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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA


LABORATORIO CLÍNÍCO E HISTOPATOLÓGICO

GUÍA DE PRÁCTICA DE BIOLOGÍA CELULAR

GUÍA DE PRÁCTICA N° 1
NOMBRE DEL DOCENTE PhD. Liliana M. Araujo Baptista FECHA:
1. 18.
2. 19.
3. 20.
4. 21.
5. 22.
6. 23.
7. 24.
SEGUNDO SEMESTRE 8. 25.
NOMBRE DE LOS ALUMNOS 9. 26.
PARTICIPANTES. 10. 27.
11. 28.
12. 29.
13. 30.
14. 31.
15. 32.
16. 33.
17. 34.
LUGAR DE LA PRÁCTICA LABORATORIO CLÍNICO
TITULO DE LA PRACTICA: Laboratorio: Instrumental y Bioseguridad
OBJETIVO DIDÁCTICO
Dar a conocer las normas de obligatorio cumplimiento y de bioseguridad, proveer de los conocimientos
necesarios para el correcto manejo de reactivos, materiales y equipos, así como adquirir habilidades y
destrezas para el fortalecimiento en el uso materiales orientados al estudio de la biología celular.
INTRODUCCIÓN
El trabajo en el Laboratorio requiere de la observación de una serie de normas institucionales de trabajo y de
seguridad que eviten posibles accidentes debido al desconocimiento de lo que se está haciendo o a una
posible negligencia de los alumnos que estén en un momento dado, trabajando en el Laboratorio.
La bioseguridad son las normas que se deben tener en cuenta para preservar la vida y la integridad física
dentro de un área específica de trabajo, en este caso el Laboratorio de Biología.
El laboratorio es un lugar de trabajo en el que se realizan los experimentos diseñados previamente para
contrastar una hipótesis por medio de resultados observables cualitativamente o cuantitativamente. Es por
ello, que debe ser un lugar agradable que invite a pensar y reflexionar sobre el problema por resolver o por
observar, y para ésto, debemos mantenerlo limpio, cuidar los instrumentos y colocar cada cosa en su lugar, así
como mantener y poner en práctica las medidas de seguridad personal, tales como el uso de la bata de
laboratorio.
OBJETIVO GENERAL:
Conocer los lineamientos básicos de organización, instrumental y seguridad en el laboratorio sea de análisis
clínico o de investigación.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
-Conocer las normas institucionales de trabajo en el laboratorio
-Comprender la importancia de manipular correctamente los materiales, equipos y reactivos del laboratorio
-Adquirir habilidades y destrezas para el fortalecimiento en el uso materiales orientados al estudio de
la biología celular
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FUNDAMENTACIÓN
Los avances en la investigación biológica abren nuevos caminos a la enseñanza y la comprensión de
las ciencias biológicas que representan un gran reto, con nuevos desafos. Estos cambios y
nuevos
conocimientos de la biología nos han dado la oportunidad de brindar nuestro esfuerzo por presentar
una serie de trabajos de laboratorios sencillos, fáciles de realizar, dinámicos y de bajo costo que se
adaptan a los tiempos de hoy.
1. ORGANIZACIÓN:
Generalmente los laboratorios funcionan de acuerdo a las actividades que han de realizar, se deben
considerar áreas, estructura y diseño interior, considerando lo siguiente:
Mesas de trabajo y repisa sobre la mesa
Mesa para instrumentales (balanza, microscopio, pHmetro, etc.)
Armarios para reactivos y material de vidrio
Extractor de gases.
2. SECCIONES:
Cada laboratorio puede presentar una o varias secciones dependiendo de la naturaleza de
la actividad. En forma general el laboratorio debe contar áreas fsicas o secciones:
Toma de muestra
Separación y clasifcación de muestras
Lavado y esterilización
Almacén
Sala de trabajo
3. MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO:
Tubos de ensayo
Placas de Petri
Pipetas
Matraces (Erlenmeyer, Fiolas)
Probetas
Beaker (vasos de precipitación)
Pipetas (graduadas y volumétricas)
Mecheros de Bunsen y de alcohol
Asas de Kolle
Balanza analítica
Estufa o incubadora
Hornos
Autoclave
Espectrofotómetros o colorímetros
pH metros y otros
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4. NORMAS DE TRABAJO EN EL LABORATORIO


4.1. NORMAS PERSONALES
1. Lea con atención, antes de cada práctica, las indicaciones de su guía. Siga todas las instrucciones
a menos que el profesor realice alguna modifcación.
2. No trabaje solo en el laboratorio o sin autorización.
3. Cada grupo de prácticas se responsabilizará de su zona de trabajo y de su material. Se trabajará
con cuidado y de manera organizada. Así mismo se mantendrá cada mesa de trabajo limpia, seca
y ordenada.
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4. Es obligatoria la utilización de mandil que le cubra brazos, piernas y torso. Están prohibidos el uso
de sandalias, pantalones cortos, faldas, polos cortos, etc. en el laboratorio. La persona
inapropiadamente vestida para trabajar en el laboratorio no podrá ingresar.
5. Mantener el cabello recogido.
6. No se debe llevar las manos a la boca ni a la cara pues pueden estar contaminadas. No manipular
los lentes de contacto.
7. Está terminantemente prohibido fumar, tomar bebidas y comer.
8. Si posee alguna condición médica especial comunicarlo al docente, como embarazo, alergias,
enfermedades respiratorias etc.
9. No realizar tareas de otras asignaturas.
10. No escuchar música con audífonos.
11. Permanecer en todo momento en el laboratorio, una vez iniciada la práctica no se permitirá la
entrada o salida de los estudiantes, sin previa autorización del docente.
12. Lleve los materiales exigidos para la realización de la práctica, sin éstos no podrá ingresar
al laboratorio.
13. En caso de derrame, accidente o daño avise inmediatamente al profesor.
14. Al término de cada práctica limpiar el área de trabajo y lavar los materiales utilizados con agua
de grifo. Lavarse las manos meticulosamente con agua y jabón.
4.2. DE LAS ÁREAS DEL LABORATORIO
1. En el laboratorio hay áreas exclusivas para trabajar con parásitos y animales infectados y áreas
para labores rutinarias. NUNCA TRABAJE LOS PARÁSITOS Y ANIMALES INFECTADOS FUERA DE LAS
ÁREAS ESTABLECIDAS. Utilice en las áreas contaminantes papel para delimitar el área de trabajo y
límpiela cuidadosamente una vez fnalizada su experiencia.
2. NO TRANSITE CON MATERIAL CONTAMINANTE A TRAVES DEL LABORATORIO. TRATE DE
MANTENER TODO EL EQUIPO Y EL MATERIAL NECESARIO EN EL AREA DE TRABAJO ANTES DE
COMENZAR.
3. NO CONSUMA ALIMENTOS, BEBIDAS, NI FUME dentro de las áreas del laboratorio. Recuerde que
cualquier alimento o bebida dentro del laboratorio pudiera contaminarse o contaminar el área
poniendo en peligro su salud.
4. Conozca la ubicación de extinguidores, botiquín y duchas.
5. Si tiene visitas, atiéndalas fuera del laboratorio. De esta manera no interrumpe las labores
de otras personas que trabajan en el mismo.
6. Finalmente cerciorarse que las llaves de gas y agua estén cerradas.
4.3. MANIPULACIÓN DE ESPECÍMENES
1. Manipule los microorganismos crecidos en una placa Petri o tubo de cultivo con cuidado extremo.
Siempre utilice técnicas de esterilidad (a la llama del mechero, guantes, palillos estériles, etc.).
2. En caso de trabajar con plantas nunca llevar a la boca el material vegetal o parte de él, como
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semillas, frutos y hojas.


4.4. REACTIVOS
1. Los reactivos del laboratorio deben permanecer en su lugar respectivo. Si necesita de un reactivo
tome la cantidad que necesite del envase SIN INTRODUCIR SUSTANCIAS O UTILIZAR LAS
ESPÁTULAS, QUE NO HAYAN SIDO PREVIAMENTE LIMPIADAS, DENTRO DEL MISMO. Al finalizar
coloque el envase en su sitio respectivo. NO DEVUELVA MATERIAL QUE HA SIDO SACADO DEL
ENVASE AL MISMO, SI NO ESTÁ SEGURO DE QUE NO SE ENCUENTRA CONTAMINADO O
MEZCLADO CON OTRAS SUSTANCIAS.
2. En el caso de que se acabe un reactivo, repórtelo inmediatamente para solicitarlo.
3. Los reactivos en la nevera deben ser sacados, utilizados inmediatamente y retornados a la misma
en el menor tiempo posible. En el caso de los reactivos almacenados a -20 ºC, espere que el
frasco alcance la temperatura ambiente antes de abrir y pesar la cantidad requerida.
4. No guarde reactivos ni soluciones en matraces aforados u otro material de vidrio de uso cotidiano
en el laboratorio como es el caso de cilindros, matraces, etc. Guarde sus reactivos en botellas.
5. Usar lentes de seguridad cuando trabaje con reactivos químicos peligrosos que puedan salpicar o
derramarse.
6. Antes de utilizar un compuesto, asegurarse bien de su necesidad y fjarse bien en el rótulo.
7. Como regla general, no coger ningún producto químico, hasta tanto no se lo indique su profesor.
8. Nunca devuelva los sobrantes de los productos a los frascos de origen sin consultar con el
profesor.
9. No tocar con las manos y menos con la boca, los productos químicos.
10. No pipetear con la boca. Utilizar una bombilla de succión.
11. En el área de trabajo solo deben permanecer los materiales y reactivos de la práctica.
12. Los productos inflamables (gases, alcohol, éter, etc.) deben estar lejos de fuentes de
calor, nunca se deben manipular cerca de la llama del mechero. Si hay que calentar tubos con
estos productos, se hará al baño María, nunca directamente a la llama. Sofoque cualquier
principio de incendio con un trapo mojado.
13. Manipule con precaución los solventes volátiles e infamables como el éter, acetona y metanol.
Nunca evapore estos solventes en una hornilla al abierto. Utilice siempre un sistema de
condensación efciente.
14. Mantenga bien tapados los recipientes que contengan sustancias infamables o corrosivas.
Recuerde consultar la fcha de bioseguridad.
15. Al preparar cualquier disolución se colocará en un frasco limpio y rotulado convenientemente.
16. Los ácidos requieren un cuidado especial. Al preparar soluciones de ácidos concentrados,
siempre echaremos el ácido sobre agua vertiendo lentamente y agitando el ácido sobre el agua,
nunca lo contrario para evitar salpicaduras que causen quemaduras.
17. No mezcle ácido concentrado con base concentrada, la reacción es fuertemente exotérmica y
peligrosa, las sustancias cáusticas causan daños en la piel, no las manipule directamente, haga
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uso de espátulas y pinzas. Recuerde consultar la fcha de bioseguridad.


18. Si se vierte encima cualquier ácido o producto corrosivo, lávese inmediatamente con mucha
agua y avise al profesor.
4.5. PRIMEROS AUXILIOS EN EL LABORATORIO
Siempre que alguien realiza una práctica o un experimento está expuesto a sufrir un accidente
a pesar de que se tomen todas las precauciones. Los accidentes más comunes en el laboratorio son
quemaduras, pinchazos, cortadas con vidrio, derrame de ácidos u otras sustancias corrosivas,
contaminación con reactivos, líquidos biológicos y microorganismos. Las siguientes recomendaciones
podrían serle de gran ayuda ante un posible accidente:
- Quemaduras pequeñas: Lave la parte afectada con una gasa húmeda. Luego aplique una crema
para quemaduras o vaselina y coloque una venda.
- Quemaduras extensas: Estas requieren tratamiento médico inmediato. Mientras tanto mantenga
en reposo al paciente.
- Reactivos en los ojos: lave el ojo con abundante agua en el lava ojos, pero nunca toque los ojos. Si
después del lavado persiste el malestar, consulte al médico.
- Reactivos en la piel:
Ácidos: Lave la parte afectada con abundante agua y luego manténgala durante un tiempo en
agua. Aplique vaselina y coloque una venda.
Álcalis: Proceda de igual forma que el paso anterior; pero reemplace la vaselina por ácido bórico.
Bromo: lave la parte afectada con abundante agua, cúbrala con una gasa humedecida con una
solución de tiosulfato de sodio al 10 %. Aplique vaselina.
Fenol: Lave la parte afectada con abundante agua, aplique vaselina o ácido bórico y una venda.
- Cortadas pequeñas: lave la herida con agua y una gasa estéril, aplique una solución yodada para
prevenir una infección. Deje secar y coloque una venda.
4.6. TRATAMIENTOS DE LOS REACTIVOS Y DESECHOS
1. Es muy importante que cuando los productos químicos de desecho se viertan en la pila de
desagüe, aunque estén debidamente neutralizados, debe dejarse que circule por la misma,
abundante agua.
2. Clasifque las basuras y desechos así: la funda roja para material biológico; la funda negra para
descartar objetos que no sean cortopunzantes (papel, plástico y material no contaminado); un
recipiente adecuado (el guardián) para descartar cualquier material que sea cortopunzante.
3. No arroje materiales sólidos (papeles, vidrios, fósforos, láminas, entre otros) a los sumideros o
vertederos.
4. Evite el desperdicio de agua, gas, energía y reactivos. Utilice únicamente la cantidad
requerida.
4.7. EQUIPOS
1. Los equipos deben ser mantenidos completamente limpios después de haber sido
utilizados.
2. Si no sabe cómo opera un equipo, solicite el catálogo de funcionamiento o que se le enseñe
a
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operarlo.
• La balanza:
- Esta debe estar completamente limpia antes de pesar cualquier sustancia y una vez utilizada debe
tener cuidado de mantenerla en condiciones excelentes de limpieza. NUNCA QUITE DE LA
BALANZA LA SUSTANCIA PESADA SI ANTES LA BALANZA NO HA SIDO APAGADA. No deje derramar
líquidos o sustancias corrosivas sobre la balanza.
- Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza, se colocará papel sobre los
platos de la misma y si el producto fuera corrosivo, se utilizará una luna de reloj.
- Se debe evitar cualquier perturbación que conduzca a un error, como vibraciones debidas a
golpes, aparatos en funcionamiento, soplar sobre los platos de la balanza, etc.
• Las centrífugas:
- Los rotores y tubos de centrífuga deben ser lavados con agua destilada después de su uso. No
utilice solventes orgánicos en los tubos de centrífuga para lavarlos o realizar centrifugaciones si
antes no ha consultado la resistencia del tipo de tubo a dicho solvente.
- Chequee la velocidad máxima permitida para el rotor que va a utilizar. Así mismo, chequee el
modelo de centrífuga en el cual es posible utilizar el rotor.
• El espectrómetro:
- Estos equipos son muy delicados por lo cual es conveniente leer las instrucciones de uso antes de
ser utilizados.
4.8. EQUIPOS ELÉCTRICOS
1. Todo equipo o instrumental debe estar ubicado en una zona de poco tránsito, alta iluminación y
en una mesa sólida. Para el manejo de los mismos se debe tener conocimiento de la
manipulación debiéndose contar con el manual respectivo. Antes de comenzar a operar un
equipo verifcar el voltaje, resistencia y amperaje del equipo.
2. Manipule cualquier equipo eléctrico con las manos secas y asegúrese que el área de trabajo
también este seca.
3. Ningún cordón eléctrico debe colgar fuera de la mesa de
trabajo.
4. Terminado el trabajo el instrumental debe quedar limpio, apagado y desconectado del
tomacorriente. Anotar en el cuaderno de control la fecha, hora de inicio y término de uso del
equipo
4.9. USO DEL MATERIAL VOLUMÉTRICO
Este tipo de material debe ser manejado con cuidado si se desea obtener precisión. Todo el
material volumétrico es sensible a la temperatura.
Dentro del material volumétrico más corriente se tienen: El cilindro graduado o probeta, la pipeta, la
bureta y el matraz volumétrico o balón aforado. Todos los materiales volumétricos tienen una o
varias marcas en el vidrio para medir el volumen. La curvatura formada por el líquido dentro del
material, se llama menisco y para la mayoría de los líquidos es cóncavo. Para leer el volumen, se
coloca el material sobre una superfcie plana y el ojo se debe colocar al mismo nivel que la base del
menisco.
- Pipetas: se emplean para transferir un volumen fjo de líquido con una precisión de más o menos
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0.01 mL.
- Buretas: se emplean para medir a descargar un volumen variable de líquido con mayor precisión
que la obtenida con una probeta de capacidad similar. Cada vez que se va a utilizar la bureta, se
debe verifcar que se encuentre limpia y previamente purgada (llenar un poco la bureta con el
líquido que se vaya a usar). Coloque la bureta en posición vertical y asegúrese que la llave no
gotea, si es necesario ajuste la llave. Observe la parte fnal de la bureta y asegúrese que no
queden burbujas, si las hay abra y cierre la llave de la bureta rápidamente hasta que no haya
burbujas.
- Balones aforados: éstos se encuentran calibrados para contener un volumen establecido de
líquido cuando el fondo del menisco del líquido coincide exactamente con la marca de
calibración. Los balones aforados se emplean para preparar soluciones de concentración.
4.10. MATERIAL DE VIDRIO FUNGIBLE
1. El material de vidrio y los fungibles deben ser colocados en su sitio después de haber sido
utilizados. Lave el material de vidrio cuidadosamente y enjuáguelo al menos tres veces con agua
destilada.
2. Si utilizó material de vidrio con sustancias u organismos contaminantes, debe ASEGURARSE DE
LAVARLO PREVIAMENTE CON CLORO o con hipoclorito de sodio u otro producto desinfectante
antes de colocarlo en el fregadero. Trate de utilizar guantes al lavar el material.
3. No utilice material de vidrio roto y cuando se rompa algún material, sepárelo del resto y
repórtelo.
4. El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio frío. Para evitar quemaduras use
guantes o trapos.
5. Si tienes que calentar a la llama el contenido de un tubo de ensayo, observa cuidadosamente
estas dos normas: -Ten sumo cuidado y cerciórate que la boca del tubo de ensayo no apunte a
ningún compañero ya que el líquido puede hervir y salir disparado, por lo que podrías ocasionar
un accidente. -Calienta por la pared lateral del tubo de ensayo, nunca por el fondo; agita
suavemente.
4.11. PICTOGRAMAS DE RIESGO
Otro elemento muy importante para la bioseguridad es reconocer los pictogramas de riesgos,
comprender sus mensajes y seguir las normas de acuerdo al código

E Explosivo Clasificación: Sustancias y preparaciones que


reaccionan exotérmicamente también sin oxígeno y
que detonan según condiciones de ensayo fjadas,
pueden explotar al calentar bajo inclusión parcial.
Precaución: Evitar el choque, Percusión, Fricción,
formación de chispas, fuego y acción del calor.
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O Comburente Clasificación:(Peróxidos orgánicos) y preparados que,


en contacto con otras sustancias, en especial con
sustancias infamables, producen reacción
fuertemente exotérmica. Precaución: Evitar todo
contacto con sustancias combustibles. Peligro de
infamación: Pueden favorecer los incendios
comenzados y difcultar su extinción.
F+ Clasificación: Líquidos con un punto de infamación
Extremadamente inferior a 0ºC y un punto de máximo de 35ºC. Gases y
inflamable mezclas de gases, que a presión normal y a
temperatura usual son infamables en el aire.
Precaución: Mantener lejos de llamas abiertas,
chispas y fuentes de calor.
F Fácilmente Clasificación: Líquidos con un punto de infamación
Inflamable inferior a 21ºC, pero que NO son altamente
infamables. Sustancias sólidas y preparaciones que
por acción breve de una fuente de infamación
pueden infamarse fácilmente y luego pueden
continuar quemándose ó permanecer
incandescentes. Precaución: Mantener lejos de
llamas abiertas, chispas y fuentes de calor.
T+ Muy Tóxico Clasificación: La inhalación y la ingestión o absorción
cutánea en MUY pequeña cantidad, pueden conducir
a daños de considerable magnitud para la salud,
posiblemente con consecuencias mortales.
Precaución: Evitar cualquier contacto con el cuerpo
humano, en caso de males inmediatamente al
médico!
T Tóxico Clasificación: La inhalación y la ingestión o absorción
cutánea en pequeña cantidad, pueden conducir a
daños para la salud de magnitud considerable,
eventualmente con consecuencias mortales.
Precaución: evitar cualquier contacto con el cuerpo
humano. En caso de malestar consultar
inmediatamente al médico. En caso de manipulación
de estas sustancias deben establecerse
procedimientos especiales!
C Corrosivo Clasificación: Sustancias y preparaciones que
reaccionan exotérmicamente también sin oxígeno y
que detonan según condiciones de ensayo fjadas,
pueden explotar al calentar bajo inclusión parcial.
Precaución: Evitar el choque, Percusión, Fricción,
formación de chispas, fuego y acción del calor.
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Xi Clasifcación: Sin ser corrosivas, pueden producir


Irritante infamaciones en caso de contacto breve, prolongado
o repetido con la piel o en mucosas. Peligro de
sensibilización en caso de contacto con la piel.
Clasifcación con R43. Precaución: Evitar el contacto
con ojos y piel; no inhalar vapores.
N Clasificación: En el caso de ser liberado en el medio
Peligro para el acuático y no acuático puede producirse un daño del
medio ambiente ecosistema por cambio del equilibrio natural,
inmediatamente o con posterioridad. Ciertas
sustancias o sus productos de transformación pueden
alterar simultáneamente diversos compartimentos.
Precaución: Según sea el potencial de peligro, no
dejar que alcancen la canalización, en el suelo o el
medio ambiente! Observar las prescripciones de
eliminación de residuos especiales.

Estos pictogramas los encontrará en etiquetas adheridas a los frascos que contienen los reactivos
con la siguiente información:

FICHA DE SEGURIDAD UTS


Nombre: _
Preparación: _
Vencimiento: _
Preparado por: _
R: _ S:

R y S son códigos signifcan: R: Riesgos específicos. S: Consejos de prudencia.

MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales:
 Mandil, gorro, guantes, lentes
 Cuaderno de anotaciones
 Vasos de precipitado
 Pipetas
 Propipetas o bombilla de succión

Reactvos:
Agua destilada
Colorante
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PREGUNTAS A RESPONDER:
1. Defina los términos precisión y exactitud
2. ¿Qué uso le daría usted a los siguientes materiales: vaso precipitado, cilindro graduado, balón aforado;
escriba en orden decreciente el grado de precisión de cada uno de ellos?
3. ¿Existe diferencia en cuanto a precisión entre vaso precipitado y una pipeta volumétrica?, justifique
su respuesta
4. Escriba las diferencias que existen entre una pipeta volumétrica y una serológica
5. Describa los niveles de riesgo bilógico en un laboratorio y los niveles de bioseguridad
DESCRIBIR EL PROCEDIMIENTO:
MANEJO DE LAS PIPETAS:
1.

RECOMENDACIONES
Consultar con el profesor en caso de duda
Conocer la parte teórica para relacionarlo con la práctica
BIBLIOGRAFÍA.
-Botero, D. y M. Restrepo. 2003. Parasitosis Humanas. 3ra. Edición
-Krupp, Marcus. “Manual de Diagnóstico Clínico y de Laboratorio”. Editorial Manual moderno, Octava edición.
Páginas de internet
-Koneman H., Allen S., Janda W., Winn W. 2008. Diagnóstico microbiológico. Texto y Atlas color. Sexta
edición. Medica Panamericana. Pp1691

FIRMA DEL DOCENTE FIRMA DEL RESPONSABLE DEL


LABORATORIO

Profa. Liliana M. Araujo Baptsta Lic.