QUÍMICA ANALÍTICA INSTRUMENTAL

Laboratorio N° 4

ANÁLISIS DE FOSFATOS: ESPECTROSCOPÍA DE

DERIVADAS

Informe

Integrantes del grupo:

 Alvarez Aquino, Giancarlos

 Dominguez Saldívar, Estefany
 Mayorca Huanca Tatiana

Grupo:

N° 1

Profesor:

Ing. Ulises Quiroz Aguinaga

Sección:

C-1- 5 - A

Fecha de realización: 6 de abril

Fecha de entrega: 13 de abril

2018 – I
 1. OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL:

 Determinar la técnica de espectrofotometría de derivadas en la determinación

cuantitativa de fósforo.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

 Determinar la longitud de onda de máxima absorbancia para el complejo azul de

molibdeno.

 Realizar la preparación de una serie de estándares de 𝑃 − 𝑃𝑂4 para elaborar una curva
de calibración.

 Hallar la concentración de iones fosfatos presente en las muestras problemas empleando

la curva de calibración: Absorbancia vs Concentración.
2. PARTE EXPERIMENTAL

 PREPARACIÓN DE REACTIVOS

Solución de 𝑯𝟐 𝑺𝑶𝟒 5 N.

𝑔 96 𝑔 𝐻2 𝑆𝑂4 1 𝑚𝑜𝑙 𝐻2 𝑆𝑂4 10( 𝑒𝑙𝑒𝑣𝑎𝑑𝑜 3 )𝑚𝐿 𝑚𝑜𝑙

𝑁 = 1,84 𝑥 𝑥 𝑥 𝑥
𝑚𝐿 100𝑔 98.079 𝑔 𝐻2 𝑆𝑂4 𝐿 𝐿

𝑁 = 18.0 𝑚𝑜𝑙/𝐿
𝑪 𝟏 𝒙 𝑽𝟏 = 𝑪 𝟐 𝒙 𝑽𝟐
𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙
18.0 𝑥 𝑉1 = 5 𝑥 250 𝑚𝐿
𝐿 𝐿
𝑉1 = 69,4 𝑚𝐿

Diagrama de proceso:

Ácido sulfúrico concentrado

 Colocar en un matraz volumétrico de 250 mL.

150 mL de 𝐻2 𝑂 destilada.

69,4 mL de 𝐻2 𝑆𝑂4.

 Enrasar con 𝐻2 𝑂 destilada hasta 100 mL.

Solución de 𝑯𝟐 𝑺𝑶𝟒 5 N.

𝟏
Solución de tartrato antimónico potásico 𝑲(𝑺𝒃𝑶)𝑪𝟒 𝑯𝟒 𝑶𝟔 . 𝟐 𝑯𝟐 𝑶.
𝒎
𝑪=
𝑴×𝑽

𝑚𝑜𝑙 𝑚
0,01 = 𝑔
𝐿 333,93 × 0,1𝐿
𝑚𝑜𝑙

𝒎 = 𝟎, 𝟑𝟑𝟑𝟗 𝒈
Diagrama de proceso:

0,3339 g de
𝟏
𝑲(𝑺𝒃𝑶)𝑪𝟒 𝑯𝟒 𝑶𝟔 . 𝟐 𝑯𝟐 𝑶

 Colocar en un vaso de precipitado de 50 mL.

Disolver con 40 mL de 𝐻2 𝑂 ultrapura

 Transferir en un matraz volumétrico de 100 mL.

 Enrasar con 𝐻2 𝑂 ultrapura hasta la marca.

 Almacenar en frasco de vidrio oscuro a 4 °C.

Solución de tartrato
antimónico potásico 0,01 M

Solución de molibdato de amonio (𝑵𝑯𝟒 )𝟔 𝑴𝒐𝟕 𝑶𝟐𝟒 . 𝟒𝑯𝟐 𝑶.

𝒎
𝑪=
𝑴×𝑽
𝑚𝑜𝑙 𝑚
0,0324 = 𝑔
𝐿 1235,96 × 0,25 𝐿
𝑚𝑜𝑙

𝒎 = 𝟏𝟎, 𝟎𝟏𝟏𝟑 𝒈

Diagrama de proceso:

10,0113 g de (𝑵𝑯𝟒 )𝟔 𝑴𝒐𝟕 𝑶𝟐𝟒 . 𝟒𝑯𝟐 𝑶

 Colocar en un vaso de precipitado de 50 mL.

Disolver con 40 mL de 𝐻2 𝑂 ultrapura

 Transferir en un matraz volumétrico de 250 mL.

 Enrasar con 𝐻2 𝑂 ultrapura hasta 250 mL.

 Almacenar en frasco de vidrio oscuro con tapón de

vidrio.

Solución de molibdato amónico

0,0324 M
 Solución de ácido ascórbico 0,1 M.
𝑚 𝑆𝑇𝑂
𝑀=
𝑉𝑠𝑙 (𝐿)
𝑋
0,1 𝑚𝑜𝑙 /𝐿 = 𝑔
176,12 𝑥 0,2 𝐿
𝑚𝑜𝑙

𝒎 = 𝟑, 𝟓𝟐𝟐𝟒 𝒈

Diagrama de proceso:

3,5224 g de 𝑪𝟔 𝑯𝟖 𝑶𝟔

 Colocar en un vaso de precipitado de 50 mL.

Disolver con 40 mL de 𝐻2 𝑂 ultrapura

 Transferir en un matraz volumétrico de 250 mL.

 Enrasar con 𝐻2 𝑂 ultrapura hasta 250 mL.

 La solución es estable durante 1 semana si se

almacena a 4 °C.

Solución de ácido ascórbico 0,1 M

Reactivo combinado: mezclar los reactivos mencionados arriba en la siguiente proporción

para 100 ml de reactivo combinado:

Orden Reactivo Volumen

1 Solución de H2SO4 5 N 50 ml

2 Solución de tartrato antimónico potásico 5 ml

0,01 𝑀.

3 Solución de molibdato de amonio 15 ml

0,0324 𝑀.

4 Solución de ácido Ascórbico 0,1 M 30 ml

 Reactivos preparados

 Los reactivos preparados deben alcanzar la

temperatura ambiente antes de mezclarlos.
 Colocar en un matraz volumétrico de 100 mL los
reactivos en el siguiente orden:

50 mL de H2SO4 5 N.

5 mL de tartrato antimónico potásico 0,01 M.

15 mL de molibdato de amonio 0,0324 𝑀.

30 mL de ácido ascórbico 0,1 M.

 En cada adición de reactivos debe mezclarse.

 Si aparece turbidez en el reactivo combinado se debe
agitar y dejar reposar unos minutos hasta que
desaparezca.
 El reactivo combinado es estable durante 4 horas.

Reactivo combinado

Preparación de solución estándar de fosfato 𝑷 − 𝑷𝑶𝟒 2,5 mg/L.

5 mL de solución stock de
fosfato 𝑷 − 𝑷𝑶𝟒 50 mg/L

 Colocar en un matraz volumétrico de 100 mL.

 Enrasar con 𝐻2 𝑂 ultrapura hasta la marca.

Solución estándar de fosfato

𝑷 − 𝑷𝑶𝟒 2,5 mg/L
Preparación de la muestra de agua residual.

50 mL de agua residual

 Filtrar la muestra si tiene presencia de sólidos.

 Colocar en un matraz Erlenmeyer de 125 mL.
1 gota de indicador de fenolftaleína.
 Si aparece color rojo grosella:
Gota a gota de H2SO4 5 N hasta que la solución sea
incolora.
 Transvasar a un matraz volumétrico de 100 mL.
8 mL de reactivo combinado y mezclar.
 Enrasar con 𝐻2 𝑂 ultrapura hasta la marca.
 Esperar 10 minutos para que se desarrolle el color.

Medir la absorbancia a 880 nm

Preparación de las muestras problemas (detergente y Pepsi)

0,375 g de detergente

 Colocar en un vaso de precipitado de 400 mL.

200 mL de agua ultrapura
5 mL de H2SO4 5 N
 Calentar en un baño de agua durante media hora.
 Enfriar a temperatura ambiente.
 Transvasar a un matraz volumétrico de 250 mL.
 Enrasar con 𝐻2 𝑂 ultrapura hasta la marca.
 Pipetear 7,5 mL de esta solución en un matraz
volumétrico de 50 mL.
20 mL de reactivo combinado.
 Enrasar con 𝐻2 𝑂 ultrapura hasta 50 mL.

Medir la absorbancia
 50 mL de pepsi

 Eliminación del color:

 Colocar en un matraz Erlenmeyer de 125 mL.
0,2 g de carbón activado.
 Agitar en una plancha de agitación durante 1 hora.
 Filtrar para eliminar el carbón.
 Colocar en un matraz volumétrico de 50 mL.
1 mL de la muestra libre de color.
 Enrasar con 𝐻2 𝑂 ultrapura hasta 50 mL.
 Colocar en otro matraz volumétrico de 50 mL.
5 mL de la solución anterior.
20 mL de reactivo combinado.
 Enrasar con 𝐻2 𝑂 ultrapura hasta la marca.

Medir la absorbancia
 3. DISCUSIONES

Se agregaron los reactivos preparados en orden para formar el reactivo combinado que
debió ser de color amarillo dorado, pero nos salió incoloro, a pesar que se preparó al
instante, ya que este reactivo es estable durante 4 horas. Es muy posible que algunos de
los reactivos se encuentren mal preparados, los insumos deteriorados o contaminados,
por lo cual el reactivo no se llegó a utilizar ni para añadir a los estándares como para las
muestras problemas, por lo que se tuvo que desecharlo.
Para preparar la solución stock de fosfato 𝑃 − 𝑃𝑂4 50 mg/L se utilizó dihidrógeno
fosfato de potasio 𝐾𝐻2 𝑃𝑂4 anhidro, el cual fue preparado antes de comenzar el
laboratorio. La solución stock de fosfato 𝑃 − 𝑃𝑂4 estaba en un matraz volumétrico, y
no en un frasco oscuro y en frío que es lo recomendado.
La solución de tartrato antimónico potásico y molibdato de amonio se tienen que guardar
en frascos oscuros con tapón de vidrio a 4 °C, y cuando se prepararon estuvo buen
tiempo en los matraces volumétricos, lo cual pudo haber provocado su descomposición.
El reactivo combinado se agrega tanto a la muestra como a los estándares y tiene la
función de que el molibdato de amonio y el tartrato de antimonio y potasio reaccionan
en medio ácido (medio que el H2SO4 les otorga) con los ortofosfatos para formar un
ácido heteropoliácido fosfomolíbdico que es reducido por el ácido ascórbico al complejo
azul de molibdeno [𝟏], cuyo color que es muy intenso es proporcional a la cantidad de
ortofosfatos presente.
Se debió realizar un barrido espectral de 500 nm a 1000 nm, ya que el complejo azul de
molibdeno es detectado en el espectrofotómetro a 880 nm, en la región visible.

La reacción química que hubiera ocurrido es la siguiente:

𝑷𝑶𝟒 𝟑− + 𝟏𝟐𝑴𝒐𝑶𝟒 𝟐− + 𝟐𝟕𝑯+ → 𝑯𝟑 𝑷𝑶𝟒 (𝑴𝒐𝑶𝟑 )𝟏𝟐 + 𝟏𝟐𝑯𝟐 𝑶

𝑯𝟑 𝑷𝑴𝒐(𝑽𝑰)𝟏𝟐 𝑶𝟒𝟎 + 𝟐𝑯𝟐 𝑶 + 𝟐𝑪𝟔 𝑯𝟖 𝑶𝟔 → 𝟐𝑪𝟔 𝑯𝟖 𝑶𝟕 + 𝟑𝑯+ + [𝑯𝟒 𝑷𝑴𝒐(𝑽𝑰)𝟖 𝑴𝒐(𝑽)𝟓 𝑶𝟒𝟎 ]𝟑−

El espectro de absorción del azul de molibdeno depende del modo como ha sido
preparado. Sus soluciones son coloidales y varían con el tiempo, precipitando
eventualmente, de modo que las lecturas espectrofotométricas deben tomarse antes de
una o dos horas de haber preparado la mezcla. [𝟐]
Los interferentes en este análisis son:
a) Los arseniatos; reaccionan con el molibdato de amonio y generan un color azul
similar al formado con el fosfato. Concentraciones de arseniato tan bajas como 0,1 mg
As/L interfieren en la determinación de fosfato.
b) Los iones Cr 6+ (cromo hexavalente) y NO 2- interfieren a concentraciones mayores
a 1mg/L.
c) Sulfuros como 𝑁𝑎2 𝑆 y silicatos no interfieren a concentraciones de 1 y 10 mg/L.
d) Son tolerables hasta 50 mg/L de 𝐹𝑒 3+ , 10 mg/L Cu y 10 mg/L 𝑆𝑖𝑂2. La concentración
elevada puede provocar una interferencia positiva. [𝟏]
Los materiales de vidrio se evitaron lavar con detergente y jabón porque contienen en
su composición fosfatos, los cuales podrían alterar las verdaderas concentraciones de
los patrones de calibración y de las muestras. Así que se utilizó 𝐻𝑁𝑂3 para lavar los
materiales que se iba a usar, con el fin de eliminar posibles contaminaciones muy
posibles por el uso de detergentes de limpieza. Al momento de realizar el lavado con
ácido nítrico se debió enjuagar estos con agua destilada tibia, para eliminar cualquier
traza del ácido utilizado.
Una composición típica, en cuanto a las formas de fósforo en un agua residual doméstica
puede ser la siguiente: ortofosfatos 5 mg/L; tripolifosfatos 3 mg/L; pirofosfatos 1 mg/L
y fosfato orgánico menor de 1 mg/L.

Ácido Metafosfórico:
𝑃2 𝑂5(𝑎𝑐) + 𝐻2 𝑂(𝑙)  𝐻2 𝑃2 𝑂6(𝑎𝑐) → 𝑯𝑷𝑶𝟑(𝒂𝒄)

Acido pirofosfórico:
𝑃2 𝑂5(𝑎𝑐) + 2 𝐻2 𝑂(𝑙)  𝑯𝟒 𝑷𝟐 𝑶𝟕(𝒂𝒄)

Ácido ortofosfórico:
𝑃2 𝑂5(𝑎𝑐) + 3 𝐻2 𝑂(𝑙)  𝐻6 𝑃2 𝑂8(𝑎𝑐) → 𝑯𝟑 𝑷𝑶𝟒(𝒂𝒄)

Se pensó analizar muestras de detergentes y gaseosas. Esto porque en la composición

de los detergentes hay gran cantidad de fosfatos inorgánicos 𝑃𝑂43− que contribuye a
alcalinizar los detergentes y aumentar la eficiencia de estos productos. [𝟏]
Por otro lado, en la gaseosa Pepsi o en cualquier bebida gasificada, la principal
aplicación del fosfato es como regulador de la acidez, aunque también tiene la propiedad
de agregarle un agradable sabor amargo a las bebidas.
El problema presentado en el laboratorio pudo a ver sido ocasionado, como ya se
mencionó líneas arriba, por el deterioro de los reactivos al no estar guardados
apropiadamente. Por otro lado, existen otros factores posibles que hayan causado este
problema. Estos se proceden a describir más abajo.
Todos los métodos que usan la formación del azul de molibdeno necesitan la presencia
de un ácido fuerte, una fuente de Mo (IV) y un reductor. Las concentraciones de ácido
y de molibdato son muy importantes en la formación del heteropoliácido que se deberá
formar, además también permiten contralar la reducción que ocurre después. Un pH
óptimo de trabajo vendría a ser entre 0 y 1 ya que aquí parece ser que se producen
cantidades adecuadas del producto reducido para ser denominado “estable” sin una
reducción excesiva de Mo (IV). Además de que estos parámetros indican las posibles
especies que se pueden obtener. También, es necesario tener una concentración de ácido
de al menos diez veces mayor que el Mo (IV), aunque pueda ocurrir precipitación de
MoO3. Cuando se tiene valores de pH muy bajos, casi cercanos a 0, el ácido molibdinico
empieza a protonar y dimerizar siendo muy indeseable para la formación del ácido 12-
molibdofosfórico. La elección del catión del molibdato (sodio o amonio) es irrelevante
para el proceso siempre y cuando se le permita el tiempo suficiente para que sucedan
las reacciones. Normalmente es una hora, pero en el proceso realizado se le agrega ácido
antes de mezclar, dicha acción favorece la velocidad haciendo que la reacción demore
entre 10 a 30 minutos. Lo que se conoce del uso de Sb (III) es que funciona como
catalizador en la reacción de reducción. Si se agrega la suficiente cantidad de ácido
ascórbico la reacción puede ocurrir en aproximadamente 1.5 minutos sin ningún paso
de calentamiento. Se desconoce exactamente como interactúa el ión antimonio en la
reacción pero permite un desplazamiento al rojo en las bandas características del ácido
12- molibdenofosfórico ( 880nm) siendo el potencial redox de la reducción facilitada
por el Sb (III) son desconocidas. Además no se sugiere que el procedimiento sea llevado
a una temperatura de reacción mayor a 35°C . [𝟒]
En la práctica de laboratorio se realizó la combinación de reactivos en el orden
propuesto, siendo este el correcto, pero se trabajó con un ácido sulfúrico que aún estaba
caliente. De acuerdo a Su-Cheng, Tzu-Yuan, Tien-Hsi y Kuo-Tung la temperatura (en
el uso de Sb3+) juega un rol muy importante. En experimentos realizados, se llegó a la
conclusión de que si se elevada la temperatura luego de formado el producto final, el
espectro de absorción cambiaba presentando un pico de absorción muy alto a 950 nm,
pero todo regresaba luego de enfriar la solución. Por otro lado, si el calor era aplicado
mientras se llevaba la reacción de reducción se presentaba un problema irreversible.
Dichos problema básicamente consistían en la desaparición del color característico
luego de llevada la reacción, sin embargo, este regresaba después de cierto tiempo
lentamente, pero el espectro se veía alterado de forma irreversible. [𝟓]
El error posiblemente se encuentre muy relacionado al uso del ácido sulfúrico en
caliente o también al mal almacenamiento de los reactivos para prevenir su rápido
deterioro.
4. CONCLUSIONES

 No se logró determinar la técnica de espectrofotometría de derivadas en la

determinación cuantitativa de fósforo debido a diversos factores tales como las
concentraciones de los reactivos, almacenamientos de estos o el calor proporcionado
por el ácido sulfúrico caliente que fueron discutidos.

 Se realizó la preparación de una serie de estándares de 𝑃 − 𝑃𝑂4 para elaborar una

curva de calibración sin embargo no se logró realizar el barrido espectral debido a que
el reactivo combinado que se iba a agregar no resultó ser del color ideal.

 No se logró calcular la concentración de iones fosfatos presente en las muestras de

agua residual, en el detergente y en la Pepsi debido al problema que se obtuvo con el
reactivo combinado.
5. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[𝟏] APHA, AWWA & WPCF (1992). Métodos Normalizados para el análisis de
aguas potables y residuales. España: Diaz de Santos S.A.

[𝟐] Walton, H & Reyes, J. (2005). Análisis químico e instrumental moderno. España:
Reverté S.A.

[𝟑] Gavira, V. (2013). Determinación espectrofotométrica de fosfatos en un

detergente. España: Recuperado el 10 de abril de 2018 de
https://triplenlace.com/

[𝟒] Nagul A., McKelvie D., Worsfold P. y Kolev S. (2015). The molybdenum blue
reaction for the determination of orthophosphate revisited: opening the black box.
DOI: 10.1016/j.aca.2015.07.030

[𝟓] Su-Cheng Pai, Tzu-Yuan Wang, Tien-Hsi y Kuo-Tung (2015). Effect of heating
on the color formation reaction in the Murphy and Riley Method for the Determination
of Phosphate in Natural Waters. DOI: 10.4172/2380-2391.1000139. Recuperado de:
https://www.omicsonline.org/open-access/effect-of-heating-on-the-color-formation-
reaction-in-the-murphy-andriley-method-for-the-determination-of-phosphate-in-natural-
waters-jreac-1000139.php?aid=54207