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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

GUÍA DE LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA


PRÁCTICA No. 5
(OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE ACEITES ESENCIALES)

1. DATOS GENERALES:
NOMBRES:
Grupo #:
Fecha de realización:
Fecha de entrega:

2. OBJETIVO:

Obtener y caracterizar los aceites esenciales presentes en una droga vegetal

3. METODOLOGÍA:

Se arma el equipo de extracción de aceites esenciales, lo cual se realiza por dos métodos que son:
1) destilación normal y 2) por arrastre de vapor.
Se coloca el material vegetal en un matraz de destilación con suficiente agua, se somete a ebullición
durante 2 horas. Si el destilado está emulsionado, se coloca en un embudo de separación y se deja
en reposo hasta que se separen las dos fases.
Del agua sobrante, se realizan 3 extracciones con hexano con la finalidad de extraer todo el aceite
que se encuentra en la parte acuosa. La fase orgánica se deja en un Erlenmeyer con sulfato de sodio
al menos durante 3 horas para eliminar la humedad.
Finalmente se evapora el solvente utilizado con rotaevaporador a temperatura ambiente y se
realizan análisis en el espectro infrarrojo IR.

A. DETERMINACIÓN DE LA SOLUBILIDAD EN ALCOHOL.

Se dice que el aceite esencial es soluble en N volúmenes (20 como máximo) de alcohol etílico de
determinada graduación, si el volumen mínimo de alcohol adicionado para obtener una
solución límpida es N veces el volumen de aceite esencial.

Procedimiento.

Medir con pipeta 0,5 mL de aceite esencial previamente enfriado a 20 oC, el cual se lleva a un
vaso de 10 mL. Por medio de una bureta se añade el alcohol de la graduación a ensayar gota a
gota al aceite esencial, agitando con frecuencia. Cuando se obtiene una solución límpida, se
registra el volumen consumido.
Expresión de los resultados.

Se informa que el aceite esencial es soluble en N volúmenes de alcohol de la graduación -


ensayada, con aproximación de los valores hasta las décimas.

5. EQUIPOS Y MATERIALES:

 Balanza analítica.
 Reverbero
 Balón o matraz de destilación.
 Aparato para la determinación de aceite esencial.
 Pesa filtro
 de 25 mL.
 Baño de agua termostatado.
 Pipeta de 1 mL.
 Bureta de 25 mL.
 Sulfato de sodio.
 Éter etílico.
 Soln. de NaCl 1% m/v.
 Etanol absoluto (el cual se lleva a diluciones de 70, 80 y 90%

MÉTODO 2
Prensado en frío
Los aceites esenciales de cítricos obtenidos por prensado tienen características odoríferas
superiores a los obtenidos por cualquier método de destilación. Esto es debido a la ausencia de
calor durante el procesado y a la presencia de componentes que no serían volátiles en el vapor.
Son también más estables a la oxidación, ya que contienen sustancias antioxidantes naturales,
como tocoferoles, las cuales no son volátiles en el vapor. La ausencia de daño térmico en el
aceite es significativa.

TÉCNICA
1. Los aceites obtenidos por prensado en frío, se extraen del pericarpio de la piel del cítrico,
raspando la cáscara limpia con un rallador de cocina. Este proceso involucra la abrasión
de la piel.
2. Luego de la ralladura se exprime, se extrae el aceite y a la cáscara exprimida se le agrega
poca agua para lavarlo de la piel formando un líquido viscoso (el uso de una cantidad
excesiva de agua puede arrastrar material de la cáscara a la solución, el cual puede
absorber importantes constituyentes, tales como aldehídos, los cuales son removidos
luego con la piel).
3. Luego la piel es lavada con agua y el líquido es llevado a un prensado final que separa el
aceite de los restos de piel.
4. La solución de aceite se centrífuga a (8000-10000 rpm) para separar la parte viscosa en
una emulsión rica en aceite, una solución acuosa y un material lodoso semisólido.
5. La porción lodosa a menudo se descarta, pero la acuosa puede filtrarse y retornar al
6. lavado de la cáscara para la obtención de más aceite. Así, reciclando el agua, se van
recuperando las pequeñas porciones de aceite que ésta pudiera arrastrar.
7. Se recupera la fase superior que es la que contiene el aceite esencial y se lo separa con
una pipeta pasteur.
8. Al aceite obtenido se le realiza las siguientes pruebas de control de calidad
Índice de refracción
Densidad
Espectro infrarrojo
Pruebas organolépticas
Cromatografía en capa delgada

2. Cromatografía en capa fina de aceite esencial

Extraiga 1 g de manzanilla triturada con 5 mL de diclorometano, agite durante 10 minutos.


Filtre el extracto.

Realice una cromatografía en capa fina orientada a la detección de


sesquiterpenos, empleando como adsorbente gel de sílice G y como fase móvil hexano:
acetato de etilo (80:20).
Revele la placa con vainillina/ácido sulfúrico . Para ello, (i) rocíe la placa con el reactivo
de vainillina etanólica al 1% e inmediatamente rocíe con ácido sulfúrico etanólico al 10% y
p-anisaldehído sulfúrico.
Seque el cromatofolio y caliente a 110°C hasta ver coloración.

Resultados esperados: los componentes a c t iv o s de la esencia pertenecen a la clase de


los sesquiterpenos cíclicos: chamazuleno (1-15 %) (-).α-bisabolol (10 – 25%), óxidos de
bisabolol A y B (10 – 25%), poliinos (cis-trans-en-in-dicicloéter (1– 40 %). Compare
sembrando su muestra con un extracto patrón de manzanilla y las c.c.f. del Plant Drug
Analysis.

MÉTODO 3
OLEATO

Colocar 100g de (flores) planta aromática en una olla de acero y verter aceite
vegetal (palma, girasol) 250 mL. Dejar a Baño de María por dos horas con la
olla tapada, cernir, dejar enfriar
Extraer el aceite en un embudo de separación utilizando pequeñas alícuotas de
alcohol al 96%
Evaluar el aroma y la capacidad de extracción del alcohol

Realizar IR

5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN:

 Porcentaje de aceites esenciales en la fase hidratada


 Porcentaje de aceites esenciales en la fase anhidra
 Determinación de la solubilidad en alcohol.
 Índice de refracción
 Densidad relativa

7. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:

Describir en forma lógica las conclusiones a que conlleven la práctica (en relación a los
objetivos) y las recomendaciones (como superar una dificultad) que sean pertinentes.

8. BIBLIOGRAFÍA:

Citar la fuente bibliográfica general, específica que sustentan la práctica con bibliografía
existente en bibliotecas y debidamente actualizada. (EN RELACIÓN A LAS NORMATIVAS APA)

CUESTIONARIO
1. Consulte cuántos métodos se conocen para la extracción de aceites esenciales
2. Cuáles son las principales estructuras de los compuestos presentes en los aceites esenciales
extraídos.
3. Qué función desempeñan en los vegetales.
4. Que bioactividad poseen
5. Interprete los resultados de análisis IR

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