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PROFESORES:
Dra. Cleotilde Juárez Ramírez
Dr. Oswaldo Ramos Monroy
Dra. Angélica María Salmerón Alcocer
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
● Evaluar el efecto que tiene la concentración del álcali del tratamiento (NaOH) a 60°C
durante 5 minutos; en la concentración de ácidos nucleicos (RNA) y proteínas de S.
cerevisiae.
● Determinar el contenido de RNA mediante el método del orcinol en muestras tratadas
con diferentes concentraciones de NaOH (0, 2, 4 y 6%) y una muestra control sin
tratamiento térmico.
● Determinar el contenido de proteína mediante el método de Biuret en muestras
tratadas con diferentes concentraciones de NaOH (0, 2, 4 y 6%) y una muestra control
sin tratamiento térmico.
● Encontrar la mejor concentración de NaOH que reduzca lo más posible la
concentración de RNA pero que mantenga la mayor concentración de proteína.
RESULTADOS
Asx Vc
[P roteína] = Asc x Cc x dil x Vx
mg
Cálculo para la concentración de proteína en mL del control
1
0.444 mg 500 mg
[P roteína] = 0.119 x 5 mL x 250 = 37.310 mL
[P roteína] x 100
%= Concentración celular
mg
En donde la concentración celular tiene un valor de 92.4 mL
(37.310 mg/mL)(100)
%= 92.4 mg/mL = 40.3%
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Figura 1: Reducción porcentual de proteína y RNA en función de la concentración de NaOH.
DISCUSIÓN
El principal valor de la biomasa microbiana es su aporte de proteína, se denomina proteína
unicelular (PUC) a aquella obtenida de la biomasa microbiana de algas, bacterias, levaduras
y hongos filamentosos, que son cultivados en condiciones fermentativas apropiadas y
controladas, las cuales garantizan una adecuada velocidad de crecimiento, por medio del
aprovechamiento de sustratos compuestos por o enriquecidos con carbono, nitrógeno y
fósforo (Chacón Villalobos, 2004).
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linoleico), de esteroles y vitaminas (complejo B); sin embargo, el alto contenido de ácidos
nucleicos (6-10% en levadura) limita su consumo frecuente en la alimentación humana
debido a que incrementa los niveles de ácido úrico en sangre y con esto promueve el
desarrollo de gota y/o su cristalización en el riñón (Leveau, Bovix, 2000; Reyes-Bautista et.
al., 2007).
En esta práctica se trabajó con PUC de levadura S. cerevisiae, a la cual se le aplicó el
método de hidrólisis alcalina para la reducción del contenido de ácidos nucleicos. El método
de hidrólisis alcalina no es un método específico, debido a que también afecta estructuras
celulares, entre ellas como desventaja a las proteínas (reduciendo su valor nutricional), sin
embargo, para que esto suceda aparte de la acción del NaOH, una elevación de temperatura
durante el tratamiento es necesario. Aunque en comparación con otros métodos; como la
manipulación fisiológica de la levadura, tratamientos enzimáticos ya sea endógenos o
exógenos, este método aumenta la digestibilidad de la proteína al debilitar el peptidoglicano
propio de las bacterias y pared celular de levaduras. Entonces con este método existe el
beneficio de reducir el RNA pero la desventaja de hidrolizar proteínas, por lo que en esta
práctica se evaluaron diferentes concentraciones de NaOH para ver el efecto que este tiene
sobre lo antes mencionado.
En cuanto al contenido de RNA, se observa en el cuadro 3 que la muestra sin NaOH con
tratamiento térmico es la que presenta mayor contenido de RNA, se esperaba esto debido a
que al no tener NaOH no se está hidrolizando el RNA a comparación de los otros que si se
les agregó NaOH, se observa que al aumentar la concentración del álcali la hidrólisis neta de
RNA aumenta. Al igual que en el caso de las proteínas, el tratamiento térmico también influye
sobre la hidrólisis del RNA debido a que en la muestra control se observó una ligera
disminución en el contenido de este.
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CONCLUSIONES
● Para la reducción óptima del contenido de ARN, el tratamiento con una mayor
concentración de álcali y a mayor temperatura reduce cantidades progresivamente
mayores de ácidos nucleicos, aunque como límite a esto se debe de considerar la
reducción en contenido de proteína.
● Se logró una reducción significativa (35.674 %) del contenido de ARN en la PUC de
Saccharomyces cerevisiae con la menor pérdida de proteína (13.51 %).
● Como en cualquier proceso, la producción y el consumo de PUC tienen una serie de
ventajas como alto valor nutritivo, tiempos cortos de duplicación, independencia de las
condiciones ambientales, amplia capacidad de degradación de sustratos y
mejoramiento genético; y desventajas como alto contenido de ácidos nucleicos, costo
de producción y digestión lenta o nula de la pared celular.
BIBLIOGRAFÍA
● Chacón Villalobos, A. (2004). Perspectivas actuales de la proteína unicelular (SCP) en
la agricultura y la industria. Agronomía Mesoamericana, 15(1): 93-106.
● Edozien, J.C., U.U. Udo, V.R. Young & N.S. Scrimshaw. 1970. Effects of high levels of
yeast feeding on uric acid metabolism of young men. Nature. 228:180-191.
● Hernández, A. (2003). Microbiología Industrial. Editorial Universidad Estatal a
Distancia.
● Leveau, J., Bovix, M. (2000). Los microorganismos de interés industrial. Acribia.
Zaragoza. España. 608 pp.
● Otero, A. M., A. Cacello. (1980). Single cell protein low in nucleic acids by alkaline
treatment. Biotechnol. Letters. 2 8:379-389.
● Reyes-Bautista, R., Soriano-Santos, J., Guerrero-Legarreta, I., Román-Ramos, R.
(2007). Reducción de ARN de Saccharomyces cerevisiae para el aislamiento del
factor de tolerancia a la glucosa. México: Universidad Autónoma Metropolitana.