la
evolución de la enfermedad se expresan con exantema, enantema, conjuntivitis o adenopatía.

Se revisan los Ortomixovirus (influenza o gripe), Paramixovirus (parainfluenza, sarampión,

parotiditis y respiratorio sincitial), Togavirus (rubeola), Adenovirus, Coronavirus y Rinovirus.

ORTOMYXOVIRDAE

Virus de influenza

1. Estructura y propiedades
Son virus que tienen forma redondeada, con 80 a 120 nm de tamaño, y cuyo genoma lo
constituyen ocho segmentos de ARN en nucleocápsides helicoidales. Se replican en el
núcleo de la célula diana, pero se ensamblan en el citoplasma y salen por gemación a
través de la membrana citoplasmática. Estos virus tienen una tasa de mutación muy alta
(1.5x10-5) que ocasiona cambios en los aminoácidos de las proteínas virales.
Poseen una envoltura lipídica que contiene dos glucoproteinas: hemaglutinina (HA) y
neuraminidasa (NA). La HA tiene como propiedades la de unirse al receptor de la célula
epitelial, estimular la formación de anticuerpos neutralizantes y aglutinar eritrocitos. En
cambio, la NA facilita la liberación de los virus de las células infectadas. La cara interna de
la envoltura es la proteína de matriz (M).
Los miembros de esta familia la integran tres géneros, y se les denomina virus de la
influenza: A, B, y C; todos con capacidad de atacar a las mucoproteínas (myxo = moco). Se
diferencian entre sí por la antigenicidad de la matriz y de la nucleoproteína. La
nomenclatura que designa la especie está en relación a factores como: tipo de virus,
especie en la que se aisló –excepto los humanos-, lugar de aislamiento, designación de la
cepa, año de aislamiento y subtipo. Ejemplo: A/HongKong/1/68(H3N2) o
A/porcino/Iowa/15/30(H1N1)
El virus de influenza A posee 16 subtipos antigénicos de Hemaglutinina diferentes y, 9 de

132
 Neuraminidasa distintas. Sólo infectan al humano los virus con H1, H2, H3, H5, H7 y H9, y
los que contienen N1 o N2. Los virus de las aves poseen H5, pueden transmitirse al
hombre, pero no entre personas. Los otros infectan aves, caballos y cerdos.
Las nuevas epidemias se presentan como consecuencia de los cambios antigénicos
producidos en los antígenos HA y NA, debido a procesos de mutaciones puntuales y
cambios por recombinación con otros virus, procedentes de animales (cerdo y aves).
El virus de influenza B afecta sólo a humanos y no sufre cambios antigénicos.

2. Poder patógeno
La infección se adquiere por vía respiratoria al toser, estornudar o hablar. El virus se
multiplica en la mucosa nasal y senos paranasales destruyendo los cilios y las células
mucosas. Ocasionalmente puede comprometer el pulmón y provocar descamación del
epitelio bronquial y alveolar.
En la recuperación participan macrófagos activados, células “natural killer”, y citocinas;
cuyo exceso provocan falla multiorgánica en el huésped.
Los anticuerpos antihemaglutinina neutralizan e impiden la adherencia del virus; en
cambio, los antineuraminidasa reducen la liberación viral de las células infectadas y asi se
controla la enfermedad.

3. Aspectos clínicos
Después de un período corto de incubación el paciente presenta malestar general,
escalofríos, fiebre y dolor muscular, por un tiempo de 3 a 7 días. En influenza no hay flujo
nasal ni dolor de garganta. Generalmente la recuperación es completa, pero pueden haber
complicaciones pulmonares por el virus o por bacterias (S. pneumoniae o H. influenzae).

4. Diagnóstico de laboratorio
En la práctica el diagnóstico es clínico, las pruebas de laboratorio son confirmatorias y
necesarias para conocer el subtipo de la cepa.
El aislamiento del virus se realiza a partir de secreciones respiratorias, cultivadas en
membrana corio alantoidea de embrión de pollo o en cultivos de línea de riñón (MDCK).
También se puede detectar al virus por fluorescencia o inmunocromatografía, así como
con las técnicas de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y la de enzima inmuno
ensayo, a partir de secreciones respiratorias.
Las muestras de suero se utilizan para determinar el incremento del título de anticuerpos.
Actualmente se disponde de micromatrices de ADN para la prueba de Reacción en cadena
de la polimerasa (PCR), y poder detectar gripe A, B, SARS y virus entéricos, a la vez.

5. Prevención y tratamiento
La influenza o gripe ha ocasionado epidemias y pandemias producidas por nuevos
serotipos de virus: en 1918 la “gripe española” producida por H1N1; en 1957 la “gripe
asiática” por H2N2; en 1968 la “gripe de Hong Kong” por H3N2; 1977 y en el 2009 la “gripe
porcina” por la cepa H1N1. En 1997 se presentó un caso humano por influenza aviar,

133
 H5N1. Como los anticuerpos protectores son específicos de subtipo, la población se
encuentra desprotegida ante un nuevo brote epidémico.
El control se realiza aplicando la vacuna a virus muerto con “cepas del año”, cultivados en
huevos embrionados, que incluye virus influenza A y B. También se distribuye la vacuna a
virus vivo atenuado, a partir de un pool de virus, que se administra vía inhalación.

PARAMYXOVIRIDAE

1. Estructura y propiedades

Los seis miembros de esta familia tienen una estructura similar, contienen un genoma ARN
con nucleocápside helicoidal y envoltura de lipoproteínas. Los polipéptidos de estructura están
formados por las glucoproteínas HN y F (fusión a la membrana citoplasmática) y la proteína M de
la matriz. A diferencia de los ortomixovirus, son antigénicamente estables.

Parainfluenza

Es el causante más común de infecciones respiratorias superiores en los niños (rinitis,

faringitis, bronquitis y fiebre), en cambio, en adultos se presenta laringotraqueobronquitis,
bronquiolitis y neumonía.

Se describen cuatro serotipos con prevalencia propia; el virus produce lesiones celulares y
estimula la formación de inmunoglobulina A, la que confiere protección a cada serotipo.

Sarampión

Es un virus con ARN helicoidal, con un sólo antígeno; frágil a la temperatura de 56°C por
30 mintos, a la luz visible y ultravioleta, al hipoclorito y al alcohol.

Es un virus con alta contagiosidad, que se transmite por inhalación de las gotitas que se
exhalan por las vías respiratorias, o llegan vía mucosa conjuntival. El virus produce infección
generalizada (viremia) y se replica en vías respiratorias, donde provoca fusión celular y formación
de células gigantes, luego alcanza ganglios linfáticos y son los mononucleares quienes los llevan a
la superficie de la piel y a la conjuntiva. Dos semanas después se presenta una segunda viremia,
expresada por exantema máculopapuloso en cara, tórax y extremidades, como reacción de los
linfocitos T citotóxicos contra el antígeno viral, presente en las células cutáneas.

El sarampión es una enfermedad febril con tos, conjuntivitis y fotofobia. Al inicio de la

enfermedad se presentan unas lesiones típicas en la mucosa oral, junto a los molares, de
color rojo con punto central blanco, denominadas manchas de Koplic. La clínica es muy evidente
para hacer el diagn+ostico, luego pocas veces se recurre a métodos de laboratorio. Si se desea la
confirmación, se puede realizar detectando el virus en exudado faríngeo, por inmuno
fluorescencia o PCR y por la detección de anticuerpos tipo Ig M.

134
 El virus del sarampión posee un solo serotipo y produce inmunidad permanente. Se
dispone de una vacuna atenuada.

Parortiditis

Es un virus ARN lineal de cadena simple, no segmentado, con envoltura, que produce cinco
proteínas. Constituye el único serotipo y provoca infección citolítica. La infección se adquiere por
inhalación de aerosol, e infecta vías respiratorias superiores; luego de unos días se produce la
diseminación generalizada (viremia), comprometiendo glándulas parótidas, tiroides, testículos,
ovarios, páncreas y a veces meninges.

La enfermedad cursa con fiebre y tumefacción de la glándula parótida, epidídimo o

testículo; por lo general los síntomas desaparecen luego de una semana. La infección produce
protección de por vida.

Para el diagnóstico confirmatorio se emplea el título de anticuerpos IgM específico,

procesado por ELISA. Para la prevención se dispone de vacuna a virus vivo atenuado, que ofrece
protección hasta por veinte años.

Respiratorio sincitial (VRS)

Es un virus ARN lineal, que codifica 10 proteínas: las glicoproteínas G y F; las proteínas de
matriz M1, M2; la nucleoproteína N y P; una polimerasa y numerosas proteínas no estructurales.
El virus carece de actividad de hemaglutinina y neuraminidasa.

Este virus se transmite por secreciones respiratorias, así como a través de fómites (ropa de
cama) y afecta primordialmente a niños menores de dos años y ancianos. Invade directamente el
epitelio bronquial produciendo sincitios y necrosis epitelial con formación de “tapones” de
mucosidad, fibrina y material necrótico, que obstruyen los bronquiolos y conducen al colapso de
áreas pulmonares (atelectasia). La respuesta inflamatoria peri bronquial puede extenderse y
producir neumonitis intersticial.

El virus se cultiva en células de línea HeLa produciendo efecto citopático con formación de
sincitios. El diagnóstico se realiza mediante la técnica de inmunofluorescencia, para demostrar la
presencia del antígeno viral en las secreciones: Son muy útiles las técnicas moleculares (PCR), o la
búsqueda del ARN viral.

El virus es muy contagioso y las reinfecciones son frecuentes. No hay vacuna.

135
OTROS VIRUS RESPIRATORIOS

Togaviridae (Rubeola)

El virus de la rubeola es el único del género de los togavirus que no es transmitido por
artrópodos. El genoma es ARN con cápside icosaédrico y envoltura rodeada por glucoproteinas.

La infección se adquiere por secreciones respiratorias; compromete tracto respiratorio

alto, ganglios linfáticos superiores y luego se produce diseminación sistémica (viremia), que se
expresa con exantema macular y adenopatía. La enfermedad es frecuente en población joven.
Cuando una gestante es infectada en el primer trimestre del embarazo, hay alto riesgo de que el
feto tenga malformaciones en corazón, ojos o cerebro, así como desarrollar alteraciones tardías
del cristalino (un año después del nacimiento). La infección induce a la formación de elevados
títulos de anticuerpos IgG e IgM.

La detección del virus se realiza mediante técnicas moleculares; pero para el diagnóstico
habitual de infección se utiliza la determinación de inmunoglobulina M específica, la presencia de
Ig G nos indica inmunidad. En recién nacidos la presencia de Ig M (que no atraviesa la placenta) es
índice de infección fetal. La vacuna atenuada es muy efectiva, pero está contraindicada en mujeres
en el primer trimestre de gestación.

Adenovirus

Son un grupo de virus que contienen ADN, con cápside en forma de icosaedro sin
envoltura. El virus se replica en el núcleo de la célula epitelial, formando una inclusión densa de
ADN viral, y se excreta por un proceso de lisis celular. Por sus diversas propiedades biológicas se
han agrupado en 22 grupos, de los cuales siete (A … G) afectan al humano; de éstos se conocen 52
serotipos distintos, lo que explica la prevalencia de la infección en la población; se diferencian
entre ellos por la antigenicidad de las proteínas de adherencia de las fibras (hemaglutininas). Otro
grupo de ellos afecta a las aves y mamíferos.

Los adenovirus son resistentes a los detergentes y a la desecación, se transmiten por vía
respiratoria, aerosol, agua de las piscinas, alimentos, manos, fómites y heces. El virus infecta
células epiteliales de la bucofaringe, conjuntiva, vías respiratorias y tracto intestinal. En la célula
infectada forma inclusión intranuclear densa, con infiltrado mononuclear y necrosis celular. Luego
se produce diseminación sistémica (viremia) con invasión linfática (adenoides, amígdalas y placas
de Peyer), donde permanecen en estado de latencia, para lo cual, utiliza mecanismos que
neutralizan la acción del interferón y de las citocinas.

El grupo humano más afectado son los niños, y los diversos síndromes producidos
dependen del serotipo de virus; se observan diversos cuadros clínicos, como: faringitis aguda,
fiebre faringo-conjuntival, brotes epidémicos de infección en vías respiratorias altas,

136
gastroenteritis y cistitis hemorrágica. Los anticuerpos formados resuelven la enfermedad y dan
inmunidad para reinfecciones del mismo serotipo.

Para el aislamiento del virus a partir de exudados faríngeo o conjuntival se emplean

cultivos celulares de línea (HeLa o Hep2), también se utilizan técnicas moleculares de amplificación
de ADN y, PCR e inmunofluorescencia para detectar antígeno viral. Las pruebas serológicas sólo
tienen fines epidemiológicos.

Coronavirus

Son virus pleomorfos, que poseen en la superficie glucoproteinas filamentosas alargadas

que le dan al virión el aspecto de tener corona. Tienen un genoma de ARN de cadena sencilla con
envoltura, que sólo se replica en las células epiteliales de las vías respiratorias. Se conocen cuatro
cepas de coronavirus respiratorios humanos. Otros infectan a las aves y mamíferos.

Los coronavirus producen infección de vías respiratorias altas, debido a la replicación viral
a temperarturas entre 33°C a 35°C. Ocasiona cuadro clínco semejante al resfriado común, con flujo
nasal. La cepa causante del síndrome respiratorio agudo severo (SARS) proviene de un animal,
pero en el humano tiene un comportamiento de proceso infeccioso general con neumonía atípica.
El diagnóstico etiológico se establece utilizando la técnica de PCR, también es útil la serología
mediante ELISA para la fase de convalecencia. No hay vacuna.

Rinovirus

Son virus muy pequeños (18 a 30 nm.), descritos en 1960, con genoma ARN sin envoltura,
que conforman un género de la familia Picornaviridae, y lo constituyen más de 100 serotipos.
Tienen la propiedad de multiplicarse a 33°C., que explica la predilección por la mucosa nasal.

Son los causantes del resfriado común, que se expresa por catarro nasal. La dosis
infectante es muy pequeña y la inmunidad es transitoria, detectando Inmunoglobulina A luego de
siete días de enfermedad. El virus puede cultivar en fibroblastos diploides humanos.

Para el diagnóstico, no es práctico el uso de pruebas serológicas. La mejor prevención es el

lavado de manos frecuente y el uso de pañuelos faciales con ácido cítrico. No hay vacuna.

137
 CAPÍTULO 25
VIRUS ENTÉRICOS:
ROTAVIRUS. ENTEROVIRUS

VIRUS ENTÉRICOS

Estos virus se caracterizan por propagarse con rapidez vía fecal-oral, ser resistentes en
medio ácido y pueden replicarse en el epitelio intestinal. La presentación de brotes epidémicos
está en relación a la mala calidad del sistema sanitario, contaminación del agua potable o lavado
de manos deficiente. Un grupo de estos virus produce gastroenteritis: rotavirus, adenovirus y
calcivirus; en cambio, el otro grupo no provoca enfermedades entéricas, pero ejerce su patología a
distancia: poliovirus (sistema nervioso), Coxsackie (dermis).

Rotavirus

Los Rotavirus pertenecen a la familia Reoviridae; tienen un genoma formado por once
segmentos de ARN, y un cápside icosaédrico de tres capas concéntricas, constituidas por proteínas
(VP) y carecen de envoltura. Por la antigenicidad de la proteína externa (VP6), se les clasifica en 7
serogrupos, de los cuales, los tres primeros (A, B y C) causan infección en humanos. Se conocen
numerosos serotipos y genotipos basados en las proteínas VP7 y VP4. Los rotavirus son estables a
temperatura ambiente y a rangos amplios de pH (3 a 9).

Los rotavirus sobreviven a la acidez gástrica, lesionan el epitelio de las vellosidades del
intestino delgado, produciendo aplanamiento, atrofia del epitelio e infiltrado mononuclear. La
proteína NSP4 viral tiene actividad de enterotoxina, cuya función es alterar la absorción del agua,
así como la producción de disacaridasas, que se expresa clínicamente con diarrea acuosa. La
presencia de inmunoglobulinas A en la luz intestinal controlan la infección.

Rotavirus es el agente causal más frecuente de diarrea en niños pequeños. Luego de un

período de incubación corto, se presenta el síndrome característico por vómitos, diarrea, fiebre y
deshidratación, sin embrago hay cuadros asintomáticos; y el paciente elimina numerosas
partículas virales por las heces. La recuperación es completa, pero las reinfecciones son
frecuentes, debido a que el virus resiste la desecación y sobrevive en objetos inanimados.

El diagnóstico se establece por la demostración de los antígenos del virus en las heces, sea
con procedimientos rápidos (látex, cromatografía), o por enzima inmuno ensayo (ELISA). Se
dispone de dos tipos de vacuna, la que contiene cinco rotavirus bovinos recombinantes con PV4 o
PV7 y la que contiene rotavirus humano atenuados.

138
Enterovirus

La familia Picornaviridae está formada por virus pequeños (30 nm), con genoma ARN,
cápside iscosaédrico, sin envoltura, y se incluyen a más de 230 especies. El género enterovirus se
caracteriza por su estabilidad a pH 3.0, la resistencia a cambios ambientales, detergentes, alcohol
y solventes de lípidos; así como la forma de transmisión fecal-oral, y la actividad citolítica en la
célula diana. A pesar de tener a la vía digestiva o respiratoria como vía de ingreso, no producen
patología a este nivel, sino a distancia. Pertenecen a este género los poliovirus, coxsackie A y B, y
echovirus.

1. Poliovirus
Son virus que tienen como único reservorio al ser humano y está integrado por tres
serotipos (1, 2 y 3). El virus ingresa por vía oral o respiratoria, se replica en el tejido
linfoide de las amígdalas y placas de Peyer. Luego produce viremia y se extiende
directamente, o vía axones, al sistema nervioso central (SNC).
El 90% de casos son asintomáticos, los síntomas son leves, tipo gripal con dolor de
garganta y transtorno gastro intestinal. Sólo el 1% a 2 % presenta meningitis, y en uno de
cada mil casos se comprometen las células de las astas anteriores de la médula espinal,
donde produce destrucción lítica de las células motoras, que ocasiona parálisis fláccida de
las extremidades (poliomielitis); puede comprometer bulbo y encéfalo. Las personas
infectadas eliminarán virus por las heces hasta por dos meses.
La infección induce la formación de anticuerpos específicos, que neutralizan la actividad
del serotipo de virus actuante.
El aislamiento del virus se realiza a partir de exudado faríngeo o heces, cultivados en
células Hep2. Luego de unos días se observará efecto citopático; el cual debe ser inhibido
con el antisuero específico de una de las tres cepas. Al virus aislado se le debe estudiar la
secuencia genómica para determinar si es virus vacuna o salvaje.
Los anticuerpos IGM específicos en sangre, se determinan por la capacidad de neutralizar
el efecto citopático de los poliovirus en cultivos celulares. La reacción en cadena de la
pilimerasa detecta el ARN viral en muestras clìnicas, método de uso actual.
Hay dos vacunas para los poliovirus: La inactivada (Salk) elaborada en células renales de
mono o Vero y sometida a la acción del formol, la que se administra por vía parenteral y
estimula la formación de anticuerpos sanguíneos. La otra vacuna es a virus atenuado
(Sabin), obtenida por pases sucesivos, se administra por vía oral, y estimula la formación
de anticuerpos G, M y A. La eliminación del virus vacunal por las heces, facilita la
vacunación a las personas de su entorno (en zonas de riesgo), y evita las reinfecciones.
2. Coxsackie
Son virus de distribución mundial que se transmiten vía oral, respiratoria, o fómites. Se
describen dos grupos: el grupo A, con 23 serotipos, que ocasionan lesiones vesiculares en
la mucosa oral (herpangina), en el pié, la mano y la boca a la vez, conjuntivitis hemorrágica
y meningitis. En cambio en el grupo B, tienen 6 serotipos y son causa de meningitis

139
 aséptica, miocarditis y pleurodinia (dolor pleural). El diagnóstico se establece empleando
técnicas moleculares como el PCR. No hay vacuna.

3. Echo
Los virus de este grupo son estrictamente entéricos y lo conforman 32 serotipos. El cuadro
clínico se caracteriza por diarrea, exantema y meningitis aséptica (sin respuesta
inflamatoria). No hay vacuna.

4. Enterovirus tipos del 69 al 71

Son causantes de neumonía, conjuntivitis hemorrágica y meningoencefalitis.

5. Enterovirus 72
Ocasiona síndrome de Hepatitis tipo A.

Adenovirus

Las características generales de los adenovirus se han revisado en el grupo de virus

respiratorios. Los serotipos 40, 41 y 42, (grupo F) de los adenovirus tienen selectividad por el
tracto intestinal y producen diarrea en lactantes. El diagnóstico se establece por la presencia del
antígeno viral en las heces, detectado por procedimientos de inmunoprecipitación o enzima
inmuno ensayo.

Calcivirus (norovirus)

Son virus pequeños con genoma ARN, que tienen como hospederos a diversas especies de
animales. Numerosas cepas ocasionan brotes epidémicos en humanos, por la ingesta de alimentos
o agua contaminada, y se caracterizan por lesionar el cepillo intestinal. El cuadro clínico cursa con
vómitos y diarrea (sin sangre) a veces fiebre o dolor abdominal. El nombre de éstos virus
corresponden al lugar donde fueron identificados por primera vez (Norwalk, Hawai, Montañas
Nevadas, etc.). El diagnóstico se estable empleando técnicas moleculares como la reacción en
cadena de la polimerasa o mediante la técnica e ELISA, para detectar antígeno viral en heces.

140
 CAPÍTULO 26
HERPESVIRUS
_______________________________________________________________________________

HERPESVIRUS (HV)

Con este nombre se integra a un grupo de virus que se caracterizan por provocar
infecciones con evolución clínica diversa, produciendo cuadros clínicos de infección aguda,
persistente, latente o recurrente; incluso alguno de ellos están asociadas con cáncer. Tienen un
genoma de ADN de doble cadena lineal, recubierto de un cápside icosaédrico con 162 capsómeros
y rodeados con envoltura de glucolípidos. Los virus codifican ADN polimerasa que estimula la
replicación del virus en el núcleo y forma cuerpo de inclusión intranuclear. Los herpesvirus son
sensibles a los ácidos, los detergentes y a la desecación.

La mayoría de las especies sólo infectan al ser humano y, se clasifican de acuerdo a las
características estructurales y biológicas, en tres subfamilias:

1. Herpes virus alfa: HV simple tipo 1, HV simple tipo 2, Varicela zóster (VVZ)
2. Herpes virus beta: Citomegalovirus CMV (5), HV humano 6, HV humano 7
3. Herpes virus gamma: virus Epstein Barr (4), HV del sarcoma de Kaposi (8)

I. HERPESVIRUS ALFA

Virus herpes simple (VHS)

1. Estructura y propiedades
Es un virus grande que codifica numerosas proteínas, útiles para su replicación e
interacción con las células anfitrionas; así mismo codifica diez glucoproteinas, necesarias
para los procesos de adhesión y evasión del sistema complemento y anticuerpos; de
manera que, el virus y la célula infectada puedan evadir la respuesta humoral. Comprende
dos tipos de virus, el 1, que afecta sobre todo la parte superior del cuerpo y el 2, que
generalmente afecta los genitales.

2. Poder patógeno
Estos virus tienen como reservorio al hombre, el individuo infectado es fuente de contagio
durante toda su vida. El virus afecta las células de las mucosas y del epitelio, donde se
multiplican, forma cuerpos de inclusión intranucleares, luego causan lisis celular y
formación de vesículas. Después de la replicación local los virus se diseminan a los ganglios
linfáticos regionales, luego por viremia o por vía nervios sensitivos, migran a los ganglios de
las raíces dorsales de los nervios trigémino y lumbosacro. En estos ganglios nerviosos los
virus entran en estado de latencia, el ADN viral se integra a la célula de las neuronas y
bloquea la acción del interferón gamma sobre la síntesis de proteínas virales y evita el

141
 reconocimiento de las células infectadas por los linfocitos T CD8. Esta localización será el
punto de partida de las recurrencias.
Hay respuesta a la infección por VHS con la formación de anticuerpos IgG, IgM e IgA. Los
anticuerpos IgG persisten por muchos años y no previenen reactivaciones. Los anticuerpos
contra el VHS-1 no confieren inmunidad contra el VHS-2.

3. Aspectos clínicos
El VHS-1 suele contagiarse por contacto bucal u objetos contaminados con saliva; se
adquieren en la niñez manifestándose por la presencia de vesículas en la mucosa oral
(labios y encías), que constituyen la infección primaria; tiempo después hay recurrencia en
el borde labial, que se vuelven costrosas y sanan; posteriormente en el curso de los años se
presentan recurrencias. Puede presentarse infecciones iniciales en los dedos (panadizo
herpético), oftálmicas (querato conjuntivitis herpética) y complicaciones como encefalitis.
En cambio, el VHS-2 generalmente se transmite por contacto sexual o de madre a hijo al
momento del nacimiento; es más frecuente en adultos y se presentan vesículas en el
glande, vulva, vagina y cuello uterino.

4. Diagnóstico de laboratorio
Microscopía: en el frotis tomado de la base de las vesículas se observan células
multinucleadas con inclusiones intranucleares. Con el uso de anticuerpos monoclonales
marcados con fluoresceína, se aprecian los viriones como puntos fluorescentes y permite
diferenciar los dos tipos de VHS. El uso de sondas de ADN o PCR es muy útil para
diferenciar el tipo de virus, asi como para diagnosticar encefalitis herpética.
Cultivo: los virus pueden ser cultivados en células diploides humanas, donde se observan
los cambios producidos por el efecto citopático.
La serología es útil sólo para el diagnóstico de la infección primaria.

5. Prevención y tratamiento
No han vacuna para el VHS recomendada por la OMS, aunque hay varias en fase
experimental. En gestantes con diagnóstico de infección por VHS activa debe evitarse el
parto vaginal. El fármaco aciclovir inhibe la polimerasa del ADN víral, lo que acorta la
evolución de la enfermedad, pero no elimina la infección latente. El VHS es frágil a los
detergentes, jabones y alcohol 70%, para uso en la desinfección de manos.

Virus varicela zóster (VVZ)

1. Estructura y propiedades
El VVZ comparte muchas características biológicas con los virus herpes simple, la
diferencia fundamental es que se disemina por vía respiratoria, la primo infección se
expresa como varicela, y cuando recurre la enfermedad se expresa como herpes zoster.

142
2. Poder patógeno
La infección primaria se produce por lo general en la infancia, por inhalación; el virus
infecta las células de la mucosa respiratoria, luego se disemina por vía sanguínea y linfática
hacia el sistema retículo endotelial. Días después se produce una segunda viremia, se
disemina en todos los tejidos. En la piel se expresa con lesiones tipo exantema vesículo
papulosas, que se distribuyen con más intensidad en la cara y el tronco, constituyendo la
enfermedad “varicela”.
Luego de la infección primaria, el virus entra en un estado de latencia en los ganglios de la
raíz dorsal de los nervios: trigémino, torácicos, cervicales o lumbosacros. Después de un
tiempo el virus puede reactivarse, replicarse y diseminarse a lo largo de los nervios,
presentando vesículas en el trayecto del nervio, conocido como “herpes zóster”.
Durante la fase aguda de ambas presentaciones de la enfermedad hay respuesta humoral
con anticuerpos IgM, que controlan la diseminación del virus. La respuesta celular con
linfocitos T tiene un papel importante en la recuperación del paciente.

3. Aspectos clínicos
La varicela es una de las enfermedades habituales en la infancia, caracterizada por fiebre y
presentación de vesículas sobre una base eritematosa, que da el aspecto de “gota de
rocío”, distribuidas de preferencia en tronco y cara. En adultos puede presentarse
neumonía intersticial.
El herpes zóster es una recurrencia de la infección anterior, las lesiones son similares, pero
distribuidas en el trayecto de los nervios costales, y precedido de dolor intenso en la
región.

4. Diagnóstico de laboratorio
Al examen microscópico de frotices de las vesículas, se aprecian las alteraciones
producidas por el efecto citopático, que son similares a las lesiones del VHS. El diagnóstico
se puede mejorar con el uso de anticuerpos fluorescente.
El aislamiento del virus es lento, por lo que se prefiere el uso de técnicas moleculares,
como el PCR.
La presencia de anticuerpos contra VVZ se determina con el procedimiento de enzima
inmuno ensayo o por inmuno fluorescencia, utilizando cultivos previamente infectados.

5. Prevención y tratamiento
Existe una vacuna atenuada de VVZ, de uso electivo para niños, y otra más potente para
adultos mayores de 60 años, para limitar la aparición del zóster. La inmunidad pasiva con
inmunoglobulinas humana es útil en los primeros días de la enfermedad.
No hay tratamiento satisfactorio. El uso de lociones para aliviar el dolor o prurito está
recomendado. El aciclovir tiene menos efecto que con el VHS.

143
II. HERPESVIRUS BETA

Citomergalovirus (CMV)

1. Estructura y propiedades
El CMV tiene un genoma grande, que sólo se replica en el núcleo de células humanas,
formando un cuerpo de inclusión característico en “ojo de búho”. El virus se replica en
fibroblastos, células epiteliales, macrófagos y se mantiene en forma latente en linfocitos,
mononucleares y en el estroma de la médula ósea.

2. Poder patógeno
El virus se transmite por diversas vías: oral (saliva y besos), sexual, placentaria, leche
materna, transfusiones sanguíneas y receptores de trasplantes. El virus se disemina sin
ocasionar sintomatología alguna, pero se replica constantemente en células secretoras y
renales, permaneciendo de por vida, encontrándosele en orina y secreciones corporales.
La infección altera la función de los linfocitos; así el virus impide la presentación de
antígeno a los linfocitos CD8 como a los CD4 y genera una proteína que impide la actividad
de los linfocitos T citotóxicos naturales, lo que conlleva a una infección crónica.
Sólo la infección primaria induce anticuerpos Ig M, pero no las reactivaciones. Los
anticuerpos Ig G perduran toda la vida.

3. Aspectos clínicos
Es un patógeno oportunista, se considera la causa más frecuente de anomalías congénitas
(microcefalia, calcificación intracerebral, pérdida auditiva, retraso mental, etc.). Los recién
nacidos pueden adquirir la enfermedad por la lactancia, o transfusiones. La mayoría
adquieren la enfermedad de adultos jóvenes, transmitida por besos y relaciones sexuales.
El cuadro clínico corresponde a un síndrome similar al de la mononucleosis infecciosa
(fiebre, adenopatía, visceromegalia y alteración de la función hepática).

4. Diagnóstico de laboratorio
En muestras de orina y saliva se pueden observar células que contienen en el núcleo una
inclusión basófila, densa, en forma de “ojo de búho”, estructura que se aprecia con las
coloraciones histológicas. Se pueden utilizar técnicas de inmuno fluorescencia con
anticuerpos monoclonales y métodos moleculares como el PCR.
La determinación de los anticuerpos Ig M, por ELISA, es útil sobre todo en recién nacidos,
para diagnosticar infección reciente.

5. Prevención y tratamiento
No hay vacuna. Realizar control serológico en donantes de sangre.
Los antivirales tienen poca acción contra el CMV.

144
Virus herpes humano tipo 6 (VHH-6)

Es un virus ampliamente distribuido en el ser humano, causante de la enfermedad

eruptiva denominada “exantema súbito”, enfermedad febril que se presenta en la niñez, sin
complicaciones. El virus produce efecto citopático en los linfocitos B y el diagnóstico sólo amerita
para descartarlo de otras causas de fiebre.

Virus herpes humano tipo 7 (VHH-7)

La mayoría de personas poseen anticuerpos contra el VHH-7, el cuadro clínico es similar al

síndrome de la mononucleosis.

III. HERPESVIRUS GAMMA

Virus de Epstein-Barr (VEB)

1. Estructura y propiedades
Este virus, a diferencia de otros herpes virus, tiene un espectro celular restringido a los
linfocitos B, y está relacionado con enfermedad maligna.
Durante la infección productiva, el VEB genera numerosas proteínas que se agrupan
inmunológicamente en tres categorías: a) antígeno precoz, que facilita la replicación, b)
antígeno del cápside y c) antígeno de membrana, blanco de los linfocitos T citotóxicos. En
cambio durante la infección latente, se forman antígenos nucleares del virus y proteínas
latentes de membrana, con la función de mantener la infección y de inmortalizar a los
linfocitos B (multiplicación indefinida), proceso que tiene importancia en el potencial
oncogénico del virus.

2. Poder patógeno
El VEB se transmite por la saliva, por lo que se le denomina enfermedad del beso; infecta
células epiteliales de la bucofaringe, luego se produce viremia y se ubica en los linfocitos
B, produciendo infección durante toda la vida, sin producir efecto citopático.
En la fase aguda de la infección el virus activa la proliferación de los linfocitos B, pero son
los linfocitos T protectores los encargados de limitar ésta proliferación, para lo cual se
activan y ocasionan linfocitosis en sangre periférica (linfocitos atípicos) e hipertrofia de
órganos linfoides; durante éste período se forman anticuerpos contra el cápside y la
membrana. En cambio, cuando se resuelve el cuadro agudo de la infección se encuentran
anticuerpos contra los antígenos nucleares.
En ausencia de respuesta inmunitaria de linfocitos T, se presentan las enfermedades
linfoproliferativas.

145
 3. Aspectos clínicos
Se pueden agrupar en cuatro niveles:
a) Mononucleosis infecciosa: síndrome caracterizado por fiebre, faringitis, adenopatía y
disfunción hepática, que se presenta generalmente a edad temprana. El estudio
hematológico revela leucocitosis con linfocitosis, de los cuales la mayoría de linfocitos
son atípicos (citoplasma azulado y núcleo irregular) correspondientes a linfocitos T.
b) Linfoma de Burkitt: es una neoplasia que afecta la cara y es endémico en niños de
regiones del África con malaria.
c) Carcinoma nasofaríngeo: cáncer endémico en el sur de China, que afecta las células
epiteliales, con metástasis a los ganglios cervicales.
d) Leucoplasia vellosa oral: enfermedad que se manifiesta en pacientes con sida, con
placas blanquecinas en la lengua y boca.

4. Diagnóstico de laboratorio
Los hallazgos clínicos y la presencia de linfocitosis a células atípicas en sangre periférica,
son muy orientadores del diagnóstico. La presencia de anticuerpos IgM, heterófilos, que
reaccionan con eritrocitos de oveja, caballo o vaca (Paul Bunnell) es muy contributorio.
La confirmación diagnóstica precisa es la reacción de inmuno ensayo para detectar, en la
fase aguda, anticuerpos Ig M contra los antígenos del cápside y, en la fase crónica,
anticuerpos contra el núcleo (EBNA) del virus de Epstein Barr.

4. Prevención y tratamiento
No hay vacuna para el VEB. Como no codifica ADN polimerasa, los antivirales son poco
útiles.

Herpes virus asociado con sarcoma de Kaposi

También denominado Virus del herpes humano 8, afecta la dermis a partir de las células
endoteliales.

146
 CAPÍTULO 27
VIRUS TRANSMITIDOS POR ARTRÓPODOS Y ROEDORES
FLAVIVURUS: FIEBRE AMARILLA, DENGUE.
FILOVIRUS, ARENAVIRUS, BUNYAVIRUS
________________________________________________________________________________

VIRUS TRANSMITIDOS POR ARTRÓPODOS Y ROEDORES

En este capítulo se agrupan a virus que corresponden a diversas familias, pero tienen en
común, que durante el ciclo de transmisión participa un artrópodo o un roedor. A los virus que
utilizan un artrópodo se les denomina “arbovirus”, en ellos el vector adquiere la infección al ingerir
sangre de un vertebrado con viremia. En cambio, en el caso de los virus que son transmitidos por
roedores, la infección se mantiene por transmisión directa de roedor a roedor o por vía
transovárica en los artrópodos, y el ser humano adquiere la infección por contacto directo con
líquidos orgánicos o con excretas de los roedores.

Las principales infecciones en el hombre por arbovirus son: Fiebre amarilla, Dengue,
Chikungunya, Zika, Fiebre del Nilo Occidental, Fiebre de San Luis y Fiebre Japonesa. Al grupo de
virus en los que interviene un animal como reservorio, se les puede clasificar clínicamente como:
1. Fiebre con o sin erupción, 2. Encefalitis, y 3) Fiebre hemorrágica. A los virus causantes de estas
enfermedades también se les denomina “virus exóticos”, y corresponden a los géneros: Filovirus,
Arenavirus y Bunyavirus.

FLAVIVIRUS
Fiebre amarilla

1. Estructura y propiedades
Corresponde a la familia Flaviviridae, que son virus ARN, con cápside icosaédrico y
envoltura de glucoproteínas. La liberación viral de la célula huésped puede realizarse por
exocitosis o luego de la lisis celular.

2. Poder patógeno
El vector es el mosquito Aedes aegypti, que habita en zonas cálidas, en ámbitos con agua
acumulada y charcos, donde mantiene el ciclo selvático con el mono como hospedero
natural; en el ciclo urbano el hombre el hospedero. El mosquito se infecta al ingerir sangre
de un vertebrado con viremia; el virus infecta las células epiteliales del intestino del vector,
luego atraviesa la lámina basal e infecta las glándulas salivales, donde se establece una
infección persistente.
Cuando el ser humano es picado por un mosquito hembra infectado, los virus ingresan a la
sangre y se ubican en las células diana (endotelio de los capilares, monocitos y
macrófagos). La primera viremia ocasiona síntomas de un proceso infeccioso general. La
respuesta del huésped es con formación de inmunoglobulinas M y G, las que bloquean la
diseminación viral, dando protección, inclusive, frente a otros virus de la misma familia.

147
 También se forman anticuerpos sin capacidad neutralizante, los que favorecen el ingreso
de los virus a otras células que expresen receptores Fc (macrófagos), asi como la
producción de citosinas que incrementan la permeabilidad capilar y contribuye a la
presentación de patologías como encefalitis o hemorragia.

3. Aspectos clínicos
El paciente presenta sintomatología correspondiente a una enfermedad sistémica grave, la
que cursa con ictericia por degeneración del hígado y hemorragia digestiva (vómito negro),
como expresión del compromiso del endotelio vascular.

4. Diagnóstico de laboratorio
Se determina por la presencia de anticuerpos IgM específico contra el virus. En población
autóctona se debe demostrar el incremento del título de anticuerpos en muestras
pareadas. Para ello se emplean diversos métodos serológicos (inhibición de
hemaglutinación, ELISA, aglutinación con látex, etc.). Las técnicas de inmunofluorescencia
o detección del ARN viral. (PCR) son de actalidad.

5. Prevención y tratamiento
Hay vacuna a virus vivo atenuado a partir de la cepa 17D, útil para poblaciones de riesgo; la
que genera protección por largos períodos de tiempo.

Dengue

El virus corresponde a un flavivirus y tiene las características morfológicas similares a las

de la Fiebre amarilla. Se describen cuatro serotipos que son transmitidos por el mismo mosquito
Aedes.

El síndrome clínico clásico se caracteriza por fiebre y exantema con dolores articulares y
musculares, que duran 5 a 8 días (fiebre quiebra huesos). La convalecencia puede tardar varias
semanas. El síndrome de shock o el hemorrágico se presenta cuando el paciente es reinfectado
por un serotipo diferente, y la linfocitos T memoria secretan citocinas que provocan lisis de las
células del endotelio vascular.

En la fase aguda de la enfermedad, el diagnóstico se establece mediante la reacción en

cadena de la polimerasa (PCR). Los estudios serológicos son complicados porque se presentan
reacciones cruzadas con otros flavivirus; por lo que deben realizarse análisis comparativos de la
fase aguda y convalecencia. La metodología puede ser: ELISA o Inhibición de la hemaglutinación.

Las medidas de control son orientadas contra el mosquito. El síndrome hemorrágico se

trata con reemplazo hídrico y sanguíneo. Se ha elaborado una vacuna atenuada del Dengue 2,
asociada a genes de otras cepas , útil para poblaciones de zonas endémicas.

148
Chikungunya

Es un alfavirus, muy similar al anterior, que fué aislado en Tanzania el 1950. Se reconocen
tres genotipos (Asiático, Africano del Oeste y Africano del Este-Centro); tienen dos ciclos de
transmisión definidos: Uno selvático, en el que participan diversos tipos de aedes y los primates; el
otro ciclo urbano, endémico, que tiene como vector sólo al aedes aegypti y al aedes albopictus,
con participación del ser humano.

La clínica de la infección de este virus se denomina Fiebre Chikungunya, cuya palabra

significa “el que se dobla”, presentando fiebre, dolor articular y rash, con una duración de dos
semanas; se reporta un 12% de pacientes que van a la cronicidad con artralgia permanente. En los
exámenes auxiliares se destaca leucopenia con linfopenia y el número de plaquetas se mantiene
normal, a diferencia del Dengue que cursa con plaquetopenia. El diagnóstico se establece con
técnicas moleculares y titulando anticuerpos IgM. No hay vacuna.

Zika

Descrito en el año 1947, como endémico en monos del bosque Zika, Uganda (Africa),
teniendo como vector a mosquitos del género Aedes. Se describe transmisión sexual durante el
período de viremia.

El 60% a 80% de pacientes infectados con el virus Zika son asintomáticos. Los otros
presenta síntomas de viremia: fiebre, erupciones cutáneas, artralgia y cefalea. Se describen
efectos teratogénicos durante el desarrollo fetal, con presentación de cuadros neurológicos y
microcefalia. El diagnóstico se estable mediante la técnica del PCR. No hay vacuana.

FILOVIRUS

Son virus en forma de filamento, que pueden medir hasta 1400 nm, pleomorfos, contienen
ARN y están rodeados de nucleocápside helicoidal. El virus infecta fundamentalmente macrófagos
y monocitos, los que generan gran cantidad de citocinas, que son las causantes de la destrucción
del endotelio vascular, hígado, bazo, ganglios y pulmón.

La enfermedad se presenta en brotes epidémicos en el África. Los probables reservorios

son los murciélagos y los chimpacés. Se transmite al hombre por contacto directo con sangre o
secreciones. Los cuadros clínicos producidos por los virus Marburgo y Ébola, son muy similares;
caracterizadas por fiebre, dolores de espalda, diarrea y vómitos; luego se presenta exantema
máculopapular y hemorragia nasal, gingival, pulmonar y gastrointestinal; acompañada de
trombocitopenia. La mortalidad es muy elevada.

Pocos laboratorios en el mundo está capacitados para cultivar el virus e identificarlo por
microscopia electrónica. Los antígenos vitrales se detectan por o inmunofluorescencia, ELISA y
PCR.. No se dispone de vacuna. El personal de cuidados de la salud son los de mayor riesgo.

149
ARENAVIRUS

Son virus que tienen el aspecto de arena dentro de las células, al ser observados al
microscopio electrónico. El genoma es ARN.

Se señalan cuatro infecciones humanas: 1) el virus de Junín, que causa de la fiebre

hemorrágica argentina, 2) el virus Machupo, que produce la fiebre hemorrágica boliviana, 3) el
virus Lassa y 4) el virus de la coriomeningitis linfocitaria.

La enfermedad se presenta en África y Sudamérica, y depende del roedor hospedero

correspondiente. El ser humano adquiere la enfermedad por contacto con excretas de roedores.
Los virus se diseminan ampliamente en diversos órganos; la infección de los macrófagos libera
factor de necrosis tumoral y citocinas, que son los causantes del daño vascular. El paciente
presenta fiebre, cefalea, exantema en el cuello; luego puede presentar hemorragia
gastrointestinal y urogenital. La infección suele ser persistente y la convalecencia prolongada. Sólo
la infección por Coriomeningitis linfocitaria se relaciona con hamster y ratones domésticos; y la
enfermedad no produce hemorragia.

El diagnóstico se puede establecer por la presencia de anticuerpos IgM e IgG, método

ELISA, y la reacción en cadena de la polimerasa a partir de muestras clínicas. El control de los
roedores puede limitar las infecciones por arenavirus. El tratamioentos es sólo de sostén,

BUNYAVIRUS

En este grupo se incluyen numerosos virus que son transmitidos por artrópodos, la
excepción es el Hantavirus, que se transmite a través de un roedor y representa para el hombre
una zoonosis. Son virus redondos con ARN segmentado.

La prevalencia del roedor hospedero del hantavirus se ubica en Asia y países escandinavos,
es transmitido al humano por contacto con las excretas de los roedores. Ocasiona dos
enfermedades en humanos: 1) Fiebre hemorrágica con síndrome renal, caracterizado por fiebre,
dolor abdominal, hipotensión, trombocitopenia y hemorragia; días posteriores se presenta
insuficiencia renal; este proceso clínico tiene una elevada mortalidad. 2) Síndrome pulmonar, que
evoluciona con neumonía intersticial, hipotensión y edema pulmonar, aunque sin hemorragia; y
también con elevada mortalidad.

La determinación de anticuerpos IgM por el procedimiento de inmunoensayo, así como el

uso de la reacción en cadena de la polimerasa, son diagnósticos. El tratamiento se limita a la
terapia de sostén para mantener el equilibrio hidro-electrolítico.

150
 CAPÍTULO 28
VIRUS DE LA RABIA
_______________________________________________________________________________

Virus de la Rabia
La enfermedad de la rabia (rabere = enloquecer), o también llamada “hidrofobia”, es
conocida desde la era anterior a Cristo, y tiene una relevante importancia por su tánica evolución
clínica, así como por el éxito en el desarrollo de la vacuna por Luis Pasteur en 1884. Este virus
pertenece a la familia Rhabdoviridae, que incluye a virus que parasitan diversos animales (incluso
peces e insectos) y vegetales; pero el de la rabia está incluido en el género Lyssavirus, que infectan
sólo a los vertebrados.

1. Estructura y propiedades
El virus de la rabia tiene un nucleocápside helicoidal, dentro del cual se encuentra el ARN
viral monocatenario; rodea al virion una envoltura lipoproteica gruesa que le da forma de
bala y adquiere un tamaño de 130 a 360 nm. Está rodeado por numerosos filamentos de
glucoproteína (G), que le sirve para adherirse a las células receptoras, e inducen la
formación de anticuerpos neutralizantes. Protegiendo al ácido nucleico se encuentran las
proterinas matriz (M) y nucleoproteina (N). La replicación del genoma sucede en el núcleo,
pero el ensamblaje en el citoplasma, donde se expresa con la formación del cuerpo de
inclusión. La célula infectada no muere, sino que continúa como fuente de gemación de
virus. El virus es muy frágil a la luz, calor y desecación.

2. Poder patógeno
Los animales de sangre caliente (zorro, lobo, perro, gato, murciélago) son susceptibles al
virus de la rabia, son los que mantienen el virus en la naturaleza y los verdaderos vectores.
Generalmente el virus ingresa al humano como consecuencia de la mordedura o lamedura
de un animal en estado rabioso; pero puede ingresar por inhalación o contacto de la
conjuntiva con aerosoles (como sucede en la cueva de vampiros).
El virus se replica en la zona de ingreso y luego progresa, vía neuronal, hacia los ganglios
dorsales, médula espinal y cerebro (hipocampo, tronco encefálico, células de Purkinje del
cerebelo). Posteriormente el virus realiza diseminación centrífuga, vía nervios periféricos,
hacia las glándulas salivales, córnea, tejido recubierto de pelo (cuello), mucosa nasal, etc.
A pesar de la gran diseminación viral en el tejido nervioso, no se observan cambios
histológicos remarcables, con excepción de la presencia de una inclusión acidófila
intracitoplasmática (corpúsculo de Negri).

3. Aspectos clínicos
El período de incubación de la enfermedad está en relación a la distancia de la mordedura
(sitio de ingreso) al cerebro, pudiendo ser desde 10 días a un año o más.

151
 El período prodrómico se caracteriza por síntomas generales como fiebre, cefalea,
salivación y parestesia (hormigueo) en la zona de la mordedura.
La forma furiosa o hidrofobia: es un estado de excitación, con hiperpirexia, ansiedad y
deseo de beber agua, lo que le ocasiona fuerte dolor laríngeo con sólo ver el líquido
(hidrofobia), luego ingresa a la fase de parálisis generalizada.
En la forma paralítica, el paciente presenta parálisis ascendente progresiva, que lo lleva a
la muerte.

4. Diagnóstico de laboratorio
a) Detección del antígeno viral: A partir de muestras de tejidos (piel con pelo –nuca-,
córnea, tejido nervioso), se busca la presencia de los corpúsculos intracitoplasmáticos de
Negri, utilizando la técnica de inmunofluorescencia.
b) Detección del genoma viral: en muestras de líquido cefalorraquídeo, saliva o lágrimas,
se busca el ARN viral, empleando la técnica de reacción en cadena de la polimerasa.
c) Título de anticuerpos en sangre o líquido cefalorraquídeo, aunque son de presentación
tardía.

5. Prevención y tratamiento
La prevención de la rabia depende del control de la rabia en animales domésticos (perros y
gatos), utilizando vacunas atenuadas, sean inyectables u orales.
La vacuna para el virus de la rabia ha sufrido cambios en beneficios de la población, así:
A) La primera vacuna fue elaborada por Luis Pasteur a partir de una cepa salvaje, la que
se obtuvo luego de varios pases sucesivos en cerebro de conejo, hasta que el tiempo
de incubación se hizo estable en una semana (cepa fija). La disminución de la
virulencia del virus se obtuvo desecando a medio ambiente la médula espinal del
conejo infectado. Esta vacuna fue muy utilizada por L. Pasteur, pero tiene el riesgo de
producir reacciones adversas, como encefalitis con desmielinización, cuya frecuencia
es de 1 en 200 casos
B) Vacuna elaborada en embrión de pato, luego inactivada químicamente, la que
requiere de 21 aplicaciones.
C) Vacuna elaborada en cultivo de células diploides humanas, inactivada con agentes
químicos, por lo que las reacciones adversas son mínimas. Es la vacuna de uso actual,
como profiláctico y como terapeútico, con la ventaja de requerir pocas aplicaciones.

Ante un evento de mordedura por un animal sospechoso de rabia, se debe realizar

limpieza de la herida con agua y jabón (amonio cuaternario), alcohol o yodo; Instilar
suero antirrábico alrededor de la herida; y administrar la vacuna asociada con una dosis de
inmunoglobulina antirrábica. La vacuna actual se administra en cinco dosis.

Las personas en riesgo de contraer la rabia, deben recibir tres dosis de la vacuna, antes de
la exposición.

152
 CAPÍTULO 29
RETROVIRUS
________________________________________________________________________________

Retrovirus
Con esta denominación se agrupa a virus ARN con envoltura, cuya forma de replicación es
propia, que contradice el dogma de la biología molecular, que dice: “la información genética sigue
el sentido del ADN al ARN y luego a las proteínas”. Los retrovirus codifican una polimerasa de ADN
dependiente del ARN, denominada “retrotranscriptasa inversa”, luego, la copia del genoma del
virus se integra al cromosoma de la célula huésped para quedarse como un gen celular.

Los retrovirus se clasifican en tres subfamilias: a) Lentivirinae, asociados a enfermedades

neurológicas e inmunodepresoras (virus de inmunodeficiencia humana: VIH-1, VIH-2, virus de
leucosis bovina, virus de la inmunodeficiencia felina, etc.); b) Oncovirinae, virus que inmortalizan
o transforman las células diana (virus linfotrópico T humano: VLTH-1, VLTH-2, VLTH-5); y c)
Spumavirinae, virus que provocan un efecto citopático que da aspecto espumoso a la célula, y no
se relacionan con enfermedades en el ser humano.

Virus de inmunodeficiencia humana (VIH)

En la década de los 80, médicos de los Estados Unidos reportaron una nueva enfermedad
viral, con las siguientes características: a) de mayor incidencia en hombres homosexuales jóvenes,
b) presentación súbita de un cáncer en la piel, hasta la fecha muy raro, llamado sarcoma de kaposi,
c) neumonía atípica causada por Pneumocistis carini, d) Incremento de infecciones por
Citomegalovirus, y e) candidiasis de la mucosa bucal. Todo ello hizo pensar que el paciente sufría
de deficiencia de la inmunidad celular.

En el año 1982, el Centro para el Control de enfermedades (CDC) de los Estados Unidos le
denomina “síndrome de inmunodeficiencia adquirida” o SIDA. Luc Montagnier, del Instituto
Pasteur de Francia, y Robert Gallo, del National Institute of Health de USA, publicaron, en forma
casi simultánea, el aislamiento de un retrovirus en un cultivo de linfocitos T; más tarde se confirmó
que se trataba del virus de la inmunodeficiencia humana.

1. Estructura
La partícula viral es icosaédrica, de 100 a 120 nm, rodeada de una membrana compuesta
por glucoproteínas. El genoma lo constituyen dos copias de ARN monocatenario, rodeadas
de la proteína del cápside, (p24). Las proteínas transcriptasa inversa (p64) y la integrasa
(p32) están unidas al genoma viral. Las glucoproteínas que rodean al virión son la cabeza
(gp120) y la espiga (gp41).

153
2. Propiedades
El VIH infecta a los linfocitos T CD4 y los lisa. Puede ubicarse en otras células, como
macrófagos, linfocitos T CD8, natural Killer, células dendríticas y células del sistema
nervioso, pero no les produce lisis. Cuando el VIH se adhiere a una célula, la gp120
interactúa con el receptor CD4 y se fusionan, permitiendo el ingreso del virus. En el
citoplasma el ARN viral, con la participación de la transcriptasa inversa, se convierte en
ADN. El ADN viral es transportado al núcleo de la célula, donde se integra al cromosoma
de la célula.
El genoma del VIH contiene genes estructurales: gag (p17, proteínas de la matriz, p24,
proteínas del cápside); pol (p15, p51, transcriptasa inversa, p32, integrasa); env (gp120,
glucoproteína de envoltura externa y gp41, glucoproteína de envoltura de unión). Los
componentes del virión (ARN, proteínas y glucoprpoteínas) se ensamblan y liberan en los
sitios de brotación de la membrana citoplasmática.
El VIH-1 puede infectar de manera lítica y latente; se replica rápidamente y tiene una tasa
de mutación elevada, se estima que un paciente alberga 100 millones de variantes
antigénicas.

3. Poder patógeno
El VIH causa el SIDA por la destrucción de los linfocitos T CD4; sin estas células no hay
respuesta inmune, luego el organismo es incapaz de detener las infecciones o eliminar
células cancerosas.
El VIH forma sincitios a células gigantes, por fusión de células del huésped, las que mueren
prematuramente. Se forman anticuerpos neutralizantes contra la gp120, sin embargo, el
virus recubierto de anticuerpos sigue siendo infeccioso.
En el SIDA hay compromiso de las células de la microglia y macrófagos del cerebro, con
complicaciones neurológicas inflamatorias que afectan el razonamiento cognitivo
(memoria alterada), el funcionamiento motor (temblores, debilidad de las piernas), y el
comportamiento (apatía, irritación o depresión).
Los linfocitos T CD8, por su acción citotóxica directa, pueden destruir las células infectadas
e inhibir la unión del virus a su correceptor, pero, éstos linfocitos deben ser activados para
dicha función por los linfocitos T CD4, que están siendo destruidos.

4. Aspectos clínicos
El VIH está presente en la sangre, semen, secreciones vaginales y leche materna. Las vías
más comunes de transmisión son: relaciones sexuales, compartir agujas contaminadas,
transfusión sanguínea o derivados, punciones accidentales en trabajadores de la salud y el
SIDA congénito.
La infección por VIH se puede dividir en tres fases:
a) Infección primaria: Se refiere a la etapa desde la infección hasta antes que puedan
detectarse anticuerpos en la sangre (período de ventana). La mayoría no experimenta
síntomas, aunque el virus se encuentra en gran cantidad en la sangre. Suele durar pocas
semanas o meses.

154
 b) Fase crónica asintomática: En esta fase el paciente no presenta signos ni síntomas de
enfermedad. El virus sigue replicándose en el organismo y es detectable la respuesta
inmune. El recuento de linfocitos T CD4 declina hasta cifras no menores de 200 células µ/L.
Este período tiene un tiempo de duración promedio de diez años.
c) SIDA: Fase en la que el paciente presenta sintomatología diversa, como consecuencia de
infecciones producidas por microorganismos oportunistas (Citomegalovirus, Candida
albicans, Pneumocystis carini, Toxoplasma gondii, Mycobacterium tuberculosis,
Mycobacterium avium, etc.), y los recuentos de linfocitos T CD4 son inferiores a 200
células µ/L. Los síntomas más comunes son la diarrea por períodos superiores a 30 días y
la pérdida de peso. Algunos padecen de neoplasias malignas. Sin terapia antirretroviral los
pacientes fallecen en promedio de dos años.

5. Diagnóstico de laboratorio
A) Las pruebas de despistaje se basan en la detección de anticuerpos contra el virus, a
partir de muestras de sangre, orina, o saliva. El método utilizado es el de enzima
inmunoensayo (ELISA), aunque existen pruebas rápidas de inmunoprecipitación.
B) Cuando las pruebas de despistaje son positivas, se debe realizar la prueba
confirmatoria de Western blot, que consiste en poner el suero del paciente frente a
las proteínas fraccionadas del virus. Para ello, previamente se han fraccionado las
proteínas del virus, mediante la técnica de electroforesis, usando como soporte el gel
de poliacrilamida (éste reactivo se expende en tiras). La reacción de las proteínas
virales con el suero del paciente se observará por la presencia de bandas coloreadas, y
se debe comparar las bandas con el patrón que permite identificarlas. Para considerar
un caso como positivo debe presentar como mínimo las bandas contra p24 (cápside),
p31 (endonucleasa), gp41 (transmembrana) y gp120 (envoltura).
C) El conteo total de linfocitos T CD4, y la relación entre CD4 y CD8, nos permite evaluar
el estado de la infección por VIH.
D) Para conocer la eficacia del tratamiento de un paciente con VIH se está utilizando la
determinación de la carga viral, mediante la técnica de la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR).

6. Prevención y tratamiento
El control de la infección por VIH, es la educación en la práctica del sexo seguro, la de no
compartir material inyectable y utilizar las barreras que impidan el contacto con
hemoderivados.
Existen muchos esfuerzos para obtener una vacuna eficaz, pero aun no se ha conseguido.
El tratamiento actual del SIDA es la administración combinada de varios antivirales, con
distintos mecanismos de acción (inhibidores de fusión, de transcriptasa inversa o de
proteasas) conocido como “TARGA”. Estos fármacos poseen diversos efectos adversos y
deben ser modulados para cada paciente.

155
 SECCIÓN IV
MICOLOGÍA

CAPÍTULO 30
HONGOS: GENERALIDADES. HONGOS AMBIENTALES
_______________________________________________________________

A.GENERALIDADES

Los hongos forman el reino Myceleae, integrado por células eucariotas con características
bien definidas, como: pared celular constituida por quitina, glucano y manosa (sustancias que no
pueden ser degradas por enzimas de los mamíferos), y membrana citoplasmática constituida por
ergosterol (molécula exclusiva de los hongos y que es el blanco donde actúan los antimicóticos).
Para diferenciarlos de las plantas, se debe señalar que no realizan el proceso de fotosíntesis, por
carecer de cloroplastos, ni forman clorofila.

Los hongos habitan el medio ambiente, en especial el que contienen materia orgánica en
descomposición, ya que son heterotrofos y se encargan de reciclar el carbono y el nitrógeno. La
mayoría son aerobios, muchos son productores de metabolitos como alcoholes, ácido cítrico o
sustancias bactericidas, y pocas especies realizan procesos de fermentación. No se ha demostrado
la presencias de endotoxinas, pero sí algunos son productores de sustancias con actividad tóxica.

Los hongos se reproducen de dos formas: sexuada o teleomórfica, cuando hay unión de
dos células y luego una meiosis; y asexuada o anamórfica, cuando la unidad de reproducción se
llama conidia (polvillo) y la división es sólo por mitosis. La identificación de los hongos está basada
en las características macroscópicas de las colonias y las características microscópicas de las
estructuras de reproducción o conidias. Las conidias que pueden ser: a) Libres que proceden de las
hifas, ejemplo: blastoconidias, astrosconidias y clamidosporas. b) Libres que proceden de una
estructura especializada, el conidióforo, y c) Conidias propiamente dichas que se encuentran
dentro de una bolsa o esporangio.

En los cultivos, la característica macroscópica de las colonias de los hongos permite

agruparlos en dos categorías: 1. Levaduras: forman colonias redondas, cremosas o mucoides,
semejantes a las bacterias. La célula fundamental es redondeada y se multiplica por gemación.
2. Filamentosas o mohos: forman colonias vellosas o filamentosas. La célula básica es tubular,
llamadas “hifa”, y el conjunto de ellas en los cultivos toma el nombre de “micelio”. Para
multiplicarse el micelio se transforma en “conidias”, elementos pequeños, redondeados, cuya
forma, organización y disposición da el nombre a la especie de hongo.

156
B. HONGOS CONTAMINANTES

Los hongos contaminantes son los que más abundan en el medio ambiente. Aunque la
mayoría son inocuos, algunos son oportunistas en huéspedes inmunodeprimidos, o en pacientes
que han recibido terapia antibiótica prolongada. Revisten interés, porque son los microorganismos
que con mayor frecuencia contaminan los alimentos o la ropa; además, algunos de ellos son
productores de antibióticos; otros, se comportan como alergenos, provocando cuadros de
hipersensibilidad o alergia. Todos ellos desarrollan bien en agar Sabouraud luego de 48 horas de
incubación. Los hongos contaminantes se les clasifica en:

I. ZIGOMICETOS: Absidia, Cunninghamella, Mucor, Rhizopus y Syncephalostrium

II. LEVADURAS: Geotrichum, Rhodotórula, Saccharomyces y Trichosporon

III. HONGOS FILAMENTOSOS HIALINOS: Cefalosporium, Aspergillus (clavatus, flavus, fumigatus,

niger y terrae), Fusarium, Monilia y Penicillium

IV. HONGOS FILAMENTOSOS DEMATIÁCEOS (negros): Alternaria, Biopolaris, Cladosporium,

Curvularis y Helminthosporium

Se describen las características de los mas frecuentes en medicina:

1. Penicillium sp. Contaminante más frecuente de los alimentos y de la ropa húmeda. Forma
colonias pulverulentas de color verde con halo blanquecino. Al microscopio se observa
hifas tabicadas con conidióforos ramificados y esterigmas con conidias en el extremo
distal, que da la apariencia de pincel.

2. Aspergillus sp. Se describen diecinueve especies; pueden colonizar cavidades pulmonares

preformadas por tuberculosis, dichos granulomas se diagnostican por la detección del
antígeno galactomanano. Forman colonias aterciopeladas o pulverulentas de color blanco,
amarillo, verde, marrón o negro. Al microscopio se observa hifas tabicadas con
ensanchamiento distal (vesícula), que da origen a esterigmas con conidias en cadena.

3. Mucor sp. Se describen en pacientes con inmunodeficiencia y en vendajes quirúrgicos.

Forma colonias algodonosas blanco grisáceas. Al microscopio se observa micelios con un
esporangio distal, dentro del cual se ubican las endoesporas.

4. Rhizopus sp. Saprofito. Forma colonias algodonosas, de color blanco a gris oscuro. Al
microscopio se observa hifas con rizoides (raíces) y un esporangio en el extremo, dentro
del cual se ubican las endoesporas.

5. Cefalosporium sp. Forma colonias vellosas húmedas sin pigmento. Al microscopio se

observa micelios hialinos, con microconidias pequeñas, alargadas agrupadas en masas.

157
 6. Fusarium sp. Ocasiona compromiso de la córnea en personas con lentes de contacto o
posterior a un trauma. Forma colonias vellosas, secas, de color naranja, violeta o lila. Al
microscopio se observa macroconidias multiseptadas, fusiformes, de 5-8 micras y
microconidias ovoides.

7. Alternaria sp: Forma colonias atercipeladas con tonalidad café oscuro. Al microscopio se
observa micelios septados con cuerpos noduclares (poroconidias), dispuestos en cadenas.

C. MICOTOXINAS

Algunos hongos filamentosos contaminantes son productores de toxinas, las que son
dañinas para el ser humano y los animales. La intoxicación está relacionada con la ingesta de
alimentos. Los síndromes clínicos que se presentan son muy variados, pudiendo ser: dermatitis,
gastroenteritis, hepatitis, cuadros neurológicos, discrasias sanguíneas, nefritis, e incluso algunas se
relacionan como generadores de cáncer.

Las micotoxinas que con más frecuencia se relacionan en patología humana son:

1) Alfatoxinas: producida por especies de Aspergillus flavus que contaminan el maíz o semilla de
algodón, produciendo hepatitis tóxica.

2) Citronina: producida por especies de Penicillium y Aspergillus, contaminantes del queso, trigo,
avena, maíz y arroz; con capacidad nefrotóxica.

3) Alcaloides del cornezuelo: hongo del género Claviceps, cuya sustancia es un derivado de la
ergotina; se ingiere con el trigo, la cebada o el centeno, y produce vasoconstricción periférica con
necrosis distales y gangrena, así como cuadros neurológicos con convulsiones y alucinaciones.

4) Fumonisinas: sustancias elaboradas por especies del género Fusarium; la intoxicación se

presenta por la ingesta de pan elaborado con maíz enmohecido, ocasionando dolor abdominal,
diarrea; ha sido considerado como probable cancerígeno.

5) Ocratoxina: formada por especies de Aspergillus y Penicillium contaminantes del café, pan y
cereales; la acción es fundamentalmente nefrotóxica y

6) Tricotecenos: producidos por varios hongos, como el Cefalosporium, Fusarium, Stachybotrys,

etc., que ocasionan cuadros de dermatitis, vómitos, diarrea, úlceras y hemorragia en las mucosas,
por la ingesta de cereales enmohecidos.

158
D. ANTIMICÓTICOS

Como los hongos son células eucaritas, los antifúngicos afectan las rutas metabólicas de las
células del huésped; luego, su uso pone en riego la salud de las células del huésped. Los
antimicóticos se les puede clasificar en:

a. Inhibidores del ergosterol, compuesto químico exclusivo de la membrana

citoplasmática de los hongos.
Los polienos que se unen al ergosterol e interfieren su función.
Los azoles que inhiben la síntesis del ergosterol.
b. Las equinocandinas, que inhiben la enzima glucano-sintetaza, útil para la formación de la
pared celular.
c. Los que interfieren en la formación de folatos: griseofulvina

159
 CAPÍTULO 31
LEVADURAS
_______________________________________________________________

LEVADURAS

Las levaduras son hongos unicelulares, conocidas desde Hipócrates y Galeno, como causa
de infección en la boca del ser humano (Muguet). En 1923, Berkhaud, acuñó el término de
Candida albicans a la especie más frecuente. El género Candida habita en el ambiente hospitalario,
alimentos, y es comensal en el tubo digestivo, piel y mucosas del ser humano.

Se describen más de 150 especies del género Candida, pero pocas son aisladas a partir de
muestras clínicas, se señalan a: C. albicans, C. tropicalis, C. glabrata, C. crusei, C. guilliermondii,
entre otras.

Candida albicans

A.ESTUDIO MICOLÓGICO

1. Forma y estructura: las células elementales son redondas o elipsoides de 3 a 6 µm, que
se reproducen por brotación única (blastoconidias). En los tejidos genera seudomicelios,
estructuras alargadas, similar a un fideo, que no se desprende de la célula original. Esta estructura
se puede observar in vitro, cuando se incuba a 37°C con la presencia de suero humano, al cual se
le denomina “tubo germinativo”.

2. Fisiología: Todas las especies de Cándida desarrollan fácilmente en el medio de

Sabouraud luego de 24 a 48 horas de incubación a 37°C, dando colonias lisas, blanco cremosas. Se
describe un fenotipo variante que forma colonias ásperas. En el medio agar harina de maíz, sólo la
especie C. albicans forma clamidosporas.

B. PODER PATÓGENO

C. albicans es una levadura comensal de piel, mucosas y tubo digestivo del hombre, se
estima que el 25% de la población sana es portadora en la boca. Luego, en los casos clínicos, la
fuente de infección es generalmente endógena.

Se consideran como factores de patogenicidad del microorganismo, fundamentalmente a:

1. La capacidad de adherirse a células epiteliales de la mucosa oral o vaginal, así como a los
materiales inertes (plástico, acrílico).

2. La producción de proteasas que hidrolizan la inmunoglobulina A secretora.

160
Aunque también se señalan otros factores, como: la capacidad hidrofóbica de la pared de la
levadura, la producción de fosfolipasa que daña la superficie celular y a la capacidad de cambio
fenotípico (de levadura a seudomicelio), que le otorga resistencia al daño oxidativo, todo ello
contribuye a la virulencia de la cepa.

Se señalan como factores predisponentes del huésped para adquirir la infección, entre
otros: a) la alteración de la integridad de la piel por procesos de maceración y humedad constante;
b) la disminución de la capacidad fagocítica de los neutrófilos y monocitos; c) la deficiencia de
niveles de complemento C3; y d) los procesos metabólicos como embarazo, diabetes o sobrepeso.
A ello debemos agregar factores iatrogénicos como: la administración prolongada de antibióticos,
o la permanencia de catéteres por varios días.

La forma clínica de presentación es diversa y, dpenden en gran medidad, de la

predisposición del huésped. Se describen candidiasis: a) mucocutánea (oral, genital, intestinal);
b) cutánea (interdigital y uña); y c) sistémica (urinaria, endocardio y meníngea).

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: cuando la muestra proviene de tejido queratinizado, como la uña o la piel,

se hacer un examen en fresco con hidróxido de potasio al 10%, (durante una hora), para ablandar
la queratina; luego se observarán con facilidad las esporas de las levaduras a 40X de aumento. En
muestras de mucosas se suele observar la presencia de seudomicelio.

2. Cultivo: desarrolla con facilidad en el medio de cultivo clásico de Sabouraud, formando

colonias cremosas; seguidamente se debe promover la formación del tubo germinativo, haciendo
una suspensión de la colonia en suero humano e incubarlo a 37°C.

3. Serología: el título de anticuerpos tiene utilidad sólo en candidiasis sistémicas, para lo

cual se pueden utilizar diversos métodos inmunológicos.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La prevención de infecciones por Cándida está orientada a evitar o disminuir los factores
iatrogénicos o de riesgo del huésped, pues se trata de un microorganismo endógeno.

Para el tratamiento se dispone de una amplia gama de productos de uso tópico, oral y sistémico;
los que se utilizan sólos o se combinan de acuerdo al caso clínico en particular. Ejemplo:Nistatina,
fluconasol o itraconazol.

161
Cryptococcus neoformans

Es una levadura ampliamente distribuida en la naturaleza, saprofito en el intestino de las

palomas, canarios, loros y gallinas. En el humano puede ocasionar micosis sistémica, con
compromiso del sistema nervioso central, denominada “torulosis”.

A.ESTUDIO MICOLÓGICO

1. Morfología y estructura: levadura esférica u ovalada de 2 a 20 µm, se multiplica por

gemación única. Forma cápsula de polisacáridos fácilmente observable al microscopio.
2. Fisiología: desarrolla en medio de Sabouraud en 48 horas, formando colonias grandes,
húmedas, mucoides, de color blanco cremoso. Metaboliza urea y galactosa. Se describen
las especies C. neoformans, con las vareidades neofromas y grubii, que habitan en el suelo
con excretas de aves; y la especie C. gattii, que habita en los eucaliptos. En la especie C.
neoformans se describen cuatro serotipos (A ... D).

B.PODER PATÓGENO

El desarrollo de la criptococosis en humanos depende de tres factores: a) Integridad de la

inmunidad celular, b) número de microorganismos contagiantes y, c) virulencia de la levadura
inhalada. El C. neoformans inhalado es fagocitado por los macrófagos alveolares, aunque no los
destruye, pero secretan citocinas que atrae a linfocitos NK, neutrófilos, monocitos e induce la
diferenciación de linfocitos T y B específicos. La virulencia de la cepa está centrada en la cápsula,
que protege a la célula de la fagocitosis, de las citocinas, e interfiere los mecanismos de
presentación de antígenos. También se describen casos cutáneos primarios, con formación de
granuloma ulcerado y compromiso linfático y ganglionar. La respuesta humoral no otorga
protección. Cuando la levadura ha vencido estas barreras inmunológicas se disemina vía sanguínea
al sistema nervioso central y otros órganos.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: la observación del líquido céfalo raquídeo con tinta china permite apreciar
las células rodeadas de un halo transparente característico, la cápsula.

2. Cultivo: el aislamiento de la levadura se realiza a partir de muestras de sangre o líquido

céfalo raquídeo. La formación de colonias mucoides en agar Sabouraud a las 48 de incubación y el
metabolismo de la urea son característicos.

3. Detección de antígenos: la determinación del antígeno capsular con látex recubierto de

anticuerpos es muy útil y de mayor sensibilidad que el cultivo. Los anticuerpos se determinan con
el procedimiento de ELISA

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

La prevención no es posible. El tratamiento se basa en la administración de anfotericina B,

vía endovenosa, seguido de fluconazol o itraconazol, vía oral.

162
 CAPÍTULO 32

HONGOS PRODUCTORES DE MICOSIS CUTÁNEAS Y SUPERFICIALES

DERMATOFITOS
_______________________________________________________________
MICOSIS CUTANEAS

Las infecciones de los tegumentos ocasionadas por hongos tienen prevalencia en todo el
mundo y son conocidas desde el siglo XVI, denominadas por los griegos como “tiña”. El primer
agente aislado de una lesión dérmica fue Trichophyton schoenleinii, en 1841.

Estos hongos filamentosos que invaden el tejido queratinizado, como piel, pelo y uñas, se
denominan dermatofitos, habitan en el suelo y la mayoría son patógenos para los humanos y los
animales. De acuerdo a la fuente de infección para los humanos, pueden ser zoofílicos, si
provienen de una infección animal (M. canis, T. equinum, T. gallinae, T. mentagrophytes);
geofílicos, si provienen del suelo (M. gypseum); y antropofílicos, los que son transmisible entre
humanos (E. floccosum, T. rubrum, T. tonsurans, M.audini).

La clasificación de los dermatofitos no ha sufrido cambios, a pesar de la presencia de

enzimas, como la ureasa, proteinasas, elastasa, etc., y de las técnicas moleculares actuales; se
sigue manteniendo la clasificación ortodoxa en tres géneros: Trichophyton, Microsporum y
Epidermophyton, identificados por las características macroscópicas de las colonias y
microscópicas de los micelios y conidias.

En clínica, se denomina tiña a las lesiones dérmicas descamativas, con márgenes elevados
y un área central inflamada, adquiriendo nombres de acuerdo a la zona afectada, así: tiña de cuero
cabelludo (capitis), tiña de la barba (barbis), tiña corporal (corpis), tiña inguinal (cruris), tiña de los
pies (pedis) y tiña de la uña (unguis). Las lesiones son asintomáticas o con prurito y la respuesta
inmune es casi nula.

A.ESTUDIO MICOLÓGICO

1. Morfología y estructura: los tres géneros de los dermatofitos se caracterizan por la

formación de microconidias y/o macroconidias en los cultivos. Trichophyton produce
abundantes microconidias en forma de lágrimas o en racimo de uvas esféricas,
ocasionalmente hifas enrolladas y macroconidias en forma de lápiz. Microsporum produce
abundantes macroconidias multicelulares, fusiformes, de pared gruesa y rugosa, con
escasas microconidias. Epidermophyton sólo produce macroconidias en forma de mazo
con pared lisa.

2. Fisiología: la afinidad de estos microorganismos por los tejidos superficiales corresponde a

la producción de proteasas que tienen acción sobre la queratina. In vitro, todos

163
 desarrollan bien en el medio de Sabouraud, incubados a temperatura ambiental (22°C-
26°C), formando colonias a partir de los siete días. Trichophyton forma colonias
granulosas, algunas de color rojo en el reverso; Microsporum forma colonias vellosas de
color pardusco y Epidermophyton colonias vellosas verde amarillentas.

B. PODER PATÓGENO

La infección se adquiere por contacto directo con material (tierra, peine, sábanas, cepillo,
etc.) que contenga artrosporas o conidias y/o hifas del dermatofito, con una persona susceptible.
Estos elementos se mantienen infectantes por mucho tiempo en el medio ambiente. Luego de
adherirse a las células con queratina, germinan y conducen a la invasión. Hay diversos factores que
determinan la infección, como la edad (la tiña del cuero cabelludo afecta a niños pre púberes, y la
tiña del pié afecta a los hombres adultos), la humedad de la piel (presentación de tiña crural o
interdigital), abuso tópico de esteroides o una deficiente higiene personal.

Las manifestaciones clínicas más frecuentes son: la presentación de una lesión anular
descamativa, con bordes elevados y con la zona central menos inflamada, o la presencia de placas
circulares de alopecía con eritema y descamación, aunque pueden ser pápulas, pústulas o
vesículas. La infección de las uñas produce cambios como engrosamiento, decoloración, o
coloración negruzca, fragilidad y deformidad. El compromiso del cuero cabelludo se presenta
mayormente en pre-púberes y puede afectar la parte externa del tallo del pelo (ectotrix) o dentro
del pelo (endotrix) como es el caso del T. schoenleinii.

C. DIAGNÓSICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: preparaciones en fresco a partir de escamas de piel tomadas del borde de la

lesión, uña o pelo, suspendidas en solución de KOH al 10%, son muy útiles para observar
esporas agrupadas en racimos o hifas hialinas.

2. Cultivo: para el aislamiento de los dermatofitos se recomienda el uso del medio de cultivo
agar Sabouraud, con el agregado de ciclohexamida y cloranfenicol, que inhiben a los
hongos ambientales y bacterias contaminantes. Luego de un período de incubación de
una a dos semanas, a temperatura ambiental (22°C - 26°C), se observaran las colonias
características.

3. Identificación: la identificación de las diversas especies de dermatofito es morfológica,

observando al microscopio el micelio aéreo en preparados en fresco con azul de
lactofenol. Se apreciarán las características de las hifas, microconidias y macroconidias.

164
 Colonia Microconidias Macroconidias Ubicación
Trichophyton Granulosa, Abundantes, Ausentes Piel, Pelo
anverso rojoen lágrima o
racimo
Microsporum Vellosa, Escasas Abundantes, Piel, Pelo, Uña
pardusco fusiformes (+/-)
Epidermophyton Vellosa, verde- Ausentes Numerosas, Piel, Uña
amarillo en mazo

Tabla: 32-1: Características diferenciales de los dermatiofitos

C. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

No hay un esquema de prevención aceptable que impida la contaminación, puesto que la

infección depende, en gran medida, de la susceptibilidad personal. Pero es aconsejable medidas
de higiene personal y evitar hacer vida común con animales domésticos. No hay vacuna para los
dermatofitos.

El tratamiento tópico está indicado con la finalidad de producir efecto queratolítico, con el
uso de soluciones de ácido salicílico o ácido benzoico. En micosis dérmica extendida es
recomendable el uso oral de fluconazol, itraconazol o terbinafina. El tratamiento debe extenderse
hasta una semana después de la remisión clínica.

MICOSIS SUPERFICIALES

Hay algunos hongos que producen infección en las capas más superficiales de la dermis. La
más frecuente es la levadura lipofílica Malassezia furfur, comensal de las superficies cutáneas, de
forma esférica u ovalada, con pared gruesa e hifas cortas flexionadas. Para aislarla in vitro se debe
utilizar medio de Sabouraud con el añadido de aceite de oliva; las colonias de aspecto
levaduriformes se forman luego de 3 a 5 días de incubación.

A la enfermedad se le denomina pitiriasis versicolor, por las lesiones circulares

hipocrómicas (por diminución de producción de melanina) o hipercrómicas (por incremento del
tamaño de los melanosomas). La distribución de estas lesiones es de preferencia la cara, el cuello y
el tórax. Las lesiones no son pruriginosas y dan fluorescencia verde amarillento al exponerse a la
luz de Wood. El diagnóstico se establece por la observación microscópica de las levaduras en
racimos en las escamas de la piel afectada. La aplicación tópica de loción de sulfuro de selenio o
tiosulfato de sodio durante dos semanas, es lo aconsejable para el tratamiento.

En poblaciones con higiene personal deficiente, se puede observar infecciones del

cabello, denominadas “piedra”, por la formación de nódulos o concreciones en el tallo del pelo. Se
describen dos tipos de ésta enfermedad: Piedra blanca, causada por la levadura Trichosporum
beigelii, que afecta el pelo axilar y pubiano; y Piedra negra, ocasionada por el hongo filamentosos

165
pigmentado Piedra hortae. En ambos casos el tratamiento es el afeitado del cabello y el
mejoramiento de las condiciones de higiene.

INFECCIONES SUPERFICIALES NO MICÓTICAS

La zona superficial de la piel, así como los pelos, pueden sufrir infecciones crónicas,
muchas veces asintomáticas, como consecuencia de diversos factores: hiperhidrosis, sobre peso,
ambiente húmedo tropical y falta de higiene personal. Esta infección afecta solamente la capa
córnea de la piel, y es producida por bacterias del género Corynebacterium, habitantes de la piel
del ser humano.

1. Tricomicosis: El agente causal es el Corynebacterium flurescens, bacilos Gram positivos tipo

difteroides. Afecta los pelos de las axilas, pubis y zona interglútea; con formación de nódulos
alrededor del tallo piloso, donde se adhiere y forma concreciones. .

2. Eritrasma: El agente causal es el Corynebacterium minutissimum, bacilos Gram positivos

filamentosos y difteroides. Afecta la zona de los pliegues axilares, inguinales, interdigitales,
interglúteo y submamario; con formación de placas eritemato-escamosas bien delimitadas,
cubierta de una fina capa de aspecto grasoso.

3. Queratosis puntata: Los agentes causales son el Corynebacterium y los Micrococcus. Afectan la
planta y los dedos de los pies, ocasionando depresiones puntiformes y erosiones superficiales, que
originan mal olor.

166
 CAPÍTULO 33
HONGOS PRODUCTORES DE MICOSIS SISTÉMICAS Y SUBCUTÁNEAS
_______________________________________________________________
HONGOS DIMÓRFICOS

Los hongos denominados dimórficos son aquellos que adquieren la forma filamentosa en
el medio ambiente en el que se encuentran a temperaturas entre 22°C a 26°C., y la forma de
levadura, cuando se ubican en los tejidos del organismo animal o humano a 37°C. También se les
denomina endémicos, porque están restringidos a regiones geográficas definidas; o patógenos
sistémicos, por la capacidad de diseminarse a los diferentes órganos. No se describe transmisión
inter humana con éstos hongos.

Se revisarán los de presentación más frecuente en nuestro país: Histoplasma capsulatum,

Paracoccidioides brasiliensis y Sporothrix schenkii.

Histoplasma capsulatum

A.ESTUDIO MICOLÓGICO
1. Hábitat: el hongo se encuentra en el suelo de zonas templadas y húmedas, de preferencia
en los que tienen alto contenido de nitrógeno y fósforo, por la presencia de heces de aves
(gallinas, pavos, gansos, gallinazos) y de murciélagos. El hongo habita el intestino de éstos
animales en forma saprofita. En nuestro país es conocida “la cueva de las lechuzas”,
ubicada en la ciudad de Tingo María, como fuente principal de contaminación.

2. Morfología y estructura: la forma micelial se encuentra en la naturaleza; los micelios forma

dos tipos de conidias: las macroconidias circulares, de 8 a 15 µm, están rodeadas de
espículas o tubérculos; y las microconidias, muy pequeñas de 2 a 5 µm que representan las
partículas infectantes. La segunda foema de presentación del hongo es la levadura, que se
desarrolla dentro de los tejidos animales, son pequeñas, ovales y unicelulares.

3. Fisiología: la forma micelial desarrolla en medio de Sabouraud, incubado a 25°C, que luego
de 3 a 4 semanas de incubación formatá colonias algodonosas, blanquecinas. La forma de
levadura desarrolla in vitro a 37°C, en medios enriquecidos con infusión de cerebro y
corazón (BHI) o sangre. La capacidad de desarrollar dos formas según la temperatura de
incubación, obedece a los genes cdc2, que se activa positivamente con el calor,
desencadenándose procesos bioquímicos que les confieren vida intracelular.

4. Variedades: se describen dos variedades: a) H. capsulatum var. capsulatum que ocasiona

infecciones pulmonares y diseminadas, con prevalencia en América Central y del Sur, y b)
H. capsulatum var. duboisii que ocasiona infecciones pulmonares y óseas, con prevalencia
en el África y América del Norte.

167
B. PODER PATÓGENO

Las personas expuestas a remoción de tierras, o las que visitan cuevas donde habitan
murciélagos, pueden inhalar las microconidias o partículas infecciosas. Las microconidias se
depositan en los alvéolos pulmonares, donde se transforman en levaduras, luego son fagocitadas
por los macrófagos con quienes migran a los ganglios linfáticos, hígado, bazo y médula óseas (RES).
La inmunidad celular limita la infección primaria, mediante las células T CD4 que activan la
fagocitosis de los mononucleares. En un 95% de casos la infección se limita con la formación de un
granuloma que se fibrosa; pero puede permanecer latente por mucho tiempo en forma
asintomática, pudiendo reactivarse posteriormente. Las formas clínicas más frecuentes son:
pulmonar, mediastínica y diseminada.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: las muestras procedentes de lavado bronquial, frotis sanguíneo, médula ósea
y tejidos, pueden ser coloreados con Giemsa, PAS o HE, para observar las levaduras
pequeñas (2 a 4 µm) intracelulares formando grupos.

2. Cultivo: es más probable aislar el hongo en la forma diseminada de la enfermedad. La

formación de colonias es lenta ( 4 a 6 semanas), una vez formadas las colonias en medio de
Sabouraud, se debe cultivar en agar sangre o agar infusión de cerebro y corazón (BHI),
para revertir a la forma de levadura, o aplicar las pruebas de hibridación de ácido nucleico.

3. Serología: mediante el procedimiento enzima inmuno ensayo (ELISA), se puede determinar

la presencia de antígeno del Histoplasma en suero y orina, procedimiento de gran
sensibilidad en la enfermedad diseminada. La determinación de anticuerpos por
inmunodifusión y fijación de complemento, no son útiles en los cuadros agudos.

4. Técnicas moleculares: el uso de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) a partir de

muestras de tejidos o líquidos, establece un diagnóstico rápido y específico.

D. PREVENCIÓN Y TRTAMIENTO

No hay medidas preventivas ni vacuna para evitar la histoplasmosis. Muchos pacientes

infectados se recuperan sin tratamiento.

En la forma diseminada se recomienda como terapeútica el uso de anfotericina B,

seguido, en forma ambulatoria, con de itraconazol por períodos de 12 a 24 meses.

168
Paracoccidioides brasiliensis

A.ESTUDIO MICOLÓGICO

1. Hábitat: el ambiente ecológico del P. brasiliensis corresponde a zonas tropicales de la

selva, que son muy húmedas, con exuberante vegetación, clima cálido y suelo ácido de
América Latina. El huésped natural es el hombre, el armadillo, el ganado vacuno y caballar.

2. Morfología y estructura: la forma de filamento corresponde a hifas delgadas, tabicadas

que originan conidias pequeñas de 4 a 5 µm. En cambio la forma de levadura desarrolla
estructuras grandes de 10 a 60 µm, redondas, con pared gruesa y con múltiple gemación,
dando imágenes de “timón de barco” o “cabeza de ratón Mickey”.

3. Fisiología: la forma micelial desarrolla a 25°C, produciendo colonias algodonosas con hifas
tabicadas y clamidosporas. Los cultivos en agar sangre, incubados a 37°C, desarrollan
colonias de aspecto cerebriforme. En ambos cultivos se tarda 3 a 4 semanas para observar
las colonias.

B. PODER PATÓGENO

La población más afectada son los hombres en edad laboral, en trabajadores agrícolas y
en la industria de la madera. La infección se produce por inhalación de conidias de la forma
micelial (aunque se presentan casos por inoculación traumática). En el alveolo pulmonar se
transforman en levaduras, las que secretan el antígeno gp43, responsable de la adhesión a los
macrófagos y de la intensa respuesta humoral.

Luego de un período de inactividad clínica se presentan problemas respiratorios, con tos,

esputo purulento, adelgazamiento y fiebre; las imágenes radiográficas revelan nódulos con
infiltraciones, síntomas y signos que recuerdan a la tuberculosis pulmonar. Luego de un período
variable se presenta metástasis en zonas cutáneas y mucosas de la cara (labios, encías, lengua,
paladar blando y nariz), produciendo lesiones inflamatorias destructivas; también se observa
compromiso ganglionar cervical. La enfermedad clínica tiene dos denominaciones:
paracoccidiodomicosis o blastomicosis sudamericana, y tiene varias presentaciones clínicas:
pulmonar primaria, mucocutánea, ganglionar y visceral.

C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscopía: a partir de muestras de esputo o exudados de las lesiones orales, en

preparaciones en fresco o coloreados con Giemsa, se pueden observar las levaduras de
tamaño variado, generalmente grandes multigemadas características. La biopsia de la
lesión dérmica hace el diagnóstico.

2. Cultivo: el aislamiento in vitro es posible en agar Sabouraud incubado a 25°C, luego de 3 a

4 semanas. Es conveniente confirmar el dimorfismo térmico.

169
 3. Serología: La presencia de antígenos de P. brasiliensis circulantes en la sangre se detectan
con el uso de anticuerpos monoclonales, empleando técnicas de Western blot o enzima
inumo ensayo. El título de anticuerpos Ig G e Ig M se utiliza para el diagnóstico y sobre
todo la evolución del tratamiento; para lo cual se emplean técnicas de inmunodifusión,
fijación de complemento, inmunofluorescencia o ELISA.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

No hay medidas preventivas ni vacuna para evitar la blastomicosis sudamericana. Para el

tratamiento se emplea sulfonamidas por períodos prolongados (3 a 5 años). En casos graves se
debe asociar anfotericina B. En los casos clínicos que no respondan a éste esquema terapeútico se
recomienda el uso de ketoconazol.

Sporothrix schenkii

A.ESTUDIO MICOLÓGICO

1. Hábitat: el hongo se ubica en el suelo y los vegetales en descomposición de regiones

tropicales y sub tropicales.

2. Morfología y estructura: la forma micelilal se compone de hifas tabicadas que producen

conidias ovaladas, organizadas en forma de rosetas en “pétalos de margarita”. La forma de
levadura son esféricas, ovaladas o alargadas que semejan al cigarro, con gemación única.

3. Fisiología: a temperatura ambiental (25°C), desarrolla la forma de filamentos y las colonias

en agar Sabouraud son algodonosas, de color blanco que se tornan pardas. En los cultivos
de agar infusión de cerebro y corazón, incubados a 37°C, desarrolla colonias con el
aspecto de levadura. En los tejidos, se observan levaduras alargadas con una gemación.

B. PODER PATÓGENO

Las personas más expuestas a padecer ésta infección, son las que se relacionan con
actividades en granjas y jardinería. La forma infectante (micelila) ingresa através de lesión cutánea
producida por espinas, aguijones o astillas de madera; posteriormente, se aprecia una pápula
nodular eritematosa, no dolorosa, que con frecuencia se ulcera. Luego se desarrollan lesiones
nodulares subcutáneas secundarias, que siguen el trayecto del vaso linfático, construyendo el
patrón de linfangitis nodular. También se describen esporotricosis extracutánea, como la
osteoarticular. En pacientes con SIDA se pueden presentar manifestaciones invasivas atípicas
(pulmonar, meníngea, hepática, etc).

170
C. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

1. Microscópico: la biopsia de las muestras obtenidas de las lesiones, es sugestivas de

infección por la presencia de levaduras alargadas en forma de cigarro, pero no es
concluyente.

2. Cultivo: el aislamiento del agente a partir del pus o tejido infectado es definitivo para el
diagnóstico. En agar Sabouraud, incubado a 25°C, desarrollan colonias filamentosas en
una semana; a partir de las cuales se pueden observar las hifas con microconidias ovaladas
ordenadas en rocetas. Se debe revertir a la forma de levadura en medio agar cerebro y
corazón incubado a 37°C.

D. PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO

No hay medidas preventivas, ni vacunas. El tratamiento clásico es la administración de

solución de yoduro de potasio, pero se presentan efectos adversos. El uso de anfotericina
B e itraconazol son los recomendados.

171
 SECCIÓN V
MICROBIOLOGÍA SISTEMÁTICA

CAPÍTULO 34
INFECCIONES DEL TRACTO RESPIRATORIO

_______________________________________________________________
I. TRACTO RESPIRATORIO ALTO

A. INTRODUCCIÓN

En la vía espiratoria alta existe una flora microbiana normal, formada por diversas
bacterias y virus, a los que se añaden microorganismos ambientales que ingresan por inhalación.
Todos ellos son saprofitos, pero pueden superar las barreras anatómicas e inmunológicas
antimicrobianas naturales del ser humano y ocasionar procesos inflamatorios benignos como:
rinitis, faringitis, epiglotitis y traqueobronquitis. Ocasionalmente se puede presentar alguna
complicación severa, cuando el microorganismo involucrado posee elevada virulencia.

El cuadro clínico más frecuente es la faringitis y por lo general el agente etiológico es un

virus, pero algunas veces, pueden estar involucradas bacterias, como S. pyógenes o C. diphtheriae,
que por el compromiso sistémico que conllevan revisten singular importancia clínica. En cambio,
la inflamación de la epiglotis es ocasionada casi exclusivamente por bacterias (H. influenzae
serotipo b). Por otro lado, en el curso de procesos infecciosos bronquiales crónicos
(bronquictasias), se suelen involucrar otras bacterias, como S. aureus, Klebsiella sp. o P.
aeruginosa, que ocasionan sobreinfecciones, debiendo modificar la estartegia terapeútica.

Las estructuras anatómicas colindantes con la vía respiratoria alta, como el oído medio y
los senos paranasales, son áreas normamente estériles; pero por su vecindad y comunicación con
la nasofaringe están expuestas a contaminaciones con la flora microbiana residente. Este
problema se evidencia en la otitis del lactante, donde la anatomía de la Trompa de Eustaquio
facilita la diseminación microbiana. Las otitis de origen externo son de mayor riesgo, pues los
microorganismos involucrados (S. aureus y P. aeruginosa) son más agresivos y pueden
comprometer el hueso temporal. En cambio, la infección de los senos paranasales ocurre por
inflamación y obstrucción del osteum que comunica con las fosas nasales, y los agentes
involucrados pueden ser tanto virus como bacterias y hongos filamentosos.

Si bien la conjuntiva no forma parte de la via respiratoria alta, pero algunas veces está
involucrada en infecciones virales como: Sarampión, Adenovirus 3, 4 ó 7; o bacteriana como
Bordetella pertussis. Otras veces se compromete por vía sanguínea o vía sistema nervioso, como
es el caso de la infección por Herpes. La inflamación de la conjuntiva se produce generalmente por
invasión miocrobiana directa o por contigüidad desde los bordes del párpado.

172
B. ESTUDIO

La muestra para el estudio microbiológico es la secreción faríngea, ótica o conjuntival, la

que debe ser obtenida con hisopo de algodón o de amianto. En el caso del seno paranasal, la
punción es lo ideal. La muestra debe ser procesada de inmediato o depositada en medio de
transporte (Stuart o Amies). Para estudios virales se utiliza, como medio de transporte el de Hanks.

C. AGENTES CAUSALES

Rinitis … … Rinovirus, Coronavirus, Coxsackie, Parainfluenzae, Adenovirus

Faringitis … … Adenovirus, Enterovirus, Virus Epstein Barr, V.Parainfluenzae,

Virus respiratorio sincitial, Coxsackie, Echovirus, Herpes simple,
Citomegalovirus, Rubeola.
S. pyógenes, S. pneumoniae, H. influenzae, C. diphtherieae,
Asociación fuso-espirilar de Vincent, Mycoplasma pneumoniae

Epiglotitis … … H. influenzae b, H. influenzae no tipables

Otitis media … … S. pneumoniae, H. influenzae, Pseudomonas aeruginosa

Sinusitis … … Rinovirus, V. influenzae, Adenovirus,

S. pneumoniae, H. influenzae, Anaerobios no esporulados, S.
aureus.
Aspergillus, Fusarium

Conjuntivitis --- --- Resfriado, Adenovirus (3,4,7), Adenovirus (8,19,37),Varicela zoster,

Echo virus, Enterovirus (70), Coxsakie A24, V. Herpes simple,
Sarampión, Rubeola.
Chlamydia trachomatis A-C y D-K
S. aureus, S. pneumoniae, H. influenzae (aegyptus), S. pyógenes, N.
gonorrhoeae, B. pertussis.

173
II. TRACTO RESPIRATORIO BAJO

A. INTRODUCCIÓN

Los microorganismos llegan al parénquima pulmonar a través de la vía respiratoria alta o

por vía sanguínea; la presentación clínica del proceso infeccioso ocurrirá en fucnión de diversos
factores, tales como: edad, estado funcional del parénquima pulmonar, situaciones
predisponentes del huésped y epidemiología regional, todas ellas van a contribuir en definir al
agente etiológico.

En los lactantes los agentes infecciosos más frecuentes son los virus, en especial el Virus
respiratorio sincitial, que causa bronquiolitis con producción de mucus, el cual puede taponar los
bronquiolos ocasionando atelectasia. En niños de edad pre escolar y escolar es la bacteria
Bordetella pertussis, que se adhiere al epitelio ciliado y, por acción de sus toxinas lo destruye,
ocasionando bronquitis de larga evolución. Pero el S. pneumoniae, es el agente causal más
frecuente que ocasiona neumonía en todas las edades.

En las bronquitis crónicas varias bacterias participan en este proceso, algunas residentes
del tracto respiratorio alto, otras externas que colonizan los bronquios. A todo ello hay que añadir
un componente externo irritativo (tabaquismo o humo). El Mycobacterium tuberculosis, necesita
mención aparte en los procesos infecciosos crónicos, tanto en la epidemiología, diagnóstico como
tratamiento; debiéndo ser considerado en la discusión de todo proceso infeccioso crónico.

B. ESTUDIO

Para la búsqueda del agente causal en una infección respiratoria la muestra es el esputo,
el que debe reunir ciertos criterios para garantizar la buena calidad de ella. Por ejemplo: que
proceda luego de un golpe de tos, que no contenga saliva y, que al examen microscópico con
objetivo 40X, se observen menos de 10 células epiteliales por campo. Para estudios virales la
muestra obtenida por aspirado de la nasofarínge es muy adecuada.

Cuando el agente probable de la infección es un microorganismo que forma parte de la

flora respiratoria, la muestra debe ser obtenida con cepillo protegido. En pacientes que se
encuentran entubados, se debe aspirar la secreción bronquial con una cánula, que nos
proporcionará la flora bacteriana que coloniza el bronquio.

Como medida complementaria se deben realizar hemocultivos y colectar orina para la

determinación de antígenos bacterianos (S. pneumonae, Legionella pneumophila).

Las coloraciones de Gram y Ziehl-Neelsen son muy útiles y orientadoras para el

diagnóstico. El uso de anticuerpos fluorescentes (Inmunofluorescencia directa) para la búsqueda
de Virus respiratorio sincitial, Bordetella pertussis, Legionella o Virus de Influenza, son de utilidad
diagnóstica.

174
 El uso de técnicas moleculares de amplificación, se recomiendan para microorganismos
que no forman parte de la flora respiratoria: C. diphtheriae, B. pertussis, M. pneumonae, L.
pneumophila y M. tuberculosis.

C. AGENTES CAUSALES

Niños Adultos Ancianos

Virus Respiratorios S. neumoniae S. neumoniae

Mycoplasma pneumoníae Mycoplasma pneumoniae
S. neumoniae Chlamydia
Bordetella pertussis M. tuberculosis
Legionella pneumophila
Virus de la gripe
Virus de la gripe
Legionella pneumophila
M. tuberculosis
Virus respiratorio sincitial
Klebsiella pneumoniae

175
 CAPÍTULO 35
INFECCIONES CUTÁNEAS Y TEJIDOS BLANDOS
_______________________________________________________________
A.INTRODUCCIÓN

La piel representa una barrera anatómica para el ingreso de los microorganismos, pero
cuando se lesiona se encuentra expuesta a la acción de diversos agentes infecciosos, muchos de
ellos habitantes saprofitos de los tegumentos. La acción de estas bacterias puede ser en forma
directa, de tal manera que producen infecciones localizadas y que puede extenderse a tejidos
circundantes; o pueden producir lesiones en órganos distantes por acción de las toxinas
excretadas. En general, las lesiones de tipo punzante, laceraciones o quemaduras, evolucionan
muy rápido hacia la infección.

Los folículos pilosos son los que con más frecuencia se infectan con gérmenes habitantes
de la piel, en especial con Staphylococcus, ocasionando: forúnculos, abscesos o ántrax. Los
traumas de la piel producidos por mordeduras, de humanos o animales, así como arañazos, tienen
alto riesgo de infección, debido al elevado número de bacterias habitantes en la boca, hocico o
nasofaringe, ocasionando en su mayoría infecciones polimicrobianas (aerobios y anaerobios).

El nombre de la entidad clínica de éstas infecciones varía de acuedo a los tejidos

afectados, así: cuando se compromete sólo la epidermis, la infección se denomina impétigo; ésta
puede extenderse obstruyendo los linfáticos y producir edema con eritema localizado, cambiando
de denominación por erisipela. Este proceso se puede complicar en personas con deficiente
vascularización en las extremidades, y comprometer el celular subcutáneo, produciendo la entidad
clínica de celulitis. Si la infección continua, progresa y compromete tejidos debajo de la dermis, se
produce una fascitis, y cuando el músculo adyacente se infecta, constituye una miositis o
gangrena.

Hay ciertas condiciones de la piel como la humedad o el frote constante, que facilitan la
instalación de infección por hongos (levaduriformes o dermatofitos), situación que se observa
mayormente en personas con sobrepeso.

En algunos procesos infecciosos sistémicas (virales o bacterianos), se observan

manifestaciones cutáneas y/o mucosas de tipo eritematoso, vesicular o nodular, como expresión
de la septicemia. Ejemplo: Pseudomonas aeruginosa, S. pyógenes, Herpes virus, Sarampión,
Rubeola, etc.

B.ESTUDIO

El tipo de muestra y la técnica a seguir para su procesamiento, va a variar, de acuerdo al

tipo clínico de la lesión:

176
 1) Lesiones secas y escamosas: Con ayuda de un bisturí se debe raspar el borde de la lesión
para obtener escamas de piel y cabellos, depositarlos en placa petri.
2) Lesiones eritematosas no exudativas: en ellas no se puede obtener muestra.
3) Lesiones exudativas o purulentas: La muestra se obtiene con ayuda de un hisopo, luego
depositarlo en medio de transporte (Amies).
4) Lesiones granulomatosas: Con ayuda de un bisturí frotar la lesión y hacer frotices para
colorearlos con Gram, Giemsa y Ziehl-Neelsen. La biopsia es lo más adecuado. La Clínica
orientará el procedimiento de cultivo.

C.AGENTES CAUSALES

1) Lesiones secas en piel y cuero cabelludo: Dermatofitos y Cándida

2) Lesiones en mucosas o piel húmeda: Cándida
3) Lesiones eritematosas no exudativas: Streptococcus
4) Lesiones muco-cutáneas, eritematosa o vesicular:
a) Por diseminación sistémica: Herpes simple, Herpes 6, Herpes 8, Sarampión, Rubeola,
Virus varicela zoster
b) Sin desiminación sistémica: Papiloma virus, Pox virus
5) Lesiones exudativas y purulentas: Staphylococcus, Streptococcus, Pseudomonas.
6) Lesiones granulomatosas con cuerpo extraño: Staphylococcus, Anaerobios, Nocardia,
Sporotrix, Mycobacterium, Leishmania.
7) Lesiones con compromiso del tejidos profundos: Clostridium, E. coli, Staphylococcus,
Streptococcus.
8) Lesiones por mordedura de humanos: Staphylococcus aureus, Streptococcus viridans,
Anaerobios (Bacteroides, Fusobacterium, Peptoestreptococcus) Eikenella corrodens.
9) Lesiones por mordedura de animales: Pasteurella multocida, Streptobacillus moniliformis
10) Lesiones producidas por arañazo : Bartonella henselae

177
 CAPÍTULO 36
INFECCIONES DEL APARATO DIGESTIVO
_______________________________________________________________
A.INTRODUCCIÓN

Diversos agentes microbianos pueden ocasionar enterocolitis, incluyendo a protozoarios,

bacterias y virus. La mayoría de casos presentan cuadros clínicos de diarrea que son controlados o
se autolimitan; aunque en pacientes lactantes, ancianos, o cuando la diarrea es muy intensa,
puede llevar a la deshidratación.

Los mecanismos por los cuales se presenta diarrea se pueden resumir en dos: a) Invasivo,
cuando el microorganismo infectante se multiplica, coloniza, invade el epitelio intestinal, e incluso
lo destruye produciendo úlceras (Campylobacter, Salmonella, Shigella), y la expresión clínica es la
emisión de heces amorfas o líquidas, con moco, pus y/o sangre. b) Toxigénico, algunas bacterias
excretan toxinas que, por distintos mecanismos, alteran la reabsorción de líquidos por el
enterocito, e incluso hacen que las células excreten líquidos y electrolitos. Si estas toxinas están en
el alimento ingerido, se trata de una verdadera intoxicación alimentaria (Staphylococcus aureus,
Clostridium botulinum); pero, también pueden ser toxinas formadas por las bacterias ingeridas
durante su permanencia en el intestino, tratándose entonces de una infección asociada al
alimento (Vibrio cholerae, Escherichia coli ET). En estos casos la expresión clínica es la emisión de
heces acuosas, con o sin moco.

Algunas infecciones adquiridas por vía oral son el inicio de un compromiso sistémico,
como es el caso de la Hepatitis A, Salmonella typhi, Listeria monocytogenes o Bucella; en las que
para el diagnóstico se debe considerar los estudios serológicos, que indiquen la presencia de
antígenos o anticuerpos circulantes.

La participación de los virus, como causa de diarrea, es muy frecuente, felizmente los
cuadros clínicos son de corta duración. Su reconocimiento es importante, pues, limita el uso
innecesario de antibióticos.

Los cuadros clínicos de gastritis y úlcera duodenal, están íntimamente relacionados con la
participación activa del Helicobacter pylori. Para su confirmación se utilizan técnicas endoscópicas
con la consiguiente biopsia.

B.ESTUDIO

Debido a la diversidad de agentes etiológicos causantes de diarrea, la muestra debe ser

adecuada para garantizar la calidad del estudio; por ello la muestra de heces debe ser patológica:
diarreica, líquida, con moco o sangre. Una pequeña porción (1 gramo aproximadamente) debe
depositarse en cada uno de tres frascos: a) con transporte de Cary-Blair para estudio de bacterias,
b) con transporte mertiolate-yodo-formol (MIF) para estudio de parásitos y c) sin ningún
ingrediente y conservarlo en refrigeración para estudio de virus y toxinas.

178
 El examen microscópico en fresco es útil para el estudio de protozoarios en fase
vegetativa. Los frotices coloreados con Gram, sólo tienen utilidad para la búsqueda de
Campylobacter y Vibrio, y los coloreados con Ziehl-Neelsen, para Cryptosporidium. En cambio el
cultivo utilizará una diversidad de medios selectivos para aislar la bacteria sospechosa.

La determinación de antígenos virales en las heces, mediante técnicas de aglutinación,

inmuno cromatografía y enzima inmuno ensayo, permite el diagnóstico de infecciones virales o la
presencia de toxinas bacterianas (Clostridium difficile).

C.AGENTES CAUSALES

Bacterias Virus

Frecuente Salmonella enteritidis Rotavirus

Campylobacter jejuni Norovirus
Shigella sp Adenovirus
Staphylococcus aureus Hepatitis A

Poco frecuente Salmonella typhi

Yersinia enterocolítica
E. coli hemorrágico
Listeria monocytogenes
Clostridium botulinum

Hospitalario Clostridium difficile

Viajeros Escherichia coli enteropatógenos

(ECEP, ECEI, ECET, ECEA)
Vibrio cholerae
Vibrio parahemolyticus
Clostridium perfringes

179
 CAPÍTULO 37
INFECCIONES URINARIAS
_______________________________________________________________
A. INTRODUCCIÓN

Anatómicamente las vías urinarias pueden dividirse en bajas y altas. Las bajas se refiere a
uretra y vejiga; en cambio las altas a los uréteres y riñones. Esta división se expresa muy bien en la
sintomatología de la infección urinaria, siendo de tipo local (uretritis o cistitis) en las bajas, y de
tipo sistémico (fiebre, dolor lumbar o compromiso general) en las altas. En ambos casos el aspecto
de la orina cambia, tornándose turbia y mal oliente, y al microscopio observamos la presencia de
leucocitos (piuria) y la de bacterias (bacteriuria).

El mecanismo de la infección urinaria, en la gran mayoría de casos, es ascendente, a partir

del meato urinario las bacterias llegan a la vejiga, pudiendo ascender posteriormente a las zonas
altas. Situaciones que contribuyan al éxtasis urinario o disminuyan el flujo normal de la orina al
momento de la micción, como: embarazo, adenoma prostático, cálculos, alteraciones congénitas
de uréteres o vejiga, permitirán que las bacterias que llegan a la orina se reproduzcan. Así mismo,
a los pacientes que por diversas razones se les practicó un sondaje vesical, o presentan prolapso
vaginal o uretral, son proclives en adquirir infección de las vías urinarias. La infección del tracto
urinario por vía descendente es consecuencia de una bacteriemia sufrida por el paciente.

B.ESTUDIO

Para el estudio de la orina debemos tener en cuenta que la orina normalmente es estéril,
cuando es miccionada se contamina con flora bacteriana de la porción externa de la uretra y de los
genitales. Hay tres formas para tomar una muestra de orina para cultivo: a) orina miccionada, para
ello es indispensable hacer, previamente, higiene de los genitales externos con agua y jabón,
empezar a miccionar y colectar la orina intermedia (no la inicial), b) pacientes con sonda, se debe
punzar la sonda en la zona diseñada para ello y aspirar, y c) punción suprapúbica, realizable en
lactantes que tienen infección en los genitales externos, que dificultan la desinfección externa. La
muestra debe ser procesada de inmediato, de no ser posible, refrigerarla por un tiempo menor a
dos horas.

La observación microscópica del sedimento de la orina es de capital importancia, ya que

nos permite detectar si la muestra fue mal obtenida (presencia de células epiteliales, levaduras,
etc), y si hay respuesta inflamatoria (piuria). La presencia de gérmenes en un frotis, a partir de
una gota de orina sin centrifugar coloreado con Gram, permite predecir infección urinaria.

Los cultivos cuantitativos son útiles, porque sobre todo, en el proceso de diluciones se
eliminan las bacterias contaminantes; no debe utilizarse con la finalidad de conocer el número de
bacterias presentes. Se ha establecido que: cuentas inferiores a 10,000 bacterias/mL., lo más
probable es que sean contaminantes; cuentas superiores a 100,000 bacterias/mL. es considerada

180
como una infección real; y las cuentas intermedias deben evaluarse de acuerdo al cuadro clínico o
repetir el estudio. Siempre se debe correlacionar los hallazgos con el cuadro clínico del paciente.

C.AGENTES CAUSALES

Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae
Proteus mirábilis
Enterococo
Staphylococcus saprophyticus
Adenovirus

En pacientes con factores de riesgo:

Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa,
Otras enterobacterias,
Streptococcus beta hemolítico grupo B
Bacilos Gram negativos no fermentadores
Enterococo
Cándida albicans
Staphylococcus epidermidis
Corynebacterium

181
 CAPÍTULO 38
INFECCIONES DEL SISTEMA NERVIOSO
_______________________________________________________________
A.INTRODUCCIÓN

La vía sanguínea es la principal ruta por donde los microorganismos llegan al espacio
subaracnoideo y ventrículos del sistema nervioso. Otra manera de llegar es por vecindad, debido a
la presencia de fisuras producidas por accidentes o traumas quirúrgicos, estableciendo
comunicación con el oído o las fosas nasales. Por último, la presencia de catéter de drenaje del
líquido ventricular, es un riesgo de infección.

El compromiso del sistema nervioso por microorganismos puede tener tres dimensiones:
a) meningitis, b) encefalitis, y c) abscesos. La inflamación de las meninges es muy frecuente en
procesos infecciosos, algunas veces sólo por acción irritativa de las toxinas bacterianas; otras, por
acción directa de las bacterias. La formación de un absceso dentro del tejido cerebral implica la
existencia de un foco infeccioso a distancia, origen de la diseminación microbiana.

La mayoría de virus pueden provocar enfermedad del sistema nervioso central (SNC), pero
sólo algunas especies tienen neurotropismo definido (Herpes y rabia); los otros llegan luego de la
invasión sanguínea (viremia) y por localización en el endotelio vascular (poliovirus, parotiditis). La
respuesta inflamatoria a la infección viral es discreta con la presencia de escasos linfocitos e
incremento de globulinas en el LCR, denominándole meningitis aséptica. Posteriormente se
observará la aparición de la inmuno globulina tipo M.

Las bacterias para llegar al tejido nervioso deben atravesar la barrera hematoencefálica,
siendo S. neumoníae, Haemophylus influenzae y Neisseria meningitidis, las que producen el 80%
de meningitis bacterianas. El huésped responde con incremento marcado de polinucleares que
enturbia el LCR, así como de proteínas, designándole como meningitis séptica.

Mención aparte requiere la meningitis tuberculosa, que en su mayoría es expresión de un

foco a distancia o por diseminación miliar. La sospecha diagnóstica se establece por la lentitud en
la evolución de los síntomas y el entorno epidemiológico.

B.ESTUDIO

La muestra para el estudio, evidentemente, es el LCR, el cual debe ser procesado con el
máximo cuidado y con orientación al diagnóstico clínico:

a) Examen microscópico: en fresco con tina china para buscar la presencia de esporas de C.
neoformans. El contaje de los leucocitos presentes y la coloración de Gram nos aportan
información importante, puesto que como es un líquido estéril, cualquier nivel de
pleocitosis, como la presencia de microorganismo deben ser considerados.
b) El cultivo debe realizarse de inmediato en medios enriquecidos

182
 c) Investigar la presencia de antígenos bacterianos (Haemophilus), utilizando métodos
inmunológicos (Látex, ELISA)
d) Un alícuota del LCR debe ser conservada en refrigeración para estudios relacionados con
los virus, sea con métodos inmunológicos o moleculares.

C.AGENTES CAUSALES

Recién Nacidos Niños/Escolares Adultos

Streptococcus agalctiae (B) S. neumoniae S. neumoniae

Escherichia coli
Listeria monocytogena
Enterovirus M. tuberculosis
Virus parotiditis Cryptococcus n.
Haemophylus influenzae Virus del Herpes simple
M. tuberculosis
Neisseria meningitidis
Virus del Herpes simple

En pacientes con catéteres o trauma quirúrgico: Staphylococcus coagulasa negativa

Pseudomonas aeruginosa

Infecciones virales:

1. Agudas y de acción viral directa: Enterovirus, Parotiditis, Poliovirus, V. Epstein Baar,

Citomegalovirus,V. Herpes, V. Rabia, HTLV-1

2. Agudas por acción viral indirecta: Sarampión, Rubeola, Parotiditis, Varicela,

Vacunaciones para Rabia, Influenza, Adenovirus

3. Crónicas de evolución letal: Sarampión, Rubeola, Papovavirus (leucoencefalitis)

Priones.

183
 CAPÍTULO 39
INFECCIONES DE TRANSMISIÓN SEXUAL

A.INTRODUCCIÓN

Los microorganismos causantes de infecciones que se transmiten sexualmente son

agentes lábiles al medio ambiente, por lo que requieren la inoculación directa en la mucosa o piel
lesionada del paciente receptor. Este grupo de infecciones son consecuencia de la conducta
humana, y la originan un grupo diverso de microorganismos que ocasionan lesiones en el sitio de
la inoculación, pudiendo éstas ser exudativas, ulcerativas o verrucosas.

Cuando se atiende a un paciente que presenta una enfermedad de transmisión sexual, es

recomendable investigar las dos infecciones en las que muchas veces el paciente no refiere
antecedentes sexuales o no se aprecian los signos iniciales del contagio, nos referimos a sífilis y
sida.

B.ESTUDIO

En la fase inicial de la enfermedad con las lesiones dérmicas presentes, los exámenes
microscópicos son muy importantes para el diagnóstico. El frotis de la secreción o exudado,
coloreado con Gram, permitirá observar la bacteria causante (N. gonorrhoeae o H.ducreyi). A toda
lesión ulcerosa en los genitales, se le debe tomar muestra para examen en fresco (lámina y
laminilla) y observarla en microscopio con campo oscuro (Treponema pallidum). Estos estudios se
realizan en la cabecera del enfermo.

El agente causal de una enfermedad de transmisión sexual se encuentra en las secreciones

y lesiones dérmicas, por lo tanto, debemos utilizar la tecnología que mejor contribuya a
evidenciar el agente etiológico. Existe en el mercado “kits” para detectar la presencia del antígeno
microbiano, pudiendo ser: inmuno cromatografía, Inmuno fluorescencia o enzima inmuno ensayo,
para: Chlamydia trachomatis, Herpes simple o Papiloma virus.

Con excepción del T. pallidum, que no cultiva in vitro, algunas bacterias como N.
gonorrhoeae, H. ducreii, pueden ser cultivadas, aunque requieren medios de cultivo apropiados.
Otros agentes como la Chlamydia y los virus, requieren de cultivos celulares para su desarrollo,
luego sólo se realizan en laboratorios especializados. Las técnicas moleculares son empleadas,
sobre todo, para el diagnóstico de infecciones por C. trachomatis, Herpes simple o Papiloma.

La respuesta inmune humoral (serología), en la mayoría de estas infecciones es escasa,

debido al cuadro clínico agudo. En cambio, en los procesos con compromiso sistémico, como la
prodcuida por T. pallidum, la serología es muy útil para el diagnóstico y evolución de la
enfermedad, para lo cual hay procedimientos rápidos (RPR, VDRL), muy sensibles, pero no
específicos; válidos como “screening” y como marcadores en la evolución de la enfermedad.

184
C.AGENTES CAUSALES

1. Con lesiones exudativas o purulentas:

Neisseria. gonorrhoeae
Chlamydia trachomatis

2. Con lesiones vesiculares o ulcerosas:

Herpes simple,
Haemophylus ducreyi,
Treponema pallidum,
Chlamydia L1,L2,L3. Linfogranuloma venéreo,
Klebsiella granulomatis. Granuloma inguinal

3. Con lesiones verrucosas:

Papiloma virus
Treponema pallidum

4. Otros agentes:
Hepatitis B
Citomegalovirus
Virus de inmunodeficiencia humana

185
 CAPÍTULO 40
INFECCIONES SISTÉMICAS
_______________________________________________________________
A.INTRODUCCIÓN

El término bacteriemia, viremia o fungemia, se refiere al paso de microorganismo por la

sangre. En cambio, la expresión septicemia incluye evidencia clínica sistémica de respuesta del
huésped al microorganismo, expresado por: fiebre (más de 38°C) o hipotermia (menos de 36°C),
taquicardia (más de 90 ppm), taquipnea (más de 20 rpm), hipocápnea (CO2 menor de 32 mmHg),
leucocitosis (superior a 12,000 pmmc) o leucopenia (inferior a 4,000 pmmc), neutrófilos
abastonados (más del 10%), o signos clínicos de shock séptico (hipotermia, oliguria, acidosis
metabólica o coagulación intravascular diseminada).

Para que un paciente presente un cuadro clínico de sepsis, debe tener un foco infeccioso
de inicio. La evidencia de este foco es muy importante, porque permite la orientación terapeútica.
Algunas veces, es difícil determinar la fuente de la infección, como en los casos de: absceso
abdominal, presencia de catéter endovascular, pacientes con cirrosis o inmuno deficiencia, donde
generalmente los microorganismos provienen de la luz intestinal.

El cuadro clínico de bacteriemia o sepsis, es algunas veces un estadío de la infección, como

en los casos de fiebre tifoidea y brucelosis. En cambio, en otros procesos infecciosos las bacterias
salen del foco principal al torrente sanguíneo, como en la meningitis por meningococo, neumonía
por neumococo y osteomielitis por estafilococo.

B.ESTUDIO

El examen directo de la sangre sólo es útil en casos específicos, como en infecciones por
Bartonella bacilliformis (fiebre de la Oroya) y Borrelia recurrentis (fiebre recurrente), en las que se
puede observar, en los frotices coloreados con Wright, al microorganismo dentro de los hematíes
(bartonella) o dispersas en el frotis (borrelias).

Por lo demás, el diagnóstico se establece mediante el cultivo de la sangre o hemocultivo.

Para lo cual el medio de cultivo más adecuado es el “caldo tripticase soya” con anticoagulante
polianetol sulfonato de sodio. Si la sospecha diagnóstica es Brucella sp, el medio recomendado es
el de “Ruiz Castañeda”

La muestra de sangre no debe ser superior al 10% del volumen del medio de cultivo
empleado, y debe obtenerse en condiciones de asepsia. Es aconsejable obtener dos muestras
sucesivas de sangre, con intervalo de 5 a 10 minutos, con la finalidad de confirmar el diagnóstico
en caso se aíslen bacterias colonizantes de la piel. En pacientes con sospecha de endocarditis
deben tomarse tres hemocultivos en el curso de 24 horas.

186
 El seguimiento del hemocultivo debe ser diario, hasta por siete días. En caso de ausencia
de turbidez, deben hacerse subcultivos ciegos a los dos y cinco días de incubación. Cuando se
sospecha en Brucella, Bartonella u Hongos dimórficos, los cultivos deben observarse hasta los 30
días. Hay procedimientos en los que el seguimiento del hemocultivo se basa en la presencia de
CO2, el que se mide sea por el cambio del pH o detectable por radioactividad.

Se puede determinar la presencia de antígenos microbianos en la sangre, en especial

cuando se sospecha en infección por virus de la Hepatitis, Criptococo o Citomegalovirus. El uso de
técnicas de biología molelcular (PCR), se emplean en infecciones por Citomegalovirus, Epstein
Baar, Hepatitis B y Mycobacterium tuberculosis.

C.AGENTES CAUSALES

Frecuentes Poco frecuentes Infrecuente

Enterobacterias (E.coli) Acinetobacter baumannii Criptococcus n

Neumococo Streptococcus viridans Leptospira sp
Staphylococcus coagulasa negativa Cándida sp Histoplasma c
Salmonella enteritidis Bacteroides fragilis| Borrelia r.
Salmonella typhi Corynebacterias
Pseudomonas aeruginosa Clostridium sp
Staphylococcus aureus Enterococcus
Brucellla sp
Neisseria meningitidis

187
 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Microbiología Médica. Octava edición
Patrick Murray
Elsevier, 2017 España
2. Microbiología Médica. Diecinueveava edición en español
Jawets, Melnick y Adelberg
El Manual Moderno, 2008
3. Microbiología Humana. Quinta edición
Nester, Anderson, Roberts y Nester
El Manual Moderno, 2007
4. Microbiología Médica. Segunda edición
Mims * Playfair * Roit * Wakelin * Williams
Mosby, 1999
5. Virología Humana. Tercera edición
Leslie Collier y John Oxford
Ed.McGraw-Hill, 2006
6. Virus. Estudio Molecular con Orientación Clínica
Shors, Teri
Editorial Médica Panamericana, 2009
7. Micología Médica Básica
Alexandro Bonifaz
Ed.McGraw-Hill. Tercera edición, 2010
8. Brock. Biología de los microorganismos
Michael T. Medigan; John M. Martinko; Paul V. Dunlap; David P. Clark
Pearson Educación SA. Duodécima edición, 2009

188
 MANUAL
DE MICROBIOLOGÍA
PARA ESTUDIANTES
DE MEDICINA

Profesor
Nicanor Domínguez Navarrete

Universidad Ricardo Palma

Facultad de Medicina
2018

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