optical atomic spectrometric techniques

These methods are based on the measurement of absorption, emission, or fluorescence originated
from the free, unionized atoms or atomic ions in gas phase.
In atomic absorption and fluorescence spectrometry the
atomizer should produce a large population of sample atoms that are in
the ground state. The sample matrix should not affect the degree of
atomisation, or otherwise chemical interferences are encountered.
Different combustion flames are most commonly used as atomization
devices. In addition, graphite furnaces and flame or electrically heated
quartz tubes are commonly used to enhance the determination of low
analyte levels by AAS. In AES the atomizer/excitation source must be
very efficient or otherwise only the elements having low lying excited
states can be measured with reasonable sensitivity (Figure 2). Various
plasma sources, especially ICPs, fulfil this well, especially when liquid
samples are used. The atomizatiodexcitation devices used in AAS, AES
and AFS techniques can be at the atomization temperature continuously
(flame, plasma) or transiently (graphite furnace)

Atomic fluorescence has many superior features for trace elemental

analysis (spectral simplicity, wide dynamic range, and simultaneous
multi-element analysis). In atomic fluorescence spectrometry the sample
atoms in the atomizer are irrariated by an intense electromagnetic
radiation from the source. Sample atoms are excited if the energy
(wavelength) of the incoming radiation exactly matches with the energy
states of the atoms in the atomizer unit. The excited atoms rapidly relax
to ground state through collisions and emission of fluorescence radiation.
The intensity of the fluorescence radiation is measured. The
measured signal must not contain the radiation from the excitation
source. Therefore the detector and the excitation source are usually
positioned at a right angle with each other. The monochromator shown
in Figure 1 is not always necessary in atomic fluorescence spectrometry,
i.e. when an excitation source emits only the wavelengths specific to the
atoms that are measured. Hence only these atoms are excited.
Atomic absorption spectrometry (AAS). An analytical method for the determination of elements in
small quantities. It is based on the absorption of radiation energy by free atoms.

Atomic fluorescence spectrometry (AFS). An analytical method

for the determination of elements in small quantities. It is based on
the emission of free atoms when the excitation is performed by the
radiation energy.
Atomic emission spectrometry (AES). An analytical method for the
determination of elements in small quantities. It is based on spontaneous
emission of free atoms or ions when the excitation is performed by
thermal or electric energy.
However, wavelengths of
adjacent spectral regions are overlapping, and in atomic spectrometry
we shall mainly be concentrating on the spectral region extending
from about 190 nm in the ultraviolet to about 850 nm in the infrared
(Figure 5).

Hollow cathode lamps are the most

widely used radiation sources in the AA technique
In the AA technique the principal function of the monochromator is to
isolate the measured line (resonance radiation) from the other emission
lines of the cathode material and lines of the filler gas. Atomic absorption
is a very selective method when an element specific radiation source
is used. It is practically free of spectral interferences caused by overlapping
atomic lines of other elements. The unmodulated molecular emission
and other background continua originated in the flame or graphite
furnace are eliminated by means of selective amplification. The monochromator
consists of two slits (an entrance slit and an exit slit) and
a dispersing component (a prism or a grating). The quality of an
instrument in other spectrometric techniques, such as in UV-visible
spectrometry or plasma-AES, depends mainly on the resolution of the
monochromator or on its spectral bandpass.
Photomultiplier tubes (PMTs) are used nowadays almost exclusively
in AAS. They are also very common in sequential plasma-AES
instruments. A photomultiplier contains a photo-emissive cathode and
several anodes (dynodes) in a vacuum. The cathode is coated with an
easily ionized material such as alloys of alkali metals with antimony,
bismuth, and/or silver.
The basic components of an atomic absorption spectrometer are shown
in Figure 40. The function of the instrument is as follows: (i) The
radiation source (a hollow cathode or an EDL) emits a sharp line
spectrum characteristic of the analyte element; (ii) The emission beam
from the radiation source is modulated; (iii) The modulated signal
passes through the atomic vapour where the atoms of the analyte
absorb radiation of the line-like radiation source; (iv) The desired
spectral line (usually resonance line) is selected by the monochromator;
(v) The isolated analyte line falls onto the detector (a photomultiplier)
where the light signal is converted into the electric signal; (vi) The
modulated signal is amplified by a selective amplifier; (vii) The signal is
finally recorded by a readout device (a meter, strip chart recorder, or
through data processing to a digital display unit or printer).
Atomic fluorescence spectrometry (AFS) is based on the excitation of
gaseous atoms by optical radiation of suitable wavelength (frequency)
and the measurement of the resultant fluorescence radiation. Atomic
fluorescence is, thus, in principle the opposite process to atomic
absorption. Each atom has a characteristic fluorescence spectrum. The
wavelength of the fluorescence line may be the same, greater, or
smaller than the wavelength of the excitation line.
Atomic fluorescence transitions may be divided into three types:
(a) resonance fluorescence (the excitation and fluorescence lines have
the same upper and lower energy levels), (b) direct line fluorescence
(the excitation line and fluorescence line have the same upper energy
level, but different lower energy levels), and (c) stepwise line fluorescence
(the excitation line and the fluorescence line have different upper
energy levels) (Figure 159).
The resonance fluorescence is the most common form, and in this
case the excitation and fluorescence lines have the same wavelength.
The resonance fluorescence lines may originate from the ground state or
from an excited state.
If the wavelength of the fluorescence line is greater than that of the
excitation line, the effect is called Stokes direct line fluorescence. In
the reverse case this effect is called anti-Stokes direct line fluorescence.
All these lines may originate either from the ground state or from an
excited state.
In the case of the stepwise line fluorescence, the effect is divided
into Stokes and anti-Stokes stepwise fluorescence depending on the
wavelength (energy) relationships. A thermally assisted process may
take place, if after radiation excitation, further collisional excitation
occurs.
 A schematic structure of a simple AFS instrument is shown in
Figure 161. The main units of the instrument are: (i) excitation source,
(ii) atomization cell, (iii) wavelength selection unit, and (iv) detection
and readout devices. Sample introduction is achieved by solution
nebulisation or with special techniques, like cold vapour method or
hydride generation (Section 7.4).
7.2.1 Radiation Sources
An ideal radiation source for AFS measurements should fulfill the
following requirements: (a) high intensity, (b) good stability (short- and
long-term), (c) ease of operation, (a) reasonable price, (e) available
for all common elements, and (f) long operation time. The most used
radiation sources in AFS are hollow cathode lamps, EDLs, ICPs, lasers,
and xenon arc lamps.
7.2. I . I Hollow Cathode Lamps. The intensities of the hollow cathode
lamps normally used in AAS are too low for AFS determinations.
However, the intensities may be increased when higher lamp currents
are periodically used. Several hollow cathode lamps can be used at
the same time for simultaneous multi-element analysis provided that the
operations of the lamps and the monochromator or filters are synchronized.
Special hollow cathode lamps (e.g. boosted discharge lamps) with
high intensities have been developed. These lamps are especially well
suited for AFS determination of hydride forming elements, such as As
and Se, that are difficult to excitate.
Non-dispersive Instruments. In non-dispersive equipment,
the atoms act as their own monochromators. In these instruments
element-specific, line-like radiation sources (hollow cathode lamps,
EDLs, lasers) are employed, and hence only the atoms of the analyte
element are excited. For example, if a single element hollow cathode
lamp or EDL is used, the fluorescence spectrum produced originates
from the atoms of this particular element only. Then it is not necessary
to isolate the different fluorescence lines from each other, and all the
lines can be measured at the same time. The principle of non-dispersive
AFS equipment was first introduced by Larkins.
The optimization of the signalhoke ratio is very important in AFS.
In non-dispersive equipment, the intensity of the signal is directly
proportional to the intensity of the incident beam, space angle,
quantum yield, and transmission efficiency of the optics. The last factor
may be improved by using mirrors because no colour deflections occur,
unlike the case of lenses.
Advantages of the non-dispersive instruments are the simplicity and
low costs. In addition, the optical transmission of the instruments is
good, because monochromators are not required. In multi-element
analysis, rotating filters may be employed to separate the wavelengths
of different elements from each other. On the other hand, nondispersive
instruments are prone to interferences caused by stray light.
In addition, background emission from the atomizer may cause
interference. In order to minimize interferences flames shielded with
nitrogen or argon are often used.
In dispersive instruments monochromators
are employed for selection of the wavelength. When a line-like
radiation source is employed, a monochromator of low resolution is
adequate, but for a continuum radiation source a high resolution monochromator
is required. In dispersive equipment the exit slit width is
narrower than that in non-dispersive equipment. In this way, thermal
background emission and stray light originating from the atomizer
can be considerably decreased, but at the same time the optical transmission
also decreases. The schematic construction of a dispersive AFS
instrument is shown in Figure 162.
Instrumentos dispersivos
Un sistema dispersivo para medidas de fluorescencia
atomica consta de una fuente modulada, un atomizador
(con llama o sin ella), un monocromador o un sistema
de filtro de interferencia, un detector y un procesador de
senal, y un dispositivo de lectura. Con excepcion de la
fuente, la mayor parte de estos componentes son similares
a los que se analizaron en las primeras partes de
este capitulo.
Instrumentos no dispersivos
En teoria, ningun monocromador o filtro debe ser
necesario para las medidas de fluorescencia atomica
cuando una lampara de descarga sin electrodos o una
lampara de catodo hueco sirven como fuente de excitacion
porque, en principio, la radiacion emitida es
la de un solo elemento y excitara, por consiguiente,
solo atomos de ese elemento. Un sistema no dispersivo
podria estar constituido entonces de solo una fuente,
un atomizador y un detector. Hay varias ventajas de tal
sistema: 1) sencillez e instrumentacion de bajo costo,
2) adaptabilidad a analisis de varios elementos, 3) alto
rendimiento energetico y, por tanto, mayor sensibilidad
y 4) recoleccion simultanea de energia para lineas
multiples, lo cual incrementa tambien la sensibilidad.
Para darse cuenta de estas ventajas importantes, es
necesario que la salida de la fuente este libre de lineas
contaminantes de otros elementos; ademas, el atomizador
no debe emitir radiacion de fondo significativa.
En algunos casos con atomizadores electrotermicos, la
radiacion de fondo es minima, pero con seguridad no
lo es con las llamas tipicas. Para superar este problema
se han utilizado filtros localizados entre la fuente y el
detector para eliminar la mayor parte de la radiacion
de fondo. Otra posibilidad son los fotomultiplicadores
insensibles a la luz solar, que responden solo a la radiacion
de longitudes de onda más cortas que 320 nm.
Para que estos dispositivos se usen de modo efectivo, la
emisión del analito debe estar por debajo de los 320 nm.
Hay tres tipos de instrumentos para la medicion de la
absorcion en el infrarrojo: 1) espectrofotometros dispersivos
con monocromador de red, 2) espectrometros
de transformada de Fourier con interferometro (seccion
7I) y 3) fotometros no dispersivos equipados con

un filtro o un gas absorbente que se usan para analizar

gases atmosfericos a longitudes de onda determinadas.
En los anos ochenta los instrumentos que mas se
usaron para mediciones en el infrarrojo fueron los espectrofotometros
dispersivos. En la actualidad, dichos
aparatos ya fueron desplazados por espectrometros de
transformada de Fourier para efectuar mediciones en
el infrarrojo mediano y lejano, debido a su velocidad,
confiabilidad, ventaja en la relacion senal-ruido y comodidad.
Los espectrometros dispersivos todavia se
utilizan en el infrarrojo cercano y por lo general son
extensiones de los instrumentos UV-visible, pero muchos
de los instrumentos especificos para el infrarrojo
cercano son del tipo de transformada de Fourier.

La espectroscopia de transformada de Fourier difiere

de la espectroscopia ordinaria en que todos los
elementos de resolucion de un espectro se miden de
manera simultanea, lo cual reduce enormemente el
tiempo requerido para obtener un espectro en cualquier
relacion senal-ruido.

La mayoria de los instrumentos de infrarrojo de transformada

de Fourier que hay en el comercio se basan en
el interferometro de Michelson, aunque tambien hay
otros tipos de sistemas opticos. Se considerara solo el
diseno de Michelson, que se ilustra en la figura 7.43.8
Mecanismo de activacion. Para obtener interferogramas
satisfactorios y, por tanto, espectros satisfactorios,
es necesario que la velocidad del espejo movil sea
constante y que su posicion se conozca con exactitud
en cualquier instante. Tambien debe permanecer constante
el plano del espejo a lo largo de todo el recorrido
de 10 cm o mas.
En la region del infrarrojo lejano, donde las longitudes
de onda van de 50 a 1000 μm (de 200 a 10 cm_1),
se pueden tener desplazamientos del espejo de fracciones
de longitud de onda y la medida exacta de su
posicion mediante un tornillo micrometrico accionado
con un motor. Para las regiones del infrarrojo medio
y cercano se requieren mecanismos mas precisos
y complicados. En este caso, el soporte del espejo esta
suspendido sobre cojinetes de aire sujetos a unos manguitos
de acero inoxidable muy ajustados (vease figura
16.4). Este montaje se acciona por medio de un motor
de accionamiento lineal y una bobina electromagnetica
semejante a la de un altavoz; una corriente creciente
de la bobina mueve al espejo a una velocidad
constante. Al alcanzar el extremo final, el espejo regresa
con rapidez al punto de partida para el proximo
barrido mediante una rapida inversion de la corriente.
La longitud del recorrido varia de 1 a 20 cm y las velocidades
de barrido oscilan de 0.01 a 10 cm/s.

con exactitud el punto de retraso cero para facilitar el

promedio de las senales. Si no se conoce con exactitud
este punto, las senales de los barridos repetidos no estaran
en fase; el promedio tiende a degradar la senal
en lugar de mejorarla.
El problema de la toma de muestras precisa de la
senal y de su promedio puede resolverse usando dos
o tres interferometros en vez de uno y con un unico
montaje para espejos que sostiene los tres espejos
moviles. En la figura 16.4 se muestra un esquema de
esta configuracion. Los componentes y las trayectorias
de la radiacion para cada uno de los tres sistemas interferometricos
se indican respectivamente con los
subindices 1, 2 y 3. El sistema 1 es el sistema infrarrojo
que proporciona en ultima instancia un interferograma
semejante al que se muestra en la curva A de la
figura 16.5. El sistema 2, tambien denominado sistema
de referencia de franjas laser, proporciona la informacion
del intervalo de muestreo. Dicho sistema consta
de un laser de helio/neon S2, un sistema interferometrico
con los espejosMM2 yM2, un divisor del haz B2 y
un transductor T2. La senal de salida de este sistema
es una onda coseno, como se indica en la parte C de la
figura 16.5. Esta senal se convierte electronicamente
en la onda de forma cuadrada que se muestra en D; el
muestreo comienza y termina en cada cruce sucesivo
con el cero. El sistema de referencia de franjas laser
proporciona intervalos de muestreo muy reproductibles
y con separacion regular. En la mayoria de los instrumentos,
la senal del rayo laser se utiliza también

para mantener constante la velocidad del sistema que

acciona los espejos.
El tercer sistema interferometrico, a veces llamado
sistema de luz blanca, emplea una fuente de tungsteno
S3 y un transductor T3 sensible a la radiacion visible. Su
sistema de espejo se fija de modo que se produzca un
retraso cero desplazado hacia la izquierda respecto al
de la senal analitica (vease el interferograma B, figura
16.5). Como la fuente es policromatica, su potencia
cuando el retraso es cero es mucho mayor que cualquier
senal anterior y posterior a ese punto. Por consiguiente,
se puede utilizar este maximo para activar el
inicio de la toma de muestras de los datos para cada
barrido en un punto altamente reproductible.
El sistema de tres interferometros apenas descrito
permite una notable precision al determinar las frecuencias
espectrales y supera con mucho la que se
consigue con los instrumentos de red ordinarios. Esta
elevada reproductibilidad es importante sobre todo
cuando se tiene que promediar muchos barridos. En
la actualidad existen instrumentos como el que se
muestra en la figura 16.6 que son capaces de dar una
excelente precision en las frecuencias con uno o dos
interferometros. En el caso del instrumento cuyo esquema
se observa en la figura 16.7, el interferometro
esta compuesto en realidad con dos interferometros
paralelos, a saber, uno que modula la radiacion IR desde
la fuente antes de que pase por la muestra y otro
que modula la luz roja del rayo laser de He-Ne para
proporcionar la senal de referencia y reunir los datos
17A.2 Análisis cualitativo
El uso generalizado de la espectroscopia en el infrarrojo
medio por parte de los quimicos para identificar
compuestos organicos se inicio a finales de los anos
cincuenta, con la aparicion en el mercado de espectrofotometros
dispersivos de doble haz con registro, baratos
y de facil manejo que producian espectros en el
intervalo de 5000 a 670 cm_1 (2 a 15 μm). El surgimiento
de este tipo de instrumentos, asi como de los
espectrometros de resonancia magnetica nuclear y de
masas, revoluciono la forma en que los quimicos identificaban
las especies organicas, inorganicas y biologicas.
De repente, el tiempo necesario para realizar
una determinacion estructural se redujo de manera
notable.
En la figura 17.5 hay cuatro espectros caracteristicos
obtenidos con un instrumento barato de doble haz.
La identificacion de un compuesto organico a partir
de un espectro de este tipo es un proceso que consta de
dos etapas. En la primera se determina que grupos
funcionales son los que tienen mas probabilidad de estar
presentes al examinar la region de frecuencias de
grupo, que abarca la radiacion comprendida entre
3600 cm_1 y 1250 cm_1 aproximadamente (vease figura
17.5). La segunda etapa consiste en comparar con detalle
el espectro del compuesto desconocido con los espectros
de compuestos puros que contienen todos los
grupos funcionales que se encontraron en la primera
etapa. En este caso es particularmente util la region
de la huella dactilar, comprendida entre 1200 cm_1 y
600 cm_1 (figura 17.5), debido a que pequenas diferencias
en la estructura y la constitucion de una molecula
causan cambios importantes en el aspecto y la distribucion
de las bandas en esta region. Por tanto, una
gran similitud en la region de huella dactilar (asi como
en otras) de los espectros de dos compuestos constituye
una evidencia casi certera de que son identicos.
Frecuencias de grupo
Ya se explico que la frecuencia aproximada (o numero
de onda) a la que un grupo funcional, como C“O,
C“C, C￢H, C‚CuO￢H, absorbe radiacion en el
infrarrojo se puede calcular a partir de las masas de los
atomos y de la constante de fuerza del enlace entre
ellos (ecuaciones 16.14 y 16.15). Estas frecuencias, denominadas
frecuencias de grupo, rara vez permanecen
invariables, debido a las interacciones con otras vibraciones
asociadas a uno o a los dos atomos que forman
el grupo. Por otra parte, los efectos de dichas interac-

ciones suelen ser pequenos; como consecuencia de

ello, se puede asignar un intervalo de frecuencias dentro
del cual es muy probable encontrar el maximo de
absorcion para un grupo funcional determinado. En la
tabla 17.3 se enumeran las frecuencias de grupo para
algunos de los grupos funcionales mas comunes. Una
presentacion mas detallada de las frecuencias de grupo
se da en la grafica de correlacion que se muestra en la
figura 17.6.3 Observe que aunque la mayoria de las frecuencias
de grupo estan en el intervalo de 3600 a
1250 cm_1, algunas se encuentran en la region de la
huella dactilar. Entre estas estan la vibracion de estiramiento
del grupo C￢O￢C a aproximadamente
1200 cm_1 y la vibracion de estiramiento del enlace
C￢Cl entre 700 y 800 cm_1.

Región de la huella dactilar

Pequenas diferencias en la estructura y la constitucion
de las moleculas dan lugar a cambios significativos en
la distribucion de los maximos de absorcion en la region
del espectro que se extiende desde alrededor de
1200 hasta 600 cm_1 (8 a 14 μm). Por consiguiente, la
region de la huella dactilar sirve para identificar compuestos
al comparar los espectros. La mayoria de los
enlaces sencillos origina bandas de absorcion a estas
frecuencias; como sus energias son aproximadamente
iguales, se producen interacciones fuertes entre los enlaces
vecinos. Por tanto, las bandas de absorcion son la
combinacion de estas distintas interacciones y dependen
de la estructura del esqueleto completo de la molecula.
Debido a la complejidad de los espectros, rara
vez es posible interpretar en forma exacta los espectros
en esta region. No obstante, para fines de identificacion,
la riqueza de las caracteristicas de los espectros
es una ventaja distintiva. Muchos compuestos contienen
bandas de absorcion unicas en esta region, lo cual
es muy util en la identificacion final.
Las figuras 17.5a y b ilustran el caracter unico de los
espectros de infrarrojo, sobre todo en la region de la
huella dactilar. Las dos moleculas difieren solo en un
grupo metilo, pero sus espectros son muy distintos en
la region de la huella dactilar.
Como se muestra en la figura 17.6, algunos grupos
inorganicos, como sulfato, fosfato, nitrato y carbonato
absorben radiacion IR en la region de la huella dactilar
(_1200 cm_1 o _8.3 μm).

C uando la radiacion atraviesa un medio

transparente, las especies presentes dispersan

una fraccion del haz en todas
direcciones (seccion 6B.10). La difusion Raman es
resultado del mismo tipo de cambios vibracionales
cuantizados que se asocian con la absorcion
infrarroja. Por tanto, la diferencia de longitud de
onda entre la radiacion visible incidente y la
dispersada corresponde a las longitudes de onda
de la region del infrarrojo medio. De hecho, en el
caso de una especie determinada, el espectro de
difusion de Raman y el espectro de absorcion
infrarrojo son a menudo muy parecidos entre si.
Como se explica en este capitulo, en el caso de
algunos problemas, la espectroscopia en el
infrarrojo es la mejor herramienta, pero en el caso
de otros, la espectroscopia Raman proporciona
informacion mas util.
481

RAMAN
Los espectros Raman se obtienen al irradiar una
muestra con una fuente potente de rayos laser de radiacion
monocromatica visible o infrarroja. Durante el
proceso se registra el espectro de la radiacion dispersada
a un cierto angulo, casi siempre 90°, con ayuda de
un espectrometro apropiado. Para evitar la fluorescencia,
las longitudes de onda de la excitacion se eliminan
de una banda de absorcion del analito. El experimento
Raman se ilustro ya en la figura 6.18. Las intensidades
de las lineas Raman son, cuando mucho, un 0.001% de
la intensidad de la fuente. Debido a esto podria parecer
mas dificil detectar y medir las bandas Raman que
las bandas vibracionales en el infrarrojo.

Sin embargo,
la radiacion Raman difundida esta en las regiones visible y del infrarrojo cercano, para las cuales ya
hay
detectores muy sensibles. En la actualidad, las mediciones
de los espectros Raman son casi tan faciles de
hacer como las de los espectros en el infrarrojo.

Rmn

L a espectroscopia de resonancia magnetica

nuclear (RMN) se basa en medir la absorcion

de la radiacion electromagnetica en la
region de radiofrecuencias, de alrededor de 4 a
900 MHz. En contraste con la absorcion ultravioleta,
visible e infrarroja, los nucleos de los atomos
son los que participan en el proceso de absorcion
en vez de los electrones exteriores. Ademas, para
que en los nucleos se formen los estados de
energia que hagan posible la absorcion, es
necesario colocar el analito en un intenso campo
magnetico. En este capitulo se explica la teoria, se
describen los instrumentos y las aplicaciones de la
espectroscopia de resonancia magnetica nuclear.
Se trata de una de las tecnicas mas potentes
con la que los quimicos y bioquimicos pueden
dilucidar las estructuras de las especies quimicas.
Tambien es util para la determinacion cuantitativa
de las especies absorbentes.
498

Las bases teoricas de la espectroscopia de resonancia

magnetica nuclear1 fueron formuladas por W. Pauli en
1924, quien sugirio que ciertos nucleos atomicos tienen
las propiedades de espin y momento magnetico y
que, como consecuencia, al exponerlos a un campo
magnetico se produciria una division de sus niveles de
energia. Durante el siguiente decenio se consiguio la
comprobacion experimental de estos postulados. Pero
no fue sino hasta 1946 cuando Felix Bloch, en Stanford,
y Edward Purcell, en Harvard, con trabajos independientes,
demostraron que los nucleos absorben
radiacion electromagnetica en un campo magnetico
intenso como resultado del desdoblamiento de los niveles
de energia inducidos por el campo magnetico. En
1952, los dos fisicos compartieron el Premio Nobel por
su trabajo.