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Departamento de Bioquímica
Resultados
Intensidad
Intensidad de
Intensidad de Intensidad de de
Riboflavina fluoresceína
fluoresceína fluoresceína fluoresceína
(ppm) en 𝐶𝐻3 𝐶𝑂𝑂𝐻
en 𝐻2 𝑂 en HCl 0.1 M en NaOH
0.9 M
0.1 M
0.0 5.00 4.99 5.00 4.98
1.0 5.74 5.13 5.85 5.00
2.0 6.40 5.27 6.56 5.01
3.0 6.85 5.39 7.26 4.81
4.0 7.81 5.51 7.90 5.04
5.0 8.94 5.62 8.49 5.04
10.0 11.27 6.12 10.95 4.85
50.0 18.18 6.89 15.22 5.11
pH 5 1 3 13
20
18
16
Intensidad de fluorescencia
14
12
Agua
10
HCl
8
Acético
6 NaOH
4
0
0 10 20 30 40 50 60
Concentración (ppm)
Discusión
A partir del análisis gráfico se puede observar que la intensidad de fluorescencia se
ve inhibida de forma decreciente cuando el disolvente es hidróxido de sodio, ácido
clorhídrico, ácido acético y agua, esto se puede justificar porque la estructura
química de la riboflavina se ve alterada tanto en medio ácido como en un medio
básico, puesto que se limita el número de electrones libres y resonancias
conjugadas, por lo que estos cambios estructurales pueden no absorber ni transmitir
de la misma forma que en su estructura neutra.
Por otro lado, la forma en cómo se inhibe esta característica respecto a la
concentración es que al existir una gran cantidad de moléculas en un volumen,
supongamos pequeño, estas producirán choques entre las mismas, lo cual
ocasionará que la energía emitida por una molécula sea cedida en forma de calor
por otra, reduciendo la intensidad de fluorescencia. Este comportamiento es
claramente visualizado en la tendencia que sigue la gráfica del agua, en esta se
aprecia que al aumentar la concentración de la riboflavina se inhibe la intensidad de
fluorescencia, pues ya no sigue una tendencia lineal.
Bibliografía
Christian, Gary D, “Química analítica”, 6ta edición, editorial McGraw Hill, México DF, 2009, páginas
464 -466, 505-511.
Anexos:
1. ¿Por qué se deben conocer las longitudes de onda de máxima excitación y
de máxima emisión?
Se deben de conocer puesto que a partir de estas se puede determinar a qué
longitudes de onda es posible cuantificar la intensidad de fluorescencia, esto debido
a que sólo una longitud de onda posee la energía necesaria para poder alcanzar la
absorbancia máxima, y la emisión máxima.